CN103768137A - 牛大力抗疲劳口服液及牛大力在制备抗疲劳保健品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了牛大力抗疲劳口服液及牛大力在制备抗疲劳保健品中的应用。牛大力抗疲劳口服液，它是是这样制备而成：1）取牛大力根茎切片1000重量份，用蒸馏水浸泡1～3h，所述蒸馏水用量与所述牛大力根茎切片的比例为8～12：1（ml/g），加热煮沸2～4h，趁热过滤；2）过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为4～8：1（mL/g），加热煮沸1～3h，趁热过滤；3）合并两次滤液，浓缩，用乙醇沉淀，上清液减压过滤，回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至与所述牛大力根茎切片的比例为1:1（mL/g），加适量防腐剂，灌装，灭菌。本发明产品按《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）中关于抗疲劳评价标准提示牛大力具有显著的抗疲劳活性。

Description

牛大力抗疲劳口服液及牛大力在制备抗疲劳保健品中的应用

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及牛大力RadixMillettiaSpeciosae在制备抗疲劳保健品中的用途及牛大力抗疲劳保健品。

背景技术

牛大力（radix millettiaspeciosae）为豆科崖豆藤属植物美丽崖豆藤（millettiaSpeciosa Champ）的干燥根，别名大力牛、扒山虎、血藤、金钟根、倒吊金钟、甜大力牛等，其性味甘、平，归肺、脾肾经，有补虚润肺、强筋活络之功，用于病后虚弱、阴虚咳嗽、腰肌劳损、遗精、白带等症状。牛大力用药历史悠久，《生草药性备要》记载其：“壮筋活络，补虚润肺。治腰腿痛，风湿痹痛，慢性肝炎，肺结核”。《陆川本草》也记载其：“清肺止咳，清凉解毒，治咳血，痢疾，温病身热口渴，头晕”。70年代开始作为壮腰健肾丸、强力健身胶囊等的原料用于中成药生产，在两广地区广泛应用，作为岭南地区药食两用植物。现代药理研究表明，牛大力具有多种药理活性，概括起来讲，目前已公开的文献报道的药理作用如下：

1、调节免疫作用（吕世静，黄槐莲等，牛大力对抗体及IL-2产生的影响【J】，上海免疫杂志，1997,17（1）：56；郑元升，蒲含林等，牛大力多糖对小鼠T淋巴细胞增值的双向调节作用【J】，广东药学院学报，2008，24（1）：58-61；石焱，弓小雪等，牛大力多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用【J】.临床军医杂志，2008，36（4）；530-532；魏翠萍，刘丹丹等，牛大力对小鼠免疫功能的影响【J】，广州中医药大学学报，209,26（6）：539-542；郑元升，牛大力多糖的提取及药理活性研究【D】，暨南大学硕士学位论文，2009）；

2、抗氧化作用（郑元升，牛大力多糖的提取及药理活性研究【D】，暨南大学硕士学位论文，2009）；

3、抗肿瘤作用（郑元升，牛大力多糖提取及药理活性研究【D】，暨南大学硕士学位论文，2009；臧文霞，王箐等，五中药用植物萃取物对四种组织来源肿瘤细胞体外增殖抑制作用的观察，山东医药，2012,52（42）：7-10）；

4、抗炎作用（郑元升，牛大力多糖的提取及药理活性研究【D】,暨南大学硕士学位论文，2009）；

5、祛痰、镇咳、平喘作用（刘丹丹、唐立海。牛大力多糖祛痰、镇咳和平喘作用的实验研究。广州中医药大学学报。2009,26（3）；266-269.）；

6、保肝作用（周添浓，刘丹丹等，牛大力对四氯化碳及酒精所致小鼠急性肝损伤的保护作用，时珍国医国药，2009,20（10）；2585-2587）；

7、DNA防护作用（陈晓白，王晓平等，彗星实验评价牛大力对60Co R射线致小鼠DNA损伤的防护[J]，时珍国医国药，2013,24（1）：76-78.）；

8、保鲜作用（张苏敏，李天略.牛大力氯仿提取物保鲜豇豆研究【J】.安徽农业科学，2012,40（36）：17714-17715.）。

以上研究提示，牛大力具有调节免疫、抗氧化、抗肿瘤、抗炎、祛痰、镇咳、保肝、DNA防护和保鲜等作用。目前，尚未见牛大力抗疲劳方面在临床上应用的研究报道。

疲劳作为一种生理现象，是指机体生理过程不能持续其机能在某一特定的水平和/或不能维持预定的运动强度。从生物化学角度来看，产生疲劳的原因：一是由于运动时能力体系输出的最大功率下降：二是由于肌肉力量下降或内脏器官功能下降而不能维持运动强度。据WHO调查，全球约有35%以上的人处于疲劳状态，中年男性人群疲劳状态达60.70%,我国有近70%的中年人处于疲劳状。疲劳的出现，可引起运动能力降低、战斗力减退、工作效率降低、差错事故增多。疲劳发生后如果得不到及时的恢复，逐渐积累，还会导致“过劳”，出现“过度训练综合征”、“慢性疲劳综合症”等，使机体发生内分泌紊乱、免疫力下降，甚至出现器质性病变，成为威胁人类健康的重要因素。在社会竞争日益激烈，人们日益讲求工作实效而又重视身体保健的今天，从天然植物资源中寻找安全、有效的抗疲劳成为已成为预防医学和运动医学研究的热点。

发明内容

本发明的目的在于提供牛大力抗疲劳口服液。

本发明的第二个目的在于提供牛大力在制备抗疲劳保健品中的应用。

为了实现本发明的第一个目的，本发明提供了以下技术方案：

牛大力抗疲劳口服液，它是通过以下方法制备而成的：

（1）取经烘干且水分含量在5以下%的牛大力根茎切片1000重量份，用蒸馏水浸泡1h，所述蒸馏水用量与所述牛大力根茎切片的比例为10:1（ml/g），加热煮沸3h，趁热过滤；

所述经烘干的牛大力根茎切片，是这样制备得到的：

a)将牛大力原料进行感官检验，检验指标为：外观大小一致，分散均匀；色泽为棕黄色;滋味、气味甘香，不得有异味；无无肉眼可见杂质；

b)挑选：挑选原料，进一步除去杂质并除去非食用部位，留取根茎部位；挑选后的根茎部位的总黄酮≥105mg/100g，总多糖≥2.2g/100g，水分≤10g/100g，总灰分≤7g/100g，铅(Pb)≤3.0mg/kg，总砷(As)≤2.0mg/kg，总汞(Hg)≤0.17mg/kg，镉(Cd)≤0.28mg/kg，敌敌畏≤0.2mg/kg，乐果≤0.8mg/kg，六六六总量≤0.2mg/kg，滴滴涕总量≤0.18mg/kg，三氯杀螨醇≤0.2mg/kg，氰戊菊酯≤0.5mg/kg，五氯硝基苯≤0.1mg/kg；

c)干燥：采用烘干机，温度设定50-60℃，优选在58.5℃进行干燥，干燥至水分含量在5%以下，水分含量优选1-2%;

d)切片：将牛大力根茎切片;

e)灭菌：将牛大力根茎切片置于微波灭菌机中灭菌，灭菌后菌落总数≤30000cfu/g，大肠菌群≤40MPN/100g，霉菌≤1000cfu/g，致病菌（沙门氏菌，志贺氏菌，金黄色葡萄球菌）无；

（2）过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为6：1（mL/g），加热煮沸1.5h，趁热过滤；

（3）合并两次滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压过滤，回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至与步骤（1）中牛大力根茎切片之间的比例为1:1（mL/g），加入适量食用防腐剂，灌装于聚丙烯包装材料，每支10ml，灭菌，即得。

所述牛大力原料为市场上普遍流通的将新鲜牛大力经水洗、除尘、晾晒后用于制备饮片的原材料。

一种牛大力抗疲劳口服液，它是通过以下方法制备而成：

（1）取经烘干且水分含量在5%以下的牛大力根茎切片1000重量份，用蒸馏水浸泡1～3h，所述蒸馏水用量与所述牛大力根茎切片的比例为8～12：1（ml/g），加热煮沸2～4h，趁热过滤；

（2）过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为4～8：1（mL/g），加热煮沸1～3h，趁热过滤；

（3）合并两次滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压过滤，回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至与步骤（1）中牛大力根茎切片之间的比例为1:1（mL/g），加入适量防腐剂，灌装，每支10ml，灭菌，即得。

所述牛大力抗疲劳口服液，它是通过以下方法制备而成：

取取经烘干且水分含量在4以下%的牛大力根茎切片1000g，用10L蒸馏水浸泡1h，加热煮沸3h，趁热过滤，过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为6：1（mL/g），加热煮沸1.5h，合并两次滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至1L，加入适量防腐剂，灌装，每支10或12或15或20ml，灭菌，即得。

所述牛大力抗疲劳口服液，其包装材料为聚丙烯材料。

所述经烘干的牛大力根茎切片，是通过以下方法制备得到的：

b)将牛大力原料进行感官检验，检验指标为：外观大小一致，分散均匀；色泽为棕黄色;滋味、气味甘香，不得有异味；无无肉眼可见杂质；

b)挑选：挑选原料，进一步除去杂质并除去非食用部位，留取根茎部位；挑选后的根茎部位的总黄酮≥100mg/100g，总多糖≥2g/100g，水分≤10g/100g，总灰分≤8g/100g，铅(Pb)≤3.0mg/kg，总砷(As)≤2.0mg/kg，总汞(Hg)≤0.2mg/kg，镉(Cd)≤0.3mg/kg，敌敌畏≤0.2mg/kg，乐果≤1.0mg/kg，六六六总量≤0.2mg/kg，滴滴涕总量≤0.2mg/kg，三氯杀螨醇≤0.2mg/kg，氰戊菊酯≤0.5mg/kg，五氯硝基苯≤0.1mg/kg；

c)干燥：采用烘干机，温度设定50-60℃，优选在58.5℃进行干燥，干燥至水分含量在5%以下，水分含量优选1-2%;

d)切片：将牛大力根茎切片;

e)灭菌：将牛大力根茎切片置于微波灭菌机中灭菌，灭菌后菌落总数≤30000cfu/g，大肠菌群≤40MPN/100g，霉菌≤1000cfu/g，致病菌（沙门氏菌，志贺氏菌，金黄色葡萄球菌）无。

为了实现本发明的第二个目的，本发明提供了以下技术方案：

牛大力在制备抗疲劳保健品中的应用。

所述应用，具体是取经烘干水分含量在5%以下的牛大力根茎切片，粉碎成粗粉，过筛，加入适量预糊化淀粉，拌匀，以模具或压差机制成小方块，每块25g，干燥，包装，即制得抗疲劳保健品牛大力茶块。

所述应用，具体是取经烘干水分含量在5%以下的牛大力根茎切片，粉碎成粗粉，过筛，装袋，每袋重20g，灭菌，即制得抗疲劳保健品牛大力袋装茶。

所述应用，具体是取经烘干水分含量在5%以下的牛大力根茎切片，切片，分装入袋，每袋重20g，灭菌，即制得抗疲劳保健品牛大力煎煮茶。

所述应用，具体是：

（1）取经烘干且水分含量在5%以下的牛大力根茎切片1000重量份，用蒸馏水浸泡1～3h，所述蒸馏水用量与所述牛大力根茎切片的比例为8～12：1（ml/g），加热煮沸2～4h，趁热过滤；

（2）过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为4～8：1（mL/g），加热煮沸1～3h，趁热过滤；

（3）合并两次滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压过滤，回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至与步骤（1）中牛大力根茎切片之间的比例为1:1（mL/g），加入适量防腐剂，灌装，每支10ml，灭菌，即得。

进一步的，所述应用进一步优选为：

（1）取经烘干且水分含量在3以下%的牛大力根茎切片1000重量份，用蒸馏水浸泡1h，所述蒸馏水用量与所述牛大力根茎切片的比例为10:1（ml/g），加热煮沸3h，趁热过滤；

（2）过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为6：1（mL/g），加热煮沸1.5h，趁热过滤；

（3）合并两次滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压过滤，回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至与步骤（1）中牛大力根茎切片之间的比例为1:1（mL/g），加入适量防腐剂，灌装，每支10ml，灭菌，即得。

与现有技术相比，本发明的有益效果：本发明产品具有抗疲劳活性，涉及通过小鼠负重游泳实验，爬杆试验以及相应生化指标的检测：尿素氮、葡萄糖，肌糖原，乳酸脱氢酶，肌酸磷酸激酶的含量变化，对牛大力的抗疲劳功能作出科学评价。实验结果表明牛大力可以延长小鼠的力竭游泳时间和爬杆时间，其中以高剂量组最为明显；可以显著性增加运动小鼠肌糖原含量，降低血清中尿素氮以及肌酸磷酸激酶含量。同时，有增加血清中葡萄糖和减少乳酸脱氢酶含量的趋势。按《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）中关于抗疲劳评价标准显示牛大力具有明显的抗疲劳活性。因此牛大力在抗疲劳保健食品上具有很大的开发应用前景。

附图说明：

图1为显示牛大力对小鼠爬杆时间的影响的结果图。

图2为显示牛大力对小鼠力竭游泳时间的影响的结果图

图3为显示牛大力对运动后小鼠血浆中葡萄糖含量的影响的结果图。

图4为显示牛大力对运动后小鼠血浆中尿素氮含量的影响的结果图

图5为显示牛大力对运动后小鼠血浆中乳酸脱氢酶含量的影响的结果图

图6为显示牛大力对运动后小鼠血浆中磷酸肌酸酶含量的影响的结果图

图7为显示牛大力对运动后小鼠肌肉中肌糖原含量的影响的结果图。

具体实施方式

下面结合实验例及具体实施方式对本发明作进一步的详细描述。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明内容所实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1牛大力在制备抗疲劳保健品中的应用及牛大力茶块

取牛大力，粉碎成粗粉，过筛，加入淀粉糊适量，拌匀，以模具或压差机制成小方块，每块20g或25g或28g或30g，干燥，包装，即得。

用法:茶块煎服，一次一块。

实施例2牛大力在制备抗疲劳保健品中的应用及牛大力茶袋

取牛大力，粉碎成粗粉，过筛，装袋，每袋重20g，灭菌，即得。茶袋开水泡服，一次1袋。

实施例3牛大力在制备抗疲劳保健品中的应用及牛大力煎煮茶

取经烘干水分含量在5%以下的牛大力根茎切片，切片，分装入袋，每袋重20g，灭菌，即得。煎煮后取汁当茶饮。一次1袋。

实施例4牛大力抗疲劳口服液

取牛大力根茎切片1000g，用10倍体积的蒸馏水浸泡1h，加热煮沸3h，趁热过滤，残渣再加6倍体积的蒸馏水，加热煮沸1.5h，合并2此滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至1000ml，加入适量防腐剂，灌装，每支10ml，灭菌，即得。口服，一次10ml，每天2次。

实施例5牛大力抗疲劳口服液

它是通过以下方法制备而成的：

（1）取经烘干且水分含量在5以下%的牛大力根茎切片1000重量份，用蒸馏水浸泡1h，所述蒸馏水用量与所述牛大力根茎切片的比例为10:1（ml/g），加热煮沸3h，趁热过滤；

所述经烘干的牛大力根茎切片，是这样制备得到的：

c)将牛大力原料进行感官检验，检验指标为：外观大小一致，分散均匀；色泽为棕黄色;滋味、气味甘香，不得有异味；无无肉眼可见杂质；

b)挑选：挑选原料，进一步除去杂质并除去非食用部位，留取根茎部位；挑选后的根茎部位的总黄酮≥105mg/100g，总多糖≥2.2g/100g，水分≤10g/100g，总灰分≤7g/100g，铅(Pb)≤3.0mg/kg，总砷(As)≤2.0mg/kg，总汞(Hg)≤0.17mg/kg，镉(Cd)≤0.28mg/kg，敌敌畏≤0.2mg/kg，乐果≤0.8mg/kg，六六六总量≤0.2mg/kg，滴滴涕总量≤0.18mg/kg，三氯杀螨醇≤0.2mg/kg，氰戊菊酯≤0.5mg/kg，五氯硝基苯≤0.1mg/kg；

c)干燥：采用烘干机，温度设定在58.5℃进行干燥，干燥至水分含量在1-2%;

d)切片：将牛大力根茎切片;

e)灭菌：将牛大力根茎切片置于微波灭菌机中灭菌，灭菌后菌落总数≤30000cfu/g，大肠菌群≤40MPN/100g，霉菌≤1000cfu/g，致病菌（沙门氏菌，志贺氏菌，金黄色葡萄球菌）无；

（2）过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为6：1（mL/g），加热煮沸1.5h，趁热过滤；

（3）合并两次滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压过滤，回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至与步骤（1）中牛大力根茎切片之间的比例为1:1（mL/g），加入适量食用防腐剂，灌装于聚丙烯包装材料，每支10ml，灭菌，即得。

本例牛大力抗疲劳口服液经验证，抗疲劳效果好，有较好的保健作用；且工艺成本较低，易操作，通过所述方法制备的口服液使牛大力有效药用成分尽可能的保留，疗效较好。

实施例6一种牛大力抗疲劳口服液

它是通过以下方法制备而成：

（1）取经烘干且水分含量在4以下%的牛大力根茎切片1000重量份，用蒸馏水浸泡1h，所述蒸馏水用量与所述牛大力根茎切片的比例为8：1（ml/g），加热煮沸2h，趁热过滤；

（2）过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为4：1（mL/g），加热煮沸1～3h，趁热过滤；

（3）合并两次滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压过滤，回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至与步骤（1）中牛大力根茎切片之间的比例为1:1（mL/g），加入适量防腐剂，灌装，每支10ml，灭菌，即得。

实施例7牛大力抗疲劳口服液

它是通过以下方法制备而成：

取经烘干且水分含量在2%的牛大力根茎切片1000g，用10L蒸馏水浸泡1h，加热煮沸3h，趁热过滤，过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为6：1（mL/g），加热煮沸1.5h，合并两次滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至1L，加入适量防腐剂，灌装，每支20ml，灭菌，即得。

实验例：牛大力抗疲劳作用实验

1材料与方法

1.1动物以及给药方法

动物：SPF级KM小鼠，体重18-22g，雌雄各半，由广东省实验动物中心提供（合格证号：440072000002881），小鼠饲养前将其称重，体重无差别的小鼠随机被分为空白组，高剂量组，中剂量组，低剂量组。动物在动物房饲育室中进行饲养，温度维持在23+1C.相对湿度维持在40-60%。每天保持12h（早7:00至晚7:00）灯照和黑暗的条件，所有的实验操作在动物房的操作室中进行，操作时间为9:00至15:00，各组动物在灌胃饲养期间自由饮水和进食。

给药方法：每天用灌胃针灌胃1次，每次剂量为高剂量组（20g/kg），中剂量组（10g、Kg），低剂量组（5g/kg），空白组给药生理盐水。按照0.2ml/10g体重连续灌胃20d，并在末次给药前称重。

1.2药物与制备

药物：牛大力（江门市禾盛生物技术有限公司提供）；

制备方法：取经实施例5制备得到的口服液，具体地在实施例5制备时，合并2次滤液，浓缩至1g/ml；浓度备用，用时加蒸馏水稀释至所需浓度。

1.3剂量与仪器

试剂：肝糖原/肌糖原试剂盒（南京建成生物工程研究所）

仪器：JJ600电子计重秤（高熟市双杰仪器厂），微孔板分光光度计（美国赛默飞世尔科技公司），TG16-WS台式离心机（湘仪离心机仪器有限公司），96微孔板（美国costar3599），自动生化仪9cosba8000），游泳箱（40cm*40cm*35cm）、铅皮（购自渔具店）、解剖器械，温度计，表锅，电炉，试管，平皿，滤纸，12.0ml和0,5

Ml塑料离心管，毛细管（20uL）等

1.4牛大力对小鼠爬杆时间的影响

取SPF级KM小鼠40只（分组及给药方法同1.1），即随机分别4组：空白组、低剂量组、中剂量组、高剂量组

牛大力高、中、低剂量组剂量分别为20105g kg d，各组小鼠在末次灌胃60min后进行爬杆实验。

爬杆架及其规格为：直径0.8cm，长50cm的玻璃棒，上端垂直固定于爬杆架上，下端悬空，距地面约40cm，小鼠均从第一周开始予以适应性训练，每周2次，每次5min，经3周适应性训练后，无运动功能异常的小鼠进入测试实验。各组小鼠在末次灌胃60min后，置于已设置好的爬杆下段，记录从放置开始至小鼠因疲劳无力从上端滑落的时间，为小鼠爬杆时间，连续滑落3次后将时间累加即为最终爬竿时间。

1.5牛大力对小鼠力竭游泳时间的影响

取SPF急KM小鼠48只（分组及给药方法同1.1），即随机分为4组：空白组，牛大力高中低剂量组（剂量分别为20、10、5g。kg。d）。各组小鼠在末次灌胃60min后进行力竭游泳时间实验。

在小鼠尾根部附以小鼠体重5%的铅丝，放入水温为（25.0+0.5）C游泳箱中用秒表记录自游泳开始至力竭（小鼠沉没后10s仍不能浮出水面）的时间作为小鼠力竭游泳时间。

1.6牛大力对运动后小鼠血液和肌肉生化指标的影响

取SPF级KM小鼠48只（分组及给药方法同1.1），随机分为4组：空白组、牛大力高、中、低剂量组（）。各组小鼠在末次灌胃60min后进行游泳，将小鼠置25+0.5C的游泳箱中游泳90min后取出眼球采血，加肝素抗凝后，以每分钟3000转离心15min，取血浆，按试剂盒说明用自动生化分析仪测定尿素氮，葡萄糖，磷酸激酶和乳酸脱氢酶的含量。取小鼠后肢肌肉，放入预冷的生理盐水中清除其血液，用吸水纸吸干，称取肌肉，按试剂盒说明书测定肌糖原含量。

1.7统计学处理

各组实验数据均用均数+标准差表示，单因素方差分析，P<0.05he P<0.01显示两组差异有统计学意义。

2结果

2.1牛大力对小鼠体重的影响

20天后各组小鼠活泼，精神状态好，皮毛光滑，未见任何不良反应，牛大力对小鼠体重的影响，结果见表1，与正常对照组相比，各种药组小鼠试验开始及结束时体重差异无统计学意义（P>0.05），表明牛大力对小鼠体重增长无明显影响。

表1

2.2牛大力对小鼠爬杆时间的影响

爬杆试验是反映小鼠耐力的一个方面，爬杆时间的长短反映动物静用力时的疲劳程度。图1结果显示，牛大力中剂量组和高剂量组对小鼠的爬杆时间有显著性影响，与空白组比较差异均显著性意义（P<0.05），延长率分别是96.7%和120.5%。低剂量组有延长小鼠爬杆的时间，延长率为51.7%，但无统计学意义，

2.3牛大力对小鼠力竭游泳时间的影响

负重游泳时间是反映运动疲劳的程度，小鼠负重后游泳时间的测量结果见图2，结果显示牛大力低、中、高剂量组对小鼠力竭游泳时间，延长率分别是128.3%，145.8%，177.6%，其差异均有显著性差异（P<0.05）。

2.4牛大力对运动后小鼠血浆中葡萄糖，尿素氮，乳酸脱氢酶，磷酸肌酸酶，与肌肉中肌糖原含量的影响

牛大力对不负重游泳小鼠生化指标含量的结果见图3，结果显示：

1、小鼠不负重游泳90min后，低中高剂量给药组与空白组比较，血浆中葡萄糖的含量虽无显著性差异，但有提高的趋势，并有一定的剂量依赖关系；说明牛大力对运动小鼠有增加体内葡萄糖水平的趋势

2、与空白组比较，运动后低剂量组血浆中尿素氮含量有降低趋势（无显著性差异），中剂量和高剂量组能显著性地降低尿素氮含量，且呈现剂量依赖关系。说明给药组能降低运动后血尿素氮含量，增加机体耐力，提高剧烈运动适应能力。

3、与空白组比较，低中高剂量组血浆乳酸脱氢酶活力虽无统计学意义，但均有降低趋势。说明牛大力有减低运动后产生的乳酸脱氢酶含量趋势，可能与减少其对细胞的损伤有一定关系。‘

4、与空白组相比，低中剂量组的磷酸肌酸激酶含量均有降低趋势（无统计学差异），高剂量组显著性的降低其含量，且呈剂量依赖关系。说明牛大力能减少由于游泳应激引起体内活性氧簇（ROS）的大量生成导致的细胞膜及细胞器膜的损伤，从而使磷酸肌酸激酶更少通过损伤的细胞膜进入循环血液，从而起保护细胞的作用。

与空白组相比，低剂量组有增加肌肉中肌糖原含量的趋势（无显著性差异），中和高剂量组能显著性提高肌糖原含量，且呈一定得剂量依赖关系。说明牛大力有促进糖原储备或减少糖原消耗的作用。

小结：

本发明通过小鼠负重游泳试验、爬杆试验以及检测相应的生化指标：尿素氮、葡萄糖，肌糖原，乳酸脱氢酶，肌酸磷酸激酶的含量变化，对牛大力的抗疲劳功能作出科学评价。

实验结果表明牛大力可以延长小鼠的力竭游泳时间和爬杆时间，其中以高剂量组最为明显；可以显著性增加运动小鼠肌糖原含量，降低血清中尿素氮以及肌酸磷酸激酶含量，同时，有增加血清中葡萄糖和减少乳酸脱氢酶含量的趋势。

实验结果显示牛大力具有显著抗疲劳活性。

Claims (10)

1.牛大力抗疲劳口服液，其特征在于，它是通过以下方法制备而成的：

（1）取经烘干且水分含量在5以下%的牛大力根茎切片1000重量份，用蒸馏水浸泡1h，所述蒸馏水用量与所述牛大力根茎切片的比例为10:1（ml/g），加热煮沸3h，趁热过滤；

所述经烘干的牛大力根茎切片，是这样制备得到的：

a)将牛大力原料进行感官检验，检验指标为：外观大小一致，分散均匀；色泽为棕黄色;滋味、气味甘香，不得有异味；无无肉眼可见杂质；

b)挑选：挑选原料，进一步除去杂质并除去非食用部位，留取根茎部位；挑选后的根茎部位的总黄酮≥105mg/100g，总多糖≥2.2g/100g，水分≤10g/100g，总灰分≤7g/100g，铅(Pb)≤3.0mg/kg，总砷(As)≤2.0mg/kg，总汞(Hg)≤0.17mg/kg，镉(Cd)≤0.28mg/kg，敌敌畏≤0.2mg/kg，乐果≤0.8mg/kg，六六六总量≤0.2mg/kg，滴滴涕总量≤0.18mg/kg，三氯杀螨醇≤0.2mg/kg，氰戊菊酯≤0.5mg/kg，五氯硝基苯≤0.1mg/kg；

c)干燥：采用烘干机，温度设定50-60℃，优选在58.5℃进行干燥，干燥至水分含量在5%以下，水分含量优选1-2%;

d)切片：将牛大力根茎切片;

e)灭菌：将牛大力根茎切片置于微波灭菌机中灭菌，灭菌后菌落总数≤30000cfu/g，大肠菌群≤40MPN/100g，霉菌≤1000cfu/g，致病菌（沙门氏菌，志贺氏菌，金黄色葡萄球菌）无；

（2）过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为6：1（mL/g），加热煮沸1.5h，趁热过滤；

（3）合并两次滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压过滤，回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至与步骤（1）中牛大力根茎切片之间的比例为1:1（mL/g），加入适量食用防腐剂，灌装于聚丙烯包装材料，每支10ml，灭菌，即得。

2.一种牛大力抗疲劳口服液，其特征在于，它是通过以下方法制备而成：

（1）取经烘干且水分含量在4以下%的牛大力根茎切片1000重量份，用蒸馏水浸泡1～3h，所述蒸馏水用量与所述牛大力根茎切片的比例为8～12：1（ml/g），加热煮沸2～4h，趁热过滤；

（2）过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为4～8：1（mL/g），加热煮沸1～3h，趁热过滤；

（3）合并两次滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压过滤，回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至与步骤（1）中牛大力根茎切片之间的比例为1:1（mL/g），加入适量防腐剂，灌装，每支10ml，灭菌，即得。

3.根据权利要求2所述的牛大力抗疲劳口服液，其特征在于，它是通过以下方法制备而成：

取经烘干且水分含量在1-2%的牛大力根茎切片1000g，用10L蒸馏水浸泡1h，加热煮沸3h，趁热过滤，过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为6：1（mL/g），加热煮沸1.5h，合并两次滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至1L，加入适量防腐剂，灌装，每支10或12或15或20ml，灭菌，即得。

4.根据权利要求2或3所述的牛大力抗疲劳口服液，其特征在于，其包装材料为聚丙烯材料。

5.牛大力在制备抗疲劳保健品中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，取牛大力根茎切片,烘干至水分含量在5%以下，粉碎成粗粉，过筛，加入适量预糊化淀粉，拌匀，以模具或压差机制成小方块，每块20g或25g或28g或30g，干燥，包装，即制得抗疲劳保健品牛大力茶块。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，取经烘干水分含量在5%以下的牛大力根茎切片，粉碎成粗粉，过筛，装袋，每袋重20g，灭菌，即制得抗疲劳保健品牛大力袋装茶。

8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，取经烘干水分含量在5%以下的牛大力根茎切片，切片，分装入袋，每袋重20g，灭菌，即制得抗疲劳保健品牛大力煎煮茶。

9.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，

（1）取经烘干且水分含量在5%以下的牛大力根茎切片1000重量份，用蒸馏水浸泡1～3h，所述蒸馏水用量与所述牛大力根茎切片的比例为8～12：1（ml/g），加热煮沸2～4h，趁热过滤；

（2）过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为4～8：1（mL/g），加热煮沸1～3h，趁热过滤；

（3）合并两次滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压过滤，回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至与步骤（1）中牛大力根茎切片之间的比例为1:1（mL/g），加入适量防腐剂，灌装，每支10ml，灭菌，即得。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，

（1）取经烘干且水分含量在3以下%的牛大力根茎切片1000重量份，用蒸馏水浸泡1h，所述蒸馏水用量与所述牛大力根茎切片的比例为10:1（ml/g），加热煮沸3h，趁热过滤；

（2）过滤残渣再加蒸馏水，蒸馏水与过滤残渣的比例为6：1（mL/g），加热煮沸1.5h，趁热过滤；

（3）合并两次滤液，浓缩至适量，加乙醇适量使沉淀，取上清液减压过滤，回收乙醇，加水搅拌，静置，取上清液滤过，滤液浓缩至与步骤（1）中牛大力根茎切片之间的比例为1:1（mL/g），加入适量防腐剂，灌装，每支10ml，灭菌，即得。

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