CN103251935A - 一种含有鹿茸的药用组合物及应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含有鹿茸的药用组合物，它包括按重量%：鹿茸冻干粉1～20%；葡糖胺1～10%；胶原蛋白1～20%；维生素B61～10%；白云石1～20%；发芽大豆粉95～20%；上述药物总和为100%；鹿茸冻干粉是将鲜鹿茸冻干、粉碎，生理盐水0～4℃提取，提取液离心取上清冻干成粉；经采用卵巢切除的方法制成绝经后骨质疏松动物模型，连续给药12周，结果显示，可用于防治因雌激素下降而导致的松质骨的丢失；骨代谢生化指标及骨密度结果提示，可纠正因雌激素水平低下导致的骨转换率增加，改善骨吸收与骨形成偶联失衡状况，同时促进了骨形成，对于以松质骨丢失为主，高转换型的骨质疏松症有一定的防治作用。

Description

一种含有鹿茸的药用组合物及应用

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种含有鹿茸及发芽大豆粉的药物组合物和制备方法及其在制备预防和治疗骨质疏松的药物中的应用。

背景技术

骨质疏松（osteoporosis），其世界公认的明确定义为【1993年第四届国际骨质疏松研讨会】：原发性骨质疏松是以骨量减少、骨的微观结构退化为特征的，致使骨的脆性增加以及易于发生骨折的一种全身性骨骼疾病。骨质疏松症主要分为原发性和继发性两大类。原发性骨质疏松症又分为绝经后症（I型）、老年性症（II型）和特发性3种；继发性骨质疏松症指由任何影响骨代谢的疾病或药物所致的病症。

骨质疏松症患者最常见的症状是疼痛，原发性骨质疏松症患者最常见的症状多见于腰背痛，占疼痛患者总数的70%-80%。骨质疏松症患者的疼痛是沿脊柱向两侧扩散，在仰卧或坐位时疼痛减轻，直立时久立或久坐则疼痛加剧，日间疼痛轻，而夜间和清晨醒来时加重。一般骨质疏松症的患者骨量丢失12%以上即可能出现骨痛。另外，很多骨质疏松症患者都有呼吸功能下降的症状，这是因为骨质疏松患者的胸、腰椎压缩性骨折，脊椎后弯，胸廓畸形，可使肺活量和最大换气量显著减少，从而出现胸闷、气短、呼吸困难等症状。再者，因为骨质疏松症的患者其骨质丢失较多，所以很容易发生骨折，也是骨质疏松症的症状之一，并且骨折是退行性骨质疏松症最常见和最严重的并发症【秦岭，张戈.美国国家卫生院有关骨质疏松症的预防、诊断和治疗的共识文件.中国骨质疏松杂志,2002年3月】。

目前临床治疗方面，主要以使用骨吸收抑制剂，如雌激素（雌二醇等）、双磷酸盐、降钙素等，以及骨形成促进剂活性维生素D、蛋白同化激素（苯丙酸诺龙）、钙制剂等。

除此之外，对于这种慢性疾病的预防和治疗，我国传统中医药对于骨质疏松症具有着非常独特的疗效。鹿茸就是其中非常重要的一个药味。其具有壮元阳、益精髓、强筋骨之功效【李时珍《本草纲目》】。实验证实，鹿茸对长期不愈和新生不良的溃疡与创口有增强组织再生的能力，促进骨折的愈合。经过长期的临床实践，有人选取了由鹿茸、制首乌、龟甲、杜仲、紫河车、当归、三七、水蛭、砂仁组成的药物组合物，具有补肾壮骨、活血止痛之功效，用于治疗骨质疏松症。但由于除鹿茸外还含有大量成分复杂的药味，少数患者服用后有口干、消化不良、便秘、皮疹等不良反应。

发明内容

本发明的目的是针对上述药物预防和治疗骨质疏松症存在的问题，而提供一种成分简单易控、疗效更加确切、副作用更小、针对性更强的含有鹿茸的药用组合物。

一种含有鹿茸的药用组合物，它包括按重量%：鹿茸冻干粉1～20%；葡糖胺1～10%；胶原蛋白1～20%；维生素B6 1～10%；白云石1～20%；发芽大豆粉20～95%；上述药物总和为100%。

优选为：鹿茸冻干粉5～15%；葡糖胺2～4%；胶原蛋白5～15%；维生素B6 2～4%；白云石2～12%；发芽大豆粉50～84%；

优选为：鹿茸冻干粉10%；葡糖胺3%；胶原蛋白10%；维生素B6  3%；白云石7%；发芽大豆粉67%；

所述的鹿茸为梅花鹿或马鹿；

优选马鹿；

所述的鹿茸冻干粉是将鲜鹿茸冻干、粉碎，生理盐水0～4℃提取，提取液离心取上清冻干成粉。

一种含有鹿茸的药用组合物散剂，它是由下述方法制备的：

1）将以上述各药味粉碎，过100目筛网；

2）将半量的发芽大豆粉研磨、搅拌，依次加入白云石、胶原蛋白、葡糖胺、维生素B6、鹿茸冻干粉；每次研磨搅拌至颜色均匀一至，再加入下一味药；

3）加入剩余半数量的发芽大豆粉，研磨搅拌至颜色均匀一致，干燥后分装，密封，低温保存。

一种含有鹿茸的药用组合物口服液，将一种含有鹿茸的药用组合物散剂加入矫味剂、甜味剂、防腐剂，溶于水。

本发明另一目的是一种含有鹿茸的药用组合物在制备预防和治疗骨质疏松症药物的应用。

本发明提供了一种含有鹿茸的药用组合物，它包括按重量%：鹿茸冻干粉1～20%；葡糖胺1～10%；胶原蛋白1～20%；维生素B6 1～10%；白云石1～20%；发芽大豆粉95～20%；上述药物总和为100%；鹿茸冻干粉是将鲜鹿茸冻干、粉碎，生理盐水0～4℃提取，提取液离心取上清冻干成粉；药用组合物可以包含赋形剂，由本技术领域的人员根据本发明药用组合物所选取的剂型，按常规来选择。所述的剂型可为片剂、散剂、口服液、口服乳液、胶囊剂、混悬液、颗粒剂、冲剂等，优选的剂型是散剂或口服液。对于散剂，无需加入赋形剂；加入矫味剂、矫味剂、防腐剂等溶于水制成口服液。经采用卵巢切除的方法制成绝经后骨质疏松动物模型，连续给药12周，病理形态学统计结果提示，本发明药物组合物可用于防治因雌激素下降而导致的松质骨的丢失；骨代谢生化指标及骨密度结果提示，本发明药物组合物可纠正因雌激素水平低下导致的骨转换率增加，改善骨吸收与骨形成偶联失衡状况，同时促进了骨形成，对于以松质骨丢失为主，高转换型的骨质疏松症有一定的防治作用。

附图说明

    图1为大鼠骨组织髓腔面积百分率（％Ma.Ar）；其中：1、正常组； 2、模型空白组；3、鹿茸组合物组；4、鹿茸组； 5、骨疏康组；6、尼尔雌醇组；

图2为大鼠骨组织骨小梁厚度（Tb.Th）；其中：1、正常组； 2、模型空白组；3、鹿茸组合物组；4、鹿茸组； 5、骨疏康组；6、尼尔雌醇组。

具体实施方式

下面将结合具体实施例对本发明作进一步详尽的阐述。

实施例1  含有鹿茸的药用组合物散剂

鹿茸选取来自梅花鹿或马鹿，于生长30天时，采用预消毒的医用手锯将鹿茸锯下，并用真空泵抽血后冻干；在液氮辅助下冷冻后研磨为粉末，用生理盐水或磷酸盐缓冲液，4℃下提取24h；将提取液4500rpm 4℃下离心30分钟，取上清，去除绝大部分不溶物；将上清液冷冻干燥即得鹿茸冻干粉，4℃下冷藏。

发芽大豆粉是用本技术领域公知的方法制得：将发芽2~3天，长出4-5mm嫩芽的大豆烘焙、粉碎后，过100目筛网。

该散剂可通过下列步骤制备：

将以上各药味粉碎，过100目筛网。

1、将半数量的发芽大豆粉置于乳钵中，轻轻搅拌以饱和研钵表面。

2、加入白云石，轻轻搅拌至颜色均匀一致，随后加入胶原蛋白，轻轻搅拌至颜色均匀一致，照此法依次加入葡糖胺、维生素B6、鹿茸冻干粉，并搅拌混匀至颜色均匀一致。

3、加入剩余半数量的发芽大豆粉，轻轻搅拌混匀至颜色均匀一致，干燥后分装，密封，低温保存即可。

实施例2  含有鹿茸的药用组合物散剂

一种含有鹿茸的药用组合物，按重量：鹿茸冻干粉1%；葡糖胺1%；胶原蛋白1%；维生素B6 1%；白云石1%；发芽大豆粉95%。

其余同实施例1。

实施例3

一种含有鹿茸的药用组合物，它包括按重量%：马鹿鹿茸冻干粉20%；葡糖胺10%；胶原蛋白20%；维生素B6 10%；白云石20%；发芽大豆粉20%。

其余同实施例1。

实施例4一种含有鹿茸的药用组合物，它包括按重量%：梅花鹿茸冻干粉5%；葡糖胺4%；胶原蛋白5%；维生素B6 4%；白云石2%；发芽大豆粉80%；

其余同实施例1。

实施例5一种含有鹿茸的药用组合物，它包括按重量%：马鹿茸冻干粉15%；葡糖胺2%；胶原蛋白15%；维生素B6 2%；白云石12%；发芽大豆粉54%；

其余同实施例1。

实施例6  含有鹿茸的药用组合物口服液

该口服液可通过下列步骤制备：

各药味的混合与散剂的制作一致，然后

1、加适量蒸馏水至溶解杯中，将药味混合物缓慢加入，边加入边搅拌，直至所有药味粉末加入其中，轻轻搅拌至溶解；

2、依次加入矫味剂、甜味剂，缓慢搅拌至溶解；

3、加入防腐剂，缓慢搅拌至溶解；

4、将蒸馏水加到100ml，搅拌均匀，分装，以钴-60 1.0K照射30分钟消毒，即得。

实施例7  口服含有鹿茸的药用组合物对骨质疏松大鼠模型的影响

一、材料与方法

1． 实验材料：

1.1 实验动物：

清洁级雌性SD大鼠120只，体重260－300g，4.5月龄，未曾交配，购于上海西普尔－必凯实验动物中心。

1.2实验药品：

受试药物：实施例1所制备的鹿茸组合物散剂、鹿茸片（传统炮制工艺热炸茸，购于辽宁中医学院附属医院药局）、骨疏康颗粒剂（东港市康辰制药有限公司，批号：020305），尼尔雌醇片（上海华联制药有限公司，批号：020301）。

2． 实验方法：

2.1 骨质疏松大鼠模型的建立方法：

按体重随机分组，首先分出正常组12只。

余者进行造模处理，采用手术去势方法。大鼠经麻醉后，进行脱毛、消毒，从腰背部脊柱两侧纵向逐层切开，完整切除双侧卵巢，然后关闭创口。术后给与青霉素（80万单位）肌肉注射，0.1ml/只。

2.2 动物分组及给药方法：

    术后7天将卵巢切除组存活者按体重随机分为5组（n=12），即模型空白组、鹿茸组合物组、鹿茸组（热炸茸）、骨疏康颗粒组、尼尔雌醇组。

2.3  动物给药方法：

术后7天开始给药：尼尔雌醇组给予尼尔雌醇0.6mg/kg体重,每周1次灌胃；鹿茸组合物组、鹿茸组给药剂量为0.1g／kg体重／d，灌胃；骨疏康颗粒组给药剂量为6g／kg体重／d，灌胃；中药组 1次/d，各组给药容积为 lml/100g体重；正常组、模型空白组及尼尔雌醇组未灌药期间，每天灌胃等体积的生理盐水，每天上午给药，连续给药12周。存活动物在最后一次给药后24小时，处死并采集以下标本进行测定分析。

2.4 标本采集：

① 尿液：大鼠取材前，利用代谢笼留取24小时尿，检测生化指标。

② 血清： 大鼠腹主动脉血5～8ml/只，室温静置4小时，然后3000rpm/min，离心30min，取血清，分装，－70℃冰箱保存，检测骨代谢指标及酶联免疫指标。

③ 骨组织: 

骨形态学指标：右后肢胫骨上端骨骺部分，仔细剥离附着肌肉、结缔组织，放入4％多聚甲醛/0.1M磷酸盐缓冲液中，4℃固定24小时后，放入10％EDTA脱钙液中，脱钙数周，每周换脱钙液1次，至可以用大头针能轻轻刺进为度。 

骨密度指标： 取左后肢股骨及胫骨，剔除肌肉及筋膜，生理盐水冲洗后，用塑料保鲜袋装好，置－70℃冰箱冻存备用。

3.指标检测:

3.1 骨代谢生化指标的检测:

①血清雌二醇（E₂－17β）、骨钙素（BGP），采用SN-695B型智能放免γ计数仪，采用竞争性放射免疫分析法。

②血清碱性磷酸酶测定：采用IFCC法。

③血清及尿液肌苷，采用RANDOX酶法测定；钙采用偶氮砷Ⅲ法测定；磷采用磷钼酸还原法测定；镁采用二甲苯胺蓝染料法测定。

④尿羟脯氨酸：采用经典法测定。

⑤血清抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP），采用对硝基酚磷酸盐法测定。

以上②、③均用7600－020全自动生化分析仪进行检测，其操作均按照试剂盒说明操作。

3.2  骨形态学指标：HE染色，光镜观察，应用CoolSnapfx/AX70数码相机照相， Meta Morph显微图像分析系统，对切片进行图像分析。每组取2只动物，每只动物5张切片，计算骨髓组织与骨小梁面积百分比，并对骨小梁的平均厚度进行测量。

3.3  离体股骨、胫骨骨密度的测定: 应用XR－36型双能X线骨密度仪（美国NORLAND）及其所附的“The Small Subject Scout Scan”软件测量。扫描宽度15cm，长度可任意调节，扫描速度80mm/sec,分辨率为3.0×3.0mm。对股骨整体、股骨近端（为股骨近侧干骺端1/3），股骨远端（为股骨远侧干骺端1/3）；胫骨整体、胫骨近端（胫骨至胫腓骨连接点的近侧1/3）进行骨密度分析，批内CV在0.82％～1.24％。

二、结果与分析

1.1实验动物离体股骨及胫骨骨密度的比较

与正常组比较，模型空白组大鼠左后下肢离体股骨整体、股骨近端、股骨远端、胫骨近端的骨密度显著下降，P ＜ 0.05；胫骨整体骨密度虽也有下降趋势，但无显著性差异，P ＞0.05。给药12周后，与模型空白组比较，鹿茸组合物组、鹿茸组、骨疏康组、尼尔雌醇组均可明显增加股骨整体、股骨近端、股骨远端、胫骨近端的骨密度 ，P ＜0.05。

鹿茸组合物与鹿茸组比较，前者可明显增加股骨整体、股骨远端、胫骨近端的骨密度 ，P ＜0.01。见表1。

实验动物骨代谢生化指标的比较

与正常组比较，模型空白组血清钙、磷、镁（Ca、P、Mg）含量无显著性差异，P ＞0.05；血清雌激素（E₂）水平显著降低，P ＜0.01；血清骨钙素（BGP）、血清抗酒石酸性酸性磷酸酶（TRAP）、尿羟脯氨酸与尿肌酐（Hop/Cr）比值显著升高，P ＜0.01；血清碱性磷酸酶（ALP）活性明显增高，P ＜0.05。

给药12周后，与模型空白组比较，鹿茸组合物组、鹿茸组、骨疏康组、尼尔雌醇组的血清雌激素（E₂）水平显著升高，血清BGP、ALP、 TRAP的含量显著降低，P ＜ 0.01；鹿茸组合物组、骨疏康组、尼尔雌醇组ALP活性明显下降，P ＜ 0.01。鹿茸组合物与鹿茸组比较，前者可明显降低TRAP、ALP水平，P ＜0.05、P ＜ 0.01；对血清P 、Mg含量也具有明显的调整作用，P ＜ 0.01、P ＜0.05。

表3各组大鼠尿骨代谢生化指标检测结果比较（

±s）

1.3 各组大鼠骨组织病理形态学比较

1.3.1 HE染色光镜下观察结果

光镜下观察各组大鼠右后肢胫骨上端松质骨部分显示：正常组可见骨小梁粗壮、饱满，形态结构完整，排列紧密、有规则，小梁间连接呈网状，小梁间连接好，骨髓腔相对较小。模型空白组骨小梁结构排列稀疏，总量明显减少，骨小梁间连接性差，出现大量骨小梁盲端，小梁壁的厚度不一致，骨髓腔增大，骨髓组织与骨小梁面积比增大。鹿茸各组、骨疏康颗粒组和尼尔雌醇组用药12周后，骨小梁数增多，骨小梁增宽，结构排列较紧密，形态与正常组接近，小梁间连接呈网，骨髓腔缩小。

1.3.2 病理图像分析结果

与正常组比较，模型空白组骨小梁厚度（Tb.Th）缩小，髓腔面积百分率（％Ma.Ar）明显增大，P＜0.01，差异显著；给药12周后，鹿茸组合物组、鹿茸组、骨疏康颗粒组、尼尔雌醇各组的骨小梁厚度增加，髓腔面积百分率明显缩小，P＜0.01，差异显著。见图1、图2。 

     采用实施例2、3和4鹿茸组合物进行上述实验，与实施例1鹿茸组合物效果相近，对骨质疏松症均有一定的防治作用。

本发明病理形态学统计结果提示，本发明药物组合物可用于防治因雌激素下降而导致的松质骨的丢失；骨代谢生化指标及骨密度结果提示，本发明药物组合物可纠正因雌激素水平低下导致的骨转换率增加，改善骨吸收与骨形成偶联失衡状况，同时促进了骨形成，对于以松质骨丢失为主，高转换型的骨质疏松症有一定的防治作用。

Claims (9)

1.一种含有鹿茸的药用组合物，它包括按重量%：鹿茸冻干粉1～20%；葡糖胺1～10%；胶原蛋白1～20%；维生素B6 1～10%；白云石1～20%；发芽大豆粉20～95%；上述药物总和为100%。

2.根据权利要求1所述的一种含有鹿茸的药用组合物，其特征在于：鹿茸冻干粉5～15%；葡糖胺2～4%；胶原蛋白5～15%；维生素B6 2～4%；白云石2～12%；发芽大豆粉50～84%。

3.根据权利要求1所述的一种含有鹿茸的药用组合物，其特征在于：鹿茸冻干粉10%；葡糖胺3%；胶原蛋白10%；维生素B6  3%；白云石7%；发芽大豆粉67%。

4.根据权利要求1、2或3所述的一种含有鹿茸的药用组合物，其特征在于：所述的鹿茸为梅花鹿或马鹿茸。

5.根据权利要求1、2或3所述的一种含有鹿茸的药用组合物，其特征在于：所述的鹿茸为马鹿茸。

6.根据权利要求1、2或3所述的一种含有鹿茸的药用组合物，其特征在于：所述的鹿茸冻干粉是将鲜鹿茸冻干、粉碎，生理盐水0～4℃提取，提取液离心取上清，冻干成粉。

7.一种含有鹿茸的药用组合物散剂，它是由下述方法制备的：

1）按权利要求1所述的各药味比例称重，分别粉碎，过100目筛网；

2）将半量的发芽大豆粉研磨、搅拌，依次加入白云石、胶原蛋白、葡糖胺、维生素B6、鹿茸冻干粉；每次研磨搅拌至颜色均匀一至，再加入下一味药；

3）加入剩余半数量的发芽大豆粉，研磨搅拌至颜色均匀一致，干燥后分装，密封，低温保存。

8.一种含有鹿茸的药用组合物口服液，其特征在于：将权利要求1所述的一种含有鹿茸的药用组合物散剂加入矫味剂、甜味剂、防腐剂，溶于水。

9.权利要求1所述的一种含有鹿茸的药用组合物在制备预防和治疗骨质疏松症药物的应用。

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