CN102343027B - 一种仙灵骨葆提取物，含其制剂及其制备方法 - Google Patents
一种仙灵骨葆提取物，含其制剂及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102343027B CN102343027B CN 201110317157 CN201110317157A CN102343027B CN 102343027 B CN102343027 B CN 102343027B CN 201110317157 CN201110317157 CN 201110317157 CN 201110317157 A CN201110317157 A CN 201110317157A CN 102343027 B CN102343027 B CN 102343027B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extract
- water
- radix
- ethanol
- herba epimedii
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明涉及一种仙灵骨葆提取物，含其制剂及其制备方法，该提取物是由以下重量份的中药制成：淫羊藿600-1500份、丹参50-150份、补骨脂50-150份、续断80-200份、知母50-150份和地黄50-150份，其活性成分为：丹参和补骨脂的醇提物，淫羊藿、续断、知母和地黄的水提物。本发明提供的仙灵骨葆提取物具有很好的治疗骨质疏松症，效果优于现有技术提供的提取物。
Description
技术领域
本发明涉及医药发明领域，具体涉及一种仙灵骨葆复方的提取物及其制备方法。
背景技术
骨质疏松症是单位体积内骨组织总量即骨量的绝对减少，使得骨的结构改变和功能发生变化，从而出现周围骨骼疼痛，体态变形等症状且易发生骨折的病变。
骨质疏松症是一种十分严重，而且可能致命的疾病，目前世界患此病的人数约达数亿，这种病到了晚期骨组织会变得异常脆弱，哪怕是咳嗽一下或在床上翻身都有可能发生骨折。据美国骨质疏松症基金会估计，女性患者最终因骨髋关节骨折而致死的达2％，其治疗费用也是相当高，仅在美国，一年所花的医药费就达7-10万亿美元，随着老龄化社会的到来，原发性骨质疏松症的发病率明显上升，骨质疏松症骨折成为临床常见的损伤性疾病，极易造成骨延迟愈合和不愈合而致残。其发病原因一般认为与钙或营养缺乏，内分泌功能紊乱以及运动不足等因素有关，国内外学者虽提出许多治疗方案，但是迄今为止仍未获得十分有效的治疗措施。
中医认为“肾为先天之本”、“主骨生髓”，肾气虚则筋骨隆盛，肾气衰则骨枯而髓减。《素问上古通天论》更直接描述男八女七为基数年龄递增而肾虚症状加重的正相关系，提出“女子七七，天癸竭而形坏，男子七八，天癸竭......肾脏衰而形体皆极”。说明骨的生长、发育、强劲衰弱与肾精盛衰有直接密切关系，肾精亏虚则骨髓生化无源，骨失濡养而痿弱无力。
现代医学研究证实肾虚患者的下丘脑-垂体-性腺轴功能减退，致成骨功能下降，单位体积骨组织减少而致骨质疏松。与体内内分泌系统功能紊乱、免疫功能地下及体内微量元素改变有直接关系，原发性骨质疏松包括绝经后骨质疏松和老年性骨质疏松症，绝经后骨质疏松主要是由于雌激素缺乏，破骨细胞的骨吸收功能亢进，属高代谢转换型骨质疏松。而老年性骨质疏松主要是由于成骨细胞老化，功能不全所致，属低代谢转换型骨质疏松症。临床上均有不同程度的肾虚现象，其骨密度均明显低下，所以有就“肾虚证骨密度均为低下”的说法。
今年研究证实，补肾中药可通过性激素样作用，增强成骨细胞活性及调节机体骨环境和微量元素的平衡，促进矿物质在骨中的沉积而发挥抗骨质疏松，促进骨痂生长作用，故临床上多选用入肾经之品为内服之首选。
中药仙灵骨葆是由淫羊藿、续断、丹参、知母、补骨脂、地黄等六味中药组成的复方制剂，用于治疗肝肾不足、瘀血阻络所致的骨质疏松症，适于补肾壮骨，具有增加成骨细胞活动，促进成骨细胞再生，又可通过保护性腺组织而维持性激素水平，药理实验证实，服用该药可使整体骨量、骨矿物质含量增加，使得骨钙和骨有机质的构成比向正常水平接近，从而更好地调节机体的代谢紊乱、逆转高骨转换状态，达到对骨质疏松症引起的骨折的治疗目的。
目前仙灵骨葆上市的产品有胶囊、片剂，均为贵州同济堂制药有限公司生产其工艺特点是将处方中药材经水提取、浓缩、干燥、制粒、压片包衣或装胶囊，由于中药成分复杂，且提出的中药成分中许多难溶于水，如补骨脂提取物等，导致制得的片剂或胶囊在体内崩解时间长，药物释放缓慢从而影响产品的疗效。
早在1997年，中国专利申请97107552.2就公开了将其六味中药净选，切截，然后煮提得到浓缩浸膏。但是遗憾的是该专利并没有提到是水提、醇提或者其他方式。
随后，国内又出现了很多相关报道：
三药粉碎、三药水提：
中国专利申请200610065646.3和200810176798.X公开了如下制法，续断、丹参、补骨脂粉碎成细粉，其余淫羊藿等三味加水煎煮三次，每次1h，合并煎液，浓缩至相对密度为1.35-1.38(30℃)的稠膏，加入上述细粉，混匀，制成1000丸，干燥，打光，即得。
丹参粉碎、其余水提：
中国专利申请200510041699.7和200510003100.0不同程度公开了仙灵骨葆的提取方法，包括以下步骤：将丹参粉碎成细粉、过筛、备用；将淫羊藿、续断、知母、补骨脂粉碎成粗粉，将地黄切成片，加水煎煮三次，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20的清膏，加入丹参细粉，混匀，干燥，即得。
丹参醇提、其余水提：
中国专利申请200410046192.6公开了仙灵骨葆的提取方法，其中丹参粉碎，以70-95％的乙醇做溶剂用多功能提取器提取两次，每次加入相当于药材重量6-8倍的70-95％乙醇，第一次提取1-3h，第二次提取1-2h，合并乙醇提取液，过滤，50℃滤液浓缩至相对密度为1.15-1.30的浸膏，再将丹参药材乙醇提取后的药渣与淫羊藿、续断、知母、补骨脂、地黄药材混合，以水做溶剂用多功能提取器提取三次，每次加入相当于药材重量6-14倍的水，第一次提取2-4h，第二次提取1-3h，第三次提取0.5-1.5h，合并水提液，过滤，滤液浓缩至50℃相对密度为1.15-1.30的浸膏，将醇提浸膏与水提浸膏混合，喷雾干燥、粉碎，得到提取物。
三药醇提、三药水提：
中国专利申请200810176798.X公开的实施例5提取方法是将续断、丹参、补骨脂粉碎成2-4目的粗粉，用6-12倍量的45-65的乙醇渗漉，收集渗漉液。回收乙醇至无醇味，得稠膏，渗漉药渣和淫羊藿等三味加水煎煮三次，每次1h合并煎液，浓缩至相对密度为1.35-1.38(30℃)的稠膏，与上述渗漉稠膏互相混匀，即得。
上述方法有效成分不易提出，含量偏低，影响药品的疗效，且药液黏度较大，过滤困难。
发明人为了解决以上问题，研发了一种新方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种仙灵骨葆复方的提取物。
本发明的另一目的在于提供含仙灵骨葆复方的提取物的制剂。
本发明的另一目的在于提供制备上述含仙灵骨葆复方的提取物的制剂的方法。
本发明还提供仙灵骨葆复方的提取物及含提取物的制剂的应用。
本发明提供的一种仙灵骨葆复方的提取物，仙灵骨葆提取物是由以下重量份的中药制成：淫羊藿600-1500份、丹参50-150份、补骨脂50-150份、续断80-200份、知母50-150份和地黄50-150份，其活性成分为丹参和补骨脂的醇提物，淫羊藿、续断、知母和地黄的水提物。
仙灵骨葆提取物优选由以下重量份的成分制成：淫羊藿1167份、续断167份、丹参83份、知母83份、补骨脂83份、地黄83份。
本发明所述的地黄为生地黄。
本发明提供的一种仙灵骨葆复方的提取物，该提取物的制备方法包括以下步骤：
1)淫羊藿的水提物：淫羊藿加水提，过柱大孔吸附树脂柱，用25-95％乙醇洗脱，洗脱液浓缩干燥，即得；
2)丹参和补骨脂的醇提物：称取丹参、补骨脂药材，用乙醇回流提取，提取液滤过，浓缩成稠膏状，干燥，即得；
3)续断、知母和地黄的水提物：称取续断、知母、地黄药材，用水提取，提取液滤过，浓缩成稠膏状，干燥，即得；
4)取淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，知母、续断和地黄的水提物，混合均匀，即得仙灵骨葆提取物。
优选地，本发明提供的提取物，由以下方法制备：
1)淫羊藿的水提物：淫羊藿加水煎煮提取1-3次，每次1-3h，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至60-90℃时相对密度为0.08-1.08，趁热离心，倾出上清液，过大孔吸附树脂柱，上样液浓度为0.2-0.5g/ml；上样量为1g-3g生药/ml树脂；吸附速度为4-12ml/min；洗脱速度为3-20ml/min；水洗脱体积为1-5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去，再用2-6倍柱体积的浓度为25-90％乙醇洗脱；收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得。
2)丹参和补骨脂的醇提物：称取丹参、补骨脂药材，混合均匀，用60-90％的乙醇回流提取1-3次，每次1-3h，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，减压干燥，即得；
3)续断、知母和地黄的水提物：称取续断、知母、地黄药材，混合均匀，用水煎煮提取2-3次，每次2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，减压干燥，即得；
4)取淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，知母、续断和地黄的水提物，混合均匀，即得仙灵骨葆提取物。
进一步优选，本发明的提取物由以下方法制备：
1)淫羊藿的水提物：淫羊藿加水煎煮提取3次，第一次加水20倍，第二次加水15倍，第三次加水15倍，每次2h，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至80℃时相对密度为1.02，趁热离心，2500rpm，20min，倾出上清液，上样液浓度为0.5g/ml；上样量为1g生药/ml树脂；吸附速度为8ml/min；洗脱速度为16ml/min；水洗脱体积为5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去水洗脱液；再用70％乙醇洗脱淫洋藿黄酮类成分，用量为4倍柱体积；收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得干浸膏。倾出上清液，残渣，即可；
2)丹参和补骨脂的醇提物：称取丹参、补骨脂药材，混合均匀，加入8倍量70％乙醇，回流提取2次，每次1.5h，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，60℃减压干燥，即得干浸膏；
3)续断、知母和地黄的水提物：称取续断、知母、地黄药材，混合均匀，加入10倍量水，煎煮提取3次，每次2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，80℃减压干燥，即得干浸膏；
4)取淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，知母、续断和地黄的水提物，混合均匀，即得仙灵骨葆提取物。
本发明还提供了上述提取物的制备方法，该方法包括以下步骤：
1)淫羊藿加水提过柱大孔吸附树脂柱，用20-95％洗脱，洗脱液浓缩干燥，得到淫羊藿的水提物；
2)按配比称取丹参、补骨脂药材，乙醇回流提取，提取液滤过，浓缩成稠膏状，干燥，得丹参、补骨脂的醇提物；
3)按配比称取续断、知母、地黄药材，用水提取，提取液滤过，浓缩成稠膏状，干燥，得续断、知母、地黄的水提物；
4)取淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，知母、续断和地黄的水提物，混合均匀，即得仙灵骨葆提取物。
本发明还提供了含上述提取物的制剂，该制剂由上述提取物和药学上可接受的载体或稀释剂组成。
所述制剂为固体制剂或液体制剂，所述固体制剂为片、胶囊、颗粒或丸剂；所述液体制剂为口服液或注射剂。
所述药学上可接受的载体或稀释剂是指药学领域常规的药物载体，选自填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、表面活性剂或矫味剂中的一种或几种，其中：
所述填充剂选自淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素或葡萄糖等。
所述粘合剂选自纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮等。
所述崩解剂选自微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素或交联羧甲基纤维素钠。
所述润滑剂选自硬脂酸、聚乙二醇、碳酸钙、碳酸氢钠、微粉硅胶、滑石粉或硬脂酸镁。
所述表面活性剂选自十二烷基苯磺酸钠、硬脂酸、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、脂肪酸山梨坦或聚山梨酯(吐温)等。
所述矫味剂选自阿斯巴甜、蔗糖素或糖精钠。
本发明还提供制备上述含仙灵骨葆复方的提取物的制剂的方法，将仙灵骨葆复方的提取物与药学上可接受的载体或稀释剂混匀，采用常规制剂方法制成各种剂型。
本发明还提供了上述仙灵骨葆复方提取物及含提取物的制剂在制备治疗骨质疏松症的药物中的应用。
本发明提供的仙灵骨葆复方的提取物具有以下优点：
1、与现有技术中相比：
1)现有技术中的丹参醇提，其余水提的缺点为：有效成分不易提出，经测定含量偏低，从而影响药品的疗效。且药液黏度较大，过滤困难。
2)现有技术中的丹参、补骨脂、续断醇提，淫羊藿、知母、地黄水提的缺点为：
①经测定含量偏低；
②该方法得膏率较高，从而导致临床服用量较大，患者的顺应性差。
3)本发明中淫羊藿单独使用水提过柱的方法，丹参、补骨脂醇提，续断、知母、地黄水提的方法：
①淫羊藿单独水提过柱：方中淫羊藿量较大，通过水提过柱可以对其有效成分进行富集，从而提高朝藿定C与淫羊藿苷含量，经测定朝藿定C的含量最高可达到4.7mg/g，淫羊藿苷含量最高可达到2.2mg/g；
②丹参、补骨脂用醇提
丹参主要含有以丹参酮II A为代表的脂溶性二萜醌类成分及以丹酚酸B为代表的水溶性酚酸类成分；补骨脂主要含有香豆素类成分，因此选择乙醇提取，有利于有效成份的提取，进一步提高药效。
③续断、知母、地黄水提：
药物成分损失少；药液容易浓缩、易喷雾干燥；干膏收率升高。
2、本发明提取物中朝藿定C与淫羊藿苷含量显著提高，经测定朝藿定C的含量最高可达到4.7mg/g，淫羊藿苷含量最高可达到2.2mg/g。
3、本发明提供的仙灵骨葆提取物较现有技术治疗骨质疏松症的效果显著。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
所述倍量为重量倍数，如淫羊藿加水20倍，为加入淫羊藿重量20倍量的水。
实施例1：仙灵骨葆胶囊
1、复方组成：淫羊藿1167g、续断167g、丹参83g、知母83g、补骨脂83g、地黄83g。
2、制备方法：
1)淫羊藿加水煎煮提取3次，第一次加水20倍，第二次加水15倍，第三次加水15倍，每次2h，提取液滤过，合并滤液，减压浓缩至80℃时相对密度为1.02，趁热离心，转速为2500rpm，离心20min，倾出上清液，过大孔吸附树脂HP-20型，上样液浓度为0.5g/ml；上样量为1g生药/ml树脂；吸附速度为8ml/min；洗脱速度为16ml/min；水洗脱体积为5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去水洗脱液(检查有无淫羊藿苷、朝藿定C、总黄酮泄露，如果有，则重新过柱)；再用4倍柱体积的70％的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得淫羊藿的水提取，收率为19.8％；
2)称取丹参、补骨脂药材，混合均匀，用乙醇回流提取2次，每次加入8倍量70％乙醇，每次1.5h，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，60℃减压干燥，即得丹参、补骨脂的醇提物，收率为18.5％；
3)称取续断、知母、地黄药材，混合均匀，煎煮3次，每次加入10倍量水，每次煎煮2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，80℃减压干燥，即得续断、知母、地黄的水提物，收率为19.0％；
4)合并淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，续断、知母、地黄的水提物，混合均匀，得到总提取物，然后加入总提取物1倍量的微晶纤维素，混合成均匀的粉末，装入胶囊即可。
3、规格：0.45g/粒。
4、提取物的含量的测定及结果：(朝藿定C(C39H50O19)及淫羊藿苷(C33H40O15))
1)含量测定方法：照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)测定。
①色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(25∶75)为流动相；检测波长为270nm。理论板数按朝藿定C峰计算应不得低于6000。
②对照品溶液的制备：精密称取经五氧化二磷减压干燥器中干燥36小时的朝藿定C及淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成每1ml分别含朝藿定C及淫羊藿苷0.3mg、0.1mg的混合溶液，作为对照品溶液，即得。
③供试品溶液的制备：取干燥的提取物，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率25kHz)60分钟，取出，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，取上清液，滤过，取续滤液，即得。
④测定法：分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2)结果：本实施例的提取物含淫羊藿以朝藿定C(C39H50O19)及淫羊藿苷(C33H40O15)计，分别为4.7mg/g，2.2mg/g。
实施例2：仙灵骨葆颗粒
1、组成：淫羊藿600g、续断80g、丹参50g、知母50g、补骨脂50g、地黄50g。
2、制备方法
1)淫羊藿加水煎煮提取3次，第一次加30倍的水，第二次加20倍的水，第三次加20倍的水，每次煎煮3h，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至90℃时相对密度为1.08，趁热离心，转速为2500rpm，时间为20min，倾出上清液，其余物质过大孔吸附树脂柱HP-20型上样液浓度为0.5g/ml；上样量为1g生药/ml树脂；吸附速度为8ml/min；洗脱速度为16ml/min；水洗脱体积为5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去水洗脱液(检查有无淫羊藿苷、朝藿定C、总黄酮泄露)；再用4倍柱体积的85％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得淫羊藿的水提物，收率为19.2％；
2)称取丹参、补骨脂药材，混合均匀，用乙醇回流提取3次，每次加入6倍量85％乙醇，每次提取2h，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，60℃减压干燥，即得丹参、补骨脂的醇提物，收率为19.0％；
3)称取续断、知母、地黄药材，混合均匀，用水煎煮3次，每次加入12倍量水，每次煎煮2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，80℃减压干燥，即得续断、知母、地黄的水提物，收率为18.2％；
4)合并淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，续断、知母、地黄的水提物，混合均匀，得到总提取物，然后加入总提取物1倍量的糊精和1倍的乳糖，混匀、制粒、干燥、整粒，分装，即得颗粒剂。
3、规格：4g/袋。
4、提取物的含量的测定及结果：
含量测定方法见实施例1；
结果：本实施例的提取物含淫羊藿以朝藿定C(C39H50O19)及淫羊藿苷(C33H40O15)计，分别为4.2mg/g，1.7mg/g。
实施例3：仙灵骨葆片
1、复方组成：淫羊藿1500g、续断200g、丹参150g、知母150g、补骨脂150g、地黄150g。
2、制备方法：
1)淫羊藿加水煎煮提取3次，第一次加水20倍，第二次加水15倍，第三次加水15倍，每次煎煮2h，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至80℃时相对密度为1.02，趁热离心，转速为2500rpm，时间为20min，倾出上清液，过HP-20型大孔吸附树脂柱，上样液浓度为0.5g/ml；上样量为1g生药/ml树脂；吸附速度为8ml/min；洗脱速度为16ml/min；水洗脱体积为5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去水洗脱液(检查有无淫羊藿苷、朝藿定C、总黄酮泄露)；再用4倍柱体积的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得淫羊藿的水提物，收率为19.6％；
2)称取丹参、补骨脂药材，混合均匀，用乙醇回流提取2次，每次加入8倍量70％乙醇，每次提取1.5h，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，60℃减压干燥，即得丹参、补骨脂的醇提物，收率为18.8％；
3)称取续断、知母、地黄药材，混合均匀，用水煎煮3次，每次加入10倍量水，每次煎煮2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，80℃减压干燥，即得续断、知母、地黄的水提物，收率为18.6％；
4)合并淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，续断、知母、地黄的水提物，混合均匀，制成颗粒，干燥，压片，即可片剂。
3、规格：0.25g/片。
4、提取物的含量的测定，方法同实施例1，结果为：
本实施例的提取物含淫羊藿以朝藿定C(C39H50O19)及淫羊藿苷(C33H40O15)计，分别为4.4mg/g，2.0mg/g。
实施例4：仙灵骨葆软胶囊
1、组成：淫羊藿1167g、续断167g、丹参83g、知母83g、补骨脂83g、地黄83g。
2、制备方法：
1)淫羊藿加水煎煮提取2次，第一次加水20倍，第二次加水15倍，每次煎煮2h，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至80℃时相对密度为1.02，趁热离心，转速为2500rpm，时间为20min，倾出上清液，上大孔树脂吸附HP-20型，上样液浓度为0.5g/ml，上样量为1g生药/ml树脂，吸附速度为8ml/min；洗脱速度为16ml/min，水洗脱体积为5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去水洗脱液；再用4倍柱体积浓度为50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得淫羊藿的水提物，收率为20.0％；
2)称取丹参、补骨脂药材，混合均匀，回流提取2次，每次加入5倍量65％乙醇，每次提取时间为2h，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，60℃减压干燥，即得丹参、补骨脂的醇提物，收率为19.3％；
3)称取续断、知母、地黄药材，混合均匀，用水煎煮3次，每次加入12倍量水，每次煎煮时间为2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，80℃减压干燥，即得续断、知母、地黄的水提物，收率为19.0％；
4)合并淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，续断、知母、地黄的水提物，混合均匀，得到总提取物，然后加入总提取物1倍量的植物油混匀，制得软胶囊。
3、规格：0.45g/粒。
4、提取物的含量的测定，方法同实施例1，结果为：
本实施例的提取物中含淫羊藿以朝藿定C(C39H50O19)及淫羊藿苷(C33H40O15)计，分别为4.0mg/g、1.5mg/g。
对比例1：以200410046192.6的实施例1的方法(丹参醇提，其余水提)
1、组成：淫羊藿1167g、续断167g、丹参83g、知母83g、补骨脂83g、地黄83g。
2、制备方法
1)丹参粉碎，以95％的乙醇做溶剂用多功能提取器提取两次，每次加入相当于药材重量6倍的95％乙醇，每次提取1小时，合并乙醇提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.20(50℃)的浸膏，得丹参的醇提物；
2)将丹参药材乙醇提取后的药渣与淫羊藿、续断、知母、补骨脂、地黄药材混合，以水做溶剂用多功能提取器提取三次，每次加入相当于药材重量6倍的水，第一次提取2h，第二次提取1h，第三次提取0.5h，合并水提液，过滤，滤液浓缩至50℃相对密度为1.15(50℃)的浸膏，得水提物，收率为14.5％；
3)将丹参的醇提物与水提物混合，喷雾干燥、粉碎，得到提取物200g。
4)将提取物与提取物1倍的微晶纤维素混匀，分装成胶囊。
3、规格为：0.45g/粒。
4、提取物含量的测定，方法同实施例1，结果为：
本对比例的提取物含淫羊藿以朝藿定C(C39H50O19)及淫羊藿苷(C33H40O15)计，分别为2.6mg/g、0.9mg/g。
对比例2：200510003100.0的实施例1的方法(丹参粉碎、其余水提)
1、组成：淫羊藿1167g、续断167g、丹参83g、知母83g、补骨脂83g、地黄83g。
2、提取方法：
将丹参粉碎成细粉，过200目筛备用；
淫羊藿、续断、知母、补骨脂四味药材粉碎成粗粉，地黄切成薄片，与上述粗粉混匀，加8倍量的水(第一次补足药材150％的吸水量)，煎煮3次，煎煮时间分别为3、2、1h，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至1.15-1.25(50℃)的稠膏状，加入丹参粉，混匀，60℃以下低温真空干燥，得提取物，收率为14.8％。
3、制剂：将上述提取物中加入适量的微晶纤维素，混匀，分装成胶囊。
4、规格：胶囊规格为0.45g/粒。
5、提取物的含量的测定，方法同实施例1，结果为：
本对比例的提取物含淫羊藿以朝藿定C(C39H50O19)及淫羊藿苷(C33H40O15)计，分别为2.7mg/g、0.7mg/g。
对比例3：参考200810176798.X的实施例1(三药粉碎、三药水提)
1、组成：淫羊藿1167g、续断167g、丹参83g、知母83g、补骨脂83g、地黄83g。
2、提取方法：
1)将续断、丹参、补骨脂粉碎成细粉，过80目筛；
2)其余淫羊藿等三味，用水煎煮3次，每次加10倍量的水，每次煎煮1h，合并煎液，浓缩至相对密度为1.35(30℃)的稠膏，收率为14.0％；
3)将细粉与稠膏混匀，干燥，即得提取物；
3、制剂：将上述提取物粉碎，过100目，加入1倍量的微晶纤维素，混匀，分装成胶囊。
4、规格：胶囊规格为0.45g/粒。
5、提取物的含量的测定：方法同实施例1，结果为：
本对比例的提取物含淫羊藿以朝藿定C(C39H50O19)及淫羊藿苷(C33H40O15)计，分别为2.4mg/g、0.9mg/g。
对比例4：参考200810176798.X的实施例5(三药醇提、三药水提)
1、组成：淫羊藿1167g、续断167g、丹参83g、知母83g、补骨脂83g、地黄83g。
2、提取方法：
1)将续断、丹参、补骨脂用12倍量的95％的乙醇回流提取2.5小时，回收乙醇至无醇味，减压浓缩得醇提干浸膏，收率为15.0％；
2)将续断、丹参、补骨脂的药渣和淫羊藿、地黄、知母等三味加水煎煮三次，每次加12倍量的水，每次煎煮1h，合并煎液，浓缩至相对密度为1.30(25℃)的稠膏，收率为14.3％；
3)将醇提干浸膏与水提稠膏，干燥，粉碎成160目的细粉，即得提取物。
3、将上述提取物中加入等重量的微晶纤维素，混匀，分装成胶囊。
4、胶囊规格为0.45g/粒。
5、提取物的含量的测定，方法同实施例1，结果为：
本对比例的提取物中含淫羊藿以朝藿定C(C39H50O19)及淫羊藿苷(C33H40O15)计，分别为2.2mg/g、0.7mg/g。
实验例1：含量的检测：
对实施例1-4的提取物及对比例1-4的提取物的含量进行检测，检测方法同实施例1，结果见表1：
表1：
从表1结果可以看出：实施例的朝藿定C(C39H50O19)及淫羊藿苷(C33H40O15)含量明显高于对比例。
说明：本发明的提取物含量高于现有技术的提取物。
实验例2：对去卵巢致大鼠骨质疏松症的影响
1、实验动物：2月龄Wistar大鼠，雌性，体重200～220g，购自中国医学科学院实验动物研究所。
2、实验药物：实施例1-4、对比例1、2药物均由贵州同济堂制药有限公司提供；青霉素，购自河南绿园药业有限公司；盐酸四环素，购自常州四药制药有限公司。
3、实验分组：
假手术组、模型组、实施例1高剂量组(实施例1制备的药物1.8g/kg)、实施例1中剂量组(实施例1制备的药物0.9g/kg)、实施例1低剂量组(实施例1制备的药物0.45g/kg)、实施例2组(实施例2制备的药物0.9g/kg)、实施例3组(实施例3制备的药物0.9g/kg)、实施例4组(实施例4制备的药物0.9g/kg)、对比例1组(对比例1制备的药物0.9g/kg)、对比例2组(对比例2制备的药物0.9g/kg)、对比例3组(对比例3制备的药物0.9g/kg)、对比例4组(对比例4制备的药物0.9g/kg)，倍美力组(0.03mg/kg)，共13组。
4、试验方法：
动物购入后，称重，按体重随机分笼，每笼5只。饲养5周后，当大鼠3月龄时，进行卵巢切除的手术。选取13只为假手术组，其余195只均接受卵巢切除术。将大鼠称重，以1％戊巴比妥钠(40mg/kg，4ml/kg)腹腔注射麻醉。将麻醉好的大鼠仰卧位固定，腹部用酒精消毒，无菌条件下在下腹部剪开2cm左右的切口，以无菌的眼科镊沿子宫和输卵管寻找，可见乳白色发亮的脂肪团，分离脂肪团，可见粉红色卵巢，将卵巢下输卵管用手术线结扎，摘除卵巢。同法摘除另一侧卵巢。13只假手术组，同法手术暴露卵巢，只切除少量脂肪组织。关闭腹腔，伤口局部敷青霉素，分别缝合肌肉层和皮肤，酒精消毒伤口。术后腹腔注射青霉素(4万单位/只/天)，连续3天。手术后将大鼠放回笼中饲养，正常饮食。
各组按大鼠给药容积0.5ml/100g，用0.5％的羧甲基纤维素钠(CMC)配成混悬液，以0.5％的CMC为溶剂对照。术后2天开始给药，假手术组、模型组给予0.5％的CMC。每日灌胃一次，连续灌胃90天。每周称一次大鼠体重，并调整给药剂量。每次配制1周的给药量，4℃保存，灌胃前将药品拿出温浴，摇匀。
所有动物在处死前第13天腹腔注射盐酸四环素30mg/kg，作为第一次荧光标记；处死前第3天再注射一次盐酸四环素作为第二次荧光标记，两次荧光标记间隔时间为10天。
在荧光显微镜下，沉积在骨表面的四环素荧光呈黄绿色，此方法可动态观察骨小梁的矿化沉积率，反映成骨细胞骨形成情况。
5、检测指标：
5.1双能X线骨密度仪测定大鼠右侧股骨远端端、腰椎骨密度
骨密度仪开机预热20分钟，使用Lunar公司提供的小动物阶梯模型进行质量控制(Quality Control，QC)。将-20℃保存的右侧股骨远端及腰椎取出，放置至室温后，放入扫描仪固定位置。测量时样本平放在扫描床正中，每个样本的扫描位置统一以样本的中线和扫描床的中线重叠。使用小动物测量软件，选用高分辨率模式对其进行扫描。扫描完成后，得到右侧股骨远端和腰椎的骨密度(g/cm2)，记录数据，统计结果。
扫描参数：
Mode：＜0.5Kg.med Current：150
Simple Intervals：1/32 Collimation：Fine
Simple Size：0.6*1.2 Voltages：76.0
Scane width：30mm Scane length：190mm
5.2骨组织形态计量学检测大鼠左侧胫骨近端骨形态参数
5.2.1不脱钙骨切片的制作及染色
取大鼠左侧胫骨近端1/3，将其置于10％福尔马林溶液中固定。分别用80％、95％、100％乙醇逐级脱水，二甲苯透明。标本依次在塑料聚合液I液、II液、III液中各浸泡3天。其中I液：100ml甲基丙稀酸甲酯+35ml甲基丙稀酸丁酯+5ml苯甲酸甲酯+1.2ml聚乙二醇400；II液：I液+0.4g干燥过氧化苯甲酰；III液：II液+0.8g干燥过氧化苯甲酰。将400μlN，N-二甲基对甲苯胺(N，N-Dimethyl-p-toluidine)加入到140ml预冷(4℃)III液中，用磁力搅拌器搅拌10min后，在青霉素小瓶中注入约7ml的III液，即包埋液后，将骨标本按同一方向放入瓶底，用N2排空包埋瓶中空气，用塞盖紧。然后置于-20℃冰箱中聚合1周左右，则可变为无色透明的坚硬包埋块。砸碎小瓶，取出包埋块。修块后，在Reicheit-Jung 2040切片机上，用钨钢刀分别切出3张5μm纵向不脱钙骨切片。一张切片用二甲苯溶掉树脂后，梯度乙醇脱水，甲苯胺蓝染色，透明后封片；一张切片直接用于荧光观察；另一张备份。
5.2.2骨组织形态计量学指标测定的方法
用Leica DM6000B型显微镜，按照章明放等人的方法[16]，采用Leica-Qwin Pro图象分析系统，测量距骺板下1mm处至远端4mm范围内的骨组织参数。
其中甲苯胺蓝染色的切片测定以下参数，骨小梁体积百分比(TBV％)：骨小梁体积占被测骨髓腔总体积的百分比，是骨量水平的主要标志；骨小梁吸收表面百分比(TRS％)：呈不规则、凹凸不平的骨小梁吸收表面占骨小梁表面的百分比(吸收表面是指被破骨细胞吸收的矿化骨，也称为Howship陷窝)；骨小梁形成表面百分比(TFS％)：有成骨细胞被覆的类骨质表面占骨小梁表面的百分比；骨皮质上类骨质平均宽度(OSW)：皮质内表面类骨质的平均宽度。
未染色切片，荧光下观测，骨小梁矿化率(MAR)：骨小梁表面荧光双标记带的平均距离除以两次标记相隔的天数；骨皮质矿化率(mAR)：皮质内表面双标记带的平均距离除以两次标记相隔的天数。
5.3骨生物力学指标的测定
5.3.1三点弯曲试验测量大鼠左侧股骨骨生物力学指标
使用wd-1型电子万能试验机进行大鼠股骨三点弯试验，试验机由电脑程序控制，试验参数：跨距25mm，加载速度2mm·min-1。
将-20℃保存的左侧股骨取出，放置至室温后，临测试前将纱布打开，取出股骨，保持其湿润度。将试验机三点弯试验台的两个支撑台之间的跨距调整为25mm。取大鼠股骨，股骨面向上放在三点弯试验台上，股骨远端放置在一个支撑台上；另一侧支撑台上，股骨近端大转子下垫一个0.5mm左右厚度的薄片，使得股骨三点弯试验台上保持稳定，轻微晃动股骨，确保股骨不会在试验中滑移或者脱落。使用计算机控制万能试验机进行试验，试验机的控制软件为自编软件，可以控制试验机进行拉压试验，同时能够自动记录拉压的力值，并在显示器上绘出位移-加载力的曲线图，还可以对保存的数据文件进行分析，给出样品抗弯的最大载荷。
在控制软件中设定好试验参数，启动试验机进行匀速加载，加载过程中计算机自动记录位移-加载力曲线，达到预订的加载位移后，试验机压头能自动回到初始位置，准备测试下一个样品。样品测试完成后，使用自编的软件对数据文件进行分析，得出每一个样品断裂时的加载位移和最大载荷。
5.3.2股骨颈压力试验测量大鼠右侧股骨颈骨生物力学指标
使用wd-1型电子万能试验机进行大鼠股骨颈压力试验，试验机由电脑程序控制，试验参数：加载速度2mm/min。
将-20℃保存的右侧股骨取出，放置至室温。将试验机股骨头剪切试验台放置在试验台上，剪切试验台为三爪卡盘结构。先将大鼠股骨标本在大转子下1cm左右处截断，将截断的标本股骨头向上放入三爪卡盘中，转动卡盘的手柄，使三个卡头与股骨中段的三个面良好接触，夹紧股骨。夹持股骨的力要适当，不可以一味的旋紧卡盘，否则可能将股骨压碎而没有办法夹持，轻轻晃动股骨头，确认是否夹紧。将股骨夹持好以后，调整剪切试验台的位置，使股骨头恰好位于剪切压头的下方，剪切压头的边缘与股骨头的内侧边缘对齐即可，如股骨头太靠近剪切压头的中部，则可能在试验中压到股骨中段的骨质，影响试验的结果。
使用计算机控制万能试验机进行试验，试验机的控制软件为自编软件，可以控制试验机进行拉压试验，同时能够自动记录拉压的力值，并在显示器上绘出位移-加载力曲线图，还可以对保存的数据文件进行分析，给出样品抗弯的最大载荷。在控制软件中设定好试验参数，启动试验机进行匀速加载，加载过程中计算机自动记录位移-力曲线，达到预订的加载位移后，试验机压头能自动回到初始位置，准备测试下一个样品。
样品测试完成后，使用自编的软件对数据文件进行分析，得出每一个样品断裂时的加载位移和最大载荷。
5.4血生化指标，检测血清中的钙、磷、镁、碱性磷酸酶(AKP)活性，然后用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清I型胶原氨基交联末端肽(NTX)含量，用微粒子酶免疫分析法(MEIA)测定血清雌二醇(E2)含量；
5.5子宫指数测定：子宫指数＝子宫重量(mg)/体重(g)×100％
5.6大鼠左侧股骨骨矿含量的测定
5.6.1大鼠左侧股骨灰重系数的测定[18]
将做过三点弯曲的左侧股骨置烘箱中60℃过夜，第二天用电子分析天平称量其干重(Wfemur，g)。将称过干重的左侧股骨置于马弗炉中，800℃煅烧6小时，关炉，待其冷却后用电子分析天平称量骨灰重(Wash，g)。计算灰重与干重比值，为灰重系数(Wfemur/Wash)。
5.6.2测定大鼠左侧股骨的钙、磷、镁、锶、锰、锌、铜的含量
仪器：Agilent 7500ce电感耦合等离子体质谱仪(Agilent TechnologiesUSA)，Milli-Q超纯水系统(Millipore，Bedford MA)。
标准物及试剂：标准贮备液：10μg·ml-1环境混合标准溶液(含4种待测元素)，标准溶液系列由标准贮备液逐级稀释配得，介质为5％硝酸(优级纯，Merck)内标溶液：10μg·mL-1铑、铼标准溶液，稀释为1μg·ml-1，介质为5％硝酸调谐溶液：10ng·ml-1锂、钴、钇、铈、铊混合标准溶液；超纯水，由Milli-Q超纯水系统制得，用于配置所有标准溶液与样品溶液。
样品处理：将煅烧后的股骨磨碎成细粉，精确称取0.0500g，用5％Merk级硝酸在50ml PET塑料瓶中定容，并混匀。
随同样品进行空白试验。
待测元素同位素的选择及ICP-MS仪器参数：在优化实验条件下，对样品消解液进行分析测试，按表2选择待测元素的同位素钠，钾，镁，铜，锌，锶，锰元素以103Rh作为内标进行本实验的测定。
表2：待测元素的同位素
6、统计方法：
实验数据均采用均值加减标准差的形式表示
统计使用SPSS软件，用One-way ANOVA进行检验，方差齐，用LSD法两两比较；方差不齐，用Tamhane’s法两两比较，以P＜0.05表示具有统计学意义。
7、实验结果：
7.1对去势大鼠子宫指数的影响：见表3
表3：对去势大鼠模型子宫指数的影响
| (组别) | 剂量(g/kg) | 动物数(只) | 子宫指数(％) |
| 假手术组 | - | 13 | 1.83±0.34** |
| 模型组 | - | 13 | 0.31±0.14** |
| 倍美力组 | 0.03(mg) | 13 | 0.77±0.23##※ |
| 实施例1高剂量组 | 1.8 | 13 | 0.57±0.13#※&$￥ |
| 实施例1中剂量组 | 0.9 | 13 | 0.52±0.15#※&$￥ |
| 实施例1低剂量组 | 0.45 | 13 | 0.45±0.05 |
| 实施例2组 | 0.9 | 13 | 0.50±0.13#※&$￥ |
| 实施例3组 | 0.9 | 13 | 0.51±0.12#※&$￥ |
| 实施例4组 | 0.9 | 13 | 0.52±0.11#※&$￥ |
| 对比例1组 | 0.9 | 13 | 0.29±0.16 |
| 对比例2组 | 0.9 | 13 | 0.29±0.11 |
| 对比例3组 | 0.9 | 13 | 0.28±0.17 |
| 对比例4组 | 0.9 | 13 | 0.27±0.09 |
注：与假手术组相比，**P＜0.01；与模型组相比，#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001；
与对比例1组相比，※P＜0.05；与对比例2组相比，☆P＜0.05；与对比例3组相比，&P＜0.05；
与对比例3组相比，$P＜0.05；与对比例4组相比，￥P＜0.05。
表3结果显示：与假手术组比较，模型组大鼠的子宫明显萎缩，子宫指数有显著性差异(P＜0.01)；与模型组相比，倍美力组大鼠的子宫由于雌激素的刺激大鼠子宫指数显著增加(P＜0.01)，实施例1中、高剂量组、实施例2-4组子宫萎缩有明显改善(P＜0.05)；分别与对比例1-5组相比，除实施例1低剂量组外，其余各组大鼠的子宫系数明显增加(P＜0.05)。
7.2对去势大鼠股骨远端、腰椎骨骨密度的影响：见表4
表4：对去势大鼠股骨远端、腰椎骨骨密度的影响
注：与假手术组相比，**P＜0.01；与模型组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与对比例组相比，※P＜0.05；与对比例2组相比，☆P＜0.05；与对比例3组相比，&P＜0.05；与对比例3组相比，$P＜0.05；与对比例4组相比，￥P＜0.05。
表4显示：与假手术组相比，模型组股骨远端骨密度和椎骨骨密度明显降低(P＜0.01)；与模型组相比，实施例1中剂量组和高剂量组、实施例2-4组大鼠股骨远端骨密度和椎骨骨密度有不同程度的增加(P＜0.01，P＜0.05)；分别与对比例1-4组相比，实施例1中、高剂量组和实施例2-4组大鼠股骨远端骨密度和椎骨骨密度明显增加(P＜0.05)。
7.3对去势大鼠胫骨近端骨小梁形态计量学的影响：见表5
表5：对去势大鼠胫骨近端骨小梁形态计量学的影响
注：与假手术组相比，**P＜0.01；与模型组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与对比例组相比，※P＜0.05；与对比例2组相比，☆P＜0.05；与对比例3组相比，&P＜0.05；与对比例3组相比，$P＜0.05；与对比例4组相比，￥P＜0.05。
表5显示：
骨小梁体积：与假手术组相比，模型组大鼠骨小梁体积明显减小(P＜0.01)；与模型组相比，倍美力组、实施例1中剂量组、高剂量组、实施例2-4组的骨小梁体积有不同程度增加(P＜0.05，P＜0.01)；与对比例各组相比，实施例1中、高剂量组、实施例2-4组的骨小梁体积有明显增加(P＜0.05)；
骨小梁吸收表面、形成表面、骨矿化沉积率：与假手术组相比，模型组明显增加(P＜0.01)；与模型组相比，倍美力组、实施例1中剂量组和高剂量组、实施例2-4组有不同程度的降低(P＜0.05，P＜0.01)；与对比例组相比，实施例各组无明显差异(P＞0.05)。
7.4对去势大鼠胫骨近端骨皮质形态计量学的影响：见表6
表6：对去势大鼠胫骨近端骨皮质形态计量学的影响
| 组别 | 剂量(g/kg) | 动物数(只) | 骨矿化沉积率(μm·d-1) | 皮质骨类骨质宽度(μm) |
| 假手术组 | - | 13 | 26.4±6.3 | 7.3±1.4 |
| 模型组 | - | 13 | 24.0±6.5 | 9.5±1.9 |
| 倍美力组 | 0.03(mg) | 13 | 27.3±7.2 | 10.3±2.9 |
| 实施例1低剂量组 | 0.45 | 13 | 28.3±6.8 | 10.6±3.2 |
| 实施例1中剂量组 | 0.9 | 13 | 24.3±7.1 | 11.7±2.3 |
| 实施例1高剂量组 | 1.8 | 13 | 28.2±6.1 | 9.5±2.8 |
| 实施例2组 | 0.9 | 13 | 24.5±7.3 | 11.4±2.1 |
| 实施例3组 | 0.9 | 13 | 24.3±7.1 | 11.1±2.0 |
| 实施例4组 | 0.9 | 13 | 24.1±7.0 | 10.9±2.1 |
| 对比例1组 | 0.9 | 13 | 26.7±6.8 | 9.2±3.2 |
| 对比例2组 | 0.9 | 13 | 27.5±6.7 | 9.1±3.0 |
| 对比例3组 | 0.9 | 13 | 27.2±6.3 | 9.3±3.1 |
| 对比例4组 | 0.9 | 13 | 26.9±6.5 | 9.4±2.9 |
表6结果显示：
骨矿化沉积率：与假手术组相比，模型组的骨矿化沉积率降低，没有明显差异(P＞0.05)；与模型组相比，各组骨矿化沉积率无明显差异；
皮质骨类骨质宽度：与假手术组相比，模型组的骨矿化沉积率降低，没有明显差异(P＞0.05)；与模型组相比，各组骨矿化沉积率无明显差异。
7.5对去势大鼠股骨干生物力学性能的影响：见表7
表7：仙灵骨葆对去势大鼠股骨干生物力学性能的影响
| 组别 | 剂量(g/kg) | 动物数(只) | 最大载荷(N) | 断裂挠度(mm) |
| 假手术组 | - | 13 | 89.5±10.4 | 0.576±0.091 |
| 模型组 | - | 13 | 85.0±8.1 | 0.559±0.086 |
| 倍美力组 | 0.03(mg) | 13 | 85.7±11.7 | 0.561±0.107 |
| 实施例1低剂量组 | 0.45 | 13 | 85.3±8.0 | 0.552±0.055 |
| 实施例1中剂量组 | 0.9 | 13 | 88.1±9.3 | 0.542±0.072 |
| 实施例1高剂量组 | 1.8 | 13 | 86.1±8.4 | 0.557±0.060 |
| 实施例2组 | 0.9 | 13 | 88.3±9.2 | 0.540±0.075 |
| 实施例3组 | 0.9 | 13 | 87.9±9.0 | 0.539±0.069 |
| 实施例4组 | 0.9 | 13 | 88.1±9.3 | 0.542±0.072 |
| 对比例1组 | 0.9 | 13 | 88.9±7.6 | 0.563±0.088 |
| 对比例2组 | 0.9 | 13 | 88.6±7.4 | 0.561±0.086 |
| 对比例3组 | 0.9 | 13 | 88.2±7.1 | 0.559±0.082 |
| 对比例4组 | 0.9 | 13 | 88.0±7.4 | 0.557±0.083 |
| 对比例5组 | 0.9 | 13 | 88.3±7.2 | 0.563±0.091 |
表7中骨生物力学参数显示：各组最大载荷、断裂挠度比较无明显差异。表明去卵巢3个月后，股骨干生物力学性能无明显变化。
7.6对去势大鼠股骨颈生物力学性能的影响：见表8
表8：对去势大鼠股骨颈生物力学性能的影响
| 组别 | 剂量(g/kg) | 动物数(只) | 最大荷载(N) | 断裂挠度(mm) |
| 假手术组 | - | 13 | 116.0±10.6 | 0.223±0.039 |
| 模型组 | - | 13 | 98.5±13.1** | 0.201±0.014 |
| 倍美力组 | 0.03(mg) | 13 | 107.0±11.5# | 0.226±0.037 |
| 实施例1低剂量组 | 0.45 | 13 | 104.1±14.9 | 0.230±0.047 |
| 实施例1中剂量组 | 0.9 | 13 | 108.8±11.8# | 0.233±0.035 |
| 实施例1高剂量组 | 1.8 | 13 | 116.6±14.9##※☆&$￥ | 0.239±0.032# |
| 实施例2组 | 0.9 | 13 | 108.3±11.9# | 0.219±0.028 |
| 实施例3组 | 0.9 | 13 | 107.9±11.2# | 0.217±0.026 |
| 实施例4组 | 0.9 | 13 | 108.3±11.6# | 0.213±0.025 |
| 对比例1组 | 0.9 | 13 | 103.6±14.2 | 0.218±0.027 |
| 对比例2组 | 0.9 | 13 | 102.8±14.0 | 0.222±0.025 |
| 对比例3组 | 0.9 | 13 | 102.9±14.3 | 0.221±0.026 |
| 对比例4组 | 0.9 | 13 | 103.2±13.9 | 0.219±0.025 |
注：与假手术组相比，**P＜0.01；与模型组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与对比例组相比，※P＜0.05；与对比例2组相比，☆P＜0.05；与对比例3组相比，&P＜0.05；与对比例3组相比，$P＜0.05；与对比例4组相比，￥P＜0.05。
由表8可以看出：
最大载荷：与假手术组相比，去卵巢后模型组股骨颈最大载荷显著降低(P＜0.01)；与模型组相比，倍美力组、实施例1中剂量组、实施例2、3、4组有明显增加(P＜0.05)，实施例1高剂量组有显著增加(P＜0.01)与对比例各组相比，实施例1高剂量组有明显增加(P＜0.05)；
断裂挠度：与假手术组相比，模型组的虽然有降低，但无明显差异(P＞0.05)；与模型组相比，实施例1高剂量组有明星增加(P＜0.05)，其余各组无明显差别(P＞0.05)；与对比例各组相比，实施例各组也有不同程度的增加，但是无明显差别(P＞0.05)。
提示：实施例1-4能增加去卵巢大鼠的股骨颈强度，提示对骨质疏松股骨颈骨折有一定的保护作用。
7.7对去势大鼠血清中Ca、P、Mg浓度的影响：见表9
表9：对去势大鼠血清中Ca、P、Mg浓度的影响
| 组别 | 剂量(g/kg) | 动物数(只) | 血清钙(mmol/L) | 血清磷(mmol/L) | 血清镁(mg/dl) |
| 假手术组 | - | 13 | 2.29±0.11 | 1.94±0.18 | 2.3±0.1 |
| 模型组 | - | 13 | 2.11±0.12** | 1.71±0.15 | 2.2±0.2 |
| 倍美力组 | 0.03(mg) | 13 | 2.09±0.11 | 1.89±0.26 | 2.3±0.3 |
| 实施例1低剂量组 | 0.45 | 13 | 2.12±0.12 | 1.75±0.23 | 2.4±0.3 |
| 实施例1中剂量组 | 0.9 | 13 | 2.15±0.13 | 1.72±0.19 | 2.2±0.3 |
| 实施例1高剂量组 | 1.8 | 13 | 2.18±0.17 | 1.82±0.40 | 2.2±0.2 |
| 实施例2组 | 0.9 | 13 | 2.15±0.14 | 1.72±0.17 | 2.2±0.5 |
| 实施例3组 | 0.9 | 13 | 2.16±0.13 | 1.70±0.15 | 2.2±0.7 |
| 实施例4组 | 0.9 | 13 | 2.16±0.15 | 1.72±0.18 | 2.2±0.9 |
| 对比例1组 | 0.9 | 13 | 2.00±0.11 | 1.65±0.15 | 2.1±0.1 |
| 对比例2组 | 0.9 | 13 | 2.01±0.09 | 1.62±0.13 | 2.1±0.3 |
| 对比例3组 | 0.9 | 13 | 2.03±0.11 | 1.61±0.12 | 2.1±0.2 |
| 对比例4组 | 0.9 | 13 | 2.05±0.14 | 1.65±0.16 | 2.1±0.1 |
注：与假手术组相比，**P＜0.01。
表9显示：
血清钙(Ca)：与假手术组相比，模型组大鼠血清钙有明显降低(P＜0.01)；与模型组相比，实施例各组的血清钙略有增加，但无明显差异(P＞0.05)；与对比例1-4组比较，大鼠血清Ca有所上升，但无明显差异(P＞0.05)。
血清磷(P)和镁(Mg)：与假手术组比较，模型组血清P和Mg含量略有降低，但各组间无显著差异(P＞0.05)；与模型组相比，倍美力组、实验组各组血清P和Mg含量略有提高，但是变化不明显(P＞0.05)；与对比例各组相比，实验组各组血清P和Mg含量略有提高，但是变化不明显(P＞0.05)。
7.8对去势大鼠血清中AKP活性和NTX含量的影响：见表10
表10：对去势大鼠血清中AKP活性和NTX含量的影响
| 组别 | 剂量(g/kg) | 动物数(只) | 血清AKP(U/L) | 血清NTX(μg/L) |
| 假手术组 | - | 13 | 28.9±12.0 | 2.803±1.152 |
| 模型组 | - | 13 | 45.4±10.9** | 5.156±1.518** |
| 倍美力组 | 0.03(mg) | 13 | 35.7±9.3# | 2.776±0.656## |
| 实施例1低剂量组 | 0.45 | 13 | 41.7±11.8 | 3.872±0.775# |
| 实施例1中剂量组 | 0.9 | 13 | 34.5±8.3#※☆&$ | 3.473±1.141#※☆&$￥ |
| 实施例1高剂量组 | 1.8 | 13 | 30.8±12.2##※☆&$ | 3.026±1.074##※☆&$￥ |
| 实施例2组 | 0.9 | 13 | 35.5±8.2# | 3.470±1.190#※☆&$￥ |
| 实施例3组 | 0.9 | 13 | 34.7±8.1#※☆&$ | 3.502±1.189#※☆&$￥ |
| 实施例4组 | 0.9 | 13 | 35.4±8.0# | 3.485±1.887#※☆&$￥ |
| 对比例1组 | 0.9 | 13 | 40.5±7.9 | 4.070±1.009 |
| 对比例2组 | 0.9 | 13 | 41.8±7.8 | 4.068±1.797 |
| 对比例3组 | 0.9 | 13 | 41.0±8.0 | 4.069±1.096 |
| 对比例4组 | 0.9 | 13 | 40.1±7.7 | 4.267±1.794 |
注：与假手术组相比，**P＜0.01；与模型组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与对比例组相比，※P＜0.05；与对比例2组相比，☆P＜0.05；与对比例3组相比，&P＜0.05；与对比例3组相比，$P＜0.05；与对比例4组相比，￥P＜0.05。
表10显示：
与假手术组比较，模型组大鼠的碱性磷酸酶(AKP)活性显著升高(P＜0.01)；I型胶原氨基交联末端肽(NTX)浓度明显增加(P＜0.01)，提示去卵巢后大鼠的骨形成和骨吸收均显著增加，骨转换加快。
与模型组相比：倍美力组和实施例1中剂量组、实施例2-4组大鼠AKP活性明显降低(P＜0.05)，实施例1高剂量组AKP活性显著降低(P＜0.01)；与对比例各组相比，实施例1中、高剂量组和实施例3组的AKP活性明显降低(P＜0.05)。
与模型组相比：倍美力组和实施例1高剂量组的NTX活性显著降低(P＜0.01)，实施例1中剂量组、实施例2-4组大鼠NTX活性明显降低(P＜0.05)；与对比例各组相比，除实施例1低剂量组没有明显差异(P＞0.05)外，其余各实施例组均明显降低(P＜0.05)。
提示：本发明产品剂量依赖性的抑制骨形成和骨吸收，抑制骨转化。
7.9对去势大鼠血清雌激素E2水平的影响：见表11
表11：对去势大鼠血清雌激素E2水平的影响
| 组别 | 剂量(g/kg) | 动物数(只) | 血清中雌二醇(pg/ml) |
| 假手术组 | - | 13 | 9.55±6.30 |
| 模型组 | - | 13 | 1.95±1.46** |
| 倍美力组 | 0.03(mg) | 13 | 10.58±6.73## |
| 实施例1低剂量组 | 0.45 | 13 | 3.40±5.22 |
| 实施例1中剂量组 | 0.9 | 13 | 4.69±4.07#※☆&$￥ |
| 实施例1高剂量组 | 1.8 | 13 | 8.10±5.12##※※☆☆&&$$￥￥ |
| 实施例2组 | 0.9 | 13 | 4.71±4.12#※☆&$￥ |
| 实施例3组 | 0.9 | 13 | 4.69±4.09#※☆&$￥ |
| 实施例4组 | 0.9 | 13 | 4.73±4.14#※☆&$￥ |
| 对比例1组 | 0.9 | 13 | 2.69±4.26 |
| 对比例2组 | 0.9 | 13 | 2.60±4.28 |
| 对比例3组 | 0.9 | 13 | 2.75±4.22 |
| 对比例4组 | 0.9 | 13 | 2.82±4.20 |
| 对比例5组 | 0.9 | 13 | 2.90±4.20 |
注：与假手术组相比，**P＜0.01；与模型组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与对比例组相比，※P＜0.05，※※P＜0.01；与对比例2组相比，☆P＜0.05，☆☆P＜0.01；与对比例3组相比，&P＜0.05，&&P＜0.01；与对比例3组相比，$P＜0.05，$$P＜0.01；与对比例4组相比，￥P＜0.05，￥￥P＜0.01。
表11显示：与假手术组相比，去卵巢后，模型组血清E2含量显著降低(P＜0.01)；与模型组相比，倍美力组、实施例1高剂量组血清中的E2含量显著增加(P＜0.01)，实施例1中剂量组、实施例2、4剂量组含量明显增加(P＜0.05)；与对比例各组相比，实施例1高剂量组显著增加(P＜0.01)，实施例1中剂量组、实施例2-4组明显增加(P＜0.05)。
7.10对去势大鼠股骨灰重系数的影响：见表12
表12：对去势大鼠股骨灰重系数的影响
| 组别 | 剂量(g/kg) | 动物数(只) | 股骨灰重系数 |
| 假手术组 | - | 13 | 0.619±0.011 |
| 模型组 | - | 13 | 0.590±0.016 |
| 倍美力组 | 0.03(mg) | 13 | 0.605±0.017 |
| 实施例1低剂量组 | 0.45 | 13 | 0.603±0.017 |
| 实施例1中剂量组 | 0.9 | 13 | 0.605±0.011 |
| 实施例1高剂量组 | 1.8 | 13 | 0.610±0.016 |
| 实施例2组 | 0.9 | 13 | 0.604±0.010 |
| 实施例3组 | 0.9 | 13 | 0.602±0.009 |
| 实施例4组 | 0.9 | 13 | 0.603±0.011 |
| 对比例1组 | 0.9 | 13 | 0.590±0.011 |
| 对比例2组 | 0.9 | 13 | 0.589±0.009 |
| 对比例3组 | 0.9 | 13 | 0.588±0.010 |
| 对比例4组 | 0.9 | 13 | 0.590±0.012 |
表12显示：与假手术组相比，模型组大鼠股骨的灰重系数略有降低；与模型组相比，倍美力组和实施例各组的灰重系数略有增加；与对比例组相比，实施例各组的灰重系数略有增加，但是上述对比均没有明显差别(P＞0.05)。提示实施例1-4组对灰重系数的影响较小。
7.11对去势大鼠股骨中常量元素Ca、P、Mg含量的影响：见表13
表13：对去势大鼠股骨中常量元素Ca、P、Mg含量的影响
注：与假手术组相比，**P＜0.01；与模型组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与对比例组相比，※P＜0.05，※※P＜0.01；与对比例2组相比，☆P＜0.05，☆☆P＜0.01；与对比例3组相比，&P＜0.05，&&P＜0.01；与对比例3组相比，$P＜0.05，$$P＜0.01；与对比例4组相比，￥P＜0.05，￥￥P＜0.01。
表13结果显示：与假手术组比较，模型组大鼠股骨中的Ca、P、Mg含量明显降低(P＜0.01)；与模型组相比，倍美力组、实施例1高剂量组大鼠股骨中的Ca、P、Mg显著增加(P＜0.01)，实施例1中剂量组、实施例2-4组大鼠股骨中的Ca、P、Mg明显增加(P＜0.05)；与对比例各组相比，实施例1高剂量组大鼠股骨中的Ca、P、Mg显著增加(P＜0.01)，实施例1中剂量组、实施例2-4组大鼠股骨中的Ca、P、Mg明显增加(P＜0.05)。
7.12对去势大鼠股骨中微量元素含量的影响：见表14
表14：对去势大鼠股骨中微量元素Sr、Mn、Zn、Cu含量的影响
表14结果显示：
与假手术组比较，模型组大鼠股骨中锶(Sr)、锰(Mn)、锌(Zn)、铜(Cu)的含量降低；与模型组相比，倍美力组、实施例各组Sr、Mn、Zn、Cu的含量增加；与对比例各组相比，实施例各组Sr、Mn、Zn、Cu的含量增加，但是没有明显差异(P＞0.05)。
实验小结：本发明提供的提取物可不同程度的抑制骨质疏松和治疗骨质疏松，效果优于现有技术的提取物。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (5)
1.一种仙灵骨葆提取物，其特征在于，仙灵骨葆提取物是由以下重量份的中药制成：淫羊藿600-1500份、丹参50-150份、补骨脂50-150份、续断80-200份、知母50-150份和地黄50-150份，其活性成分为：丹参和补骨脂的醇提物，淫羊藿、续断、知母和地黄的水提物，其中：
1）淫羊藿的水提物：淫羊藿加水煎煮提取1-3次，每次1-3h，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至60-90℃时相对密度为0.08-1.08，趁热离心，倾出上清液，过大孔吸附树脂柱，上样液浓度为0.2-0.5g/ml；上样量为1g-3g生药/ml树脂；吸附速度为4-12ml/min；洗脱速度为3-20ml/min；水洗脱体积为1-5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去，再用2-6倍柱体积的浓度为25-90%乙醇洗脱；收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得；
2）丹参和补骨脂的醇提物：称取丹参、补骨脂药材，混合均匀，用60-90%的乙醇回流提取1-3次，每次1-3h，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，减压干燥，即得；
3）续断、知母和地黄的水提物：称取续断、知母、地黄药材，混合均匀，用水煎煮提取2-3次，每次2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，减压干燥，即得；
4）取淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，知母、续断和地黄的水提物，混合均匀，即得仙灵骨葆提取物。
2.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于，所述提取物由以下方法制备：
1）淫羊藿的水提物：淫羊藿加水煎煮提取3次，第一次加水20倍，第二次加水15倍，第三次加水15倍，每次2h，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至80℃时相对密度为1.02，趁热离心，2500rpm，20min，倾出上清液，上样液浓度为0.5g/ml；上样量为1g生药/ml树脂；吸附速度为8ml/min；洗脱速度为16ml/min；水洗脱体积为5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去水洗脱液；再用70%乙醇洗脱淫洋藿黄酮类成分，用量为4倍柱体积；收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得干浸膏。倾出上清液，残渣，即可；
2）丹参和补骨脂的醇提物：称取丹参、补骨脂药材，混合均匀，加入8倍量70%乙醇，回流提取2次，每次1.5h，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，60℃减压干燥，即得干浸膏；
3）续断、知母和地黄的水提物：称取续断、知母、地黄药材，混合均匀，加入10倍量水，煎煮提取3次，每次2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，80℃减压干燥，即得干浸膏；
4）取淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，知母、续断和地黄的水提物，混合均匀，即得仙灵骨葆提取物。
3.含权利要求1或2所述提取物的制剂，其特征在于，该制剂由所述提取物和药学上可接受的载体组成。
4.权利要求1或2所述的仙灵骨葆提取物及权利要求3所述的含提取物的制剂在制备治疗骨质疏松症的药物中的应用。
5.一种制备权利要求1或2所述的提取物的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
1）淫羊藿的水提物：淫羊藿加水煎煮提取1-3次，每次1-3h，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至60-90℃时相对密度为0.08-1.08，趁热离心，倾出上清液，过大孔吸附树脂柱，上样液浓度为0.2-0.5g/ml；上样量为1g-3g生药/ml树脂；吸附速度为4-12ml/min；洗脱速度为3-20ml/min；水洗脱体积为1-5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去，再用2-6倍柱体积的浓度为25-90%乙醇洗脱；收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得；
2）丹参和补骨脂的醇提物：称取丹参、补骨脂药材，混合均匀，用60-90%的乙醇回流提取1-3次，每次1-3h，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，减压干燥，即得；
3）续断、知母和地黄的水提物：称取续断、知母、地黄药材，混合均匀，用水煎煮提取2-3次，每次2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，减压干燥，即得；
4）取淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，知母、续断和地黄的水提物，混合均匀，即得仙灵骨葆提取物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110317157 CN102343027B (zh) | 2011-10-18 | 2011-10-18 | 一种仙灵骨葆提取物，含其制剂及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110317157 CN102343027B (zh) | 2011-10-18 | 2011-10-18 | 一种仙灵骨葆提取物，含其制剂及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102343027A CN102343027A (zh) | 2012-02-08 |
| CN102343027B true CN102343027B (zh) | 2013-01-23 |
Family
ID=45542348
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201110317157 Active CN102343027B (zh) | 2011-10-18 | 2011-10-18 | 一种仙灵骨葆提取物，含其制剂及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102343027B (zh) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103083521B (zh) * | 2013-02-20 | 2015-04-15 | 贵州同济堂制药有限公司 | 一种仙灵骨葆的提取方法、分离提取物及制剂 |
| CN103191315B (zh) * | 2013-04-26 | 2014-08-20 | 漯河医学高等专科学校 | 一种治疗绝经后骨质疏松症的中药 |
| CN104337992B (zh) * | 2013-07-29 | 2017-12-12 | 贵州益佰制药股份有限公司 | 具有增加骨密度功能的药物组合物及制法和应用 |
| CN106237158A (zh) * | 2016-08-30 | 2016-12-21 | 林海燕 | 一种治疗骨质疏松的药物组合物 |
| CN110161135B (zh) * | 2018-02-13 | 2022-03-11 | 国药集团同济堂（贵州）制药有限公司 | 续断标准汤剂的制备方法及其检测方法 |
| CN113933237B (zh) * | 2021-10-20 | 2023-10-13 | 山西信谊通制药有限公司 | 一种阿莫西林胶囊检测装置 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100341489C (zh) * | 2005-07-06 | 2007-10-10 | 北京正大绿洲医药科技有限公司 | 一种具有补肾壮骨作用的仙灵骨葆滴丸及其制备方法 |
| CN100533139C (zh) * | 2006-03-23 | 2009-08-26 | 江西汇仁药业有限公司 | 一种药物制剂的检测方法 |
-
2011
- 2011-10-18 CN CN 201110317157 patent/CN102343027B/zh active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102343027A (zh) | 2012-02-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102343027B (zh) | 一种仙灵骨葆提取物，含其制剂及其制备方法 | |
| US20060193929A1 (en) | Method for treating or preventing symptoms associated with menopause | |
| KR101794836B1 (ko) | 당귀, 천궁 및 육계를 유효성분으로 함유하는 갱년기 증상의 개선을 위한 조성물 | |
| CN104306959A (zh) | 一种治疗骨质疏松的药物组合物及其制备方法 | |
| CN101966222A (zh) | 一种具有壮骨功效的药物组合物、制剂及其制备方法 | |
| CN105920086A (zh) | 一种补骨脂提取物的制备方法及补骨脂提取物 | |
| CN104721678B (zh) | 高良姜提取物在制备抗骨质疏松药品方面的应用 | |
| KR100585445B1 (ko) | 혼합 생약재를 이용한 골질환 예방 및 치료용 약제 조성물 | |
| CN102397328B (zh) | 一种用于治疗骨折的中药组合物及其制备方法和应用 | |
| KR100456981B1 (ko) | 식물추출물을 포함하는 골다공증 예방 또는 치료용 조성물및 그 제조 방법 | |
| CN100352464C (zh) | 一种治疗骨质疏松的药物 | |
| CN101138597B (zh) | 一种防治骨质疏松症的中药制剂及其制备方法 | |
| CN102266415A (zh) | 一种复方中药在防治骨质疏松疾病中的应用 | |
| CN101773490B (zh) | 具有降低绝经期妇女骨相关疾病发病风险的接骨木活性部位及其应用 | |
| CN101618087B (zh) | 一种具有改善更年期功能的保健食品 | |
| CN1322888C (zh) | 一种治疗骨质疏松的药物的用途 | |
| CN102366493B (zh) | 治疗绝经后骨质疏松症的中药复方提取物及其制备方法 | |
| CN101167783A (zh) | 杜仲仁总苷在制备治疗骨质疏松病药物中的应用 | |
| CN109528886B (zh) | 一种防治绝经后骨质疏松症的中药组合物制剂及其制备与应用 | |
| WO2007031140A2 (de) | Extrakte aus epimedium-arten, verfahren zu ihrer herstellung und verwendung | |
| CN102366621A (zh) | 五加生化中药复方提取物的植物雌激素样作用及应用 | |
| CN103768158B (zh) | 一种防治骨质疏松症的药物组合物及其制备方法 | |
| CN106309543A (zh) | 补骨脂总黄酮在制备治疗围绝经期综合征药物中的应用 | |
| CN107184657A (zh) | 一种治疗原发性骨质疏松症的中药复方制剂及其制备方法 | |
| CN103251935A (zh) | 一种含有鹿茸的药用组合物及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C56 | Change in the name or address of the patentee |
Owner name: SINOPHARM GROUP TONGJITANG (GUIZHOU) PHARMACEUTICA Free format text: FORMER NAME: GUIZHOU TONGJITANG PHARMACEUTICAL CO., LTD. |
|
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder |
Address after: 550009 No. 296 Southwest Ring Road, Xiaohe District, Guizhou, Guiyang Patentee after: Sinopharm group (Guizhou) Pharmaceutical Co., Ltd. Address before: 550009 No. 296 Southwest Ring Road, Xiaohe District, Guizhou, Guiyang Patentee before: Guizhou Tongjitang Pharmaceutical Co., Ltd. |
|
| CP02 | Change in the address of a patent holder | ||
| CP02 | Change in the address of a patent holder |
Address after: 550009 Guiyang economic and Technological Development Zone, Guizhou Province, No. 99 Tongji Hall Patentee after: Sinopharm group (Guizhou) Pharmaceutical Co., Ltd. Address before: 550009 No. 296 Southwest Ring Road, Xiaohe District, Guizhou, Guiyang Patentee before: Sinopharm group (Guizhou) Pharmaceutical Co., Ltd. |