CN103125989B - 一种提取鱼脑油、鱼脑肽的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种提取鱼脑油的方法，步骤为：首先，取鱼脑，匀浆。其次，超声辅助复合酶酶解：加入中性蛋白酶酶解；灭酶后，加入碱性蛋白酶酶解，灭酶。最后，酶解液干燥，经超临界二氧化碳萃取法提取油。同时，提取油后的残渣可直接用于提取鱼脑肽。本发明首次从鱼脑中同时制备健脑肽和油，提高了生产效率。而且采用复合酶酶解-超临界二氧化碳法提取鱼脑油，提取过程中不使用有机溶剂，方法绿色、环保，油回收率高。此后超滤法制备鱼脑肽，同样具有产品性状好、回收率高的特点。
Description
技术领域
本发明涉及鱼脑物质的提取方法，更具体的说，涉及鱼脑油、鱼脑肽的提取方法。
背景技术
从20世纪50年代以来，世界渔业总产量一直以6%-7%的速度增加，尽管渔业产量早已超过一亿吨，但有近1/3的渔获物未能被人类直接利用。我国水产品总量已经超过5200万吨，已经连续20年成为世界渔业生产第一大国。鱼头是鱼类加工过程中的主要下脚料，占据了鱼总重量的15-30％左右。鱼头富含蛋白质、脂肪、钙、磷、铁、维生素，蛋白质的氨基酸模式接近于人体需要，脂肪酸中富含DHA、EPA等不饱和脂肪酸和磷脂，具有一定的开发利用价值。
目前对鱼头的开发利用主要有以下途径：①直接鲜冻或冰冻鱼头，做成鱼头火锅等半成品，供应市场。这种方法主要针对部分鱼头，应用有限；②将鱼头干燥、粉碎，碾成鱼骨粉，加工成动物饲料。这种方法虽然简单，但生产的产品附加值较低；③从鱼头中回收蛋白质（肽）和鱼油，开发出相关产品。这种方法近年来研究较多，但相关技术工艺尚未成熟，未真正实现大规模产业化应用。针对目前对鱼头利用水平不高，加工品技术含量低、附加值低等系列问题，急需寻找解决方案。
脑蛋白水解物具有中枢神经营养和中枢神经保护的作用，其相关如脑活素是近年来应用最多的药物之一。目前采用的脑蛋白水解物原料主要为猪脑或牛脑。疯牛病、猪流感等陆生动物性疾病的爆发，使人们对牛源性和猪源性脑蛋白水解物类产品有所顾虑。本专利以鱼脑为原料，以脑活素为技术背景，生产氨基酸和生物活性肽的混合体，具有特殊的健脑益智功能，拓宽了鱼头的利用途径。
发明内容
本发明基于鱼脑旨在提供一种操作简便环保、提取效率高、质量佳的鱼脑油、鱼脑肽提取方法。
为了达到上述目的，本发明首先提供了一种提取鱼脑油的方法，包括如下步骤：
S1、取鱼脑，匀浆，获得匀浆液；
S2、超声辅助复合酶酶解：用300-800瓦超声波处理所述匀浆液5-30分钟；调pH为6-9；加入中性蛋白酶，在30-70℃下酶解；酶解后在90-100℃灭酶；
S3、再调pH为7-11；加入碱性蛋白酶，30-70℃酶解，酶解后在90-100℃灭酶；
S4、所述酶解液经干燥得干粉；
S5、采用超临界二氧化碳萃取法提取所述干粉中的油。
优选方式下，步骤S2中所述中性蛋白酶选用EC 3.4.24.28；步骤S3中所述碱性蛋白酶选用EC 3.4.21.14；所述中性蛋白酶和所述碱性蛋白酶的加入量均为所述匀浆液重量的0.1-1.0%，酶解时间均为1-4小时；灭酶时间均10分钟以上。此外，优选方式下，步骤S2和S3中调节pH选用柠檬酸或氢氧化钠。
步骤S5超临界萃取条件为萃取压力15-35兆帕，萃取温度30-50℃，CO2流速5-20升/小时，萃取时间60-120分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度35-45℃、压力8-10兆帕沉淀于第一分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度25-35℃，压力2-4兆帕下沉淀于第二分离器底部；收集合并油，得鱼脑油。优选方式下，步骤S5中，分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
本发明进一步改进在于，针对上述工艺过程，本发明还提供了一种提取鱼脑肽的方法，包括如下步骤：
A1、取鱼脑，匀浆，获得匀浆液；
A2、超声辅助复合酶酶解：用300-800瓦超声波处理所述匀浆液5-30分钟；调pH为6-9；加入中性蛋白酶，在30-70℃下酶解；酶解后在90-100℃灭酶；
A3、再调pH为7-11；加入碱性蛋白酶，30-70℃酶解，酶解后在90-100℃灭酶；
A4、所述酶解液经干燥得干粉；
A5、采用超临界二氧化碳萃取法提取所述干粉中的油，并获得残渣；
A6、将所述残渣以体积/重量比溶于3-5倍的蒸馏水，调pH至中性，于大于等于5000×g离心10-20分钟，取上清，经3000道尔顿超滤膜滤过，滤过液经干燥后即得鱼脑肽。
优选方式下，步骤A2中所述中性蛋白酶选用EC 3.4.24.28；步骤A3中所述碱性蛋白酶选用EC 3.4.21.14；所述中性蛋白酶和所述碱性蛋白酶的加入量均为所述匀浆液重量的0.1-1.0%，酶解时间均为1-4小时；灭酶时间均10分钟或10分钟以上。此外，优选方式下，步骤A2和A3中调节pH选用柠檬酸或氢氧化钠。
步骤A5超临界萃取条件为萃取压力15-35兆帕，萃取温度30-50℃，CO2流速5-20升/小时，萃取时间60-120分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度35-45℃、压力8-10兆帕沉淀于第一分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度25-35℃，压力2-4兆帕下沉淀于第二分离器底部；收集合并油，得鱼脑油。优选方式下，步骤S5中，分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
本发明的产品具有健脑功效，本发明与现有技术相比本发明具有如下优点：
1、首次从鱼脑中同时制备健脑肽和油，提高了生产效率。
2、采用复合酶酶解-超临界二氧化碳法提取鱼脑油，提取过程中不使用有机溶剂，方法绿色、环保，油回收率高。
3、采用复合酶酶解-超临界二氧化碳脱脂-超滤法制备鱼脑肽，样品性状好，回收率高。
本发明最大的贡献在于变废为宝，充分利用过去渔业的废弃物鱼头，制备健脑产品，提升产品附加值，适合渔业地区广泛推广。
具体实施方式
发明公开了一种提取鱼脑肽、氨基酸和油的方法，依次包括如下步骤：
1、原料获取及处理：新鲜（或冷冻保存，流水解冻）的鱼头，揭开头盖，取出鱼脑，匀浆。
2、超声辅助复合酶酶解：鱼脑匀浆液用300-800瓦超声波处理5-30分钟；用1-3摩尔/升柠檬酸或氢氧化钠调pH为6-9；加入中性蛋白酶（EC 3.4.24.28），酶加量为鱼脑匀浆重量的0.1-1.0%，30-70℃酶解1-4小时；90-100℃灭酶10分钟以上；用1-3摩尔/升氢氧化钠调pH为7-11；加入碱性蛋白酶（EC3.4.21.14），酶加量为鱼脑匀浆重量的0.1-1.0%，30-70℃酶解1-4小时；90-100℃灭酶10分钟以上；酶解液经干燥得干粉。
3、超临界二氧化碳法萃取鱼脑油：采用超临界二氧化碳法提取鱼脑酶解液干粉中的油，超临界萃取条件为萃取压力15-35兆帕，萃取温度30-50℃，CO2流速5-20升/小时，萃取时间60-120分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度35-45℃、压力8-10兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度25-35℃，压力2-4兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；收集合并分离器中油，即得鱼脑油产品；分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
4、超滤法制备鱼脑健脑肽：提油后残渣溶于3-5倍体积（v/w）的蒸馏水，调pH至中性，于>=5000×g离心10-20分钟，取上清，经3000道尔顿超滤膜滤过，滤过液经干燥后即得鱼脑肽。
实施例1：以新鲜的鱼头为原料，揭开头盖取出鱼脑后匀浆。匀浆液用300瓦超声波处理10分钟；用1摩尔/升柠檬酸调pH为6；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.1%的中性蛋白酶（EC 3.4.24.28），70℃酶解1小时；100℃灭酶10分钟；用1摩尔/升氢氧化钠调pH为7；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.1%的碱性蛋白酶（EC 3.4.21.14），30℃酶解4小时；90℃灭酶15分钟；酶解液经干燥得干粉。
采用超临界二氧化碳法提取鱼脑酶解液干粉中的油，超临界萃取条件为：萃取压力15兆帕，萃取温度30℃，CO2流速5升/小时，萃取时间60分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度35℃、压力8兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度25℃，压力2兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；收集合并分离器中油，即得鱼脑油产品；分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
提油后残渣溶于3倍体积（v/w）的蒸馏水，调pH至中性，于5000×g离心15分钟，取上清，经3000道尔顿超滤膜滤过，滤过液经干燥后即得鱼脑肽。
实施例2：以新鲜的鱼头为原料，揭开头盖取出鱼脑后匀浆。匀浆液用800瓦超声波处理:30分钟；用3摩尔/升氢氧化钠调pH为9；加入重量为鱼脑匀浆重量的1.0%的中性蛋白酶（EC 3.4.24.28），30℃酶解4小时；100℃灭酶10分钟；用3摩尔/升氢氧化钠调pH为11；加入重量为鱼脑匀浆重量的1.0％的碱性蛋白酶（EC 3.4.21.14），70℃酶解4小时；100℃灭酶10分钟；酶解液经干燥得干粉。
采用超临界二氧化碳法提取鱼脑酶解液干粉中的油，超临界萃取条件为：萃取压力35兆帕，萃取温度50℃，CO2流速20升/小时，萃取时间120分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度45℃、压力10兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度35℃，压力4兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；收集合并分离器中油，即得鱼脑油产品；分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
提油后残渣溶于5倍体积（v/w）的蒸馏水，调pH至中性，于15000×g离心20分钟，取上清，经3000道尔顿超滤膜滤过，滤过液经干燥后即得鱼脑肽。
实施例3：以新鲜的鱼头为原料，揭开头盖取出鱼脑后匀浆。匀浆液用400瓦超声波处理20分钟；用3摩尔/升柠檬酸调pH为7；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.5%的中性蛋白酶（EC 3.4.24.28），60℃酶解2小时；95℃灭酶10分钟；用3摩尔/升氢氧化钠调pH为8；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.5%的碱性蛋白酶（EC 3.4.21.14），40℃酶解3小时；95℃灭酶10分钟；酶解液经干燥得干粉。
采用超临界二氧化碳法提取鱼脑酶解液干粉中的油，超临界萃取条件为：萃取压力20兆帕，萃取温度35℃，CO2流速10升/小时，萃取时间80分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度35℃、压力8兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度25℃，压力4兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；收集合并分离器中油，即得鱼脑油产品；分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
提油后残渣溶于4倍体积（v/w）的蒸馏水，调pH至中性，于10000×g离心15分钟，取上清，经3000道尔顿超滤膜滤过，滤过液经干燥后即得鱼脑肽。
实施例4：以新鲜的鱼头为原料，揭开头盖取出鱼脑后匀浆。匀浆液用500瓦超声波处理25分钟；用1摩尔/升氢氧化钠调pH为8；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.3%的中性蛋白酶（EC 3.4.24.28），50℃酶解4小时；90℃灭酶20分钟；用3摩尔/升氢氧化钠调pH为9；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.3%的碱性蛋白酶（EC 3.4.21.14），50℃酶解2小时；90℃灭酶20分钟；酶解液经干燥得干粉。
采用超临界二氧化碳法提取鱼脑酶解液干粉中的油，超临界萃取条件为：萃取压力25兆帕，萃取温度40℃，CO2流速15升/小时，萃取时间100分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度40℃、压力8兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度35℃，压力2兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；收集合并分离器中油，即得鱼脑油产品；分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
提油后残渣溶于4倍体积（v/w）的蒸馏水，调pH至中性，于8000×g离心10分钟，取上清，经3000道尔顿超滤膜滤过，滤过液经干燥后即得鱼脑肽。
实施例5：以新鲜的鱼头为原料，取出鱼脑后匀浆。匀浆液用600瓦超声波处理20分钟；用3摩尔/升氢氧化钠调pH为8；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.4%的中性蛋白酶（EC 3.4.24.28），40℃酶解3小时；100℃灭酶10分钟；用3摩尔/升氢氧化钠调pH为10；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.4%的碱性蛋白酶（EC3.4.21.14），50℃酶解2小时；100℃灭酶10分钟；酶解液经干燥得干粉。
采用超临界二氧化碳法提取鱼脑酶解液干粉中的油，超临界萃取条件为：萃取压力30兆帕，萃取温度45℃，CO2流速5升/小时，萃取时间60分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度40℃、压力9兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度30℃，压力2兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；收集合并分离器中油，即得鱼脑油产品；分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
提油后残渣溶于4倍体积（v/w）的蒸馏水，调pH至中性，于10000×g离心10分钟，取上清，经3000道尔顿超滤膜滤过，滤过液经干燥后即得鱼脑肽。
实施例6：以新鲜的鱼头为原料，取出鱼脑后匀浆。匀浆液用700瓦超声波处理15分钟；用3摩尔/升氢氧化钠调pH为8；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.8%的中性蛋白酶（EC 3.4.24.28），30℃酶解3小时；90℃灭酶15分钟；用1摩尔/升氢氧化钠调pH为8；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.6%的碱性蛋白酶（EC3.4.21.14），60℃酶解2小时；90℃灭酶15分钟；酶解液经干燥得干粉。
采用超临界二氧化碳法提取鱼脑酶解液干粉中的油，超临界萃取条件为：萃取压力45兆帕，萃取温度35℃，CO2流速10升/小时，萃取时间70分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度40℃、压力10兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度30℃，压力3兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；收集合并分离器中油，即得鱼脑油产品；分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
提油后残渣溶于5倍体积（v/w）的蒸馏水，调pH至中性，于12000×g离心15分钟，取上清，经3000道尔顿超滤膜滤过，滤过液经干燥后即得鱼脑肽。
实施例7：以新鲜的鱼头为原料，取出鱼脑后匀浆。匀浆液用500瓦超声波处理30分钟；用1摩尔/升柠檬酸调pH为7；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.4%的中性蛋白酶（EC 3.4.24.28），40℃酶解4小时；100℃灭酶12分钟；用2摩尔/升氢氧化钠调pH为9；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.3%的碱性蛋白酶（EC3.4.21.14），50℃酶解3小时；100℃灭酶12分钟；酶解液经干燥得干粉。
采用超临界二氧化碳法提取鱼脑酶解液干粉中的油，超临界萃取条件为：萃取压力25兆帕，萃取温度50℃，CO2流速20升/小时，萃取时间100分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度45℃、压力10兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度30℃，压力4兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；收集合并分离器中油，即得鱼脑油产品；分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
提油后残渣溶于4倍体积（v/w）的蒸馏水，调pH至中性，于13000×g离心10分钟，取上清，经3000道尔顿超滤膜滤过，滤过液经干燥后即得鱼脑肽。
实施例8：以新鲜的鱼头为原料，揭开头盖取出鱼脑后匀浆。匀浆液用600瓦超声波处理15分钟；用2摩尔/升氢氧化钠调pH为9；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.1%的中性蛋白酶（EC 3.4.24.28），70℃酶解2小时；100℃灭酶10分钟；用2摩尔/升柠檬酸调pH为7；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.4%的碱性蛋白酶（EC 3.4.21.14），40℃酶解4小时；100℃灭酶10分钟；酶解液经干燥得干粉。
采用超临界二氧化碳法提取鱼脑酶解液干粉中的油，超临界萃取条件为：萃取压力15兆帕，萃取温度40℃，CO2流速20升/小时，萃取时间120分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度35℃、压力8兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度25℃，压力4兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；收集合并分离器中油，即得鱼脑油产品；分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
提油后残渣溶于5倍体积（v/w）的蒸馏水，调pH至中性，于7000×g离心15分钟，取上清，经3000道尔顿超滤膜滤过，滤过液经干燥后即得鱼脑肽。
实施例9：以冷冻保存，流水解冻的鱼头为原料，取出鱼脑后匀浆。匀浆液用400瓦超声波处理30分钟；用1摩尔/升柠檬酸调pH为7；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.4%的中性蛋白酶（EC 3.4.24.28），50℃酶解3小时；90℃灭酶15分钟；用1摩尔/升氢氧化钠调pH为9；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.3%的碱性蛋白酶（EC 3.4.21.14），30℃酶解3小时；90℃灭酶15分钟；酶解液经干燥得干粉。
采用超临界二氧化碳法提取鱼脑酶解液干粉中的油，超临界萃取条件为：萃取压力30兆帕，萃取温度40℃，CO2流速5升/小时，萃取时间60分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度35℃、压力10兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度35℃，压力4兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；收集合并分离器中油，即得鱼脑油产品；分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
提油后残渣溶于4倍体积（v/w）的蒸馏水，调pH至中性，于20000×g离心15分钟，取上清，经3000道尔顿超滤膜滤过，滤过液经干燥后即得鱼脑肽。
实施例10：以冷冻保存，流水解冻的鱼头为原料，取出鱼脑后匀浆。匀浆液用700瓦超声波处理25分钟；用1摩尔/升氢氧化钠调pH为8；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.3%的中性蛋白酶（EC 3.4.24.28），50℃酶解2小时；100℃灭酶10分钟；用1摩尔/升氢氧化钠调pH为9；加入重量为鱼脑匀浆重量的0.5%的碱性蛋白酶（EC 3.4.21.14），60℃酶解3小时；100℃灭酶10分钟；酶解液经干燥得干粉。
采用超临界二氧化碳法提取鱼脑酶解液干粉中的油，超临界萃取条件为：萃取压力25兆帕，萃取温度45℃，CO2流速10升/小时，萃取时间120分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度45℃、压力8兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度35℃，压力2兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；收集合并分离器中油，即得鱼脑油产品；分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
提油后残渣溶于3倍体积（v/w）的蒸馏水，调pH至中性，于10000×g离心20分钟，取上清，经3000道尔顿超滤膜滤过，滤过液经干燥后即得鱼脑肽。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种提取鱼脑油、鱼脑肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、取鱼脑，匀浆，获得匀浆液；
S2、超声辅助复合酶酶解：用300-800瓦超声波处理所述匀浆液5-30分钟；调pH为6-9；加入中性蛋白酶，在30-70℃下酶解；酶解后在90-100℃灭酶；
S3、再调pH为7-11；加入碱性蛋白酶，30-70℃酶解，酶解后在90-100℃灭酶；
S4、所述酶解液经干燥得干粉；
S5、采用超临界二氧化碳萃取法提取所述干粉中的油，即鱼脑油，并获得残渣；
S6、将所述残渣以体积/重量比溶于3-5倍的蒸馏水，调pH至中性，于大于等于5000×g离心10-20分钟，取上清，经3000道尔顿超滤膜滤过，滤过液经干燥后即得鱼脑肽。
2.根据权利要求1所述提取鱼脑油、鱼脑肽的方法，其特征在于，
所述步骤S2中所述中性蛋白酶选用EC3.4.24.28；步骤S3中所述碱性蛋白酶选用EC3.4.21.14；
所述中性蛋白酶和所述碱性蛋白酶的加入量均为所述匀浆液重量的0.1-1.0%，酶解时间均为1-4小时；灭酶时间均为10分钟以上。
3.根据权利要求2所述提取鱼脑油、鱼脑肽的方法，其特征在于，所述步骤S2和S3中调节pH选用柠檬酸或氢氧化钠。
4.根据权利要求3所述提取鱼脑油、鱼脑肽的方法，其特征在于，步骤S5超临界萃取条件为萃取压力15-35兆帕，萃取温度30-50℃，CO2流速5-20升/小时，萃取时间60-120分钟；CO2自下而上流经萃取器，提取液经减压阀减压后流经第一分离器，部分油在温度35-45℃、压力8-10兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；提取液经第一分离器减压后进入第二分离器，剩余油在温度25-35℃，压力2-4兆帕下不溶于CO2沉淀于分离器底部；收集合并分离器中油，得鱼脑油。
5.根据权利要求4所述提取鱼脑油、鱼脑肽的方法，其特征在于，步骤S5中，分离出油的CO2，再经高压泵压缩成超临界状态，重新进入萃取器循环使用。
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