CN106309556A - 一种基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法 - Google Patents
一种基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106309556A CN106309556A CN201610976198.6A CN201610976198A CN106309556A CN 106309556 A CN106309556 A CN 106309556A CN 201610976198 A CN201610976198 A CN 201610976198A CN 106309556 A CN106309556 A CN 106309556A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cortex cinnamomi
- cellulase
- polyphenol
- assisted extraction
- cinnamon
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 87
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 title claims abstract description 87
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims abstract description 61
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 title claims abstract description 35
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 title claims abstract description 35
- 241000723347 Cinnamomum Species 0.000 title abstract description 20
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 title abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 47
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 23
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 4
- 238000010025 steaming Methods 0.000 claims description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 claims description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 abstract description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 2
- 238000012827 research and development Methods 0.000 abstract description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 7
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 4
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 4
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000013461 design Methods 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 3
- 244000080208 Canella winterana Species 0.000 description 2
- 235000008499 Canella winterana Nutrition 0.000 description 2
- 244000037364 Cinnamomum aromaticum Species 0.000 description 2
- 235000014489 Cinnamomum aromaticum Nutrition 0.000 description 2
- 235000021511 Cinnamomum cassia Nutrition 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N coumarin Chemical compound C1=CC=C2OC(=O)C=CC2=C1 ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 18beta-glycyrrhetic acid Chemical compound C([C@H]1C2=CC(=O)[C@H]34)[C@@](C)(C(O)=O)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](O)C1(C)C MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 229940119157 Hydroxy radical scavenger Drugs 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 241000219000 Populus Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229960000956 coumarin Drugs 0.000 description 1
- 235000001671 coumarin Nutrition 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000012938 design process Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 235000018927 edible plant Nutrition 0.000 description 1
- 239000000686 essence Substances 0.000 description 1
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- -1 hydroxyl free radical Chemical class 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000012567 medical material Substances 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229920001864 tannin Polymers 0.000 description 1
- 235000018553 tannin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001648 tannin Substances 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/54—Lauraceae (Laurel family), e.g. cinnamon or sassafras
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
- A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation or decoction
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法，所述基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法加入占干燥肉桂粉总质量的0.15％的纤维素酶，酶解后加蒸馏水煎煮。本发明用正交试验法对纤维素酶解法辅助提取肉桂多酚的工艺进行了优化，为研究开发肉桂提供科学依据；通过单因素及正交试验，对纤维素酶辅助提取肉桂多酚的工艺进行研究；确定肉桂多酚的最佳提取工艺参数为温度100℃、提取时间60min，料液比1:25、pH5.2，肉桂多酚的得率为3.23％，总多酚含量为35.2％，结果表明肉桂多酚有较强的抗氧化活性(IC50为41.02μg/mL)，浓度为200μg/mL时对羟自由基有最大清除率97.1％。
Description
技术领域
本发明属于肉桂多酚提取技术领域，尤其涉及一种基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法。
背景技术
肉桂为樟科植物肉桂(Cinnamomum cassia Presl)的干燥树皮，是我国卫生部公布的药食兼用植物材料，既在民间作为食用香料广泛使用，又在中医临床上作为药品使用。其味辛甘、大热，有补火助阳、引火归源、散寒止痛等功效。其所含化学成分有挥发油、酚类、有机酸、鞣质、多糖、甙、甾体、内脂、香豆精等。现代药理试验表明，肉桂多酚可增强胰岛素生物活性，具有降血糖及抗氧化等作用。纤维素酶是一组能够降解纤维素的酶的总称，可破坏细胞壁的致密结构，加速药材有效成分的溶出，因此纤维素酶在不少中草药有效成分的提取分离中都得到了应用。但目前尚未看到纤维素酶应用于肉桂多酚提取的相关报道。有文献报导了一种肉桂多酚的提取方法：Joseph等最早采用水煮法从肉桂中提取多酚。还有文献报导了一种肉桂多酚的提取方法：平华,张贵军等重复水煮法工艺,用正交法设计改良工艺条件,得到提取温度为60℃,加水量为12倍,提取时间为60min的结论。还有文献报导了一种肉桂多酚的提取方法：秦莹等采用乙醇-水混合溶剂体系提取,经多次实验得出乙醇与水的比例为10:90时提取效果最好的结论。还有文献报导了一种肉桂多酚的提取方法：Anderson等采用混合溶剂提取,后用LH-20葡萄糖凝胶柱分离,再通过液相制备柱的形式对肉桂多酚进行了提取、分离和鉴别。上述方法都存在不同程度的局限性。其中水提法简单无毒成本低易操作，是近年来常用的方法，但是其产率低是其最大的缺点，不适合大批量的生产，有必要开发一种更加简单易行且提取率增加的方法。
综上所述，现有的提取肉桂多酚的方法存在产率低，不适合大批量的生产。
发明内容
本发明的目的在于提供一种基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法，旨在解决现有的提取肉桂多酚的方法存在产率低，不适合大批量的生产的问题。
本发明是这样实现的，一种基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法，所述基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法加入占干燥肉桂粉总质量0.15％的纤维素酶酶解后加蒸馏水煎煮。
进一步，所述基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法，其特征在于，所述加入纤维素酶之前：
称取干燥肉桂粉，料液比1：25，pH5.2。
进一步，所述加蒸馏水煎煮后滤液合并后浓缩，得浸膏。
进一步，所述基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法提取温度100℃，提取时间60min。
进一步，于30℃条件下酶解60min后加蒸馏水煎煮。
本发明的另一目的在于提供一种利用所述基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法的肉桂多酚提取方法。
本发明提供的基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法，用正交试验法对纤维素酶解法辅助提取肉桂多酚的工艺进行了优化，为研究开发肉桂提供科学依据。通过单因素及正交试验，对纤维素酶辅助提取肉桂多酚的工艺进行研究；确定肉桂多酚的最佳提取工艺参数为温度100℃、提取时间60min，料液比1:25、pH5.2，肉桂多酚的得率为3.23％，总多酚含量为35.2％，结果表明肉桂多酚有较强的抗氧化活性(IC50为41.02μg/mL)，浓度为200μg/mL时对羟自由基有最大清除率97.1％。
附图说明
图1是本发明实施例提供的基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法流程图。
图2是本发明实施例提供的提取温度对得率的影响示意图。
图3是本发明实施例提供的提取时间对得率的影响示意图。
图4是本发明实施例提供的pH值对得率的影响示意图。
图5是本发明实施例提供的料液比对得率的影响示意图。
图6是本发明实施例提供的肉桂多酚和VC的还原能力测定示意图。
图7是本发明实施例提供的肉桂多酚对羟自由基的清除作用示意图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
下面结合附图对本发明的应用原理作详细的描述。
如图1所示，本发明实施例提供的基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法包括以下步骤：
S101：称取干燥肉桂粉，料液比1：25，pH5.2；
S102：加0.15％纤维素酶于30℃条件下酶解60min后加蒸馏水煎煮，提取温度100℃，提取时间60min，滤液合并后浓缩，得其浸膏。
下面结合试验对本发明的应用原理作详细的描述。
l材料与方法
1.1材料、试剂与设备
肉桂：产地广西，经宜春学院陈武教授鉴定为樟科植物肉桂(Cinnamomum cassiaPresl)的干燥树皮，洗净、干燥、粉碎备用。
纤维素酶：北京双旋微生物培养基制品厂生产，活性1200IU/g；没食子酸对照品：中国药品生物制品检定所；Folin-Ciocalteus phenol reagent：Sigma公司；碳酸钠：分析纯，天津市大茂化学试剂厂。
紫外分光光度计：美国尤尼克公司，UV-2000；数显恒温水浴锅：江苏省金坛市环宇科学仪器厂，HH-6；电热恒温干燥箱：上海精密仪器仪表有限公司，DHG-9023A；旋转蒸发器：上海亚荣生化仪器厂，RE-3000；电子天平：北京赛多利斯仪器系统有限公司，BSA223S；离心机：上海安亭科学仪器厂，TGL-16。
1.2方法
1.2.1多酚标准曲线的制作
精密称取没食子酸10mg，置100mL量瓶中，加入超纯水制成0.1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。分别精确吸取1mL对照品溶液或样品溶液，加1mL1mol/L的Folin-ciocalteu显色剂，然后加入1mol/L Na2CO3溶液3mL，混匀，室温静置15min，反应液用蒸馏水定容至10mL，于725nm处测定其吸光度值。用1mL蒸馏水代替对照品溶液，同法操作作为空白溶液。其线性回归方程为：Y＝7.0457X--0.0433(R2＝0.9959)。
1.2.2肉桂多酚的制备
精密称取干燥肉桂粉，加0.15％纤维素酶于30℃、pH4.5条件下酶解60min后加蒸馏水煎煮，滤液合并后浓缩，得其浸膏，按绘制标准曲线的方法操作，测定总多酚含量并计算总多酚得率。
1.2.3单因素试验及正交实验
在肉桂多酚的提取过程中，以提取温度、提取时间、料液比、pH值为主要因素进行单因素试验及正交实验。
1.2.4肉桂多酚抗氧化活性研究
1.2.4.1还原能力的测定
吸取不同质量浓度的肉桂多酚水溶液lmL，依次加入0.2mol/L的PBS溶液(pH6.6)2.5mL、1％的K3[Fe(CN)6]溶液l mL，混匀后50℃水浴保温20min，流水冷却，加入l0％的TCA溶液5mL，混匀后静置10min，加入0.1％的FeC13溶液0.5mL最后加蒸馏水2.5mL，混匀静置l0min，在波长700nm处测吸光度，以蒸馏水作为空白。用相同质量浓度的VC溶液为对照。
1.2.4.2对羟自由基清除率的测定
吸取不同质量浓度的肉桂多酚溶液2mL，加入2mL 6mmol/L FeSO4、2mL6mmol/L水杨酸-乙醇溶液和2mL 6mmol/L H2O2溶液，37℃恒温反应30min，然后在波长510nm处测定吸光度，并按相同方法测定未加入肉桂多酚的溶液吸光度A0，未加入H2O2的溶液的吸光度Ax0，均以蒸馏水为参比溶液。
OH清除率(％)＝[A0-(Ax-Ax0)]/A0×100％
2结果与分析
2.1提取温度的影响
选择料液比为1：10，提取时间1小时，自然pH的条件下，提取温度对肉桂总多酚得率的影响见图2。
由图2可见，随着提取温度的升高，肉桂总多酚得率不断增高。当提取温度达到100℃时得率最高。所以，提取温度100℃为好。
2.2提取时间的影响
选择料液比为1：10，提取温度100℃，自然pH的条件下，提取时间对肉桂总多酚得率的影响见图3。
由图3可见，随着肉桂总多酚提取时间的延长，肉桂总多酚的得率出现上升，60min达到最高，此后缓慢下降。因此最佳提取时间为60min。
2.3pH值的影响
在提取温度100℃，提取时间60min，料液比1：10时，不同pH的条件对肉桂总多酚得率的影响见图4。
由图4可见，随着pH值的升高肉桂总多酚得率缓慢上升，pH5.0时达到最高，此后迅速下降，pH7.0时得率几乎只有最高值的一半。因此，弱酸性环境有利于肉桂多酚的提取，最佳提取pH为5.0。
2.4料液比的影响
在提取温度100℃，提取时间60min，pH5.0的条件下不同料液比对肉桂总多酚得率的影响见图5。
由图5可见，随着溶剂量的增加，提取效果不断增高，当料液比为1：50时，肉桂总多酚得率最高，但当料液比超过1：16时，肉桂总多酚得率增加较小，综合考虑成本因素选择1：16作为提取的最佳料液比。
2.5正交试验设计
根据单因素试验结果，选取提取温度、提取时间、料液比、pH值为考察因素，各取3个水平，选用L9(34)正交表进行试验。以肉桂总多酚得率为指标，正交试验水平因素见表1，试验结果见表2。
表1正交试验因素水平表
表2 L9(34)正交试验设计及结果
由表2可知，4个因素对总多酚得率的影响主次顺序为：C>D>A>B即：料液比>pH值>提取温度>提取时间；最佳工艺参数为C3D2A3B2，即：料液比为1：25，pH5.0，提取温度100℃，提取时间60min。经验证试验表明：加水量为肉桂粉的25倍，pH5.2，提取温度100℃，提取时间60min平均进行3组，测得肉桂总多酚的平均得率为3.23％，其RSD为0.51％，总多酚含量为35.2％，优选条件的重现性良好。
2.6方差分析
由表3方差分析结果表明：由F比可知各因素对试验结果影响的程度是料液比>pH值>温度>提取时间，即影响最大的是料液比，其次是pH值，然后是提取温度、提取时间，这与上面结果分析一致。
表3方差分析
2.7肉桂多酚抗氧化活性测定
2.7.1肉桂多酚的还原能力
还原能力是抗氧化性强弱的重要指标，因此可通过对还原能力的测定了解肉桂多酚抗氧化活性的大小。
由图6可知，肉桂多酚和VC的还原能力均随浓度的增大而增强，在相同质量浓度的条件下，肉桂多酚的还原力强于VC，说明肉桂多酚有较强的还原能力，其IC50(A700nm为0.5时的样品质量浓度)为41.02μg/mL。
2.7.2对羟自由基的清除
由图7可知。肉桂多酚对羟自由基具有明显的清除作用，在多酚质量浓度为25μg/mL～200μg/mL时，清除率随质量浓度的增加而增大，在200μg/mL时有最大清除率97.1％，说明肉桂多酚是一种有效的羟自由基清除剂。
3结论
经上述研究表明：纤维素酶辅助提取肉桂多酚工艺合理可行、操作简便、成本较低、效果较好，总多酚得率较高。料液比、pH值、提取温度、提取时间4个因素对总多酚得率有较大影响。料液比是影响提取率的主要因素，pH值是居中因素，提取温度、提取时间是次要因素，经单因素试验和正交试验对提取工艺的优化，肉桂多酚最佳提取工艺条件为为料液比1：25，pH5.2，提取温度100℃，提取时间60min。肉桂总多酚得率为3.23％，总多酚含量为35.2％。
抗氧化试验表明，肉桂多酚的还原能力随浓度的增大而增强，在相同的质量浓度条件下，肉桂多酚的还原力要强于VC；肉桂多酚对羟自由基的最大清除率为96.3％，具有良好的清除作用，并有明显的量效关系。因此，肉桂多酚有望开发成为一种优良的天然抗氧化剂。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法，其特征在于，所述基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法加入占干燥肉桂粉总质量的0.15％的纤维素酶酶解后加蒸馏水煎煮。
2.如权利要求1所述的基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法，其特征在于，所述基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法，其特征在于，所述加入纤维素酶之前：
称取干燥肉桂粉，料液比1：25，pH5.2。
3.如权利要求1所述的基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法，其特征在于，所述加蒸馏水煎煮后滤液合并后浓缩，得浸膏。
4.如权利要求1所述的基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法，其特征在于，所述基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法提取温度100℃，提取时间60min。
5.如权利要求1所述的基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法，其特征在于，于30℃、pH4.5条件下酶解60min后加蒸馏水煎煮。
6.一种利用权利要求1～5任意一项所述基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法提取的肉桂多酚。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610976198.6A CN106309556A (zh) | 2016-11-07 | 2016-11-07 | 一种基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610976198.6A CN106309556A (zh) | 2016-11-07 | 2016-11-07 | 一种基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106309556A true CN106309556A (zh) | 2017-01-11 |
Family
ID=57816326
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610976198.6A Pending CN106309556A (zh) | 2016-11-07 | 2016-11-07 | 一种基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106309556A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109444288A (zh) * | 2018-12-21 | 2019-03-08 | 武汉市农业科学院 | 一种基于响应面优化的‘凤丹’牡丹多酚提取与检测方法 |
| CN111888290A (zh) * | 2020-08-18 | 2020-11-06 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 一种肉桂树皮提取物及其制备方法和应用 |
| CN113480673A (zh) * | 2021-08-14 | 2021-10-08 | 广西庚源香料有限责任公司 | 一种从肉桂枝叶提油残渣中提取肉桂多糖和肉桂多酚的方法 |
-
2016
- 2016-11-07 CN CN201610976198.6A patent/CN106309556A/zh active Pending
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 平华等: ""肉桂中多酚物质水提工艺的研究"", 《食品科技》 * |
| 费玉婷等: ""纤维素酶法提取山药多糖的工艺研究"", 《农产品加工·学刊》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109444288A (zh) * | 2018-12-21 | 2019-03-08 | 武汉市农业科学院 | 一种基于响应面优化的‘凤丹’牡丹多酚提取与检测方法 |
| CN111888290A (zh) * | 2020-08-18 | 2020-11-06 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 一种肉桂树皮提取物及其制备方法和应用 |
| CN113480673A (zh) * | 2021-08-14 | 2021-10-08 | 广西庚源香料有限责任公司 | 一种从肉桂枝叶提油残渣中提取肉桂多糖和肉桂多酚的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104173401B (zh) | 一种昆仑雪菊原花青素的提取方法及在延缓衰老中的应用 | |
| CN105998109A (zh) | 一种芒果核多酚提取物及其制备方法 | |
| CN106309556A (zh) | 一种基于纤维素酶辅助提取肉桂多酚的方法 | |
| CN107525862B (zh) | 拟草果总黄酮提取物的质量检测方法 | |
| CN102106892B (zh) | 一种山茱萸中药饮片的炮制方法 | |
| CN106324161A (zh) | 治疗糖尿病肾病的中药组合物的质量检测方法 | |
| CN106942719A (zh) | 一种玫瑰安神酵素的制备方法 | |
| CN102426205B (zh) | 血栓心脉宁胶囊的检测方法 | |
| CN102353735B (zh) | 通脉糖眼明胶囊的质量检测方法 | |
| CN101543545B (zh) | 治疗鼻炎的中药制剂及其质量检测方法 | |
| CN104840525A (zh) | 互叶白千层总黄酮的制备及其检测方法 | |
| CN109771579A (zh) | 正交实验法优化桦树茸与玉米须降糖成分提取工艺的方法 | |
| CN108828111A (zh) | 一种核桃仁中膳食多酚的含量测定方法 | |
| CN107490594A (zh) | 一种复方丹参滴丸提取物的氢核磁共振检测方法 | |
| CN106138130B (zh) | 一种芒果核黄酮提取物及其制备方法 | |
| CN106924117B (zh) | 用提取青蒿素后剩余的黄花蒿残渣制备的洗护用品组合物 | |
| CN103520243B (zh) | 一种环磷酸腺苷雪菊油树脂复合软胶囊及其制备方法 | |
| CN115720972A (zh) | 一种强化美白功效的刺梨汁饮品及其制备方法 | |
| CN105055248B (zh) | 远志总皂苷在制备皮肤抗衰老日化产品中的应用及其制备的抗衰老日化产品 | |
| CN112500383A (zh) | 一种提高秦皮乙素转移率的二丁颗粒提取工艺 | |
| CN103091408B (zh) | 柑橘生物类黄酮中橙皮甙含量的测定方法 | |
| CN103543213B (zh) | 一种平消片有效成分含量测定方法 | |
| CN102204945A (zh) | 大蓟炭总黄酮液的提取方法 | |
| CN105646164A (zh) | 一种用于治疗胃癌的新木脂素类化合物 | |
| CN103739657B (zh) | 一种油茶皂苷化合物、其制备方法、应用及其制备的抗肿瘤药物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170111 |