CN103228624B

CN103228624B - （3s,3s’）4,4’-二硫二基双（3-胺基丁烷1-磺酸）的制备方法

Info

Publication number: CN103228624B
Application number: CN201180056371.6A
Authority: CN
Inventors: 法布里斯·巴拉瓦纳; 乔纳森·马代克; 珍妮·玛丽·施耐特; 杰勒德·科克雷尔; 尼古拉斯·库夫拉; 约翰·卡尔蒂尼; 玛丽·诺艾尔·佩蒂特
Original assignee: Quantum Genomics SA
Current assignee: Quantum Genomics SA
Priority date: 2010-10-07
Filing date: 2011-10-07
Publication date: 2016-02-03
Anticipated expiration: 2031-10-07
Also published as: RS57670B1; CA3016057A1; BR112013008404B1; EA021612B1; CY1124919T1; TW201305091A; CN103228624A; US20130231500A1; CA2813834A1; SI3395796T1; KR101893894B1; DK2625163T3; JP2014500238A; SI2625163T1; US20160046571A1; HUE058031T2; HUE040484T2; WO2012045849A1; EP3395796A1; CY1120859T1

Abstract

本发明涉及一种从（S）-2-（苄氧羰基胺基）-4-（新戊氧基磺酰基）丁酸乙酯A分五个步骤制备（3S,3S’）4,4’-二硫二基双（3-胺基丁烷1-磺酸）的新方法。

Description

（3S,3S’）4,4’-二硫二基双（3-胺基丁烷1-磺酸）的制备方法

技术领域

本发明涉及一种自（S）-2-（苄氧羰基胺基）-4-（新戊氧基磺酰基）丁酸乙酯A分五个步骤制备（3S,3S’）4,4’-二硫二基双（3-胺基丁烷1-磺酸）的新方法。在本发明中，（3S,3S’）4,4’-二硫二基双（3-胺基丁烷1-磺酸）被称为“化合物I”。

背景技术

化合物I是选择性胺基肽酶A（APA）抑制剂3-胺基4-巯基丁烷磺酸（在先文献中也称为EC33）的二聚体，其是通过在两个3-胺基4-巯基丁烷磺酸分子的硫醇末端之间形成二硫键二产生的。二聚合作用提供更易穿过血液-大脑障壁的分子作为前药。如Bodineau等人在Hypertension200851,1318-1325中所述，已证明化合物I在（在先文献中也称为RB150）为有效的抗增压剂。

化合物I及其作为抗增压剂的用途在专利申请WO2004/007441中披露。此文献中所提供的合成化合物I的方法的实例允许其分6个步骤由L-高丝氨酸形成。此方法中所包含的技术规格（尤其是当量数、溶剂/或纯化技术）无法让其有效且容易地转化成工业规模。

有机合成法的永久目标是建立可转换成工业条件的合成方法。为了满足工业方法的要求，需要优化该合成方法的不同参数。首先，溶剂挥发性必须尽可能降低，以可容易回收。因此，优选避免使用氯化挥发性溶剂，例如二氯甲烷、氯仿及/或四氯化碳。此外，优选限制所需试剂的当量数，所涉及的温度优选保持在容易达到的范围内，且应特别关注易于进行纯化步骤。最后，反应混合物及分离产物优选热稳定。

现行商品制造规范（cGMP）被确定用于制备给药至人类或动物的药品。GMP法规要求品质制造方法，以使企业能够最大限度地减少或消除污染、混淆及错误的情况。GMP法规解决包括记录保管、人员资格、卫生、清洁、设备验证、制程验证、及投诉处理的问题。

据本申请人所知，至今未描述合成化合物I的工业上可适用的方法。

因此，本发明的一个目标在于提供一种制备化合物I的方法，其与其中使用毒性溶剂（如二甲基甲酰胺）和管柱层析法的现有技术的方法相比，可容易有效适用于工业规模。

此外，对于人类治疗而言，通常需要任何药物的高纯形式（通常为大于99.5%），因此一种组合异构体的形成控制及易最终纯化的方法是特别有利的。

发明内容

本发明涉及一种自（S）-2-（苄氧羰基胺基）-4-（新戊氧基磺酰基）丁酸乙酯A，更特别地，分五个步骤制备化合物I的新方法。流程1说明始自A至化合物I的连续步骤。

除非另外说明，否则本发明之所有描述及权利要求书中使用以下缩写及名称：

Et=乙基；tBu=第三丁基；CH₂-tBu=新戊基=2，2-甲基丙基

Cbz=苄氧羰基

Ms=甲磺酰基=SO₂CH₃

TFA=三氟乙酸

THF=四氢呋喃

MTBE=甲基第三丁基醚

HPLC=高效液相层析

ee=对应异构体超量

可以固相或液相进行本文所述的各种反应。优选于选自有机或水溶剂（例如，THF、乙醇、氯仿、MTBE、甲苯、丙酮、TFA、及/或苯甲醚）之溶剂中，进行液相反应。

流程1：

本发明的第一目标涉及一种自A制备化合物I的通用方法，其包括以下步骤：

（a）还原该乙酯A，以获得（S）-3-（苄氧羰基胺基）-4-羟基丁烷1-磺酸新戊酯B；

（b）在碱的存在下，使该醇B与甲磺酸酐或甲磺酰氯反应,以获得（S）-3-（苄氧羰基胺基）-4-（甲磺酰氧基）丁烷1-磺酸新戊酯C；

（c）该甲磺酰化醇C与硫代乙酸甲反应，以获得（S）硫代乙酸2-（苄氧羰基胺基）4-（新戊氧基磺酰基）丁酯D；

（d）使D二聚合，以获得（3S,3S’）4,4’-二硫二基双（3-(苄氧羰基胺基)丁烷1-磺酸新戊酯）E；以及

（e）使E的磺酸酯及胺基脱除保护基，以获得（3S,3S’）4,4’-二硫二基双（3-胺基丁烷1-磺酸）化合物I。

在本说明书中，上述方法被称为【通用方法】。

优选地，可通过使A与成对的还原剂-溶剂（选自NaBH₄/LiC1-THF与乙醇的混合物（优选按照1:1体积比）及LiBH₄-THF，更优选NaBH₄/LiC1-THF）反应，进行步骤（a）。可在约0℃至约25℃（优选约20℃至约25℃）的温度下，进行该反应。

更优选地，可在约20℃至约25℃的温度下，通过使A与LiBH₄-THF反应，进行步骤（a）。

使用可溶于THF且在其中保持稳定的LiBH₄时，不可否认地可以改善安全性；更特别地，其容许使用纯THF作为溶剂且因此避免由于硼氢化钠在乙醇中的分解所导致的氢气释放。

优选地，可在三乙胺的存在下进行步骤（b）。可在选自氯仿及MTBE与甲苯的混合物（优选MTBE与甲苯的混合物，更优选依3:2的体积比）的溶剂中，进行该反应。可在约-10℃至约10℃（优选约5℃至约10℃）的温度下，进行该反应。

合成法的工业转换需要优选用较低挥发性和/或较容易回收溶剂代替挥发性溶剂。本发明中的步骤（b）的更优选条件包括用较低挥发性和/或较容易回收溶剂（如MTBE与甲苯的3:2的体积比的混合物）代替氯仿。

更优选地，可在三乙胺的存在下，在MTBE与甲苯的3:2的体积比的混合物中和约5℃至约10℃的温度下进行步骤（b）。

优选地，在选自乙醇和丙酮（优选丙酮）的溶剂中，进行步骤（c）。可在约15℃至约25℃的温度下进行该反应。

更优选地，可在丙酮中及约15℃至约25℃的温度下进行步骤（c）。

更优选地，可通过首先使D与氢氧化钠接触进行步骤（d）。随后，使所获得的混合物与碘反应。溶剂可以是乙醇。可在约15℃至约25℃的温度下进行该反应。

优选地，可通过在TFA及苯甲醚的混合物中搅拌E，进行步骤（e）。更优选地，可通过在优选按照5:1体积比的TFA和苯甲醚的回流混合物中搅拌E，进行步骤（e）。

本发明的一个最佳实施例是上述通用方法，其中：

-通过在约20℃至约25℃的温度下，使A与LiBH₄-THF反应，进行步骤（a）；

-在三乙胺之存在下，于MTBE及甲苯之3：2体积比之混合物中及约5℃之约10℃之温度下，进行步骤（b）；

-在约15℃至约25℃的温度下，在丙酮中进行步骤（c）；

-通过首先在约15℃至约25℃的温度下及乙醇中，使D与氢氧化钠接触，且随后在约15℃至约25℃的温度下及乙醇中，使所获得的混合物与碘反应，进行步骤（d）；以及

通过在TFA和苯甲醚5:1体积比的回流混合物中搅拌E，进行步骤（e）。

该方法包括用于工业应用中的（a）至（e）的优化步骤，特别地，步骤（b）至（e）甚至符合c-GMP要求。

合成法的工业转换需要优化参数。特别地，优选避免高焓反应。优选高纯度产物。分离产物优选热稳定。

表1提供该优选方法的各步骤的反应焓、产物的纯度（由HPLC测定且表示为莫耳百分比）及稳定性。

表1.

合成法的工业转换需要优选容易得纯化步骤，尤其是该合成法的最终纯化步骤。

本发明的一个优选形式涉及一种如上所述的化合物I的合成方法，其中通过在水中再结晶进行化合物I的纯化。

合成法的工业转换需要优选最稳定的化合物，尤其是最稳定形式的最终产物。

针对化合物I进行的研究显示水合物形式（尤其是三水合物形式）比该化合物的纯形式更稳定。在环境条件下，该三水化合物形式的化合物I（3H₂O）是最稳定的形式。在环境条件下，化合物I的水合物的任何混合物将在几天内转变成三水合物形式。本文所使用的环境条件是指15℃至25℃的温度，大气压下，及高于50%的相对湿度率。

本发明的一优选形式涉及关于一种如上所述化合物I的合成方法，其中获得呈水合物形式，优选呈三水合物形式之化合物I。

因此，本发明的另一目标为化合物I的结晶三水合物形式。特别地，化合物I三水合物的结晶结构在实例2中详细描述。

关于合成双三氟乙酸4,4’-硫代双（3-胺基丁烷1-新戊基磺酸酯）的中间体，已在专利申请WO2004/007441中描述上述通用方法的起始材料（S）-2-（苄氧羰基胺基）4-（新戊基磺酰基）丁酸乙酯A的合成法。如果需要，可容易地由本领域普通技术人员进行其分离。

本发明的另一目标为上述通用方法，其中化合物A自L-高胱胺酸的合成包括以下步骤：

（a-1）使L-高胱胺酸与氯甲酸苄酯反应，以获得（2S，2S’）4,4’-二硫二基双（2-（苄氧羰基胺基）丁酸）F；

（b-1）使F与乙醇进行酯化反应，以获得（2S，2S’）4,4’-二硫二基双（2-（苄氧羰基胺基）丁酸）二乙酯G；

（c-1）氧化裂解G的二硫键，以获得（S）-2-（苄氧羰基胺基）4-（新戊基磺酰基）4-（氯磺酰基）丁酸乙酯H；及

（d-1）使磺酰氯H与新戊醇反应，以获得（S）-2-（苄氧羰基胺基）4-（新戊基磺酰基）丁酸乙酯A。

流程2阐述从L-高胱胺酸合成A。

流程2

与自A合成化合物I时所关注的情况一样，可优化合成A的方法，以使其尽可能符合工业要求。

优选地，可在氢氧化钠的存在下进行步骤（a-1）。该溶剂可以是THF。可在约5℃至约25℃的温度下进行该反应，优选地，该温度可在添加试剂期间保持在约5℃至约10℃下。

易分析性是合成法适用于工业的重要标准。在化合物F上存在Cbz胺保护基可使其适于分析，尤其是HPLC分析。

优选地，可通过使F与亚硫酰氯反应，进行步骤（b-1）。该溶剂可以是纯乙醇。可在约45℃至55℃的温度下进行该反应。

优选地，可通过使G与氯反应，进行步骤（c-1）。该溶剂可以是乙醇。可在约5℃至约10℃的温度下进行该反应。

优选地，可在三乙胺的存在下进行步骤（d-1）。该溶剂可以是甲苯。可在约15℃至约25℃的温度下进行该反应。

附图说明

图1：

化合物I三水合物的比较XRPD（X射线粉末衍射）图谱：自单晶结构的计算值（下部光谱）及实验值（上部光谱）。

图2：

化合物I三水合物的ORTEP（橡树岭热椭圆体图）表示。

图3：

沿化合物I三水合物之轴线的投影。虚线表示H键。

具体实施方式

实例

实例1：化合物I自（S）-2-（苄氧羰基胺基）4-（新戊氧基磺酰基）丁酸乙酯A合成

步骤（a）：（S）-3-（苄氧羰基胺基）4-羟基丁烷1-磺酸新戊酯B

将（S）-2-（苄氧羰基胺基）4-（新戊氧基磺酰基）丁酸乙酯A（41.55g，100.0mmol，1.0当量）滴加至含于THF中的LiBH₄的2M溶液（50mL，44.8g，100.0mmol，1.0当量）中。在温室下，历时3小时进行该添加。在该添加结束时，在温室下搅拌该混合物，直至完全转化（A<1%）。添加甲苯，然后用HCl水解，用NaHCO₃及水清洗有机层，并在真空下浓缩，以获得定量产率（ee=98%）的呈浅黄色油的所需产物，其在温室下历时4或5天缓慢结晶。

由于通过DSC分析测得B具有极低的熔点，故无法通过简单结晶将其分离成固体。决定使其呈溶液形式，且无需进一步纯化而用于以下步骤中。

步骤（b）：（S）-3-（苄氧羰基胺基）4-（甲磺酰氧基）丁烷1-磺酸新戊酯C

在温室下，用MTBE（173mL，3.0体积）稀释含于甲苯（115mL，2.0体积）中的B（57.64g，154.34mmol，1.0当量）的溶液。随后，在温室下添加甲磺酰氯（17.9mL，26.5g，231.50mmol，1.5当量），并将该均质混合物冷却至10℃。在T<20℃下，添加三乙胺（43.0mL，31.2g，308.67mmol，2.0当量）。在该添加结束时，在10℃下搅拌该混合物，直至完全转化（B<1%）。在用稀HCl水解之后，用NaHCO₃、水及盐水清洗该有机层，接着在减压下部分浓缩。随后，在40℃下，通过添加庚烷（5.0体积），使相应的甲磺酸酯结晶。在冷却、过滤及干燥之后，将预期产物分离成产率为92.5%且具有极高化学纯度（98%）的近白色固体。

步骤（c）：（S）硫代乙酸2-（苄氧羰基胺基）4-（新戊氧基磺酰基）丁酯D

在温室下，历时2小时将含有丙酮（203mL，2.5体积）中的甲磺酸酯C（81.3g，180.05mmol，1.0当量）的溶液滴加至含于丙酮（203mL，2.5体积）中的硫代乙酸钾（41.1g，360.1mmol，2.0当量）的悬浮液中。在温室下，搅拌该反应混合物，直至完全转化（C<1%）。在过滤这些盐及添加甲苯（4.0体积）之后，在25℃及减压下蒸馏去除丙酮。随后，用活性炭处理该溶液，并浓缩至2.0体积。在温室下缓慢添加庚烷（5.0体积），接着在0℃冷却，过滤且在45℃干燥，其获得产率为78.2%且具有极高化学纯度（98%）的呈近白色固体的预期产物。

步骤（d）：（3S，3S’）4,4’-二硫二基双（3-（苄氧羰基胺基）丁烷 1-磺酸新戊酯）E

将悬浮于乙醇（203mL，2.5体积）中的D（59.16g，137.1mmol，1.0当量）的溶液冷却至0℃。随后，通过将温度保持在低于10℃下，将经水（16.9mL，0.285体积）稀释的20%氢氧化钠（25.1mL，150.8mmol，1.1当量）滴加至该悬浮液中。使该反应混合物升温至室温，并搅拌直至完全转化（D<1%）。使中间物硫醇与含于乙醇（118mL，2.0体积）中的碘（20.9g，82.3mmol，0.6当量）的溶液在温室下反应。在添加该氧化剂结束时，完成该反应。在添加Na₂S₂O₅（13.0g，68.5mmol，0.5当量）水溶液（118mL，2.0体积）以减少过量残留碘之后，在40℃及减压下蒸馏移除乙醇。在室温下添加水（3.0体积），接着在0℃下冷却，过滤并在45℃至50℃下干燥，其获得产率为98.3%且具有极高化学纯度（97.0%）的呈白色固体的预期二聚体。

通过电位测定，检测样本中来自碘还原作用的碘离子含量。

E⁰（Ag⁺/Ag(s)）=0.80V

Ks_Agl=1.5.10^-16

[AgNO₃]=0.1N

电极:E=E⁰(Ag⁺/Ag(s))+0.06log[Ag⁺]

[Ag⁺]=KS1/[I^-]

E=E⁰(Ag⁺/Ag(s))+0.06log(KS1/[I^-])

测定：[I^-]减少且E增加

LOD=1mg

用水另外清洗四次，直至检测不到碘离子。结果在表2中表示。

清洗	1	2	3	4
					I^-测定(%)	4.5	1.26	0.12	0.02

步骤（e）：（3S，3S’）4,4’-二硫二基双（3-胺基丁烷1-磺酸）化合物I

将含于TFA（220mL，5.0体积）及苯甲醚（44mL，1.0体积）中的E（44.0g，56.6mmol，1.0当量）的溶液加热至回流（75℃），且在此等条件下搅拌该反应混合物，直至转化完全（E<1%）。通过在50℃减压蒸馏，去除TFA。在温室下，缓慢添加MTBE（5.0体积）以使预期产物沉淀。在研磨、过滤及用MTBE（1.0体积）清洗之后，将粗制固体悬浮于甲醇（220mL，5.0体积）中。再次研磨、过滤及用MTBE（1.0体积）清洗，接着在减压下干燥，以获得92.5%产率的呈白色固体的化合物I。

NMR:¹H(溶剂D₂O,400MHZ,ppm):4.70(s,6H,H₅);3.77(m,2H,H₂);3.14(dd,2H,H₁);2.98(dd,4H,H₄);2.86(dd,2H,H₁);2.13(m,4H,H₃)。¹³C（溶剂D₂O,100MHZ,ppm）：49.4（2C,C2）;46.6(2C,C₄)；38.3（2C,C₁）;26.9(2C,C₃)。

实例2：化合物I三水合物的结晶数据

将实例1中所获得的化合物I在环境条件下中储存22天，以仅含有三水合物形成。

数据收集：

已从单晶体X-射线衍射法(XRD)确定化合物I三水合物[C₈S₄N₂O₆H₂O,3(H₂O)]的晶体结构。将所选的晶体固定在玻璃纤维上并安装于具有CCD平面检测器的布鲁克（Bruker）SMARTAPEX衍射仪的全三圆测角仪上。记录三组曝光（总共1800帧），其对应于针对三种不同值的三种ω扫描（0.3°的步进）。

图1显示化合物I三水合物的实验及计算XRD图谱。

表3提供经选择的自PowderCell算得的化合物I三水合物结构的反射及对应的实验峰位置及强度。不可赋予实验峰的强度值过多重要性，因为依赖于结晶过程的择优取向作用是极为重要的。

表3.

通过使用SMART软件，初步测定晶体的晶胞参数及定向矩阵。利用SAINT软件进行数据整合及总体晶胞精修。校正强度的洛伦兹（Lorentz）、极化、衰减及吸收作用（SAINT及SADABS软件）并将其减小至。使用程序包WinGX3进化空间群测定、结构解析及精修。

数据精化：

自系统消光及等效反射的相对，测定标准空间群P2₁（n°4）。通过直接方法（SIR92）解析该结构。精化所有非氢原子的各向异性位移参数。自随后的差值傅立叶（Fourier）合成法确定氢原子的位置并以几何约束放置（SHELXL）。关于F2的全矩阵最小平方精化的最终循环是基于3714个反射观察值及234个可变参数并利用以下未加权及加权一致性因子收敛：

对于[F²>2σ（F²）]而言，R1=0.0347，wR2=0.0845，及对所有数据而言，R1=0.0371，wR2=0.0934。

通过在环境温度下缓慢蒸发化合物I的饱和水溶液获得晶体。

表4

表5提供原子坐标（x10⁴）及等效各向同性位移参数（）。U（eq）系定义为正交化Uij张量迹线的三分之一。

表5

结构描述：

不对称单元由3个水分子结合的单个化合物I分子组成。图2显示该化合物I分子及3个水分子的不对称单元。

连续的化合物I分子经由在氧原子O1A与氢原子H（N1A）之间及氧原子O1与氢原子H（N1）之间建立的两个氢键沿b轴相互作用。两个连续的化合物I份子经由氧原子O2A与氢原子H（N1A）之间的氢键沿a轴相互作用。在a及b方向中定向的这些相互作用产生平行于（110）的层。此外，水分子（OWA）嵌入这些分子之间并建立三种不同的氢键：第一种氢键连接氧原子OWA与氢原子H（N1A）第二种氢键连接氧原子O3A与氢原子H（OWA）且最后一种氢键连接氧原子O1与氢原子H（OWA）切片（110）显示d₀₀₁的厚度图3更具体地描绘这些切片内部沿a轴的不同相互作用。两个连续层经由利用位于（002）平面内的两个其他水分子OWB及OWC建立的氢键沿c轴相互作用。该OWB水分子的氧原子与来自第一切片的氢原子H（来自N1）建立氢键且经由氧原子O3与氢原子H（来自OWB）的氢键连接至下一切片。该OWC水分子的氧原子与第一切片之氢原子H（来自N1）建立氢键且随后借由经由磺酸酯基团S2的两个氧原子的相互作用的两个氢键连接至相邻切片。氧原子O2及氢原子O3与该水分子OWC之两个氢原子相互作用，其键长分别为及

实例3：（S）-2-（苄氧羰基胺基）4-（新戊氧基磺酰基）丁酸乙酯A自L-高胱胺酸的合成

步骤（a-1）：（2S，2S’）4,4’-二硫二基双（2-（苄氧羰基胺基）丁酸）F

将L-高胱胺酸（200.0g，745.5mmol，1.0当量）悬浮于THF（1000mL，5.0体积）中，并冷却至5-10℃。添加20%氢氧化钠（521.7mL，626.2g，在100%时是125.25g，3.13mmol，4.2当量），随后，添加氯甲酸苄酯（220.3mL），267g，1565.5mmol，2.1当量）。在室温下过夜后转化完全（L-高胱胺酸<1%）。用水萃取并清洗该有机层获得以定量产率分离的黄色油，其在室温下缓慢结晶成微黄色固体。

步骤（b-1）：（2S，2S’）-4,4’-二硫二基双（2-（苄氧羰基胺基）丁酸）二乙酯G

将F（140.0g，260.89mmol，1.0当量）悬浮于纯乙醇（700mL，5.0体积）中，并加热至50℃。在50℃下，添加SOCl₂（41.6mL，68.3g，573.96mmol，2.2当量），以避免积聚。在维持于50℃下一小时之后，转换完全（F<1%）。浓缩该粗制混合物，接着溶于乙酸乙酯中，并清洗该有机层，以获得经部分浓缩的澄清溶液。缓慢添加5.0体积的庚烷，以使所需产物结晶成白色固体。在过滤及干燥之后，以92%产率分离该双酯。

步骤（c-1）：（S）-2（苄氧羰基胺基）4-（氯磺酰基）丁酸乙酯H

将G（100.0g，168.7mmol，1.0当量）悬浮于乙醇（500mL，5.0体积）中，并冷却至5℃。在T<10℃下，添加Cl₂（83.7g，1.18mol，7.5当量）。当该反应混合物是完全均质时，转换完全（G<1%）。将磺酰氯溶液倒入碳酸盐水溶液及甲苯的混合物中，并保持温度低于20℃。清洗该有机层，接着在减压下浓缩，以获得产率为96.8%的呈无色油的所需产物。

当将5.0体积庚烷缓慢添加至该产物的浓缩甲苯溶液（2.0体积）中时，可将预期产物分离成白色固体。然而，纯度实质上未提高且产率大幅下降（75-80%）。因此，在1.0体积之甲苯中分离黄酰氯H且无需进一步纯化而用于以下步骤中。

步骤（d-1）：（S）-2-（苄氧羰基胺基）4-（新戊氧基磺酰基）丁酸乙酯A

将新戊醇（29.1g，329.84mmol，1.2当量）溶于甲苯（400mL，4.0体积）中，并在室温下添加含于甲苯（100mL，1.0体积）中的H（100.0g，274.87mmol，1.0当量）的溶液。随后，将该均质混合物冷却至0℃。在0℃下，添加三乙胺（46.0mL，33.4g，327.84mmol，1.2当量）。在该添加结束时，将该混合物升温至室温，直至转化完全（H<1%）。在用稀HCl水解之后，用NaHCO₃、水及盐水清洗该有机层，并在减压下浓缩，以获得产率为94.4%的呈浅黄色油的所需产物。

Claims

1.一种从(S)-2-(苄氧羰基胺基)4-(新戊氧基磺酰基)丁酸乙酯A制备三水合物形式的(3S,3S’)4,4’-二硫二基双(3-胺基丁烷1-磺酸)的方法，其包括以下步骤:

(a)还原所述乙酯A，以获得(S)-3-(苄氧羰基胺基)-4-羟基丁烷1-磺酸新戊酯B；

(b)在碱的存在下，使所述醇B与甲磺酸酐或甲磺酰氯反应，以获得(S)-3-(苄氧羰基胺基)-4-(甲磺酰基)丁烷1-磺酸新戊酯C；

(c)使所述甲磺酰化醇C与硫代乙酸钾反应，以获得(S)硫代乙酸2-(苄氧羰基胺基)-4-(新戊氧基磺酰基)丁酯D：

(d)使D二聚合，以获得(3S,3S’)4,4’-二硫二基双(3-(羰基胺基)丁烷1-磺酸新戊酯)E；

(e)使E的磺酸酯及胺基脱除保护基，以获得(3S,3S’)4,4’-二硫二基双(3-胺基丁烷1-磺酸),其中，在TFA与苯甲醚的混合物中搅拌E进行步骤(e)；及

(f)将步骤(e)获得的化合物在15℃至25℃的温度，大气压下，及高于50％的相对湿度率储存，由此从(S)-2-(苄氧羰基胺基)4-(新戊氧基磺酰基)丁酸乙酯A获得三水合物形式的(3S,3S’)4,4’-二硫二基双(3-胺基丁烷1-磺酸)。

2.根据权利要求1所述的方法，其中在约0℃至约25℃的温度下，使A与选自NaBH₄/LiC1-THF与乙醇的混合物及LiBH₄-THF的成对的还原剂-溶剂反应，进行步骤(a)。

3.根据权利要求1所述的方法，其中在约0℃至约25℃之温度下，使A与LiBH4-THF反应，进行步骤(a)。

4.根据权利要求1所述的方法，其中在作为碱的三乙胺的存在下，在选自氯仿和MTBE与甲苯的混合物的溶剂中，在约-10℃至约10℃的温度下，进行步骤(b)。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，在作为碱的三乙胺的存在下，在MTBE与甲苯3：2体积比的混合物中，在约5℃至约10℃的温度下，使B与甲磺酰氯反应，进行步骤(b)。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，在选自乙醇及丙酮的溶剂中进行步骤(c)。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，在约15℃至约25℃的温度下，在丙酮中进行步骤(c)。

8.根据权利要求1所述的方法，其中，在约15℃至约25℃的温度下，使D与氢氧化钠在乙醇中反应，且使所获得的混合物与碘在乙醇中反应，进行步骤(d)。

9.根据权利要求1所述的方法，其中，在TFA与苯甲醚5：1体积比的回流混合物中搅拌E，进行步骤(e)。

10.根据权利要求1所述的方法，其中，在水中再结晶，纯化最终产物。

11.根据权利要求10所述的方法，其中，最终产物系以其一种水合物形式，优选为其三水合物形式，获得。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中，通过包括以下步骤的方法从L-高胱胺酸制备A：

(a-1)使L-高胱胺酸与氯甲酸苄酯反应，以获得(2S,2S’)4,4’-二硫二基双(2-(苄氧羰基胺基)丁酸)F；

(b-1)使F与乙醇进行酯化反应，以获得(2S,2S’)4,4’-二硫二基双(2-(苄氧羰基胺基)丁酸)二乙酯G；

(c-1)氧化裂解G之二硫键，以获得(S)2-(苄氧羰基胺基)-4-(氯磺酰基)丁酸乙酯H；及

(d-1)使H与新戊醇反应，以获得(S)2-(苄氧羰基胺基)-4-(新戊氧基磺酰基)丁酸乙酯A。

13.根据权利要求12所述的方法，其中，在THF中，在氢氧化钠的存在下，在约15℃至约25℃之温度下，进行步骤(a-1)。

14.根据权利要求12所述的方法，其中，在约45℃至约55℃的温度下，使F与亚硫酰氯在纯乙醇中反应，进行步骤(b-1)。

15.根据权利要求12所述的方法，其中，在约5℃至约10℃的温度下，使G与氯在乙醇中反应，进行步骤(c-1)。

16.根据权利要求12所述的方法，其中，在三乙胺的存在下，在约15℃至约25℃之温度下，在甲苯中进行步骤(d-1)。

17.一种结晶(3S,3S’)4,4’-二硫二基双(3-胺基丁烷1-磺酸)三水合物，其由权利要求1至16中任一项所述的方法获得，其基本上显示以下X射线衍射特性：

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