CN103110703A - 何首乌动态连续循环提取方法及装置 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种何首乌动态连续循环提取方法及装置，所述方法包括：将何首乌干燥后超微粉碎，再投入提取罐中，提取罐中加入体积分数为70%-80%的甲醇溶液，搅拌并热水循环加热提取，提取20-45min后，通过药液泵把何首乌粗提液输送到低温浓缩罐中真空浓缩到所需要的浓度，浓缩温度为60-80℃，回收的溶剂通过药液泵输送回提取罐中，循环使用。该装置包括提取罐，提取罐连接循环加热器，提取罐下部通过第一药液泵连接浓缩罐，浓缩罐连接真空系统及第一冷凝器，第一冷凝器连接循环冷凝机组及中转罐，中转罐通过第二药液泵连接第二冷凝器，第二冷凝器连接提取罐。采取本发明的提取工艺及装置，何首乌中总蒽醌与二苯乙烯苷提取率高，溶剂循环使用，消耗量少。

Description

何首乌动态连续循环提取方法及装置

技术领域

本发明涉及一种药材提取方法，特别涉及一种何首乌动态连续循环提取方法及装置。

背景技术

何首乌（Radix Polygoni Multiflori）为蓼科植物何首乌（Polygonum multiflorumThunb.）的干燥块根。中药何首乌有生首乌与制首乌之分：生首乌功能解毒（载疟）、润肠通便、消痈；制首乌功能补益精血、乌须发、强筋骨、补肝肾。其中制首乌主治精血亏虚，头晕眼花，须发早白，腰酸脚软，遗精，崩带等证。《本草备要》记载：“补肝肾，涩精，养血祛风，为滋补良药。”《开宝本草》云：“益气血，黑髭鬓，悦颜色，久服长筋骨，益精髓，延年不老。”

现在药理研究表明，蒽醌类化合物与二苯乙烯苷为何首乌的主要有效成分。具有以下药理作用：（1）抗衰老作用：何首乌可通过抑制脑内单胺氧化酶-B活性，影响生物体中枢神经递质的含量，从而调节中枢神经活动，延缓大脑的衰老。此外，何首乌也具有延缓皮肤衰老的作用，可作为皮肤抗衰老化妆品添加剂。(2)心肌保护作用：何首乌中的二苯乙烯苷有增加超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶活性的功能，加之何首乌中蒽醌类成分有直接的抗氧化作用，减少体内氧自由基以保护心肌的作用。（3）降血脂作用：何首乌中蒽醌类成分具有泻下作用，加速了机体内毒物代谢，使肝脏的脂肪代谢途径得以恢复。（4）保肝作用。（5）神经保护作用。

何首乌传统提取方法消耗大量溶剂与能量，有效成分提取效率低，增加大生产成本。因此急需寻求一种低能耗、减少溶剂使用率的绿色提取技术，同时提高该药材的利用率。

发明内容

为了解决现有技术的问题，本发明实施例提供了一种提取、浓缩温度低、提取率高，所用提取溶剂能循环使用的何首乌动态连续循环提取方法。

为了实现上述目的本发明采取的技术方案是：

一种何首乌动态连续循环提取方法，所述方法包括：

将何首乌干燥后超微粉碎，再投入提取罐中，提取罐中加入体积分数为70%-80%的甲醇溶液，搅拌并热水循环加热提取，提取20-45min后，通过药液泵把何首乌粗提液输送到低温浓缩罐中真空浓缩到所需要的浓度，浓缩温度为60-80℃，回收的溶剂通过药液泵输送回提取罐中，循环使用。

所述提取温度为60-70℃，所述何首乌粗提液流速为20-30ml/min，所述回收的溶剂与所述何首乌粗提液的流速相等。

所述甲醇溶液与何首乌的加入比例为5-15:1。

还包括，在提取液输送口与浓缩罐中设置在线检测口，利用远红外光谱、紫外可见光谱、高效液相色谱或者超效液相色谱仪检测何首乌中总蒽醌与二苯乙烯苷的含量的含量，监测提取过程含量的变化，当提取液输出口检测到总蒽醌与二苯乙烯苷的浓度均低于0.2mg/ml时，提取完成。

优选的方法包括：

称取超微粉碎10min的何首乌粉末200g，置于提取管中，加入75%的甲醇溶液1000ml，60℃热水循环加热40min，放出300ml提取液于旋转蒸发仪中浓缩，补充提取管内溶剂至1000ml，调节提取管溶剂流速，3h后停止回流，浓缩液65℃下定容至500ml。

本发明还提供一种用于何首乌动态连续循环提取方法中的装置，包括提取罐，所述提取罐连接循环加热器，所述提取罐下部通过第一药液泵连接浓缩罐，所述浓缩罐连接真空系统及第一冷凝器，所述第一冷凝器分别连接循环冷凝机组及中转罐，所述中转罐通过第二药液泵连接第二冷凝器，所述第二冷凝器连接所述提取罐。

所述提取罐内设有涡轮式搅拌器。

所述提取罐内设有第一液位计，所述浓缩罐内设有第二液位计。

所述提取罐与所述第一药液泵连接的管线上设有三通阀和提取液样口，所述中转罐上设有浓缩液取样口。

所述提取液取样口与浓缩液取样口连接远红外光谱仪、紫外可见光谱仪、高效液相色谱仪或者超效液相色谱仪。

本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：

与现有技术相比，本发明减少了提取过程的能耗，溶剂能循环使用，采用低温动态提取与低温真空浓缩工艺，减少何首乌药材在提取过程的损失，何首乌中总蒽醌与二苯乙烯苷提取率高，消耗量少，提取条件温和可控，能有效降低生产成本。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本发明实施例提供的装置的结构示意图；

图2是本发明实施例提供的30min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图3是本发明实施例提供的45min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图4是本发明实施例提供的60min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图5是本发明实施例提供的75min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图6是本发明实施例提供的90min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图7是本发明实施例提供的120min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图8是本发明实施例提供的150min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图9是本发明实施例提供的180min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图10是本发明实施例提供的210min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图11是本发明实施例提供的240min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图12是本发明实施例提供的300min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图13是本发明实施例提供的360min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图14是本发明实施例提供的不同时间点提取液游离蒽醌含量曲线图；

图15是本发明实施例提供的60min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图16是本发明实施例提供的75min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图17是本发明实施例提供的90min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图18是本发明实施例提供的120min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图19是本发明实施例提供的150min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图20是本发明实施例提供的180min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图21是本发明实施例提供的210min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图22是本发明实施例提供的240min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图23是本发明实施例提供的300min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图24是本发明实施例提供的360min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图25是本发明实施例提供的不同时间点浓缩液总游离蒽醌含量曲线图；

图26是本发明实施例提供的不同时间点提取液二苯乙烯苷含量曲线图；

图27是本发明实施例提供的不同时间点浓缩液二苯乙烯苷含量曲线图；

图28是本发明实施例提供的不同提取方法对何首乌二苯乙烯苷转移率影响的柱状图；

图29是本发明实施例提供的不同提取方法对二苯乙烯苷转移率影响的柱状图。

图1中：1提取罐，2三通阀，3第一药液泵，4浓缩罐，5第一冷凝器，6中转罐，7第二药液泵，8第二冷凝器，9循环加热器，10循环冷凝机组，11真空系统，12第一液位计，13提取液样口，14浓缩液取样口，15第二液位计。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明实施方式作进一步地详细描述。

参见图1，一种用于何首乌动态连续循环提取方法中的装置，包括提取罐1，提取罐1连接循环加热器9，提取罐1下部通过第一药液泵3连接浓缩罐4，浓缩罐4连接真空系统11及第一冷凝器5，第一冷凝器5分别连接循环冷凝机组10及中转罐6，中转罐6通过第二药液泵7连接第二冷凝器8，第二冷凝器8连接提取罐1。

作为优选，所述提取罐1内设有涡轮式搅拌器。提取罐1内设有第一液位计12。浓缩罐4内设有第二液位计15。提取罐1与第一药液泵3连接的管线上设有三通阀2和提取液样口13，浓缩罐4上设有浓缩液取样口14。提取液取样口13与浓缩液取样口14连接远红外光谱仪、紫外可见光谱仪、高效液相色谱仪或者超效液相色谱仪，以实现在线检测。

利用本发明的设备和方法，提取时间短，一般为3-4小时。在提取罐与浓缩罐设置液位计与感温元件，提取浓缩温度与提取溶剂体积变化值小于5％，何首乌粗提液的输送速度与回收溶剂输送速度保持一致，提取体系稳定，可长期处于动态连续状态。

利用本发明的装置提取何首乌药材中总蒽醌与二苯乙烯苷的动态连续循环提取方法如下：

将何首乌干燥，超微粉碎后，将粉末放进提取罐1上端入口中，并从提取罐1上端溶剂入口加入适量提取溶剂。启动循环加热器9，其产生的恒温加热介质在提取罐1外夹套中循环加热，设置提取温度为60-70℃，优选65℃，启动提取罐内设置的涡轮式搅拌器，提取罐1内提取溶剂产生切向和径向运动，使药材粉体呈悬浮状态，提取时所蒸发的溶剂由第二冷凝器8冷凝后回流到提取罐1中，提取30min后，何首乌中总蒽醌与二苯乙烯苷的浓度在提取介质中达到平衡状态时，打开提取罐1下端三通阀2，何首乌粗提取液通过第一药液泵3输送到浓缩罐4中，调节流速至20-30ml/min，启动浓缩罐4，设定浓缩温度于60-80℃，调节第一液位计12，补充提取罐1中的提取溶剂。同时，启动真空系统11，使浓缩罐4处于真空环境中，调节第二液位计15，使浓缩罐4内溶液体积处于恒定状态，启动低温循环冷凝机组10，设定温度于10℃以下，其产生的冷流体在第一冷凝器5中循环。浓缩罐4蒸发的溶剂在经冷凝后储存于溶剂中转罐6中，打开阀门，溶剂由第二药液泵7经过第二冷凝器8输送到提取罐1中，流速与何首乌粗提液输送速度保持一致，开始动态连续循环提取过程，在提取液取样口13与浓缩液取样口14均设置了在线检测口，连接远红外光谱仪、紫外可见光谱仪、高效液相色谱仪或者超效液相色谱仪等分析仪器对提取情况进行实时监控，当所测何首乌药材中总蒽醌与二苯乙烯苷的含量小于0.2mg/ml时，停止提取，将浓缩液浓缩至所需浓度。

以紫外分光光度法为例，说明何首乌游离蒽醌的在线检测方法：

从在线检测口处精密吸取供试品溶液25ml，置于锥形瓶中，水浴蒸干，加10ml蒸馏水分次洗涤，转移至分液漏斗中。加二氯甲烷萃取3次（20ml/10ml/10ml），合并二氯甲烷萃取液，水浴蒸干，残渣用0.5%醋酸镁甲醇溶液溶解并转移定容到25ml容量瓶中，测定其吸光度，并计算出游离蒽醌的含量。

下面通过具体的实施例对何首乌动态连续循环提取方法进行说明：

实施例1

一种何首乌动态连续循环提取方法，步骤如下：

称取超微粉碎10min的何首乌粉末200g，置于提取管中，加入75%的甲醇溶液1000ml，60℃热水循环加热40min，调节提取罐溶剂流速为24ml/min，放出300ml提取液于旋转蒸发仪中浓缩，补充提取管内溶剂至1000ml，调节提取管溶剂流速，3h后停止回流，浓缩液65℃下定容至500ml。

实施例2

称取超微粉碎5min的何首乌粉末200g，置于提取管中，加入70%的甲醇溶液850ml，65℃热水循环加热45min，调节提取罐溶剂流速为20ml/min，放出300ml提取液于旋转蒸发仪中浓缩，补充提取管内溶剂至1000ml，调节提取管溶剂流速，3h后停止回流，浓缩液75℃下定容至500ml。

实施例3

称取超微粉碎15min的何首乌粉末200g，置于提取管中，加入80%的甲醇溶液1000ml，70℃热水循环加热30min，调节提取罐溶剂流速为30ml/min，放出300ml提取液于旋转蒸发仪中浓缩，补充提取管内溶剂至1000ml，调节提取管溶剂流速，4h后停止回流，浓缩液80℃下定容至500ml。

以上实施例，可在提取液输送口与浓缩罐中设置在线检测口，利用远红外光谱、紫外可见光谱、高效液相色谱或者超效液相色谱仪检测何首乌中总蒽醌与二苯乙烯苷的的含量，监测提取过程含量的变化，当提取液输出口检测到何首乌中总蒽醌与二苯乙烯苷浓度低于0.2mg/ml时，提取完成。

下面结合一些试验进一步来说明本发明的效果：

1.方法与结果

1.1何首乌中游离蒽醌的含量测定方法

根据上述方法学考察结果，标准曲线、仪器精密度、样品稳定性、重复性、回收率均符合方法学考察要求，故何首乌中游离蒽醌含量的测定方法确定如下：

对照品溶液的制备：精密称取1，8-二羟基蒽醌对照品约10mg，置于10ml的容量瓶中，用甲醇溶解并定容，摇匀，配成浓度为1.0mg/ml的对照品贮备液。

标准曲线的制备：分别精密移取对照品溶液0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml、3.5ml置于蒸发皿中，编号为1号、2号、3号、4号、5号、6号，7号溶液，置于水浴锅上蒸干，放冷，用0.5%的醋酸镁甲醇溶液溶解残渣转移定容到10ml容量瓶中，放置30min，以0.5%醋酸镁-甲醇溶液为空白对照，照分光光度法（《中国药典》2010版一部附录VA）试验，在517nm波长测定吸光度，以吸光度(Y)为纵坐标，浓度(X，mg/ml)为横坐标，绘制标准曲线。

供试品溶液的制备：取制何首乌粉末约1.5g，精密称定，置于100ml锥形瓶中，精密加入50ml甲醇溶液，称定重量，加热回流1h，放冷，补重；再摇匀，过滤，精密移取续滤液25ml，置于锥形瓶中，水浴蒸干，加10ml蒸馏水分次洗涤，转移至分液漏斗中。加二氯甲烷萃取3次（20ml/10ml/10ml），合并二氯甲烷萃取液，回收二氯甲烷，残渣用0.5%醋酸镁甲醇溶液溶解并转移定容到25ml容量瓶中，即得。

测定法：精密吸取供试品溶液25ml，置于锥形瓶中，水浴蒸干，加10ml蒸馏水分次洗涤，转移至分液漏斗中。加二氯甲烷萃取3次（20ml/10ml/10ml），合并二氯甲烷萃取液，水浴蒸干，残渣用0.5%醋酸镁甲醇溶液溶解并转移定容到25ml容量瓶中，测定其吸光度，从标准曲线上读出游离蒽醌的含量。

1.1.1何首乌中游离蒽醌的含量测定

取批号为20100821何首乌药材粉末，粉碎过60目筛，精密称取药材粉末约1.5g，平行3份。按照“1.1.”项下供试品的制备方法制备溶液。根据标准曲线方程，计算样品溶液中含游离蒽醌的含量，数据见表1。

表1药材含量测定结果

2010版中国药典规定制何首乌按干燥品游离蒽醌含量不得低于0.1%，故批次为20110821的制何首乌药材，其游离蒽醌百分含量按干燥品计，为0.81％，符合药典规定。

本实验是利用紫外分光光度法测定制何首乌中游离蒽醌含量的方法，该方法简便，对仪器无特殊要求，并且准确度高、精密度高，重现性好，可以作为制何首乌中游离蒽醌含量的测定方法，为进一步优化制何首乌提取和纯化工艺提供依据。

1.1.2何首乌中二苯乙烯苷含量测定方法

根据上述方法学考察结果，标准曲线、仪器精密度、样品稳定性、重复性、回收率均符合方法学考察要求，故何首乌中二苯乙烯苷含量的测定方法确定如下：

对照品溶液制备：精密称取二苯乙烯苷对照品约2.4mg，置于10ml的棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容，摇匀，配成浓度为0.236mg/ml的对照品贮备液。

标准曲线的制备：精密移取2ml对照品母液置于10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，制成浓度为0.0472mg/ml对照品溶液，连续进样5μl，10μl，20μl，30μl，40μl，50μl，60μl，记录峰面积。以峰面积（Y）为纵坐标，二苯乙烯苷量(X，μg)为横坐标，绘制标准曲线。

供试品溶液制备：精密称取制何首乌药材约0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密移取甲醇溶液25ml加入锥形瓶中，密塞称重，加热回流30min，放冷，再称定重量，用甲醇溶液补足损失的重量，摇匀，取上清液，过滤，再取续滤液，微孔滤膜过滤，作为供试品溶液。

测定方法：以十八烷基硅烷键合硅胶填充剂(250mm*4.6mm，5μm)；以乙腈-水（25:75）为流动相；流速为0.8ml/min；检测波长为320nm。进样量10μl，测定含量。

1.1.3何首乌中二苯乙烯苷的含量测定

取批号为20100821的何首乌药材，平行3份。依照“1.1.2”项下制备供试品样品液，分别精密吸取对照溶液和供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪测定。实验结果如表2：

表2何首乌中二苯乙烯苷的含量测定结果

本实验建立高效液相色谱法测定制何首乌中二苯乙烯苷含量，该方法简便、准确，重现性好，可以作为制何首乌中游离蒽醌含量的测定方法，为进一步优化制何首乌提取和纯化工艺提供依据。

1.2何首乌动态连续循环提取工艺

根据索氏提取原理，可建立中药有效成分的连续回流提取或连续渗漉提取的工艺。动态连续循环提取工艺是一种提取与浓缩同步进行的提取方法，提取液连续输送到浓缩装置中，回收的提取溶剂连续添加到提取装置中，药材长时间浸泡在热溶剂中，新提取溶剂不断补充，溶质高速溶出，提取时间短，能耗低，溶剂循环使用，减少溶剂的消耗率，同时有利于有效成分的完全溶出。此工艺克服了索氏提取法中提取液长时间加热，药材与溶剂接触时间不足等缺点。提取时，将粉碎后的药材加入到提取装置中，一次性加入适量提取溶剂，提取一定时后，提取液连续输送到浓缩装置中，回收提取溶剂同步输送回提取装置中，达到提取的效果。

本文建立动态连续循环提取装置对中药有效成分进行提取可提高提取效率，减少溶剂使用量和提取时间。

1.2.1.1供试品溶液制备

称取批号为20100821何首乌药材中粉200g，置于提取管中，加入一定体积分数的甲醇溶液1000ml，热水循环加热40min，放出300ml提取液于旋转蒸发仪中浓缩，补充提取管内溶剂至1000ml，调节提取管溶剂流速，3h后停止回流，浓缩液定容至500ml，精密吸取5ml，按“1.1”项下方法制备供试品。

1.2.1.2游离蒽醌与二苯乙烯苷的含量测定

供试品A按“1.1”项下测定方定测定何首乌的游离蒽醌的含量，供试品B按“1.2”项下测定方法测定何首乌的二苯乙烯苷的含量，计算何首乌中游离蒽醌与二苯乙烯苷的转移率。

1.2.2紫外分光光度法在线检测何首乌游离蒽醌提取浓缩过程

1.2.2.1紫外分光光度法在线检测何首乌游离蒽醌提取过程

称取何首乌药材粉末100g，置于提取罐中，加入一定体积分数的甲醇溶液1000ml，热水循环加热，在不同时间点放出300ml提取液，补充提取罐内溶剂，分别在30min，45min，60min，75min，90min，120min，150min，180min，210min，240min，300min，360min时从提取液取样口精密吸取10ml，蒸干，按“1.1”项下方法分别制备供试品溶液，按“1.1”项下方法测定其吸光度，并计算游离蒽醌含量和转移率。实验结果见表3和图14。

表3为不同时间点提取液紫外-可见全波长扫描图

图14为不同时间点提取液游离蒽醌含量曲线。

实验结果显示，在动态连续循环提取过程中，提取液中的游离蒽醌含量在45分钟时达到最大值，即可开始循环提取，随着循环提取时间的增加，提取液中的浓度逐渐降低。

1.2.2紫外分光光度法在线检测游离蒽醌浓缩过程

分别取在60min，75min，90min，120min，150min，180min，210min，240min，300min，360min时浓缩液适量，将浓缩液定容至500ml，精密吸取定容后的浓缩液5ml，按“1.1”项下方法分别制备供试品溶液，按“1.1”项下方法测定其吸光度，并计算游离蒽醌含量和转移率。实验结果见表4，图25。

表4不同时间点浓缩液紫外-可见全波长扫描图

图25不同时间点浓缩液总游离蒽醌含量曲线。

实验结果显示，在动态连续循环浓缩过程中，随着循环提取时间的增加，浓缩液液中的游离蒽醌转移率逐渐升高，但在240min以后，转移率升高不显著，提示240分钟后结束提取。

1.2.3高效液相色谱法在线检测何首乌二苯乙烯苷含量

1.2.3.1高效液相在线检测何首乌二苯乙烯苷提取过程含量变化

称取何首乌药材粉末100g，置于提取罐中，加入一定体积分数的乙醇溶液1000ml，热水循环加热，在不同时间点时放出300ml提取液，补充提取罐内溶剂，分别从提取液取样口在30min，45min，60min，75min，90min，120min，150min，180min，210min，240min，300min,360min时精密吸取10ml，按“1.1.2”项下制备待测样品溶液，待测结果如表5和图26。

表5何首乌二苯乙烯苷在线提取含量

图26不同时间点提取液二苯乙烯苷含量

实验结果显示，在动态连续循环提取过程中，提取液中的二苯乙烯苷含量在45min时达到最大值，即可开始循环提取，随着循环提取时间的增加，提取液中的二苯乙烯苷浓度逐渐降低。

1.2.3.2高效液相在线检测何首乌二苯乙烯苷浓缩过程含量变化

分别取在60min,75min,90min,120min,150min,180min,210min,240min,300min,360min时浓缩液适量，按1..1.3项下药渣挥干溶剂项下起制备待测样品溶液，将测结果如下表6和图27。

表6不同时间浓缩液二苯乙烯苷含量

图27为不同时间点浓缩液二苯乙烯苷含量

实验结果显示，在动态连续循环浓缩过程中，随着循环提取时间的增加，浓缩液液中的何首乌中二苯乙烯苷转移率逐渐升高，但在240min以后，转移率升高不显著，提示240分钟后结束提取。

1.2.3.3响应曲面法验证实验

何首乌动态连续循环提取工艺确定为：称取超微粉碎15min的何首乌药材粉末100g，置动态连续循环提取装置中，将最佳工艺条件修正为溶剂流速为22ml/min，乙醇体积分数为65%，浓缩温度为55℃，精密吸取5ml，按“1.2和1.2.1”项下提取测定方法操作，测定二苯乙烯苷含量。

为验证该响应曲面法实验的可靠性，采用上述最佳工艺条件进行何首乌二苯乙烯苷的动态连续循环提取实验，重复3次，实验结果见表7和8。

表7响应曲面法验证实验结果

表8响应曲面法验证实验结果

实验结果显示，何首乌中游离蒽醌的转移率为86.24%，二苯乙烯苷的转移率为77.72%，与理论预测值相比，误差较小。采用响应曲面法得到的工艺条件参数准确可靠，对于何首乌动态连续循环提取工艺有实际参考意义。

1.2.4不同提取工艺比较如下：

查阅该类研究资料显示，对于二苯乙烯苷的提取绝大部分采用回流法，而优化工艺多采用正交设计实验进行不同因素的考查，因素主要包括提取时间、次数、溶剂用量三个主要方面。对于游离蒽醌的提取研究相对较少。曹骋等在何首乌中二苯乙烯苷转移率研究中得出水提二苯乙烯苷的平均转移率为80.67%，醇提转移率达到91.19%，所以本研究为保证对于该批药材和现有文献对于何首乌中二苯乙烯苷提取具有可比性，进行比较性验证。分别取批号为20110821的何首乌药材粉末约100g，按照文献中所述采用水煎法、超声法、回流法、微波法对何首乌中游离蒽醌与二苯乙烯苷提取方法进行探讨。取提取液续滤液25ml，按照“5.3.9”项下测定方法制备供试品溶液，在517nm处测定吸光度。根据标准曲线方程，计算样品溶液中含游离蒽醌的含量，结果如表9及图28，另取不同方法提取液0.2ml,稀释至10ml,微孔滤膜虑过，按照高效液相测定二苯乙烯苷含量的方法，结果如表10及29。

表9不同提取方法何首乌游离蒽醌转移率

表10不同提取方法何首乌二苯乙烯苷转移率

结果显示，对于游离蒽醌类成分超声提取和微波提取方法所得转移率最大，水煎煮法最小，与通过响应曲面优化法所得出的最佳工艺相比，动态连续循环提取的游离蒽醌转移率显著高于其他方法，超声提取法所得二苯乙烯苷转移率最最大，与本研究所得到的转移率77.72%相比还略小，说明通过该方法优化得出的何首乌游离蒽醌和二苯乙烯苷最佳提取条件可显著改善提取率。

本实验以何首乌中游离蒽醌与二苯乙烯苷转移率为指标，通过响应曲面法优化何首乌动态连续循环提取工艺，实验结果表明，该工艺提取率高，能有效节约溶剂与能源。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种何首乌动态连续循环提取方法，其特征在于，所述方法包括：

将何首乌干燥后超微粉碎，再投入提取罐中，提取罐中加入体积分数为70%-80%的甲醇溶液，搅拌并热水循环加热提取，提取20-45min后，通过药液泵把何首乌粗提液输送到低温浓缩罐中真空浓缩到所需要的浓度，浓缩温度为60-80℃，回收的溶剂通过药液泵输送回提取罐中，循环使用。

2.根据权利要求1所述的何首乌动态连续循环提取方法，其特征在于，所述提取温度为60-70℃，所述何首乌粗提液流速为20-30ml/min，所述回收的溶剂与所述何首乌粗提液的流速相等。

3.根据权利要求1所述的何首乌动态连续循环提取方法，其特征在于，所述甲醇溶液与何首乌的加入比例为5-15:1。

4.根据权利要求1所述的何首乌动态连续循环提取方法，其特征在于，还包括，在提取液输送口与浓缩罐中设置在线检测口，利用远红外光谱、紫外可见光谱、高效液相色谱或者超效液相色谱仪检测何首乌中总蒽醌与二苯乙烯苷的含量的含量，监测提取过程含量的变化，当提取液输出口检测到总蒽醌与二苯乙烯苷的浓度均低于0.2mg/ml时，提取完成。

5.根据权利要求1所述的何首乌动态连续循环提取方法，其特征在于，所述方法包括：

称取超微粉碎10min的何首乌粉末200g，置于提取管中，加入75%的甲醇溶液1000ml，60℃热水循环加热40min，调节提取罐溶剂流速为20-30ml/min，放出300ml提取液于旋转蒸发仪中浓缩，补充提取管内溶剂至1000ml，调节提取管溶剂流速，3h后停止回流，浓缩液65℃下定容至500ml。

6.一种用于何首乌动态连续循环提取方法中的装置，其特征在于，包括提取罐，所述提取罐连接循环加热器，所述提取罐下部通过第一药液泵连接浓缩罐，所述浓缩罐连接真空系统及第一冷凝器，所述第一冷凝器分别连接循环冷凝机组及中转罐，所述中转罐通过第二药液泵连接第二冷凝器，所述第二冷凝器连接所述提取罐。

7.根据权利要求6所述的装置，所述提取罐内设有涡轮式搅拌器。

8.根据权利要求6所述的装置，所述提取罐内设有第一液位计，所述浓缩罐内设有第二液位计。

9.根据权利要求6-8任一项所述的装置，所述提取罐与所述第一药液泵连接的管线上设有三通阀和提取液样口，所述浓缩罐上设有浓缩液取样口。

10.根据权利要求9所述的装置，所述提取液取样口与浓缩液取样口连接远红外光谱仪、紫外可见光谱仪、高效液相色谱仪或者超效液相色谱仪。

Images