CN105326706A - 一种含有茶枯提取物的洗手液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种含有茶枯提取物的洗手液及其制备方法。本发明提供的含有茶枯提取物的洗手液与现有洗手液等清洁剂的配方相比，使用的茶枯提取物是富含生物活性物质，具有较强的去污能力和起泡能力、以及抑菌、抗氧化和保湿滋润等功效；本发明还采用天然的茶枯粉作为洗手液中的磨砂颗粒，在使用时，可通过悬浮的茶枯粉将油污快速剥离，且对皮肤的刺激性小，适合长期使用；值得一提的是，本发明为茶枯综合利用找到新的途径，可以很好地大量利用茶枯原料，有效避免茶枯的浪费，使用茶枯提取液制作的生物洗手液环保效果好，具有较高的社会效益。

Description

一种含有茶枯提取物的洗手液及其制备方法

技术领域

本发明涉及日化技术领域，具体涉及一种含有茶枯提取物的洗手液及其制备方法。

背景技术

油茶系山茶科山茶属植物，常绿小乔木，是我国特有的树种。油茶树是世界四大木本油料之一，它生长在中国南方亚热带地区的高山及丘陵地带，是中国特有的一种纯天然高级油料。主要集中在浙江、江西、河南、湖南、广西五省。至2013年底我国油茶林种植总面积已达到5750万亩，年产油茶籽达76万余吨，利用油茶籽制取的茶籽油中不饱和脂肪酸含量一般在90％以上，是一种具有保健功能的高级食用油。而油茶籽榨油时会产生约60％的茶枯，油枯组分一般为：粗蛋白15％，粗脂肪5％，糖类40％，粗纤维6％，茶皂素10-14％，总灰分6％，丹宁2％，咖啡碱0.95％，水分14％。由于油茶皂素、单宁的存在导致茶枯具苦涩味，加上纤维素含量高，无法得到充分利用，大部分的茶枯都会当燃料烧掉，或廉价出口，造成资源浪费。近年来，对茶枯饼的开发利用已日益引起了各地的高度重视，国内外学者对茶枯饼所含的主要成分也进行了综合研究。随着茶枯的提取工艺得到进一步开发，茶枯将会得到进一步的开发利用。

茶枯提取物中天然活性成分大多为茶皂素。茶皂素是一种五环三菇类化合物，由糖体、甙元及有机酸组成，它是一种天然的非离子型表面活性剂，具有分散、乳化、发泡、湿润、渗透等活性作用，所形成的乳液粒子小，分布均匀，稳定性好。同时，它能够显著地降低水的表面张力，且在硬水中的具有很好稳定性；茶皂素具有很强的起泡能力，有资料表明：茶皂素的起泡能力优于上等肥皂，而且茶皂素有较明显的抑菌作用；茶皂素性质温和，对皮肤刺激性小，无明显毒理性作用。茶皂素可以作为基质成分用于洗发水、沐浴液、洗手液等洗护用品中。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种含有茶枯提取物的洗手液及其制备方法。

第一方面，本发明提供了一种含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，包括：

pH调节剂、防腐剂、外观调节剂适量；

余量为水；

其中，所述护肤剂为乙二醇、丙三醇和羊毛脂中的至少一种；

所述增稠剂为氯化铵、羟乙基纤维素和氯化钠中的至少一种；

所述外观调节剂为苹果香精、薰衣草香精和桂花香精中的至少一种。

优选地，所述护肤剂为丙三醇和羊毛脂。

优选地，所述增稠剂为羟乙基纤维素。

优选地，所述pH调节剂为柠檬酸。

优选地，所述防腐剂为卡松(K15)。

优选地，所述外观调节剂为桂花香精。

进一步优选地，所述含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，包括：茶枯提取物4％、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AESA)9％、十二烷基硫酸钠(K12)3％、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)3％、十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)4％、水溶性羊毛脂1％、丙三醇3％、羟乙基纤维素1％、柠檬酸、桂花香精、卡松适量、余量为去离子水。

进一步优选地，所述含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，包括：茶枯提取物4％、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AESA)11％、十二烷基硫酸钠(K12)1％、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)1％、十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)8％、水溶性羊毛脂1％、丙三醇3％、羟乙基纤维素1％、柠檬酸、桂花香精、卡松适量、余量为去离子水。

进一步优选地，所述含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，包括：茶枯提取物4％、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AESA)7％、十二烷基硫酸钠(K12)1％、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)5％、十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)4％、水溶性羊毛脂1％、丙三醇3％、羟乙基纤维素1％、柠檬酸、桂花香精、卡松适量、余量为去离子水。

进一步优选地，所述含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，包括：茶枯提取物4％、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AESA)7％、十二烷基硫酸钠(K12)5％、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)1％、十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)6％、水溶性羊毛脂1％、丙三醇3％、羟乙基纤维素1％、柠檬酸、桂花香精、卡松适量、余量为去离子水。

进一步优选地，所述含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，包括：茶枯提取物2％、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AESA)7％、十二烷基硫酸钠(K12)5％、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)3％、十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)8％、水溶性羊毛脂1％、丙三醇3％、羟乙基纤维素1％、柠檬酸、桂花香精、卡松适量、余量为去离子水。

进一步优选地，所述含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，包括：茶枯提取物6％、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AESA)11％、十二烷基硫酸钠(K12)5％、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)5％、十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)4％、水溶性羊毛脂1％、丙三醇3％、羟乙基纤维素1％、柠檬酸、桂花香精、卡松适量、余量为去离子水。

优选地，所述茶枯提取物采用下述方法得到：

采用水提醇沉法从茶枯中提取获得。

可以理解的是，如本发明所述的水提醇沉法为本领域技术人员容易理解的常规技术，包括但不限于如下步骤：

(1)茶枯粉碎后获得茶枯粉；

(2)60-80℃(优选为75℃)的水浸泡步骤(1)所得茶枯粉0.5-5小时(优选为2小时)，过滤得到茶枯浸泡液；其中，水的用量为茶枯粉重量的2-5倍；

(3)在茶枯浸泡液中加入2-4倍体积的有机溶剂(比如石油醚或乙醇)萃取，静置后分层，取上层干燥至水分质量分数低于1-3％，得到茶枯提取物。

进一步优选地，所述茶枯粉的大小为20-200目。

优选地，所述含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，还包括磨砂剂0.01-1％。

进一步优选地，所述磨砂剂为茶枯粉，所述茶枯粉的大小优选为20-200目。

可以理解的是，如本发明所述的茶枯粉作为洗手液中的纯天然磨砂颗粒，在使用时，可通过悬浮的茶枯粉将油污快速剥离，且对皮肤的刺激性小，适合长期使用。

优选地，所述含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，还包括天然抑菌化合物0.05-1％；其中，天然抑菌化合物为化合物P1和化合物P2中的至少一种，化合物P1的化学结构式如式Ⅰ所示：

P2的化学结构如式Ⅱ所示：

第二方面，本发明提供了一种如第一方面所述的含有茶枯提取物洗手液的制备方法，包括如下步骤：

(1)将表面活性剂脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AESA)、十二烷基硫酸钠(K12)、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)、十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)混合加热到60-80℃，加水搅拌混合直至全部溶解；

(2)将护肤剂加热至60-80℃(优选为70℃)后，加入到步骤(1)所得的混合物中，搅拌使之乳化，冷却到35-45℃(优选为40℃)；

(3)将茶枯提取物、防腐剂、增稠剂、外观调节剂加入步骤(2)所得混合物，搅拌混合；

(4)采用pH调节剂将步骤(3)所得混合物的pH值调至5.0-6.5，冷却后，获得含有茶枯提取物洗手液；

按照上述步骤所得的含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，包括：

pH值调节剂、防腐剂、外观调节剂适量；

余量为水；

其中，所述护肤剂为乙二醇、丙三醇和羊毛脂中的至少一种；

所述增稠剂为氯化铵、羟乙基纤维素和氯化钠中的至少一种；

所述外观调节剂为苹果香精、薰衣草香精和桂花香精中的至少一种。

优选地，所述步骤(3)中，还包括：

将茶枯粉加入步骤(2)所得混合物，搅拌混合；其中，茶枯粉占所述含有茶枯提取物的洗手液的重量百分比为0.01-1％。

进一步优选地，所述茶枯粉由茶枯原料研细过筛获得。

优选地，所述步骤(3)中，还包括：

将天然抑菌化合物加入步骤(2)所得混合物，搅拌混合；其中，天然抑菌化合物占所述含有茶枯提取物的洗手液的重量百分比为0.05-1％，天然抑菌化合物为化合物P1和P2中的至少一种。

可以理解的是，任何熟悉本技术领域的技术人员都可以将本发明提供的含茶枯提取的洗衣液的配方及其制备方法用于生产制备洗发水、沐浴液等洗护用品中。

本发明的有益效果在于：

(1)本发明与现有洗手液等清洁剂的配方相比，使用天然的的茶枯提取物是具有较强的去污能力和起泡能力，可以代替其他化学物质，并且其来源广，价格便宜，同时茶枯提取物富含生物活性物质具有抑菌、抗氧化、防晒抗紫、保湿滋润等功效，对人体无伤害；

(2)本发明采用天然的茶枯粉作为洗手液中的磨砂颗粒，在使用时，可通过悬浮的茶枯粉将油污快速剥离，且对皮肤的刺激性小，适合长期使用；

(3)本发明为茶枯综合利用找到新的途径，可以很好地大量利用茶枯原料，有效避免茶枯的浪费，使用茶枯提取液制作的生物洗手液环保效果好，具有较高的社会效益。

附图说明

图1是本发明实施例提供的油茶提取物质量分数对去污力的影响图。

具体实施方式

本发明实施例所用菌种和相关试剂以如下方法制得：

一、菌种培养

(1)大肠杆菌培养：挑取斜面保藏的大肠杆菌菌种转接至装有10ml营养肉汤液体培养基的试管中，37℃静置培养48-72h。

(2)金黄色葡萄球菌培养：挑取斜面保藏的金黄色葡萄球菌种转接至装有10ml营养肉汤液体培养基的试管中，37℃静置培养18-24h。

二、试剂配制

(1)磷酸盐缓冲液(PBS，0.03mol/L，pH＝7.2-7.4)：将2.83g无水磷酸氢二钠和1.36g磷酸二氢钾加入到1000ml蒸馏水中，待完全溶解后，调pH至7.2-7.4，于121℃压力蒸气灭菌20min备用。

(2)中和剂：将0.5g硫代硫酸钠、1g卵磷脂和1g吐温-80加入100ml的0.03mol/L磷酸盐缓冲液中，于121℃压力蒸气灭菌15min备用。

(3)菌悬液：取金黄色葡萄球菌或大肠杆菌24h新鲜培养物，用含1000mg/L蛋白胨磷酸盐缓冲液冲洗下培养物，配制成所需浓度的菌悬液备用。

下面结合附图和实施例对本发明做进一步说明。

实施例1

一种茶枯提取物的制备方法，包括如下步骤：

(1)取茶枯样品粉碎至20-200目，获得茶枯粉，称量2000g茶枯粉，置于桶中备用。

(2)将75℃10L的水倒入桶中，浸泡茶枯2小时。

(3)用纱布对步骤(2)所得茶枯浸泡液进行过滤。

(4)使用抽真空旋转蒸发仪对步骤(3)所得茶枯浸泡液茶枯浸泡液进行提取分离。因为茶枯含有茶皂素加热搅拌容易起泡，所以刚开始先将温度调整至50℃，待茶枯浸泡液起泡稳定，不再喷向蒸馏水收集瓶，再将温度调整至60℃，待茶枯浸泡液再次稳定，则将温度调整至70℃。当旋转圆底烧瓶中的茶枯提取液粘稠挂壁时，停止转动烧瓶，再旋开三通活塞通大气，放下蒸馏瓶，将瓶中的茶枯提取液倒入事先清洁干净的玻璃杯中。

(5)重复(4)的步骤，提取1000ml的茶枯提取液备用。

(6)将步骤(5)提取得到的提取液平均分批加入石油醚萃取(石油醚与提取液的体积比为6:1)，静置后分层，将上层石油醚萃取液倒出在铁盆子上，放到烘干箱调整温度70℃烘至干燥无水分，获得200g茶枯提取物。

实施例2单因素实验

(1)取实施例1获得的茶枯提取物。

(2)实验组：将脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AESA)、十二烷基硫酸钠(K12)、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)、十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)分别固定为9g、4g、4g、6g，和不同质量的步骤(1)所得茶枯提取物分别搅拌混合加热到70℃，直至全部溶解，加入去离子水至100g，边搅拌反应边冷却制成试液。

(3)空白对照组：按照步骤(2)，配制茶枯提取物的质量分数为0的空白对照试液。

(4)去污能力的测定：将手涂上油等物质，用试液清洗，考察去污效果。

(5)杀菌效果测定：将步骤(2)所得的试液用倍稀释法稀释，取2.5ml不同浓度的稀释液与2.5ml大肠杆菌的菌悬液混匀，作用5min，取0.5ml菌药混合液加入4.5ml中和剂溶液内，中和作用10min，取该液0.5ml接种于4.5ml营养肉汤中，于30℃培养至第7天，以肉汤不混浊为无菌生长。

根据茶枯提取物的质量分数与杀菌效果以及去污能力之间的关系，得到茶枯提取物的最适质量分数。

实验结果

茶枯提取物质量分数对杀菌效果的影响如表2所示，茶枯提取物质量分数对去污力的影响如图1所示。由表1可知，当茶枯提取物质量分数大于4％时，增加茶枯提取物浓度对抑菌能力没有影响或影响较少。由图1可知，茶枯提取物质量分数为4％时，洗手液去污能力得到极大值。综述，茶枯提取物质量分数最适为4％。

表1茶枯提取物质量分数对杀菌效果的影响

实施例3正交实验

(1)取实施例1获得的茶枯提取物。

(2)按照实施例2的步骤(2)和步骤(4)，以5种表面活性剂茶枯提取物，脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AESA)，十二烷基硫酸钠(K12)，椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)，十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)为影响因素，以各表面活性剂的最适质量分数及其相邻的2个梯度为水平数，以杀菌效果(杀菌效果以不同浓度洗手液对大肠杆菌杀灭效果表示)、去污能力、外观为评价标准作选用L16(5³)正交表来优化洗手液配方。正交试验的因素水平设置见表2和表3。

(3)杀菌效果测定：试验菌为大肠杆菌，取5支试管，分别加入2.5ml菌悬菌然后将不同浓度洗手液(对照组为磷酸盐缓冲液)2.5ml分别加入5支试管中，混匀，分别作用5min，作用后各取0.5ml菌药混合液接种于4.5ml含中和剂的营养肉汤内，于30℃培养至第7天，以肉汤不混浊为无菌生长。

表2实验因素水平设置

表3五因素三水平正交实验表

实验结果：

正交实验结果如表4所示，由表5可知，2.5ml1，2，5，6，7，8，12，14号洗手液对2.5ml大肠杆菌菌悬液的最低抑菌浓度均为25％，抑菌效果较好；1，3，4，5，7，9，10，11，12，13，15号配方外观较好；综上述1，5，7，12号配方既抑菌好，外观也好，而其中12号配方去污能力最好，综合考虑12号配方为最优方案。即最终配方确定为茶枯提取物(4％)，脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AESA)(9％)，十二烷基硫酸钠(K12)(3％)，椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)(3％)，十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)(4％)，水溶性羊毛脂(1％)，丙三醇(3％)，羟乙基纤维素(1％)，柠檬酸、香精、防腐剂(卡松)适量，余量为去离子水。

表4正交实验结果

实施例4一种含有茶枯提取物洗手液的制备方法，包括如下步骤：

(1)将表面活性剂脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AESA)，十二烷基硫酸钠(K12)，椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)，十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)(35％)混合加热到70℃，加水搅拌混合直至全部溶解；

(2)将羊毛脂和甘油混合加热至70℃后，加入到步骤(1)所得的混合物中，搅拌使之乳化，冷却到40℃；

(3)将实施例1所得的茶枯提取物、卡松、香精依次加入步骤(2)所得混合物，搅拌混合；

(4)采用柠檬酸将步骤(3)所得混合物的pH值调至5.0-6.5，冷却后，获得含有茶枯提取物洗手液。

按照上述步骤所得的含有茶枯提取物洗手液，按重量百分比计，包括：

柠檬酸、香精、卡松适量；

余量为去离子水。

实施例5中和剂选择实验

为了进一步说明本发明的有益效果，取实施例4获得的洗手液，检测所述洗手液的中和试剂选择实验。试验菌为金黄色葡萄球菌，试验设平行6组，具体如表5所示，在25℃，所得洗手液原液与金黄色葡萄球菌悬液混匀后，作用2min，加中和剂之后作用10min后观察。

表5洗手液中和剂试验结果

实验结果

实验结果如表6所示，以第6组不长菌，第3、4、5组组间菌数不超过10％，第1组不长菌或长菌量远低于第2组长菌量，超过100cfu/ml，表明所用中和剂及其浓度适宜，即用含1％的硫代硫酸钠、1％吐温-80、0.5％的硫代硫酸钠的磷酸盐缓冲液中和洗手液原液是符合所定要求的。

表6洗手液中和剂试验结果

实施例6洗手液原液作用不同时间的杀菌效果检测

为了进一步说明本发明的有益效果，取实施例4获得的洗手液，检测所述洗手液作用不同时间的杀菌效果。试验菌为金黄色葡萄球菌与大肠杆菌，取5支试管，分别加入2.5ml菌悬菌然后将2.5ml洗手液原液(对照组为磷酸盐缓冲液)分别加入5支试管中，混匀，分别作用1min，2min，3min，4min，5min，作用后各取0.5ml菌药混合液接种于4.5ml含中和剂的营养肉汤内，于30℃培养至第7天，以肉汤不混浊为无菌生长。

实验结果

试验温度为25℃，阳性对照组肉汤培养基中大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均自然生长，所有结果经3次重复，实验结果如表7所示，实验结果表明，2.5ml洗手液原液和2.5ml大肠杆菌菌悬液或2.5ml金黄色葡萄球菌菌悬液作用时间为1min时，并不能有效杀灭细菌，至少需作用2min左右。

表7不同作用时间的杀菌效果

实施例7不同浓度洗手液的杀菌效果检查

为了进一步说明本发明的有益效果，取实施例4获得的洗手液，检测所述洗手液的杀菌效果。试验菌为金黄色葡萄球菌与大肠杆菌，以对倍稀释法用无菌蒸馏水配置不同浓度的洗手液，试验时，分别将2.5ml不同浓度的实施例3所得洗手液(对照为蒸馏水)和2.5ml菌悬液混匀，置25℃水浴中，作用5min，取0.5ml菌药混合液，加入4.5ml中和剂溶液内，洗手液的终浓度如表8所示，中和作用10min，取该液0.5ml接种于4.5ml营养肉汤中，于30℃培养至第7天，以肉汤不混浊为无菌生长。

实验结果

不同浓度洗手液的杀菌效果如表8所示，实验结果表明，2.5ml洗手液对2.5ml大肠杆菌菌悬液的最低抑菌浓度25％左右，低于25％浓度，并不能有效杀灭大肠杆菌；2.5ml洗手液对2.5ml金黄色葡萄球菌菌悬液的最低抑菌浓度为37.5％左右，低于百分之37.5％并不能有效杀灭金黄色葡萄球菌。

表8不同浓度洗手液的杀菌效果

实施例8性能指标测定

为了进一步说明本发明的有益效果，重复实施例4的步骤，获得洗手液，根据GB19877.1-2005《特种洗手液》测定洗手液的感官指标，理化指标。

①pH值的测定：25℃条件下，用pH试纸测洗手液的pH值。

②稳定性的测定：将试样放入电热恒温箱温箱中并将温度调到(40±1)℃，放置24小时后，取出恢复室温后观察现象并记录；将试样放入冰箱中并将温度调到(-5±2℃)，放置24小时后，取出恢复室温后观察现象并记录。

③去污能力的测定：用移液管取0.25ml的洗手液产品于烧杯中，加入100ml的水，摇匀，滴加纯机油，振荡，滴加到最后一滴机油不溶解为止，准确记录洗手液溶解纯机油的体积，用记录体积的大小来表征洗手液去污能力的相对大小。

④起泡能力的测定：采用震荡法测定。在比色管中加入0.01ml待测洗手液，再加入10ml蒸馏水，盖好盖子，震摇50次(震摇方向、快慢、强度等尽可能一致)，取下盖子，加入10ml的水，将比色管壁上泡沫冲下，记录泡沫的高度及泡沫破坏到原有高度一半时所需时间，以泡沫高度作为洗手液起泡性能的量度，以泡沫破坏到原有高度一半时所需时间表征泡沫的稳定性。

实验结果

经3次重复实验，洗手液的感官指标和理化指标如表9所示，本产品符合GB19877.1-2005《特种洗手液特种沐浴剂和特种香皂的应急国家标准》中的感官指标，由表9可知，该洗手液各项性能均优于相应的国家标准，洗手液配方合理。外观漂亮；泡沫细腻适中，易于冲洗；黏度适中，洗手液在手中有一定滞留时间，也较为容易冲洗，有较高去污能力；pH值适中，对皮肤无刺激性作用；产品的护肤成分丙三醇、水溶性羊毛脂，对手部皮肤起到滋润保湿的功效。

表9洗手液的感官指标和理化指标

实施例9

一种含有茶枯提取物和茶枯粉的洗手液的制备方法，包括如下步骤：

(1)将表面活性剂脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AESA)、十二烷基硫酸钠(K12)、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)、十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)混合加热到70℃，加水搅拌混合直至全部溶解。

(2)将羊毛脂和甘油混合加热至70℃后，加入到步骤(1)所得的混合物中，搅拌使之乳化，冷却到40℃。

(3)将茶枯提取物、卡松、羟乙基纤维素、香精依次加入步骤(2)所得混合物，搅拌混合。

(4)采用柠檬酸将步骤(3)所得混合物的pH值调至6.0，冷却后，获得含有茶枯提取物洗手液。

按照上述步骤所得的含有茶枯提取物洗手液，按重量百分比计，包括：

柠檬酸、香精、卡松适量；

余量为去离子水。

实施例10

抑菌化合物P1和P2的制备方法，包括如下步骤：

(1)原料处理：将油茶籽粕粉碎至20-80目，得到茶粉原料。

(2)连续相变萃取：将步骤(1)所得茶粉原料1.5kg并装入萃取釜中，在始终低于萃取剂的临界压力和临界温度的条件下，将浓度为80％的乙醇萃取剂压缩为液体，在萃取温度80℃、萃取压力0.4MPa的条件下，以100L/h的流速流经萃取釜，连续萃取1h，萃取油茶中抑菌物质后，在解析温度80℃、解析压力0.2MPa的条件下，流经解析釜中，获得萃取物。

(3)将步骤(2)所得的抑菌物质浓缩干燥后，加入蒸馏水溶解，摇匀，转入分液漏斗中，加入4倍体积的石油醚，充分振摇萃取，静置，待溶液完全分层后，放出上层的石油醚萃取液，减压浓缩得石油醚萃取物。

(4)将步骤(3)所得石油醚萃取物加入蒸馏水溶解后，加入4倍体积的乙酸乙酯，充分振摇萃取，静置，待溶液完全分层后，放出上层的乙酸乙酯萃取液，减压浓缩得乙酸乙酯萃取物。

(5)将步骤(4)所得乙酸乙酯萃取物加入蒸馏水溶解后，加入4倍体积的正丁醇，充分振摇萃取，静置，待溶液完全分层后，放出上层的正丁醇萃取液，直至正丁醇层澄清无色，将萃取液合并，减压浓缩得正丁醇萃取物。

(6)将步骤(5)中所得正丁醇萃取物浓缩干燥后，采用高速逆流色谱(HSCCC)对所得正丁醇萃取物进行分离纯化；高速逆流色谱(HSCCC)的条件为乙酸乙酯-正丁醇-水(含3％乙酸)(1:4:4，V/V)体系，流速为1.5ml/min，转速为850r/min，进样量为500ml，进样液为3ml，分别收集三个峰对应的组分，分别命名为F1，F2(P1)，F3，浓缩冻干物P1，P1的重量为50g，纯度为98.5％，备用。

油茶提取物P1为山奈酚-3-O-{β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-[α-L-鼠李糖-(1→6)]-β-D-葡萄糖甙}(即aempferol-3-O-{β-D-glucopyranosyl-(1→2)-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)]-β-D-glucopyranoside})，化学结构式如式Ⅰ所示：

为进一步说明本发明的有益效果，重复上述实验步骤，将所得的F3组分采用高效液相色谱(HPLC)进一步分离，HPLC操作条件：谱柱选用C18色谱柱，流动相选用30％的甲醇溶液，检测波长为210nm，流速10ml/min，进样量为50μl，样品浓度15mg/ml；冷冻干燥后得到P2，P2的重量为50g，纯度为98.7％，备用。

所述油茶提取物P2为山奈酚-3-O-{β-D-吡喃木糖-(1→2)-[α-L-鼠李糖-(1→6)]-β-D-葡萄糖甙}(kaempferol-3-O-{β-D-xylopyranosyl-(1→2)-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)]-β-D-glucopyranoside})，化学结构如式Ⅱ所示：

实施例11

一种含有化合物P1的洗手液的制备方法，包括如下步骤：

(1)将表面活性剂脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AESA)，十二烷基硫酸钠(K12)，椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)，十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)混合加热到70℃，加水搅拌混合直至全部溶解。

(2)将羊毛脂和甘油混合加热至70℃后，加入到步骤(1)所得的混合物中，搅拌使之乳化，冷却到40℃。

(3)将茶枯提取物、化合物P1、羟乙基纤维素、卡松、香精依次加入步骤(2)所得混合物，搅拌混合。

(4)采用柠檬酸将步骤(3)所得混合物的pH值调至6.0，冷却后，获得含有茶枯提取物洗手液。

按照上述步骤所得的含有茶枯提取物洗手液，按重量百分比计，包括：

柠檬酸、香精、卡松适量；

余量为去离子水。

实施例12

为进一步说明本发明的有益效果，重复实施例11的步骤，将实施例11步骤(3)中的化合物P1替换成化合物P2，获得含有化合物P2的洗手液。

按照上述步骤所得的含有茶枯提取物洗手液，按重量百分比计，包括：

柠檬酸、香精、卡松适量；

余量为去离子水。

实施例13

为进一步说明本发明的有益效果，重复实施例11的步骤，将实施例11步骤(3)中的化合物P1替换成化合物P1和化合物P2，获得含有化合物P1和P2的洗手液。

按照上述步骤所得的含有茶枯提取物洗手液，按重量百分比计，包括：

柠檬酸、香精、卡松适量；

余量为去离子水。

实施例14

为了进一步说明本发明的有益效果，取实施例4、9、11、12、13获得的含有茶枯提取物的洗手液、含有茶枯粉的的洗手液、含有化合物P1的洗手液、含有化合物P2的洗手液、含有化合物P1和P2的洗手液。考察这五种洗手液的杀菌效果以及去污能力。杀菌效果测定和去污能力的测定的具体步骤如下：

(1)杀菌效果测定：分别将步骤(1)所得的洗手液用倍稀释法配成不同浓度的稀释液，取2.5ml不同浓度的稀释液与2.5ml金黄色葡萄球菌的菌悬液混匀(含金黄色葡萄球菌浓度不低于10⁸cfu/ml)，作用2min，取0.5ml菌药混合液加入4.5ml中和剂溶液内，中和作用10min，取该液0.5ml接种于4.5ml营养肉汤中，于30℃培养至第7天，以肉汤不混浊为无菌生长。

(2)去污能力的测定：用移液管取0.25ml的步骤(1)所得的洗手液于烧杯中，加入100ml的水，摇匀，滴加纯机油，振荡，滴加到最后一滴机油不溶解为止，准确记录所述试液溶解纯机油的体积，用记录体积的大小来表征所述试液去污能力的相对大小。

实验结果

上述五种洗手液的测定结果如表10所示(其中，相对与实施例4提供的洗手液，实施例9提供的洗手液增加了茶枯粉；实施例11提供的洗手液增加了茶枯粉和化合物P1；实施例12提供的洗手液增加了茶枯粉和化合物P2；实施例13提供的洗手液增加了茶枯粉、化合物P1和化合物P2)。由表10可知，上述五种洗手液的均有良好的杀菌和去污能力、且外观良好，与实施例9提供的洗手液相比，实施例9提供的洗手液的去污力更强，说明茶枯粉能有效地提高洗手液的去污力；与实施例9提供的洗手液相比，实施例11和实施例12提供的洗手液的杀菌效果和去污力更强，说明化合物P1和P2能有效提高洗手液的杀菌效果和去污力；另外，2.5ml实施例13提供的洗手液对2.5ml金黄色葡萄球菌的菌悬液的最低杀菌浓度低至0.5％，且去污力最好，说明化合物P1和P2具有协同作用，使得洗手液的菌效果和去污力增强。

表10五种洗手液的杀菌效果、去污能力和外观的测定结果

注：结果经3次重复。

实施例15

为了进一步说明本发明的有益效果，取实施例4、9、11、12、13获得的含有茶枯提取物的洗手液、含有茶枯粉的的洗手液、含有化合物P1的洗手液、含有化合物P2的洗手液、含有化合物P1和P2的洗手液。考察这五种洗手液与市售品绿尔生物抑菌洗手液、现有配方洗手液的消毒效果，消毒效果现场试验如下：选择35名志愿者作为观察对象。洗手前，在受试者双手相互充分搓擦后，让受试者左手和右手指并拢，用浸湿采样液的无菌棉拭子在五指屈面指尖至指根作涂抹采样，作阳性对照。然后将受试者的左右手分别浸泡在抗菌洗手液试品中1、2min，或或市售品绿尔生物抑菌洗手液原液中，或现有配方洗手液中，再用自来水冲净残留样液，吹干。按上述方法对受试者右手进行自然菌采样，作为试验组样本。将两组样液充分振打，取0.5ml样液接种平皿，倾注普通琼脂，将平板置37℃温箱培养48h后观察结果。

实验结果

上述七种洗手液的测定结果如表11所示(其中，相对与实施例4提供的洗手液；实施例9提供的洗手液增加了茶枯粉；实施例11提供的洗手液增加了茶枯粉和化合物P1；实施例12提供的洗手液增加了茶枯粉和化合物P2；实施例13提供的洗手液增加了茶枯粉、化合物P1和化合物P2)。由表11可知，实施例4、9、11、12、13所提供的含有茶枯提取物的洗手液具有良好的抑菌效果，浸泡时间为1min时，对皮肤表面自然菌的抑菌率均在99％以上，浸泡时间为2min时，对皮肤表面自然菌的抑菌率均在99.9％以上，明显优于市售品绿尔生物抑菌洗手液、现有配方洗手液的抑菌效果。

表11七种洗手液的消毒效果现场试验的测定结果

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种含有茶枯提取物的洗手液，其特征在于，按重量百分比计，包括：

pH值调节剂、防腐剂、外观调节剂适量；

余量为水；

其中，所述护肤剂为丙三醇和羊毛脂中的至少一种；

所述增稠剂为羟乙基纤维素和氯化钠中的至少一种；

所述外观调节剂为苹果香精、薰衣草香精和桂花香精中的至少一种。

2.如权利要求1所述的含有茶枯提取物的洗手液，其特征在于，所述含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，包括：茶枯提取物4％、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠9％、十二烷基硫酸钠3％、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺3％、十二烷基二甲基氧化胺4％、水溶性羊毛脂1％、丙三醇3％、羟乙基纤维素1％、柠檬酸、桂花香精、卡松适量、余量为去离子水。

3.如权利要求1所述的含有茶枯提取物的洗手液，其特征在于，所述含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，包括：茶枯提取物4％、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠11％、十二烷基硫酸钠1％、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺1％、十二烷基二甲基氧化胺8％、水溶性羊毛脂1％、丙三醇3％、羟乙基纤维素1％、柠檬酸、桂花香精、卡松适量、余量为去离子水。

4.如权利要求1所述的含有茶枯提取物的洗手液，其特征在于，所述含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，包括：茶枯提取物4％、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠7％、十二烷基硫酸钠1％、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺5％、十二烷基二甲基氧化胺4％、水溶性羊毛脂1％、丙三醇3％、羟乙基纤维素1％、柠檬酸、桂花香精、卡松适量、余量为去离子水。

5.如权利要求1-4任一所述的含有茶枯提取物的洗手液，其特征在于，所述茶枯提取物采用下述方法得到：

采用水提醇沉法从茶枯中提取获得；其中，水的用量为茶枯重量的2-5倍；有机溶剂的用量为茶枯重量的2-4倍。

6.如权利要求1-4任一所述的含有茶枯提取物的洗手液，其特征在于，所述含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，还包括茶枯粉0.01-1％。

7.如权利要求1-4任一所述的含有茶枯提取物的洗手液，其特征在于，所述含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，还包括抑菌化合物0.05-1％；其中，抑菌化合物为化合物P1和化合物P2中的至少一种，化合物P1的化学结构式如式Ⅰ所示：

P2的化学结构如式Ⅱ所示：

8.一种含有茶枯提取物洗手液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将表面活性剂脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠、十二烷基硫酸钠、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺、十二烷基二甲基氧化胺混合加热到60-80℃，加水搅拌混合直至全部溶解；

(2)将护肤剂加热至60-80℃后，加入到步骤(1)所得的混合物中，搅拌使之乳化，冷却到35-45℃；

(3)将茶枯提取物、防腐剂、增稠剂、外观调节剂加入步骤(2)所得混合物，搅拌混合；

(4)采用pH调节剂将步骤(3)所得混合物的pH值调至5.0-6.5，冷却后，获得含有茶枯提取物洗手液；

按照上述步骤所得的含有茶枯提取物的洗手液，按重量百分比计，包括：

pH值调节剂、防腐剂、外观调节剂适量；

余量为水；

其中，所述护肤剂为乙二醇、丙三醇和羊毛脂中的至少一种；

所述增稠剂为氯化铵、羟乙基纤维素和氯化钠中的至少一种；

所述外观调节剂为苹果香精、薰衣草香精和桂花香精中的至少一种。

9.如权利要求8所述的含有茶枯提取物洗手液的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，还包括：

将茶枯粉加入步骤(1)所得混合物，搅拌混合；其中，茶枯粉占所述含有茶枯提取物的洗手液的重量百分比为0.01-1％。

10.如权利要求8或9所述的含有茶枯提取物洗手液的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，还包括：

步骤(1)原料还包括抑菌化合物；其中，抑菌化合物占所述含有茶枯提取物的洗手液的重量百分比为0.05-1％，抑菌化合物为化合物P1和P2中的至少一种。