CN104873624B - 一种用于痛风性关节炎的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种用于痛风性关节炎的药物组合物，属于中药组分的技术领域。本发明提供的用于痛风性关节炎的中药组合物的组分重量份比组成为：肿节风10~50份、何首乌10~30份、虎杖15~40份、五味子8~25份、铁马鞭10~40份、赤芍5~25份、灵芝10~35份、木香10~30份。本发明的中药组合物加以医学上可接受的辅料以制成不同的剂型。本发明的药物组合物经过试验论证比之前用于痛风性关节炎的中药或西药均具有更加明显的药效，同时也具有很好的安全性；此外，本发明的药物组合物成本低、制备方法简单，具有明显的实用性和经济价值。

Description

一种用于痛风性关节炎的药物组合物

技术领域

本发明公开一种用于痛风性关节炎的药物组合物，属于中药组分的技术领域。

背景技术

痛风性关节炎是由于尿酸盐沉积在关节囊、滑囊、软骨、骨质和其他组织中而引起病损及炎性反应，其多有遗传因素，好发于40岁以上男性，多见于第一跖趾关节，也可发生于其他较大关节，尤其是踝部与足部关节。痛风分布在世界各地，受种族、饮食、饮酒、职业、环境和受教育程度等多因素影响。欧美地区痛风的患病率为0.2%~1.7%。在我国，近年来痛风的发病率呈上升趋势，我国普遍人群患病率约为1.14%。目前，痛风病发生有年轻化趋势，其主要的症状为：关节疼痛、肿胀、僵硬或畸性。

痛风性关节炎的发病原因一般认为是尿酸是嘌呤代谢的最终产物所引起的。痛风是长期嘌呤代谢障碍、血尿酸增高引起。如果患者无临床症状，血中尿酸浓度高于正常值，医学上称为“高尿酸血症”。血中尿酸浓度如果达到饱和溶解度，这些物质最终形成结晶体，积存于软组织中，最终导致身体出现炎症反应。痛风可以由饮食、天气变化如温度和气压突变、外伤等多方面引发。

痛风性关节炎的发病痛常分为三期：1、急性关节炎期：多在夜间突然发病，受累关节剧痛，首发关节常累及第一跖趾关节，其次为踝、膝等出现关节红、肿、热和压痛，全身无力、发热、头痛等。一般可持续3~11天。2、间歇期：为数月或数年，随病情反复发作，间期变短、病期延长、病变关节增多，渐转成慢性关节炎。3、慢性关节炎期：由急性发病转为慢性关节炎期平均11年左右，关节出现僵硬畸形、运动受限。30%左右病人可见痛风石和发生肾脏合并症，以及输尿管结石等。晚期甚至伴有高血压、肾和脑动脉硬化、心肌梗塞。少数病人会死于肾功能衰竭和心血管意外。对于上述急性期的治疗应祛除诱因并控制关节炎的急性发作。急症时常用药物包括：(1)非甾类抗炎药，如双氯芬酸钠或双氯芬酸钾，塞来昔布或美洛昔康等，症状控制后停药；(2)秋水仙碱：非甾类抗炎药无效时可考虑应用，开始时小量口服，直至症状缓解或出现药物副作用时停药；(3)糖皮质激素：如果有肾功能不全的患者，急性期可以考虑糖皮质激素，临床常选用德宝松肌注。对于缓解期的治疗的主要目的是为降低血尿酸水平，预防再次急性发作。其中可选择的药物有：(1)抑制尿酸生成药物：别嘌呤醇，根据尿酸水平从小量开始逐渐加量。(2)促进尿酸排泄药物：苯溴马隆。此外，对于无症状高尿酸血症的治疗：一般治疗包括减肥、控制血脂、减少非必要的利尿剂应用、控制饮食等。

由于上述西药的治疗方案存在药效明显，但是存在对肾脏的代谢要求高，对身体体能调节有一定的影响。同时西药治疗的费用高、适用性差等缺陷。

发明内容

本发明旨在提供一种安全、无毒、治疗效果好的用于痛风性关节炎的药物组合物，各组分的重量份比为：肿节风10~50份、何首乌10~30份、虎杖15~40份、五味子8~25份、铁马鞭10~40份、赤芍5~25份、灵芝10~35份、木香10~30份。

优选的，上述药物组合物的各组分重量份比为：肿节风15~40份、何首乌15~25份、虎杖17~35份、五味子10~20份、铁马鞭15~35份、赤芍10~20份、灵芝15~30份、木香15~25份。

进一步的，上述药物组合物的各组分重量份比为：肿节风20~35份、何首乌17~20份、虎杖20~30份、五味子12~18份、铁马鞭20~30份、赤芍12~18份、灵芝20~25份、木香17~20份。

进一步的，上述药物组合物的各组分重量份比为：肿节风30份、何首乌15份、虎杖25份、五味子16份、铁马鞭20份、赤芍10份、灵芝18份、木香20份。

肿节风为金粟兰科植物草珊瑚的干燥全株，其别名：观音茶、九节茶、九节花、九节风、竹节茶、接骨莲、接骨木、驳节茶、鸭脚节、山牛膝、珍珠兰、九节草、野靛、学士茶、接骨丹、接骨草、铜脚灵仙、九节兰、节骨茶、接骨莲、竹茶。肿节风对于抗菌消炎凉血清热解毒，祛风痛络，活血散结有很好的疗效；其主要用于肺炎、阑尾炎、蜂窝组织炎属热毒壅盛证候者，以及风湿痹痛、跌扑损伤、肿瘤的辅助治疗有很好的效果。肿节风味苦、辛、性平；归心、肝经；功能主治：清热解毒凉血，活血消斑散瘀，祛风除湿痛络；用于血热紫斑、紫癜，风湿痹痛，跌打损伤，肢体麻木，骨折，妇女痛经，产后瘀滞腹痛，肺炎，急性阑尾炎，急性胃肠炎，菌痢，胆囊炎，脓肿，口腔炎，风湿痹痛。肿节风炮制方法：取夏、秋二季采收，除去杂质，晒干，洗净、润透、切段、干燥。

虎杖异名为阴阳莲，为蓼科植物虎杖PolygonumcuspidatumSieb.etZucc.的干燥根茎和根。虎杖具有利湿退黄，清热解毒，散瘀止痛，止咳化痰的功效。虎杖主要用于湿热黄疸，淋浊，带下，风湿痹痛，痈肿疮毒，水火烫伤，经闭，症瘕，趺打损伤，肺热咳嗽等病症。虎杖味微苦、性微寒；归肝、胆、肺经。虎杖的炮制方法：一般在春、秋二季采挖，除去须根，洗净，趁鲜切短段或厚片，干燥。

何首乌学名：Fallopiamultiflora(Thunb.)Harald.，又名多花蓼、紫乌藤、夜交藤等；何首乌是蓼科蓼族何首乌属多年生缠绕藤本植物，块根肥厚，长椭圆形，黑褐色。何首乌块根入药，可安神、养血、活络，解毒(截疟)、消痈；制首乌可补益精血、乌须发、强筋骨、补肝肾。何首乌味苦、甘涩，微温；归入肝、肾经；主要功效：养血滋阴；润肠痛便；截疟；祛风；解毒。主血虚头昏目眩；心悸；失眠；肝肾阴虚之腰膝酸软；须发早白；耳鸣；遗精；肠燥便秘；久疟体虚；风疹瘙痒；疮痈；瘰疬；痔疮。

五味子的异名为菋、玄及、会及、五梅子，为五味子科五味子属植物五味子或华中五味子的果实；五味子药性酸、性温，归肺、心、肾经；功能主治：收敛固涩、益气生津、宁心安神，主治久咳虚喘、梦遗滑精、尿频遗尿、久泻不止、自汗盗汗、津伤口渴、心悸失眠。五味子为木兰科植物五味子Schisandrachinensis（Turcz.）Baill.或华中五味子SchisandrasphenantheraRehd.etWils.的干燥成熟果实。五味子的药用价值：功能主治：敛肺，滋肾，生津，收汗，涩精；治肺虚喘咳，口干作渴，自汗，盗汗，劳伤羸瘦，梦遗滑精，久泻久痢。五味子的炮制方法：秋季果实成熟时采摘，晒干或蒸后晒干，除去果梗及杂质筛净灰屑，除去杂质，置蒸笼内蒸透，取出晒干。酒五味子：取拣净的五味子，加黄酒拌匀，置罐内，密闭，隔水炖之，待酒吸尽，取出，晒干。

铁马鞭学名：Rhamnusaurea.，其异名为三叶藤、野花生、金钱藤、野花草、假山豆、夜牵牛、土黄芪。其功能主治：益气安神、活血止痛、利尿消肿，主治：气虚发热、失眠、痧证腹痛、风湿痹痛、水肿、痈疽肿毒。

赤芍为毛茛科植物赤芍或川赤芍的干燥根。赤芍味苦，性微寒；归肝经。赤芍有清热凉血，活血祛瘀的功效；主治：用于热人营血，温毒发斑，吐血衄血，目赤肿痛，肝郁胁痛，经闭痛经，瘾瘕腹痛，跌扑损伤，痈肿疮疡。炮制方法：春、秋二季采挖，除去根茎、须根及泥沙，晒干。其中炒赤芍后，赤芍药性偏于缓和，活血止痛而不伤中，可用于瘀滞疼痛。

灵芝学名：GanodermaLucidumKarst.，外形呈伞状，菌盖肾形、半圆形或近圆形，为多孔菌科真菌灵芝的子实体。灵芝具有补气安神、止咳平喘的功效，用于眩晕不眠、心悸气短、虚劳咳喘。灵芝含有氨基酸、多肽、蛋白质、真菌溶菌酶(fungallysozyme)，以及糖类(还原糖和多糖)、麦角甾醇、三萜类、香豆精甙、挥发油、硬脂酸、苯甲酸、生物碱、维生素B2及C等；孢子还含甘露醇、海藻糖(trehalose)等物质。灵芝活性成分的提取：取灵芝粉末2g，加乙醇30毫升，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2毫升使溶解即可。灵芝功效作用：保肝解毒，灵芝对多种理化及生物因素引起的肝损伤有保护作用。无论在肝脏损害发生前还是发生后，服用灵芝都可保护肝脏，减轻肝损伤。灵芝还能促进肝脏对药物、毒物的代谢，对于中毒性肝炎有确切的疗效。治疗糖尿病：灵芝降血糖之原理是由于促进组织对糖的利用；服用灵芝后可取代胰岛素抑制脂肪酸的释出，可改善血糖、尿糖等症状。灵芝中的水溶性多糖，可减轻非胰岛素依赖性糖尿病的发病程度。改善心血管系统：动物实验和临床试验均表明，灵芝可有效地扩张冠状动脉，增加冠脉血流量，改善心肌微循环，增强心肌氧和能量的供给。灵芝性温，味淡；气特殊、味微苦涩。灵芝功能主治：1、心神不宁，失眠，惊悸。该品味甘性平，入心经，能补心血、益心气、安心神，故可用治气血不足、心神失养所致的心神不宁、失眠、惊悸、多梦、健忘、体倦神疲、食少等症。2、咳喘痰多；该品味甘能补，性平偏温，入肺经，补益肺气，温肺化痰，止咳平喘，常可治痰饮证，见形寒咳嗽、痰多气喘者，尤其对痰湿性或虚寒性疗效较好。3、虚劳症；该品有补养气血作用，故常用治虚劳短气、不思饮食、手足逆冷、或烦躁口干等症。

木香的异名为蜜香、青木香、五香、五木香、南木香、广木香。木香味辛、苦，性温；归脾、大肠、三焦经；功效：行气，止痛，健脾，消食；主治：行气止痛；调中导滞。木香主胞胁胀满足；脘腹胀痛；嗳吐泄泻；痢疾后重；一般用于胸脘胀痛、泻痢后重、食积不消、不思饮食；中气不省；突发耳聋；蛇虫咬伤；牙痛。

本发明的中药组合物还可以含有药学上可接受的辅料以制成不同的剂型。

上述药物组合物可以加入辅料制成各种剂型，如汤剂、片剂、水针剂、胶囊、颗粒剂、粉剂、丸剂、喷雾剂、乳化液、霜剂或药膏。

本发明的上述药剂可接受的辅料为：稀释剂包括但不限于，山梨醇、甘露醇、淀粉、乳糖、粉状或微晶状纤维素、二钙磷酸盐，三钙磷酸盐、糖和相似物；填充剂：羧甲基纤维素钠、PVP-K30、羟丙基纤维素、淀粉浆、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、胶化淀粉等；崩解剂：干淀粉、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素等；润滑剂：硬脂酸镁、滑石粉、十二烷基硫酸钠或微粉硅胶；其它辅料包括结合剂、润滑剂、流动剂、复合形成剂、释放控制剂、膜衣剂、塑化剂、着色剂、调味剂、甜味剂、黏度增强剂、保存剂或抗氧化剂。

本发明所提供的药物组合物主要是适用于痛风性关节炎。

本发明所提供的药物组合物的组分经清洗后，采取中药常规煎服方法，以汤剂的形式服用；其具体操作是以将上述药物组合物经清洗、干燥后，投入药物总重量的3~10倍蒸馏水中煎煮1~3次，每次煎煮时间为0.5~3h，收取每次煎煮后的药汁、经灭菌处理，袋装或瓶装分装，低温保存即得汤剂。

进一步地，本发明的药物组合物经清洗、干燥后，采用20%~70%(wt%)乙醇萃取药物中的活性成分，萃取2~5次，每次萃取时间为20~60min，每次萃取采用乙醇的质量为原药物总重量的1~3倍；收取上述乙醇得到的药汁，采用袋装或小瓶分装，灭菌处理后低温保存。采用乙醇萃取药物组合物中的活性成分，使得萃取得到的汤剂的药效更明显。

本发明的药物组合物经清洗、低温干燥后再经乙醇萃取后溶于注射水中，超声、搅拌使其完全溶解，加入注射用活性炭，在20~50℃水浴中保持10~30min，微孔过滤膜过滤，在用截留分子量为5万的超滤膜超滤，补足注射用水，分装于安瓿中，每支封口，灭菌即得水针剂。

进一步地，上述药物组合物经清洗、干燥后经乙醇萃取得出其中药物的活性成分，药物活性成分和甘露醇一起溶解于注射用水中，超声、搅拌使其完全溶解，然后加入注射用活性炭，20~50℃水浴中保持10~25min，趁热与微孔滤膜过滤，再用截留分子量为5万的超滤膜过滤，补足注射用水，分装于西林瓶中，每支装药物活性成分的溶液5ml和注射用水5~10ml，冷冻干燥中冻干，即得粉剂。

本发明的药物组合物经清洗、低温或室温下干燥后加入透明质酸钠、乳糖、微晶纤维素、聚维酮、硬脂酸镁，分别取上述药物组合物及辅料，分别粉碎；过150目筛，将透明质酸、药物组合物，乳糖、微晶纤维素混合均匀，以聚维酮的乙醇溶液为黏合剂制成软材，制粒、干燥、整粒，加入硬脂酸镁，混合均匀，压片、即得片剂。

进一步地，本发明的药物组合物经清洗、低温干燥后加入透明质酸钠、预胶化淀粉，分别取药物组合物及辅料，粉碎，过150目筛，混匀，均匀喷入蒸馏水，制软材，制粒、干燥、整粒，装入胶囊即得胶囊剂。

本发明的药物组合物经清洗、低温干燥后，使用机械将各药物进行粉碎，将粉碎后的药物过150目筛，然搅拌混合，最后包装得散剂。

在具体服用本发明不同剂型得到的药物，以每次服用2~10g原药/次，每天2~3次，以7~10天为一个疗程，2~3个疗程为一个治疗期。对于痛风性关节炎的患者服用本发明的药物组合物的上述不同剂型，服用1个疗程即见效果，当继续服用2~3个疗程，病情基本得到控制，达到治本治表的效果，同时不复发。

本发明的药物使用方便，安全，舒适，无毒副作用，对痛风性关节炎有较好的疗效。本发明还提供了上述药物组合物加入各种辅料以制成不同剂型。所提供的不同的剂型方便患者服用，同时疗效显著。

具体实施方式

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例对本发明的技术方案作详细的解释。

实施例1

肿节风15份、何首乌15份、虎杖20份、五味子8份、铁马鞭15份、赤芍15份、灵芝15份、木香20份。

实施例2

肿节风50份、何首乌30份、虎杖20份、五味子20份、铁马鞭30份、赤芍20份、灵芝30份、木香20份。

实施例3

肿节风40份、何首乌30份、虎杖40份、五味子25份、铁马鞭30份、赤芍20份、灵芝30份、木香20份。

实施例4

肿节风30份、何首乌20份、虎杖30份、五味子15份、铁马鞭20份、赤芍15份、灵芝20份、木香10份。

实施例5

肿节风40份、何首乌20份、虎杖35份、五味子15份、铁马鞭30份、赤芍15份、灵芝20份、木香15份。

实施例6

肿节风30份、何首乌15份、虎杖20份、五味子12份、铁马鞭20份、赤芍20份、灵芝15份、木香20份。

实施例7药物组合物汤剂

肿节风25份、何首乌12份、虎杖20份、五味子15份、铁马鞭25份、赤芍18份、灵芝15份、木香25份。上述重量份比的药物加入药物总重量7倍的蒸馏水煎煮1次后，再采用上述药物总重量5倍的蒸馏水煎煮；第一次水沸腾后再煎煮2小时，第二次煎煮过程中水沸腾后再煎煮1小时即可，在煎煮期间保持水淹没药物2~3cm。收取上述两次的煎煮得到的药汁、灭菌处理后，分成每小瓶15ml的药汁包装，-5℃下保存。

实施例8药物组合物水针剂

肿节风30份、何首乌25份、虎杖25份、五味子18份、铁马鞭25份、赤芍20份、灵芝20份、木香12份。上述重量份的药物经清洗、室温下干燥后，采用上述药物总重量的7倍的80%(wt%)乙醇萃取后溶于注射水中，超声、搅拌使其完全溶解，加入注射用活性炭，活性炭的重量为药物总重量的0.5%倍，在30℃水浴中保持15min，微孔过滤膜过滤，在用截留分子量为5万的超滤膜超滤，加入5ml萃取得到的原药汁，再补足注射用水至12ml，分装于安瓿中，每支封口，灭菌即得水针剂。

实施例9药物组合物粉剂

肿节风45份、何首乌25份、虎杖20份、五味子20份、铁马鞭30份、赤芍20份、灵芝30份、木香20份。将上述药物组分经清洗后、室温下干燥；然后加入药物总重量的10%的甘露醇溶解于注射用水中，注射用水的质量为药物重量的20%，超声、搅拌使其完全溶解，加入注射用活性炭；其中活性炭的重量为药物总重量的1%，在35℃水浴中保持15min，趁热与微孔滤膜过滤，再用截留分子量为5万的超滤膜过滤，补足注射用水，分装于西林瓶中，每支装入过滤后的药汁5ml和5ml注射水，冷冻干燥中冻干，得粉剂。

实施例10药物组合物片剂

肿节风30g、何首乌20g、虎杖25g、五味子20g、铁马鞭30g、赤芍20g、灵芝15g、木香25g。药物组合物经清洗、室温下干燥后加入透明质酸钠30g、乳糖150g、微晶纤维素30g、聚维酮3g、硬脂酸镁4g，分别取上述药物组合物及辅料，分别粉碎，过150目筛，将上述各重量份的组分加入乙醇(体积分数50%)20ml，以聚维酮的乙醇溶液(聚维酮的质量分数为50%)为黏合剂制成软材，制粒、干燥、整粒，最后加入硬脂酸镁，混合均匀，压片、即得片剂1.5g/片。

实施例11药物组合物胶囊剂

肿节风45g、何首乌30g、虎杖15g、五味子20g、铁马鞭30g、赤芍20g、灵芝30g、木香20g。上述重量份的药物组合物先经清洗和低温干燥处理后再加入透明质酸钠50g、预胶化淀粉450g，分别取上述处方量原料药物及辅料，粉碎，过150目筛，混匀，均匀喷入蒸馏水45ml，制软材，制粒、干燥、整粒，装入胶囊即得，每颗胶囊2g。

以下通过药物药效性试验和毒性实验以表明本发明药物组合物在用于治疗痛风性关节炎疾病的药效以及药物的安全性。其中实验1~6中本发明药物组合物的组分重量份比为肿节风30份、何首乌15份、虎杖25份、五味子16份、铁马鞭20份、赤芍10份、灵芝18份、木香20份。

药效学试验

以下实验主要是研究对尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾联合尿酸导致痛风性高尿酸血症的影响。

实验方法：以尿酸500mg/kg灌胃，联合腹腔注射尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾200mg/kg，连续7天致大鼠高尿酸血症模性，然后给药前、给药后1天、4天、7天后采血，观察药物对大鼠血尿酸浓度的影响。

材料

1.1.1动物模拟

Wistar大鼠，雄性，体重180-220g，共计80只，由中国食品药品检定研究院提供，合格证号SCXK(京)2009-0017。

1.1.2药品与试剂

受试药物：本发明的药物组合物，棕褐色粉末。

阳性对照药：1、秋水仙碱片，白色片剂，由西双版纳版纳药业有限责任公司生产，国药准字H53021369，每片0.5mg，人日用量为3mg，批号为140709；2、痛风定胶囊，暗红色胶囊，由四川升和药业股份有限公司，国药准字Z10970025，每粒0.4g，人日用量为4.8g，批号为140709。以上药物用前均以无菌蒸馏水配成所需浓度（按体表系数折算），灌胃给药。

试剂：尿酸(Uricacid)，白色粉末，分子式C₅H₄N₄O₃，分子量168.11，CASNO.:69-93-2，北京博奥拓达科技有限公司生产；氧嗪酸钾(PotassiumOxonate)，白色粉末，分子式C₄H₂KN₃O₄，分子量195.18，CASNO.:2207-75-2，东京化成工业株式会社（TCI）生产，Lot.C5S2D-TI。尿酸用前以无菌蒸馏水配成所需浓度，灌胃给药；氧嗪酸钾用前以无菌注射用水配成所需浓度，腹腔注射给药。尿酸测定试剂盒(URO-PAP法)，四川迈克生物科技股份有限公司，批号-0614061。

仪器：全自动生化仪（HITACHI7020R），日本日立有限责任公司；

1.2实验方法

1.2.1分组及给药

将实验大鼠按体重随机分为八组，即空白组、模型组、秋水仙碱组(0.3mg/kg)、痛风定组(480mg/kg)、本发明药物组合物高剂量组(504mg/kg)、中剂量组(252mg/kg)、低剂量组(126mg/kg)及低剂量1/2组(63mg/kg)，每组10只大鼠，药物均用无菌蒸馏水配制，每日给药一次，给药容积为5ml/kg，其中空白组和模型组灌服等量生理盐水。

1.2.2造模方法

将购买的大鼠在动物房观察饲养两日后开始造模，除空白对照组外，各组以尿酸按500mg/kg灌胃，联合腹腔注射的尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾200mg/kg，空白组灌胃同样体积的生理盐水和腹腔注射同样体积的无菌注射用水，连续造模7天后，乙醚麻醉，眼眶取血，对动物血尿酸进行检测。

1.2.3大鼠血尿酸的测定

将取到的血样(约400μL)4℃静置4h，4000r/min离心10min，取上层血清，按照试剂盒操作步骤，在日立全自动血生化仪上进行测定，每个样品重复测3次，取平均值。

结果与讨论

本发明药物组合物对高尿酸血症模性大鼠血尿酸的影响

表1本发明药物组合物对高尿酸血症模性大鼠血尿酸的影响(x±s)

注：与空白组相比，^△P＜0.05,^△△P＜0.01，模性组相比，^*p＜0.05,^*p＜0.01；与秋水仙组比，^▲P＜0.05，^▲▲P＜0.01；与痛风定组相比，^☆p＜0.05，^☆☆p＜0.01。

以上结果显示，我们利用尿酸联合尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾制作的大鼠高尿酸血症模性成功，模性大鼠的血尿酸显著升高，且可持续4天以上。本发明药物组合物组高、中、低3个剂量及阳性药组与模性组相比在治疗4天时均可降低模性动物的血尿酸浓度。

(1)本发明药物组合物高、中剂量组可显著降低高尿酸血症大鼠模型的血尿酸含量(P＜0.01，P＜0.05)，且效果优于阳性对照药秋水仙碱和痛风定胶囊。说明神阙散对痛风型高尿酸血症具有明确治疗作用。

(2)本发明药物组合物高、中剂量组可显著降低高尿酸血症大鼠模型的肌酐和尿素氮含量(P＜0.01，P＜0.05)，且效果优于阳性对照药秋水仙碱和痛风定胶囊，说明本发明药物组合物对肾脏具有保护作用。

本发明药物组合物药理性试验

2.1材料及仪器

健康雄性wistar大鼠70只，体重190~220g，随机分为7组。

秋水仙碱、痛风定胶囊、本发明药物组合物、氧嗪酸钾盐、酵母膏及腺嘌呤的来源和规格和上述实验1一致。肌酐检测试剂盒(购自宁波瑞源生物科技有限公司)、尿酸试剂盒(购自宁波瑞源生物科技有限公司）、尿素氮检测试剂盒(购自宁波瑞源生物科技有限公司)、电子称(常州市衡正电子仪器有限公司)、全自动生化分析仪(东芝、型号：TAB-40F2)、离心机(北京白洋医疗器械有限公司)

2.2实验方法

2.2.1分组

70只大鼠随机分为7组，溶媒对照组、西药对照组、中药对照组、本发明药物组合物高剂量组、本发明药物组合物中剂量组、本发明药物组合物低剂量组、本发明药物组合物低剂量1/2组

实验前饲养一周以适应环境，每组动物自由饮食一周进行给药，给药前称量大鼠体重，正常组实验过程中正常饲养，其余各组分别给予所制备的不同的造模药物。自第7天起，每日灌胃给药，共一周。

对照组：给予蒸馏水。

西药对照组：秋水仙碱按体重给予0.15mg/kg，酵母膏按体重18g/kg，腺嘌呤按体重100mg/kg，每天给药一次。给药7天后，取材前一小时给予氧嗪酸钾盐300mg/kg。

中药对照组：痛风定胶囊按体重给予624mg/kg，酵母膏按体重18g/kg，腺嘌呤按体重100mg/kg，取材前一小时给予氧嗪酸钾盐300mg/kg。

本发明药物组合物高剂量组：本发明药物组合物按体重给予504mg/kg，酵母膏按体重18g/kg，腺嘌呤按体重100mg/kg，取材前一小时给予氧嗪酸钾盐300mg/kg。

本发明药物组合物中剂量组：本发明药物组合物按体重给予252mg/kg，酵母膏按体重18g/kg，腺嘌呤按体重100mg/kg，取材前一小时给予氧嗪酸钾盐300mg/kg。

本发明药物组合物低剂量组：本发明药物组合物按体重给予126mg/kg，酵母膏按体重18g/kg，腺嘌呤按体重100mg/kg，取材前一小时给予氧嗪酸钾盐300mg/kg。

本发明药物组合物低剂量1/2组：本发明药物组合物按体重给予63mg/kg，酵母膏按体重18g/kg，腺嘌呤按体重100mg/kg，取材前一小时给予氧嗪酸钾盐300mg/kg。

表2给药前各分组大鼠体重（单位：g）

2.3实验结果与讨论

实验前，实验后第七日，内眦静脉取血，离心半径23cm，2500r/min离心5min，每份血样取200ul上清液测定血清尿酸、肌酐、尿素氮。不同组给药前后大鼠尿酸、肌酐以及尿素氮的含量值具体如下表3~9。

表3A组溶媒对照组(蒸馏水)给予大鼠前后各参数的对比

表4西药对照组秋水仙碱给药前后大鼠各参数的对比

表5C组中药对照组(风定胶囊)给药前后大鼠各参数的对比

表6发明药物组合物高剂量组给药前后大鼠各参数的对比

表7本发明药物组合物中剂量组给药前后大鼠各参数的对比

表8本发明药物组合物低剂量药物给药前后大鼠各参数的对比

表9本发明药物组合物低剂量1/2组给药前后大鼠各参数的对比

由以上数据可以清楚地得知：采用本发明的药物组合物的中剂量的药效明显高于风定胶囊以及秋水仙碱组的实验。

大鼠急性痛风性关节炎的药效实验

大鼠急性痛风性关节炎模性的建立：麻醉大鼠后，选右踝关节外侧后方为穿刺点，针口斜面朝前上方与胫骨成45°夹角刺入踝关节腔，以4.5号针头向关节腔一次性注入50μl浓度为20mg/ml尿酸钠(MSU)溶液，以关节囊对侧膨起为注入标准，判断模型建立成功。

实验条件：

预试实验，每组十只小鼠，雌雄各半，药物按最大浓度配置(即小鼠灌胃针能吸起来的浓度）。给药体积按0.1ml/10g、0.2ml/10g、0.3ml/10g、每组一只、0.4ml/10g每组两只。给药前禁食不禁水十二小时。给药后密切观察小鼠的反应，一般观察4小时，之后每天一次，连续十四天。

结果：低剂量死亡1只，高剂量死亡2只。

健康雄性wistar大鼠60只，体重190~220g，随机分为6组。秋水仙碱、痛风定胶囊、本发明药物组合物、氧嗪酸钾盐(购自sigma)、酵母膏腺嘌呤、电子称、离心机、尿酸(sigma)、足趾容积测量仪(济南益延科技发展有限公司，型号：yls-7b)；高速低温离心机(GL20)，长沙英泰仪器有限公司，编号：0033022。

实验方法

3.2.1分组

(1)溶媒对照组(蒸馏水)；(2)西药对照组：秋水仙碱组；(3)中药对照组：痛风定胶囊组；(4)本发明药物组合物高剂量组；(5)本发明药物组合物中剂量组；(6)本发明药物组合物低剂量组

3.2.2模性建立

(1)尿酸盐结晶(MSU)制备方法：无菌条件下将5ml1mol/L的NaOH和800mg尿酸钠加入155ml去热原的灭菌注射用水中并煮沸，使尿酸钠完全溶解，自然降温并搅拌，滴入1mol/L的HCl至pH值7.0，溶液呈乳白色后反复离心(3000r/min)2min，最后于4℃冷却1h后离心，收集晶体于无菌EP管，4℃保存。烤干上清、烧杯、搅棒和离心管，称重，将实验后减去实验前器械重量加上生成氯化钠的量即为所得晶体的重量。再将MSU晶体溶于磷酸盐缓冲液(PBS)中配成所需浓度。此方法制备的MSU晶体可均匀混悬于PBS中。

(2)大鼠急性痛风性关节炎模性的建立：麻醉大鼠后，选右踝关节外侧后方为穿刺点，针口斜面朝前上方与胫骨成45°夹角刺入踝关节腔，以4.5号针头向关节腔一次性注入50μl浓度为20mg/mlMSU溶液。

表10给药前各分组大鼠体重(单位：g)

3.3实验结果与讨论

观察指标及评价方法

用药组大鼠于诱发模性前5d开始灌胃给药,1次/d，连续7d。通过比较2、4、6、8、24和48h关节炎症、肿胀、功能障碍指数和病理变化，观察指标包括关节炎症指数、肿胀指数、关节功能障碍指数和组织病理变化。

(1)炎症指数分级：注射后4h为1级，6h为2级;

(2)功能障碍分级：注射后4h为1级，6h为2级;

(3)肿胀指数：通过足趾容积测量仪测量大鼠关节肿胀指数

表11给药后各组大鼠关节肿胀指数(1h)

表12各组药物给予后大鼠关节肿胀指数(2h)

表13各组药物给予后大鼠关节肿胀指数(4h)

表14各组药物给予后大鼠关节肿胀指数(6h)

表15各组药物给予后大鼠关节肿胀指数(8h)

表16各组药物给予后大鼠关节肿胀指数(24h)

表17各组药物给予后大鼠关节肿胀指数(48h)

由上述表格11~17的数据可得出：⑴本发明药物组合物高剂量组在用药后两小时即开始对痛风性关节炎产生药理作用，对模型大鼠关节炎肿胀指数具有显著降低作用，在用药后4h至8h治疗效果更加显著（P<0.05），其治疗效果与痛风定和秋水仙碱相当。由于12h后模型组关节炎开始出现自愈，故观察至48h后，各组之间差异不明显。

(2)本发明药物组合物低中高剂量组均能改善模型大鼠痛风性关节炎的病理结果，且低中高剂量组呈现明显的量效关系。中高剂量组滑膜及周围组织炎症明显改善，仅在滑膜区散在急、慢性炎细胞，关节腔内渗出物和炎细胞消失。中剂量组与痛风定和秋水仙碱疗效相当，高剂量组改善作用优于痛风定和秋水仙碱。

、本发明药物组合物大鼠灌胃急性毒性试验

我们设计以下实验以观察大鼠单次灌胃本发明药物组合物后所产生的急性毒性反应及死亡的情况，为其反复给药毒性试验的剂量设计，本实验采用最大给予药量法，以最大混旋浓度250mg/ml、最大灌胃体积20ml/kg给药，剂量为5000g/kg。设计给药组和空白对照组，每组10只动物，雌雄各半，SD大鼠SPF级，20只大鼠、雌雄各半，动物年龄6~8周，动物体重150~250g/只。动物实验前自由摄食和水。单次灌胃给药后连续观察14天，临床观察指标包括一般生理指标观察(每天)、体重(每周)、尸检(死亡和D₁₅)。

材料和方法

4.1.1供试品及对照组品的配制

供试品的配制；本发明的药物组合物的散剂分在在纯净水中，搅拌均匀，现用现配，室温避光保存；对照品：纯净水

4.2实验方法

实验条件

本发明的药物组合物，250mg/ml为灌胃给药最大溶解浓度

实验分组

本实验采用最大给药量观察大鼠灌胃本发明的急性毒性，剂量为5000mg/kg。

设计空白对照和本发明药物的剂量和有效剂量倍数方法如下表18的数据所示。

表18大鼠灌胃本发明药物组合物急性毒性实验

给药途径：灌胃给药；给药体积：20ml/kg，给药频率与时间：给药1次；给药期限：1天；给药操作：按照SOPT001《大、小鼠口灌胃给药》的要求操作

观察指标与方法

临床症状：给药当天，尤其是给药后4小时内密切观察动物外观、饮食、对刺激反应、分泌物、排泄物等，然后每天上午各观察1次，连续观察14天。

死亡情况：记录动物死亡时间、濒死反应、出现的症状以及症状的起始时间、严重程度以及症状的起始时间、严重程度、持续时间等。

体重变化：在给药第1天、第8天、第15天各称重一次，记录体重变化。

病理学检查方法：所有的试验动物均进行解剖，在不同性别组别中，对体重“t”检验，进行组别比较。

本实验数据处理采用本中心与京师利源公司共同编制的计算机应用软件EasyGLP，对试验中的动物进行随机分组和给药量计算，进行笼旁观察数据的采集及统计处理。

经上述仔细观察，全体动物的外观、行为、饮食、对刺激反应、分泌物、排泄物未见异常。试验期间全部动物存活，没有发生死亡情况。同时试验期间全部动物没有出现失重现象，与试验开始的体重相比，在给药后第8天、第15天全体动物体重均增长，在给药组雌性和雄性动物体重增加幅度比对照组小。给药组雌性动物第8天体重与同期对照组相比，增长显著减少，其余时间点比较未见显著差异。与此同时，第14天对所有动物进行病理解剖检查。20只动物未见显著差异，剖检胸腔、腹腔、盆腔、颅腔各脏器未见明显异常。大鼠灌胃本发明的药物组合物5000mg/kg14天后，动物剖检未见明显肉眼可见的病例改变。其中具体试验条件下大鼠体重的变化如下表19的数据所示。

表19大鼠灌胃本发明药物组合物急性毒性试验动物体重统计结果

注：表内数据为x±s，与同期性别对照组相比，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01。

本发明药物组合物灌胃给大鼠后大鼠体重变化如表20的数据所示。

表20大鼠灌胃本发明药物组合物急性毒性动物体重增长率(%)

由表19和表20的试验结果表明试验期间所有动物临床观察未见异常，全部存活。给药后15天尸检未见异常。试验期间所有动物没有失重，但第8天和第15天给药组动物与空白对照组相比体重增长减少，表明此现象与给予药物有关。

结论：在本实验条件下，大鼠灌胃本发明药物组合物5000mg/kg未见明显毒性反应，LD₅₀≥5000mg/kg。

、Ames波动试验

实验数据和模型来自于军事医学科学院毒物药物研究所和国家北京药物安全评价研究中心。

通过Ames波动试验检测本发明的药物组合物代谢成分大鼠血清对测试菌株TA100的致突变性。

材料与方法

5.1.1供试品

本申请的药物组合物代谢成分大鼠血清的制备

雄性SD大鼠5只，体重在200~220g，按5000mg/kg灌胃给予本发明的药物组合物，每天1次，连续5天。未给药后1h后，二氧化碳麻醉大鼠，腹主静脉取血。4℃冰箱静止4h，4℃、3000rpm离心10min。无菌条件下吸出血清，-80℃冰箱保存，备用。

阳性对照品

叠氮化钠(Sodiumazide,SA)：直接诱变剂，为非活化条件下的阳性诱变剂，为非活化条件下的阳性诱变剂。来源：上海化学试剂采购供应站；批号：791030；纯度≥98%；理化性质：白色粉末，用无菌水自制去离子水配制；保存条件：2~8℃避光保存。

环磷酰胺(Cyclophosphamide,CP)：间接诱变剂，为活化条件下的阳性诱变剂。来源：Sigma、含量100%；批号：120M1253V；理化性质：白色粉剂；保存条件：避光、密闭，2~8℃保存。

阳性对照品溶媒信息：自制去离子水，纯水仪型号Milli-QBiocel；厂商：Millipore；阳性对照品的配制：叠氮化钠和环磷酰胺用无菌自制去离子水配制，在试验体系中的终浓度分别为0.2μg/ml和100.0μg/ml。

试验系统

菌株：鼠伤寒沙门氏菌TA100；菌株来源及遗传特性：菌株由美国加州大学Ames.BN教授惠赠，具有组氨酸合成缺失突变外和细胞壁多糖缺失和含有抗性R因子，前者可增加受试物渗透进入细胞的能力，后者使细菌产生氨基苄青霉素抗性并增加检测的敏感性。AT100菌株还具有切除修复系统缺失突变(紫外线敏感)。上述遗传特性鉴定合格试验菌株方可用于试验。菌株保存：液氮或-75℃冰箱冷冻保存。

菌株增菌培养：将细菌接种在肉汤培养基中，在37℃、空气浴震荡(100~120rpm)条件下连续培养约10h。

S9活化系统(SOPG032)：每mlS9混合液组成如下：0.1mlS9；8μmolMgCl₂；33μmolKCl；5μmolG-6-P；4μmolNADP；0.5ml磷酸缓冲液(pH7.4)。

S9混合液临用前配置，除S9外的其他成分配好后，过滤除菌，冰水浴中加入S9，立即混匀，整个试验过程中S9混合液保持在冰水浴中。

以Wistar大鼠为试验动物，本发明的药物组合物的最低有效剂量为216mg/kg。

临床拟用方案：口服2.4g/d，共7天，1个疗程。

试验过程及方法

5.2毒性实验

拟设5个含本发明的药物组合物成分的大鼠血清受试验浓度组，在9.6、9.8、9.9、9.95、9.975ml选择指示性生长培养基中分别加入0.4、0.2、0.1、0.05、0.025ml含本发明药物组合物成分的大鼠血清，混匀后按每孔1ml加入24孔培养板，每个测试浓度设3孔，在培养板盖上表明对应孔的组别，放入37℃培养箱中培养。培养板分别于24h和48h观察结果，通过培养基中指示剂颜色变化来判断细菌生长情况；如果细菌生长，指示剂由紫变黄，如果细菌受到抑制，指示剂仍为紫色，同时通过肉眼或显微镜观察有无污染或杀菌、受试物有无析出和沉淀现象。

菌液稀释培养

取9ml0.1M的PBS溶液(pH7.4)，加入培养过夜的细菌液1ml，用棉塞封口，锡箔纸包裹避光，在37℃恒温震荡(100~120rpm)条件下继续培养3h。

非活化条件下的Ames波动试验

取选择性生长培养基19.1、19.5、19.7、19.8和19.85ml加入无菌器皿中，向其中加入0.1ml稀释菌液，再分别加入0.8、0.4、0.2、0.1和0.05ml含本发明药物组分代谢成分大鼠血清，混匀后用多通道移液器加入96孔板，每孔0.2ml，每个受试浓度一块板，板盖上标记受试物的名称或代号、浓度、活化条件、操作日期，放入37℃培养箱中培养72h。试验同时设溶剂对照及阳性诱变剂对照(叠氮钠0.2μg/ml)。

活化条件下的Ames波动试验

取选择性生长培养基4.18、4.58、4.78、4.88和4.93ml，加入0.02ml稀释菌液，再分别加入0.8、0.4、0.2、0.1和0.05ml含本申请药物组分代谢成分血清，在平皿中混匀后加入96孔板，每孔0.05ml，每浓度一块板，在板盖上标记受试物名称或代号、浓度、活化条件、操作日期，置37℃培养箱中培养，17h后向板中加入选择培养基，每孔150μl，放入培养箱继续培养至药物作用总时间72h。试验同时设溶剂对照及阳性诱变剂对照(环磷酰胺100μg/ml)。

结果与讨论

向培养72h后的96孔板中加入600μg/ml的溴麝香草酚蓝，每孔20μl，计数阳性孔数，黄色孔为阳性，蓝色为阴性，介于蓝黄之间的记为阴性。

非活化条件下及活化条件下本发明药物组合物的测试结果如由表21所示。

表21本发明药物组合物对TA100菌株Ames波动试验结果

﹡以血清在培养体系中的比例计算。

计算公式：X²=2×96×(t-c)2/[(t+c)×(2×96-t-c)]

t:处理组阳性孔数

c：溶剂对照组阳性孔数

上述数据用卡方检验对各组的阳性孔数进行统计，分析各受试浓度组与阴性对照组间的差异性。公式为：。公式中a为溶剂对照版阴性孔数，b为溶剂对照版阳性孔数，c为试验板阴性孔数，d为试验板阳性孔数，n为上述四项之和。X²＞3.84，p＜0.05，差异显著；X²＞6.63，p＜0.01，差异非常显著。

由上述数据显示可知：受试物诱发的阳性孔数与受试浓度效应关系过某浓度组与阴性对照组相比有显著性差异，可判为结果阳性。阳性对照组与阴性对照组间应有显著差异。非活化条件下及活化条件下本发明药物组合物在所测试浓度下均未见沉淀析出，各浓度下的阳性孔数与溶剂对照组比较均无显著性差异。阳性对照叠氮钠和环磷酰胺在各自试验条件下的阳性孔数与溶剂对照比较有显著差异，表明试验系统可靠。

毒性试验结果显示各受试浓度下菌株均正常生长，显微镜下观察未见污染，供试品未见沉淀析出，表明本发明的药物组合物在测试范围内对测试菌株无明显毒性。通过实验非活化条件下含本发明的药物组合物代谢大鼠血清在各浓度下的阳性孔数与溶剂对照组比较均无显著性差异。在本实验条件下本发明的药物组合物的Ames波动试验为阴性。

、本发明药物组合物生殖毒性实验

6.1本发明药物组合物在大鼠中脑微团试验

本发明的药物组合物是中国少数民族传统医学基础上开发的一种药物组合物，主要用于治疗痛风性关节炎。本实验目的是观察含本发明药物组分代谢成分的血清对大鼠中脑微团细胞分化和增殖的影响，评价本发明的药物组合物在体外致畸性。

本实验采用固定给药剂量法，以不同浓度含本发明药物组合物代谢成分的大鼠血清培养大鼠中脑微团细胞，建立体外试验系统，培养5天后，观察中脑细胞分化和增殖情况，以判断本发明药物组分是否具有体外致畸性。

材料和方法

供试验品信息：本发明药物组分经研磨成粉末，粒径为500目、米黄色无定性，采用纯净水分散配置。

对照品的配制：纯净水

6.2实验具体操作

SD系大鼠，SPF级，采用10只、雌雄各半；6~8周龄；200~280g/只。

含本发明药物药物组分代谢成分大鼠血清制备

SD大鼠5只，雄性、体重200~220g/只，按5000mg/kg灌胃给予本发明的药物组分，每天1次，连续5天。最后一次给药1h后，二氧化碳麻醉大鼠，腹主静脉取血。4℃冰箱静止4小时，4℃离心，3000转/分，10分钟。无菌条件下吸出血清，-80℃冰箱保存、备用。

孕鼠模性建立

中脑细胞微团培养

材料

受试物：受试物直接加入反应体系中的终浓度为10%(v/v)；阳性对照组；环磷酰胺(Sigma公司)

试剂：1%胰酶(Gibco公司)，用D-hanks液配；马血清(Gibco公司)；胎牛血清(三利公司)；F12培养基(Gibco公司)。每升培养基中含584.6mg、pH7.2谷氨酰胺，临用前加10%胎牛血清；中性红染液和苏木精染液按常规方法配制。

动物当妊娠满13d脱颈椎处死孕鼠

6.2.1实验方法

胚胎细胞培养物的制备：处死后的孕鼠以75%乙醇浸湿消毒皮肤，在无菌条件下取出全部胚胎，放入体积为1︰1含马血清的无钙镁离子的D-Hanks液中清洗一次，切下中脑组织，眼科箭剪碎，F12培养液清洗2次，加1%胰酶溶液适量，消化20min左右，弃胰酶，加含10%牛胎血清的F12培养基洗涤3次。经充分吹打形成细胞悬浮液，用10μm尼龙滤膜过滤，滤液离心3min，用含牛胎血清的F12培养制成密度为5×10⁶个细胞悬液。

细胞增殖实验：于96孔细胞培养板中加上述细胞悬液10μl/孔，培养2h后，分别加含10%、5%、2.5%、1.25%、.625%、0.3125%、0.15625%、0.07825%和0.039%受试物大鼠血清的DMSO完全培养基、10%胎牛血清DMSO的完全培养基、10%大鼠血清DMSO的完全培养基和10μg/ml环磷酰胺200μl。继续培养5d后、弃培养基，4.5%戊二醛固定20min，pH7.4PBS洗涤3次，加200μl0.1%中性红染液，染色90min后去染液，PBS洗3次，后用200μl含0.5%醋酸的50%乙醇抽提至少2h。在550nm波长下用酶标仪(ThermolabsystemsMultiskanMCC/340,Flowlaboratories公司)测定其光密度值。绘制剂量效应曲线，作图确定半数细胞增殖抑制浓度(IV₅₀)。

细胞分化实验

于24孔细胞培养板中滴加10μl细胞悬浮液，每孔滴加1滴，培养2h后，形成细胞小岛，每孔分别加10%、5%、2.5%、1.25%、0.625%、0.3125%、0.15625%、0.07825%和0.039%受试物大鼠血清的DMSO完全培养基、10%胎牛血清DMSO的完全培养基，10%大鼠血清DMSO的完全培养基和10μg/ml环磷酰胺培养基2ml，继续培养5d后，弃培养基，加1ml10%甲醛固定20min，自来水洗去甲醛，滴加Delafield苏木精染液200μl染色10~30min，自来水洗去染液，风干。在倒置显微镜下(Olympus公司)计数着色后的集落数，根据不同受试物浓度和微团中全部集落数，绘制剂量效应曲线，作图确定半数细胞分化抑制浓度(ID₅₀)。

剂量设计

根据含本发明药物组合物代谢产物大鼠血清的含量不同，实验设定以下剂量组：10%胎牛血清对照组(Ⅰ)、10%正常大鼠血清对照组(Ⅱ)、10ug/ml环磷酰胺对照组(Ⅲ)、10%含本发明代谢产物大鼠血清组(Ⅳ)、5%含本发明代谢产物大鼠血清+5%胎牛血清组(Ⅴ)、2.5%含本发明药物组合物代谢大鼠血清+7.5%胎牛血清组(Ⅵ)、1.25%含本发明代谢产物大鼠血清+8.75%胎牛血清组(Ⅶ)、0.625%含本发明药物组合物代谢产物大鼠血清+9.375%胎牛血清组(Ⅷ)、0.3125%含本发明药物组合物代谢产物大鼠血清+9.687%胎牛血清组(Ⅸ)、0.15625含本发明药物组合物代谢产物大鼠血清+9.84375%胎牛血清组(Ⅹ)、0.15625%含本发明药物组合物代谢产物大鼠血清+9.92175%胎牛血清组(Ⅺ)、0.039125%含本发明药物组合物代谢产物大鼠血清+9.960875%胎牛血清组(Ⅻ)。其中Ⅰ、Ⅱ组为空白对照组，Ⅲ组为阳性对照组，Ⅳ至Ⅻ组为含本发明药物组合物代谢产物大鼠血清倍比稀释组，从10%到0.039125%。

评价方法

采用Origin5.0软件拟合，求半数增殖抑制浓度(50%inhibitionconcentrationofviability,IV₅₀)半数分化抑制浓度(50%inhibitionconcentrationofdifferentiation,ID₅₀)，计算准IV₅₀与ID₅₀的比值R，R＞2.0，有潜在致畸性，R＜2.0没有致畸性。

实验结果与讨论

试验期间动物饲养情况正常，本实验未进行供试品分析。

细胞增殖试验

中脑微团细胞分别在含有正常大鼠血清、普痛胎牛血清、10μg/ml环磷酰胺和不同浓度含本发明药物组合物代谢产物的大鼠血清培养体系进行培养，发现含本发明药物组合物代谢产物大鼠血清对大鼠中脑微团细胞增殖没有明显影响。

表22含本发明药物组合物代谢产物大鼠血清对大鼠中脑细胞增殖的影响

细胞分化实验

对照组和染毒组原单个分散的细胞形成明显的细胞集落，集落间有丰富的神经纤维，并连接成网状，各组间没有剂量-效应关系，显示含本发明药物组合物的血清没有抑制中脑细胞分化，没有阻止神经形成和集落形成。

表23含本发明药物组合物代谢产物大鼠血清对大鼠中脑细胞分化的影响

由上述的实验数据可知：在本实验条件下，含有本发明药物组合物代谢成分的大鼠血清未见抑制大鼠中脑微团细胞的增殖和分化，本发明的药物组合物不具有体外致畸作用，同时无剂量-效应关系。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种用于痛风性关节炎的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物的组分重量份比：肿节风10~50份、何首乌10~30份、虎杖15~40份、五味子8~25份、铁马鞭10~40份、赤芍5~25份、灵芝10~35份、木香10~30份。

2.根据权利要求1所述的一种用于痛风性关节炎的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物的组分重量份比为：肿节风15~40份、何首乌15~25份、虎杖17~35份、五味子10~20份、铁马鞭15~35份、赤芍10~20份、灵芝15~30份、木香15~25份。

3.根据权利要求1所述的一种用于痛风性关节炎的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物的组分重量份比为：肿节风20~35份、何首乌17~20份、虎杖20~30份、五味子12~18份、铁马鞭20~30份、赤芍12~18份、灵芝20~25份、木香17~20份。

4.根据权利要求1所述的一种用于痛风性关节炎的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物的组分重量份比为：肿节风30份、何首乌15份、虎杖25份、五味子16份、铁马鞭20份、赤芍10份、灵芝18份、木香20份。

5.根据权利要求1~4任一项所述的一种用于痛风性关节炎的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物的剂型为汤剂、片剂、水针剂、胶囊、颗粒剂、粉剂、丸剂、喷雾剂、乳化液、霜剂或药膏。

6.根据权利要求5所述的一种用于痛风性关节炎的药物组合物，其特征在于：药物组合物的不同剂型中还加入药学上可接受的辅料。

7.根据权利要求6所述的一种用于痛风性关节炎的药物组合物，其特征在于：在不同剂型中加入药学可接受的辅料为：稀释剂选自山梨醇、甘露醇、淀粉、乳糖、粉状或微晶状纤维素、二钙磷酸盐、三钙磷酸盐或糖；填充剂选自羧甲基纤维素钠、PVP-K30、羟丙基纤维素、淀粉浆、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素或胶化淀粉；崩解剂选自干淀粉、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠或低取代羟丙基纤维素；润滑剂选自硬脂酸镁、滑石粉、十二烷基硫酸钠或微粉硅胶或结合剂、流动剂、释放控制剂、膜衣剂、塑化剂、着色剂、调味剂、黏度增强剂、保存剂或抗氧化剂。

8.权利要求5所述的一种用于痛风性关节炎的药物组合物汤剂的制备方法，其特征在于：将药物组合物的组分经清洗、干燥后，投入药物总重量的3~10倍蒸馏水中煎煮1~3次，每次煎煮时间为0.5~3h，收取每次煎煮后的药汁、经灭菌处理，袋装或瓶装分装，低温保存即可。

9.权利要求5所述的一种用于痛风性关节炎的药物组合物片剂的制备方法，其特征在于：将药物组合物经清洗、低温或室温下干燥后加入透明质酸钠、乳糖、微晶纤维素、聚维酮、硬脂酸镁，分别将上述药物组合物及辅料，分别粉碎；过150目筛，将透明质酸、药物组合物，乳糖、微晶纤维素混合均匀，以聚维酮的乙醇溶液为黏合剂制成软材，制粒、干燥、整粒，加入硬脂酸镁，混合均匀，压片、即可。

10.权利要求5所述的一种用于痛风性关节炎的药物组合物胶囊剂的制备方法，其特征在于：将药物组合物经清洗、低温干燥后加入透明质酸钠、预胶化淀粉，分别取上述处方量原料药物及辅料，粉碎，过150目筛，混匀，均匀喷入蒸馏水，制软材，制粒、干燥、整粒，装入胶囊即得胶囊剂。