CN102911286A - 一种甘蔗叶多糖的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于农作物废弃物资源开发利药物化学领域，主要应用领域为医药、保健食品；涉及了一种新的甘蔗叶多糖的制备方法，其特征主要为先将甘蔗叶采用水提醇沉法、减压干燥得灰褐色粗多糖；用蒸馏水超声溶解粗多糖，离心除去不溶物，上清液先用大孔树脂静态吸附脱色，然后利用絮凝剂除杂、澄清，醇沉，无水乙醇洗涤沉淀，减压干燥得白色甘蔗叶精制多糖。本发明解决了粗多糖溶液过滤难、颜色深的问题，且提取、纯化过程不含有毒有害、呈酸性的有机溶剂，保证多糖结构的完整性，实现全过程安全无毒、绿色环保的提取、纯化。

Description

一种甘蔗叶多糖的制备方法

技术领域

本发明属于农作物废弃物资源开发领域和药物化学领域，主要应用领域为医药、保健食品。

背景技术

甘蔗叶是禾本科植物甘蔗Saccharum sinensis Roxb.的叶。甘蔗广泛种植于热带、亚热带地区，中国蔗区主要分布在广西、广东、台湾等地。甘蔗叶作为甘蔗丰收后的副产品，每年产量颇高，却未得到充分利用，除少部分被加工成动物饲料、造纸等，大部分被蔗农焚烧，造成资源浪费、环境污染且易造成森林火灾。甘蔗叶含有大量叶绿素、氨基酸、多糖利黄酮类等物质，其嫩叶和蔗梢含过氧化物酶等物质，具有抗氧化、抗菌、降血糖、抗肿瘤等药理作用。国内外对甘蔗叶多糖的研究并不多见，仅提取工艺、药效学筛选等报道。目前制备多糖多采用水提醇沉法，水提液经乙醇沉淀处理时，沉淀中除含有多糖类物质，还含蛋白质、色素等杂质，影响多糖的纯度，因此需除去多糖中蛋白质等有关杂质，提高多糖的纯度。本发明人以甘蔗叶为原料，探究甘蔗叶多糖的提取、纯化方法，探索出高产高纯甘蔗叶多糖的制备工艺，对于甘蔗废弃物资源的挖掘利用、深度开发，进一步促进甘蔗产业发展具有积极意义。

发明内容

本发明的目的在于发掘出一种甘蔗叶多糖的新的制备方法。

本发明人将甘蔗叶采用水提醇沉、减压干燥的方法制备粗多糖，先后利用大孔树脂脱色、絮凝剂除杂、澄清，减压干燥，制得白色甘蔗叶精制多糖，从而实现了本发明的目的。

1、一种甘蔗叶多糖的制备方法，包括以下步骤：

(1)将甘蔗叶采用水提醇沉法、减压干燥制备得灰褐色粗多糖；

(2)将步骤(1)中所得到的粗多糖用蒸馏水超声溶解，离心除去不溶物，于上清液中按15～25g/100mL粗多糖溶液的比例加入大孔树脂，置于40℃水浴锅中静态吸附脱色6～8h，抽滤得滤液；

(3)于步骤(2)所得到的滤液中按6～8％/3～4％的体积比例先后滴加絮凝剂的B组分利A组分，边搅边加，分别置于40℃水浴锅中保温1～2h，过滤，滤液浓缩至原液的四分之一至三分之一，缓缓加入四倍量无水乙醇，边搅边加，于4℃冰箱中静置过夜，抽滤，用无水乙醇洗涤沉淀2～3次，减压干燥得白色甘蔗叶精制多糖。

附：絮凝剂配制方法：

A组分：称取絮凝剂A组分1g，用10mL蒸馏水溶解，并搅拌成糊状，再加入剩余90mL蒸馏水，不断搅拌，使其充分溶解，溶胀24h，配成1％黏胶液100mL，即得(用前摇匀)。

B组分：先配制1％醋酸(v/v)，称取絮凝剂B组分1g，用10mL1％醋酸溶解，并搅拌成糊状，加入余下的90mL1％醋酸，充分搅拌使其溶解，溶胀24h，配成1％黏胶液100mL，即得(用前摇匀)。

2、上述纯化过程特征在于先采用大孔树脂静态吸附脱色，然后再采用絮凝剂絮凝除杂、澄清，可有效保证纯化后多糖溶液澄清、透亮。

步骤(2)中大孔树脂用量为15～25g/100mL粗多糖溶液，时间为6～8h，在保证脱色效果的同时，兼顾了多糖的含量。

步骤(3)中絮凝剂B组分加入量为6～8％，A组分加入量为3～4％，温度最好为30～50℃，时间为1～2h，从而保证除杂效果。

本发明的制备方法实现了安全无毒、绿色环保的提取、纯化和精制过程，能够制备出白色甘蔗叶精制多糖，实现了本发明的目的。

综上所述，与现有技术相比，本发明的优势在于：

1、现有技术利用双氧水、活性炭对粗多糖进行脱色处理，而本发明采用大孔树脂静态吸附脱色，可以防止多糖被氧化和活性炭的残留。

2、现有技术利用氯仿-正丁醇、三氯乙酸去除粗多糖中的蛋白质，而本发明摒弃有毒有害的有机试剂及酸性试剂，应用纯天然的絮凝剂去除粗多糖中蛋白质等杂质，且无试剂残留，可保证纯化工艺安全无毒、绿色环保。

3、相比大孔树脂柱层析而言，本发明中脱色、除杂都采用恒温水浴保温方法，简化了操作，适合大规模工业化生产。

具体实施方式

实例一

称取甘蔗叶粗多糖7.5044g，加入250mL蒸馏水超声溶解，离心除去不溶物，上清液置于装有50g已预处理的D₁₀₁大孔树脂的锥形瓶，于40℃恒温水浴锅中静态吸附脱色6h，抽滤，用蒸馏水洗涤树脂，得滤液300mL，按6～8％/3～4％的体积比例先后滴加絮凝剂的B组分和A组分，边搅边加，于40℃恒温水浴锅中分别保温2h、1h，过滤，用蒸馏水洗涤絮凝物，滤液浓缩为原液的四分之一至三分之一，然后加入四倍量无水乙醇沉，于4℃冰箱中静置过夜，抽滤，用无水乙醇洗涤沉淀2～3次，减压干燥得白色甘蔗叶精制多糖2.1032g。

实例二

称取甘蔗叶粗多糖9.0021g，加入300mL蒸馏水超声溶解，离心除去不溶物，上清液置于装有60g已预处理的AB-8大孔树脂的锥形瓶，于40℃恒温水浴锅中静态吸附脱色6h，抽滤，用蒸馏水洗涤树脂，得滤液350mL，按6～8％/3～4％的体积比例先后滴加絮凝剂的B组分和A组分，边搅边加，于40℃恒温水浴锅中分别保温2h、1h，过滤，用蒸馏水洗涤絮凝物，滤液浓缩为原液的四分之一至三分之一，然后加入四倍量无水乙醇沉，于4℃冰箱中静置过夜，抽滤，用无水乙醇洗涤沉淀2～3次，减压干燥得白色甘蔗叶精制多糖5.9739g。

Claims (3)

1.一种甘蔗叶多糖的制备方法，包括以下步骤：

(1)将甘蔗叶采用水提醇沉法、减压干燥制备得灰褐色粗多糖；

(2)将步骤(1)中得到的粗多糖用蒸馏水超声溶解，离心除去不溶物，于上清液中加入已预处理的大孔树脂，置于水浴锅中静态吸附脱色，抽滤得滤液；

(3)于步骤(2)得到的滤液中滴加絮凝剂，边搅边加，置于水浴锅中保温，过滤，滤液浓缩至饱和状态，缓缓加入无水乙醇，边搅边加，于冰箱中静置过夜，抽滤得沉淀，无水乙醇洗涤沉淀数次，减压干燥得白色甘蔗叶精制多糖。

2.根据权利要求1所述的一种甘蔗叶多糖的制备方法，步骤(2)中树脂脱色方法的特征在于其脱色方式为静态吸附脱色；所采用的大孔树脂可以从非极性大孔树脂D₁₀₁、D₃₅₂₀、弱极性大孔树脂AB-8中任选一种；树脂用量为15～25g/100mL粗多糖溶液。

3.根据权利要求1所述的一种甘蔗叶多糖的制备方法，其特征在于粗多糖纯化方法为大孔树脂、絮凝剂联合应用，且纯化方式为先采用大孔树脂静态吸附脱色，然后再利用絮凝剂除杂、澄清。