CN101974096A - 一种高效提取裙带菜孢子叶多糖的方法 - Google Patents
一种高效提取裙带菜孢子叶多糖的方法 Download PDFInfo
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Abstract
高效提取裙带菜孢子叶多糖的方法,水分含量8-10%以下裙带菜孢子叶粉碎成粉末;粉末中加入水并超声波处理;用盐酸调pH加入纤维素酶酶解并干燥成粉;粉中加入乙醇浸提后离心得上清液和沉淀物;上清液蒸发干燥得低分子量多糖;沉淀物加水,用盐酸调pH浸提,离心分离得上清液和沉淀物;浓缩上清液至原重量的1/5-1/3,醇沉得沉淀物;干燥沉淀物得裙带菜高分子量多糖。超声辅助酶解技术更利于糖的提取;连续采用醇提和水提分别提取裙带菜低分子量多糖和高分子量多糖,提取充分,原料利用率高,大大降低裙带菜多糖的提取成本。
Description
技术领域:
本发明涉及一种用裙带菜特别是裙带菜的孢子叶作为原料,采取浸泡提取,分离提取高分子量和低分子量多糖的加工方法。
背景技术:
海洋面积辽阔,海洋植物多糖逐步成为生物多糖的主要来源之一。我国现在裙带菜经过人工养殖,年产量最高达40万吨,位居世界首位。裙带菜制成的各种快餐食品、休闲食品、营养和保健食品如雨后春笋般涌向市场,但其产品远远不能满足人们的需求,所以裙带菜的加工与利用也逐步进入了深层加工时期,这为裙带菜的利用与加工带来了更为广阔的发展空间。
裙带菜含有多种生物活性物质,其主要成分为多糖。目前从裙带菜中发现了3种主要的多糖:褐藻胶、褐藻糖胶、褐藻淀粉。研究表明,裙带菜含有丰富的褐藻酸,具有一定的抗癌作用。它还能增强由无机物、氨基酸和糖类形成的协同风味,保持食品的天然风味。此外,其含有独特的生理调节活性物质,如裙带菜氨酸、高不饱和脂肪酸、多卤多萜类化合物、甾醇类化合物等,既能维持和促进人体健康,又可改善无机物的平衡关系,因此,近年来国内外都很重视对裙带菜食品保健功能的研究。
目前对海洋植物中多糖的提取方法很多,包括水提法、酸提法、碱提法、酶提法、超声波提取法等,但这些方法并不适合对高、低分子量多糖的同时提取;裙带菜制品在此方面的研究多停留在将裙带菜加入到食品中,而对裙带菜多糖等活性物质作为功能食品的应用,以及加入其它食品中的研究尚少,因此,发明一种高效提取高、低分子量多糖的方法已备受关注。
发明内容:
本发明一种高效提取裙带菜孢子叶多糖的方法,其步骤如下:
A.原料及处理:将水份含量8-10%以下的裙带菜孢子叶,粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下的粉末作为原料;向粉末中加入40-60倍重量的水,用300-800W超声波处理10-30min;用4-8mol/L盐酸调pH为4-6,加入原料重量0.5-2.0%的纤维素酶,40-60℃下酶解2-4小时;将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
B.低分子量多糖提取:向酶解物干粉中加入3-5倍重量的无水乙醇,浸提8-14小时,用管式离心机于≥10000×g离心10-20min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在40-60℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖,得率为1-5%;;
C.高分子量多糖的提取:向沉淀物A中加入20-30倍重量的水,用4-8mol/L盐酸调pH为4-6,于80-100℃下浸提3-10小时,用管式离心机于≥10000×g离心10-20min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/5-1/3,加入3-5倍重量的无水乙醇,醇沉8-12小时,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.1-0.2MPa,温度35-85℃,得裙带菜高分子量多糖,得率为5-15%。
也就是本发明的高效提取裙带菜多糖的方法,原料及处理和低分子量多糖、高分子量多糖分步分别提取提取的步骤。
1.原料及处理:将裙带菜孢子叶洗净,晒干使其水分含量达到8-10%以下,并用超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下的粉末作为原料;向原料的粉末中加入40-60倍重量的水进行浸提,用300-800W的超声波进行处理10-30min;用4-8mol/L盐酸调pH达到为4-6,再加入纤维素酶,纤维素酶加量为原料质量(重量)的0.5-2.0%,在40-60℃下酶解2-4小时;将酶解得到的液体置于喷雾干燥器中进行干燥,得到裙带菜孢子叶酶解物干粉;
2.低分子量多糖的提取:向裙带菜孢子叶酶解物干粉中加入3-5倍重量的无水乙醇,进行浸提8-14小时,用管式离心机于≥10000×g离心10-20min,分离得到上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在40-60℃下进行干燥,从而得到裙带菜孢子叶低分子量多糖产品,低分子量多糖的得率为原料重量的1-5%;
3.高分子量多糖的提取:向沉淀物A中加入20-30倍重量的水进行浸提,用4-8mol/L盐酸调pH为4-6,于80-100℃下浸提3-10小时,浸提后用管式离心机于≥10000×g离心分离10-20min,分离得到上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/5-1/3后,再加入浓缩上清液B3-5倍重量的无水乙醇,进行醇沉8-12小时,得到上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.1-0.2MPa,温度35-85℃,得到裙带菜孢子叶的高分子量多糖产品,高分子量多糖的得率为原料重量的5-15%。
本发明与已有技术相比具有如下效果有优点:
1.超细粉碎:采用超微粉碎机对原料多次粉碎,提高组织中多糖的释放量,提高了多糖提取率。
2.超声辅助酶解:超声波能引起空化等一系列的特殊效应,可促进物料中有效成分的溶出,与酶解法结合更利于糖的提取。
3.连续制备:连续采用醇提和水提分别提取裙带菜低分子量多糖和高分子量多糖,多糖提取充分,原料利用率高,低分子量多糖产品得率为1-5%,高分子量多糖产品得率为5-15%。;裙带菜高、低分子量多糖在理化性质、生物活性方面存在较大差异,将其分别制备,拓宽了裙带菜多糖的应用空间。
具体实施方式:
实施例1
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入40倍重量的水,300W超声波处理10min;用6mol/L盐酸调pH为4,加入纤维素酶5g,40℃下酶解2h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提8h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在60℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品12.4g;
向沉淀物A中加入20倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为5,于80℃下浸提3h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/5,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉8h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.1MPa,温度35℃,得裙带菜高分子量多糖产品60.6g。
实施例2
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入40倍重量的水,300W超声波处理20min;用6mo l/L盐酸调pH为5,加入纤维素酶12.5g,60℃下酶解2h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提11h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在50℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品13.9g;
向沉淀物A中加入25倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为6,于80℃下浸提6.5h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/4,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉12h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.1MPa,温度60℃,得裙带菜高分子量多糖产品66.5g。
实施例3
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入40倍重量的水,300W超声波处理10min;用6mol/L盐酸调pH为6,加入纤维素酶20g,50℃下酶解3h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提8h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在40℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品13.8g;
向沉淀物A中加入30倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为4,于90℃下浸提10h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/3,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉12h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.1MPa,温度60℃,得裙带菜高分子量多糖产品72.0g。
实施例4
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入40倍重量的水,550W超声波处理20min;用6mol/L盐酸调pH为4,加入纤维素酶5g,40℃下酶解3h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提11h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在60℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品19.7g;
向沉淀物A中加入25倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为5,于80℃下浸提3h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/5,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉8h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.1MPa,温度85℃,得裙带菜高分子量多糖产品67.7g。
实施例5
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入40倍重量的水,550W超声波处理20min;用6mol/L盐酸调pH为5,加入纤维素酶12.5g,50℃下酶解3h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提14h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在50℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品20.5g;
向沉淀物A中加入30倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为6,于90℃下浸提6.5h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/4,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉10h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.1MPa,温度35℃,得裙带菜高分子量多糖产品77.1g。
实施例6
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入40倍重量的水,550W超声波处理30min;用6mol/L盐酸调pH为6,加入纤维素酶20g,40℃下酶解3h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提14h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在40℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品15.8g;
向沉淀物A中加入20倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为4,于90℃下浸提3h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/3,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉8h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.1MPa,温度35℃,得裙带菜高分子量多糖产品67.3g。
实施例7
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入40倍重量的水,800W超声波处理10min;用6mol/L盐酸调pH为4,加入纤维素酶5g,40℃下酶解4h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提8h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在60℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品17.9g;
向沉淀物A中加入25倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为5,于80℃下浸提6.5h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/5,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉10h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.1MPa,温度60℃,得裙带菜高分子量多糖产品90.3g。
实施例8
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入40倍重量的水,800W超声波处理10min;用6mol/L盐酸调pH为5,加入纤维素酶12.5g,60℃下酶解3h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提8h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在50℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品25.2g;
向沉淀物A中加入30倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为6,于100℃下浸提6.5h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/4,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉10h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.1MPa,温度85℃,得裙带菜高分子量多糖产品89.7g。
实施例9
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入40倍重量的水,800W超声波处理20min;用6mol/L盐酸调pH为6,加入纤维素酶20g,40℃下酶解4h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提11h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在40℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品25.4g;
向沉淀物A中加入20倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为4,于100℃下浸提10h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/3,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉8h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.1MPa,温度35℃,得裙带菜高分子量多糖产品79.0g。
实施例10
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入40倍重量的水,800W超声波处理30min;用6mol/L盐酸调pH为4,加入纤维素酶5g,40℃下酶解4h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提14h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在60℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品34.6g;
向沉淀物A中加入20倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为5,于100℃下浸提10h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/5,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉8h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.1MPa,温度60℃,得裙带菜高分子量多糖产品121.2g。
实施例11
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入40倍重量的水,800W超声波处理30min;用6mol/L盐酸调pH为5,加入纤维素酶12.5g,50℃下酶解4h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提14h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在50℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品33.7g;
向沉淀物A中加入25倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为6,于100℃下浸提10h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/4,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉8h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.2MPa,温度85℃,得裙带菜高分子量多糖产品129.6g。
实施例12
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入50倍重量的水,300W超声波处理10min;用6mol/L盐酸调pH为6,加入纤维素酶20g,50℃下酶解2h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提8h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在40℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品29.2g;
向沉淀物A中加入25倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为4,于80℃下浸提3h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/3,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉8h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.2MPa,温度35℃,得裙带菜高分子量多糖产品117.7g。
实施例13
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入50倍重量的水,300W超声波处理20min;用4mol/L盐酸调pH为4,加入纤维素酶5g,50℃下酶解2h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提11h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在60℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品26.2g;
向沉淀物A中加入30倍重量的水,用4mol/L盐酸调pH为5,于90℃下浸提10h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/5,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉12h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.2MPa,温度60℃,得裙带菜高分子量多糖产品109.1g。
实施例14
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入50倍重量的水,300W超声波处理30min;用4mol/L盐酸调pH为5,加入纤维素酶12.5g,50℃下酶解4h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提14h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在50℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品36.4g;
向沉淀物A中加入20倍重量的水,用4mol/L盐酸调pH为6,于80℃下浸提3h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/4,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉10h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.2MPa,温度85℃,得裙带菜高分子量多糖产品122.8g。
实施例15
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入50倍重量的水,300W超声波处理30min;用4mol/L盐酸调pH为6,加入纤维素酶20g,50℃下酶解2h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提14h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在40℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品42.3g;
向沉淀物A中加入25倍重量的水,用4mol/L盐酸调pH为4,于80℃下浸提6.5h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/3,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉12h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.2MPa,温度35℃,得裙带菜高分子量多糖产品136.8g。
实施例16
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入50倍重量的水,550W超声波处理10min;用4mol/L盐酸调pH为4,加入纤维素酶5g,60℃下酶解3h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提8h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在60℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品42.6g;
向沉淀物A中加入20倍重量的水,用4mol/L盐酸调pH为5,于80℃下浸提6.5h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/5,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉10h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.2MPa,温度60℃,得裙带菜高分子量多糖产品128.3g。
实施例17
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入50倍重量的水,550W超声波处理20min;用8mol/L盐酸调pH为5,加入纤维素酶12.5g,50℃下酶解3h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提11h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在50℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品37.1g;
向沉淀物A中加入25倍重量的水,用8mol/L盐酸调pH为6,于90℃下浸提6.5h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/4,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉12h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.2MPa,温度60℃,得裙带菜高分子量多糖产品128.5g。
实施例18
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入50倍重量的水,800W超声波处理10min;用8mol/L盐酸调pH为6,加入纤维素酶20g,50℃下酶解4h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提8h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在40℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品38.9g;
向沉淀物A中加入25倍重量的水,用8mol/L盐酸调pH为4,于100℃下浸提3h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/3,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉10h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.2MPa,温度85℃,得裙带菜高分子量多糖产品128.3g。
实施例19
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入50倍重量的水,800W超声波处理20min;用8mol/L盐酸调pH为4,加入纤维素酶5g,40℃下酶解4h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提11h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在60℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品34.0g;
向沉淀物A中加入25倍重量的水,用8mol/L盐酸调pH为5,于100℃下浸提10h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/5,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉8h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.2MPa,温度35℃,得裙带菜高分子量多糖产品126.4g。
实施例20
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入50倍重量的水,800W超声波处理30min;用8mol/L盐酸调pH为5,加入纤维素酶12.5g,40℃下酶解3h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提8h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在50℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品28.1g;
向沉淀物A中加入20倍重量的水,用8mol/L盐酸调pH为6,于100℃下浸提10h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/4,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉10h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.2MPa,温度35℃,得裙带菜高分子量多糖产品119.4g。
实施例21
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入60倍重量的水,300W超声波处理10min;用8mol/L盐酸调pH为6,加入纤维素酶20g,60℃下酶解2h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提11h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在40℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品44.0g;
向沉淀物A中加入25倍重量的水,用8mol/L盐酸调pH为4,于80℃下浸提3h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/3,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉8h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.15MPa,温度60℃,得裙带菜高分子量多糖产品137.5g。
实施例22
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入60倍重量的水,300W超声波处理20min;用6mol/L盐酸调pH为4,加入纤维素酶5g,40℃下酶解2h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提11h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在60℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品40.7g;
向沉淀物A中加入30倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为5,于90℃下浸提3h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/5,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉12h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.15MPa,温度85℃,得裙带菜高分子量多糖产品133.2g。
实施例23
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入60倍重量的水,300W超声波处理30min;用6mol/L盐酸调pH为5,加入纤维素酶12.5g,60℃下酶解2h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提14h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在50℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品44.5g;
向沉淀物A中加入30倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为6,于80℃下浸提6.5h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/4,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉10h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.15MPa,温度35℃,得裙带菜高分子量多糖产品140.2g。
实施例24
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入60倍重量的水,550W超声波处理10min;用6mol/L盐酸调pH为6,加入纤维素酶20g,60℃下酶解3h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提8h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在40℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品38.6g;
向沉淀物A中加入30倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为4,于90℃下浸提3h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/3,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉12h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.15MPa,温度60℃,得裙带菜高分子量多糖产品130.5g。
实施例25
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入60倍重量的水,550W超声波处理20min;用6mol/L盐酸调pH为4,加入纤维素酶5g,40℃下酶解4h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提11h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在50℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品40.6g;
向沉淀物A中加入25倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为5,于90℃下浸提10h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/5,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉12h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.15MPa,温度85℃,得裙带菜高分子量多糖产品126.2g。
实施例26
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入60倍重量的水,550W超声波处理30min;用6mol/L盐酸调pH为5,加入纤维素酶12.5g,60℃下酶解3h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提14h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在40℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品44.3g;
向沉淀物A中加入20倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为6,于100℃下浸提3h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/4,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉8h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.15MPa,温度35℃,得裙带菜高分子量多糖产品143.6g。
实施例27
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入60倍重量的水,800W超声波处理30min;用6mol/L盐酸调pH为6,加入纤维素酶20g,40℃下酶解4h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提8h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在60℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品39.1g;
向沉淀物A中加入30倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为4,于100℃下浸提10h,用管式离心机于≥10000×g离心20min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/3,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉8h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.15MPa,温度60℃,得裙带菜高分子量多糖产品131.0g。
实施例28
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入60倍重量的水,800W超声波处理30min;用6mol/L盐酸调pH为4,加入纤维素酶5g,60℃下酶解4h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提14h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在50℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品39.8g;
向沉淀物A中加入30倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为5,于100℃下浸提10h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/5,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉12h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.15MPa,温度85℃,得裙带菜高分子量多糖产品135.4g。
实施例29
将裙带菜孢子叶洗净,晒干(水分含量8%以下),超微粉碎机反复粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下粉末,取1公斤粉末作为原料,加入60倍重量的水,800W超声波处理30min;用6mol/L盐酸调pH为5,加入纤维素酶12.5g,60℃下酶解4h,将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
向酶解物干粉中加入3倍重量的无水乙醇,浸提14h,用管式离心机于≥10000×g离心15min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在40℃下干燥,得裙带菜低分子量多糖产品41.2g;
向沉淀物A中加入20倍重量的水,用6mol/L盐酸调pH为6,于90℃下浸提6.5h,用管式离心机于≥10000×g离心10min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原重量的1/4,加入3倍重量的无水乙醇,醇沉10h,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.15MPa,温度35℃,得裙带菜高分子量多糖产品129.2g。
Claims (1)
1.一种高效提取裙带菜孢子叶多糖的方法,其步骤如下:
A.原料及处理:将水分含量8-10%以下裙带菜孢子叶,粉碎至颗粒粒度为1.0mm以下的粉末作为原料;向粉末中加入40-60倍重量的水,用300-800W超声波处理10-30min;用4-8mol/L盐酸调pH为4-6,加入原料重量0.5-2.0%的纤维素酶,40-60℃下酶解2-4小时;将酶解液置于喷雾干燥器中干燥,得裙带菜孢子叶酶解物干粉;
B.低分子量多糖提取:向酶解物干粉中加入3-5倍重量的无水乙醇,浸提8-14小时,用管式离心机于≥10000×g离心10-20min,得上清液A和沉淀物A;上清液A用旋转蒸发仪在40-60℃下干燥,得裙带菜孢子叶低分子量多糖;
C.高分子量多糖的提取:向沉淀物A中加入20-30倍重量的水,用4-8mol/L盐酸调pH为4-6,于80-100℃下浸提3-10小时,用管式离心机于≥10000×g离心10-20min,得上清液B和沉淀物B;浓缩上清液B至原体积的1/5-1/3,加入3-5倍重量的无水乙醇,醇沉8-12小时,得上清液C和沉淀物C;用真空干燥机干燥沉淀物C,控制真空度0.1-0.2MPa,温度35-85℃,得裙带菜孢子叶高分子量多糖。
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