CN103340829B - 一种质子泵抑制剂肠溶微丸 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种质子泵抑制剂肠溶微丸，包括空白丸心、载药层、隔离层和肠溶层，其特征在于，其中含有至少一种碱性化合物，其中碱性化合物不超过微丸总重的5%，所述碱性化合物的粒径D90不高于75um，本发明的肠溶微丸制剂不仅可以降低碱性化合物对药物的吸附作用，提高药物的体外释放度，还可以提高质子泵抑制剂周围环境的碱性，增强药物的稳定性。

Description

一种质子泵抑制剂肠溶微丸

技术领域

本发明涉及一种药物制剂，特别涉及一种质子泵抑制剂肠溶微丸的制备。

背景技术

质子泵抑制剂为苯并咪唑类化合物，用于消化性溃疡、食管反流病、胃泌素瘤综合症和幽门螺杆菌的治疗。迄今为止，国外已上市的质子泵抑制剂有奥美拉唑、埃索美拉唑、泮托拉唑、兰索拉唑、雷贝拉唑、右旋雷贝拉唑、右旋兰索拉唑等，国内上市的质子泵抑制剂有奥美拉唑、埃索美拉唑、泮托拉唑、兰索拉唑、雷贝拉唑等，正在申报注册的有右旋雷贝拉唑、右旋兰索拉唑等。奥美拉唑于1988年在美国上市，是上市最早的苯并咪唑类质子泵抑制剂。

不稳定性是这类化合物的一个共同特点，如在光照、热、酸、氧化等条件下均很容易降解，导致药物的颜色发生变化，如变红、变紫、变黑等。质子泵抑制剂具有苯并咪唑类化合物结构，具有弱碱性，在pH大于9以上的条件下趋于稳定。也有一些药物如雷贝拉唑、右旋雷贝拉唑的稳定性更差，需要pH大于10的条件下才会稳定，因此，做成药物组合物之后，需要保持载药层、保护层和/或隔离层较高的碱性环境，通常我们在载药层、保护层和/或隔离层加入碱性物质，如碳酸镁、碳酸钙、氧化钙、碳酸钠、碳酸氢钠、氧化镁、氢氧化镁、氢氧化钙、磷酸盐等。

在研究中发现，微丸制剂中间体的载药层、保护层和/或隔离层中的碱性化合物的选择和用量非常重要。对于雷贝拉唑、右旋雷贝拉唑这类化合物很容易降解的质子泵抑制剂，需要在很强的碱性环境才能稳定。因此，我们在开发此类微丸制剂产品时，经常需要加入比较多的碱性化合物，但是，碱性化合物用量的增加会吸附更多的质子泵抑制剂药物，导致药物的体外释放度明显下降，甚至药物的释放度不合格。我们曾经把添加了难溶性碱性化合物微丸制剂进行体外释放度实验研究，在释放度实验结束后，我们将溶出杯中的混悬液超声后检测，结果发现溶出杯中的药物浓度明显升高。基于此，我们推测，像碳酸钙、碳酸美、氧化镁、氢氧化钙、氢氧化镁等这些难溶性物质在悬浮状态下，很可能吸附了部分质子泵抑制剂药物。正因为部分活性药物“躲藏”在这些碳酸钙、碳酸美、氧化镁、氢氧化钙、氢氧化镁等难溶性物质的“孔隙”中，故而在释放度实验中不能快速地溶出来，但是，在超声过程中，药物又从这些碱性化合物的“孔隙”中释放出来。

还有一种情况，如果加入的碱性化合物的碱性不够强，或用量不够，则会导致质子泵抑制剂药物降解，有关物质上升，甚至在加速实验3个月，有关物质就会增加至1.5%以上。我们曾经尝试将碱性化合物更改为水溶性的磷酸盐离子对，以十二水合磷酸钠和磷酸二氢钠离子对作为稳定剂后，产品的释放度大幅提高，超过90%，几乎达到100%，但是，产品容易吸潮。在加速实验3个月时，有关物质增加到1.58%，产品的稳定性显著下降。

一般来说，我们采购的难溶于水的碱性化合物，如碳酸钙、碳酸美、氧化镁、氢氧化钙、氢氧化镁等，其粒度一般在150um（100目）左右。为了提高质子泵抑制剂周围环境的碱性，在备料时需要使用气流粉碎机将上述难溶于水的碱性化合物微粉化。经研究发现，这些难溶于水的碱性化合物微粉化后的粒径D90小于75um时，特别是小于50um之后，其溶解度和碱性均会明显增强。我们知道，这些难溶性碱性化合物的溶解度与碱性密切相关，随着这些难溶性碱性化合物的粒度的降低，其表面积以半径降低倍数的平方增加，因此，溶解度大幅增加，其碱性也明显增强。以氢氧化钙为例，将8g通过100目的氢氧化钙（150um，未微粉化）溶于100ML的水中，其pH值为11.73，而将8g通过200目的氢氧化钙（75um，微粉化后）溶于100ML的水中，其pH值为12.36，碱性增加了3-4倍；将氢氧化钙的用量降一半，即4g通过200目的氢氧化钙（75um，微粉化后）溶于100ML的水中，其pH值为12.01。这表明，即使将氢氧化钙的用量减去一半，其碱性也增加了近1倍。由此可见，将碱性化合物微粉化提高了碱性化合物的溶解度，最终使得碱性化合物的碱性明显增强。碱性环境越强，质子泵抑制剂药物的降解减少，稳定性增强，这也是本发明的理论基础。

此外，将碳酸钙、碳酸镁、氧化镁、氢氧化钙、氢氧化镁等微粉化后，与未经微粉化的碱性化合物相比，活性药在微粉化后的碱性化合物的表面空隙中无处可藏，明显降低了药物的吸附效应，也有利于药物的体外释放。

本发明采用不大于质子泵抑制剂药物组合物总重5%的、粒径D90不大于75um，优选D90小于50um的难溶于水的碱性化合物作为质子泵抑制剂的稳定剂，不仅可以提高微丸制剂的体外释放度，而且还可以提高质子泵抑制剂药物组合物的稳定性，大幅提高了质子泵抑制剂药物组合物的产品质量，具有良好的商业前景。

发明内容

针对上述含质子泵抑制剂的药物组合物在储藏过程中体外释放度低和有关物质显著上升的问题，本发明提供了一种提高质子泵抑制剂药物组合物体外释放度和稳定性的方法，以及基于该方法的质子泵抑制剂药物组合物的制备工艺。

具体地，本发明提供了一种提高质子泵抑制剂药物组合物体外释放度和稳定性的方法，以及基于该方法的质子泵抑制剂药物组合物的制备工艺。该方法和制备工艺为，以不高于药物组合物重量的5%、粒度D90不高于75um，粒度D90优选50um以下的碱性化合物为稳定剂，以混悬液上药法或粉末层积法，在空白丸心的外面依次包上载药层、保护层和/隔离层，最后在保护层和/或隔离层外侧包上肠溶层，制成的微丸制剂中间体不仅体外释放度高，而且产品的质量稳定性更好，即使加速实验6个月，其体外释放度也没有显著变化，有关物质也无显著上升。

为此，本发明提供一种质子泵抑制剂肠溶微丸，包括空白丸心、载药层、隔离层和肠溶层，其中含有至少一种碱性化合物，碱性化合物不超过微丸总重的5%，所述碱性化合物的粒径D90不高于75um。优选碱性化合物的粒径D90不高于50um。

所述质子泵抑制剂选自：奥美拉唑、埃索美拉唑、泮托拉唑、雷贝拉唑、右旋雷贝拉唑、兰索拉唑、右旋兰索拉唑。

所述碱性化合物选自：碳酸钙、碳酸氢钙、碳酸镁、氧化钙、氢氧化钙、氧化镁、氢氧化镁。

本发明所述的肠溶微丸，作为制剂的中间产物，可进一步制备成微丸制剂，如片剂、胶囊。

本发明所述微丸制剂，制备方法如下：

（1）称取药物和经过微粉化处理得到D90不高于75um，必要时粒度D90控制在50um以下的、不高于微丸总重量的5%的碱性化合物，溶于HPMC溶液中，然后，加入吐温-80、微粉硅胶，搅拌均匀。过80目筛，备用。

（2）在流化床包衣机上，以不高于50℃的雾化温度下，将步骤（1）所得的混悬液喷在空白丸心的表面上；

（3）将步骤（2）所得含载药层微丸外层依次包上保护层和/或隔离层；

（4）将步骤（3）所得的微丸外层，在流化床包衣机上包上肠溶层。

（5）将步骤（4）所得的肠溶微丸与药物可接受的载体混合，压片或填充胶囊。

本发明采用不大于质子泵抑制剂药物组合物总重5%的、粒径D90不大于75um、优选粒度D90在50um以下的难溶于水的碱性化合物作为质子泵抑制剂的稳定剂，不仅可以提高微丸制剂的体外释放度，而且还可以提高质子泵抑制剂药物组合物的稳定性，大幅提高了质子泵抑制剂药物组合物的产品质量，具有良好的商业前景。

附图说明

图1一种含质子泵抑制剂的微丸制剂中间体结构示意图。

图2另一种含质子泵抑制剂的微丸制剂中间体结构示意图。

图3本发明方法生产的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（A）与处方中碱性化合物未经微粉化的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（R）在SD大鼠体内的C-t曲线比较。

图4本发明方法生产的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（A）与处方中碱性化合物未经微粉化的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（R）在SD大鼠体内的lnC-t曲线比较。

具体实施方式

为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明。

实施例1碳酸钙微粉化的处理

称取过80目筛的碳酸钙粗粉50Kg，置气MQL03气流粉碎机（潍坊埃尔派粉体技术设备有限公司制造）中微粉化，并通过325目的筛网，得到微粉化的碳酸钙42.3Kg，收率为84.6%。取微粉化后的碳酸钙小样，用Mastersizer2000马尔文激光粒度分析仪（英国马尔文仪器公司制造）检测，D90为30.7um。

实施例2碳酸镁微粉化的处理

称取过80目筛的碳酸镁粗粉50Kg，置气MQL03气流粉碎机（潍坊埃尔派粉体技术设备有限公司制造）中微粉化，并通过300目的筛网，得到微粉化的碳酸镁42.3Kg，收率为84.6%。取微粉化后的碳酸镁小样，用Mastersizer2000马尔文激光粒度分析仪（英国马尔文仪器公司制造）检测，D90为45.2um。

实施例3氢氧化钙微粉化的处理

称取过80目筛的氢氯化钙粗粉50Kg，置气MQL03气流粉碎机（潍坊埃尔派粉体技术设备有限公司制造）中微粉化，并通过200目的筛网，得到微粉化的氢氧化钙45.9Kg，收率为91.8%。取微粉化后的氢氧化钙小样，用Mastersizer2000马尔文激光粒度分析仪（英国马尔文仪器公司制造）检测，D90为68.7um。

实施例4右旋雷贝拉唑肠溶胶囊的制备

A．空白丸心载药层的制备

取64.0g HPMC加入500ML加热的纯化水中，搅拌溶胀至澄清待用；称取按实施例1方法微粉化处理的32.0g碳酸钙和实施例3方法微粉化处理的8.0g氢氧化钙，用适量的加热的纯化水分散，在搅拌HPMC溶液的同时加入；边搅拌边加入8.0g的吐温80、16.0g的滑石粉和24.0g的低取代羟丙基纤维素L-HPC；然后，加入80.0g的右旋雷贝拉唑原料药，搅拌均匀。将上述混悬液过80目筛，并用适量水冲洗干净，加纯化水至1000.0g，搅拌均匀。将800g蔗糖-淀粉微球（粒径0.6-0.8mm，杭州高成生物营养技术有限公司制造）填入流化床制粒包衣机（DPL-1，重庆精工制药机械有限责任公司制造）中，风机频率20～40Hz、进风温度50～70℃、物料温度35～50℃、雾化气压0.05～0.10MPa、喷液泵速10～30转/分钟进行上药操作，直至上药包衣液喷完。将右旋雷贝拉唑载药微丸置40℃的真空干燥箱（YZG-600低温真空干燥箱，南京飞宇干燥设备厂）中，真空干燥24小时，至水分小于2.5%。收集粒径在16目和30目之间的微丸，用PE袋封装，称量得到右旋雷贝拉唑载药微丸1032.0g。

表1右旋雷贝拉唑载药层处方

*溶剂在制备工艺中被去除

B．载药微丸隔离层的制备

取32.0g HPMC加入约1000ML加热的纯化水中，搅拌溶胀至澄清待用；称取按实施例1方法微粉化处理的32.0g碳酸钙和实施例3方法微粉化处理的8.0g氢氧化钙，用适量的加热的纯化水分散，在搅拌HPMC溶液的同时加入；边搅拌边加入16.8g的PEG6000、33.6g的二氧化钛和1.0ML的二甲硅油，持续搅拌，使用前过80目筛，用95%乙醇溶液洗涤残留至隔离层溶液总重约为2000.0g，持续搅拌至均匀。将上述1032.0g的右旋雷贝拉唑载药微丸填入流化床制粒包衣机（DPL-1，重庆精工制药机械有限责任公司制造）中，风机频率20～40Hz、进风温度50～70℃、物料温度35～50℃、雾化气压0.05～0.10MPa、喷液泵速10～30转/分钟进行包衣操作，直至隔离层的包衣液喷完。将已经包上隔离层的右旋雷贝拉唑载药微丸置40℃的真空干燥箱（YZG-600低温真空干燥箱，南京飞宇干燥设备厂）中，真空干燥24小时，至水分小于2.5%。收集粒径在16目和30目之间的微丸，用PE袋封装，称量得到右旋雷贝拉唑载药的保护层微丸1155.4g。

表2右旋雷贝拉唑载药微丸的隔离层处方

*溶剂在制备工艺中被去除

C．载药微丸肠溶衣的制备

将1386.5g甲基丙烯酸树脂EUDRAGIT L30D-55和38.3g柠檬酸三乙酯溶解于净化水（600.0g）中，在所得到的溶液中分散46.0g滑石得到包衣溶液。将上述1155.4g已经包上隔离层的的右旋雷贝拉唑载药微丸填入流化床制粒包衣机（DPL-1，重庆精工制药机械有限责任公司制造）中，风机频率20～40Hz、进风温度50～70℃、物料温度35～50℃、雾化气压0.05～0.10MPa、喷液泵速10～30转/分钟进行包衣操作，直至肠溶层的包衣液喷完。将包上肠溶层的右旋雷贝拉唑载药微丸置40℃的真空干燥箱（YZG-600低温真空干燥箱，南京飞宇干燥设备厂）中，真空干燥24小时，至水分小于2.5%。收集粒径在16目和30目之间的微丸，用PE袋封装，称量得到包上肠溶衣的右旋雷贝拉唑载药微丸1647.0g。

表3右旋雷贝拉唑载药微丸的肠溶衣处方

类别	原辅料名称	投料量（g）	占比（%）
				载药微丸	包上隔离层的载药微丸	1155.4	70.2
肠溶材料*	EUDRAGIT L30D-55	1386.5	21.5
				塑化剂	柠檬酸三乙酯	46.0	2.8
抗粘剂	滑石粉	92.0	5.6
				溶剂*	纯化水	600.0
总重		1647.0	100.0

*溶剂在制备工艺中被去除

D．填充胶囊

上述包上肠溶衣的右旋雷贝拉唑肠溶微丸，加入适量的气相微粉硅胶和滑石粉混合均匀，填充胶囊，折合每粒胶囊内容物约205.8mg，每粒右旋雷贝拉唑肠溶胶囊含雷贝拉唑10mg。

表4右旋雷贝拉唑肠溶微丸的填充胶囊处方

类别	原辅料名称	投料量（g）	占比（%）
				载药微丸	右旋雷贝拉唑肠溶微丸	1647.0	99.8
助流剂	气相微粉硅胶	1.7	0.1
				润滑剂	滑石粉	1.7	0.1
总重		1650.3	100.0

实施例5右旋兰索拉唑肠溶胶囊的制备

A．空白丸心载药层的制备

取16.0g HPMC加入500ML加热的纯化水中，搅拌溶胀至澄清待用；称取按实施例3方法微粉化处理的16.0g氢氧化钙，用适量的加热的纯化水分散，在搅拌HPMC溶液的同时加入；边搅拌边加入8.0g的吐温80、16.0g的滑石粉和24.0g的低取代羟丙基纤维素L-HPC；然后，加入240.0g的右旋兰索拉唑原料药，搅拌均匀。将上述混悬液过80目筛，并用适量水冲洗干净，加纯化水至1000.0g，搅拌均匀。将800g蔗糖-淀粉微球（粒径0.6-0.8mm，杭州高成生物营养技术有限公司制造）填入流化床制粒包衣机（DPL-1，重庆精工制药机械有限责任公司制造）中，风机频率20～40Hz、进风温度50～70℃、物料温度35～50℃、雾化气压0.05～0.10MPa、喷液泵速10～30转/分钟进行上药操作，直至上药包衣液喷完。将包上载药层的右旋兰索拉唑载药微丸置40℃的真空干燥箱（YZG-600低温真空干燥箱，南京飞宇干燥设备厂）中，真空干燥24小时，至水分小于2.5%。收集微丸粒径在16目和30目之间的微丸，用PE袋封装，称量得到右旋兰索拉唑载药微丸1120.0g。

表5右旋兰索拉唑载药层处方

类别	原辅料名称	投料量（g）	占比（%）
				空白丸芯	空白丸芯φ0.6～0.8mm	800.0	71.4
活性成分	右旋兰索拉唑	240.0	21.4
				粘合剂	HPMC	16.0	1.4
稳定剂	氢氧化钙	16.0	1.4
				抗粘剂	滑石粉	16.0	1.4
崩解剂	L-HPC	24.0	2.1
				增溶剂	聚山梨酯80	8.0	0.7
溶剂*	水	1000.0
				总重		1120.0	100.0

*溶剂在制备工艺中被去除

B．载药微丸保护层的制备

取22.4g HPMC加入约1000ML加热的纯化水中，搅拌溶胀至澄清待用；称取按实施例2方法微粉化处理的22.4g碳酸镁，用适量的加热的纯化水分散，在搅拌HPMC溶液的同时加入；边搅拌边加入16.8g的PEG6000、33.6g的二氧化钛和1.0ML的二甲硅油，持续搅拌，使用前过80目筛，用95%乙醇溶液洗涤残留至保护层溶液总重约为2000.0g，持续搅拌至均匀。将上述1120.0g的右旋兰索拉唑载药微丸填入流化床制粒包衣机（DPL-1，重庆精工制药机械有限责任公司制造）中，风机频率20～40Hz、进风温度50～70℃、物料温度35～50℃、雾化气压0.05～0.10MPa、喷液泵速10～30转/分钟进行包衣操作，直至保护层的包衣液喷完。将包上保护层的右旋兰索拉唑载药微丸置40℃的填空干燥箱（YZG-600低温真空干燥箱，南京飞宇干燥设备厂）中，真空干燥24小时，至水分小于2.5%。收集微丸粒径在16目和30目之间的微丸，用PE袋封装，称量得到右旋兰索拉唑载药的保护层微丸1215.2g。

表6右旋兰索拉唑载药微丸的保护层处方

*溶剂在制备工艺中被去除

C．载药微丸隔离层的制备

取60.8g欧巴代YS-7027加入约810.7ML95%的乙醇水溶液中，配制成7.5%的欧巴代YS-7027的95%乙醇水溶液，搅拌2个小时至完全分散，持续搅拌，使用前过80目筛，备用。将上述1215.2g已经包上保护层的的右旋兰索拉唑载药微丸填入流化床制粒包衣机（DPL-1，重庆精工制药机械有限责任公司制造）中，风机频率20～40Hz、进风温度50～70℃、物料温度35～50℃、雾化气压0.05～0.10MPa、喷液泵速10～30转/分钟进行包衣操作，直至隔离层的包衣液完全喷完。将包上隔离层的右旋兰索拉唑载药微丸置40℃的真空干燥箱（YZG-600低温真空干燥箱，南京飞宇干燥设备厂）中，真空干燥24小时，至水分小于2.5%。收集微丸粒径在16目和30目之间的微丸，用PE袋封装，称量得到包上隔离层的右旋兰索拉唑载药微丸1276.0g。

表7右旋兰索拉唑载药微丸的隔离层处方

类别	原辅料名称	投料量（g）	占比（%）
				载药微丸	包上保护层的载药微丸	1215.2	95.2
包衣材料	欧巴代YS-7027	60.8	4.8
				溶剂*	95%乙醇	810.7
总重		1276.0	100.0

*溶剂在制备工艺中被去除

D．载药微丸肠溶衣的制备

将1276.0g甲基丙烯酸树脂EUDRAGIT L30D-55和38.3g柠檬酸三乙酯溶解于净化水（600.0g）中，在所得到的溶液中分散114.9g滑石得到包衣溶液。将上述1276.0g已经包上隔离层的的右旋兰索拉唑载药微丸填入流化床制粒包衣机（DPL-1，重庆精工制药机械有限责任公司制造）中，风机频率20～40Hz、进风温度50～70℃、物料温度35～50℃、雾化气压0.05～0.10MPa、喷液泵速10～30转/分钟进行上药操作，直至保护层的包衣液喷完。将包上肠溶层的右旋兰索拉唑载药微丸置40℃的真空干燥箱（YZG-600低温真空干燥箱，南京飞宇干燥设备厂）中，真空干燥24小时，至水分小于2.5%。收集微丸粒径在16目和30目之间的微丸，用PE袋封装，称量得到包上肠溶衣的右旋兰索拉唑载药微丸1754.6g。

表8右旋兰索拉唑载药微丸的肠溶衣处方

类别	原辅料名称	投料量（g）	占比（%）
				载药微丸	包上肠溶层的载药微丸	1276.0	72.7
肠溶材料*	EUDRAGIT L30D-55	1276.0	18.5
				塑化剂	柠檬酸三乙酯	38.3	2.2
抗粘剂	滑石粉	114.9	6.5
				溶剂*	纯化水	600.0
总重		1754.6	100.0

*溶剂在制备工艺中被去除

F．填充胶囊

上述包上肠溶衣的右旋兰索拉唑肠溶微丸，加入适量的气相微粉硅胶和滑石粉混合均匀，填充胶囊，折合每粒胶囊内容物约219.0mg，每粒右旋兰索拉唑肠溶胶囊含右旋兰索拉唑30mg。

表9右旋兰索拉唑肠溶微丸的填充胶囊处方

类别	原辅料名称	投料量（g）	占比（%）
				载药微丸	右旋兰索拉唑肠溶微丸	1754.6	99.8
助流剂	气相微粉硅胶	1.8	0.1
				润滑剂	滑石粉	1.8	0.1
总重		1758.2	100.0

实施例6本发明制备方法制备的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（A）与处方中碱性化合物未经微粉化的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（R）的体外释放度对比

取实施例5制备的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（A）与处方中碱性化合物未经微粉化的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（R）各12粒，按照溶出度测定法（《中国药典》2010年版二部附录ⅩC第二法，加沉降篮）进行操作：量取500mL pH8.0的磷酸盐溶液的溶出介质（0.235M的磷酸氢二钠溶液400ML+乙醇100ML），转速为每分钟50转，依法操作，经5min、10min、15min、20min、30min、45min、60min、90min、120min时，各取溶液10mL，并同时补充相同温度及体积的溶出介质，滤过，精密量取续滤液适量，加溶出介质定量稀释制成一定浓度的右旋雷贝拉唑的溶液，高效液相色谱法（《中国药典》2010年版二部附录V D）测定，色谱条件为，流动相：乙腈-水-三乙胺（40:60:0.5）磷酸调节pH至7.0，流速1.0ml/min，波长285nm，柱号：A3柱子规格：4.6×250mm，柱压：116bar；另精密称取右旋雷贝拉唑对照品（自制，批号：20130105，纯度为99.9%），用溶出介质溶解并定量稀释制成每1mL中约含一定浓度的右旋雷贝拉唑的溶液，同法测定，分别计算每粒右旋雷贝拉唑肠溶胶囊在不同时间点的溶出量。测定结果见表10。

表10右旋雷贝拉唑肠溶胶囊A和R的平均累积溶出度测定结果（n=12）

由表10结果可知，A和R处方产品在pH1.2的盐酸溶液中2个小时几乎不释放，但是，在pH8.0的磷酸盐-乙醇溶液中，A和R的f2因子仅为40.2，即f2<50，说明A和B的体外释放曲线不相似，具有显著差异。由表10的数据，可以知道，本发明制备方法制得的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（A）在pH8.0的磷酸盐-乙醇溶液中的释放度显著高于处方中碱性化合物未经微粉化的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（R），即A的体外释放度显著高于R。

实施例7本发明制备方法制备的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（A）与处方中碱性化合物未经微粉化的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（R）的加速试验稳定性研究对比

取右旋雷贝拉唑肠溶胶囊A和R，对其进行铝塑泡罩包装后，于温度为40±2℃，湿度RH75%±5%的恒温恒湿箱中放置，于0个月、1个月、2个月、3个月、6个月末分别取样一次，检查其性状、含量、溶出度及有关物质，其结果如表11所示。

表11右旋雷贝拉唑肠溶胶囊A和B的加速试验稳定性数据

表11结果显示：按本发明制得的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（A）在温度为40±2℃，湿度RH75%±5%的恒温恒湿箱中放置6个月，本品有关物质、溶出度及含量测定均未见显著变化，而处方中碱性化合物未经微粉化的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（R）的体外释放度显著降低，有关物质呈上升趋势。本发明制得的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（A）的稳定性好于处方中碱性化合物未经微粉化的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（R）。

实施例8本发明制备方法制备（处方中碱性化合物经微粉化）的右旋兰索拉唑肠溶胶囊（A）与处方中碱性化合物未经微粉化的右旋兰索拉唑肠溶胶囊（R）的体外释放度对比

取实施例5制备的右旋兰索拉唑肠溶胶囊（A）与处方中碱性化合物未经微粉化的右旋兰索拉唑肠溶胶囊（R）各12粒，按照溶出度测定法（《中国药典》2010年版二部附录ⅩC第二法，加沉降篮）进行操作：量取900mL溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作，经5min、10min、15min、20min、30min、45min、60min、90min、120min时，各取溶液10mL，并同时补充相同温度及体积的溶出介质，滤过，精密量取续滤液适量，加溶出介质定量稀释制成一定浓度的右旋兰索拉唑的溶液，紫外-可见分光光度法（《中国药典》2010年版二部附录ⅣA）测定302nm波长处的吸光度；另精密称取右旋兰索拉唑对照品（自制，批号：20130305，纯度为99.9%），用溶出介质溶解并定量稀释制成每1mL中约含一定浓度的右旋兰索拉唑的溶液，同法测定，分别计算每粒右旋兰索拉唑肠溶胶囊在不同时间点的溶出量。测定结果见表12。

表12右旋兰索拉唑肠溶胶囊A和R的平均累积溶出度测定结果（n=12）

由表12结果可知，A和R处方产品在pH1.2的盐酸溶液中2个小时几乎不释放，但是，在pH6.8的磷酸盐缓冲溶液中，A和R的f2因子仅为47.5，即f2<50，说明A和R的体外释放曲线不相似，具有显著差异。由表10的数据，我们可以知道，本发明制备方法制得的右旋兰索拉唑肠溶胶囊（A）在pH6.8的磷酸盐缓冲液中的释放度显著高于处方中碱性化合物未经微粉化的右旋兰索拉唑肠溶胶囊（R），即A的体外释放度显著高于R。

实施例9本发明制备方法制备的右旋兰索拉唑肠溶胶囊（A）与处方中碱性化合物未经微粉化的右旋兰索拉唑肠溶胶囊（R）的加速试验稳定性研究对比

取右旋兰索拉唑肠溶胶囊A和R，对其进行铝塑泡罩包装后，于温度为40±2℃，湿度RH75%±5%的恒温恒湿箱中放置，于0个月、1个月、2个月、3个月、6个月末分别取样一次，检查其性状、含量、溶出度及有关物质，其结果如表13所示。

表13右旋兰索拉唑肠溶胶囊A和R的加速试验稳定性数据

表13结果显示：按本发明制得的右旋兰索拉唑肠溶胶囊（A）在温度为40±2℃，湿度RH75%±5%的恒温恒湿箱中放置6个月，本品有关物质、溶出度及含量测定均未见显著变化，而处方中碱性化合物未经微粉化的右旋兰索拉唑肠溶胶囊（R）的体外释放度显著降低，有关物质呈上升趋势。本发明制得的右旋兰索拉唑肠溶胶囊（A）的稳定性好于处方中碱性化合物未经微粉化的右旋兰索拉唑肠溶胶囊（R）。

实施例10本发明制备方法制备的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（A）与处方中碱性化合物未经微粉化的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（R）在SD大鼠体内药代动力学研究对比

具体操作过程如下：

受试制剂：按实施例4方法制备的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（A），批号：20130310；对照制剂：处方中碱性化合物未经微粉化的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（R），批号：20130309。

实验SD大鼠22只，雌雄各半。受试大鼠于试验前一日晚餐后开始禁食。试验当日晨给予受试制剂和对照制剂，（相当于右旋雷贝拉唑的量为30mg/kg）。

服药前（0h）及服药后1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h、4h、5h、6h、8h、10h、12h、15h尾静脉采血0.5ml。血样置于肝素化试管中，离心分离血浆，-20℃冷冻贮存待分析。

采用高效液相色谱法测定血浆中右旋雷贝拉唑的浓度。采用DAS2.0程序进行药代动力学参数计算。

右旋雷贝拉唑对照品由珠海润都制药股份有限公司自行试制，批号：20130328，纯度为99.99%；内标奥美拉唑对照品由中国药品生物制品检定所提供，批号：批号：100367-200702，纯度为100%；甲醇（色谱纯）购自天津市科密欧试剂有限公司。超纯水为自行试制。

实验仪器为Waters高效液相色谱系统，包括600泵，717+自动进样器，996紫外检测器，Empower色谱工作站；色谱柱：SymmetryC18柱（150mm×4.6mm，5mm）；预柱：Symmetry C18保护柱（20×3.9mm，10mm）；万分之一电子天平（上海精密科学仪器有限公司）；TG16-Ⅱ台式离心机（上海安亭科学仪器有限公司）；XW-80A漩涡混合仪（上海沪西分析仪器厂）。

色谱条件为流动相：乙腈-水-三乙胺（40:60:0.5）磷酸调节pH至7.0，流速1.0ml/min，波长285nm，柱号：A3柱子规格：4.6×250mm，柱压：116bar；进样量：100μL。

血浆样品处理:取空白血浆90μL，加入10μL内标溶液（80μg/mL奥美拉唑）和一定量的NaOH作为稳定剂，涡混10s后加入300μL甲醇沉淀蛋白，涡混1min，离心10min（12000rpm），取上清液175μL，加入到进样瓶，进行HPLC分析。

在上述色谱条件下，按照“血浆样品处理”项下操作，分别考察右旋雷贝拉唑HPLC测试方法专属性、标准曲线及线性回归方程、定量下限、精密度与准确度试验、绝对回收率、不同放置条件下的稳定性。

专属性试验：分别配制药物右旋雷贝拉唑与奥美拉唑对照品溶液，进行HPLC分析。分别取22只SD大鼠的空白血浆，按“血浆样品处理”项下操作（不加内标溶液）；将一定浓度的标准溶液和内标溶液加入空白血浆中，依同法操作。右旋雷贝拉唑和内标奥美拉唑的典型保留时间分别为11.5和8.5min左右。取受试SD大鼠口服给药1h后的血浆样品，依同法操作。实验表明，空白血浆中的内源性物质不干扰右旋雷贝拉唑和内标奥美拉唑的测定。

标准曲线及线性回归方程：取空白血浆80μL，加入右旋雷贝拉唑标准系列溶液10μL，配制成相当于右旋雷贝拉唑血浆浓度为0.64，1.0，3.2，20.0，40.0和80.0μg/ml的样品，按“血浆样品处理”项下依法操作，记录色谱图，以待测物浓度为横坐标，待测物与内标物的峰面积比值为纵坐标，用加权最小二乘法（权重为1/C）进行回归运算，求得的直线回归方程即为标准曲线。根据标准曲线，HPLC法测定血浆中右旋雷贝拉唑的线性范围为0.64～80.0μg/mL。

定量下限：根据标准曲线的结果，表明HPLC法测定血浆中右旋雷贝拉唑的定量下限为0.64μg/mL。

精密度与准确度试验：取空白血浆90μL，按“标准曲线及线性回归方程”项下的方法配制低、中、高三个浓度（右旋雷贝拉唑血浆浓度分别为3.2，20.0，40.0μg/mL）的质量控制（QC）样品，每一浓度进行5样本分析，连续测定三天，根据当日的标准曲线，计算QC样品的测得浓度。根据QC样品测试结果，本法的日内和日间精密度的相对标准差均小于3.72%，准确度在（100±8.26）%之内。

绝对回收率：取空白血浆80μL，按“标准曲线及线性回归方程”项下的方法配制低、中、高三个浓度（右旋雷贝拉唑血浆浓度分别为3.2，20.0，80.0μg/mL）的样品，每一浓度进行3样本分析。以处理后待测物色谱峰面积与相同浓度未经处理直接进样获得的色谱峰面积之比，计算右旋雷贝拉唑及内标的绝对回收率。3种浓度下右旋雷贝拉唑的绝对回收率分别为（87.21±2.32）%、（93.82±2.65）%和（93.97±3.56）%，内标的绝对回收率为（93.14±2.81）%。

稳定性试验：考察未经处理的右旋雷贝拉唑血浆样品室温放置2h稳定性，血浆样品经历3次冷冻解冻循环的稳定性以及血浆样品-20℃冷冻放置20天的稳定性，取空白血浆80μL，按“标准曲线及线性回归方程”项下的方法配制低、中、高三个浓度的血浆样品，每一种浓度水平每一条件的稳定性考察进行三样本分析，采用HPLC法测定。处理后的血浆样品室温放置2h内稳定，血浆样品经过3次冷冻解冻循环后稳定，血浆样品-20℃冷冻放置20天内稳定。

上述结果表明：此分析方法符合化学药物制剂生物利用度和生物等效性研究技术指导原则和生物样品分析国际规范的有关要求，可用于右旋雷贝拉唑肠溶胶囊在SD大鼠体内生物等效性研究。

未知血浆样品测定：每批次建立一条标准曲线，同时分析低、中、高浓度质控样品。根据当日标准曲线，求算质控样品和未知样品的浓度，当质控样品相对偏差在±15%之内时，当日数据方可接受。实施例4制备的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊和处方中碱性化合物未经微粉化的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（R）的C-t曲线和lnC-t曲线分别见图3和图4所示。

采用DAS2.0药动学软件中的生物等效性评价模块计算程序对数据进行处理，计算受试者用药后的药动学参数。受试制剂药-时曲线下面积（AUC）及参比制剂药-时曲线下面积（AUC）按梯形面积法计算；峰浓度（Cmax）和达峰时间（Tmax）均为实测值。相对生物利用度（F）按公式：F=AUCT/AUCR×100%计算。右旋雷贝拉唑肠溶胶囊A和R的主要药物动力学参数分别见表14和表15，Cmax和Tmax的方差分析表分别见表16和表17。

表16右旋雷贝拉唑肠溶胶囊A与R的Cmax方差分析表

变异来源	SS	DF	MS	F	P
						总变异	16.41	43	0.382
药剂间	0.286	1	0.286	0.856	0.366
						周期间	0.811	1	0.811	2.430	0.135
个体间	8.636	21	0.411	1.232	0.322
						总误差	6.677	20	0.334

表17右旋雷贝拉唑肠溶胶囊A与R的Tmax两药均数与标准差(配对Wilcoxon检验)

	N	Mean	SD	Median	U值	P值
							A药	22	2.318	0.945	2
R药	22	3.75	1.751	3.500
							A药-R药	22	1.432	2.106	1.25	10.500	<0.05

从表16、表17可以看出，本发明生产的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（A）在SD大鼠体内的血药浓度的峰值Cmax高于处方中碱性化合物未经微粉化的右旋雷贝拉唑肠溶胶囊（R），p=0.135，p>0.05，这说明A药的Cmax高于R药，A药和R药的Cmax无统计学上的差异。

但是，A药在大鼠体内的Tmax显著高于R药，p<0.05，这说明A药与B药的Cmax具有统计学上的差异。也就是说，在抵达Cmax前的某一时间点，A药在SD大鼠体内的血药浓度显著高于R药在SD大鼠体内的血药浓度，这与A药和R药在体外的释放度研究结果是一致的。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (2)

1.一种质子泵抑制剂肠溶微丸制剂的制备方法，步骤如下：

（1）称取药物和经过微粉化处理得到D90不高于75μm，不高于微丸总重量的5%的碱性化合物，溶于HPMC溶液中，加入吐温-80、微粉硅胶，搅拌均匀；

（2）在流化床包衣机上，以不高于50℃的雾化温度下，将步骤（1）所得的混悬液喷在空白丸心的表面上；

（3）将步骤（2）所得含载药层微丸外层依次包上保护层和/或隔离层；

（4）将步骤（3）所得的微丸外层，在流化床包衣机上包上肠溶层；

（5）将步骤（4）所得的肠溶微丸与药物可接受的载体混合，制备成制剂；

其中，质子泵抑制剂为右旋雷贝拉唑或右旋兰索拉唑，

其中，碱性化合物选自碳酸钙，碳酸镁，氢氧化钙，

其中，所述制剂为胶囊剂。

2.根据权利要求1的制备方法，其特征在于，所述碱性化合物的粒径D90不高于50μm。