CN103012612A - 一种枸杞多糖的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种枸杞多糖的提取方法，包括如下步骤：（1）将枸杞粉置于提取器中，加入石油醚萃取，干燥，得脱脂粉末；（2）将纤维素酶配制纤维素酶溶液；（3）将脱脂粉末溶于纤维素酶溶液中，超声浸提；（4）加热灭酶，冷却至室温后，抽滤除去固体，得到提取液；（5）蒸发提取液，浓缩，得浓缩液；（6）醇沉；（7）对醇沉液离心，取沉淀，以无水乙醇洗涤，冻干，得粗枸杞多糖。本发明的方法获得的枸杞多糖的收率高，得率可达到6.32%，较传统热水浸提法提高了62.6%；显著缩短了浸提时间，是热水浸提法所需浸提时间的1/9，因而其浸提效率高；降低了浸提温度，浸提条件温和，可以有效保护枸杞多糖的立体结构及生物活性。
Description
技术领域
本发明属于一种植物多糖的提取方法，尤其是涉及一种从中药材枸杞中提取多糖的方法。
背景技术
常规提取植物多糖的方法为溶剂提取法，超声波提取法及微波提取法。
其中溶剂提取法一般采用热水、酸的水溶液或碱的水溶液等作为溶剂，而尤以热水浸提法在多糖提取中应用最为广泛。溶剂提取法工艺比较简单，易于操作。然而，其提取效率低，同时较高的提取温度以及酸碱的存在容易破坏多糖的结构，降低多糖的生物活性。
超声波提取法是一种物理破碎过程，可以有效提高提取率，缩短提取时间，保护多糖活性结构，但杂质会与有效成分溶出，所以选择性较差，同时需要较大的超声功率，成本较高。
微波提取法的优点在于加热迅速，高效节能，且选择性好，然而微波对人体有伤害，微波泄漏的问题成为制约微波技术在天然药物有效成分浸提领域大规模应用的关键性问题。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种提取条件温和，提取率高，浸提时间短，同时还可以较好的保持天然产物的结构和生物活性的枸杞多糖的提取方法。
本发明的技术方案概述如下：
一种枸杞多糖的提取方法，包括如下步骤：
（1）将20质量份经真空干燥、粉碎并过80~120目筛获得的枸杞粉末置于提取器中，加入120~180质量份的石油醚萃取1~3次，每次2~4h，干燥，得脱脂粉末；
（2）将纤维素酶溶于pH为4~5的缓冲液中配制成浓度为1.5%~2.5%的纤维素酶溶液，所述缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液；
（3）将1质量份所述脱脂粉末溶于25~30质量份所述纤维素酶溶液中，在55~60℃，超声功率为60~100W下进行浸提10~30min；
（4）将步骤（3）反应后的液体置于沸水浴中加热10~15min灭酶，冷却至室温后，抽滤除去固体，得到提取液；
（5）旋转蒸发步骤（4）得到的提取液，于50~70℃下浓缩至所述提取液体积的1/5~1/4，得浓缩液；
（6）向所述浓缩液中加入3~5倍体积的无水乙醇，于2~6℃静置10~12h醇沉；
（7）对步骤（6）得到的醇沉液离心，取沉淀，以无水乙醇洗涤2~4次，冻干，得粗枸杞多糖。
步骤（1）优选为：将20质量份经真空干燥、粉碎并过100目筛获得的枸杞粉末置于提取器中，加入160质量份的石油醚萃取2次，每次3h，干燥，得脱脂粉末。
步骤（2）优选为：将纤维素酶溶于pH为4.6的缓冲液中配制成浓度为2.15%的纤维素酶溶液，所述缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。
步骤（3）优选为：将1质量份所述脱脂粉末溶于30质量份所述纤维素酶溶液中，在55.79℃，超声功率为78.6W下进行浸提20.29min。
步骤（4）优选为：将步骤（3）反应后的液体置于沸水浴中加热10min灭酶，冷却至室温后，抽滤除去固体，得到提取液。
步骤（5）优选为：旋转蒸发步骤（4）得到的提取液，于60℃下浓缩至所述提取液体积的1/5，得浓缩液。
步骤（6）优选为：向所述浓缩液中加入4倍体积的无水乙醇，于4℃静置12h醇沉。
步骤（7）优选为：对步骤（6）得到的醇沉液离心，取沉淀，以无水乙醇洗涤3次，冻干，得粗枸杞多糖。
本发明的方法获得的枸杞多糖的收率高，得率可达到6.32%，较传统热水浸提法提高了62.6%；显著缩短了浸提时间，是热水浸提法所需浸提时间的1/9，因而其浸提效率大大提高；降低了浸提温度，浸提条件温和，可以有效保护枸杞多糖的立体结构及生物活性。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。下面的实施例是为了使本领域的技术人员能够更好地理解本发明，并不对本发明作任何限制。
本发明所采用的药材枸杞子为茄科植物宁夏枸杞的干燥成熟果实。
实施例1
一种枸杞多糖的提取方法，包括如下步骤：
（1）将20质量份经真空干燥、粉碎并过100目筛获得的枸杞粉末置于提取器中，加入160质量份的石油醚萃取2次，每次3h，干燥，得脱脂粉末；
（2）将纤维素酶溶于pH为4.6的缓冲液中配制成浓度为2.15%的纤维素酶溶液，所述缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液；
（3）将1质量份所述脱脂粉末溶于30质量份所述纤维素酶溶液中，在在55.79℃，超声功率为78.6W下进行浸提20.29min；
（4）将步骤（3）反应后的液体置于沸水浴中加热10min灭酶，冷却至室温后，抽滤除去固体，得到提取液；
（5）旋转蒸发步骤（4）得到的提取液，于60℃下浓缩至所述提取液体积的1/5，得浓缩液；
（6）向所述浓缩液中加入4倍体积的无水乙醇，于4℃静置12h醇沉；
（7）对步骤（6）得到的醇沉液离心，取沉淀，以无水乙醇洗涤3次，冻干，得粗枸杞多糖。收率6.32%。
实施例2
一种枸杞多糖的提取方法，包括如下步骤：
（1）将20质量份经真空干燥、粉碎并过80目筛获得的枸杞粉末置于提取器中，加入160质量份的石油醚萃取2次，每次3h，干燥，得脱脂粉末；
（2）将纤维素酶溶于pH为4的缓冲液中配制成浓度为2.5%的纤维素酶溶液，所述缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液；
（3）将1质量份所述脱脂粉末溶于25质量份所述纤维素酶溶液中，在55℃，超声功率为100W下进行浸提10min；
（4）将步骤（3）反应后的液体置于沸水浴中加热10min灭酶，冷却至室温后，抽滤除去固体，得到提取液；
（5）旋转蒸发步骤（4）得到的提取液，于50℃下浓缩至所述提取液体积的1/4，得浓缩液；
（6）向所述浓缩液中加入3倍体积的无水乙醇，于4℃静置11h醇沉；
（7）对步骤（6）得到的醇沉液离心，取沉淀，以无水乙醇洗涤2次，冻干，得粗枸杞多糖。收率5.35%。
实施例3
一种枸杞多糖的提取方法，包括如下步骤：
（1）将20质量份经真空干燥、粉碎并过100目筛获得的枸杞粉末置于提取器中，加入180质量份的石油醚萃取1次，时间4h，干燥，得脱脂粉末；
（2）将纤维素酶溶于pH为4.6的缓冲液中配制成浓度为2.0%的纤维素酶溶液，所述缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液；
（3）将1质量份所述脱脂粉末溶于28质量份所述纤维素酶溶液中，在58℃，超声功率为80W下进行浸提20min；
（4）将步骤（3）反应后的液体置于沸水浴中加热13min灭酶，冷却至室温后，抽滤除去固体，得到提取液；
（5）旋转蒸发步骤（4）得到的提取液，于60℃下浓缩至所述提取液体积的1/4，得浓缩液；
（6）向所述浓缩液中加入4倍体积的无水乙醇，于6℃静置10h醇沉；
（7）对步骤（6）得到的醇沉液离心，取沉淀，以无水乙醇洗涤3次，冻干，得粗枸杞多糖。收率5.96%。
实施例4
一种枸杞多糖的提取方法，包括如下步骤：
（1）将20质量份经真空干燥、粉碎并过120目筛获得的枸杞粉末置于提取器中，加入120质量份的石油醚萃取3次，每次2h，干燥，得脱脂粉末；
（2）将纤维素酶溶于pH为5的缓冲液中配制成浓度为1.5%的纤维素酶溶液，所述缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液；
（3）将1质量份所述脱脂粉末溶于30质量份所述纤维素酶溶液中，在60℃，超声功率为60W下进行浸提30min；
（4）将步骤（3）反应后的液体置于沸水浴中加热15min灭酶，冷却至室温后，抽滤除去固体，得到提取液；
（5）旋转蒸发步骤（4）得到的提取液，于70℃下浓缩至所述提取液体积的1/5，得浓缩液；
（6）向所述浓缩液中加入5倍体积的无水乙醇，于2℃静置12h醇沉；
（7）对步骤（6）得到的醇沉液离心，取沉淀，以无水乙醇洗涤4次，冻干，得粗枸杞多糖。收率4.51%。
Claims (8)
1.一种枸杞多糖的提取方法，其特征是包括如下步骤：
（1）将20质量份经真空干燥、粉碎并过80~120目筛获得的枸杞粉末置于提取器中，加入120~180质量份的石油醚萃取1~3次，每次2~4h，干燥，得脱脂粉末；
（2）将纤维素酶溶于pH为4~5的缓冲液中配制成浓度为1.5%~2.5%的纤维素酶溶液，所述缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液；
（3）将1质量份所述脱脂粉末溶于25~30质量份所述纤维素酶溶液中，在55~60℃，超声功率为60~100W下进行浸提10~30min；
（4）将步骤（3）反应后的液体置于沸水浴中加热10~15min灭酶，冷却至室温后，抽滤除去固体，得到提取液；
（5）旋转蒸发步骤（4）得到的提取液，于50~70℃下浓缩至所述提取液体积的1/5~1/4，得浓缩液；
（6）向所述浓缩液中加入3~5倍体积的无水乙醇，于2~6℃静置10~12h醇沉；
（7）对步骤（6）得到的醇沉液离心，取沉淀，以无水乙醇洗涤2~4次，冻干，得粗枸杞多糖。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤（1）为：将20质量份经真空干燥、粉碎并过100目筛获得的枸杞粉末置于提取器中，加入160质量份的石油醚萃取2次，每次3h，干燥，得脱脂粉末。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤（2）为：将纤维素酶溶于pH为4.6的缓冲液中配制成浓度为2.15%的纤维素酶溶液，所述缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤（3）为：将1质量份所述脱脂粉末溶于30质量份所述纤维素酶溶液中，在55.79℃，超声功率为78.6W下进行浸提20.29min。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤（4）为：将步骤（3）反应后的液体置于沸水浴中加热10min灭酶，冷却至室温后，抽滤除去固体，得到提取液。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤（5）为：旋转蒸发步骤（4）得到的提取液，于60℃下浓缩至所述提取液体积的1/5，得浓缩液。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤（6）为：向所述浓缩液中加入4倍体积的无水乙醇，于4℃静置12h醇沉。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤（7）为：对步骤（6）得到的醇沉液离心，取沉淀，以无水乙醇洗涤3次，冻干，得粗枸杞多糖。
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