CN102552386A - 一种抗骨质疏松的中药制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种抗骨质疏松的中药制剂,由以下重量份的原料药制成:淫羊藿4~6份,葛根4~6份,续断4-6份,鹿角胶1-3份,牡蛎0.1-0.2份。本发明还公开了其制备方法,该方法操作简单,易于实施。本发明按照传统的补肾壮骨理论及现代的植物异黄酮理论得到治疗绝经后骨质疏松症的配方,在现有技术中没有利用本配方治疗骨质疏松的相关报道。配方中各药物成分协同起效,即滋补肝肾、强筋壮骨,又利用植物异黄酮代替体内缺少的雌性激素,双管齐下,对绝经后骨质疏松具有很好的防治作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药组合物及其制备方法,具体涉及一种抗骨质疏松的中药制剂及其制备方法,属于中药技术领域。
背景技术
骨质疏松症(Osteoporosis,OP)是一种代谢性骨病,它是以骨量减少和骨的微观结构退化为特征,导致骨的脆性增加以致于易发生骨折的一种全身性骨骼疾病。绝经后骨质疏松症是绝经后妇女的高发病症,国外有统计资料表明在60岁以上妇女发生的危险率为58%。绝经后骨质疏松症与卵巢合成的激素水平降低有关,由此造成骨痛、骨折,严重地影响了妇女的生活质量,增加了妇女的残疾率和死亡率。目前,雌激素替代疗法(HRT)一直是绝经后骨质疏松症的首选方法,但它在诱发生殖系统的癌症、引起深静脉血栓等方面的副作用,使HRT的应用有了广泛争议。因此,急需一种能够替代雌激素疗法的药物来治疗绝经后骨质疏松。中药是我国的一大资源宝库,许多疑难杂症都能够从中药中找到治疗药方,因此,从中药中寻找治疗骨质疏松症的药方是一种行之有效的方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种抗骨质疏松的中药制剂,该制剂可以有效的治疗骨质疏松症,尤其是绝经后的骨质疏松症。
本发明的另一目的是提供该抗骨质疏松的中药制剂的制备方法,该方法有效提取药物有效成分,操作方便,易于实施。
本发明是通过以下措施实现的:
一种抗骨质疏松的中药制剂,其特征是,由以下重量份的原料药制成:淫羊藿4~6份,葛根4~6份,续断4-6份,鹿角胶1-3份,牡蛎0.1-0.2份。
本发明制剂可以加入辅料制成不同的剂型,例如颗粒剂、片剂、胶囊剂等,所用的辅料为一般药学上可接受的辅料,例如淀粉、环糊精等。
本发明制剂以淫羊藿、葛根、续断、鹿角胶、牡蛎为药物原料,淫羊藿和葛根中含有总黄酮药物有效成分,在上述药物配比范围内,所得制剂总黄酮含量大于20%。
本发明还提供了抗骨质疏松的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1) 取淫羊藿、葛根和续断,用乙醇溶液回流提取两次,合并提取液;
(2) 将提取液离心,取上清液过大孔吸附树脂柱,然后先用水快速冲洗大孔吸附树脂柱,再用乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液;
(3) 将洗脱液回收乙醇,然后喷雾干燥得提取物;或者将洗脱液回收乙醇,浓缩成稠膏,然后对稠膏真空减压干燥、粉碎,得提取物;
(4) 将鹿角胶、牡蛎粉碎,过100目筛,得细粉;
(5) 将提取物和细粉混合,加入药用辅料,制成颗粒剂、片剂或胶囊剂。
上述步骤(1)中,每次回流提取所用乙醇溶液的量为淫羊藿、葛根和续断总质量的5-6倍,每次提取2~3h。
上述步骤(1)和(2)中,乙醇溶液的体积浓度均为50-70%。
上述制备方法中,稠膏在60℃的相对密度为1.11-1.26。
上述制备方法中,喷雾干燥的进口温度为100-130℃,真空减压干燥的温度为40-65℃。
上述制备方法中,所用的大孔吸附树脂可以为各种适合黄酮类物质应用的大孔吸附树脂,其中D312型和HPD100型树脂效果较好,本领域技术人员可以在现有技术中进行选择。
本发明中药制剂使用简便,一次1-2g,每天2-3次,30天一个疗程。
本组方的将传统的补肾壮骨法与现代的植物异黄酮治疗骨质疏松法进行有机结合,各药物成分的功效如下:
淫羊藿——味性辛、甘,温,归肝、肾经,具有补肾阳、强筋骨、祛风湿的功效,主治阳痿遗精、筋骨痿软、风湿痹痛、麻木拘挛、更年期高血压。
葛根——蔷薇目、豆科、葛属的多年生草质藤本植物野葛的块根,性味甘、辛,凉,归脾、胃经,具有解肌退热、生津、透疹、升阳止泻的功效。葛根主要含碳水化合物,植物蛋白,多种维生素和矿物质,此外还含有黄酮类物质:大豆素、大豆甙、大豆素-4,7-二葡萄糖甙、葛根素、葛根素-7-木糖甙、葛根醇、葛根藤、异黄酮甙、大豆黄酮、大豆黄酮甙及β-谷甾醇等。异黄酮类化合物又称为“植物源雌激素”,具有与雌激素相类似的作用,因此发明人推测葛根异黄酮可能有改善骨质疏松症的生物学活性。
续断——味苦、辛、性微温,归肝、肾经,具有补肝肾、强筋骨、调血脉、续折伤、止崩漏的功效,主治腰背酸痛、肢节痿痹、跌扑创伤、损筋折骨、胎动漏红、血崩、遗精、带下、痈疽疮肿。
鹿角胶——雄鹿已骨化的鹿角经水煮熬、浓缩制成的固体胶,呈黄棕色或红棕色,半透明,上部有黄白色泡沫层。鹿角胶性味甘咸、温,入肝、肾经,具有滋补肝肾、添精止血的功效,可用于治疗虚劳羸弱、腰膝酸痛、夜梦遗精、崩漏带下等症。
牡蛎——性味咸、微寒,归肝、胆、肾经,含80%~95%的碳酸钙、磷酸钙及硫酸钙,并含镁、铝、硅及氧化铁等,牡蛎原动物含糖原(Glycogen)、牛磺酸(Taurine)、10种必需的氨基酸、谷胱甘肽(Glutathione)、维生素A、B1、B2、D、无机质如铜、锌、锰、钡、磷及钙等,具有补钙、重镇安神、潜阳补阴、软坚散结、收敛固涩的功效。
本发明按照传统的补肾壮骨理论及现代的植物异黄酮理论得到治疗绝经后骨质疏松症的配方,在现有技术中没有利用本配方治疗骨质疏松的相关报道。配方中各药物成分协同起效,即滋补肝肾、强筋壮骨,又利用植物异黄酮代替体内缺少的雌性激素,双管齐下,对骨质疏松具有很好的防治作用。
本发明制备方法易于操作,充分提取了药物中的有效成分,加强了所得制剂的治疗作用。
具体实施方式
下面结合具体实施例和实验对本发明作进一步的说明,应该明白的是,下述说明仅是为了解释本发明,并不对其内容进行限定。如无特别说明,所用乙醇水溶液的浓度为体积浓度。
实施例1
制备抗骨质疏松症的制剂,方法如下:
(1)取淫羊藿4kg,葛根4 kg,续断4 kg,加它们总质量5倍量的70%的乙醇溶液,回流提取两次,每次2小时,滤过,合并提取液,将提取液离心,取上清液过D312型大孔吸附树脂柱,然后先用水快速冲洗大孔吸附树脂柱,再用70%的乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液,将洗脱液回收乙醇并浓缩至适量,进行喷雾干燥(进口温度100℃),即得提取物2.1 kg;
(2)取鹿角胶1 kg,牡蛎0.1 kg,超微粉碎过100目筛,得细粉1kg;
(3)将提取物和细粉混合,加入适量的常规药用辅料(淀粉、环糊精等),制成片剂、颗粒剂或胶囊剂。
实施例2
制备抗骨质疏松症的颗粒剂,方法如下:
(1)取淫羊藿6kg,葛根6 kg,续断6kg,加6倍量的50%乙醇溶液,回流提取两次,每次3小时,滤过,合并提取液,将提取液离心,取上清液过HPD100型大孔吸附树脂柱,然后先用水快速冲洗大孔吸附树脂柱,再用50%的乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液,将洗脱液回收乙醇并浓缩至适量,进行喷雾干燥(进口温度100℃),即得提取物;
(2)取鹿角胶3 kg,牡蛎0.2 kg,超微粉碎过100目筛,得细粉;
(3)将提取物和细粉混合,加入适量的常规药用辅料,制成片剂、颗粒剂或胶囊剂。
实施例3
制备抗骨质疏松症的胶囊剂,方法如下:
(1)取淫羊藿5kg,葛根5 kg,续断5 kg,加5倍量的60%乙醇溶液,回流提取两次,每次2小时,滤过,合并提取液,将提取液离心,取上清液过大孔吸附树脂柱,然后先用水快速冲洗大孔吸附树脂柱,再用60%的乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液,将洗脱液回收乙醇并浓缩至适量,进行喷雾干燥(进口温度120℃),即得提取物;
(2)取鹿角胶2 kg,牡蛎0.1 kg;超微粉碎过100目筛,得细粉;
(3)将提取物和细粉混合,加入适量的常规药用辅料,制成胶囊剂。
实施例4
制备抗骨质疏松症的胶囊剂,方法如下:
(1)取淫羊藿4kg,葛根4 kg,续断4 kg,加5倍量的70%乙醇溶液,回流提取两次,每次2小时,滤过,合并提取液,将提取液离心,取上清液过大孔吸附树脂柱,然后先用水快速冲洗大孔吸附树脂柱,再用70%的乙醇溶液洗脱,收集乙醇洗脱液,将洗脱回收乙醇并浓缩成60℃下相对密度为1.11-1.26的稠膏,真空减压干燥(40-65℃)、粉碎,得提取物;
(2)取鹿角胶1 kg,牡蛎0.1 kg;超微粉碎过100目筛,得细粉1kg;
(3)将提取物和细粉混合,加入适量的常规药用辅料,制成片剂、颗粒剂或胶囊剂。
本发明的中药制剂,经动物试验(以去卵巢大鼠模型来模拟绝经后OP,观察制剂对由雌激素缺乏引起OP的作用)证明,对骨质疏松症具有治疗作用。
动物试验
1、材料
1.1药物
受试品为实施例1的片剂(将提取物和细粉混合,加入适量的常规药用辅料,制成片剂。片剂含总黄酮>20%。三个剂量组分别定为600mg/kg、300mg/kg、150mg/kg,使用前分别配制成6%、3%、1.5%的水混悬液,以10ml/kg灌胃给药,每日一次。
对照品为尼尔雌醇片:2mg/片,上海医药集团有限公司华联制药厂产品。以1.5mg/kg剂量给药,给药前配制成0.015%的水溶液以10ml/kg灌胃,每周两次(每周一、四)。
1.2动物
Wistar雌性大鼠,250-300g,山东大学实验动物中心提供, 动物合格证号:SCXK(鲁)20030004,合格证编号:0001387。
1.3环境、饲料
环境:山东省中医药研究院药理实验中心,许可证号:SYXK(鲁)20050052。
饲料:全价营养鼠饲料,山东省实验动物管理中心提供,合格证号:SCXK(鲁)20040014。
1.4 仪器
梅特勒—托利多GB-303电子天平,梅特勒中国公司;
DDL-5低速冷冻离心机,上海安亭科学仪器厂;
KNOE PRO型全自动生化分析仪,芬兰康艺仪器公司;
YB-6LF生物组织石蜡包埋机、YT-7F型生物组织摊烤片机、ZT-12P生物组织自动脱水机,湖北孝感亚光医用电子技术有限公司;
LEICA-RM2135切片机、LEICA -DM/LS显微镜, 德国LEICA公司;
SX-5-12箱式电阻炉、KSW电炉温度控制器,北京永光明医疗仪器厂;
PV-9100X射线能谱仪,日本飞利浦;
S-520扫描电镜,日本日立;
GMJ型全自动放射免疫γ计数器,江苏医疗电子研究所;
YLS-7A足趾容积测量仪、YLS-16A小动物骨骼强度测定仪,山东省医学科学院设备站产品。
1.5试剂
碘[125I]骨钙素放射免疫分析药盒,北京市普尔伟业生物科技有限公司产品,批号:20070804,20070824;
碘[125I]雌二醇放射免疫分析药盒,北京科美东雅生物技术有限公司,批号:20070925;
碱性磷酸酶(ALP)试剂盒,批号:070251,磷(P)试剂盒,批号:070061,钙(Ca)试剂盒,批号:070113,北京中生北控生物技术股份有限公司产品。
、方法
2.1 造模
雌性wistar大鼠,80只,10%硫化钠水溶液下腹部正中脱毛约1.5cm2左右,40mg/kg戊巴比妥钠腹腔麻醉后仰位固定,分层剥离,暴露两侧卵巢,结扎后完整切除两侧卵巢,止血后分层缝合。假手术组(10只)做相同的手术操作,但不切除卵巢。术后连续3天硫酸庆大霉素抗感染,自由饮水、摄食。
2.2 分组与给药
手术3日后剔除状态较差大鼠,按照体重随机分为6组:假手术组,去卵巢模型组,阳性对照组,制剂200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg组。分组后各给药组给与相应药物,假手术组和模型组给以同体积凉开水,尼尔雌醇组每周给药两次(1.5mg/kg,周一、四给药),连续灌胃6个月。每周称取体重,并按新体重调整灌胃剂量。各组大鼠自由饮水、摄食。
2.3测定指标
血生化指标:给药6个月后,仰卧位固定大鼠,颈外静脉采血,3000r/min离心15min,分离血清,分别测定血清钙、磷、碱性磷酸酶含量及血清雌二醇、骨钙素、降钙素含量。
骨骼标本:采血后脱颈处死大鼠,完整分离大鼠的左右两侧股骨,剔除所有附着的肌肉和结缔组织,一只以10%甲醛溶液固定,行病理学检查;一只用生理盐水浸泡的湿纱布包裹,密封-20℃保存,分别测定股骨的湿重、体积,生物力学性能。
脏器标本:充分暴露并剥离取出子宫,电子天平称重,计算子宫的脏器指数。
脏器指数=(子宫÷体重)×100%
2.4数据分析
所有实验数据以平均数±标准差表示,用SPSS 11.0进行t检验分析。
、结果
3.1对去卵巢大鼠体重及脏器系数的影响
连续给药六个月后,分别观察各组大鼠体重,结果提示本发明的中药制剂(以下简称制剂)对造模引起的大鼠体重增加具有明显的降低作用,其中高剂量组与模型组比较具有非常显著的统计学差异,中、低剂量作用也较明显;对子宫系数的影响三个剂量均具有明显的统计学查异,其中高剂量组影响最为明显,三个剂量呈现较好的量效关系趋势,但作用总体而言较尼尔雌醇组较差,如表1所示。
3.2 制剂对去卵巢大鼠骨生物力学的影响
如表2所示,分离大鼠股骨称取湿重后测定股骨生物力学性能,结果提示制剂不同剂量均明显提高骨组织抗外力作用,其中以高剂量作用最为明显,明显提高股骨抗外力性能。
3.3 制剂对去卵巢大鼠骨质量、体积比值的影响
不同组大鼠股骨分别称取湿重和体积,并采集干重和灰重,计算湿重、干重、灰重和体积的比值,结果如表3所示,模型组湿重体积、干重体积、灰重体积比值均明显降低,与空白对照组比较具有非常显著的统计学差异(P<0.01),提示造模明显降低大鼠股骨的钙磷含量,减轻其骨密度。尼尔雌醇组明显改善模型造成的上述病理性改变,符合文献和临床应用实际,制剂不同给药组不同程度改善造模引起的骨质疏松表现,三个剂量组均具有显著性统计学差异(P<0.01),其中高剂量作用最显著。
3.4 制剂对去卵巢大鼠血清Ca、P含量和碱性磷酸酶的影响
制剂对大鼠血清钙磷含量影响不明显,如表4所示,模型组钙磷含量也与对照组比较无显著性差异,提示造模对血清钙磷含量无明显影响。但造模引起碱性磷酸酶血清水平的明显升高,与空白对照组比较具有显著性统计学差异(P<0.05)。制剂明显降低血清碱性磷酸酶,高剂量组与模型组比较具有显著性差异(P<0.01),其余两个剂量组也不同程度的降低其血清水平。
3.5 制剂对去卵巢大鼠血清E2、骨钙素(BGP)的影响
放射免疫分析大鼠血清雌二醇含量和骨钙素、降钙素水平,结果提示:模型组大鼠血清雌二醇含量明显降低,与空白对照组比较具有显著性差异(P<0.01),尼尔雌醇组和制剂不同剂量组不同程度提高大鼠血清雌二醇浓度,其中制剂高剂量组作用最为明显,作用较尼尔雌醇更佳,中、低剂量亦不同程度提高模型大鼠的雌二醇浓度。对骨钙素的影响,模型大鼠与空白对照组比较无显著性差异,与血清钙磷含量的模型比较相符合,但制剂高剂量组不同程度的影响上述两个指标,其影响结果与血清钙磷含量的变化一致。结果如表5所示。
3.6制剂对去卵巢大鼠骨组织病理学的影响
病理诊断结果如下:
空白组:光镜观察显示该组股骨骨小梁排列密集,互相连接呈网状结构,骨小梁的厚度大,其间距小。
模型组:去除卵巢后骨小梁明显变细,数量明显减少,断裂增多,碎裂形成纽扣状碎骨片,骨小梁面积明显减小,髓腔扩大,皮质骨变薄。与空白组比较,同样倍数下骨小梁的连接中断点明显增多,骨小梁髓腔间距增大。
尼尔雌醇组:与模型组比较骨小梁稍规则,数目增多,厚度增加,断裂少,髓腔间隙变小,但骨小梁面积仍小于空白组。
制剂高剂量组:与模型组比较骨小梁稍规则,数目轻度增多,厚度稍增加,断裂少,髓腔间隙稍变小,骨小梁面积稍高于模型组。
中剂量组:与模型组比较骨小梁稍规则,数目轻度增多,厚度稍增加,断裂少,髓腔间隙稍变小,骨小梁面积稍高于模型组。
小剂量组:骨小梁变细,数量减少,断裂增多,碎裂形成纽扣状碎骨片,髓腔扩大,皮质骨变薄。与空白组比较,同样倍数下骨小梁的连接中断点明显增多,骨小梁髓腔间距增大。病理改变接近模型组。
对骨小梁面积的影响如表7所示,中剂量组明显提高模型大鼠骨组织骨小梁面积。高低剂量组不同程度提高骨小梁面积,但无统计学差异。
、结论
本发明的中药制剂明显提高去卵巢骨质疏松大鼠血清雌激素雌二醇和骨钙素水平,提高骨抗外力的强度,增加骨钙含量,骨重量与体积比值提高骨的质量,降低血清碱性磷酸酶活性,具有明显的防治骨质疏松的作用。
Claims (7)
1.一种抗骨质疏松的中药制剂,其特征是,由以下重量份的原料药制成:淫羊藿4~6份,葛根4~6份,续断4-6份,鹿角胶1-3份,牡蛎0.1-0.2份。
2.根据权利要求1所述的中药制剂,其特征是:剂型为颗粒剂、片剂或胶囊剂。
3.一种权利要求1或2所述的抗骨质疏松的中药制剂的制备方法,其特征是,包括以下步骤:
(1)取淫羊藿、葛根和续断,用乙醇溶液回流提取两次,合并提取液;
(2)将提取液离心,取上清液过大孔吸附树脂柱,然后先用水快速冲洗大孔吸附树脂柱,再用乙醇溶液洗脱,收集洗脱液;
(3)将洗脱液回收乙醇,然后喷雾干燥得提取物;或者将洗脱液回收乙醇,浓缩成稠膏,然后对稠膏真空减压干燥、粉碎,得提取物;
(4)将鹿角胶、牡蛎粉碎,过100目筛,得细粉;
(5)将提取物和细粉混合,加入药用辅料,制成颗粒剂、片剂或胶囊剂。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征是:步骤(1)和(2)中乙醇溶液的体积浓度均为50-70%。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征是:步骤(1)中,每次回流提取所用乙醇溶液的量为淫羊藿、葛根和续断总质量的5-6倍,每次提取2~3h。
6.根据权利要求3所述的制备方法,其特征是:稠膏在60℃的相对密度为1.11-1.26。
7.根据权利要求3所述的制备方法,其特征是:喷雾干燥的进口温度为100-130℃,真空减压干燥的温度为40-65℃。
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