CN101649341A

CN101649341A - 一种从禽蛋壳膜中提取蛋白肽的方法

Info

Publication number: CN101649341A
Application number: CN200910023807A
Authority: CN
Inventors: 黄继红; 杨玉萍
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2009-09-04
Filing date: 2009-09-04
Publication date: 2010-02-17

Abstract

本发明公开了一种从禽蛋壳膜中提取蛋白肽的方法。其技术方案是：将蛋壳超微粉碎；用有机酸做溶剂调pH值3－5，制蛋壳悬浊液；分离出蛋壳中非蛋白质的成分；将分离后的蛋壳蛋白用去离子水调节，用碱调整pH值5－9，加入酶制剂，加热搅拌；再加入肽酶搅拌，然后离心分离去除料渣，即得到小肽营养液；50℃－60℃浓缩蒸发，干燥得到小肽产品。本发明工艺简单，可操作性强，利用本发明制备的小肽含量高达50％以上。

Description

一种从禽蛋壳膜中提取蛋白肽的方法

技术领域

本发明涉及一种抗氧化活性肽酶解制备方法，具体是一种从禽蛋壳膜中提取蛋白肽的方法，属于食品医药领域。

背景技术

我国是一个禽蛋消费大国，其食品加工厂、糕点厂、孵化场、酒店、企业食堂等单位每年抛弃的蛋壳约400多万吨，不仅对环境造成污染，也是对资源的浪费。因为抛弃的蛋壳会很快腐败变质，滋生细菌，特别在夏季，蚊蝇成群、奇臭难闻。实际上蛋壳是一种完全高度结合的生物钙，由无机物和有机蛋白质组合而成，含2.8％的有机物，有机基质主要包括糖蛋白和糖肽。鸡蛋壳膜是位于蛋壳与蛋清之间的纤维状薄膜，约占蛋湿重的1.02％，由外蛋壳膜和内蛋壳膜构成，蛋壳膜的主要成分是蛋白质，以糖蛋白形式存在，占膜总重的90％左右，蛋壳膜中的蛋白质类似细胞膜蛋白质的构成，是以角蛋白为主的与黏多糖类相结合的复合蛋白质。若将这些抛弃的蛋壳充分利用，既增加了经济效益，又避免了对环境的污染。经典营养学认为，蛋白质在消化道中不能直接吸收利用，消化终产物往往大部分是小肽而非游离氨基酸，小肽能完整地被吸收并以二肽和三肽形式进入血液循环，小肽在蛋白质营养中有着重要的作用。经研究表明，蛋白质在消化道的降解产物大部分是小肽，主要是二肽和三肽，它们以完整形式被吸收进入循环系统而被组织利用，动物为了达到最佳生产性能，必需一定数量的小肽，随着蛋白质和氨基酸营养研究的深入，人们已逐渐认识到肽营养的重要性。但是最佳的小肽种类和来源是有限的，充分利用废弃物资源生产小肽，为发展蛋白质营养开辟了一条新途径，利用蛋壳开发生物活性肽，具有巨大的市场前景及利润空间。

对于蛋壳资源的再利用，此前已有相关报道，申请号03117340.3专利申请公开了一种从禽蛋壳中提取水溶性有机钙的方法。是将禽蛋壳通过清洗、干燥、粉碎、煅烧、酸解、洗酸、除杂、干燥微细后制成可用于果汁饮料、酿造食醋营养强化的两种钙营养强化剂；申请号02117550.0专利申请公开了一种以禽蛋壳为原料制备生物蛋白钙的方法，采取低温干燥、负压脱水、气流粉碎生产出生物蛋白钙；申请号03114435.7专利申请公开了一种利用鸡蛋壳制备丙酸钙的方法，包括粉碎、中和反应、过滤、浓缩和干燥步骤；小肽比游离氨基酸在吸收率和利用率上的优势逐渐被人们认可，进一步加强小肽营养的理论研究，开发和研制小肽制品并应用于生产实践，对于有效利用蛋白质、节约蛋白质资源，具有广阔的开发前景。而目前未见利用蛋壳酶解出抗氧化活性小肽的专利申请及相关报道。

发明内容

本发明的目的是填补现行技术开发的空白，公开一种从禽蛋壳膜中提取蛋白肽的方法。

本发明所采用的技术方案是：

a.将蛋壳超微粉碎；

b.用有机酸做溶剂调pH值3-5，

c.制蛋壳悬浊液；

d.分离出蛋壳中非蛋白质的成分；

e.将分离后的蛋壳蛋白放入带有搅拌器的容器内，用去离子水调节蛋壳悬浊液，用碱调整pH值5-9，加入酶制剂，加热，充分搅拌；

f.再加入肽酶，继续搅拌，然后离心分离去除料渣，即得到小肽营养液；

g.50℃-60℃浓缩蒸发，干燥得到小肽产品。

本发明工艺简单，可操作性强，利用本发明制备的小肽含量高达50％以上。

具体实施方式

以中性蛋白酶和r-转肽酶为例，结合实施例对本发明进行详细描述。

实施例一：

a.取蛋壳50g超微粉碎300-600目；

b.用有机酸做溶剂调pH值3.5-4.5；

c.制蛋壳悬浊液，固形物含量10％；

d.分离出蛋壳中非蛋白质的成分；

e.将萃取后的蛋壳蛋白放入带有搅拌器的容器内，用去离子水调节蛋壳悬浊液，

e.1所用的碱为氨水或季铵盐

e.2调pH值5-9

e.3蛋壳悬浊液固形物含量10％

e.4加入酶制剂0.15g

e.5加温20℃-60℃，充分搅拌2-3小时；

f.再加入肽酶0.15g，保温20℃-60℃，充分搅拌9小时，然后离心分离去除料渣，得到小肽营养液；

g.60℃浓缩蒸发、干燥得到小肽产品。

实施例二：

a.将蛋壳2Kg超微粉碎600目；

b.用有机酸做溶剂调pH值3.5-4.5；

c.制蛋壳悬浊液，固形物含量8％；

d.分离出蛋壳中非蛋白质的成分；

e.将分离后的蛋壳蛋白放入带有搅拌器的容器内，用去离子水调节蛋壳悬浊液，

e.1所用的碱为氨水或季铵盐

e.2调整pH值5-9

e.3蛋壳悬浊液固形物含量6％

e.4加入酶制剂6g

e.5加温20-60℃，充分搅拌2-4小时；

f.再加入肽酶6g，保温20℃-60℃，充分搅拌10小时，然后离心分离去除料渣，即得到小肽营养液；

g.60℃浓缩蒸发、干燥得到小肽产品。

小肽含量测定：GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法，先将试样中可溶性蛋白质、游离氨基酸和氨在水中提取出来，部分提取液在110℃，6mol/l盐酸中水解24h成单个氨基酸，经茚三酮显色反应在570nm处测定总氨基酸氮含量，以提取液直接与茚三酮显色反应在570nm处测定的游离氨基酸氮含量为空白，水溶性肽含量即是总氨基酸氮含量减去游离氨基酸氮含量后再乘以转换系数。本方法中样品在酸水解过程产生的游离氨所带来的误差忽略。

Claims

1.一种从禽蛋壳膜中提取蛋白肽的方法，其特征是采用以下技术方案：

1.a将蛋壳超微粉碎；

1.b用有机酸做溶剂调pH值3-5，

1.c制蛋壳悬浊液；

1.d分离出蛋壳中非蛋白质的成分；

1.e将分离后的蛋壳蛋白放入带有搅拌器的容器内，用去离子水调节蛋壳悬浊液，用碱调整pH值5-9，加入酶制剂，加热，充分搅拌；

1.f再加入肽酶，继续搅拌，然后离心分离祛除料渣，即得到小肽营养液；

1.g 50℃-60℃浓缩蒸发，干燥得到小肽产品。以中性蛋白酶和r-转肽酶为例，结合实施例对本发明进行详细描述。

2.根据权利要求1所述的一种从禽蛋壳膜中提取蛋白肽的方法，其特征是采用以下技术方案：

2.a取蛋壳50g超微粉碎300-600目；

2.b用有机酸做溶剂调pH值3.5-4.5；

2.c制蛋壳悬浊液，固形物含量10％；

2.d分离出蛋壳中非蛋白质的成分；

2.e将萃取后的蛋壳蛋白放入带有搅拌器的容器内，用去离子水调节蛋壳悬浊液，

2.e.1所用的碱为氨水或季铵盐

2.e.2调pH值5-9

2.e.3蛋壳蛋白悬浊液固形物含量10％

2.e.4加入酶制剂0.15g

2.e.5加温20℃-60℃，充分搅拌2-3小时；

2.f再加入肽酶0.15g，保温20℃-60℃，充分搅拌9小时，然后离心分离祛除料渣，得到小肽营养液；

2.g 60℃浓缩蒸发、干燥得到小肽产品。

3.根据权利要求1所述的一种从禽蛋壳膜中提取蛋白肽的方法，其特征是采用以下技术方案：

3.a将蛋壳2Kg超微粉碎600目；

3.b用有机酸做溶剂调pH值3.5-4.5；

3.c制蛋壳悬浊液，固形物含量8％；

3.d分离出蛋壳中非蛋白质的成分；

3.e将分离后的蛋壳蛋白放入带有搅拌器的容器内，用去离子水调节蛋壳悬浊液，

3.e.1所用的碱为氨水或季铵盐

3.e.2调整pH值5-9

3.e.3蛋壳悬浊液固形物含量6％

3.e.4加入酶制剂6g

3.e.5加温20-60℃，充分搅拌2-4小时；

3.f再加入肽酶6g，保温20℃-60℃，充分搅拌10小时，然后离心分离祛除料渣，即得到小肽营养液；

3.g 60℃浓缩蒸发、干燥得到小肽产品。