CN101671359B - 一种利用溶剂萃取制备高纯大豆卵磷脂的方法 - Google Patents

一种利用溶剂萃取制备高纯大豆卵磷脂的方法 Download PDF

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Abstract

一种利用溶剂萃取制备高纯大豆卵磷脂的方法,先利用丙酮脱除大豆浓缩磷脂原料中的豆油、再利用酒精萃取、酒精和丙酮混合溶剂萃取得PC含量大于70%(w/w)的高纯大豆卵磷脂。本发明方法萃取效率高、操作简便、成本较低、易于实现。

Description

一种利用溶剂萃取制备高纯大豆卵磷脂的方法
技术领域
本发明涉及大豆卵磷脂的制备方法,具体涉及一种利用溶剂萃取制备高纯大豆卵磷脂的方法。
背景技术
磷脂是动物细胞膜系统的主要构成成分,因此是形成生命最重要的基础物质之一,在神经及内脏系统中所占比例高于其它系统,例如:大脑、肝脏、卵黄、植物的种子等中磷脂的比例极高。由于磷脂是一种生物活性物质,它有着独特的理化性质和营养价值,所以,磷脂在世界范围内的食品、保健品、医药以及饲料行业越来越多广泛使用。人食用磷脂可以起到降低较高的血脂、改善脂肪肝症状、健脑益智及延缓衰老等生理功能。
磷脂是一类含磷类脂的总称,由卵磷脂(磷脂酰胆碱)、脑磷脂(磷脂酰乙醇胺)、肌醇磷脂(磷脂酰肌醇)、丝氨酸磷脂(磷脂酰丝氨酸)、神经鞘磷脂等混合组成。其中,卵磷脂(磷脂酰胆碱)是其中最具生物活性的一种。卵磷脂可以从大豆磷脂和蛋黄及蛋黄粉中提取,分别称为大豆卵磷脂和蛋黄卵磷脂,不同的磷脂在甲醇、乙醇和异丙醇中的溶解度不同,卵磷脂在低级醇中的溶解度最大,脑磷脂次之。
目前,国内外提取大豆卵磷脂是以大豆浓缩磷脂或大豆粉末磷脂为原料,采用溶剂法,一般为低级醇,例如,甲醇、乙醇或异丙醇,卵磷脂的含量为55%左右;层析法、膜分离或超临界CO2法等方法提取的卵磷脂含量可达到70%(w/w)以上,甚至90%(w/w)以上。
CN1884287A公开了一种用高剪切设备,以无水乙醇为萃取剂,从大豆粉末磷脂中萃取制备卵磷脂的方法,PC(磷脂酰胆碱)含量为55%(w/w)的产品。
CN1687084A公开了一种使用醇醚溶液为萃取剂,母液经超临界CO2萃取提取大豆卵磷脂的方法。
CN51500791A公开了一种高纯度磷脂酰胆碱的提纯方法,按该文献的内容,首先使用丙酮,脱除浓缩磷脂含有的豆油,然后以乙醇萃取得到大豆卵磷脂,PC(磷脂酰胆碱)含量为50%(w/w)以上的产品。
CN51390843A公开了一种从大豆粉末磷脂提取磷脂酰胆碱的方法,按该文献的内容,先乙腈-低碳醇浸提,减压脱除溶剂,获得PC含量为70%(w/w)以上的产品。
CN101066979A公开了一种高纯度磷脂酰胆碱的工业化生产的提取技术,按该文献的内容,该技术以乙醇萃取大豆粉末磷脂,萃取母液浓缩后,再以甲醇为洗脱剂进行分离纯化,得到高纯度磷脂酰胆碱。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种高效、方便的利用溶剂萃取制备高纯大豆卵磷脂的方法,通过该方法可以得到磷脂酰胆碱(PC)含量为70%(w/w)以上的高纯大豆卵磷脂。
本发明所指的高纯大豆卵磷脂为磷脂酰胆碱(PC)含量大于等于70%(w/w)的大豆卵磷脂。
为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案如下:
一种利用溶剂萃取制备高纯大豆卵磷脂的方法,包括如下步骤:
(1)脱除大豆浓缩磷脂中的豆油:
(1a)在萃取釜中,将大豆浓缩磷脂原料与丙酮按重量比1∶(1~10),搅拌混合20~60分钟;
(1b)将步骤(1a)得到的混合物料固液分离,液体部分经回收利用,固体部分经替换步骤(1a)中的大豆浓缩磷脂原料重复步骤(1a)和(1b)的操作1~3次;
(1c)将步骤(1b)得到的固体部分经真空干燥1~4小时,得到无油大豆粉末磷脂;
(2)酒精萃取:
(2a)在萃取釜中,将步骤(1c)得到的无油大豆粉末磷脂与酒精按重量比1∶1~10,搅拌混合10~20分钟;
(2b)将步骤(2a)得到的混合物料固液分离,液体部分经真空浓缩至总溶质(即大豆卵磷脂)含量为50~60%(w/w)(浓缩液中剩余的40~60%(w/w)部分即为酒精),蒸馏出的乙醇回收利用;
上述总溶质含量的检测方法为重量法,具体检测方法如下:
第一步,将托盘洗净,烘干。
第二步,称取烘干后的烘盘质量M1,向烘盘中加入适量大豆卵磷脂浓缩液(约30g),称重M2,放入真空烘箱干燥,烘箱温度在50~55℃,真空度在0.095MPa以上,干燥时间约1~3个小时。(此时干物质的水分及挥发物约为1%(w/w))
第三步,达到干燥时间后,关闭烘箱真空进行放空,及时将干燥好的大豆卵磷脂取出称量,M。
第四步,计算,总溶质=[M/(M2-M1)]×100%
(3)混合溶剂萃取:
(3a)向步骤(2b)得到的浓缩液中加入丙酮,丙酮的加入重量为浓缩液中酒精重量的2~8倍,搅拌混合10~20分钟;
(3b)将步骤(3a)得到的混合液静置15分钟以上,分层;
(3c)取上层液体,浓缩,真空干燥后得到高纯大豆卵磷脂。
步骤(2a)中,酒精的浓度为95~99.5%(v/v)。
步骤(1b)或(2b)中,固液分离方法为离心、或抽滤、或板框压滤。
步骤(1c)或(3c)中,真空干燥温度为10~80℃。
步骤(2b)中,真空浓缩温度为10~80℃。
步骤(3a)中,丙酮的加入重量优选为浓缩液中酒精重量的2~6倍。
通过上述方法制得的高纯大豆卵磷脂,其PC含量在70%(w/w)以上。
上述PC含量的检测方法为高效液相色谱法,具体检测方法为:HP1100高效液相色谱仪,按GB/T21493-2008大豆磷脂中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定方法执行。
不同的磷脂在低级醇(例如,甲醇、乙醇和异丙醇等)中的溶解度不同,卵磷脂在低级醇中的溶解度最大,脑磷脂次之;所有的磷脂(卵磷脂(磷脂酰胆碱)、脑磷脂(磷脂酰乙醇胺)、肌醇磷脂(磷脂酰肌醇)、丝氨酸磷脂(磷脂酰丝氨酸)、神经鞘磷脂等)均不溶于丙酮,所以,我们利用磷脂混合物中各组分对乙醇和丙酮溶剂溶解度的差异来分离不同的磷脂组分,达到富集卵磷脂(磷脂酰胆碱)的目的,根据以上原理,萃取的上层清液PC的含量大于下层。
大豆浓缩磷脂原料中一般含有约40%豆油、60%磷脂,其中磷脂酰胆碱的含量约12%左右。本发明方法先使用丙酮,脱除浓缩磷脂中含有约40%的豆油十分必要,这样改善了卵磷脂被大量豆油所包裹不易溶出的状态,保障了大豆卵磷脂的丙酮不溶物的含量,还大大减少乙醇的使用量,因此,在浓缩时可减少乙醇萃取液的处理量。采用乙醇萃取法,萃取的液相经浓缩和干燥后得到的干物质,经检测干物质中磷脂酰胆碱(PC)的含量一般在55%左右,如果使萃取温度、固液比、酒精浓度等参数改变,PC的含量一般会在50%左右波动,但PC的含量不会突破60%。当萃取的液相经浓缩至50~60%时,在含有乙醇的浓缩液中加入一定量的丙酮,采用乙醇和丙酮混合溶剂法进一步萃取,上层清液经干燥得到卵磷脂含量70%以上的产品,以简便的方法,较少的设备投入和较低的生产成本,获得高纯PC产品的方法是本发明的特点。
有益效果:通过本发明方法得到的高纯大豆卵磷脂,PC含量在70%以上。
卵磷脂(磷脂酰胆碱,PC)是磷脂混合物中最重要的组成成分,具有重要的生理功能。它是细胞膜的重要组成成分,起保护层的作用,能重新修复由于自由基攻击生物大分子而产生的膜损伤;它具有胆碱成分,胆碱对脂肪具有亲和力,可使脂肪以磷脂形式由肝脏通过血液输送出去,从而防止脂肪肝的形成;它是提供神经物质乙酰胆碱的前体物质,具有健脑功能,还用于脂质体的研究,以及作为抗癌药物的研究,在食品、医药、化妆品等领域有广阔的应用前景。
磷脂中不同卵磷脂含量的产品有着不同的用途,PC含量在25%~55%范围的磷脂产品,主要是食品,特别是保健食品的原料,有研究资料显示,每天每人口服7.5克的大豆磷脂,可以起到降低血脂、健脑益智、防治脂肪肝等生理功效。PC含量大于70%的磷脂产品主要用于医药原料及高档化妆品脂质体的研究,特别是抗癌药物以及靶向药物的应用,本发明工艺萃取效率高、操作简便、成本较低、易于实现。
具体实施方式:
根据下述实施例,可以更好地理解本发明,然而,本领域的技术人员容易理解,实施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明,而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1:
(1)脱除大豆浓缩磷脂中的豆油:
(1a)在100L萃取釜中,加入丙酮60千克,开启搅拌装置,同时细流缓缓加入大豆浓缩磷脂10千克,搅拌状态持续20分钟;
(1b)将步骤(1a)得到的混合物料静置20分钟,缓缓抽去上层清液并回收利用,固体部分再加入丙酮40千克,搅拌状态持续20分钟后静置30分钟,抽滤固液分离,固体部分再加入丙酮40千克,搅拌状态持续20分钟后静置30分钟,抽滤固液分离;
(1c)将步骤(1b)得到的固体部分放入盘中,在60~70℃温度,真空度0.07~0.095MPA条件下,烘干3小时,粉碎后得到6.1千克的无油大豆粉末磷脂;
(2)酒精萃取:
(2a)在100L萃取釜中,注入浓度为95%(v/v)的酒精30千克,开启搅拌装置,加入6公斤步骤(1c)得到的大豆粉末磷脂,搅拌状态持续15分钟;
(2b)将步骤(2a)得到的混合物料固液分离,液体部分经真空浓缩至总溶质(即大豆卵磷脂)含量为50%(w/w)(浓缩液中剩余的50%(w/w)部分即为酒精),蒸馏出的乙醇回收利用,得到3.6千克浓缩液;
(3)混合溶剂萃取:
(3a)称取步骤(2b)得到的浓缩液266克(其中酒精含量156g),缓缓加入丙酮780克,搅拌混合20分钟;
(3b)将步骤(3a)得到的混合液静置15分钟,分层;
(3c)分液漏斗分离取上层液体,浓缩,真空干燥后得到干物质87.3克。样品编号为1#;下层液体,浓缩,真空干燥后得到干物质69.2克,样品编号为2#,检测结果见表1。
表1 实施例1的PC分析结果
  样品编号   1#   2#
  PC含量   69.9%(w/w)   54.6%(w/w)
实施例2:
制备方法如下:
(1)脱除大豆浓缩磷脂中的豆油:
(1a)在500L萃取釜中,加入丙酮300千克,开启搅拌装置,同时细流缓缓加入大豆浓缩磷脂80千克,搅拌状态持续40分钟;
(1b)将步骤(1a)得到的混合物料静置30分钟,缓缓抽去上层清液并回收利用,固体部分再加入丙酮200千克,搅拌状态持续30分钟后静置30分钟,抽滤固液分离,固体部分再加入丙酮200千克,搅拌状态持续30分钟后静置30分钟,抽滤固液分离;
(1c)将步骤(1b)得到的固体部分放入盘中,在60~70℃温度,真空度0.07~0.095MPA条件下,烘干4小时,粉碎后得到47.6千克的无油大豆粉末磷脂;
(2)酒精萃取:
(2a)在500L萃取釜中,注入浓度为95%(v/v)的酒精250千克,开启搅拌装置,加入47千克步骤(1c)得到的大豆粉末磷脂,搅拌状态持续20分钟;
(2b)将步骤(2a)得到的混合物料固液分离,液体部分经真空浓缩至总溶质(即大豆卵磷脂)含量为58%(w/w)(浓缩液中剩余的42%(w/w)部分即为酒精),蒸馏出的乙醇回收利用,得到23.6千克浓缩液;
(3)混合溶剂萃取:
(3a)称取步骤(2b)得到的浓缩液23千克(其中酒精含量9.7千克),缓缓加入丙酮34.0千克,搅拌混合20分钟;
(3b)将步骤(3a)得到的混合液静置30分钟,分层;
(3c)从设备底部接管放出下层液体,再放取上层液体,分别盛放并浓缩,上层液体,浓缩,真空干燥后得到干物质9.9千克,样品编号为3#;下层液体,浓缩,真空干燥后得到干物质11.3千克,样品编号为4#,检测结果见表2。
表2 实施例2的PC分析结果
  样品编号   3#   4#
  PC含量   71.6%(w/w)   56.4%(w/w)
实施例3:
(1)脱除大豆浓缩磷脂中的豆油:
(1a)在100L普通萃取釜中,加入丙酮40千克,开启搅拌装置,同时细流缓缓加入大豆浓缩磷脂20千克,搅拌状态持续30分钟;
(1b)将步骤(1a)得到的混合物料静置30分钟,缓缓抽去上层清液并回收利用,固体部分再加入丙酮40千克,搅拌状态持续30分钟后静置30分钟,抽滤固液分离,固体部分再加入丙酮40千克,搅拌状态持续30分钟后静置30分钟,抽滤固液分离;
(1c)将步骤(1b)得到的固体部分放入盘中,在60~70℃温度,真空度0.07~0.095MPA条件下,烘干4小时,粉碎后得到12.2千克的无油大豆粉末磷脂;
(2)酒精萃取:
(2a)在100L普通萃取釜中,注入浓度为99%(v/v)的酒精50千克,开启搅拌装置,加入12.2千克步骤(1c)得到的大豆粉末磷脂,搅拌状态持续20分钟;
(2b)将步骤(2a)得到的混合物料固液分离,液体部分经真空浓缩至总溶质(即大豆卵磷脂)含量为50%(w/w)(浓缩液中剩余的50%(w/w)部分即为酒精),蒸馏出的乙醇回收利用,得到6.3千克浓缩液;
(3)混合溶剂萃取:
(3a)称取步骤(2b)得到的浓缩液270克(其中酒精含量135g),缓缓加入丙酮486克,搅拌混合20分钟;
(3b)将步骤(3a)得到的混合液静置20分钟,分层;
(3c)分液漏斗分离取上层液体,浓缩,真空干燥后得到干物质69.6克。样品编号为5#;下层液体,浓缩,真空干燥后得到干物质85.4克,样品编号为6#,检测结果见表3。
表3 实施例3的PC分析结果
  样品编号   5#   6#
  PC含量   70.5%(w/w)   53.0%(w/w)

Claims (6)

1.一种利用溶剂萃取制备高纯大豆卵磷脂的方法,其特征在于该方法包括如下步骤:
(1)脱除大豆浓缩磷脂中的豆油:
(1a)在萃取釜中,将大豆浓缩磷脂原料与丙酮按重量比1∶1~10,搅拌混合20~60分钟;
(1b)将步骤(1a)得到的混合物料固液分离,液体部分经回收利用,固体部分经替换步骤(1a)中的大豆浓缩磷脂原料重复步骤(1a)和(1b)的操作1~3次;
(1c)将步骤(1b)得到的固体部分经真空干燥1~4小时,得到无油大豆粉末磷脂;
(2)酒精萃取:
(2a)在萃取釜中,将步骤(1c)得到的无油大豆粉末磷脂与酒精按重量比1∶1~10,搅拌混合10~20分钟;
(2b)将步骤(2a)得到的混合物料固液分离,液体部分经真空浓缩至总溶质的重量百分含量为50~60%,蒸馏出的乙醇回收利用;
(3)混合溶剂萃取:
(3a)向步骤(2b)得到的浓缩液中加入丙酮,丙酮的加入重量为浓缩液中酒精重量的2~8倍,搅拌混合10~20分钟;
(3b)将步骤(3a)得到的混合液静置15分钟以上,分层;
(3c)取上层液体,浓缩,真空干燥后得到高纯大豆卵磷脂;
所述的高纯大豆卵磷脂为磷脂酰胆碱重量百分含量大于等于70%的大豆卵磷脂。
2.根据权利要求1所述的利用溶剂萃取制备高纯大豆卵磷脂的方法,其特征在于步骤(2a)中,酒精的体积百分浓度为95~99.5%。
3.根据权利要求1所述的利用溶剂萃取制备高纯大豆卵磷脂的方法,其特征在于步骤(1b)或(2b)中,固液分离方法为离心、或抽滤、或板框压滤。
4.根据权利要求1所述的利用溶剂萃取制备高纯大豆卵磷脂的方法,其特征在于步骤(1c)或(3c)中,真空干燥温度为30~80℃。
5.根据权利要求1所述的利用溶剂萃取制备高纯大豆卵磷脂的方法,其特征在于步骤(2b)中,真空浓缩温度为30~80℃。
6.根据权利要求1所述的利用溶剂萃取制备高纯大豆卵磷脂的方法,其特征在于步骤(3a)中,丙酮的加入重量为浓缩液中酒精重量的2~6倍。
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