CN108084243A - 一种从蛋黄油中提取高纯度胆固醇的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从蛋黄油中提取高纯度胆固醇的方法，以蛋黄油为起始原料，通过高速离心，低极性溶剂洗涤，脂族醇或者脂族醇的水溶液精制，可得到高纯度、高质量的胆固醇。该提取工艺具有工艺简单、操作方便、成本低、污染小等优点。

Description

一种从蛋黄油中提取高纯度胆固醇的方法

技术领域

本发明涉及胆固醇的制备领域，具体地说，涉及一种从蛋黄油中提取高纯度胆固醇的工艺。

背景技术

胆固醇（cholesterol）又名胆甾醇、异辛甾烯醇、胆甾-5-稀-3β-醇，是一种甾体化合物。早在18世纪人们已从胆结石中发现了胆固醇，1816年化学家本歇尔将这种具脂类性质的物质命名为胆固醇。胆固醇广泛存在于动物体内，尤以脑及神经组织中最为丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也高。其溶解性与脂肪类似，不溶于水，易溶于乙醚、氯仿等溶剂。胆固醇是动物组织细胞所不可缺少的重要物质，它不仅参与形成细胞膜，而且是合成胆汁酸，维生素D3以及甾体激素的原料。

目前，胆固醇作为医药用途，真正具备工业化生产可能的方式只有通过动物脑髓提取以及从羊毛脂中提取两种方式来实现。由于西欧等国家疯牛病的发生，欧美国家对于以动物脑髓为原料生产的胆固醇成品持抵制态度。而来源于羊毛脂的胆固醇中含较多结构与胆固醇类似的其他杂质成分，分离困难，难以得到高纯度的胆固醇。胆固醇是供注射用脂质体、脂肪乳等新型药品制剂的重要辅料。而要达到医药质量标准，需要纯度高、杂质少的高纯度胆固醇。

目前也有一些专利或文献中开始对一些新的制备方法的提出或者探讨，比如中国专利（公开号为：CN 102643306A）《一种从蛋黄中提取卵磷脂、蛋黄油、和胆固醇的方法》中，提到了一种新的思路，从蛋黄中提出胆固醇的方法，其中关于胆固醇的提取，用到的是采用热乙醇对已分离出卵磷脂的蛋黄渣进行溶解，然后再将提取液冷却，使大部分胆固醇结晶分离出来，并在对蛋黄油的精制中，采用了β-环糊精去除多余的胆固醇。

但一般现有的方法存在许多不成熟或者不稳定的地方，比如上面提到的采用β-环糊精去除多余的胆固醇的方法，难以将胆固醇包合完全，解包合后胆固醇纯度较低等。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术存在的不足，提出一种工艺简单、操作方便、成本低的从蛋黄油中提取高纯度胆固醇的方法。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种从蛋黄油中提取高纯度胆固醇的方法，包括以下步骤：

步骤（1）：将蛋黄油放阴凉处静置；

步骤（2）：把蛋黄油转移到带搅拌功能的罐，搅拌均匀；把搅拌均匀的蛋黄油接入高速离心机离心分离，收集离心机内的固体物料得胆固醇粗品1；

步骤（3）：把胆固醇粗品1加入低极性溶剂搅拌打浆，过滤，滤渣再加相同低极性溶液洗涤1~5次，得到胆固醇粗品2。

步骤（4）用脂族醇或者脂族醇的水溶液对胆固醇粗品2进行加热溶解，析晶、再重结晶，过滤去除滤液，干燥，得到胆固醇产品。

优选的，在上述步骤（1）中，经过发明人观察，蛋黄油需要放置在阴凉处静置，才有较多半固体物析出。

优选的，在上述步骤（2）中，经过发明人多次试验，只有当离心速度达到10000转/分钟以上，胆固醇粗品1中胆固醇含量才会较高。

优选的，在上述步骤（3）中，经过发明人多次实验与验证，发现蛋黄油：低极性溶剂质量比为1：1~1：4时，对蛋黄油中的油脂类成分洗涤比较完全，损失也少。低极性溶剂质量大于1倍蛋黄油质量时，胆固醇粗品1才能有效分散，才能较完全洗涤出油脂类成分，低极性溶剂质量大于4倍蛋黄油质量时时，则损失胆固醇较多。

优选的，在上述步骤（4）中，结合胆固醇的理化性质，选择胆固醇粗品质量的2~8倍脂族醇或者脂族醇的水溶液进行重结晶进一步除去杂质，提高胆固醇的纯度，脂族醇每个分子具有1~2个碳原子。

优选的，在上述步骤（4）中，脂族醇的水溶液体积分数为80%~100%。

本发明的有益效果为：本发明以蛋黄油为起始原料，通过高速离心分离，低极性溶剂洗脱，脂族醇或脂族醇的水溶液精制，可得到高纯度、高质量的胆固醇。本发明与已报道文献工艺相比有如下优点：

1.无需要其他吸附剂，通过高速离心直接分离，可以得到含量较高的胆固醇粗品；此步分离为物理分离，不引入有机溶剂，绿色、环保。

2.胆固醇成品质量好，纯度高，成品胆固醇含量≥99%。

3.生产操作简单，便于工业化生产。

附图说明

图1为胆固醇粗品1 HPLC色谱图；

图2为胆固醇对照品HPLC色谱图；

图3为胆固醇成品HPLC色谱图；

图4为胆固醇红外图谱。

具体实施方式

下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1：

本实施例提取胆固醇的操作方法按照如下两个步骤来进行：

胆固醇粗品的制备：将100Kg已分层的蛋黄油搅拌均匀后上样至管式离心机；离心后得到1.1kg胆固醇粗品1，然后取50g胆固醇粗品1加入100g二氯甲烷进行打浆、过滤，再加50g二氯甲烷洗脱；残渣加入150g乙醇加热溶解，析晶，过滤，再加100g乙醇洗涤得到胆固醇粗品2。

胆固醇产品的制备：加入150g乙醇对胆固醇粗品2进行重结晶，过滤去除滤液，再加100g乙醇洗涤，得到胆固醇产品；对得到的胆固醇产品进行鉴定，采用红外图谱和高效液相色谱法对胆固醇的红外图谱和色谱图与2015年中国药典进行表征比较，通过表征鉴定，得到的胆固醇与2015版中国药典的表征数据一致，高效液相色谱法分析成品胆固醇含量为99.6%。

实施例2：

本实施例提取胆固醇的操作方法按照如下两个步骤来进行：

胆固醇粗品的制备：取实施例1中的胆固醇粗品1样品50g加入100g正已烷进行打浆、过滤，再加50g正已烷洗脱；残渣加入200g 无水乙醇加热溶解，析晶，过滤，再加150g 无水乙醇洗涤得到胆固醇粗品2。

胆固醇产品的制备：加入200g 无水乙醇对胆固醇粗品2进行重结晶，过滤去除滤液，再加200g 无水乙醇洗涤，得到胆固醇产品；对得到的胆固醇产品进行鉴定，采用红外图谱和高效液相色谱法对胆固醇的红外图谱和色谱图与2015年中国药典进行表征比较，通过表征鉴定，得到的胆固醇与2015版中国药典的表征数据一致，高效液相色谱法分析成品胆固醇含量为99.1%。

实施例3：

本实施例提取胆固醇的操作方法按照如下两个步骤来进行：

胆固醇粗品的制备：取实施例1中的胆固醇粗品1样品50g加入100g石油醚（30~60℃）进行打浆、过滤，再加50g石油醚（30~60℃）洗脱；残渣加入200g甲醇加热溶解，析晶，过滤，再加150g甲醇洗涤得到胆固醇粗品2。

胆固醇产品的制备：加入150g甲醇对胆固醇粗品2进行重结晶，过滤去除滤液，再加100g甲醇洗涤，得到胆固醇产品；对得到的胆固醇产品进行鉴定，采用红外图谱和高效液相色谱法对胆固醇的红外图谱和色谱图与2015年中国药典进行表征比较，通过表征鉴定，得到的胆固醇与2015版中国药典的表征数据一致，高效液相色谱法分析成品胆固醇含量为99.8%。

Claims (6)

1.一种从蛋黄油中提取高纯度胆固醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤（1）：将蛋黄油放阴凉处静置；

步骤（2）：把蛋黄油转移到带搅拌功能的罐，搅拌均匀；把搅拌均匀的蛋黄油接入高速离心机离心分离，收集离心机内的固体物料得胆固醇粗品1；

步骤（3）：把胆固醇粗品1加入低极性溶剂搅拌打浆，过滤，滤渣再加相同低极性溶液洗涤1~5次，得到胆固醇粗品2；

步骤（4）用脂族醇或者脂族醇的水溶液对胆固醇粗品2进行加热溶解，析晶、再重结晶，过滤去除滤液，干燥，得到胆固醇产品。

2.如权利要求1所述的从蛋黄油中提取制备高纯度胆固醇的工艺，其特征在于：步骤（2）中，高速离心机的转速不小于10000转/分钟。

3.如权利要求1所述的从蛋黄油中提取高纯度胆固醇的方法，其特征在于：步骤（3）中所述低极性溶剂为石油醚、环己烷、正己烷、二硫化碳、四氯化碳、二氯甲烷中的任一种或几种混合。

4.如权利要求1所述的从蛋黄油中提取高纯度胆固醇的方法，其特征在于：步骤（4）中，加入胆固醇粗品1质量的2~8倍脂族醇或者脂族醇的水溶液进行溶解、析晶，再加入胆固醇粗品1质量的2~8倍脂族醇或者脂族醇的水溶液进行重结晶。

5.如权利要求1所述的从蛋黄油中提取制备高纯度胆固醇的工艺，其特征在于：步骤（4）中，所述脂族醇每个分子具有1~2个碳原子。

6.如权利要求1所述的从蛋黄油中提取高纯度胆固醇的方法，其特征在于：步骤（4）中，脂族醇的水溶液体积分数为80%~100%。