CN102204945A - 大蓟炭总黄酮液的提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒11～13分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用8-10倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取4-6个小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，最后上大孔树脂用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。优点：大蓟炭总黄酮液的中药炮制方法，其炮制品主要以炒炭为主，炒炭后止血作用增强，同时具有较好的抗炎作用。

Description

大蓟炭总黄酮液的提取方法

技术领域

本发明涉及一种中药成分的提取的方法，具体是涉及一种大蓟炭总黄酮液的提取方法。

背景技术

大蓟为菊科蓟属植物 1Cirsium japonicum DC的干燥地上部分或根 , 为多年生宿根草本。中国大部分地区及朝鲜、日本均有分布。大蓟味甘、微苦、性凉 ,传统中医常以其地上部分或根入药 ,用于凉血止血 ,行瘀消肿。大蓟主要用于治疗血热所致的出血证, 如吐血、咯血、衄血、崩漏、尿血和热毒痈肿等症。大蓟化学成分复杂, 药理作用和临床应用也较为广泛。研究表明大蓟中含有三萜、甾体、挥发油、长链炔醇、黄酮和黄酮苷及大蓟菊糖、丁香苷、绿原酸、尿苷等化合物 。为了进一步研究其化学成分, 对大蓟根部分的90%乙醇提取物的醋酸乙酯和正丁醇萃取部分进行了较系统的研究, 从中分离得到10 个化合物, 并通过NMRMSIR等方法鉴定了这些化合物的结构, 分别为柳穿鱼苷 、蒙花苷 、金合欢素 、槲皮素 、香叶木素、田蓟苷 、尿嘧啶 、胸腺嘧啶 、豆甾醇32 2 2 2吡喃葡萄糖苷及胡萝卜苷。现有文献报道从大蓟中分离得到的化合物主要有黄酮及黄酮苷类。

大蓟作为临床主要止血药物之一，使用历史悠久，疗效确切。其炮制品主要以炒炭为主，炒炭后其止血作用增强。大蓟的炮制工艺对其临床疗效及饮片质量具有重要的影响。通过对比大蓟炮制前后的高效液相图谱发现，随着炮制程度的不同，在柳穿鱼叶苷下降的同时，另一种成分柳穿鱼黄素含量在升高，而且成为炒炭后的主要成分，根据大蓟炭的药效学考察发现总黄酮部分为其止血主要成分，同时目前也有文献报道柳穿鱼黄素具有一定的抗炎作用，根据中医基础理论，抗炎和止血具有一定的相关性。顾考虑将此作为一个指标对大蓟炒炭的工艺进行优选。

不同炮制工艺对中药成分的变化是有影响的，进而影响药物性质和质量。

中药炒炭的主要目的是产生或增强药物的止血作用。大量研究表明, 炭药炮制过程中的成分变化和止血作用的物质基础复杂多样，总的来说, 大致与可溶性钙离子、鞣质、止血抗止血成分及炭素等因素有关。多数动植物体内都含有钙元素, 经制炭后,产生的可溶性钙离子能促使血液凝固, 从而缩短血凝时间, 产生止血功效。鞣质本身具有收敛止血作用, 能收缩微血管, 易与蛋白质结合形成大分子物质在血管破损处形成硬块, 阻止血液外流的同时达到止血目的。有些药物制炭后, 无论钙离子或鞣质含量如何变化, 其止血作用都有增无减, 说明炭药止血作用不仅与鞣质及钙离子含量有关, 还可能与原有成分的比例改变, 或者产生了新的成分, 如止血与抗止血成分比例的变化及炭素的产生等有关。另外, 还有相当部分炭药的炮制机理尚不完全明确, 只有通过现代的新方法、新手段开展进一步的深入研究, 才能为炭药的炮制提供更科学合理的理论依据。

发明内容

本发明涉及一种中药成分的提取的方法，具体是涉及一种大蓟炭总黄酮液的提取方法，其炮制品主要以炒炭为主，炒炭后其止血作用增强，同时具有较好的抗炎作用。

本发明提供的的技术方案如下：

大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒11～13分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用8-10倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取4-6个小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，最后上大孔树脂AB-8用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

优选方案1：

大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒13分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用10倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取6小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，上大孔树脂AB-8用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

优选方案2：

大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒11分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用8倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取4小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，上大孔树脂AB-8用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

优选方案3：

大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒12分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用9倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取5小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，上大孔树脂AB-8用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

本发明优点：由于采用本发明，将大蓟切成大小适宜的中药饮片，在高温条件下的炮制法，极大的促进了大蓟内部成分的变化，在高温高湿环境下炮制，可以得到含有新的柳穿鱼黄素物质的大蓟饮片。使用本发明的中药炮制法处理后的大蓟，经过检测可以发现有柳穿鱼黄素的存在。而柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮在以往的文献涉及的大蓟成分中从来没有被报过。这证明本发明的中药炮制方法确实对枳壳的内部成分的变化有决定性的作用。

附图说明

图1大蓟炮制前后HPLC图谱；

图2柳穿鱼黄素的分子结构图。

具体实施例

提取过程中需用到树脂的筛选情况：

1、静态吸附行为考察分别称取已处理好的4种型号的树脂:AB - 8, RAR - 9,D101及HPD450型大孔吸附树脂各2. 00 g(湿重)于100 ml具塞三角瓶中,加入样品溶液30 ml, 20℃下振摇2 h,静置24 h过滤,吸取过滤后样品液按2. 4法测定吸附平衡后溶液中总黄酮浓度。按下式计算静态饱和吸附量及吸附率。结果见表1。

静态吸附容量E = (Po - Pa)V a /M (单位:mg/g)   吸附率s = ( Po - Pa) /Po

式中: Po - - - 样品溶液中总黄酮的初始浓度:mg/ml; Pa - - 吸附平衡后溶液中总黄酮浓度:mg/ml; Va:样品液体积(ml) M:树脂量( g)

2、静态洗脱行为考察取上述经静态饱和吸附总黄酮后滤出的树脂,取20 ml纯净水洗20 min后用滤纸吸干表面水分,精密加入95%乙醇30 ml,不时振摇,持续5 h,测定洗脱液的浓度,按下式计算各型号树脂的解吸率。结果见表1。

由上述结果表明, 4种树脂中AB-8具有较好的静态吸附率及解吸率,均高于其他3种树脂,而HPD450具有较好的解吸率,但其吸附率太低,故在本次实验中选择AB-8型树脂来纯化和富集大蓟中黄酮类成分。

综合以上情况，本文选取了柳穿鱼黄素的含量、小鼠凝血时间、炭药吸附力及外观性状的综合评价对炒炭进行了炮制工艺的优选。

实施例1、大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒13分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用10倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取6小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，上大孔树脂AB-8用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

实施例2、大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒11分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用8倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取4小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，上大孔树脂AB-8用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

实施例3、大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒12分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用9倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取5小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，上大孔树脂AB-8用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

实施例4、大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒9分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用7倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取3小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，上大孔树脂HPD450用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

实施例5、大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒15分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用12倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取7小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，上大孔树脂RAR-9用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

实施例6、大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒16分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用6倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取2小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，上大孔树脂D101用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

实施例7、大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒8分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用13倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取8小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，上大孔树脂D101用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

实施例8、大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒13分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用10倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取6小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，上大孔树脂HPD450用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

实施例9、大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒11分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用8倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取4小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，上大孔树脂RAR-9用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

实施例10、大蓟炭总黄酮液的提取方法，取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒12分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用9倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取5小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，上大孔树脂D101用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

实施例效果如下：

效果实施例验证实验：本发明通过对大蓟炒炭后的主要成分的研究，根据大蓟炭的药效学考察发现总黄酮部分为其止血主要成分，同时目前也有文献报道柳穿鱼黄素具有一定的抗炎作用，根据中医基础理论，抗炎和止血具有一定的相关性。顾考虑将此作为一个指标对大蓟炒炭的工艺进行优选。同时炒炭的药物要求存性，目前关于炒炭存性的评判还没有统一的标准，有文献采用色泽度或吸附力表征炒炭存性；此外现代药理研究炭药止血多采用凝血时间来评判。综合以上情况，故本发明选取了柳穿鱼黄素的含量、小鼠凝血时间、炭药吸附力及外观性状的综合评价对炒炭进行了炮制工艺的优选。

通过对柳穿鱼黄素的含量、小鼠凝血时间、炭药吸附力及外观性状的综合评价来验证由各组实施例中的大蓟碳的工艺效果。

1.1 实验材料与仪器

1.1.1仪器

高效液相色谱仪(Dionex UltiMate3000)，PDA-3000二极管阵列紫外检测器，Chrome—leon工作站，KQ3200超声波清洗器(杭州中拓仪器有限公司)，METFLER AE240型十万分之一电子天平(瑞士METTLER)Sartorius BS214-D天平（万分之一）Mettler AE240天平（十万分之一）KQ3200超声波清洗器（昆山超声仪器厂）FW100高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）CFP-110X50型报喜龙电炒锅（报喜龙电器厂）TN408LC型红外测温枪（上海仪迷杰光电技术有限公司）GZX-9146MBE型数显鼓风干燥箱（上海博讯实业有限公司）HH-2数显恒温水浴锅（国华电器有限公司）

1.1.2试剂

甲醇（色谱纯）（山东禹王试剂有限公司）乙腈（TEDIA公司）其余试剂均为分析纯。柳穿鱼黄素对照品（pectolinarigenin）：自制，云南白药:云南白药集团股份有限公司(批号:20070705),

1.1.3药材

大蓟药材经我院中药鉴定教研室褚小兰教授鉴定为菊科植物蓟的干燥地上部分。

1.1.4 动物

小鼠(清洁级)，雌雄各半，购自江西中医学院实验动物中心。许可证号:SCXK(赣)2005-0001。

1.2.3 指标测定

1.2.3.1柳穿鱼黄素含量测定

按质量标准【含量测定】项下的方法测定。并且各组实施例的大蓟炒炭后柳穿鱼黄素含量的测定数据，结果见下表1所述。

其中：本发明提供的柳穿鱼黄素对照品标准如下：

柳穿鱼黄素 Pectolinarigenin

本品为菊科植物蓟(Cirsium  japonicum DC．)的干燥地上部分经炒炭后提取分离得到的一种黄色结晶。

【制法】大蓟炭（粗粉），75%乙醇回流提取,合并滤液,减压浓缩，得总浸膏。取浸膏悬浮于蒸馏水中，依次用石油醚、氯仿分别萃取，回收溶剂后得氯仿部分。经硅胶柱层析，氯仿：甲醇梯度洗脱，经Sephadex-LH20柱层析分离，丙酮重结晶纯化，得到柳穿鱼黄素单体。

【化学名】（5，7-Dihydroxy-6，4/-Dimethoxy Flavone）

【英文名】Pectolinarigenin

【分子式】C17H14O6

【分子量】314.29

【熔  点】211－213℃

【物理性状】黄色结晶（丙酮），UV（MeOH）λmax:336,273 nm;ESI-MS m/z:313 [M－H]－;1H-NMR(DMSO-d6 400 MHz) ，13C-NMR(DMSO-d6 100 MHz )数据与文献[6]报道的基本一致, 故确定该化合物为柳穿鱼黄素。经HPLC分析纯度达到98 ％以上，符合含量测定要求。

【纯度】

HPLC检查大于98 ％，色谱条件同含量测定。

3.1.3 讨论与小结

大蓟是常用的止血药，炒炭后止血作用显著增强。大蓟炭药理作用显著改变的物质基础是其化学成分的变化，本章节首先从对比大蓟炒炭前后的图谱的变化着手，发现大蓟中柳穿鱼叶苷含量很高，大蓟炭中几乎检测不到，但大蓟炭中有新的成分产生。

本发明针对相关实验图谱变化对大蓟炭中的新增成分进行了实验研究。对主要新增成分进行了提取分离和结构鉴定，此成分为生品中主要止血成分柳穿鱼叶苷的苷元-柳穿鱼黄素，并为此成分制定了质量标准，此成分的提取分离为开展大蓟炭炮制机理研究和提高其质量控制水平提供了物质基础。

1.2.3.2小鼠凝血实验

1.2.3.2.1 药液的制备

取各组实施例制得的大蓟炭各炮制样品粉末(100目)，分别加入0.4%的CMC-Na溶液研磨，制成混悬液实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、实施例5、实施例6、实施例7、实施例8、实施例9、实施例10待用时摇匀。

1.2.3.2.2凝血时间的测定

取体重18～22g小鼠随机分成10组，雄各半，每组10只，禁食(不禁水)12小时后，按3.6g/kg剂量灌胃，各样品混悬液以0.3ml/10g剂量灌胃，对照组給予同体积的0.4%的CMC-Na溶液，连续灌胃给药三天，在末次给药1小时后以毛细管法测定小鼠凝血时间。以玻璃毛细管插入眼内毗球后静脉丛取血，按毛细管法（自血液流入毛细管内开始计时）待血液注满毛细管，取出平放于桌面上，每隔30s折断毛细管约0.5cm，并缓慢向左右拉开，观察折断处是否有血凝丝出现，直至血凝丝出现为止，所需时间即为凝血时间，结果见下 表1所述。

1.2.3.3炭药吸附力测定

炒炭存性,自古以来一直是炮制炭药时的重要指标。何为存性，一直是炮制研究中的一个难题。现在大蓟炒至药材外黑褐色,内棕褐，有焦香味。对于炒炭要求存性是个很模糊的概念，有人用炭药止血的药理作用或鞣质含量，或薄层鉴别作为判别标准，本文参考相关炒炭文献借鉴了一种用炭吸附色素计算吸附力作为控制炒炭存性质量标准的定量方法。

其中上文所述中的相关炒炭文献引自 许腊英，毛维伦，杨瑾等. 乌梅炭吸附力的测定比较[J]. 中国医院药学杂志2004，24（5）：281.

1.2.3.3.1测定原理

炭对色素有一定的吸附力。炭药对色素的吸附力应与炭药炮制时所产生的炭化量成正比，试样与标准的色素溶液混合作用后,过滤，用分光光度法测出剩余色素量，即可求出被吸附色素的量，从而计算得到吸附力。中药炭药的炭化量由受热程度决定，同一品种炭药，炮制火候不同，炭化量就不同，对色素的吸附力也不同。通过测定炒炭存性对照炭药对色素的吸附力就可制定出控制存性的量化指标。该原理在中华人民共和国国家标准，木质活性炭检验方法上就是用亚甲基蓝脱色力来作为检验标准的。

其中：木质活性炭的检验方法引自中华人民共和国国家标准[s].GB／T12496.2-90.523．

1.2.3.3.2 实验方法和结果：

1.2.3.3.2.1 柠檬酸溶液的配制

取柠檬酸20.0g，加纯水溶解成1000mL，摇匀，NaOH调pH为6。

1.2.3.3.2.2柠檬黄标准溶液的配制

精密称取干燥至恒重的柠檬黄0.0502g，于500mL量瓶中，加柠檬酸溶液溶解并稀释至刻度，即得。

1.2.3.3.2.3 测定波长的选择

取柠檬黄标准溶液，照《中国药典》2005版，以柠檬酸溶液为空白，在190～700nm波长范围内扫描，结果表明428nm处有最大吸收。

1.2.3.3.2.4 样品吸附量测定

分别精密称取各组实施例中的大蓟炭粉末3份，每份约0.1g，精密称重，分别置50mL量瓶中，其中每一组实施例中有一份加柠檬酸溶液，振摇15min，过滤，滤液作为空白溶液，另二份分别加入5.0mL柠檬黄标准溶液，用柠檬酸溶液稀释至刻度，振摇15min过滤。滤液作为供试品溶液，于428nm处测定供试溶液的吸收度。计算柠檬黄量，由已知准确加入的柠檬黄的量减去测得量则为大蓟炭吸附柠檬黄的量，同法测得其它样品大蓟炭的吸附量，结果见下表1所述。

根据公式：吸附力(mg·g)=吸附量／样品量，计算各样品炭的吸附力。

1.2.3.4 饮片外观评分

将各组实施例制得的大蓟炒炭饮片进行外观评分，结果见下表1所述。

根据外观性状,请有经验的药工来评价,主要侧重评价炒炭内外颜色，片形完整度，分为五等。

试验结论：

从上述表格中的数据可以得知：由实施例1、实施例2、实施例3提取得到的大蓟炭总黄酮液的各项指标明显优于其他各组实施例

炒炭存性是炮制炭药时的重要指标，本文参考相关炒炭文献借鉴了一种用炭吸附色素计算吸附力作为控制炒炭存性质量标准的定量方法。结果显示：炒炭未炭化及过炭化样品的吸附力均不及炒炭存性的样品，由此可见吸附力可以作为炒炭的有力证据之一。而且该方法简便易行，能够做为炒炭存性的判定指标。

Claims (2)

1.大蓟炭总黄酮液的提取方法，其特征在于：取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒11～13分钟后出锅，喷水灭尽火，放凉，晾干；得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的中药饮片。

2.大蓟炭总黄酮液的提取方法，其特征在于：取大蓟生品，切成段长为1.5-2cm的大蓟饮片，置于恒温炒药机中，表盘温度定为580℃，炒11～13分钟后出锅，喷水灭尽火星，放凉，晾干；取炮制好的大蓟炭，用8-10倍量的石油醚提取6小时，得到药渣用10倍量的70%乙醇提取4-6个小时，得到乙醇提取液后，回收乙醇，水分散溶解得到药液，再用等量的石油醚萃取，得到水溶液，最后上大孔树脂AB-8用80%乙醇溶液洗脱，Hcl-Mg检测，得到含有柳穿鱼黄素即5,7-二羟基-6，4′-二甲氧基黄酮的大蓟炭总黄酮提取液。

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