CN102894152B - 一种保健茶及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种保健茶及其制备方法，该制备方法包括将灵芝和刺梨粉碎成粗粉，加水煎煮两次，每次加水5～10倍量，煎煮1～3.5小时，水煮液经200目网过滤，滤液通过4000r/min管式离心机离心后或用750KD中空纤维膜滤过后，得上清液；上清液中按照重量份比1:1加入麦芽糊精和甘露醇，搅拌均匀，浓缩，得浸膏；将浸膏于50～70℃下微波真空干燥4个小时，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。本发明具有抗疲劳、增强免疫力、抗老年痴呆、帮助睡眠，预防心血管疾病、神经衰弱及肝损伤，且无任何毒副作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种保健茶及其制备方法，属于保健品和功能性食品领域。
背景技术
现代文明给人类带来物质享受，从根本上改变了人类原先的生活方式和习性，同时也给人类带来了大量的负面影响。营养过剩造成各种代谢紊乱，体内毒素排泄受阻，诱发各类疾病。另一方，在市场经济条件下，经济收入逼迫人们过度地劳作，出现身心“透支”现象；现在的生活空间狭小，交通拥挤，住房紧张；为了工作和生活，不得不承受越来越重的压力。所以现代人都或多或少的进入了亚健康状态。其主要表现在：免疫力差，浑身乏力，易疲倦、失眠、乏力、无食欲等。
免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物（病毒、细菌等）；处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。现代免疫学认为，免疫力是人体识别和排除“异己”的生理反应。免疫力低下的身体易于被感染或患癌症。
疲劳又称疲乏是主观上一种疲乏无力的不适,感觉疲劳不是特异症状，很多疾病都可引起疲劳。现代中医认为，疲劳为一个病名，有其病因病机，是临床上常见病、多发病，是必须重视的新病种，归于亚健康范畴，涉及五脏六腑，主要以脾、肝、肾为主。可以通过中医辨证组方调治，以达到预防、治疗、控制的目的。
心血管疾病如冠心病、脑血栓、老年性痴呆等均是当今世界上最常见和危害最大的疾病之一，在许多国家里已成为人口死亡的主要原因之一；据调查，近年来的发病率有逐年增高的趋势，而且中、青年患者不断增加，心血管疾病已成为危害我国人民健康的常见病。其中，老年痴呆又名阿尔茨海默病，是一种进行性发展的致死性神经退行性疾病，临床表现为认知和记忆功能不断恶化，日常生活能力进行性减退，并有各种神经精神症状和行为障碍。据中国协会2011年的公布调查结果显示，全球有约3650万人患有痴呆症，每七秒就有一个人患上此病，平均生存期只有5.9年，是威胁老人健康的“四大杀手”之一。在中国65岁以上的老人患病率高达6.6%以上，年龄每增加5岁，患病率增长一倍，3个85岁以上的老人中就有一个是老年痴呆，保守估计全国老年痴呆患病人数高达800万以上。
神经衰弱是一种常见病、多发病，主要表现为睡眠障碍，睡眠障碍是睡眠量不正常以及睡眠中出现异常行为的表现，也是睡眠和觉醒正常节律性交替紊乱的表现。可由多种因素引 起，常与躯体疾病有关。包括睡眠失调和异态睡眠。睡眠与人的健康息息相关。但根据调查显示，很多人都患有睡眠方面的障碍或者和睡眠相关的疾病，成年人会出现睡眠障碍的比例高达30%。专家指出睡眠是维持人体生命的极其重要的生理功能，对人体必不可少。因此，睡眠障碍必须引起足够的重视。长期失眠会导致大脑功能紊乱，对身体造成多种危害，严重影响身心健康。
申请号为03131836.3名称为“一种延缓衰老的保健品及加工方法”的专利申请公开了一种使用灵芝多糖和刺梨粉制备而成的抗衰老、除色斑的保健品，但是该保健品并没有公开关于抗疲劳、增强免疫力、抗老年痴呆、帮助睡眠和防治心血管疾病及肝损伤方面的功能；并且此专利申请中所用的原料为灵芝多糖和刺梨粉，刺梨未经过提取处理，与本发明的原料有本质区别。申请号为200910215806.1名称为“一种保健茶”的专利申请公开了一种使用灵芝、野刺梨和银杏叶制备而成的保健茶，此保健茶的原料未经过任何提取处理，仅仅是原药材泡水即饮，灵芝中的有效成分不能破壁入水，因而起不到灵芝应有的保健作用；另外由于银杏叶含有毒成分，用其泡茶可能会引起阵发性痉挛、神经麻痹、瞳孔放大、过敏及其它副作用；而且银杏叶中含有银杏酸，如果服用剂量过大或者服用时间过长，则会损害心脏。目前还没有关于无任何毒副作用的、能同时具有抗疲劳、增强免疫力、抗老年痴呆、帮助睡眠和保肝护肝作用并有效预防心血管疾病的保健品的报道。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种保健茶及其制备方法，它可以同时有效抗疲劳、增强免疫力、抗老年痴呆、帮助睡眠，预防心血管疾病、神经衰弱及肝损伤，且无任何毒副作用。
本发明是这样构成的：一种保健茶，按重量份计算，主要由下述原料：灵芝2～8份和刺梨8～32份制成。
优选的，按重量份计算，主要由下述原料：灵芝6份和刺梨12份制成。
按照重量份计算，其原料还包括10份沙棘。
或者按照重量份计算，其原料还包括6份葛根。
或者按照重量份计算，其原料还包括10份沙棘和6份葛根。
或者按照重量份计算，其原料还包括10份山楂。
或者按照重量份计算，其原料还包括10份沙棘和10份山楂。
或者按照重量份计算，其原料还包括6份葛根和10份山楂。
或者按照重量份计算，其原料还包括10份沙棘、6份葛根和10份山楂。
本发明选用的各味原料的方解如下：
灵芝：又称灵芝草、神芝、芝草、仙草、瑞草，孔菌科真菌赤芝Ganoderma luncidum (Leyss.ex Fr)Karst.或紫芝Ganoderma sinense Zhao.Xu et Zhang的干燥子实体。气微香，味苦涩，性为甘，平，归心、肺、肝、肾经，具备很高的药用价值，对于增强人体免疫力、调节血糖、控制血压、保肝护肝、促进睡眠等方面均具有显著疗效。
刺梨：又名茨梨、木梨子，蔷薇科植物缫丝花的果实，是滋补健身的营养珍果。味甘、酸微涩，性凉，刺梨中含有丰富的B族维生素，能保护心脏，增强心肌活力，降低血压；所含的配糖体及鞣酸等成分，能祛痰止咳，对咽喉有养护作用；所含的较多糖类物质和多种维生素，易被人体吸收，增进食欲，对肝脏具有保护作用；此外，刺梨性凉并能清热镇静，常食能使血压恢复正常，改善头晕目眩等症状；还能防止动脉粥样硬化，抑制致癌物质亚硝胺的形成，从而防癌抗癌；刺梨中的果胶含量很高，有助于消化、通利大便。
沙棘：达尔、沙枣、醋柳果、大尔卜兴、醋柳、酸刺子、酸柳柳、其察日嘎纳、酸刺、黑刺、黄酸刺、酸刺刺，胡颓子科植物沙棘Hippophae rhamnoides L.的干燥成熟果实。味酸；涩；性温。功效主治：止咳化痰；健胃消食；活血散瘀，尤其是咳嗽痰多；肺脓肿；消化不良；食积腹痛；胃痛；肠炎；闭经；跌打瘀肿。
葛根：别名野葛，为豆科植物野葛的干燥根。性凉，味甘、辛。入脾、胃经。主治：解表退热，生津，透疹，升阳止泻。用于外感发热头痛、高血压颈项强痛、口渴、消渴、麻疹不透、热痢、泄泻、高血压、心绞痛、耳聋。
山楂：味酸、甘，性微温。归脾、胃、肝经。功用主治：开胃消食、化滞消积、活血散瘀、化痰行气，用于肉食滞积、症瘕积聚、腹胀痞满、瘀阻腹痛、痰饮、泄泻、肠风下血等。
上述原料符合《中国药典》中各药材项下的规定。
本发明的方剂中，灵芝免疫调节、降血糖、抗氧化、降血脂、抗衰老，抑制肝癌细胞，同时抑制组织胺的释放；刺梨增强心肌活力、降低血压、祛痰止咳、养护咽喉，二药合用，则可达保肝解毒、抗心血管疾病、抗神经衰弱之功效。本方中沙棘止咳化痰、健胃消食，葛根解表退热，生津，透疹，升阳止泻，山楂开胃消食、化滞消积、活血散瘀、化痰行气，任意组合加入上述组方中，均可进一步加强药效作用。此外，本方中所使用的原料价格便宜，获取较为方便；而且无毒副作用，对正常生理功能的干扰很小，使用起来较为安全。
本发明提供的保健茶的制备方法是：取灵芝和刺梨，粉碎成粗粉，加水煎煮两次，每次加水5～10倍量，煎煮1～3.5小时，水煮液经200目网过滤，滤液通过4000r/min管式离心 机离心后或用750KD中空纤维膜滤过后，得上清液；在上清液中按照重量份比1:1加入麦芽糊精和甘露醇，搅拌均匀，浓缩，得浸膏；将浸膏于50～70℃下微波真空干燥4个小时，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
优选的，加水煎煮两次，每次加水8倍量，煎煮3小时。
或者取灵芝、刺梨和沙棘，粉碎后加入40%～80%乙醇，浸泡4～6小时，回流提取，减压回收乙醇并浓缩成浸膏；将浸膏于90～95℃下微波真空干燥20～25分钟，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
以上组分的重量在生产时可按照相应的比例增大或减少，如大规模生产时可以以公斤或吨为单位，小规模生产也可以以克为单位，重量可以增大或减小，但各原料之间的重量配比的比例不变。
与现有技术相比，本发明疗效显著，具有抗疲劳、增强免疫力、抗老年痴呆和保肝解毒、预防心血管疾病之功效，临床上用于压力大、免疫力低下等亚健康人群，以及慢性中毒、各类慢性肝炎、肝硬化、肝功能障碍及冠心病、心绞痛等症，也用于各类失眠症，如压力型失眠、不良嗜好型失眠、焦虑型失眠、抑郁型失眠等。本发明的组方合理，原料获取方便，无毒副作用，而且价格便宜，防治效果显著且疗程短。长期饮用本发明所提供的保健茶，可以增强机体抵抗力，延年益寿，提高免疫力；而且该保健茶口感独特，体积小、重量轻、易于运输和携带，食用方便、卫生。本品的应用范围非常广泛，就中医辩证看，由于本品入五脏肾补益全身五脏之气，所以无论心、肺、肝、脾、肾脏虚弱，均可服之。它不同于一般药物对某种疾病而起治疗作用，亦不同于一般营养保健食品只对某一方面营养素的不足进行补充和强化，它是在整体上双向调节人体机能平衡，调动机体内部活力，调节人体新陈代谢机能，提高自身免疫能力，促使全部的内脏或器官机能正常化。
使用本发明所述的保健茶防治失眠、心血管疾病及肝功能障碍，有效率达90%，大多数病人通过饮用后，停止饮用观察三年以上，至今病情稳定。
发明人共诊治失眠患者300例，心血管疾病患者500例，肝功能障碍患者500例，治愈率达90%。其中，比较典型的病例有：(1)王XX，男，50岁，汉族，六盘水市钟山区人。因患冠心病，于2007年7月开始呼吸短促、头晕、恶心、多汗，曾用冠心病超声治疗仪治疗无效，后经人介绍服用本保健茶6个月后，呼吸恢复正常，继续服用3个月后，头晕、恶心、多汗等症状全部消失，现一年有余未复发。(2)张XX，男，56岁，汉族，农民。患肝胃不和型失眠长达10年，入睡困难，还经常伴有夜间盗汗、手脚发热等症状。曾服用安定片，失眠症状得到一定的缓解，可安睡2小时左右，但是停药后，病症又恢复。服用本发 明所述的保健茶2个月后，睡眠时间增加到3～4小时，又服用了3个月，睡眠时间恢复正常，可达6～7小时，同时夜间盗汗、手脚发热的症状也完全消失，继续服用3个月进行巩固，至今未复发。（3）王XX，男，52岁，汉族，因患慢性肝炎，经常浑身乏力、体重减轻、皮肤干枯粗糙，头疼。服用本发明的保健茶3个月后，皮肤干枯粗糙及头疼的症状减轻，继续服用2个月后，身体乏力、皮肤干枯粗糙及头疼症状全部消失，体重上升了10公斤。
本申请人进行了一系列实验来选择本发明提供的保健茶的制备工艺及组分配比，保证科学、合理、可行；申请人还进行了一系列实验，以证明本发明提供的保健茶具有有效的效果，生产企业可以根据本发明直接生产、制备效果显著的保健茶，而不再需要进行新的摸索、研究；实际上对于本发明来讲，其关键就在于生产工艺条件的选择；如果选择不当，要么制备不出有效的产品、有时甚至危害健康，要么产品的成本高昂、又不符合市场要求；本发明的选择解决了这些问题；同时，向市场又提供了新的保健品种类，使患者有更多的选择余地。
申请人还进行了一系列实验，对本发明的工艺条件进行筛选及证明本发明提供的保健茶具有有效的效果：
实验例1：组方实验
材料：原料购于贵阳市药材市场，昆明种小白鼠由贵阳医学院动物中心提供。
实验动物及分组：小白鼠100只，雌雄各半，体重(18±2)g，按雌雄、体重随机分为1个对照组和9个实验组，每组10只。实验组分别为：实验组1（灵芝水提取物）、实验组2（刺梨水提取物）、实验组3（灵芝水提取物：刺梨水提取物=1：2）、实验组4（灵芝水提取物+刺梨水提取物+沙棘水提取物）、实验组5（灵芝水提取物+刺梨水提取物+葛根水提取物）、实验组6（灵芝水提取物+刺梨水提取物+山楂水提取物）、实验组7（灵芝水提取物+刺梨水提取物+沙棘水提取物+葛根水提取物）、实验组8（灵芝水提取物+刺梨水提取物+沙棘水提取物+山楂水提取物）、实验组9（灵芝水提取物+刺梨水提取物+葛根水提取物+山楂水提取物）。
实验方法：实验组以20mg/kg体重的剂量给小白鼠灌胃各提取物，对照组灌以同量的生理盐水。1h后每组进行游泳耐力实验，游泳实验水深40cm水温25℃。实验过程中记录小鼠从入水至运动疲劳的游泳时间，小鼠头部没入水面以下7s不再上浮判定为疲劳，记录疲劳时间。
实验结果：9组实验组小鼠的游泳时间均明显高于对照组，除了实验组2，其他各组与 对照组比较均有显著性(p＜0.05)，灵芝+刺梨+（沙棘、葛根、山楂的任意组合）均比灵芝+刺梨的效果要好。结果见下表：
各组小鼠游泳耐力实验结果
与对照组比：*P<0.05
实验例2：原料配比的选择实验
材料：原料购于贵阳市药材市场，昆明种小白鼠由贵阳医学院动物中心提供。
实验动物及分组：小白鼠100只，雌雄各半，体重(18±2)g，按雌雄、体重随机分为1个对照组和9个实验组，每组10只。实验组分别为：实验组1（灵芝：刺梨=1：2）、实验组2（灵芝：刺梨=1：1）、实验组3（灵芝：刺梨=2：1）、实验组4（灵芝：刺梨：沙棘=3：6：5）、实验组5（灵芝：刺梨：葛根=1：2：1）、实验组6（灵芝：刺梨：山楂=1：2：2）、实验组7（灵芝：刺梨：沙棘=1：1：1）、实验组8（灵芝：刺梨：葛根=1：2：2）、实验组9（灵芝：刺梨：山楂=1：2：1）。
实验方法：实验组以20mg/kg体重的剂量给小白鼠灌胃各提取物，对照组灌以同量的生理盐水。1h后每组进行游泳耐力实验，游泳实验水深40cm水温25℃。实验过程中记录小鼠从入水至运动疲劳的游泳时间，小鼠头部没入水面以下7s不再上浮判定为疲劳，记录疲劳时间。
实验结果：9组实验组小鼠的游泳时间均明显高于对照组，各组与对照组比较均有显著性(p＜0.05)，说明灵芝：刺梨=1：2效果最佳，在此配比下，加入葛根：灵芝=1：1效果最佳，沙棘或山楂：灵芝=5:3效果最佳。结果见下表：
各组小鼠游泳耐力实验结果
与对照组比：*P<0.05
实验例3：保健茶的抗疲劳作用
（1）一次给予的抗疲劳试验：
实验方法：将20只小鼠随机分为实验组和对照组，雌雄各半，实验组以20mg/kg体重的剂量灌胃保健茶，对照组灌以同量的生理盐水。1h后每组各分两批分别进行转轮实验和游泳实验。转轮实验转速为18r/min，游泳实验水深40cm水温25℃。
实验结果：一次给予保健茶后实验组小鼠的转轮时间和游泳时间均明显高于对照组，两组的差异有显著性(p＜0.05和p＜0.01)。
（2）25d喂食后抗疲劳试验：
实验材料：保健茶为本实验室自制；昆明种小白鼠由贵阳医学院动物中心提供。
动物分组：小白鼠240只，雌雄各半，体重(18±2)g，按雌雄、体重随机分为1个对照组和3个剂量实验组，每组60只。适应性饲养3d后灌胃，空白对照组适量生理盐水灌胃，根据人体推荐剂量0.5g／(60kg·d)，三个给药剂量分别按人体推荐剂量的5倍、10倍、30倍设计低剂量（0.042g/kg·d），中剂量组（0.083g/kg·d），高剂量组（0.25g g/kg·d）。连续25d。实验期间，小鼠自由摄食及饮水。
小鼠游泳耐力实验：实验至第25d时，每实验剂量组及对照组各取小鼠15只。小鼠右侧臀负重体重6％，放入水温(25±1)℃、水深40cm的水槽中游泳，记录小鼠从入水至运动疲劳发生时的游泳时间。小鼠头部没入水面以下7s不再上浮判定为疲劳，记录疲劳时间。
低压缺氧实验：实验至第25d时，灌胃2h后，每实验剂量组及对照组各取小鼠20只。放入减压箱减压至负压8mmHg，持续时间为5rain，记录小白鼠死亡只数。
实验结果：
（1）保健茶对小鼠游泳耐力的影响：
实验组中高剂量组与对照组(生理盐水组)比较，力竭游泳时间明显延长(P<0．05)。实验组随剂量增加，游泳时间分别为(41．2±10.9)，(63．9±8.2)，(62.4±9.5)min，中、高剂量组小鼠游泳时间均长于对照组(42.6±6.1)min。
（2）保健茶对小鼠低压缺氧的影响：
实验组的高剂量组与对照组(生理盐水组)比较(小白鼠死亡只数)，耐低压缺氧能力明显增强(P<0.05)。高剂量组5min动物死亡5只，中剂量组5min动物死亡8只，低剂量组5min动物死亡14只，而对照组5min死亡18只。
实验例4：保健茶的增强免疫力作用
实验材料：保健茶为本实验室自制，昆明种小白鼠由贵阳医学院动物中心提供。
动物分组：本功能共8项实验(其中抗体生成细胞测定和血清溶血素测定共用动物；ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定共用动物；SRBC诱导小鼠DTH实验和JⅣ体比值测定共用动物)。将200只雌性小鼠分为5等份，每份40只小鼠并随机分为四小组，每小组10只。各项实验剂量设计均为：一个溶剂对照组、三个剂量组：低剂量组（0.042g/kg·d），中剂量组（0.083g/kg·d），高剂量组（0.25g/kg·d）。其剂量分别相当于人体推荐成品用量的30、20、10倍。
实验方法及结果：按剂量各组每天灌胃一次(灌胃容量均为0.2mL/10g bw，溶剂对照组组灌等容量蒸馏水)，连续30d后分别对动物进行各项免疫指标测定。
实验方法：
（1）小鼠迟发型变态反应(DTH)测定：于灌胃第26d，给小鼠腹腔注射2％绵羊红细胞(SRBC)0.2ml／只进行致敏，于免疫后第4天每鼠左后足跖部皮下注射20％SRBC(20μL／只)进行攻击，并于攻击前和攻击后24h测量每鼠左后足跖同一部位厚度，计算攻击前、后的差值，各剂量组结果与溶剂对照组比较进行方差分析。
结果：各剂量组用SRBC攻击后，小鼠足跖厚度差值均较溶剂对照组增高，其差异均有统计学意义（P<0.05），结果见下表1：
表1保健茶DTH测定结果（24h）
与对照组比：*P<0.05
(2)ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验(M1TI'法)：对各组小鼠无菌取脾，制脾细胞悬液，用RPMI1640完全培养液调整脾细胞浓度为3×109个/L，按照程序中MTr法进行淋巴细胞增殖反应，最后在紫外可见分光光度计570nm波长处测其吸光度值(A)，计算ConA+与ConA一各孔的吸光度值差。各剂量组结果与溶剂对照组比较进行方差分析。
结果：中、高剂量组小鼠ConA+和ConA-差值较溶液对照组差异均有统计学意义（P<0.05），低剂量组小鼠ConA+和ConA-差值较溶液对照组无统计学意义（P＞0.05）结果见下表2：
表2保健茶对ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验的影响
与对照组比：*P<0.05
（3）血清溶血素测定：于灌胃第25天给小鼠腹腔注射2％SRBC(0．2mL／只)，于免疫后第5天摘眼球采血，分离血清并在微量血凝板上进行血清溶血素测定：37℃孵育3h，统计血球凝集度，计算相应抗体积数。各剂量组结果与溶剂对照组比较进行方差分析。
结果：各剂量组小鼠抗体积数均较溶剂对照组升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。
结果见表3：
表3保健茶对小鼠血清溶血素抗体积数的影响
与对照组比：*P<0.05
（4）抗体生成细胞(PFC)检测：于灌胃第25天给小鼠腹腔注射2％SRBC 0.2mL／只，于免疫后第5天处死，解剖取脾制备脾细胞悬液，用RPMI 1640完全培养液调整脾细胞浓度为5×109个／L。按程序方法制备琼脂糖玻片，在CO2培养箱(37℃、5％CO2)中温育1.5h后加补体，再温育1.5h，计数每张琼脂薄层玻片上形成的溶血空斑数。各剂量组结果与溶剂对照组比较进行方差分析。
结果：中、高剂量组溶血空斑数与溶液对照组间差异有统计学意义（P<0.05），低剂量组溶血空斑数与溶液对照组间差异无统计学意义（P＞0.05）结果见下表4：
表4保健茶对小鼠抗体生成细胞(PFC)检测结果
与对照组比：*P<0.05
（5）小鼠碳廓清实验：按顺序给各组小鼠尾静脉注射印度墨汁(4倍稀释)0.1mL/10gbw。每鼠均于注射墨汁后2min及10min分别准时内毗采血20μL，并迅速加入到2mL0.1％碳酸钠溶液中并摇匀，以紫外可见分光光度计600nm波长处测吸光度值(A)。同时取小鼠肝、脾称重，按公式计算吞噬指数(a)。各剂量组结果与溶剂对照组比较进行方差分析。
结果：中、高剂量组小鼠碳廓清吞噬指数与溶液对照组之间有统计学意义（（P<0.05），低剂量组溶血空斑数与溶液对照组间差异无统计学意义（P＞0.05）结果见下表5：
表5保健茶对小鼠碳廓清实验结果
与对照组比：*P<0.05
（6）小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验：于末次给予受试物后各组小鼠腹腔注射20％鸡红细胞悬液1mL／只，间隔30min处死小鼠。腹腔注人生理盐水2mL／只，振摇lmin后取腹腔洗液制片，37℃温育30min，漂洗、固定后染色镜检。计数吞噬鸡红的巨噬细胞数和巨噬细胞吞噬鸡红细胞数，以各剂量组吞噬率和吞噬指数与溶剂对照组比较进行方差分析。
结果：各剂量组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率均较溶剂对照组升高，且差异均有统计学意义(P<0．05)；各剂量组小鼠巨噬细胞吞噬指数均比溶剂对照组升高且高、中剂量组与溶剂对照组间差异均有统计学意义(P<0．05)。低剂量组与溶剂对照组间差异无统计学意义(P>0．05)。结果见下表6：
表6保健茶对小鼠巨噬细胞吞噬实验结果
与对照组比：*P<0.05
结论：本次实验发现，中、高剂量组胸腺指数及脾指数增加明显，初步证明受试物有增强免疫力的作用。对于ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验，高、中、低剂量组吸光度差值高于对照组，说明给药后淋巴细胞扩增能力提高，表明该保健茶能提高小鼠细胞免疫和体液免疫的作用。保健茶中、高剂量组小鼠溶血空斑数均高于溶液对照组，血清溶血素测定中高、中、低剂量组抗体积数均高于溶液对照组，表明保健茶具有增强小鼠体液免疫的作用。综上所述：保健茶具有增强小鼠免疫力的作用。
实验例5：保健茶的抗老年痴呆作用：
材料与动物：保健茶为本实验室自制，昆明种小白鼠由贵阳医学院动物中心提供。
动物分组：昆明小鼠50只，清洁级，体重20～25g，雌雄各半，随机分成5组，每组10只，即空白对照组(同体积生理盐水)，模型组，低剂量组（0.042g/kg·d），中剂量组 （0.083g/kg·d），高剂量组（0.25g/kg·d）。
自主活动：试验第30天将小鼠放入自主活动测试箱，适应5min，测试10min，计算机自动记录动物的运动总路程、运动总时间、平均运动速度。
结果：与对照组比较，模型组运动总路程减少，运动总时间和平均运动速度降低，其差异具有统计学意义；与模型组比较，中、高剂量组的运动总路程、运动总时间和平均运动速度均有明显改善。
水迷宫检测：试验第3l天开始进行水迷宫检测：定位航行实验：将动物面向池壁置于水池内进行试验，历时4d，每天3次，每次60s，记录动物逃避潜伏期和游出率。
空间探索实验：定航实验后将平台撤去，从目标象限的对角象限将动物面向池壁置于池内，使动物在池内游泳60s，记录动物在目标象限活动时间和路程比率及穿台次数。
结果：水迷宫Morris水迷宫定位航行实验中，随着训练时间的延长，各组游出率逐渐升高，潜伏期逐渐降低，但模型组游出率的上升幅度和潜伏期的下降幅度明显小于对照组，从训练第2天起，与模型组相比中、高剂量组组小鼠的游出率明显升高，逃避潜伏期明显缩短。空间探索实验中，模型组小鼠与对照组相比空间探索能力明显减弱，而低、中、高剂量组均可改善小鼠空间探索能力。
实验例6：保健茶的帮助睡眠作用：
材料与动物：保健茶为本实验室自制，昆明种小白鼠由贵阳医学院动物中心提供。
动物分组：昆明小鼠40只，清洁级，体重20～25g，雌雄各半，随机分成4组，每组10只，即溶液对照组(同体积生理盐水)，低剂量组（0.042g/kg·d），中剂量组（0.083g/kg·d），高剂量组（0.25g/kg·d）。
实验方法与结果：连续灌胃30d，末次灌胃后2h，皮下注射戊巴比妥钠50mg·kg-1，以小鼠翻正反射消失1min为入睡标准，记录小鼠的睡眠时间；皮下注射巴比妥钠130mg·kg-1，以小鼠翻正反射消失1min为入睡标准，记录在30min内小鼠的入睡个数。
结果：
（1）延长戊巴比妥钠致睡眠小鼠的睡眠时间。连续给小鼠灌胃30d，各剂量组小鼠的睡眠时间均长于对照组，经方差分析及两两比较统计学处理与阴性对照组相比，中、高剂量组有明显统计学差异（如表7所示），表明中、高剂量组样品可延长戊巴比妥钠致睡眠小鼠的睡眠时间的作用。
表7 保健茶延长小鼠戊巴比妥钠睡眠时间（n＝10）
与对照组比：*P<0.05，**P<0.01
（2）促小鼠巴比妥钠睡眠作用。连续给小鼠灌胃30d，各剂量组小鼠的入睡个数随着剂量的增加而增加，结果经统计学处理（见表8），与对照组相比，各剂量组均有显著统计学差异（见表8），表明保健茶各剂量均具有促进小鼠入睡的作用。
表8 保健茶促小鼠入睡的只数（n=10）
与对照组比：*P<0.05
实验例7：保健茶的保肝作用：
实验材料：保健茶为本实验室自制，实验动物由贵阳医学院动物实验中心提供，Wistar大鼠，雄性，体质量(160±20)g。。
实验方法：
（1）模型复制：选取健康大鼠50只，均分成5组，每组10只：正常组、模型组、低小剂量组、大剂量组和阳性对照组(甘草甜素)。除正常组外其余各组均采用皮下注射四氯化碳、花生油混合液(1：9)复制大鼠肝纤维化模型，每周注射两次(5.0ml／kg)，连续13周，每周称体质量1次。从第5周开始，按组别分别灌服相应药物(10mg/kg)，每日1次，周日停药，连续9周。
（2）观察指标及检测方法：给药14周后，所有动物禁食，不禁水。12h后腹主动脉取血，摘取肝脏，电镜下观察病理形态学变化。抽取的血液经3500r/min离心15min，分离血清。按试剂盒说明书检测清测ALT，AST，AKP。
实验结果：保健茶多糖对CCl4致慢性肝纤维化大鼠肝脏的影响与正常组比较，保健茶小、大剂量组均可对抗血清中ALT，AST，AKP的升高，与模型组有显著性差别。
实验例8：工艺条件筛选实验
（1）水提条件筛选
影响水煎煮的主要因素有：煎煮次数、加水量、煎煮时间等。本实验以这三个因素作L9(3)4正交实验，以灵芝多糖的含量和出膏率为评价指标。实验中按处方比例称取药材，共9份，按正交实验设计的提取工艺条件提取，200目筛过滤，浓缩，干燥，测定灵芝多糖的含量和出膏率，取正交试验9份干浸膏分别进行抗疲劳试验，以抗疲劳实验结果（50%）、灵芝多糖的含量（25%）和出膏率（25%）三个指标综合评分作为正交实验结果，来优选水提工艺条件。试验结果如下表：
正交因素水平表
直观分析表
实验结果：水提工艺条件为加8倍量水，煎煮两次，每次煎煮3小时，得到的保健茶抗疲劳效果最好，且此工艺条件下所含的灵芝多糖最多，出膏率最大。
（2）除杂工艺研究试验
A.离心除杂工艺
离心就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力，加快液体中颗粒的沉降速度，把样品中不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。在医药、化学、食品、环境等各个领域应用广泛。本实验以溶液色泽、出膏率和灵芝多糖的含量为指标，综合考察了离心的转速对提取液的作用，结果显示（如下表），离心的转速越大，离心的效果越好。4000r/min时已经可以达到应用要求，考虑到生产中实际情况，优选离心机转速为4000r/min。
离心转速的选择
B.膜过滤除杂工艺
本实验选择中空纤维膜为中国科学院生态环境研究中心研制开发，主要成份为聚丙烯，具有很好的耐酸碱和耐温性能,机械强度高，耐细菌腐蚀、化学稳定性好等特点。实验中进行了500KD、750KD和1000KD的三种型号中空纤维膜的筛选。
称取水提药材，在最佳水提条件下进行提取，滤过（200目），量取滤液的1/4直接浓缩、干燥，量取滤液的3/4离心，用1000KD的中空纤维膜滤过，滤液均分成3等份，1份直接减压浓缩、干燥；1份用750KD的中空纤维膜滤过；1份用500KD的中空纤维膜滤过，以3份膜滤后的滤液色泽、出膏量、指示性成分的含量（灵芝多糖）作为指标优选中空纤维膜的型号。结果表明（如下表）：750KD的中空纤维膜滤过效果好，膜后指示性成份减少不明显且色泽较好，而50KD中空纤维膜的滤液指标性成分减少的太多且出膏量最少，过1000KD中空纤维膜的滤液较浑浊，未达到去粗取精的目的。故选择用750KD中空纤维膜滤过。
不同型号膜的选择
具体实施方式
实施例1：取灵芝6g、刺梨12g，粉碎成粗粉，加水煎煮两次，每次加水8倍量，煎煮3小时，水煮液经200目网过滤，滤液通过4000r/min管式离心机离心后，得上清液；在上清液中按照重量份比1:1加入麦芽糊精和甘露醇，搅拌均匀，浓缩，得浸膏；将浸膏于65℃下微波真空干燥4小时，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
实施例2：一种保健茶，取灵芝8g、刺梨32g，粉碎成粗粉，加水煎煮两次，每次加水10倍量，煎煮3.5小时，水煮液经200目网过滤，滤液用750KD中空纤维膜滤过后，得上清液；在上清液中按照重量份比1:1加入麦芽糊精和甘露醇，搅拌均匀，浓缩，得浸膏；将浸膏于70℃下微波真空干燥4个小时，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
实施例3：取灵芝2g、刺梨8g，粉碎成粗粉，加水煎煮两次，每次加水5倍量，煎煮1小时，水煮液经200目网过滤，滤液通过4000r/min管式离心机离心后，得上清液；在上清液中按照重量份比1:1加入麦芽糊精和甘露醇，搅拌均匀，浓缩，得浸膏；将浸膏于50℃下微波真空干燥4个小时，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
实施例4：取灵芝6g、刺梨12g、沙棘10g，粉碎后加入40%～80%乙醇，浸泡4～6小时，回流提取，减压回收乙醇并浓缩成浸膏；将浸膏于90～95℃下微波真空干燥20～25分钟，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
实施例5：取灵芝6g、刺梨12g、葛根6g，粉碎成粗粉，加水煎煮2～5次，每次1～4小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度60℃为1.15～1.20的清膏，加入乙醇进行沉淀纯化，过滤，收集滤液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.15～1.20的浸膏，将浸膏于70℃下微波真空干燥2小时，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
实施例6：取灵芝6g、刺梨12g、山楂10g，粉碎成粗粉，加入60%～90%的乙醇溶液，乙醇溶液的用量为6～8倍，渗漉提取，过滤，合并醇液，减压回收乙醇并浓缩成相对密度为1.1～1.5的浸膏；将浸膏于50℃下微波真空干燥1个小时，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
实施例7：取灵芝6g、刺梨12g、沙棘10g、葛根6g，粉碎成粗粉，加水煎煮两次，每次加水7倍量，煎煮2.7小时，水煮液经200目网过滤，滤液用750KD中空纤维膜滤过后，得上清液；在上清液中按照重量份比1:1加入麦芽糊精和甘露醇，搅拌均匀，浓缩，得 浸膏；将浸膏于50℃下微波真空干燥1个小时，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
实施例8：取灵芝6g、刺梨12g、沙棘10g、山楂10g，粉碎成粗粉，加水煎煮2～5次，每次1～4小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度60℃为1.15～1.20的浸膏；将浸膏于98℃下干燥25分钟，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
实施例9：取灵芝6g、刺梨12g、葛根6g、山楂10g，粉碎成粗粉，加水煎煮2～5次，每次1～3.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度65℃为1.15～1.20的清膏，加入乙醇进行沉淀纯化，过滤，收集滤液，减压回收乙醇至65℃相对密度为1．15～1．20的浸膏；将浸膏于90℃下干燥2小时，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
实施例10：取灵芝6g、刺梨12g、沙棘10g、葛根6g、山楂10g，粉碎成粗粉，加水煎煮两次，每次加水10倍量，煎煮3.5小时，水煮液经200目网过滤，滤液用750KD中空纤维膜滤过后，得上清液；在上清液中按照重量份比1:1加入麦芽糊精和甘露醇，搅拌均匀，浓缩，得浸膏；将浸膏于70℃下干燥25分钟，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
Claims (9)
1.一种保健茶，其特征在于：按重量份计算，主要由灵芝和刺梨按照以下方法制备而成：取灵芝6份和刺梨12份，粉碎成粗粉，加水煎煮两次，每次加水5～10倍量，煎煮1～3.5小时，水煮液经200目网过滤，滤液通过4000r/min管式离心机离心后或用750KD中空纤维膜滤过后，得上清液；在上清液中按照重量份比1:1加入麦芽糊精和甘露醇，搅拌均匀，浓缩，得浸膏；将浸膏于50～70℃下微波真空干燥4个小时，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
2.根据权利要求1所述的保健茶，其特征在于：按照重量份计算，其原料还包括10份沙棘。
3.根据权利要求1所述的保健茶，其特征在于：按照重量份计算，其原料还包括6份葛根。
4.根据权利要求1所述的保健茶，其特征在于：按照重量份计算，其原料还包括10份沙棘和6份葛根。
5.根据权利要求1所述的保健茶，其特征在于：按照重量份计算，其原料还包括10份山楂。
6.根据权利要求1所述的保健茶，其特征在于：按照重量份计算，其原料还包括：10份沙棘与10份山楂，或者，6份葛根与10份山楂。
7.根据权利要求1所述的保健茶，其特征在于：按照重量份计算，其原料还包括10份沙棘、6份葛根和10份山楂。
8.如权利要求1所述保健茶的制备方法，其特征在于：取灵芝和刺梨，粉碎成粗粉，加水煎煮两次，每次加水5～10倍量，煎煮1～3.5小时，水煮液经200目网过滤，滤液通过4000r/min管式离心机离心后或用750KD中空纤维膜滤过后，得上清液；在上清液中按照重量份比1:1加入麦芽糊精和甘露醇，搅拌均匀，浓缩，得浸膏；将浸膏于50～70℃下微波真空干燥4个小时，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
9.一种保健茶的制备方法，其特征在于，按重量份计算，取灵芝6份、刺梨12份和沙棘10份，粉碎后加入40%～80%乙醇，浸泡4～6小时，回流提取，减压回收乙醇并浓缩成浸膏；将浸膏于90～95℃下微波真空干燥20～25分钟，粉碎，用95%乙醇制软材，40目筛制粒干燥后过60目筛，干燥，包装，即得。
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