CN103070956B

CN103070956B - 治疗溃疡性结肠炎的生物黏附结肠定位微片

Info

Publication number: CN103070956B
Application number: CN201310065705.7A
Authority: CN
Inventors: 段晓颖; 平佳宜; 王卫红; 王小晓; 李学林; 张辉; 陈天朝
Original assignee: Henan University of Traditional Chinese Medicine HUTCM
Current assignee: Henan University of Traditional Chinese Medicine HUTCM
Priority date: 2013-03-02
Filing date: 2013-03-02
Publication date: 2014-09-17
Anticipated expiration: 2033-03-02
Also published as: CN103070956A

Abstract

本发明涉及治疗溃疡性结肠炎的生物黏附结肠定位微片，可有效解决因首过效应使药物代谢失活，病人顺应性差的问题，其解决的技术方案是，该微片是由以下重量计的：苦参14-17g、乌梅9-11g、椿皮11-13g、吴茱萸2.35-2.75g、卡波姆934P3-4g、羟丙基纤维素9-11g、β-环糊精0.7-0.84g，聚丙烯酸树脂S1001.44-1.64g、邻苯二甲酸二乙酯0.35-0.4g和硬脂酸镁0.11-0.13g制成，本发明制备工艺简单，耗时短，质量标准，容易控制，使用效果好，是治疗溃疡性结肠炎药物上的创新。

Description

治疗溃疡性结肠炎的生物黏附结肠定位微片

技术领域

本发明涉及医药，特别是一种治疗溃疡性结肠炎的生物黏附结肠定位微片。

背景技术

溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis，UC)又称慢性非特异性溃疡性结肠炎，是一种原因未明、与自身免疫有关的炎症性疾病，病变主要发生在大肠黏膜及黏膜下层，以溃疡糜烂为主，多累及远端结肠，亦可遍及全部结肠。以长期反复的腹痛、腹泻及迁延难愈的脓血黏液便为特征。本病治愈难度大，愈后容易复发，且与大肠癌有一定的关系．近年来其发病率逐年上升，治疗相当棘手。其发病机制并不十分明确，目前认为可能与免疫、环境、感染、遗传、精神心理等五大因素有关。

溃疡性结肠炎的治疗主要采取口服剂型与灌肠法结合或直肠栓剂给药等，普通片剂或胶囊口服后，在胃内崩解，蛋白质、多肽类等药物大多数被胃酸降解，而普通肠溶制剂药物主要在小肠内释放，大部分药物经小肠吸收入血，因首过效应使药物代谢失活，会使到达结肠段的药物浓度降低，治疗效果不理想。灌肠法或直肠栓剂给药个体差异较大，药物在结肠内分布不均匀，仅限于直肠和乙状结肠，达不到横结肠和升结肠等位置，且使用不便，医务人员工作量大，病人顺应性差。因此，研制出疗效确切的治疗溃疡性结肠炎的药物，能够在结肠段定位释药的新型给药系统具有重要的临床治疗意义。

现有以肠溶型和渗透型丙烯酸树脂为包衣材料制备了pH依赖型缓释型美沙拉秦结肠定位小丸。实验结果表明该释药系统优于单独的肠溶或缓释制剂，可定位于结肠，提高肠道病变部位药物浓度，避免美沙拉秦在小肠吸收后产生头痛、肾毒性等副作用。开发压力依赖型结肠定位释药系统的基础，制备的胶囊，内装PEG与主药的混合物，胶囊壳为内包一定厚度乙基纤维素(EC)的明胶胶囊。当制剂进入体内后，PEG在体内溶化，胶囊壳破裂形成EC膜，整个制剂就像一个气球在胃肠道中转运。到达结肠后，由于所受到的压力增大，EC膜破裂，制剂开始释放药物。还有以传统中药复方愈肠宁为模型，通过筛选成膜剂、致孔剂、增塑剂等种类与用量，制备了pH-时控型愈肠宁结肠靶向片(PT-YT-CSD)。体外溶出试验表明，PT-YT-CSD中苦参碱和氧化苦参碱在模拟胃液中不溶解，在模拟小肠液中4h后累计溶出量小于10％，在模拟结肠液lh后的溶出量分别为75.7％、76.8％，可实现药物的结肠定位释放。那么能否根据以上情况研制出用于治疗溃疡性结肠炎的结肠定位释放药物，是人们关心的技术问题。

发明内容

针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种治疗溃疡性结肠炎的生物黏附结肠定位微片，可有效解决因首过效应使药物代谢失活，治疗效果不理想，使用不便，医务人员工作量大，病人顺应性差的问题。

本发明解决的技术方案是，该微片是由以下重量计的：苦参14-17g、乌梅9-11g、椿皮11-13g、吴茱萸2.35-2.75g、卡波姆934P 3-4g、羟丙基纤维素9-11g、β-环糊精0.7-0.84g，聚丙烯酸树脂S100 1.44-1.64g、邻苯二甲酸二乙酯0.35-0.4g和硬脂酸镁0.11-0.13g制成，其中，将苦参、吴茱萸混合在一起，加苦参、吴茱萸8倍量的质量浓度为60%的乙醇，回流提取3次，每次1.5h，滤过，合并滤液，得醇提液，备用；乌梅、椿皮加水煎煮3次，每次加乌梅、椿皮6倍重量的水，煎煮1h，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.12，再加入质量浓度为95%的乙醇使含醇量达到60%，静置24h，离心，滤过，得滤液，滤液与上述醇提液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.10，加入β-环糊精，喷雾干燥，进风温度为140℃，泵液速度为15%，得药粉，药粉与卡波姆、羟丙基纤维素混合，用质量浓度为95%的乙醇制软材，过20目筛制粒，60℃鼓风干燥，加入硬脂酸镁，压制成直径为2-3mm的素片，以邻苯二甲酸二乙酯、聚丙烯酸树脂S100的乙醇溶液作为包衣材料，进行滚转包衣，即得。

本发明制备工艺简单，耗时短，质量标准，容易控制，使用效果好，是治疗溃疡性结肠炎药物上的创新。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。

实施例1

该微片是由以下重量计的：苦参14g、乌梅9g、椿皮11g、吴茱萸2.35g、卡波姆934P 3g、羟丙基纤维素9g、β-环糊精0.7g，聚丙烯酸树脂S100 1.44g、邻苯二甲酸二乙酯0.35g和硬脂酸镁0.11g制成，其中，将苦参、吴茱萸混合在一起，加苦参、吴茱萸8倍量的质量浓度为60%的乙醇，回流提取3次，每次1.5h，滤过，合并滤液，得醇提液，备用；乌梅、椿皮加水煎煮3次，每次加乌梅、椿皮6倍重量的水，煎煮1h，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.12，再加入质量浓度为95%的乙醇使含醇量达到60%，静置24h，离心，滤过，得滤液，滤液与上述醇提液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.10，加入β-环糊精，喷雾干燥，得药粉，药粉与卡波姆、羟丙基纤维素混合，用质量浓度为95%的乙醇制软材，过20目筛制粒，60℃鼓风干燥，加入硬脂酸镁，压制成直径为2-3mm的素片，以邻苯二甲酸二乙酯、聚丙烯酸树脂S100的乙醇溶液作为包衣材料，进行滚转包衣，每片重24mg，即得。

实施例2

该微片是由以下重量计的：苦参15.33 g、乌梅10.22 g、椿皮12.77g、吴茱萸2.55g、卡波姆934P 3.58g、羟丙基纤维素10.74g、β-环糊精0.77g，聚丙烯酸树脂S100 1.54g、邻苯二甲酸二乙酯0.38g和硬脂酸镁0.12g制成，其中，将苦参、吴茱萸混合在一起，加苦参、吴茱萸8倍量的质量浓度为60%的乙醇，回流提取3次，每次1.5h，滤过，合并滤液，得醇提液，备用；乌梅、椿皮加水煎煮3次，每次加乌梅、椿皮6倍重量的水，煎煮1h，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.12，再加入质量浓度为95%的乙醇使含醇量达到60%，静置24h，离心，滤过，得滤液，滤液与上述醇提液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.10，加入β-环糊精，喷雾干燥，进风温度为140℃，泵液速度为15%，得药粉，药粉与卡波姆、羟丙基纤维素混合，用质量浓度为95%的乙醇制软材，过20目筛制粒，60℃鼓风干燥，加入硬脂酸镁，压制成直径为2-3mm的素片，以邻苯二甲酸二乙酯、聚丙烯酸树脂S100的乙醇溶液作为包衣材料，进行滚转包衣，每片重24mg，即得。

实施例3

该微片是由以下重量计的：苦参17g、乌梅11g、椿皮13g、吴茱萸2.75g、卡波姆934P 4g、羟丙基纤维素11g、β-环糊精0.84g，聚丙烯酸树脂S100 1.64g、邻苯二甲酸二乙酯0.4g和硬脂酸镁0.13g制成，其中，将苦参、吴茱萸混合在一起，加苦参、吴茱萸8倍量的质量浓度为60%的乙醇，回流提取3次，每次1.5h，滤过，合并滤液，得醇提液，备用；乌梅、椿皮加水煎煮3次，每次加乌梅、椿皮6倍重量的水，煎煮1h，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.12，再加入质量浓度为95%的乙醇使含醇量达到60%，静置24h，离心，滤过，得滤液，滤液与上述醇提液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.10，加入β-环糊精，喷雾干燥，得药粉，药粉与卡波姆、羟丙基纤维素混合，用质量浓度为95%的乙醇制软材，过20目筛制粒，60℃鼓风干燥，加入硬脂酸镁，压制成直径为2-3mm的素片，以邻苯二甲酸二乙酯、聚丙烯酸树脂S100的乙醇溶液作为包衣材料，进行滚转包衣，每片重24mg，即得。

本发明是基于生物黏附技术的结肠定位微片，采用具有较强生物黏附作用的材料作为辅料，利用其与结肠黏膜上的黏蛋白的缠结及产生的化学键，形成紧密的黏附作用。微片口服后能够较好地分散并黏附在结肠内，不易移动，延长在特定部位的停留时间，维持局部较高的药物浓度，从而大大提高疗效，缩短疗程，减少用药次数等优点。

本发明微片直径为2～3mm的小药片，它是以临床经验方，结合现代科学研究成果，根据组方中的有效成分，经提取制成的新制剂，以较强的生物黏附材料制成的含药片芯，然后选择PH溶解临界值较高的肠溶衣材料EudragitS100进行包衣。该剂型是一种新型的多单元(multiple-unit dosage．forms，MUDF)口服结肠定位给药系统（OCDDS）的缓控释制剂，与微丸相比同属剂量分散型制剂。由于一个剂量的药物分散在多个相互独立的微小单元中，口服后与胃肠道黏膜的接触面积增大，个别小单元在制备工艺上的缺陷不会对整体制剂的释药行为产生严重的影响，从而能提高药物的生物利用度，还可以减少或消除某些药物对胃肠道的刺激；与普通片剂相比，其片重和尺寸都精确可控，生产重现性好，每个微片单元的尺寸相等、重量相同、药物的含量相同。因此，微片兼备微丸体内释药具有较好的重现性及疗效和片剂大小均匀，表面光滑、美观，制备工艺简单，耗时短，质量标准容易控制的双重优点。

一、本发明定位微片药效学研究资料：

1.本发明定位微片治疗实验性溃疡性结肠炎大鼠的实验

采用2，4-二硝基氯苯免疫加乙酸局部灌肠法(即复合法)复制大鼠溃疡性结肠炎模型，并随机分为正常对照组、模型对照组、空白微片组、柳氮磺吡啶阳性对照组（0.3 g/kg）、本发明定位微片低、中、高剂量组（0.24g/kg、0.48 g/kg、 0.96g/kg，含原药分别为0.4 g/kg、0.8 g/kg、 1.6g/kg）。经药物治疗后观察各组大鼠饮食、活动、大便等一般情况，形态学方法观察结肠损伤大体形态并记录组织学形态评分结果，生化法测定结肠黏膜组织和血清SOD的活性及MDA的含量，酶免法测定血清TNF-α和IL-8的水平。模型组SOD活性、MDA含量、血清TNF-α和IL-8的水平与正常组比较均有显著性差异（p＜0.01）。本发明定位微片中、高剂量组与模型组比较能显著降低MDA的含量及血清TNF-α和IL-8水平（p＜0.01），而提高SOD的活性（p＜0.01）。组织切片显微观察显示：模型组溃疡处结肠粘膜糜烂、溃疡，粘膜及粘膜下层有大量炎性细胞浸润，腺体破坏，溃疡面大、数量多；阳性药对照组大鼠结肠粘膜部分见炎症充血、水肿，结肠粘膜上皮明显增生，肠腺增生明显粘膜下肌层增厚，溃疡少；低剂量组病理改变与模型组基本相同，中、高剂量组大鼠结肠粘膜有炎症充血、水肿，炎性细胞浸润，肠腺增生，溃疡少，尚可见肠粘膜形成瘢痕组织。由此可见本发明定位微片对溃疡的修复有明显的促进作用。

2. 抗炎实验

(1) 抑制毛细血管通透性试验：采用小鼠耳二甲苯致炎法，通过鼠耳肿胀度的测量,观察药物对急性炎症早期毛细血管通透性的抑制作用。取小鼠随机分为模型对照组，本发明定位微片低、中、高剂量组（0.3g/kg、0.6 g/kg、 1.2g/kg，含原药分别为0.5 g/kg、1.0g/kg、 2.0g/kg）。模型对照组给予双蒸水，灌胃给药每天一次，连续3d。末次给药后1h，于各小鼠右耳耳廓正反面各滴二甲苯0.05ml，1h后颈椎脱位法处死小鼠，在左、右两耳耳廓相同部位用4.5mm打孔器取下耳片并称重，将每鼠右耳片重量减去左耳片重量即为肿胀度。观察本发明定位微片抑制二甲苯诱发的小鼠耳廓炎性肿胀程度，并与阳性对照组进行比较。结果显示本发明定位微片可明显抑制二甲苯诱发的小鼠耳廓炎性肿胀程度，各组肿胀度与模型对照组比，p＜0.05，表明本发明可抑制血管扩张及急性炎症渗出。

(2) 抑制白细胞游走试验：采用大鼠羧甲基纤维素囊袋实验法，通过对囊袋渗出液中白细胞的计数，观察药物对炎症中期致炎部位白细胞游走的抑制作用。取健康大鼠，随机分为模型对照组，本发明定位微片低、中、高剂量组（0.24g/kg、0.48 g/kg、 0.96g/kg，含原药分别为0.4 g/kg、0.8 g/kg、 1.6g/kg）。模型对照组给予双蒸水，灌胃给药，每天一次，连续3d。末次给药前1 d，将各组大鼠背部脱毛，无菌操作下向颈背部注入空气5ml，形成圆形气囊，末次给药1h后向囊内注入已高压灭菌的1.5%羧甲基纤维素生理盐水溶液各5ml，于3h及7.5h吸取囊内的羧甲基纤维素液，在采集囊液时宜将大鼠前后左右摇动或轻轻按压囊的四周以使囊内液充分混合均匀。用血细胞计数仪计数囊内白细胞数。结果显示本发明定位微片各用药组羧甲基纤维素囊内白细胞数明显低于模型对照组，p＜0.01，表明本发明定位微片可抑制炎性细胞的游走和渗出。

(3)抑制肉芽肿形成试验：采用大鼠棉球植入法，通过对棉球肉芽肿的测量，观察药物对慢性炎症晚期炎性肉芽形成的抑制作用。取健康大鼠，随机分为模型对照组，本发明定位微片低、中、高剂量组（0.24g/kg、0.48 g/kg、 0.96g/kg，含原药分别为0.4 g/kg、0.8 g/kg、 1.6g/kg）。取脱脂棉，称重，团成球状，放入高压灭菌锅内灭菌1h，90℃烘箱干燥3h。干燥后再次称重并记录重量，放入干燥器内备用。依据每个大鼠的体重，腹腔注射水合氯醛（10%，0.3ml/100g）麻醉。向每个棉球上滴加0.1ml刚配制的青霉素注射液（80万单位配成10ml），在无菌操作下埋入后大腿内侧腋窝皮下。每天灌胃1次，连续灌胃7天，最后一次给药1h后，处死动物，剥离棉球肉芽肿。取出后60℃烘干24h，称重，计算肉芽肿的重量。结果显示本发明定位微片各用药组棉球肉芽肿重量低于模型对照组，p＜0.05，表明本发明可抑制炎性肉芽肿的形成。

3.止泻实验

取健康小鼠，随机分为模型对照组，本发明定位微片低、中、高剂量组（0.3g/kg、0.6 g/kg、 1.2g/kg，含原药分别为0.5 g/kg、1.0g/kg、 2.0g/kg）。实验前禁食不禁水8小时，灌胃给药，模型对照组给予双蒸水，40min后,以蓖麻油0.2ml/10g灌胃，单只分笼，笼底垫干净滤纸，观察其后5h内小鼠的排便情况。以腹泻率（即一组动物中排稀便的动物数与该动物总数的百分比）、稀便率（即每只动物所排的稀便数与总便数比）、稀便级（以稀便污染滤纸形污迹面积的大小定级，分为4级，1:污染直径＜1cm；2: 污染直径1-1.9cm；3：污染直径2-3cm；4：污染直径＞3cm。逐个统计每一堆稀便的级数，然后将该鼠所有稀便数相加除以稀便次数得稀便的平均级数。）及腹泻指数（即稀便率与稀便级的乘积）为指标，观察受试药物的止泻作用。结果显示本发明定位微片高、中剂量组稀便率、稀便级及腹泻指数显著低于模型对照组( p＜0.01 )，表明本发明具有明显的止泻作用。

综合以上实验研究，可见本发明定位微片用于溃疡性结肠炎可起到抗炎、止泻、促进溃疡面愈合、减轻结肠黏膜炎症症状的作用。

本发明制备工艺简单，耗时短，质量标准，容易控制，使用效果好，是治疗溃疡性结肠炎药物上的创新，具有实际的临床意义。

Claims

1.一种治疗溃疡性结肠炎的生物黏附结肠定位微片，其特征在于，该微片是由以下重量计的：苦参14-17g、乌梅9-11g、椿皮11-13g、吴茱萸2.35-2.75g、卡波姆934P 3-4g、羟丙基纤维素9-11g、β-环糊精0.7-0.84g、聚丙烯酸树脂S100 1.44-1.64g、邻苯二甲酸二乙酯0.35-0.4g和硬脂酸镁0.11-0.13g制成，其中，将苦参、吴茱萸混合在一起，加苦参、吴茱萸8倍量的质量浓度为60%的乙醇，回流提取3次，每次1.5h，滤过，合并滤液，得醇提液，备用；乌梅、椿皮加水煎煮3次，每次加乌梅、椿皮6倍重量的水，煎煮1h，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.12，再加入质量浓度为95%的乙醇使含醇量达到60%，静置24h，离心，滤过，得滤液，滤液与上述醇提液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.10，加入β-环糊精，喷雾干燥，得药粉，药粉与卡波姆934P、羟丙基纤维素混合，用质量浓度为95%的乙醇制软材，过20目筛制粒，60℃鼓风干燥，加入硬脂酸镁，压制成直径为2-3mm的素片，以邻苯二甲酸二乙酯、聚丙烯酸树脂S100的乙醇溶液作为包衣材料，进行滚转包衣，即得。

2. 根据权利要求1所述的治疗溃疡性结肠炎的生物黏附结肠定位微片，其特征在于，该微片是由以下重量计的：苦参14g、乌梅9g、椿皮11g、吴茱萸2.35g、卡波姆934P 3g、羟丙基纤维素9g、β-环糊精0.7g、聚丙烯酸树脂S100 1.44g、邻苯二甲酸二乙酯0.35g和硬脂酸镁0.11g制成，其中，将苦参、吴茱萸混合在一起，加苦参、吴茱萸8倍量的质量浓度为60%的乙醇，回流提取3次，每次1.5h，滤过，合并滤液，得醇提液，备用；乌梅、椿皮加水煎煮3次，每次加乌梅、椿皮6倍重量的水，煎煮1h，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.12，再加入质量浓度为95%的乙醇使含醇量达到60%，静置24h，离心，滤过，得滤液，滤液与上述醇提液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.10，加入β-环糊精，喷雾干燥，得药粉，药粉与卡波姆934P、羟丙基纤维素混合，用质量浓度为95%的乙醇制软材，过20目筛制粒，60℃鼓风干燥，加入硬脂酸镁，压制成直径为2-3mm的素片，以邻苯二甲酸二乙酯、聚丙烯酸树脂S100的乙醇溶液作为包衣材料，进行滚转包衣，每片重24mg，即得。

3.根据权利要求1所述的治疗溃疡性结肠炎的生物黏附结肠定位微片，其特征在于，该微片是由以下重量计的：苦参15.33 g、乌梅10.22 g、椿皮12.77g、吴茱萸2.55g、卡波姆934P 3.58g、羟丙基纤维素10.74g、β-环糊精0.77g、聚丙烯酸树脂S100 1.54g、邻苯二甲酸二乙酯0.38g和硬脂酸镁0.12g制成，其中，将苦参、吴茱萸混合在一起，加苦参、吴茱萸8倍量的质量浓度为60%的乙醇，回流提取3次，每次1.5h，滤过，合并滤液，得醇提液，备用；乌梅、椿皮加水煎煮3次，每次加乌梅、椿皮6倍重量的水，煎煮1h，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.12，再加入质量浓度为95%的乙醇使含醇量达到60%，静置24h，离心，滤过，得滤液，滤液与上述醇提液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.10，加入β-环糊精，喷雾干燥，得药粉，药粉与卡波姆934P、羟丙基纤维素混合，用质量浓度为95%的乙醇制软材，过20目筛制粒，60℃鼓风干燥，加入硬脂酸镁，压制成直径为2-3mm的素片，以邻苯二甲酸二乙酯、聚丙烯酸树脂S100的乙醇溶液作为包衣材料，进行滚转包衣，每片重24mg，即得。

4. 根据权利要求1所述的治疗溃疡性结肠炎的生物黏附结肠定位微片，其特征在于，该微片是由以下重量计的：苦参17g、乌梅11g、椿皮13g、吴茱萸2.75g、卡波姆934P 4g、羟丙基纤维素11g、β-环糊精0.84g、聚丙烯酸树脂S100 1.64g、邻苯二甲酸二乙酯0.4g和硬脂酸镁0.13g制成，其中，将苦参、吴茱萸混合在一起，加苦参、吴茱萸8倍量的质量浓度为60%的乙醇，回流提取3次，每次1.5h，滤过，合并滤液，得醇提液，备用；乌梅、椿皮加水煎煮3次，每次加乌梅、椿皮6倍重量的水，煎煮1h，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.12，再加入质量浓度为95%的乙醇使含醇量达到60%，静置24h，离心，滤过，得滤液，滤液与上述醇提液合并，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.10，加入β-环糊精，喷雾干燥，得药粉，药粉与卡波姆934P、羟丙基纤维素混合，用质量浓度为95%的乙醇制软材，过20目筛制粒，60℃鼓风干燥，加入硬脂酸镁，压制成直径为2-3mm的素片，以邻苯二甲酸二乙酯、聚丙烯酸树脂S100的乙醇溶液作为包衣材料，进行滚转包衣，每片重24mg，即得。