CN103110676A - 人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法及装置 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法及装置，该方法包括：将人参干燥后超微粉碎，再投入提取罐中，提取罐中加入体积分数为70%-80%的乙醇溶液，搅拌并热水循环加热提取，提取20-45min后，通过药液泵把人参粗提液输送到低温浓缩罐中真空浓缩到所需要的浓度，浓缩温度为60-80℃，回收的溶剂通过药液泵输送回提取罐中，循环使用。该装置包括提取罐，提取罐连接循环加热器，提取罐下部通过第一药液泵连接浓缩罐，浓缩罐连接真空系统及第一冷凝器，第一冷凝器连接循环冷凝机组及中转罐，中转罐连接第二冷凝器，第二冷凝器连接提取罐。采取本发明的提取工艺及装置，人参总皂苷提取率高，溶剂循环使用，消耗量少。

Description

人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法及装置

技术领域

本发明涉及一种药材提取方法，特别涉及一种人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法及装置。

背景技术

人参为五加科人参属植物，是传统的名贵药材。人参（Radix Ginseng）为五加科植物人参（Panax ginseng C.A.Mey.）的干燥根。中国药典记载，人参性平，味甘、微苦。归脾、肺、心经。具有大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津，安神的功效。用于体虚欲脱，肢冷脉微，脾虚食少，肺虚喘咳，津伤口渴，内热消渴，久病虚羸，惊悸失眠，阳痿宫冷；心力衰竭，心原性休克。

现在药理研究表明，人参皂苷为人参的主要有效成分，迄今为止，已经发现40多种人参皂苷，其中主要为人参皂苷Ra₁、Ra₂、Ra₃、Rb₁、Rb₂、Rb₃、Rc、Rd、Re、Rf、Rg₁、Rg₂、Rg₃、Rh₁等。具有以下药理作用：（1）中枢神经系统兴奋与抑制作用：Rb1、Rg1和Re能减缓东莨菪碱所诱导产生的记忆缺失，可促进学习和记忆能力提高，且能促进神经突触的生长。(2)对心血管的作用：提高心肌对缺氧的耐受能力；抗心律失常活性，心脏输出量增加，心肌收缩力增强，心率减慢；加快脂质的代谢；降低血中胆固醇含量。（3）具有免疫调节的作用。（4）抗肿瘤作用。人参传统的提取方法是乙醇回流提取。目前，有关于微波提取、超声辅助提取或超临界提取方面的报道。

传统提取方法消耗大量溶剂与能量，有效成分提取效率低，增加大生产成本。因此急需寻求一种低能耗、减少溶剂使用率的绿色提取技术，同时提取这种名贵药材的利用率。

发明内容

为了解决现有技术的问题，本发明实施例提供了一种提取、浓缩温度低，时间短，所用提取溶剂能循环使用的人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法。

为了实现上述目的本发明采取的技术方案是：

一种人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法，所述方法包括：

将人参干燥后超微粉碎，再投入提取罐中，提取罐中加入体积分数为70%-80%的乙醇溶液，搅拌并热水循环加热提取，提取20-45min后，通过药液泵把人参粗提液输送到低温浓缩罐中真空浓缩到所需要的浓度，浓缩温度为60-80℃，回收的溶剂通过药液泵输送回提取罐中，循环使用。

所述提取温度为60-70℃，所述人参粗提液流速为20-30ml/min，所述回收的溶剂与所述人参粗提液的流速相等。

所述乙醇溶液与人参的加入比例为10:1。

进一步地，还包括，在提取液输送口与浓缩罐中设置在线检测口，利用远红外光谱、紫外可见光谱、高效液相色谱或者超效液相色谱仪检测人参总皂苷的含量，监测提取过程含量的变化，当提取液输出口检测到人参总皂苷浓度低于0.2mg/ml时，提取完成。

优选的方法包括：

称取超微粉碎10min的人参药材粉末100g，置于提取罐中，加入体积分数为78%的乙醇溶液1000ml，80℃回流40min后开始循环提取，调节提取罐溶剂流速为24ml/min，放出300ml提取液于浓缩装置中浓缩，补充提取罐内溶剂至1000ml，6h后停止回流，浓缩液65℃下浓缩定容至500ml。

本发明还提供一种用于人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法中的装置，包括提取罐，所述提取罐连接循环加热器，所述提取罐下部通过第一药液泵连接浓缩罐，所述浓缩罐连接真空系统及第一冷凝器，所述第一冷凝器分别连接循环冷凝机组及中转罐，所述中转罐通过第二药液泵连接第二冷凝器，所述第二冷凝器连接所述提取罐。

所述提取罐内设有涡轮式搅拌器。

所述提取罐内设有第一液位计，所述浓缩罐内设有第二液位计。

所述提取罐与所述第一药液泵连接的管线上设有三通阀和提取液样口，所述中转罐上设有浓缩液取样口。

所述提取液取样口与浓缩液取样口连接远红外光谱仪、紫外可见光谱仪、高效液相色谱仪或者超效液相色谱仪。

本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：

与现有技术相比，本发明减少了提取过程的能耗，溶剂能循环使用，采用低温动态提取与低温真空浓缩工艺，减少人参药材在提取过程的损失，人参总皂苷的提取率明显高于传统乙醇回收提取法。与微波提取、超声辅助提取或超临界提取相比，本法提取条件温和稳定，设备成本投入较少，能有效降低生产成本，适用于人参提取的大生产工艺。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本发明实施例提供的装置的结构示意图；

图2是本发明实施例提供的30min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图3是本发明实施例提供的45min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图4是本发明实施例提供的60min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图5是本发明实施例提供的75min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图6是本发明实施例提供的90min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图7是本发明实施例提供的120min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图8是本发明实施例提供的150min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图9是本发明实施例提供的180min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图10是本发明实施例提供的210min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图11是本发明实施例提供的240min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图12是本发明实施例提供的300min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图13是本发明实施例提供的360min提取液紫外-可见全波长扫描图；

图14是本发明实施例提供的不同时间点提取液人参总皂苷含量曲线图；

图15是本发明实施例提供的60min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图16是本发明实施例提供的75min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图17是本发明实施例提供的90min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图18是本发明实施例提供的120min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图19是本发明实施例提供的150min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图20是本发明实施例提供的180min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图21是本发明实施例提供的210min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图22是本发明实施例提供的240min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图23是本发明实施例提供的300min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图24是本发明实施例提供的360min浓缩液紫外-可见全波长扫描图；

图25是本发明实施例提供的不同时间点浓缩液总人参皂苷含量曲线图；

图26是本发明实施例提供的不同时间点提取液人参皂苷Rg1含量变化曲线图；

图27是本发明实施例提供的不同时间点提取液人参皂苷Re含量变化曲线图；

图28是本发明实施例提供的不同时间点提取液人参皂苷Rb1含量变化曲线图；

图29是本发明实施例提供的不同时间点浓缩液人参皂苷Rg1含量变化曲线图；

图30是本发明实施例提供的不同时间点浓缩液人参皂苷Re含量变化曲线图；

图31是本发明实施例提供的不同时间点浓缩液人参皂苷Rb1含量变化曲线图；

图32是本发明实施例提供的不同提取方法对参须中人参总皂苷转移率的影响柱图。

图1中：1提取罐，2三通阀，3第一药液泵，4浓缩罐，5第一冷凝器，6中转罐，7第二药液泵，8第二冷凝器，9循环加热器，10循环冷凝机组，11真空系统，12第一液位计，13提取液样口，14浓缩液取样口，15第二液位计。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明实施方式作进一步地详细描述。

参见图1，一种用于人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法中的装置，包括提取罐1，提取罐1连接循环加热器9，提取罐1下部通过第一药液泵3连接浓缩罐4，浓缩罐4连接真空系统11及第一冷凝器5，第一冷凝器5分别连接循环冷凝机组10及中转罐6，中转罐6通过第二药液泵7连接第二冷凝器8，第二冷凝器8连接提取罐1。

作为优选，所述提取罐1内设有涡轮式搅拌器。提取罐1内设有第一液位计12。浓缩罐4内设有第二液位计15。提取罐1与第一药液泵3连接的管线上设有三通阀2和提取液样口13，浓缩罐4上设有浓缩液取样口14。提取液取样口13与浓缩液取样口14连接远红外光谱仪、紫外可见光谱仪、高效液相色谱仪或者超效液相色谱仪，以实现在线检测。

利用本发明的设备和方法，提取时间短，一般为3-4小时。在提取罐与浓缩罐设置液位计与感温元件，提取浓缩温度与提取溶剂体积变化值小于5％，人参粗提液的输送速度与回收溶剂输送速度保持一致，提取体系稳定，可长期处于动态连续状态。

利用本发明的装置提取人参药材中的人参总皂苷的动态连续循环提取方法如下：

将人参主根或须根干燥，超微粉碎后，将粉末放进提取罐1上端入口中，并从提取罐1上端溶剂入口加入适量提取溶剂。启动循环加热器9，其产生的恒温加热介质在提取罐1外夹套中循环加热，设置提取温度为60-70℃，优选65℃，启动提取罐内设置的涡轮式搅拌器，提取罐1内提取溶剂产生切向和径向运动，使药材粉体呈悬浮状态，提取时所蒸发的溶剂由第二冷凝器8冷凝后回流到提取罐1中，提取30min后，人参总皂苷的浓度在提取介质中达到平衡状态时，打开提取罐1下端三通阀2，人参粗提取液通过第一药液泵3输送到浓缩罐4中，调节流速至20-30ml/min，启动浓缩罐4，设定浓缩温度于60-80℃，调节第一液位计12，补充提取罐1中的提取溶剂。同时，启动真空系统11，使浓缩罐4处于真空环境中，调节第二液位计15，使浓缩罐4内溶液体积处于恒定状态，启动低温循环冷凝机组10，设定温度于10℃以下，其产生的冷流体在第一冷凝器5中循环。浓缩罐4蒸发的溶剂在经冷凝后储存于溶剂中转罐6中，打开阀门，溶剂由第二药液泵7经过第二冷凝器8输送到提取罐1中，流速与人参粗提液输送速度保持一致，开始动态连续循环提取过程，在提取液取样口13与浓缩液取样口14均设置了在线检测口，连接远红外光谱仪、紫外可见光谱仪、高效液相色谱仪或者超效液相色谱仪等分析仪器对提取情况进行实时监控，当所测人参总皂苷含量小于0.2mg/ml时，停止提取，将浓缩液浓缩至所需浓度。

以紫外分光光度法为例，说明人参总皂的在线检测方法：

从在线检测口处实时吸取适量提取液，蒸干，加入10ml蒸馏水溶解，精密吸取0.3ml供试品溶液于刻度试管中，水浴蒸干，置于分液漏斗中。加乙醚萃取3次（20ml/10ml/5ml），弃去乙醚层。水层加入水饱和正丁醇萃取4次（30ml/20ml/15ml/10ml），合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇至干，用甲醇分次洗涤转移至25ml容量瓶中，甲醇定容，作为供试品溶液。精密吸取0.3ml供试品溶液于刻度试管中，水浴蒸干，精密加入5%的香草醛醋酸溶液0.2ml和高氯酸0.8ml，在60℃下水浴反应15min，冰水冷却10min以终止反应，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，在555nm下测定吸光度，并计算人参总皂苷含量。

下面通过具体的实施例对人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法进行说明：

实施例1

一种人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法，步骤如下：

称取超微粉碎10min的人参药材粉末100g，置于提取罐中，加入体积分数为78%的乙醇溶液1000ml，60℃回流40min后开始循环提取，调节提取罐溶剂流速为24ml/min，放出300ml提取液于浓缩装置中浓缩，补充提取罐内溶剂至1000ml，6h后停止回流，浓缩液65℃下浓缩定容至500ml。

实施例2

称取超微粉碎5min的人参药材粉末100g置于提取罐中，加入体积分数为70%的乙醇溶液850ml，65℃回流45min后开始循环提取，调节提取罐溶剂流速为20ml/min，放出300ml提取液于浓缩装置中浓缩，补充提取罐内溶剂至1000ml，3h后停止回流，浓缩液75℃下浓缩定容至500ml。

实施例3

称取超微粉碎15min的人参药材粉末100g置于提取罐中，加入体积分数为80%的乙醇溶液1150ml，70℃回流30min后开始循环提取，调节提取罐溶剂流速为30ml/min，放出300ml提取液于浓缩装置中浓缩，补充提取罐内溶剂至1000ml，4h后停止回流，浓缩液80℃下浓缩定容至500ml。

以上实施例，可在提取液输送口与浓缩罐中设置在线检测口，利用远红外光谱、紫外可见光谱、高效液相色谱或者超效液相色谱仪检测人参总皂苷的含量，监测提取过程含量的变化，当提取液输出口检测到人参总皂苷浓度低于0.2mg/ml时，提取完成。

下面结合一些试验进一步来说明本发明的效果：

1.方法与结果

1.1参须中人参总皂苷的含量测定方法

根据上述方法学考察结果，标准曲线、仪器精密度、样品稳定性、重复性、回收率均符合方法学考察要求，故参须中人参总皂苷含量的测定方法确定如下：

照紫外-可见分光光度法（2010版药典附录VA）测定

对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷Re对照品约6mg，置于5ml容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，精密移取2ml至10ml量瓶中，加甲醇定容，摇匀，即得。

标准曲线的制备：精密吸取人参皂苷对照品溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml、0.7ml、0.8ml分别置于刻度试管中，水浴蒸干，精密加入5%的香草醛-冰醋酸溶液0.2ml和高氯酸0.8ml，在60℃下水浴反应15min，冰水冷却10min以终止反应，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在555nm处测定吸光度，以人参皂苷重量(mg)为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

供试品溶液的制备：取参须药材适量，粉碎过筛（过三号筛)。精密称定参须粗粉约0.1g，置圆底烧瓶中，加75%乙醇50ml，加热回流1.5h，放冷后，滤过，滤渣用乙醇洗涤2-3次，收集滤液，减压浓缩至浸膏，用10倍量蒸馏水溶解，溶液置于分液漏斗中。加乙醚萃取3次（20ml/10ml/5ml），弃去乙醚层。水层加入水饱和正丁醇萃取4次（30ml/20ml/15ml/10ml），合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇至干，用甲醇分次洗涤转移至25ml容量瓶中，用甲醇定容，作为供试品溶液。

测定法：精密吸取0.3ml待测溶液至刻度试管中，水浴蒸干，精密加入5%的香草醛醋酸溶液0.2ml和高氯酸0.8ml，在60℃下水浴反应15min，冰水冷却10min以终止反应，精密加入冰醋酸5ml，摇匀得到显色溶液，在λ=555nm处测定溶液的吸光度，根据标准曲线方程，计算供试品溶液中含人参皂苷的含量。

1.1.1参须中人参皂苷的含量测定

取批号为20100824参须药材，粉碎过筛，精密称取药材粉末约0.1g，按照“1.1”项下供试品的制备方法制备溶液。分别精密吸取0.3ml待测溶液至刻度试管中，水浴蒸干，按“1.1”项下的显色方法操作，在555nm处测定吸光度。根据标准曲线方程，计算样品溶液中含人参皂苷的含量，数据见表1。

表1药材含量测定结果

2010版中国药典规定人参按干燥品计算，人参皂苷Rg1、Re、Rb1的总含量不得低于0.8%，故批次为20100824的参须药材，其人参总皂苷百分含量按干燥品算，为10.0%，均符合药典要求。

1.1.2参须中人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量测定方法

根据上述方法学考察结果，标准曲线、仪器精密度、样品稳定性、重复性、回收率均符合方法学考察要求，故参须中人参总皂苷含量的测定方法确定如下：

对照品溶液制备：分别精密称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Re及人参皂苷Rb1适量，加甲醇制成每1ml各0.2121mg、0.3252mg、0.6721mg的混合溶液作为对照品溶液。

标准曲线的制备：精密吸取对照品溶液2,4,8，10,12，14,16μl注入液相色谱仪,在上述色谱条件下进行峰面积测定,以峰面积Y为纵坐标,对照品进样量X(μg)为横坐标，绘制标准曲线。

供试品溶液制备：取参须粉末（过四号筛）约1.0g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷25ml，加热回流3小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥尽三氯甲烷，连同滤纸一同移入100ml具塞锥形瓶中，精密加入水饱和的正丁醇50ml，称定重量，密塞，放置过夜，超声提取（功率250W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，加水饱和的正丁醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液25ml，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。

测定方法：以十八烷基硅烷键合硅胶填充剂Kinetex TM2.6um；以乙腈（A）-水（B）为流动相梯度洗脱（0-6min，19%A；6-13min，19%A→29%A；13-18min，29%A→40%A；18-25min，40%A→19%A）；流速：1.8mL/min；检测波长203nm，进样量：10μl，根据结果计算三种人参皂苷的含量。

1.1.3参须中人参皂苷的含量测定

取批号为20100824的参须药材，依照制备供试品样品液，分别精密吸取对照溶液和供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪测定。实验结果如下：

表2参须样品中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量测定

1.2人参总皂苷动态连续循环提取工艺

根据索氏提取原理，可建立中药有效成分的连续回流提取或连续渗漉提取的工艺。动态连续循环提取工艺是一种提取与浓缩同步进行的提取方法，提取液连续输送到浓缩装置中，回收的提取溶剂连续添加到提取装置中，药材长时间浸泡在热溶剂中，新提取溶剂不断补充，溶质高速溶出，提取时间短，能耗低，溶剂循环使用，减少溶剂的消耗率，同时有利于有效成分的完全溶出。此工艺克服了索氏提取法中提取液长时间加热，药材与溶剂接触时间不足等缺点。提取时，将粉碎后的药材加入到提取装置中，一次性加入适量提取溶剂，提取一定时后，提取液连续输送到浓缩装置中，回收提取溶剂同步输送回提取装置中，达到提取的效果。

本发明的动态连续循环提取装置对中药有效成分进行提取可提高提取效率，减少溶剂使用量和提取时间。

1.2.1.1供试品溶液制备

称取批号为20100824人参药材中粉100g，置于提取管中，加入一定体积分数的乙醇溶液1000ml，热水循环加热40min，放出300ml提取液于浓缩装置中浓缩，补充提取管内溶剂至1000ml，调节提取管溶剂流速，6h后停止回流，浓缩液定容至500ml，精密吸取5ml，按“1.1”项下方法制备供试品。

1.2.1.2人参总皂苷的含量测定

供试品按“1.1”项下测定方法测定人参总皂苷的含量，并计算转移率。

1.2.2紫外分光光度法在线检测人参总皂苷提取浓缩过程

1.2.2.1紫外分光光度法在线检测人参总皂苷提取过程

称取人参药材粉末100g，置于提取罐中，加入一定体积分数的乙醇溶液1000ml，热水循环加热，在不同时间点放出300ml提取液，补充提取罐内溶剂，分别在30min，45min，60min，75min，90min，120min，150min，180min，210min，240min，300min,360min时从放出液吸取10ml，作为取样原液，然后从10ml吸取适量蒸干，按“1.1”项下方法分别制备供试品溶液，按“1.1”项下方法测定其吸光度，并计算总皂苷含量和转移率。实验结果见表3和图14。

表3不同时间点提取液紫外-可见全波长扫描图

图14为不同时间点提取液人参总皂苷含量曲线。

实验结果显示，在动态连续循环提取过程中，提取液中的总皂苷含量在45分钟时达到最大值，即可开始循环提取，随着循环提取时间的增加，提取液中的浓度逐渐降低。

1.2.2.2紫外分光光度法在线检测人参总皂苷浓缩过程

分别取在60min，75min，90min，120min，150min，180min，210min，240min，300min，360min时浓缩液适量，将浓缩液定容至500ml，精密吸取定容后的浓缩液5ml，按“1.1”项下的方法分别制备供试品溶液，按“1.1”项下的方法测定其吸光度，并计算总皂苷含量和转移率。实验结果见表4和图25。

表4不同时间点浓缩液紫外-可见全波长扫描图

图25为不同时间点浓缩液总人参皂苷含量曲线。

实验结果显示，在动态连续循环浓缩过程中，随着循环提取时间的增加，浓缩液液中的总皂苷转移率逐渐升高，但在240min以后，转移率升高不显著，提示240分钟后结束提取。

1.2.3高效液相色谱法在线检测人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量

1.2.3.1高效液相在线检测人参皂苷Rg1、Re、Rb1提取过程含量变化

称取人参药材粉末100g，置于提取罐中，加入一定体积分数的乙醇溶液1000ml，热水循环加热，在不同时间点时放出300ml提取液，补充提取罐内溶剂，分别从提取液取样口在30min，45min，60min，75min，90min，120min，150min，180min，210min，240min，300min,360min时精密吸取10ml，按1.1.2项下药渣挥干溶剂项下起制备待测样品溶液，待测结果如表5、图26、图27和图28。

表5不同时间点提取液中人参皂苷高效液相检测结果

实验结果显示，在动态连续循环提取过程中，提取液中的人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量在45分钟时达到最大值，即可开始循环提取，随着循环提取时间的增加，提取液中的人参皂苷Rg1、Re、Rb1浓度均逐渐降低。

1.2.3.2高效液相在线检测人参皂苷Rg1、Re、Rb1提浓缩程含量变化

分别取在60min，75min，90min，120min，150min，180min，210min，240min，300min，360min时浓缩液适量，按1.1.2项下药渣挥干溶剂项下起制备待测样品溶液，检测结果如下表6、图29、图30和图31。

表6不同时间点浓缩液中人参皂苷高效液相检测结果

实验结果显示，在动态连续循环浓缩过程中，随着循环提取时间的增加，浓缩液液中的人参皂苷Rg1、Re、Rb1转移率逐渐升高，但在240min以后，转移率升高不显著，提示240分钟后结束提取。

1.2.3.3响应曲面法验证实验

人参动态连续循环提取工艺确定为：称取超微粉碎10分钟的人参药材粉末100g，置动态连续循环提取装置中，加入10倍体积的78%乙醇，提取温度为80℃，回流40min后开始循环提取，溶剂流速为24ml/min，浓缩温度为65℃，提取4小时后收集浓缩液，精密吸取5ml，按“1.1和1.1.3”项下提取测定方法操作，测定人参总皂苷含量。

为验证该响应曲面法实验的可靠性，采用上述最佳工艺条件进行人参总皂苷的动态连续循环提取实验，重复3次，实验结果见表7和表8。

表7紫外分光光度法测定人参总皂苷含量

表8提取液中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量测定

实验结果显示，人参总皂苷的转移率为85.64%，与理论预测值比较，误差为2.58%。采用响应曲面法得到的工艺条件参数准确可靠，对于人参总皂苷动态连续循环提取工艺有实际参考意义。

1.2.4不同提取工艺比较如下：

参考文献毛祖林等所做四因素三水平人参总皂苷各类提取工艺优选正交试验，结果也是选定70%左右的乙醇为最佳溶媒，人参皂苷得率达到8%，与本实验结果相似。张崇禧等人比较了不同提取方法溶媒对人参总皂苷提取含量的影响，其中包括超声法，回流法，温浸法，水煎法，结果显示，由于其方法不同对总皂苷的提取率影响差异较大，其中以超声提取法8.68%最高，水煎煮法4.13%最低。为保证对于该批药材和现有文献对于人参皂苷提取具有可比性，进行比较性验证，分别取批号为20100824的参须药材粉末5g，共五份按照文献中所述超声法，回流法，温浸法，水煎法进行人生总皂苷的提取方法进行，取续滤液备用，按照“1.1”项下供试品的制备方法制备溶液，分别精密吸取0.3ml待测溶液至刻度试管中，水浴蒸干，按“1.1”项下的显色方法操作，在555nm处测定吸光度。根据标准曲线方程，计算样品溶液中含人参皂苷的含量，结果见表9和图32。

表9不同提取方法对人参总皂苷提取率的影响结果

图32为不同提取方法对参须中人参总皂苷转移率的影响。

结果显示正如文献中所示超声提取和乙醇回流提取所得出人生皂苷的转移率最大，水煎煮法最小，但与通过响应曲面优化法所得出的最佳工艺所得到的人参皂苷转移率85%，相比较还略小，说明通过该方法优化的出的最佳提取条件确实能改善人参皂苷的提取率，同时也证明了选用该方法的合理性和科学性，为该工艺进一步推广到实际生产中提供了最新的依据。

在单因素试验基础上，通过响应曲面优化试验得出人参动态连续循环提取工艺为：称取超微粉碎10min的人参药材粉末100g，置于提取罐中，加入体积分数为78%的乙醇溶液1000ml，60℃回流40min后开始循环提取，调节提取罐溶剂流速为24ml/min，放出300ml提取液于浓缩装置中浓缩，补充提取罐内溶剂至1000ml，3h后停止回流，浓缩液65℃下浓缩定容至500ml。同时还比较不同提取方法对皂苷转移率的影响，结果表明通过本方法所得出的转移率可以达到80%以上，与水煎煮法、超声法、回流提取法、微波法相比较而言，动态连续提取工艺有明显的提高皂苷转移率的作用，从而在根本上提高了人参药材的利用率，作为名贵中药，保护了药材资源，同时可以为工业生产提供一定的科学依据。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法，其特征在于，所述方法包括：

将人参干燥后超微粉碎，再投入提取罐中，提取罐中加入体积分数为70%-80%的乙醇溶液，搅拌并热水循环加热提取，提取20-45min后，通过药液泵把人参粗提液输送到低温浓缩罐中真空浓缩到所需要的浓度，浓缩温度为60-80℃，回收的溶剂通过药液泵输送回提取罐中，循环使用。

2.根据权利要求1所述的人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法，其特征在于，所述提取温度为60-70℃，所述人参粗提液流速为20-30ml/min，所述回收的溶剂与所述人参粗提液的流速相等。

3.根据权利要求1所述的人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法，其特征在于，所述乙醇溶液与人参的加入比例为5-15:1。

4.根据权利要求1所述的人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法，其特征在于，还包括，在提取液输送口与浓缩罐中设置在线检测口，利用远红外光谱、紫外可见光谱、高效液相色谱或者超效液相色谱仪检测人参总皂苷的含量，监测提取过程含量的变化，当提取液输出口检测到人参总皂苷浓度低于0.2mg/ml时，提取完成。

5.根据权利要求1所述的人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法，其特征在于，所述方法包括：

称取超微粉碎10min的人参药材粉末100g，置于提取罐中，加入体积分数为78%的乙醇溶液1000ml，60℃回流40min后开始循环提取，调节提取罐溶剂流速为24ml/min，放出300ml提取液于浓缩装置中浓缩，补充提取罐内溶剂至1000ml，3h后停止回流，浓缩液65℃下浓缩定容至500ml。

6.一种用于人参药材中人参总皂苷的动态连续循环提取方法中的装置，其特征在于，包括提取罐，所述提取罐连接循环加热器，所述提取罐下部通过第一药液泵连接浓缩罐，所述浓缩罐连接真空系统及第一冷凝器，所述第一冷凝器分别连接循环冷凝机组及中转罐，所述中转罐通过第二药液泵连接第二冷凝器，所述第二冷凝器连接所述提取罐。

7.根据权利要求6所述的装置，所述提取罐内设有涡轮式搅拌器。

8.根据权利要求6所述的装置，所述提取罐内设有第一液位计，所述浓缩罐内设有第二液位计。

9.根据权利要求6-8任一项所述的装置，所述提取罐与所述第一药液泵连接的管线上设有三通阀和提取液样口，所述浓缩罐上设有浓缩液取样口。

10.根据权利要求9所述的装置，所述提取液取样口与浓缩液取样口连接远红外光谱仪、紫外可见光谱仪、高效液相色谱仪或者超效液相色谱仪。

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