CN102952136A - 恩替卡韦及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种恩替卡韦的合成方法，它包括将（3R，4S）-4-苄氧-3-亚甲基苄氧-2-（2，2-二甲基-[1，3]-二氧戊环）-茂醇与6-苄氧基鸟嘌呤反应制备6-苄氧-9-[（1S，2S，3R，4S）-4-苄氧-3-亚甲基苄氧-（2，2-二甲基-1，3-二氧戊环）]茂基-9H-鸟嘌呤（产物1）；随后经两步反应先后制得16（（1S，2R，3S，5S）-6-苄氧-9H-鸟嘌呤-3-（苄氧）-2-（亚甲基苄氧）茂基甲醇（产物2）和6-苄氧-[（1S，3R，4S）-4-苄氧-亚甲基苄氧-2-亚甲基环茂基-9H-鸟嘌呤（产物3），最后获得（1S，3R，4S）-9-[4-羟基-3-（羟甲基）-2-亚甲基环戊基]-9H-鸟嘌呤（恩替卡韦）的步骤。该方法具有产率高、成本低、操作简单和适合大规模生产的特点。本发明还提供了通过这种合成方法制备的恩替卡韦。

Description

恩替卡韦及其制备方法

技术领域

本发明属于制药领域，具体涉及一种制备恩替卡韦的方法以及根据该方法制备的恩替卡韦。

背景技术

恩替卡韦是一种鸟嘌呤核苷类似物，对乙肝病毒（HBV）多聚酶具有抑制作用。它能够通过磷酸化成为具有活性的三磷酸盐，三磷酸盐在细胞内的半衰期为15小时。通过与HBV多聚酶的天然底物三磷酸脱氧鸟嘌呤核苷竞争，恩替卡韦三磷酸盐能抑制病毒多聚酶（逆转录酶）的所有三种活性：（1）HBV多聚酶的启动；（2）前基因组mRNA逆转录负链的形成；（3）HBV DNA正链的合成。

恩替卡韦的化学名称为2-氨基-9-[（1S，3S，4S）-4-羟基-3-羟甲基-2-亚甲戊基]-1，9-氢-6-H-嘌呤-6-酮-水合物，分子式：C12H15N5O3·H2O 分子量：295.3。

当前恩替卡韦的化学合成方法有多种。例如，美国专利US 5,206,244公开了恩替卡韦、其制备方法和其在治疗乙型肝炎的用途。WO 98/09964和WO 2004/052310分别公开了两种改进了的恩替卡韦的合成方法。当前的这些合成方法，一般都存在原料不易得到、成本高、产率低、反应复杂等多种缺陷。本领域中仍然需要开发新的合成方法，以克服这些缺陷。

发明内容

本发明提供了一种恩替卡韦的合成方法，该方法具有产率高、成本低、操作简单和适合大规模生产的特点。

 本发明提供了一种恩替卡韦，它是通过以下步骤合成的：

（1）将 6-苄氧基鸟嘌呤、无水四氢呋喃加入到容器中，加热回流充分溶解,氮气保护下加入（3R，4S）-4-苄氧-3-亚甲基苄氧-2-（2，2-二甲基-[1，3]-二氧戊环）-茂醇）、三苯基磷和无水四氢呋喃，搅拌1小时，滴加偶氮二羧酸二乙酯（DEAD）的四氢呋喃溶液，DEAD滴加完毕后，加入粉末状4A分子筛，升温搅拌12小时，完全反应后，过滤除去体系中的不溶物，滤液旋蒸，得土黄色固体粗产物，粗产物经柱层析分离得产物1；

（2）在反应容器中加入产物1和无水甲醇，室温下向该溶液滴加浓盐酸（37%），磁力搅拌反应3小时，室温下减压除去溶剂，加入无水甲醇将残余物溶解，冰浴，磁力搅拌，缓慢加入高碘酸钠的水溶液，滴加完毕后，升至室温，继续搅拌两小时，加入硼氢化钠，室温搅拌两小时，将体系过滤，滤液旋蒸，得淡黄色固体粗产物，粗产物经柱层析分离得产物2；

（3）向反应容器中加入二氯甲烷、产物2以及4-二甲胺基吡啶，氮气保护，磁力搅拌，冰浴至0℃，向体系缓慢滴加甲基磺酰氯，滴加完毕后，0℃下搅拌1小时，升至室温，搅拌3小时，加入二氯甲烷稀释体系，再依次用水和饱和碳酸氢钠溶液洗涤，分液，无水硫酸镁干燥有机层，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得黄色油状液体，柱层析分离得到甲基磺酸根取代的中间体，将此中间体溶于无水DMF中；

（4）将氢化钠溶于无水DMF中，氮气保护，磁力搅拌，滴加2-甲氧基乙醇，室温搅拌一小时，降温至零度，加入上述中间体的DMF溶液，0℃下搅拌4小时，加入水稀释体系，产物用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得到黄色固体粗产物，粗产物柱层析分离得白色固体产物3；和

（5）将产物3和甲醇加入到反应容器中，磁力搅拌，室温滴加5mol/L盐酸，滴加完毕后，升温至55℃，反应6小时，冷却，用饱和碳酸氢钠溶液（PH=8.5）将体系的PH值调至7.0，加入乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得到黄色固体粗产物，将所得粗产物溶于无水二氯甲烷，磁力搅拌，氩气保护，冷却到零下78℃，用双头针加入1M三氯化硼，控制加入时间大于半小时，三氯化硼滴加完毕后，体系在该温度下搅拌3小时，再升温至零下40℃，继续搅拌一个半小时，直至体系中的固体完全消失，重新降温到零下78℃，缓慢加入无水甲醇，升至室温，减压浓缩，再次加入甲醇，重复上一操作得到粗产物，将粗产物溶于水，用乙醚萃取，水层用2mol/L的氢氧化钠溶液将PH值调至7.0，然后减压浓缩，过滤析出的固体，用冷水洗涤，干燥得乳黄色絮状粗产物，粗产物用热水重结晶，得到白色晶体最终产物恩替卡韦。

本发明还提供了一种制备恩替卡韦的方法，其包括以下步骤：

（1）将 6-苄氧基鸟嘌呤、无水四氢呋喃加入到容器中，加热回流充分溶解,氮气保护下加入（3R，4S）-4-苄氧-3-亚甲基苄氧-2-（2，2-二甲基-[1，3]-二氧戊环）-茂醇）、三苯基磷和无水四氢呋喃，搅拌1小时，滴加偶氮二羧酸二乙酯（DEAD）的四氢呋喃溶液，DEAD滴加完毕后，加入粉末状4A分子筛，升温搅拌12小时，完全反应后，过滤除去体系中的不溶物，滤液旋蒸，得土黄色固体粗产物，粗产物经柱层析分离得产物1；

（2）在反应容器中加入产物1和无水甲醇，室温下向该溶液滴加浓盐酸（37%），磁力搅拌反应3小时，室温下减压除去溶剂，加入无水甲醇将残余物溶解，冰浴，磁力搅拌，缓慢加入高碘酸钠的水溶液，滴加完毕后，升至室温，继续搅拌两小时，加入硼氢化钠，室温搅拌两小时，将体系过滤，滤液旋蒸，得淡黄色固体粗产物，粗产物经柱层析分离得产物2；

（3）向反应容器中加入二氯甲烷、产物2以及4-二甲胺基吡啶，氮气保护，磁力搅拌，冰浴至0℃，向体系缓慢滴加甲基磺酰氯，滴加完毕后，0℃下搅拌1小时，升至室温，搅拌3小时，加入二氯甲烷稀释体系，再依次用水和饱和碳酸氢钠溶液洗涤，分液，无水硫酸镁干燥有机层，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得黄色油状液体，柱层析分离得到甲基磺酸根取代的中间体，将此中间体溶于无水DMF中；

（4）将氢化钠溶于无水DMF中，氮气保护，磁力搅拌，滴加2-甲氧基乙醇，室温搅拌一小时，降温至零度，加入上述中间体的DMF溶液，0℃下搅拌4小时，加入水稀释体系，产物用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得到黄色固体粗产物，粗产物柱层析分离得白色固体产物3；和

（5）将产物3和甲醇加入到反应容器中，磁力搅拌，室温滴加5mol/L盐酸，滴加完毕后，升温至55℃，反应6小时，冷却，用饱和碳酸氢钠溶液（PH=8.5）将体系的PH值调至7.0，加入乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得到黄色固体粗产物，将所得粗产物溶于无水二氯甲烷，磁力搅拌，氩气保护，冷却到零下78℃，用双头针加入1M三氯化硼，控制加入时间大于半小时，三氯化硼滴加完毕后，体系在该温度下搅拌3小时，再升温至零下40℃，继续搅拌一个半小时，直至体系中的固体完全消失，重新降温到零下78℃，缓慢加入无水甲醇，升至室温，减压浓缩，再次加入甲醇，重复上一操作得到粗产物，将粗产物溶于水，用乙醚萃取，水层用2mol/L的氢氧化钠溶液将PH值调至7.0，然后减压浓缩，过滤析出的固体，用冷水洗涤，干燥得乳黄色絮状粗产物，粗产物用热水重结晶，得到白色晶体最终产物恩替卡韦。

实施例

实施例1：6-苄氧-9-[（1S，2S，3R，4S）-4-苄氧-3-亚甲基苄氧-（2，2-二甲基-1，3-二氧戊环）] 茂基-9H-鸟嘌呤（产物1）的制备。

将 17.2g 6-苄氧基鸟嘌呤（0.075mol）， 500ml无水四氢呋喃加入到2000ml三颈瓶中，机械搅拌，加热回流30分钟使鸟嘌呤充分溶解扩散。将体系降至室温，氮气保护下加入20.6g的（3R，4S）-4-苄氧-3-亚甲基苄氧-2-（2，2-二甲基-[1，3]-二氧戊环）-茂醇（0.05mol）， 32.8g三苯基磷（0.125mol）和1000ml无水四氢呋喃，搅拌1小时。滴加偶氮二羧酸二乙酯（DEAD）的四氢呋喃溶液（2mol/L的DEAD溶液63ml溶于150 ml THF ），控制滴加速度以确保滴加时间不少于30分钟。DEAD滴加完毕后，加入5g新烘的粉末状4A分子筛，升温至30℃搅拌12小时。TLC检测反应完全后，过滤除去体系中的分子筛等不溶物，滤液旋蒸，得土黄色固体粗产物。粗产物经柱层析分离（洗脱剂:①乙酸乙酣:石油醚=1:3，②乙醚）得白色固体的产物1，16.6g （26.0 mmol），产率51%。

 实施例2：16 （（1S，2R，3S，5S）-6-苄氧-9H-鸟嘌呤-3-（苄氧）-2- （亚甲基苄氧）茂基甲醇（产物2）的制备。

在 1000 ml三颈瓶中加入32g 产物1 （0.05mo1）和500ml无水甲醇。室温下向该溶液滴加5ml浓盐酸（37%），磁力搅拌。反应3小时，TLC检测原料点消失，室温下减压（27℃， 5 Pa）除去溶剂，得到黄色油状残余物。加入400ml无水甲醇将该残余物溶解。冰浴至0℃，磁力搅拌，缓慢加入12g高碘酸钠（0.054mol）的水溶液250ml。滴加完毕后，升至室温，继续搅拌两小时。加入4g硼氢化钠（0.11 mol），室温搅拌两小时。将体系过滤，滤液旋蒸，得淡黄色固体粗产物。粗产物经柱层析分离（洗脱剂:二氯甲烷:甲醇=9:1）得产物2， 19.4g （0.034mol），产率69%。

 实施例3： 6-苄氧-[（1S，3R，4S）-4-苄氧-亚甲基苄氧-2-亚甲基环茂基-9H-鸟嘌呤（产物3）的制备。

向1000 ml三颈瓶中依次加入400ml二氯甲烷、28.5g 产物2（0.05mol）以及12.5g 4-二甲胺基吡啶（0.10 mol），氮气保护，磁力搅拌。冰浴至0℃，向体系缓慢滴加甲基磺酰氯4.7ml （61.0 mmol）。滴加完毕后，0℃下搅拌1小时；升至室温，搅拌3小时。TLC检测原料点完全消失后，加入250ml二氯甲烷稀释体系，再依次用250ml水和250ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤。分液，无水硫酸镁干燥有机层，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得黄色油状液体。柱层析分离（洗脱剂:二氯甲烷:甲醇=9:1）得到甲基磺酸根取代的中间体。将此中间体溶于400 ml无水DMF中以备接下反应所用。

将10质量百分数60%氢化钠（0.25mol，分散在矿物油中）溶于500ml无水DMF中，氮气保护，磁力搅拌，滴加20ml 2-甲氧基乙醇（0.25mol）。 室温搅拌一小时，降温至零度。加入先前准备好的甲基磺酸根取代的中间体的DMF溶液，0℃下搅拌4小时。TLC检测原料点完全消失后，加入1000ml水稀释体系，产物用乙酸乙酯萃取（1000ml*3），有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得到黄色固体粗产物。粗产物柱层析分离（洗脱剂:二氯甲烷:甲醇=19:1）得白色固体产物3，22.7g （41.5mmol），产率83.0%。

实施例4： （1S，3R，4S）-9-[4-羟基-3-（羟甲基）-2-亚甲基环戊基]-9H-鸟嘌呤（恩替卡韦）的制备。

将5.5g 6-苄氧-[（1S， 3R，4S）-4-苄氧-3-亚甲基苄氧-2-亚甲基环]茂基-9H-鸟嘌呤（产物3，10 mmol）， 100ml甲醇加入到250ml三颈瓶中，磁力搅拌，室温滴加3ml 5mol/L盐酸。滴加完毕后，升温至55℃，反应6小时。冷却，用饱和碳酸氢钠溶液（PH=8.5）将体系的PH值调至7.0。加入乙酸乙酯萃取（250ml*3 ），有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液旋蒸除去溶剂。得到黄色固体粗产物。将所得粗产物溶于250ml无水二氯甲烷，磁力搅拌，氩气保护，冷却到零下78℃，用双头针加入1M三氯化硼100ml，控制加入时间大于半小时。三氯化硼滴加完毕后，体系在该温度下搅拌3小时，再升温至零下40℃，继续搅拌一个半小时，直至体系中的固体完全消失。重新降温到零下78℃，缓慢加入300ml无水甲醇，升至室温，减压浓缩。再次加入300ml甲醇，重复上一操作得到粗产物。将粗产物溶于450ml水，用乙醚萃取（150ml*3 ）。水层用2mol/L的氢氧化钠溶液将PH值调至7.0，然后减压浓缩至l00ml左右溶液，过滤析出的固体，用冷水洗涤，干燥得乳黄色絮状粗产物。粗产物用热水重结晶，得到白色晶体最终产物恩替卡韦2.24g （8.lmmol），产率81%。

Claims (2)

1.一种恩替卡韦，它是通过以下步骤合成的：

（1）将 6-苄氧基鸟嘌呤、无水四氢呋喃加入到容器中，加热回流充分溶解,氮气保护下加入（3R，4S）-4-苄氧-3-亚甲基苄氧-2-（2，2-二甲基-[1，3]-二氧戊环）-茂醇）、三苯基磷和无水四氢呋喃，搅拌1小时，滴加偶氮二羧酸二乙酯（DEAD）的四氢呋喃溶液，DEAD滴加完毕后，加入粉末状4A分子筛，升温搅拌12小时，完全反应后，过滤除去体系中的不溶物，滤液旋蒸，得土黄色固体粗产物，粗产物经柱层析分离得产物1；

（2）在反应容器中加入产物1和无水甲醇，室温下向该溶液滴加浓盐酸（37%），磁力搅拌反应3小时，室温下减压除去溶剂，加入无水甲醇将残余物溶解，冰浴，磁力搅拌，缓慢加入高碘酸钠的水溶液，滴加完毕后，升至室温，继续搅拌两小时，加入硼氢化钠，室温搅拌两小时，将体系过滤，滤液旋蒸，得淡黄色固体粗产物，粗产物经柱层析分离得产物2；

（3）向反应容器中加入二氯甲烷、产物2以及4-二甲胺基吡啶，氮气保护，磁力搅拌，冰浴至0℃，向体系缓慢滴加甲基磺酰氯，滴加完毕后，0℃下搅拌1小时，升至室温，搅拌3小时，加入二氯甲烷稀释体系，再依次用水和饱和碳酸氢钠溶液洗涤，分液，无水硫酸镁干燥有机层，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得黄色油状液体，柱层析分离得到甲基磺酸根取代的中间体，将此中间体溶于无水DMF中；

（4）将氢化钠溶于无水DMF中，氮气保护，磁力搅拌，滴加2-甲氧基乙醇，室温搅拌一小时，降温至零度，加入上述中间体的DMF溶液，0℃下搅拌4小时，加入水稀释体系，产物用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得到黄色固体粗产物，粗产物柱层析分离得白色固体产物3；和

（5）将产物3和甲醇加入到反应容器中，磁力搅拌，室温滴加5mol/L盐酸，滴加完毕后，升温至55℃，反应6小时，冷却，用饱和碳酸氢钠溶液（PH=8.5）将体系的PH值调至7.0，加入乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得到黄色固体粗产物，将所得粗产物溶于无水二氯甲烷，磁力搅拌，氩气保护，冷却到零下78℃，用双头针加入1M三氯化硼，控制加入时间大于半小时，三氯化硼滴加完毕后，体系在该温度下搅拌3小时，再升温至零下40℃，继续搅拌一个半小时，直至体系中的固体完全消失，重新降温到零下78℃，缓慢加入无水甲醇，升至室温，减压浓缩，再次加入甲醇，重复上一操作得到粗产物，将粗产物溶于水，用乙醚萃取，水层用2mol/L的氢氧化钠溶液将PH值调至7.0，然后减压浓缩，过滤析出的固体，用冷水洗涤，干燥得乳黄色絮状粗产物，粗产物用热水重结晶，得到白色晶体最终产物恩替卡韦。

2.一种制备恩替卡韦的方法，其包括以下步骤：

（1）将 6-苄氧基鸟嘌呤、无水四氢呋喃加入到容器中，加热回流充分溶解,氮气保护下加入（3R，4S）-4-苄氧-3-亚甲基苄氧-2-（2，2-二甲基-[1，3]-二氧戊环）-茂醇）、三苯基磷和无水四氢呋喃，搅拌1小时，滴加偶氮二羧酸二乙酯（DEAD）的四氢呋喃溶液，DEAD滴加完毕后，加入粉末状4A分子筛，升温搅拌12小时，完全反应后，过滤除去体系中的不溶物，滤液旋蒸，得土黄色固体粗产物，粗产物经柱层析分离得产物1；

（2）在反应容器中加入产物1和无水甲醇，室温下向该溶液滴加浓盐酸（37%），磁力搅拌反应3小时，室温下减压除去溶剂，加入无水甲醇将残余物溶解，冰浴，磁力搅拌，缓慢加入高碘酸钠的水溶液，滴加完毕后，升至室温，继续搅拌两小时，加入硼氢化钠，室温搅拌两小时，将体系过滤，滤液旋蒸，得淡黄色固体粗产物，粗产物经柱层析分离得产物2；

（3）向反应容器中加入二氯甲烷、产物2以及4-二甲胺基吡啶，氮气保护，磁力搅拌，冰浴至0℃，向体系缓慢滴加甲基磺酰氯，滴加完毕后，0℃下搅拌1小时，升至室温，搅拌3小时，加入二氯甲烷稀释体系，再依次用水和饱和碳酸氢钠溶液洗涤，分液，无水硫酸镁干燥有机层，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得黄色油状液体，柱层析分离得到甲基磺酸根取代的中间体，将此中间体溶于无水DMF中；

（4）将氢化钠溶于无水DMF中，氮气保护，磁力搅拌，滴加2-甲氧基乙醇，室温搅拌一小时，降温至零度，加入上述中间体的DMF溶液，0℃下搅拌4小时，加入水稀释体系，产物用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得到黄色固体粗产物，粗产物柱层析分离得白色固体产物3；和

（5）将产物3和甲醇加入到反应容器中，磁力搅拌，室温滴加5mol/L盐酸，滴加完毕后，升温至55℃，反应6小时，冷却，用饱和碳酸氢钠溶液（PH=8.5）将体系的PH值调至7.0，加入乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液旋蒸除去溶剂，得到黄色固体粗产物，将所得粗产物溶于无水二氯甲烷，磁力搅拌，氩气保护，冷却到零下78℃，用双头针加入1M三氯化硼，控制加入时间大于半小时，三氯化硼滴加完毕后，体系在该温度下搅拌3小时，再升温至零下40℃，继续搅拌一个半小时，直至体系中的固体完全消失，重新降温到零下78℃，缓慢加入无水甲醇，升至室温，减压浓缩，再次加入甲醇，重复上一操作得到粗产物，将粗产物溶于水，用乙醚萃取，水层用2mol/L的氢氧化钠溶液将PH值调至7.0，然后减压浓缩，过滤析出的固体，用冷水洗涤，干燥得乳黄色絮状粗产物，粗产物用热水重结晶，得到白色晶体最终产物恩替卡韦。