CN102793741A

CN102793741A - 一种牛大力提取物及其应用

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Publication number: CN102793741A
Application number: CN2012103235137A
Authority: CN
Inventors: 纪明慧; 陈光英; 王呈文; 韩长日; 舒火明
Original assignee: Hainan Normal University
Current assignee: Hainan Normal University
Priority date: 2012-09-05
Filing date: 2012-09-05
Publication date: 2012-11-28

Abstract

本发明涉及一种牛大力提取物及其应用，该提取物是将牛大力粉碎后置于蒸馏水中，100℃下加热提取，过滤；滤渣再重复用蒸馏水提取，合并滤液并减压浓缩至浸膏，经真空冷冻干燥至恒重即得。本发明工艺简单，所得提取物为纯天然的植物提取物，不仅具有优良的抗疲劳作用，而且满足了人们在安全性、绿色环保方面的诉求，可有效用于制备抗疲劳药物或保健品，为牛大力的开发利用提供了参考。

Description

一种牛大力提取物及其应用

技术领域

本发明属医药技术领域，涉及一种牛大力提取物及其应用。

背景技术

疲劳是人体一个极其复杂的生理状态，一般指身体与精神状态的下降而导致工作能力及工作效率的衰退。主要表现为身心疲惫且困倦，工作能动力与注意力下降。生理疲劳指由于肌肉持续保持某种状态或不停的收缩和舒张而引起的运行能力的下降。随着社会节奏的加快，社会竞争日益激烈，常使人们的工作、学习处于紧张状态，精力及体力长期透支从而影响工作效率。因此，开展疲劳与抗疲劳研究具有重要的意义。由于疲劳机理的不明确性和复杂性，至今临床仍无确切疗效的药物和疗法。

抗疲劳的一个重要措施就是应用一些安全有效的、能够预防和消除疲劳、提高作业效率的食品或制剂。中医药具有扶正固本的作用，在消除疲劳和增强体力方面有其独特的优势。现己证实，中医中药和食疗药物不仅可以增加运动者体内的能量物质，而且有调节神经内分泌系统、加强代谢等作用，并可刺激体内激素的分泌与释放，增强心血管系统、消化系统以及造血系统、骨骼系统等功能，延缓疲劳的产生。

牛大力(Millettia Speciosa Champ.) 别名:金钟根、倒吊金钟、山莲藕、猪脚笠、大力茨、大薯、牛枯大力、大力牛、甜牛力、甜牛大力等，为豆科崖豆藤属植物美丽崖豆藤(Millettia Speciosa Champ.)的干燥根，性味甘、平，具有补虚润肺，强筋活络的功用.牛大力用药历史悠久，早在《生草药性备要》记载其:“壮筋活络，补虚润肺。治腰腿痛，风湿痹痛，慢性肝炎，肺结核”。《陆川本草》也记载其:“清肺止咳，清凉解毒。治咳血，痢疾，温病身热口渴，头晕”。现有的药理研究表明，牛大力提取物能有效地清除OH、DPPH.自由基，具有抗脂质过氧化作用，对小鼠T淋巴细胞的增殖呈双向调节作用以及免疫调节作用、降血糖作用等。临床上己证明其对多种慢性疾病有治疗作用，主要用来治腰痛、肾虚带下、风湿性关节炎、腰肌劳损、慢性肝炎、病后体虚等。早在70年代，牛大力作为壮腰健肾丸、强力健身胶囊的原料用于中成药的生产。著名中医邓铁涛教授还以牛大力作为其中一种重要的补脾肾，强腰膝，疏筋活络的中草药，成功治疗了“不治之症”——运动神经元疾病。如今国内外学者已对牛大力的化学成分和功能进行了一些研究，现有的研究结果表明牛大力含有三萜类、黄酮类、酚苷类、木脂素等化学成分。

牛大力药用价值极高，应用历史悠久，临床研究表明牛大力具有补虚润肺，强筋活络、壮身健体，增强机体的免疫力与抗病能力等功效，具有广阔的应用开发前景。经检索，尚未发现有牛大力在抗疲劳方面的相关文献。

发明内容

本发明的目的是提供一种制备方法简单、纯天然的牛大力提取物，不仅具有优良的抗疲劳作用，而且满足了人们在安全性、绿色环保方面的诉求，为牛大力的开发利用提供了参考。

本发明所采用的技术方案：

一种牛大力提取物，是将牛大力粉碎后置于蒸馏水中，100℃下加热提取1～2h，过滤；滤渣再重复用蒸馏水提取2次，合并滤液并在70～80℃下减压浓缩至浸膏，经真空冷冻干燥至恒重即得牛大力提取物。

上述制备方法中，蒸馏水与牛大力提取物的体积质量比为10～20mL/g。

本发明还包括上述牛大力提取物在制备抗疲劳药物或保健品中的应用。

将上述牛大力提取物进行小白鼠实验，经过给药后小白鼠负重游泳实验、给药后小白鼠全血乳酸含量检测、给药后小白鼠肝糖元含量检测、给药后小白鼠血清尿素氮含量检测等实验，结果表明，本发明所提供的牛大力提取物具有显著的抗疲劳功效。

本发明工艺简单，所得提取物为纯天然的植物提取物，不仅具有优良的抗疲劳作用，而且满足了人们在安全性、绿色环保方面的诉求，为牛大力的开发利用提供了参考。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,或按照制造厂商所建议的条件。

实施例一

将100.0g洗净、烘干、切碎的牛大力，用1000ml蒸馏水100℃加热1h，过滤，滤渣再重复提取2次，合并3次滤液在80℃下减压浓缩至50ml，真空冷冻干燥至恒重，得14.059g的干燥的浓缩物，即牛大力提取物，回收实验过程中产生的废液。

实施例二

将100.0g洗净、烘干、切碎的牛大力，用1500ml蒸馏水100℃加热2h，过滤，滤渣再重复提取2次，合并3次滤液在70℃下减压浓缩至50ml，真空冷冻干燥至恒重，得14.364g的干燥的浓缩物，即牛大力提取物，回收实验过程中产生的废液。

实施例三

将100.0g洗净、烘干、切碎的牛大力，用2000ml蒸馏水100℃加热2h，过滤，滤渣再重复提取2次，合并3次滤液在75℃下减压浓缩至50ml，真空冷冻干燥至恒重，得14.683g的干燥的浓缩物，即牛大力提取物，回收实验过程中产生的废液。

小白鼠抗疲劳实验：

根据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）对保健食品功能学评价标准，经过动物实验表明，本发明的牛大力提取物具有显著的抗疲劳功效。

1、试验动物

75只健壮雄性小白鼠，体重25 ± 2 g，由广州动物实验中心提供。实验期间全部动物给予清洁级鼠颗粒饲料和灭菌水自由食用。

2、试验方法

2.1 剂量及分组

游泳实验及各项生化指标（全血乳酸、肝糖原、血清尿素氮）所用动物均各按体重把小白鼠分成5组，即为阴性（双蒸水）对照组（NCG），阳性（安神补脑液）对照组（CCG），牛大力提取物低量组（LD），中量组（MD），高量组（HD），每组十五只。根据小白鼠体重，牛大力提取物100 mg/kg为低量组，200 mg/kg为中量组，600 mg/kg为高量组。小鼠连续灌胃30 d，实验组给予各组牛大力提取物，阴性对照组给予等容量溶剂蒸馏水，阳性对照组（安神补脑液）给予0.2ml/10g。试验期间小鼠自由摄食及饮水，每隔 2 d 称量一次体重，根据体重调整灌胃量。

2.2负重游泳实验

给药 30 d 后，末次灌胃 30 min 后，置小白鼠于玻璃游泳缸(100 cm×60 cm×60cm)中游泳，水深不低于30 cm，水温10±1℃，鼠尾根部负荷体重5%的铅皮，记录小鼠自游泳开始至沉入水中 8s 不能浮起时间，记录为力竭时间（min）。统计学处理结果用

表示，采用SPSS17.0软件进行单因素方差分析处理。结果见表1。

表1

组别	游泳时间（min）
		阴性对照组（NCG）	5.18±2.09
阳性对照组（CCG）	5.92±0.76
		低量组（LD）	7.65±2.14
中量组（MD）	12.88±4.69*
		高量组（HD）	12.60±4.76*

(n=5, min,

，注；n为小白鼠数量，

为平均游泳时间，s为标准偏差)

实验结果：

由表1可见，各剂量组小鼠游泳时间均比对照组延长，其中，高、中剂量组与阴性对照组值相比有显著差异（*P<0.05），高、中剂量组与阳性对照组值相比也有显著差异（*P<0.05），高、中、低剂量组之间差异不显著，表明牛大力提取物具有延长小鼠负重游泳时间作用。

2.3全血乳酸含量的测定实验

把实验所用离心管编号后，在各管中加入 0. 6mL蛋白沉淀剂，对号加入 0. lmL 肝素抗凝剂。

末次灌胃30min后，用注射器从小白鼠内眦取血0.1ml，放入编好号的试管中（第一次取血）。处理好伤口后，每只小白鼠不负重，放入游泳缸中游泳30min后立即取血，放入编好号的试管中（第二次取血）。处理好伤口，待小白鼠休息20min后再一次取血，放入编好号的试管中（第三次取血）。倒入离心管静置10min后，3500-4000转／min离心8分钟，取上清液进行乳酸测定。

按照试剂盒的方法测定乳酸含量，记录并分析数据。

以721分光光度计在530 mm处，测各管溶液吸光度值。统计学处理结果用

表示，采用SPSS17.0软件进行单因素方差分析处理。结果见表2。

表2

(n=5, mmol/l,

，注；n为小白鼠数量，

为平均乳酸含量，s为标准偏差)

实验结果：

由表5可见，高剂量组小鼠运动前后三个时间点血乳酸曲线下面积与阴性对照组值相比有显著差异（*P<0.05），高剂量组小鼠运动前后三个时间点血乳酸曲线下面积与中、低剂量组值相比有显著差异（*P<0.05），其余均差异不显著，表明牛大力提取物具有降低小鼠运动后血乳酸曲线下面积的作用。

2.4肝糖原含量的测定实验

将2.3实验小白鼠取完血后处死，立即取出肝脏，以生理盐水冲洗干净并用滤纸吸干，准确称取肝脏组织（本实验去肝脏质量为75mg）。然后进行水解，取NaOH溶液体积225ul，与样本一起加入试管中，沸水浴煮20min，流水冷却。

按照试剂盒说明书的方法进行操作，测定实验小鼠的肝糖原含量。

各试管混匀后置沸水中煮5 min，冷却后用721分光光度计于620 nm波长处，测各管溶液吸光度值。统计学处理结果用

表示，采用SPSS17.0软件进行单因素方差分析处理。结果见表3。

表3

组别	肝糖原含量（mg/g肝）
		阴性对照组	7.71±2.34
阳性对照组	10.36±2.14
		低量组	10.88±2.69
中量组	11.98±1.40
		高量组	14.53±1.35**

(n=5, mg/g,

，注；n为小白鼠数量，

为平均肝糖原含量，s为标准偏差)

实验结果：

由表3可见，各剂量组小鼠肝糖原含量均比对照组值增加，其中，高剂量组与阴性对照组值相比有极显著差异（**P<0.01），高剂量组与阳性对照组值相比有显著差异（*P<0.05），高、中、低剂量组之间差异不显著，表明牛大力提取物具有增加小鼠肝脏糖原储备作用。

2.5血尿素氮含量的测定实验

小鼠连续灌胃实验30d后，分别从低、中、高剂量组，阴性对照组和阳性对照组中随机取出5只小鼠，取血和分组都与全血乳酸测定操作步骤一致。

按照试剂盒的方法测定血清尿素氮含量，记录并分析数据。

各试管混匀，置37℃水浴反应10min，各试管加酚显色剂1 mL，碱性次氯酸钠1 mL，充分混匀，37℃水浴反应10 min，用721分光光度计于640nm处，测定各管溶液吸光度值。统计学处理结果用

表示，采用SPSS17.0软件进行单因素方差分析处理。结果见表4。

表4

组别	血清尿素氮含量（mmol/l）
		阴性对照组	40.81±8.10
阳性对照组	24.59±2.97
		低量组	2.58±0.25**
中量组	5.47±1.64**
		高量组	32.11±8.79*

(n=5, mmol/l,

，注；n为小鼠数量，

为平均尿素氮，s为标准偏差)

实验结果：

由表4可见，各剂量组游泳30min后各剂量组血清尿素氮均低于阴性对照组值，中、低剂量组与阴性和阳性对照组值相比均有极显著差异（**P<0.01），中、低剂量组与高剂量组值相比有极显著差异（**P<0.01），阳性对照组和阴性对照组值相比有极显著差异（**P<0.01），表明牛大力提取物可以减少疲劳小鼠血清尿素氮产生。

总结：

该牛大力提取物负重游泳试验阳性，全血乳酸、肝糖原和尿素氮试验结果阳性，根据保健食品功能学评价标准，该样品具有缓解体力疲劳的作用。牛大力表现出良好的抗疲劳作用，因而是一种很有开发潜力的天然抗疲劳保健品。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种牛大力提取物，其特征是将牛大力粉碎后置于蒸馏水中，100℃下加热提取1～2h，过滤；滤渣再重复用蒸馏水提取2次，合并滤液并在70～80℃下减压浓缩至浸膏，经真空冷冻干燥至恒重即得牛大力提取物。

2.根据权利要求1所述的牛大力提取物的提取方法，其特征在于：该提取物在制备过程中，蒸馏水与牛大力提取物的体积质量比为10～20mL/g。

3.权利要求1所述的牛大力提取物在制备抗疲劳药物或保健品中的应用。