CN105125980A - 促育生精颗粒 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种新型的促育生精颗粒，其原料药包括淫羊藿、仙茅、杜仲、山茱萸、黄精、赤芍、菟丝子、刺五加、肉苁蓉、桑螵蛸、楮实子、山药、补骨脂、寄生黄、南五味子、首乌藤、土茯苓、太子参、苦参和女贞子。其疗效可靠、安全性高，比单纯西医治疗在增加精子数量和改善精子质量方面显示出独特的优势，且副作用小、安全、有效，并且比申请人前期研发的成果产品“早期研制的促育生精颗粒”效果更好。

Description

促育生精颗粒

技术领域

本发明涉及中医药技术领域，尤其涉及一种新型的促育生精颗粒。

背景技术

生育对人类物种延续起着核心的作用，是民族、国家、家庭稳定的重要基石。自工业化以来，环境污染加剧，人类长期暴露于物理化学因素下，生育能力受到威胁。国际卫生组织统计，过去50年来，大约有15％～20％的夫妻不能生育，男性生育能力缺欠占到50％以上。估计我国不育症的发病率在10％左右，并有增加的趋势。

不育症的病因非常复杂，但最终的病因必然是血虚血瘀、肾精亏虚，进而影响精液及精子的质量，少精、弱精是导致不孕症的一个关键性因素。现代医学诊断手段日趋进步，目前仍有高达40％～75％的男性不育患者找不到原因。精液分析不正常而找不到任何病因，被称为少精、弱精症就属于此范畴。

少精、弱精症病因复杂，西医一般认为，其主要是由遗传性疾病、先天性发育不良、内分泌因素、输精管阻塞、精脉曲张、生殖道感染、免疫因素、代谢营养因素、药物因素、饮食、环境因素、不良生活习惯等导致，西医没有明确的针对性强的方法和药物治疗，目前主要是针对病因采用各种激素治疗，虽有一定疗效，但存在不同程度的副作用，且临床疗效欠佳，患者往往难以接受。

中医药在益肾补精、治疗男性不育方面积累了丰富的经验，为中华民族的繁衍做出了巨大贡献。不育症的中医药治疗在具有治疗费用低廉、副作用小、保持自然受孕过程等特点的同时，对患者精液质量的改善也能提高辅助生殖的成功率。

中医学认为肾藏精、主生殖，将生殖功能归于“肾”。《黄帝内经·素问·上古天真论》云：“丈夫八岁肾气实，齿更发长；二八肾气盛，天癸至，精气溢泻，阴阳和，故能有子。”不但提出了肾主生殖，同时也提出了肾气的盛衰关系着人的生殖能力，具体体现在肾气-天癸-精室之间的关系，在这一关系中，肾气起决定作用，只有在肾气充盛的条件下，天癸才能正常分泌，精室才能盈满，精气才会溢泻，男女和合，才能有子。肾主藏精，为一身阴阳之根本，男性生殖器官的发育、成熟、射精及其生殖能力，均有赖于肾脏所藏之精的充盛。精子的成长依赖肾阴的滋养和肾阳的温胸，肾藏精气的盛衰直接影响生殖机能。虽然不育症的病因非常复杂，外感六淫、疫毒、内伤七情、房事劳伤、饮食所伤、跌仆损伤等均可殃及肾精，但最终的病因必然是血虚血瘀、肾精亏虚，进而影响精液及精子的质量。

本发明申请人早期已经研制出“早期研制的促育生精颗粒”，处方组成为：淫羊藿、巴戟天、仙茅、蛇床子、杜仲、枸杞子、山茱萸、沙苑子、黄精、土茯苓、黄柏、知母、牛膝、赤芍。根据补肾精、益肾气的中医理论，以淫羊藿为主药补肾壮阳，祛风除湿，主治肾虚阳痿、精冷不育；辅以巴戟天、仙茅、蛇床子、杜仲温阳益肾、补益肾气；枸杞子、山茱萸、沙苑子、黄精补肾填精、以生精血；在拟定益肾为主的同时根据兼症的不同，从肾精亏虚、湿瘀阻滞精道入手，增加土茯苓、黄柏、知母清下焦湿热、滋阴降火；牛膝、赤芍活血化瘀、扩张血管、增加血流量、改善微循环，遵循精血同源。诸药配伍相得益彰，具有补肾阳、益肾精，养血清热之功。

经过进一步的研究，研究发现肾虚与肝脾三脏失调是造成少精、弱精症的机理的认识，相应制定″固肾、健脾、调肝和调和三脏″的治则，按照药物“归经”选择与“性味”配伍，选用肾经、脾经、肝经中临床功效好、作用强，具有固肾、健脾、调肝的药物配伍，因此，本发明在“早期研制的促育生精颗粒”的基础上进一步调整原料药组分，提供的一种新型的促育生精颗粒，其疗效可靠、安全性高，比单纯西医治疗在增加精子数量和改善精子质量方面显示出独特的优势，且副作用小、安全、有效，并且比申请人前期研发的成果产品“早期研制的促育生精颗粒”效果更好。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种新型的促育生精颗粒，其疗效可靠、安全性高，比单纯西医治疗在增加精子数量和改善精子质量方面显示出独特的优势，且副作用小、安全、有效，并且比申请人前期研发的成果产品“早期研制的促育生精颗粒”效果更好。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种新型的促育生精颗粒，其原料药包括淫羊藿、仙茅、杜仲、山茱萸、黄精、赤芍、菟丝子、刺五加、肉苁蓉、桑螵蛸、楮实子、山药、补骨脂、寄生黄、南五味子、首乌藤、土茯苓、太子参、苦参和女贞子。

其中，所述促育生精颗粒中各原料药的重量分别为淫羊藿30g～40g、仙茅25g～35g、杜仲30g～40g、山茱萸20g～30g、黄精25g～35g、赤芍15g～25g、菟丝子35g～45g、刺五加30g～40g、肉苁蓉25g～35g、桑螵蛸15g～25g、楮实子15g～25g、山药25g～35g、补骨脂25g～35g、寄生黄15g～25g、南五味子10g～20g、首乌藤20g～30g、土茯苓15g～25g、太子参35g～45g、苦参15g～25g和女贞子20g～30g。

其中，所述促育生精颗粒中各原料药的重量分别为淫羊藿33g～37g、仙茅28g～32g、杜仲33g～37g、山茱萸23g～27g、黄精28g～32g、赤芍18g～22g、菟丝子38g～42g、刺五加33g～37g、肉苁蓉28g～32g、桑螵蛸18g～22g、楮实子18g～22g、山药28g～32g、补骨脂28g～32g、寄生黄18g～22g、南五味子13g～17g、首乌藤23g～27g、土茯苓18g～22g、太子参38g～42g、苦参18g～22g和女贞子23g～27g。

其中，所述促育生精颗粒中各原料药的重量分别为淫羊藿35g、仙茅30g、杜仲35g、山茱萸25g、黄精30g、赤芍20g、菟丝子40g、刺五加35g、肉苁蓉30g、桑螵蛸20g、楮实子20g、山药30g、补骨脂30g、寄生黄20g、南五味子15g、首乌藤25g、土茯苓20g、太子参40g、苦参20g和女贞子25g。

本发明还提供了促育生精颗粒的制备方法，其包括：

第一步，按照前述的比例称取淫羊藿、仙茅、杜仲、山茱萸、黄精、赤芍、菟丝子、刺五加、肉苁蓉、补骨脂、寄生黄、首乌藤、太子参、苦参和女贞子，水提，纯化，获得第一原料药粉；

第二步，将余下原料药组分采用乙醇渗漉提取，得到第二原料药粉；

第三步，将第一原料药粉和第二原料药粉混合，加入相对于混合药粉质量0.4～0.6倍的蔗糖粉和0.1～0.3倍的糊精，制成颗粒，于40～50℃干燥，获得颗粒剂。

所述第一步进一步具体为，按照前述的比例称取淫羊藿、仙茅、杜仲、山茱萸、黄精、赤芍、菟丝子、刺五加、肉苁蓉、补骨脂、寄生黄、首乌藤、太子参、苦参和女贞子分别粉碎成粗粉，混合在一起，水提，第一次加水量为该步获得的混合物的质量的5-8倍的量，浸泡2h，煎煮2-3h；第二次加水量为该步获得的混合物的质量的3-5倍的量，浸泡1h，煎煮1-2h，合并煎煮液，滤过，合并提取液，减压回收乙醇并浓缩至药液浓度为0.4g生药/mL，抽滤后，滤液的相对密度约为20℃时1.06；上述滤液经体积为10L的大孔吸附树脂柱，先用10倍树脂柱体积的去离子水或蒸馏水洗脱，再用5倍树脂柱体积的95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，去除溶剂，得到第一原料药粉。

所述第二步进一步具体为，按照前述的比例称取余下原料药组分，分别粉碎成粗粉，混合在一起，加相对于混合物3～5倍的醇浓度为80％～90％的乙醇，浸泡30～50小时，采用渗漉法以每分钟1～3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，随后在真空度0.05～0.07Mpa下减压浓缩至60～70℃时相对密度为1.00～1.06的膏体，喷雾干燥，喷雾干燥机的进风温度170～185℃、出风温度80～90℃，随后粉碎成粉末，制成第二原料药粉。

本发明的有益效果：

本发明提供的新型的促育生精颗粒，其疗效可靠、安全性高，比单纯西医治疗在增加精子数量和改善精子质量方面显示出独特的优势，且副作用小、安全、有效，并且比申请人前期研发的成果产品“早期研制的促育生精颗粒”效果更好。

具体实施方式

本发明提供了一种新型的促育生精颗粒，其原料药包括淫羊藿、仙茅、杜仲、山茱萸、黄精、赤芍、菟丝子、刺五加、肉苁蓉、桑螵蛸、楮实子、山药、补骨脂、寄生黄、南五味子、首乌藤、土茯苓、太子参、苦参和女贞子。

进一步优选，所述促育生精颗粒仅由上述原料药制备而成。

所述促育生精颗粒中各原料药的重量分别为淫羊藿30g～40g、仙茅25g～35g、杜仲30g～40g、山茱萸20g～30g、黄精25g～35g、赤芍15g～25g、菟丝子35g～45g、刺五加30g～40g、肉苁蓉25g～35g、桑螵蛸15g～25g、楮实子15g～25g、山药25g～35g、补骨脂25g～35g、寄生黄15g～25g、南五味子10g～20g、乌藤20g～30g、土茯苓15g～25g、太子参35g～45g、苦参15g～25g和女贞子20g～30g。

进一步优选，所述促育生精颗粒中各原料药的重量分别为淫羊藿33g～37g、仙茅28g～32g、杜仲33g～37g、山茱萸23g～27g、黄精28g～32g、赤芍18g～22g、菟丝子38g～42g、刺五加33g～37g、肉苁蓉28g～32g、桑螵蛸18g～22g、楮实子18g～22g、山药28g～32g、补骨脂28g～32g、寄生黄18g～22g、南五味子13g～17g、首乌藤23g～27g、土茯苓18g～22g、太子参38g～42g、苦参18g～22g和女贞子23g～27g。

最优选，所述促育生精颗粒中各原料药的重量分别为淫羊藿35g、仙茅30g、杜仲35g、山茱萸25g、黄精30g、赤芍20g、菟丝子40g、刺五加35g、肉苁蓉30g、桑螵蛸20g、楮实子20g、山药30g、补骨脂30g、寄生黄20g、南五味子15g、首乌藤25g、土茯苓20g、太子参40g、苦参20g和女贞子25g。

各原料药药理如下：

淫羊藿：拉丁名EpimediiFolium，味辛、甘，性温，入肝、肾经，具有补肾阳，强筋骨，祛风湿的功效，主治肾虚阳痿、遗精早泄、腰膝痿软、肢冷畏寒；寒湿痹痛或四肢拘挛麻木等证，淫羊藿为传统的补肾壮阳中药，富含黄酮类化合物，具有性激素样作用，直接抑制骨吸收和促进骨形成，使机体代谢处于骨形成大于骨吸收的正平衡状态。

仙茅：味辛，性温，归肾、肝经，具有温肾阳，壮筋骨的功效，主治阳萎精冷，小便失禁，崩漏，心腹冷痛，腰脚冷痹，痈疽，瘰疬，阳虚冷泻等证。

杜仲：杜仲：味甘、微辛，性温，入肝、肾经，具有降血压、补肝肾，强筋骨，安胎气的作用，用于肝肾亏虚、证见眩晕、腰膝酸痛、筋骨痿弱；肾气不固、尿频或尿有余沥、阴下湿痒、阳痿、孕妇体弱、胎动不安或腰坠痛；慢性关节疾病、骨结核、痛经、功能失调性子宫出血、慢性盆腔炎等证。

山茱萸：拉丁名cornifructus，味酸、涩，性微温，归肝、肾经，具有补益肝肾，涩精固脱的功效。用于眩晕耳鸣，腰膝酸痛，阳痿遗精，遗尿尿频，崩漏带下，大汗虚脱。内热消渴等证。

黄精：味甘，性平，入肺、脾、肾经，具有滋肾润肺，补脾益气的作用，用于阴虚肺燥，干咳痰少，消渴多饮，脾胃虚弱，脾气虚或脾阴不足，肾虚精亏，腰膝酸软，须发早白等证。

赤芍：味苦、微苦，归肝经，具有泻肝火，清热凉血，祛瘀止痛的功效，主治肝火旺盛之目赤肿痛，头晕目眩，胸胁疼痛，温热病热入血分之身热舌绛，斑疹出血，以及血瘀经闭；火热炽盛迫血妄行之吐血尿血；妇女血热之行经过多；血行阻滞所引起的各种疼痛；血热毒盛之疮疖痈肿等证。

菟丝子：味甘、辛，性平，入肝、肾、脾经，有补肾益精，养肝明目的作用，主要用于肾阳不足之阳痿，遗精早泄，小便频数，头晕耳鸣；肾虚腰疼，妇人带下，胎气不固；肝肾两亏、肝血不足之双目昏花、视物不清；脾肾两虚之便溏腹痛，完谷不化等证。

刺五加：为五加科五加属植物刺五加的根、根茎或茎叶：拉丁名AcanthopanacisSenticosiRadixetRhizomaseuCaulis，味辛、苦、微甘，性温，入脾、肾、心经，具有益气健脾，补肾安神，祛风除湿的功效，用于风寒湿痹、腰膝疼痛、筋骨痿软、行动迟缓、体虚羸弱、跌打损伤、骨折、水肿、脚气、阴下湿痒等证。

肉苁蓉：为列当科肉苁蓉属植物肉苁蓉和管花肉苁蓉的肉质茎，拉丁名herbacistanches，味甘、成，性温，入肾，大肠经，有补肾阳、益精血，润肠通便的作用，用于肾阳虚衰，精血不足之阳痿早泄，不孕不育，腰膝酸痛，耳鸣耳聋，尿频尿数，肾虚肠燥及产后血虚、病后津液不足的便秘等证。

桑螵蛸：拉丁名OothecaMantidis，成甘，平，归肝、肾、膀胱经，具有补肾，固涩，止遗的功效，主治肾阳不足的小儿遗尿、夜尿多、遗精早泄、阳痿等证，既补益又收涩，为补肾助阳、固精缩尿之良药。凡肾虚阳衰、精气失固所致的遗精滑精、遗尿、尿频、阳痿不育，皆可选用，尤宜遗尿、尿频。

楮实子：味甘，性寒，归肝、肾经，具有补肾清肝，明目利尿的功效，主治肝肾不足、腰膝酸软、虚劳骨蒸、头晕目眩、水肿胀满等证。

山药：拉丁名dioscoreaerhizoma，味甘，性平，入肺、脾、肾经，具有健脾补肺、益胃补肾、固肾益精、聪耳明目、助五脏、强筋骨、长志安神、延年益寿的功效，主治脾胃虚弱、倦怠无力、食欲不振、久泄久痢、肺气虚燥、痰喘咳嗽、肾气亏耗、腰膝酸软、下肢痿弱、消渴尿频、遗精早泄、带下白浊、皮肤赤肿、肥胖等证。

补骨脂：味辛、苦，性温，入肾、脾经，有补肾壮阳，温脾止泻的作用，主要用于命门火衰，下元虚冷之腰膝冷痛，尿频遗尿，阳痿滑泄；肾阳不足、脾土失温之腹痛肢寒，五更泄泻等证。

寄生黄：味苦、涩，性寒，归肺、胃、肝经，具有润肺止咳，行气健胃，清热利湿，凉血止血，补肾涩精的功效，住址肺热咳嗽，腕腹疼痛，黄疸，跌打损伤，咯血，月经不调，崩漏，外伤出血，头昏，遗精等证。

南五味子：拉丁名SchisandraeSphenantheraeFructus，味酸、甘，性温，归肺、心、肾经，具有熟练固涩，益气生津，补肾宁心的功效，主治久咳虚喘，梦遗滑精，遗尿尿频，久泻不止，自汗盗汗，津伤口渴，内热消渴，心悸失眠等证。

首乌藤：味甘、微苦，性平；归心、肝经，具有能养心安神、祛风通络的功效，主治失眠多梦，血虚身痛，肌肤麻木，风湿痹痛，风疮疥癣等证。

土茯苓：味甘、淡，性平，入脾、肺、膀胱、心经，有渗湿利水、健脾宁心的作用，主要用于水湿停滞之水肿，小便不利；湿热蕴结之热淋，脾虚湿困之食少便溏、痰饮停滞、癫痫等证。

太子参：味甘、微苦，性平，入脾、肺经，具有补气健脾，润肺生津的作用，用于脾气虚弱、胃阴不足的食少倦怠，能益脾气，养胃阴，用于气虚津伤的肺虚燥咳及心悸不眠、虚热汗多，能益气生津，治气虚肺燥咳嗽，气阴两虚的心悸不眠、多汗等证。

苦参：味苦，性寒，入肝、肾、大肠、小肠、膀胱、心经，具有清热燥湿，祛风杀虫的作用，主治湿热泻痢，肠风便血，黄疸，小便不利，水肿，带下，阴痒，疥癣，麻风，皮肤瘙痒，湿毒疮疡等证。

女贞子：味甘、苦，微寒，入肝、肾经，有强肝益肾，清热明目的作用，主要用于治疗肝肾阴亏，头目失养之头昏耳鸣，阴虚内热等症状，女贞子属于滋阴类药，可用于益肝肾之阴，强腰壮膝和肝肾阴虚所致的腰胯无力。

本发明还提供了促育生精颗粒的制备方法，其包括：

第一步，按照前述的比例称取淫羊藿、菟丝子、刺五加、肉苁蓉、补骨脂、寄生黄、首乌藤、太子参、苦参和女贞子，水提，纯化，获得第一原料药粉；

第二步，将余下原料药组分采用乙醇渗漉提取，得到第二原料药粉；

第三步，将第一原料药粉和第二原料药粉混合，加入相对于混合药粉质量0.4～0.6倍的蔗糖粉和0.1～0.3倍的糊精，制成颗粒，于40～50℃干燥，获得颗粒剂。

所述第一步进一步具体为，按照前述的比例称取淫羊藿、仙茅、杜仲、山茱萸、黄精、赤芍、菟丝子、刺五加、肉苁蓉、补骨脂、寄生黄、首乌藤、太子参、苦参和女贞子分别粉碎成粗粉，混合在一起，水提，第一次加水量为该步获得的混合物的质量的5-8倍的量，浸泡2h，煎煮2-3h；第二次加水量为该步获得的混合物的质量的3-5倍的量，浸泡1h，煎煮1-2h，合并煎煮液，滤过，合并提取液，减压回收乙醇并浓缩至药液浓度为0.4g生药/mL，抽滤后，滤液的相对密度约为20℃时1.06；上述滤液经体积为10L的大孔吸附树脂柱，先用10倍树脂柱体积的去离子水或蒸馏水洗脱，再用5倍树脂柱体积的95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，去除溶剂，得到第一原料药粉。

所述第二步进一步具体为，按照前述的比例称取余下原料药组分，分别粉碎成粗粉，混合在一起，加相对于混合物3～5倍的醇浓度为80％～90％的乙醇，浸泡30～50小时，采用渗漉法以每分钟1～3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，随后在真空度0.05～0.07Mpa下减压浓缩至60～70℃时相对密度为1.00～1.06的膏体，喷雾干燥，喷雾干燥机的进风温度170～185℃、出风温度80～90℃，随后粉碎成粉末，制成第二原料药粉。

以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。

实施例1促育生精颗粒1

称取淫羊藿35g、仙茅30g、杜仲35g、山茱萸25g、黄精30g、赤芍20g、菟丝子40g、刺五加35g、肉苁蓉30g、补骨脂30g、寄生黄20g、首乌藤25g、太子参40g、苦参20g和女贞子25g分别粉碎成粗粉，混合在一起，第一次加2.5kg的水，浸泡2h，煎煮3h，第二次加1.5kg的水，浸泡1h，煎煮2h，合并煎煮液，滤过，合并提取液，减压回收乙醇并浓缩至药液浓度为0.4g生药/mL，抽滤后，滤液的相对密度为20℃时1.06；上述滤液经体积为10L的大孔吸附树脂柱，先用10倍树脂柱体积的去离子水或蒸馏水洗脱，再用5倍树脂柱体积的95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，去除溶剂，得到第一原料药粉，称取桑螵蛸20g、楮实子20g、山药30g、南五味子15g、土茯苓20g，分别粉碎成粗粉，混合在一起，加700g的醇浓度为90％的乙醇，浸泡50小时，采用渗漉法以每分钟1ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，随后在真空度0.07Mpa下减压浓缩至70℃时相对密度为1.06的膏体，喷雾干燥，喷雾干燥机的进风温度185℃、出风温度90℃，随后粉碎成粉末，制成第二原料药粉，将第一原料药粉和第二原料药粉混合，加入相对于混合药粉质量0.5倍的蔗糖粉和0.2倍的糊精，制成颗粒，于50℃干燥，获得促育生精颗粒。

实施例2促育生精颗粒2

称取淫羊藿33g、仙茅28g、杜仲33g、山茱萸23g、黄精28g、赤芍18g、菟丝子38g、刺五加33g、肉苁蓉28g、补骨脂28g、寄生黄18g、首乌藤23g、太子参38g、苦参18g和女贞子23g分别粉碎成粗粉，混合在一起，第一次加1.8kg的水，浸泡2h，煎煮3h，第二次加1.3kg的水，浸泡1h，煎煮2h，合并煎煮液，滤过，合并提取液，减压回收乙醇并浓缩至药液浓度为0.4g生药/mL，抽滤后，滤液的相对密度为20℃时1.06；上述滤液经体积为10L的大孔吸附树脂柱，先用10倍树脂柱体积的去离子水或蒸馏水洗脱，再用5倍树脂柱体积的95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，去除溶剂，得到第一原料药粉，称取桑螵蛸18g、楮实子18g、山药28g、南五味子13g、土茯苓18g，分别粉碎成粗粉，混合在一起，加600g的醇浓度为90％的乙醇，浸泡50小时，采用渗漉法以每分钟1ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，随后在真空度0.07Mpa下减压浓缩至70℃时相对密度为1.06的膏体，喷雾干燥，喷雾干燥机的进风温度185℃、出风温度90℃，随后粉碎成粉末，制成第二原料药粉，将第一原料药粉和第二原料药粉混合，加入相对于混合药粉质量0.5倍的蔗糖粉和0.2倍的糊精，制成颗粒，于50℃干燥，获得促育生精颗粒。

实施例3促育生精颗粒3

称取淫羊藿37g、仙茅32g、杜仲37g、山茱萸27g、黄精32g、赤芍22g、菟丝子42g、刺五加37g、肉苁蓉32g、补骨脂32g、寄生黄22g、首乌藤27g、太子参42g、苦参22g和女贞子27g分别粉碎成粗粉，混合在一起，第一次加2.2kg的水，浸泡2h，煎煮3h，第二次加1.5kg的水，浸泡1h，煎煮2h，合并煎煮液，滤过，合并提取液，减压回收乙醇并浓缩至药液浓度为0.4g生药/mL，抽滤后，滤液的相对密度为20℃时1.06；上述滤液经体积为10L的大孔吸附树脂柱，先用10倍树脂柱体积的去离子水或蒸馏水洗脱，再用5倍树脂柱体积的95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，去除溶剂，得到第一原料药粉，称取桑螵蛸22g、楮实子22g、山药32g、南五味子17g、土茯苓22g，分别粉碎成粗粉，混合在一起，加800g的醇浓度为90％的乙醇，浸泡50小时，采用渗漉法以每分钟1ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，随后在真空度0.07Mpa下减压浓缩至70℃时相对密度为1.06的膏体，喷雾干燥，喷雾干燥机的进风温度185℃、出风温度90℃，随后粉碎成粉末，制成第二原料药粉，将第一原料药粉和第二原料药粉混合，加入相对于混合药粉质量0.5倍的蔗糖粉和0.2倍的糊精，制成颗粒，于50℃干燥，获得促育生精颗粒。

实施例5毒理学试验

选取ICR小鼠60只，分成空白对照组和治疗组，每组30只。

实验药物

小鼠灌胃本发明实施例1制备的促育生精颗粒。

小鼠急性毒性实验

将治疗组小鼠按照上面的方法给药，将促育生精颗粒溶解在水中，制备成1g/ml的溶液灌胃，每次灌胃0.8ml/10g，空白对照组灌胃等量生理盐水，试验前禁食(不禁水)12h后，治疗组每天1次灌胃给药，连续14d，记录受试小鼠行为、活动、摄食量、体重、粪便、死亡等情况，未死亡小鼠于14d后处死进行尸检。

中药组合物80g(生药)/kg剂量给药的小鼠，当天见小鼠毛色光滑、粪便为褐色，质地较稀软，摄食、活动较少，第2天后小鼠活动、摄食量、体重增长、粪便等均恢复正常，与空白对照组比较无明显差异；且14d内无死亡及其他异常发生，两组同时处死后进行尸检，各主要脏器(心、肝、脾、肺、肾)经肉眼观察未见异常。

豚鼠反复给药毒性实验

将促育生精颗粒溶解在水中，制备成1g/ml的溶液，将给药组豚鼠按照上面的方法给药，每次0.8ml/10g，空白对照组灌胃等量生理盐水，试验前禁食(不禁水)12h后，治疗组每天1次灌胃给药，连续5周，记录受试豚鼠行为、活动、摄食量、体重、粪便、死亡等情况，未死亡豚鼠于5周后处死进行尸检。

试验动物在整个试验期内行为活动、饮食、大小便和被毛色泽等情况未见明显异常，未见呕吐、流涎、流泪、呼吸困难等症状。试验期间有个别动物死亡，经笼旁及解剖学观察，死亡动物未见明显异常，为给药不当致死。

给药组动物给药后生长发育良好，体重增长与空白对照组比较未见明显异常。

试验结束后处死动物，立即解剖，肉眼观察大脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏等主要器官，各器官表面光滑，无粘连，色泽正常，未见充血、肿胀、出血、坏死、粘连，胃肠无扩张，肠壁无水肿、出血、溃疡等异常现象。

心脏：心肌细胞横纹清晰，核居中，间质未见血管扩张及炎细胞浸润；心外膜、心内膜无异常。肝脏：肝细胞排列呈索状，肝小叶结构清楚，汇管区未见炎细胞浸润及纤维结缔组织增生，肝细胞多边形，浆丰富，核大而圆。脾脏：纤维包膜完整，无增厚，脾小体清晰可见，小梁结构正常，红髓、白髓清楚，未见变性、坏死及炎细胞浸润。肺脏：细支气管结构完整，层次清楚，肺泡壁结构完整，肺间隔及支气管完好无损，腔内无明显渗出物，未见变性、坏死及炎细胞浸润。肾脏：肾脏皮质、髓质、肾小球结构正常，肾小球细胞数未增多，毛细血管管腔无扩张，肾小管上皮细胞、肾间质未见异常。大脑：组织结构正常，神经细胞、神经胶质细胞形态正常，各层神经元细胞无明显异常。

上述试验证明本发明提供的药物无毒性，适于安全应用。

实施例4小鼠模型试验

试验动物

实验动物120只清洁级雄性Wistar大鼠，12周龄，性成熟，体质量300-，-350g，由青岛药检所提供。

药品与试剂

本发明早期研制的促育生精颗粒(处方组成为：淫羊藿、巴戟天、仙茅、蛇床子、杜仲、枸杞子、山茱萸、沙苑子、黄精、土茯苓、黄柏、知母、牛膝、赤芍，华润三九医药股份有限公司配方颗粒组方，批号1104211S)，免煎颗粒制剂，分包装，使用时制成水溶液，根据表面积比换算成大鼠药物用量，药液相当于生药含量3.37g·mL^-1；本发明实施例1制备的促育生精颗粒，分包装，使用时制成水溶液，根据表面积比换算成大鼠药物用量，药液相当于生药含量3.37g·mL^-1；环磷酞胺(江苏恒瑞医药股份有限公司，批号11092421)；细胞凋亡检测试剂盒(Biouniquerlifetechnologies，批号BU-AP01021)；胎牛血清(HY-CLONE，批号NTM0133)；其他试剂为分析纯。

仪器设备

流式细胞仪(美国COULTER公司)，组织切片机(LEICA公司)烤片机(中威电子仪器有限公司)，普通双口光学显微镜公司(OlympusOpticalCo.Ltd.型号：CHL)，γ-多管放射免疫计数器(众成机电公司，型号：DFM-96)，低速离心机(科大创新股份有限公司中佳分公司)。

方法

动物分组与给药

将50只大鼠伺养1周后，随机分为对照组、模型组、早期研制的促育生精颗粒治疗组、本发明提供的促育生精颗粒治疗组，每组30只。除对照组，模型组和各药物组按30mg·kg^-1腹腔注射环磷酞胺(粉针剂，用(0.9％氯化钠溶解，2h内使用)，连续5d。第6天开始，两个药物组剂量均按相当于生药含量3.37×100⁴mg·kg^-1·d^-1灌胃，模型组大鼠给与相同剂量的生理盐水灌胃，持续35d。处死动物、取材。

动物取材，标本制作

睾丸、附睾取材

大鼠处死后，四肢固定，在大鼠阴茎上方(0.5cm处，剪开表皮，打开腹腔。从大鼠阴囊下方，挤顶，把睾丸挤人打开的腹腔。分离睾丸与附睾，附睾37℃气浴保存备用。睾丸称重，记录。睾丸组织甲醛处理：睾丸注射10％甲醛预处理30min，用10％甲醛浸泡7d。

精子取材

配置精子孵育液：137mmol·L^-1氯化钠，2.8mmol·L^-1氯化钾，1.0mmol·L^-1氯化镁，12mmol·L^-1碳酸氢钠，0.4mmol·L^-1Na₂HPO₄，10mmol·L^-1HEPES缓冲液，5.5mmol·L^-1果糖，0.35％BSA(w·y^-1)，pH＝7.4。

把完整单侧附睾用37℃生理盐水冲洗，浸泡15min，把附睾浸人1mL自配精子孵育液，剪碎，200口筛过滤，分开精子与组织残片，备用，待用时间在30min内。

精子检测

精子计数取10μL精子悬液，以精子孵育液稀释100倍。混匀，再吸取稀释后精子悬液，加在牛鲍板上，光镜下，用红细胞计数区域，高倍镜下计数精子总数。

光镜下观察生殖细胞层数：制片后生精小管因挤压，大多呈椭圆型。长轴短轴比值较大。为便于观察生殖细胞层数，数据皆取长轴侧值，光镜下取10组数值取平均值。

精子活动力检侧稀释100倍的混匀精子悬液，吸取10μL，加在血细胞计数板上，光镜高倍镜下观察200个精子的活动情况。注意整个操作和观察在室温20～22℃，10min内完成。结果判断：根据WHO标准，将精子活动力分为4级：a、快速向前运动；b、慢或呆滞的向前运动；c、非前向运动；d、不动。

精子凋亡率检测流式细胞术检测步骤：精子悬液300g，1150r·min^-1离心5min，弃上清，收集精子。用精子孵育液洗涤精子，再离心，取5～10万精子。加人500μLAnnexinVBindingBuffer轻轻重悬，加人5μLAnnexinV-FITC，轻轻混匀，加人5μLPropidiumiodide，混匀。室温(20～25℃)

避光孵育10min。用流式细胞仪检测(E_x＝488nm；E_m＝530nm)，AnnexinV-FITC为绿色荧光，PI为红色荧光，经配套软件处理，获取标本数据。

统计学分析

应用统计软件SPSS(edition17.0)进行统计学分析，数据以表示，计量资料用一元方差分析，组间差别用t检验，P＜0.05为差异有显著性，P＜0.01为非常显著性差异。

结果

大鼠附睾精子数据、精子活力的变化，结果见表1。

表1大鼠附睾精子数据、精子活力的变化

注：与正常对照组比较，^aP＜0.05，与模型组比较，^bP＜0.05。

从表1可知，精子数口、a级精子比率和a+b级精子比率3个指标均显示模型组与正常对照组比较存在显著差异(P＞0.05)，造模成功。各剂量药物治疗组精子数口、a+b级精子比率与模型组比较存在显著差异(尸＜().(巧)，说明药物治疗有效。两组治疗组相比，采用本发明提供的促育生精颗粒组较申请人之前研制的早期研制的促育生精颗粒组a级精子比率和a+b级精子更好，更能促进精子质量。

附睾精子凋亡率和生精小管上皮生精细胞层数变化，结果见表2。

表2附睾精子凋亡率和生精小管上皮生精细胞层数变化

注：与正常对照组比较，^aP＜0.05，与模型组比较，^bP＜0.05。

模型组与正常对照组相比，精子凋亡率上升，P＜0.05，两药物组与模型组相比，精子凋亡率明显下降，P＜0.05，且采用本发明促育生精颗粒较申请人之前研制的早期研制的促育生精颗粒，精子凋亡率下降更为明显，P＜0.05。

模型组与正常对照组相比，生精细胞层数减少，P＜0.05，各药物组较模型组，生精细胞层数增多，P＜0.05，且采用本发明促育生精颗粒较申请人之前研制的早期研制的促育生精颗粒，生精细胞层数增多更为明显，P＜0.05。

临床资料

220例均为门诊患者且多是婚后同居2年以上，有正常的性生活而未采取任何避孕措施，配偶检查无异常。精液检查为精子数量不足及存活力、活动力都低于正常值范畴。年龄21～43岁，平均年龄30.5岁。婚后不育3～15年。所有患者具有下列特征至少一项：1、精液量＜2ml；2、精子密度＜2000万/mi；3、一次射精精子总数＜4000/mi；4、精子活力直线＜50％，精子活动强度＜60％；5、精子存活率第一小时低于60％；6、畸形精子数＞20％；7、白细胞计数＞1×10⁶/ml，平均分成2组，每组110例，两组性别，年龄无差异。

治疗方法

对照组采用早期研制的促育生精颗粒(组方)：淫羊藿、巴戟天、仙茅、枸杞子、山茱萸、土茯苓、赤芍、黄精、沙苑子、知母、黄柏、蛇床子、杜仲、牛膝、何首乌、菟丝子等。每日1剂，100g，冲服分早晚两次服用。20剂为1个疗程。

治疗组采用本发明实施例1提供的促育生精颗粒，每日1剂，100g，冲服分早晚两次服用。20剂为1个疗程。

疗效观察

疗效标准：痊愈：症状体征消除，女方已怀孕；显效：精子计数＞6000万/ml，活动强度＞60％，活动率＞65％，畸形精子数＜20％以下，精液不液化转为液化，白细胞＜5个/HP；有效：自觉症状好转，性功能增强，精液有所改善，但各项指标仍未达到正常标准；无效：精液常规未能得到改善，甚至下降。

结果

两组疗效比较，结果件表3。

表3两组疗效比较

组别

例数

痊愈

显效

有效

无效

总有效率

对照组

110

82(74.5％)

18(16.4％)

8(7.3％)

2(1.8％)

98.2％

治疗组

110

94(85.5％)

11(10.0％)

5(4.5％)

0

100％

从表3可以看出，采用本发明提供的促育生精颗粒，在治愈方面，效果要比早期研制的促育生精颗粒更好。

所有上述的首要实施这一知识产权，并没有设定限制其他形式的实施这种新产品和/或新方法。本领域技术人员将利用这一重要信息，上述内容修改，以实现类似的执行情况。但是，所有修改或改造基于本发明新产品属于保留的权利。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。

Claims (7)

1.一种新型的促育生精颗粒，其特征在于：原料药包括淫羊藿、仙茅、杜仲、山茱萸、黄精、赤芍、菟丝子、刺五加、肉苁蓉、桑螵蛸、楮实子、山药、补骨脂、寄生黄、南五味子、首乌藤、土茯苓、太子参、苦参和女贞子。

2.如权利要求1所述的促育生精颗粒，其特征在于：各原料药的重量分别为淫羊藿30g～40g、仙茅25g～35g、杜仲30g～40g、山茱萸20g～30g、黄精25g～35g、赤芍15g～25g、菟丝子35g～45g、刺五加30g～40g、肉苁蓉25g～35g、桑螵蛸15g～25g、楮实子15g～25g、山药25g～35g、补骨脂25g～35g、寄生黄15g～25g、南五味子10g～20g、首乌藤20g～30g、土茯苓15g～25g、太子参35g～45g、苦参15g～25g和女贞子20g～30g。

3.如权利要求1或2所述的促育生精颗粒，其特征在于：各原料药的重量分别为淫羊藿33g～37g、仙茅28g～32g、杜仲33g～37g、山茱萸23g～27g、黄精28g～32g、赤芍18g～22g、菟丝子38g～42g、刺五加33g～37g、肉苁蓉28g～32g、桑螵蛸18g～22g、楮实子18g～22g、山药28g～32g、补骨脂28g～32g、寄生黄18g～22g、南五味子13g～17g、首乌藤23g～27g、土茯苓18g～22g、太子参38g～42g、苦参18g～22g和女贞子23g～27g。

4.如权利要求1至3所述的促育生精颗粒，其特征在于：各原料药的重量分别为淫羊藿35g、仙茅30g、杜仲35g、山茱萸25g、黄精30g、赤芍20g、菟丝子40g、刺五加35g、肉苁蓉30g、桑螵蛸20g、楮实子20g、山药30g、补骨脂30g、寄生黄20g、南五味子15g、首乌藤25g、土茯苓20g、太子参40g、苦参20g和女贞子25g。

5.权利要求1至4所述促育生精颗粒的制备方法，其特征在于，包括：

第一步，按照前述的比例称取淫羊藿、仙茅、杜仲、山茱萸、黄精、赤芍、菟丝子、刺五加、肉苁蓉、补骨脂、寄生黄、首乌藤、太子参、苦参和女贞子，水提，纯化，获得第一原料药粉；

第二步，将余下原料药组分采用乙醇渗漉提取，得到第二原料药粉；

第三步，将第一原料药粉和第二原料药粉混合，加入相对于混合药粉质量0.4～0.6倍的蔗糖粉和0.1～0.3倍的糊精，制成颗粒，于40～50℃干燥，获得颗粒剂。

6.如权利要求5所述促育生精颗粒的制备方法，其特征在于：所述第一步进一步具体为，按照前述的比例称取淫羊藿、仙茅、杜仲、山茱萸、黄精、赤芍、菟丝子、刺五加、肉苁蓉、补骨脂、寄生黄、首乌藤、太子参、苦参和女贞子分别粉碎成粗粉，混合在一起，水提，第一次加水量为该步获得的混合物的质量的5-8倍的量，浸泡2h，煎煮2-3h；第二次加水量为该步获得的混合物的质量的3-5倍的量，浸泡1h，煎煮1-2h，合并煎煮液，滤过，合并提取液，减压回收乙醇并浓缩至药液浓度为0.4g生药/mL，抽滤后，滤液的相对密度约为20℃时1.06；上述滤液经体积为10L的大孔吸附树脂柱，先用10倍树脂柱体积的去离子水或蒸馏水洗脱，再用5倍树脂柱体积的95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，去除溶剂，得到第一原料药粉。

7.如权利要求5或6所述促育生精颗粒的制备方法，其特征在于：所述第二步进一步具体为，按照前述的比例称取余下原料药组分，分别粉碎成粗粉，混合在一起，加相对于混合物3～5倍的醇浓度为80％～90％的乙醇，浸泡30～50小时，采用渗漉法以每分钟1～3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，随后在真空度0.05～0.07Mpa下减压浓缩至60～70℃时相对密度为1.00～1.06的膏体，喷雾干燥，喷雾干燥机的进风温度170～185℃、出风温度80～90℃，随后粉碎成粉末，制成第二原料药粉。