CN102643306A - 一种从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法:将禽蛋蛋黄搅拌成蛋黄液,添加体积浓度为92~95%乙醇水溶液提取卵磷脂后获得蛋黄渣;将蛋黄渣添加无水乙醇提取后离心分离,获得上层液B,取上层液B真空浓缩后的浓缩物a结晶,离心分离,获得上层液C和结晶;取上层液C真空浓缩和干燥后的浓缩物b加入β-环糊精和水搅拌反应后,离心分离,获得上层蛋黄油和下层沉淀;再将下层沉淀加入无水乙醇中,调pH值至9.5,搅拌60min,离心分离,获得上层液D和沉淀,取上层液D真空浓缩后的浓缩物c与结晶混合,再干燥,获得胆固醇;本发明方法操作简便、运行成本低、提取率高,不会产生有毒溶剂残留,可进行工业化生产。
Description
(一)技术领域
本发明涉及一种从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法,特别涉及一种从蛋黄中提取卵磷脂后的蛋黄渣中再提取蛋黄油和胆固醇的方法。
(二)背景技术
蛋黄中含有极丰富的脂质,约占蛋黄总重的30%左右,其中以甘油三酸酯为主的蛋黄油约为65%,以卵磷脂为主的磷脂约为30%,胆固醇约为4%。
卵磷脂是具有多种生理功能的生物活性物质,又是天然的乳化剂,在食品、医药、保健品、饲料、农业、日用化工、塑料、橡胶、纺织、皮革等行业中均得到广泛应用。胆固醇广泛存在于动物体内,尤以脑及神经组织中最为丰富,在肾、脾、皮肤、肝、胆汁及蛋黄和鱼子中含量也很高。胆固醇是动物组织细胞所不可缺少的重要物质,它不仅参与形成细胞膜,而且是合成胆汁酸,维生素D以及甾体激素的原料。胆固醇也是日用化工、医药、液晶工业等的重要原料,已被广泛应用于合成维生素D3、胆固醇酯、胆甾相液晶、脂质体、生化试剂,人工牛黄,化妆品,乳化剂,激素类药物原料和对虾饲料添加剂等各个方面。蛋黄油的脂肪酸中不饱脂肪酸超过60%,还含有亚麻酸、二十二碳四烯酸和二十二碳六烯酸,蛋黄油的脂肪酸组成与人乳相似,是婴儿食品中最理想的油脂,可应用于各种婴儿食品。
卵磷脂、蛋黄油和胆固醇都是具有生物活性的物质,在医药、精细化工和保健食品等方面均有广泛用途,其价值较高,提取这些生物活性物质是禽蛋深加工增值的有效途径。因而,近几年,国内高等院校科研院所在禽蛋深加工技术方面的研究比较活跃,从蛋黄中分离提取免疫球蛋白、卵磷脂、卵黄高磷蛋白等生物活性物质的技术研究都有较多报道,但多为单一产品的提取技术研究,多个产品联合分离提取的技术还未有报道。若从蛋黄中仅提取单种生物活性物质,势必造成其它生物活性物质的严重浪费。因此,对蛋黄中的多种生物活性物质如何高效地进行联产分离提取,是目前研究的新课题。过去研究的单种生物活性物质的提取工艺,由于未进行多种生物活性物质联产的总体设计,没很好考虑前后产品工艺的可连接性,因而难以将几种单一的工艺组装成多种生物活性物质的联产工艺。
(三)发明内容
本发明目的是提供一种从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法,该方法对设备要求不高、操作简便、运行成本低、提取率高,不会产生有毒溶剂残留,可进行工业化生产。
为实现本发明目的,本发明根据卵磷脂既具脂溶性又具亲水性,而蛋黄油和胆固醇仅具脂溶性的特性,用含水乙醇先从禽蛋蛋黄中分离提取出卵磷脂,再根据胆固醇易溶于热乙醇而难溶于冷乙醇的特性,在禽蛋蛋黄分离提取出卵磷脂后的蛋黄渣中,再用热乙醇提取蛋黄油和胆固醇,然后将提取液冷却,使大部分胆固醇结晶分离出来。蛋黄油再用β-环糊精进行精制,除去剩余的胆固醇。
本发明采用的技术方案是:
一种从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法,所述方法按以下步骤进行:
(1)将禽蛋蛋黄搅拌成蛋黄液,添加体积浓度为92~95%乙醇水溶液,在30~45℃下提取0.5~6小时,然后进行离心分离,获得上层液A和蛋黄渣,取上层液A浓缩、干燥得卵磷脂;所述乙醇水溶液的体积用量是蛋黄液质量的4~6倍;
(2)将步骤(1)获得的蛋黄渣于45~55℃干燥后,添加无水乙醇,在65~85℃下提取30~60min,然后进行离心分离,获得上层液B,取上层液B于55~65℃下真空浓缩后,获得浓缩物a,将浓缩物a于15~25℃的温度下自然结晶24~48小时,离心分离,获得上层液C和结晶;所述无水乙醇的体积用量是蛋黄渣重量的8~12倍;所述的结晶干燥,获得胆固醇;
(3)取上层液C于55~65℃下真空浓缩和真空干燥后,获得浓缩物b,将浓缩物b加入β-环糊精和水,25~35℃下搅拌20~40min,离心分离,获得上层蛋黄油和下层沉淀;所述β-环糊精的加入重量为浓缩物b重量的20~40%(优选20~30%),所述水的加入重量为浓缩物b重量的40~80%(优选40~60%)。
所述的从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法,其特征在于所述方法还包含步骤(4):将步骤(3)获得的下层沉淀加入无水乙醇中,调pH值至9.5,搅拌60min,离心分离,获得上层液D和沉淀,弃去沉淀,取上层液D于55~65℃下真空浓缩后,获得浓缩物c,将浓缩物c与步骤(2)获得的结晶混合(步骤(2)获得的结晶可以先干燥再与步骤(4)得到的胆固醇混合,或者将结晶与浓缩物c混合后再干燥,获得胆固醇),干燥,获得胆固醇;所述无水乙醇的体积用量是下层沉淀质量的8~12倍。
进一步,步骤(2)所述蛋黄渣在45~55℃下干燥至水分含量<3%(优选2.5~2.8%)。
进一步,步骤(2)所述上层液B于55~65℃下真空浓缩至干物质含量为30~50%,获得浓缩物a。
进一步,步骤(3)所述上层液C先于55~65℃下真空浓缩至干物质含量≥50%(优选50~60%),再于55~65℃下真空干燥至干物质含量≥95%(优选95~96%),获得浓缩物b。
进一步,步骤(4)所述上层液D于55~65℃下真空浓缩至干物质含量>50%(优选60~80%),获得浓缩物c。
更进一步,所述的从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法推荐按如下步骤进行:
(1)将禽蛋蛋黄搅拌成蛋黄液,添加体积浓度为92~95%乙醇水溶液,在30~45℃下提取0.5~6小时,反应结束后,离心分离,获得上层液A和蛋黄渣,取上层液A浓缩、干燥得卵磷脂;所述乙醇水溶液的体积用量为蛋黄液质量的4~6倍;
(2)将步骤(1)获得的蛋黄渣于45℃干燥至水分含量<3%后,添加无水乙醇,在65~85℃下提取30~60min,在4000rpm下离心10min,获得上层液B,取上层液B于55~65℃、0.088~0.094MPa下真空浓缩至干物质含量为30~50%后,获得浓缩物a,将浓缩物a于15~25℃的温度下自然结晶24~48小时,4000rpm离心分离10min,获得上层液C和结晶;所述无水乙醇的体积用量为蛋黄渣质量的8~12倍;所述的结晶干燥,即获得胆固醇;
(3)取上层液C先于55~65℃、0.088~0.094MPa下真空浓缩至干物质含量≥50%,再于55~65℃、0.088~0.094MPa下真空干燥至干物质含量≥95%后,获得浓缩物b,将浓缩物b加入β-环糊精和水,25~35℃下搅拌20~40min,4000rpm离心分离10min,获得上层蛋黄油和下层沉淀;所述β-环糊精的加入量为浓缩物b重量的20~40%,所述水的加入量为浓缩物b重量的40~80%。
为了增加本发明胆固醇的收率,本发明所述方法还包含步(4):
(4)将步骤(3)获得的下层沉淀加入无水乙醇中,调pH值至9.5,搅拌60min,4000rpm离心分离30min,获得上层液D和沉淀,弃去沉淀,取上层液D于55~65℃、0.088~0.094MPa下真空浓缩至干物质含量>50%后,获得浓缩物c,将浓缩物c与步骤(2)获得的结晶混合,55~65℃干燥,获得胆固醇;所述无水乙醇的体积用量为下层沉淀的8~12倍。
本发明所述禽蛋包括鸡蛋、鸭蛋或鹅蛋等。
本发明所述卵磷脂的制备参见ZL 200710067279.5。
本发明所述上层液A、上层液B、上层液C、上层液D均为离心分离所得,为了便于区分不同步骤而命名,字母A、B、C、D本身没有含义;所述浓缩物a、浓缩物b、浓缩物c均为浓缩物,为了便于区分不同步骤而命名,字母a、b、c本身没有含义。
与现有技术相比,本发明的有益效果主要体现在:
(1)本发明直接使用蛋黄液为原料,仅用食用酒精为溶剂,先用含水乙醇常温提取卵磷脂后,再用无水乙醇高温提取蛋黄油和胆固醇,这种联产分步提取蛋黄中的多种生物活性物质的方法,既可确保卵磷脂等生物活性物质的活性,又可提高多种生物活性物质的提取率,能使蛋黄中的生物活性物质得到充分的利用;
(2)利用胆固醇易溶于热乙醇而难溶于冷乙醇的特性,将用热乙醇提取蛋黄油和胆固醇的提取液进行冷却,使胆固醇结晶与蛋黄油分离,产品中不残留有毒的有机溶剂,也方便了胆固醇提取后剩下的蛋黄蛋白质的利用;
(3)本发明方法对设备要求不高、操作简便、运行成本低、提取率高,不会产生有毒溶剂残留,可进行工业化生产。
(四)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述,但本发明的保护范围并不仅限于此:
实施例1
(1)挑选新鲜鸭蛋300kg装入蛋框,浸入清水中泡10~20分钟,然后用清水将禽蛋洗干净、再用质量浓度0.5%NaOH水溶液作为消毒液浸泡鸭蛋5~10分钟,取出鸭蛋用清水冲去消毒液,晾干表面水分,用打分蛋器将鸭蛋打开,分离出蛋黄、蛋清和蛋壳,约可得到100kg蛋黄、165kg蛋清和35kg蛋壳。
将100kg蛋黄用搅拌器搅拌成蛋黄液,先添加600L体积浓度92%乙醇水溶液,在45℃下提取0.5小时,反应结束后,离心分离,获得上层液A和蛋黄渣,将上层液A浓缩、脱水得卵磷脂,收率9.7%。
(2)将步骤(1)获得的蛋黄渣放入烘房,用45℃的温度,烘至蛋黄渣含水分2.5%,约可得到40kg蛋黄渣;将烘干的蛋黄渣放入提取罐(通用的提取装置)内,添加320L无水乙醇,85℃下提取30min,然后用离心机在4000r/min下离心10min,分离出上层液B,将上层液B用泵抽入真空浓缩锅内,在55℃、真空度0.094MPa下浓缩至干物质含量为30%,获得浓缩物a,将浓缩物a在15℃下自然结晶24小时,用离心机在4000r/min下离心10min,分离出结晶和上层液C;
(3)将步骤(2)获得的上层液C再用泵抽入真空浓缩锅,先在55℃、真空度0.094MPa下,真空浓缩至干物质含量50%,再放入真空干燥器在55℃、真空度0.094MPa下真空干燥至干物质含量95%,获得20kg浓缩物b,取浓缩物b加入β-环糊精4kg,水8kg,在25℃下搅拌40min,然后用离心机在4000r/min下离心10min,分离出上层液(即蛋黄油)和下层沉淀(即胆固醇-β-环糊精包合物)5.2kg,约可得蛋黄油18kg,收率90%;
(4)将步骤(3)获得的下层沉淀加入42L无水乙醇,用NaOH调pH值为9.5,搅拌60min,使胆固醇-β-环糊精包合物中的胆固醇释放出来,然后用离心机在4000r/min下离心30min,获得上层液D和沉淀(即β-环糊精),取上层液D,在65℃、真空度0.088MPa下,浓缩至干物质含量80%,获得浓缩物c,再浓缩物c与步骤(2)获得的结晶合并放入烘箱,在55℃下烘干,约可得胆固醇1.2kg,收率92%。
实施例2
(1)挑选新鲜鸡蛋300kg装入蛋框,浸入清水中泡10~20分钟,然后用清水将鸡蛋洗干净、再用质量浓度0.5%NaOH水溶液作为消毒液浸泡禽蛋5~10分钟,取出鸡蛋用清水冲去消毒液,晾干表面水分,用打分蛋器将鸡蛋打开,分离出蛋黄、蛋清和蛋壳,约可得到100kg蛋黄、170kg蛋清和30kg蛋壳。
100kg蛋黄用搅拌器搅拌成蛋黄液,先添加体积浓度95%的乙醇溶液400L,其他操作同实施例1,获得蛋黄渣和卵磷脂8.5Kg,收率85%。
(2)将步骤(1)获得的蛋黄渣,放入烘房,在55℃下烘至蛋黄渣含水分2.8%,约可得到40kg蛋黄渣。将烘干的蛋黄渣放入提取罐内,添加480L无水乙醇,在75℃下提取45min,然后将提取液用离心机在4000r/min下离心10min,获得上层液B,将上层液B用泵抽入真空浓缩锅,在65℃、真空度0.088MPa下浓缩至干物质含量为40%,获得浓缩物a,将浓缩物a在20℃下使胆固醇自然结晶36小时,用离心机在4000r/min下离心10min,获得上层液C和结晶(即胆固醇结晶);
(3)将步骤(2)获得的上层液C再用泵抽入真空浓缩锅,先在65℃、真空度0.088MPa下,真空浓缩至干物质含量50%,再放入真空干燥器在65℃、真空度0.088MPa下真空干燥至干物质含量96%,获得20kg浓缩物b,取浓缩物b加入β-环糊精8kg,水16kg,在30℃下搅拌30min,然后用离心机在4000r/min下离心10min,分离出上层蛋黄油(即上层液)和下层沉淀(即胆固醇-β-环糊精包合物)5kg,约可得蛋黄油16kg,收率90%。
(4)将步骤(3)获得的下层沉淀(胆固醇-β-环糊精包合物)加60L无水乙醇,用NaOH调pH值为9.5,搅拌60min,使胆固醇-β-环糊精包合物中的胆固醇释放出来,然后用离心机在4000r/min下离心30min,获得上层液D和沉淀(即β-环糊精),将上层液D在55℃、真空度0.094MPa下浓缩至干物质含量60%,获得浓缩物c,再将浓缩物c与步骤(2)获得的结晶合并放入烘箱,在65℃的温度烘干,约可得胆固醇1.0kg,收率92%。
实施例3
(1)挑选新鲜鸭蛋300kg装入蛋框,浸入清水中泡10~20分钟,然后用清水将鸭蛋洗干净、再用质量浓度0.5%NaOH水溶液作为消毒液浸泡鸭蛋5~10分钟,取出鸭蛋用清水冲去消毒液,晾干表面水分,用打分蛋器将禽蛋打开,分离出蛋黄、蛋清和蛋壳,约可得到100kg蛋黄、165kg蛋清和35kg蛋壳。
100kg蛋黄用搅拌器搅拌成蛋黄液,先添加体积浓度93%乙醇水溶液500L,其他操作同实施例1,获得蛋黄渣40kg和卵磷脂9.7g,收率9.7%。
(2)将步骤(1)获得的蛋黄渣,放入烘房,在50℃下烘至蛋黄渣含水分2.5%,将烘干的蛋黄渣放入提取罐内,添加无水乙醇400L,在65℃下提取60min,然后将提取液用离心机在4000r/min下离心10min,获得上层液B,将上层液B用泵抽入真空浓缩锅,在60℃、真空度0.09MPa下浓缩至干物质含量为50%,获得浓缩物a,取浓缩物a在25℃下使胆固醇自然结晶48小时,用离心机在4000r/min下离心10min,分离出上层液C和结晶(即胆固醇结晶)。
(3)将步骤(2)获得的上层液C用泵抽入真空浓缩锅,先在60℃、真空度0.09MPa下,真空浓缩至干物质含量60%,再放入真空干燥器在60℃、真空度0.09MPa下真空干燥至干物质含量96%,获得20kg浓缩物b,取浓缩物b加入β-环糊精6kg,水12kg,在35℃下搅拌20min,然后用离心机在4000r/min下离心10min,分离出上层蛋黄油(即上层液)和下层沉淀(即胆固醇-β-环糊精包合物)5kg,约可得蛋黄油18kg,收率90%。
(4)将步骤(3)获得的下层沉淀(即胆固醇-β-环糊精包合物)加52L无水乙醇,用NaOH调pH值为9.5,搅拌60min,使胆固醇-β-环糊精包合物中的胆固醇释放出来,然后用离心机在4000r/min下离心30min,分离出沉淀(即β-环糊精)和上层液D,将上层液D在60℃、真空度0.09MPa下浓缩至干物质含量80%,获得浓缩物c,取浓缩物c与步骤(2)获得的结晶合并放入烘箱,在60℃的温度下烘干,约可得胆固醇1.2kg,收率92%。
Claims (7)
1.一种从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法,其特征在于所述方法按以下步骤进行:
(1)将禽蛋蛋黄搅拌成蛋黄液,添加体积浓度为92~95%乙醇水溶液,在30~45℃下提取0.5~6小时,然后离心分离,获得上层液A和蛋黄渣,取上层液A浓缩、干燥得卵磷脂;所述乙醇水溶液的体积用量是蛋黄液质量的4~6倍;
(2)将步骤(1)获得的蛋黄渣于45~55℃干燥后,添加无水乙醇,在65~85℃下提取30~60min,然后离心分离,获得上层液B,取上层液B于55~65℃下真空浓缩后,获得浓缩物a,将浓缩物a于15~25℃的温度下自然结晶24~48小时,离心分离,获得上层液C和结晶;所述无水乙醇的体积用量是蛋黄渣重量的8~12倍;所述的结晶干燥,获得胆固醇;
(3)取上层液C于55~65℃下真空浓缩和真空干燥后,获得浓缩物b,将浓缩物b加入β-环糊精和水,25~35℃下搅拌20~40min,离心分离,获得上层蛋黄油和下层沉淀;所述β-环糊精的加入重量为浓缩物b重量的20~40%,所述水的加入重量为浓缩物b重量的40~80%。
2.如权利要求1所述的从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法,其特征在于所述方法还包含步骤(4):将步骤(3)获得的下层沉淀加入无水乙醇中,调pH值至9.5,搅拌60min,离心分离,获得上层液D和沉淀,弃去沉淀,取上层液D于55~65℃下真空浓缩后,获得浓缩物c,将浓缩物c与步骤(2)获得的结晶混合,再干燥,获得胆固醇;所述无水乙醇的体积用量是下层沉淀质量的8~12倍。
3.如权利要求1所述的从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法,其特征在于步骤(2)所述蛋黄渣在45~55℃下干燥至水分含量<3%。
4.如权利要求1所述的从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法,其特征在于步骤(2)所述上层液B于55~65℃下真空浓缩至干物质含量为30~50%,获得浓缩物a。
5.如权利要求1所述的从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法,其特征在于步骤(3)所述上层液C先于55~65℃下真空浓缩至干物质含量≥50%,再于55~65℃下真空干燥至干物质含量≥95%,获得浓缩物b。
6.如权利要求2所述的从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法,其特征在于步骤(4)所述上层液D于55~65℃下真空浓缩至干物质含量>50%,获得浓缩物c。
7.如权利要求2所述的从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油和胆固醇的方法,其特征在于所述方法按如下步骤进行:
(1)将禽蛋蛋黄搅拌成蛋黄液,添加体积浓度为92~95%乙醇水溶液,在30~45℃下提取0.5~6小时,反应结束后,离心分离,获得上层液A和蛋黄渣,取上层液A浓缩、干燥得卵磷脂;所述乙醇水溶液的体积用量为蛋黄液质量的4~6倍;
(2)将步骤(1)获得的蛋黄渣于45℃干燥至水分含量<3%后,添加无水乙醇,在65~85℃下提取30~60min,在4000rpm下离心10min,获得上层液B,取上层液B于55~65℃、0.088~0.094MPa下真空浓缩至干物质含量为30~50%后,获得浓缩物a,将浓缩物a于15~25℃的温度下自然结晶24~48小时,4000rpm离心分离10min,获得上层液C和结晶;所述无水乙醇的体积用量为蛋黄渣质量的8~12倍;
(3)取上层液C先于55~65℃、0.088~0.094MPa下真空浓缩至干物质含量≥50%,再于55~65℃、0.088~0.094MPa下真空干燥至干物质含量≥95%后,获得浓缩物b,将浓缩物b加入β-环糊精和水,25~35℃下搅拌20~40min,4000rpm离心分离10min,获得上层蛋黄油和下层沉淀;所述β-环糊精的加入量为浓缩物b重量的20~40%,所述水的加入量为浓缩物b重量的40~80%;
(4)将步骤(3)获得的下层沉淀加入无水乙醇中,调pH值至9.5,搅拌60min,4000rpm离心分离30min,获得上层液D和沉淀,弃去沉淀,取上层液D于55~65℃、0.088~0.094MPa下真空浓缩至干物质含量>50%后,获得浓缩物c,将浓缩物c与步骤(2)获得的结晶混合,55~65℃干燥,获得胆固醇;所述无水乙醇的体积用量为下层沉淀的8~12倍。
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