CN102550287B - 一种黑木耳菌丝球的制备方法及其产品 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种黑木耳菌丝球的制备方法及其产品。首先该方法以黑木耳为出发菌株，进行液体发酵，培养基的主要成分为果蔬汁，获得黑木耳菌丝球。本发明还提供了所述制备方法得到的黑木耳菌丝球制成各种黑木耳菌丝球干品、饮料、果冻、口服液或胶囊产品。本发明用果蔬汁作培养基，制备的黑木耳菌丝球及其产品具有色泽天然美观、风味独特、营养丰富和一定的保健作用的特点。
Description
技术领域
本发明涉及一种黑木耳菌丝球的制备方法及其产品。
技术背景
黑木耳(Auricularia auricula)隶属于真菌门、担子菌纲、木耳目、木耳科、木耳属，是著名的药食兼用真菌，，是一种大型真菌，由菌丝体和子实体组成。其主要活性成分黑木耳多糖具有抗肿瘤、抗血栓、抗衰老、降血糖、降血脂、调节免疫等功能。菌丝体是黑木耳的营养器官，相当于高等绿色植物的根、茎、叶，是黑木耳的主体。黑木耳的子实体，又称担子果，是我们烹饪食用的部分。
《本草纲目》中记载，黑木耳：性平，味甘；补齐止血、涩肠活血。近年来，国内外学者对黑木耳的药理作用作了较为深入的研究，黑木耳子实体及其提取物除了具有传统上的药理作用以外，还具有抗肿瘤、抗诱变、免疫调节降血脂降血糖等作用。由于野生黑木耳越来越稀少，且外销需求量大。目前研究以大量人工发酵菌丝体在生产上应用，但液体发酵耗能高，所得产物活性成分低，容易污染等缺陷。
在产物应用方面，有籍保平等的“黑木耳类降脂食品及加工方法”（CN1864541）以及张聪等的“黑木耳饮料的制备方法及其产品”（ CN101317681），他们均对黑木耳产品加工工艺进行了阐述，并将制成的产品用在降血脂以及保健功能上。
目前，在国内外用食药用菌子实体加工成的各类保健品，如各种食药用菌饮料、口服液、胶囊等，尚无涉及到以果蔬汁为原料，通过液体发酵法制备黑木耳菌丝球的方法及其产品。
发明内容
本发明的目的在于提供一种黑木耳菌丝球的制备方法及其产品，以果蔬汁为原料，通过液体发酵法制备黑木耳菌丝球及其产品。
本发明首先提供了一种黑木耳菌丝球的制备方法，以黑木耳为出发菌株，进行液体发酵，培养基的主要成分为果蔬汁，获得黑木耳菌丝球。
所述液体发酵包括摇瓶扩大培养、种子罐扩大培养和发酵罐扩大培养。
所述液体发酵包括以下步骤：
（1）培养基组成：摇瓶培养基：果蔬汁50-300 ml、白砂糖5-20g、KH2PO4 1-5g、MgSO4·7H2O 1-5g、ZnSO4 ·7H2O 0.1-0.5g，加水定容至1000ml，pH自然；发酵培养基：果蔬汁50-300 ml、白砂糖5-20g、KH2PO4 1-5g、MgSO4·7H2O 1-5g、ZnSO4 ·7H2O 0.1-0.5g、CaCO3 3-7g，加水定容至1000ml，pH pH自然；
（2）培养条件：
一级摇瓶：将生产斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养，得到生产摇瓶一级种，培养条件为：以100-250mL/500mL装量，接入0.5-2cm2的斜面菌种，70-250rpm振荡培养5-10d，温度20-30℃；
二级摇瓶：将生产摇瓶一级种用体积比为5-20%的接种量，按上述一级摇瓶培养基和培养条件，再次扩大培养3-7天，得到生产摇瓶二级种；
种子罐培养：将生产摇瓶二级种转接入装有发酵培养基的种子罐进行扩大培养得到发酵一级种；培养条件为：接种量5-15%（v/v），罐温20-30℃，罐压0.03-0.1MPa，搅拌速度50-200rpm，通气量1:0.2-1.0v/v.min，发酵培养3-7d；
发酵罐培养：按种子罐培养所述的发酵培养基和培养条件，将发酵一级种转接入装有发酵培养基的发酵罐培养，发酵5-10天放罐，发酵醪经过滤，得到发酵液和新鲜的黑木耳菌丝球。
所述果蔬汁为葡萄汁、苹果汁、橙汁、桃汁、山楂汁、梨汁、西瓜汁、甘蔗汁、草莓汁、杨梅汁、胡萝卜汁、黄瓜汁、番茄汁、白菜汁、芹菜汁中的一种或几种。
本发明还提供了将上述制备方法得到的黑木耳菌丝球制成各种黑木耳菌丝球干品、饮料、果冻、口服液或胶囊产品。
用果蔬汁作培养基，制备的黑木耳菌丝球及其产品具有色泽天然美观、风味独特、营养丰富和一定的保健作用的特点。
具体实施例
本发明的一种黑木耳菌丝球的制备方法，以黑木耳为出发菌株，进行液体发酵，培养基的主要成分为果蔬汁，获得黑木耳菌丝球。
所述液体发酵包括摇瓶扩大培养、种子罐扩大培养和发酵罐扩大培养。
所述液体发酵包括以下步骤：
（1）培养基组成：摇瓶培养基：胡萝卜汁50-300 ml、白砂糖5-20g、KH2PO4 1-5g、MgSO4·7H2O 1-5g、ZnSO4 ·7H2O 0.1-0.5g，加水定容至1000ml，pH自然；发酵培养基：果蔬汁50-300 ml、白砂糖5-20g、KH2PO4 1-5g、MgSO4·7H2O 1-5g、ZnSO4 ·7H2O 0.1-0.5g、CaCO3 3-7g，加水定容至1000ml，pH pH自然；
（2）培养条件：
一级摇瓶：将生产斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养，得到生产摇瓶一级种，培养条件为：以100-250mL/500mL装量，接入0.5-2cm2的斜面菌种，70-250rpm振荡培养5-10d，温度20-30℃；
二级摇瓶：将生产摇瓶一级种用体积比为5-20%的接种量，按上述一级摇瓶培养基和培养条件，再次扩大培养3-7天，得到生产摇瓶二级种；
种子罐培养：将生产摇瓶二级种转接入装有发酵培养基的种子罐进行扩大培养得到发酵一级种；培养条件为：接种量5-15%（v/v），罐温20-30℃，罐压0.03-0.1MPa，搅拌速度50-200rpm，通气量1:0.2-1.0v/v.min，发酵培养3-7d；
发酵罐培养：按种子罐培养所述的发酵培养基和培养条件，将发酵一级种转接入装有发酵培养基的发酵罐培养，发酵5-10天放罐，发酵醪经过滤，得到发酵液和新鲜的黑木耳菌丝球。
所述果蔬汁为葡萄汁、苹果汁、橙汁、桃汁、山楂汁、梨汁、西瓜汁、甘蔗汁、草莓汁、杨梅汁、胡萝卜汁、黄瓜汁、番茄汁、白菜汁、芹菜汁中的一种或几种。
由上述制备方法得到的黑木耳菌丝球制成各种黑木耳菌丝球干品、饮料、果冻、口服液或胶囊产品，具体产品如下：
1．黑木耳菌丝球产品
1.1 黑木耳菌丝球干品
新鲜的黑木耳菌丝球经热风干燥或冷冻干燥或微波干燥后得到黑木耳菌丝球干品。
1.2黑木耳菌丝球悬浮饮料
配方：黑木耳菌丝球干品（1种或几种）2-5%或新鲜的黑木耳菌丝球（1种或几种）10-25%，柠檬酸、苹果酸等酸味剂0.08%-0.15%，白砂糖3-9%、蜂蜜0-3%等糖味剂，果蔬汁0-15%、发酵液0-10%（1种或几种）,加纯净水至100%。
生产工艺：黑木耳菌丝球干品（1种或几种）2-5%或新鲜的黑木耳菌丝球（1种或几种）10-25%加1-3纯净水煮沸10-15分钟；然后加入柠檬酸、苹果酸等酸味剂0.08%-0.15%，白砂糖3-9%、蜂蜜0-3%等糖味剂，果蔬汁0-15%、发酵液0-10%（1种或几种）,加纯净水至100%，混合调配，用柠檬酸调pH值至3.2-4.0；将调配好的饮料趁热装瓶、封盖、杀菌，经检验合格后即为产品。
1.3黑木耳菌丝球果冻
配方：黑木耳菌丝球干品（1种或几种）2-5%或新鲜的黑木耳菌丝球（1种或几种）10-25%，果冻粉0.3-0.8%,柠檬酸、苹果酸等酸味剂0.08%-0.15%，白砂糖3-9%、蜂蜜0-3%等糖味剂，果蔬汁0-10%、发酵液0-10%（1种或几种）,加纯净水至100%。
生产工艺：黑木耳菌丝球干品（1种或几种）2-5%或新鲜的黑木耳菌丝球（1种或几种）10-25%加1-3纯净水煮沸10-15分钟；然后加入果冻粉0.3-0.8%，搅拌溶解，继续加热3-5分钟；加入柠檬酸、苹果酸等酸味剂0.08%-0.15%，白砂糖3-9%、蜂蜜0-3%等糖味剂，果蔬汁0-15%、发酵液0-10%（1种或几种）,加纯净水至100%，搅拌均匀；将调配好的黑木耳菌丝球果冻包装、杀菌，经检验合格后即为产品。
1.4黑木耳口服液、胶囊
将黑木耳菌丝球干品（1种或几种）或新鲜的黑木耳菌丝球（1种或几种）加入2-5倍重量的水，置95-100℃水浴中提取0.5-1h，经板框压滤得提取液A和滤渣；将该滤渣再重复提取、过滤1-2次，得提取液B，合并发酵液、提取液A和提取液B，40-75℃，0.05-0.1MPa低温真空浓缩至可溶性固形物为3-10%，得浓缩液。
将所述浓缩液煮沸，离心去除其中的不溶物质后，按重量比加入加入柠檬酸、苹果酸等酸味剂0.08%-0.15%，白砂糖3-9%、蜂蜜0-3%等,将调配好的口服液装瓶、杀菌，经检验合格后即为黑木耳口服液产品。
将所述浓缩液喷雾干燥，得黑木耳提取液干粉，采用现有技术制成黑木耳胶囊。
为充分公开本发明的一种黑木耳菌丝球的制备方法及其产品，下面结合实施例加以说明。
实施例1：
1．黑木耳菌丝球的制备
1.1 将黑木耳保存种用马铃薯培养基（PDA培养基）进行活化、复壮，置26℃恒温箱静止培养7天，得到生产斜面种，置冰箱中冷藏备用；所述的PDA培养基的配方为(g/L)：去皮马铃薯 200，葡萄糖 15，琼脂 20，加水定容至所需体积，pH自然；
1.2 将生产斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养，得到生产摇瓶一级种；所述的摇瓶培养基的配方为(/L)：山楂汁50ml、胡萝卜汁50ml、白砂糖5g、KH2PO4 1g、MgSO4·7H2O 2g、ZnSO4 ·7H2O 0.1g，加水定容1000 ml，pH自然；培养条件为：以100mL/500mL装量，接入1cm2的斜面菌种，旋转式摇床250rpm培养5d，温度30℃；
1.3 将生产摇瓶一级种用5%的接种量，按步骤1.2所述的摇瓶培养基配方和培养条件，再次扩大培养3天，得生产摇瓶二级种；
1.4 将生产摇瓶二级种转接入装有发酵培养基的种子罐进行扩大培养得到发酵一级种；所述的发酵培养基配方为(/L)：山楂汁50ml、胡萝卜汁50ml、白砂糖5g、KH2PO4 1g、MgSO4·7H2O 2g、ZnSO4 ·7H2O 0.1g、CaCO3 3g，加水定容至1000 ml，pH自然；培养条件为：接种量5%，罐温30℃，罐压0.1MPa，搅拌转速200rpm，通气量1:1v/v.min，发酵培养5d；
1.5 按步骤1.4所述的发酵培养基配方和培养条件，将发酵一级种转接入装有发酵培养基的发酵罐培养，发酵5天放罐，发酵醪经过滤，得到黑木耳发酵液和新鲜的黑木耳菌丝球。
2．黑木耳菌丝球产品
2.1 黑木耳菌丝球干品
新鲜的黑木耳菌丝球经热风干燥或冷冻干燥或微波干燥后得到黑木耳菌丝球干品。
2.2黑木耳菌丝球悬浮饮料
配方：新鲜的黑木耳菌丝球20%，柠檬酸0.05%、苹果酸0.03%，白砂糖8%、胡萝卜汁5%、黑木耳发酵液5%,加纯净水至100%。
生产工艺：新鲜的黑木耳菌丝球20%，加2倍纯净水煮沸10-15分钟；然后加入柠檬酸0.05%、苹果酸0.03%，砂糖8%、胡萝卜汁5%、黑木耳发酵液5%,加纯净水至100%，混合调配，用柠檬酸调pH值至3.2-4.0；将调配好的黑木耳菌丝球悬浮饮料趁热装瓶、封盖、杀菌，经检验合格后即为黑木耳菌丝球悬浮饮料成品。
2.3黑木耳菌丝球果冻
配方：黑木耳菌丝球干品3%，果冻粉0.5%,柠檬酸0.05%、苹果酸0.03%，白砂糖6%、蜂蜜0.5%，胡萝卜汁5%、黑木耳发酵液5%,加纯净水至100%。
生产工艺：黑木耳菌丝球干品3%加3倍纯净水煮沸15分钟；然后加入果冻粉0.5%，搅拌溶解，继续加热5分钟；加入柠檬酸0.05%、苹果酸0.03%，白砂糖6%、蜂蜜0.5%，胡萝卜汁5%、黑木耳发酵液5%,加纯净水至100%，搅拌均匀；将调配好的黑木耳菌丝球果冻包装、杀菌，经检验合格后即为产品。
2.4黑木耳口服液、胶囊
将新鲜的黑木耳菌丝球加入2倍重量的水，置100℃水浴中提取0.5h，经板框压滤得提取液A和滤渣；将该滤渣再重复提取、过滤1次，得提取液B，合并发酵液、提取液A和提取液B，55℃，0.05-0.1MPa低温真空浓缩至可溶性固形物为10%，得浓缩液。
将所述浓缩液煮沸，离心去除其中的不溶物质后，按重量比加入柠檬酸0.05%、苹果酸0.03%，白砂糖6%、蜂蜜0.5%等,将调配好的口服液装瓶、杀菌，经检验合格后即为黑木耳口服液产品。
将所述浓缩液喷雾干燥，得黑木耳提取液干粉，采用现有技术制成黑木耳胶囊。
实施例2：
1．黑木耳菌丝球的制备
1.1 将黑木耳保存种用马铃薯培养基（PDA培养基）进行活化、复壮，置28℃恒温箱静止培养7天，得到生产斜面种，置冰箱中冷藏备用；所述的PDA培养基的配方为(g/L)：去皮马铃薯 250，葡萄糖 15，琼脂 15，加水定容至所需体积，pH自然；
1.2 将生产斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养，得到生产摇瓶一级种；所述的摇瓶培养基的配方为(/L)：胡萝卜汁100ml、葡萄汁50 ml、白砂糖5 g 、KH2PO4 2g、MgSO4·7H2O 2g、ZnSO4 ·7H2O 0.25g，加水定容1000 ml，pH自然；培养条件为：以250mL/500mL装量，接入1cm2的斜面菌种，旋转式摇床120rpm培养7d，温度28℃；
1.3 将生产摇瓶一级种用10%的接种量，按步骤1.2所述的摇瓶培养基配方和培养条件，再次扩大培养5天，得生产摇瓶二级种；
1.4 将生产摇瓶二级种转接入装有发酵培养基的种子罐进行扩大培养得到发酵一级种；所述的发酵培养基配方为(/L)：胡萝卜汁100ml、葡萄汁50 ml、白砂糖5 g 、KH2PO4 2g、MgSO4·7H2O 2g、ZnSO4 ·7H2O 0.25g、CaCO3 3g，加水定容至所需体积，pH 6.5；培养条件为：接种量10%，罐温28℃，罐压0.05MPa，搅拌转速120rpm，通气量1:0.5v/v.min，发酵培养5d；
1.5 按步骤1.4所述的发酵培养基配方和培养条件，将发酵一级种转接入装有发酵培养基的发酵罐培养，发酵7天放罐，发酵醪经过滤，得到黑木耳发酵液和新鲜的黑木耳菌丝球。
2．黑木耳菌丝球产品
2.1 黑木耳菌菌丝球干品
新鲜的黑木耳菌丝球经热风干燥或冷冻干燥或微波干燥后得到黑木耳菌丝球干品。
2.2黑木耳菌丝球悬浮饮料
配方：新鲜的黑木耳菌丝球20%，柠檬酸0.06%、苹果酸0.02%，白砂糖5%、蜂蜜1%，葡萄汁3%、黑木耳发酵液6%,加纯净水至100%。
生产工艺：新鲜的黑木耳菌丝球20%，加2倍纯净水煮沸10-15分钟；然后加入柠檬酸0.06%、苹果酸0.02%，砂糖5%、蜂蜜1%，葡萄汁3%、黑木耳发酵液6%,加纯净水至100%，混合调配，用柠檬酸调pH值至3.2-4.0；将调配好的黑木耳菌丝球悬浮饮料趁热装瓶、封盖、杀菌，经检验合格后即为黑木耳菌丝球悬浮饮料成品。
2.3黑木耳菌丝球果冻
配方：黑木耳菌丝球干品3%，果冻粉0.5%,柠檬酸0.06%、苹果酸0.02%，白砂糖5%、蜂蜜1%，葡萄汁3%、黑木耳发酵液6%,加纯净水至100%。
生产工艺：黑木耳菌丝球干品3%加3倍纯净水煮沸15分钟；然后加入果冻粉0.5%，搅拌溶解，继续加热5分钟；加入柠檬酸0.05%、苹果酸0.03%，白砂糖5%、蜂蜜1%，葡萄汁3%、黑木耳发酵液6%,加纯净水至100%，搅拌均匀；将调配好的黑木耳菌丝球果冻包装、杀菌，经检验合格后即为产品。
2.4黑木耳口服液、胶囊
将新鲜的黑木耳菌丝球加入2倍重量的水，置100℃水浴中提取0.5h，经板框压滤得提取液A和滤渣；将该滤渣再重复提取、过滤1次，得提取液B，合并发酵液、提取液A和提取液B，55℃，0.1MPa低温真空浓缩至可溶性固形物为10%，得浓缩液。
将所述浓缩液煮沸，离心去除其中的不溶物质后，按重量比加入柠檬酸0.06%、苹果酸0.02%，白砂糖5%、蜂蜜1%等,将调配好的口服液装瓶、杀菌，经检验合格后即为黑木耳口服液产品。
将所述浓缩液喷雾干燥，得黑木耳提取液干粉，采用现有技术制成黑木耳胶囊。
实施例3：
1．黑木耳菌丝球的制备
1.1 将黑木耳保存种用马铃薯培养基（PDA培养基）进行活化、复壮，置30℃恒温箱静止培养7天，得到生产斜面种，置冰箱中冷藏备用；所述的PDA培养基的配方为(g/L)：去皮马铃薯 150，葡萄糖 20，琼脂 15，加水定容至所需体积，pH自然；
1.2 将生产斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养，得到生产摇瓶一级种；所述的摇瓶培养基的配方为(/L)：苹果汁50 ml、白砂糖10 g 、KH2PO4 5g、MgSO4·7H2O 5g、ZnSO4 ·7H2O 0.5g，加水定容1000 ml，pH自然；培养条件为：以250mL/500mL装量，接入1cm2的斜面菌种，旋转式摇床70rpm培养10d，温度20℃；
1.3 将生产摇瓶一级种用10%的接种量，按步骤1.2所述的摇瓶培养基配方和培养条件，再次扩大培养7天，得生产摇瓶二级种；
1.4 将生产摇瓶二级种转接入装有发酵培养基的种子罐进行扩大培养得到发酵一级种；所述的发酵培养基配方为(/L)：苹果汁50 ml、KH2PO4 5g、MgSO4·7H2O 5g、ZnSO4 ·7H2O 0.5g、CaCO3 5g，加水定容至所需体积，pH 自然；培养条件为：接种量15%，罐温20℃，罐压0.03MPa，搅拌转速50rpm，通气量1:0.2v/v.min，发酵培养7d；
1.5 按步骤1.4所述的发酵培养基配方和培养条件，将发酵一级种转接入装有发酵培养基的发酵罐培养，发酵10天放罐，发酵醪经过滤，得到黑木耳发酵液和新鲜的黑木耳菌丝球。
2．黑木耳菌丝球产品
2.1 黑木耳菌丝球干品
新鲜的黑木耳菌丝球经热风干燥或冷冻干燥或微波干燥后得到黑木耳菌丝球干品。
2.2黑木耳菌丝球悬浮饮料
配方：新鲜的黑木耳菌丝球15%，柠檬酸0.06%、苹果酸0.02%，白砂糖5%、蜂蜜0.5%，苹果汁3%、黑木耳发酵液5%,加纯净水至100%。
生产工艺：新鲜的黑木耳菌丝球15%，加2倍纯净水煮沸10-15分钟；然后加入柠檬酸0.06%、苹果酸0.02%，砂糖5%、蜂蜜0.5%，苹果汁3%、黑木耳发酵液5%,加纯净水至100%，混合调配，用柠檬酸调pH值至3.2-4.0；将调配好的黑木耳菌丝球悬浮饮料趁热装瓶、封盖、杀菌，经检验合格后即为黑木耳菌丝球悬浮饮料成品。
2.3黑木耳菌丝球果冻
配方：黑木耳菌丝球干品3%，果冻粉0.5%,柠檬酸0.06%、苹果酸0.02%，白砂糖5%、蜂蜜0.5%，苹果汁3%、黑木耳发酵液5%,加纯净水至100%。
生产工艺：黑木耳菌丝球干品3%加3倍纯净水煮沸15分钟；然后加入果冻粉0.5%，搅拌溶解，继续加热5分钟；加入柠檬酸0.05%、苹果酸0.03%，白砂糖5%、蜂蜜0.5%，苹果汁3%、黑木耳发酵液5%,加纯净水至100%，搅拌均匀；将调配好的黑木耳菌丝球果冻包装、杀菌，经检验合格后即为产品。
2.4黑木耳口服液、胶囊
将新鲜的黑木耳菌丝球加入2倍重量的水，置100℃水浴中提取0.5h，经板框压滤得提取液A和滤渣；将该滤渣再重复提取、过滤1次，得提取液B，合并发酵液、提取液A和提取液B，55℃，0.1MPa低温真空浓缩至可溶性固形物为10%，得浓缩液。
将所述浓缩液煮沸，离心去除其中的不溶物质后，按重量比加入柠檬酸0.06%、苹果酸0.02%，白砂糖5%、蜂蜜1%等,将调配好的口服液装瓶、杀菌，经检验合格后即为黑木耳口服液产品。
将所述浓缩液喷雾干燥，得黑木耳提取液干粉，采用现有技术制成黑木耳胶囊。
黑木耳菌丝球的制备方法及其产品，以胡萝卜汁、葡萄汁、苹果汁等果蔬汁为原料，以黑木耳为出发菌株，进行液体发酵，获得大量的黑木耳菌丝球，然后以黑木耳菌丝球主料，制成各种黑木耳菌丝球干品、饮料、果冻、口服液、胶囊等产品，产品具有营养丰富，风味独特，色泽天然美观及有一定的保健作用的特点。
Claims (2)
1.一种黑木耳菌丝球的制备方法，其特征在于：以黑木耳为出发菌株，进行液体发酵，培养基的主要成分为果蔬汁，获得黑木耳菌丝球；所述液体发酵包括摇瓶扩大培养、种子罐扩大培养和发酵罐扩大培养；所述液体发酵包括以下步骤：
（1）培养基组成：摇瓶培养基：果蔬汁50-300 ml、白砂糖5-20g、KH2PO4 1-5g、MgSO4·7H2O 1-5g、ZnSO4 ·7H2O 0.1-0.5g，加水定容至1000ml，pH自然；发酵培养基：果蔬汁50-300 ml、白砂糖5-20g、KH2PO4 1-5g、MgSO4·7H2O 1-5g、ZnSO4 ·7H2O 0.1-0.5g、CaCO3 3-7g，加水定容至1000ml，pH自然；
（2）培养条件：
一级摇瓶：将生产斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养，得到生产摇瓶一级种，培养条件为：以100-250mL/500mL装量，接入0.5-2cm2的斜面菌种，70-250rpm振荡培养5-10d，温度20-30℃；
二级摇瓶：将生产摇瓶一级种用体积比为5-20%的接种量，按上述一级摇瓶培养基和培养条件，再次扩大培养3-7天，得到生产摇瓶二级种；
种子罐培养：将生产摇瓶二级种转接入装有发酵培养基的种子罐进行扩大培养得到发酵一级种；培养条件为：接种量5-15%（v/v），罐温20-30℃，罐压0.03-0.1MPa，搅拌速度50-200rpm，通气量1:0.2-1.0v/v.min，发酵培养3-7d；
发酵罐培养：按种子罐培养所述的发酵培养基和培养条件，将发酵一级种转接入装有发酵培养基的发酵罐培养，发酵5-10天放罐，发酵醪经过滤，得到发酵液和新鲜的黑木耳菌丝球；所述果蔬汁为甘蔗汁。
2.一种黑木耳菌丝球产品，其特征在于：利用权利要求1所述制备方法得到的黑木耳菌丝球制成各种黑木耳菌丝球干品、饮料、果冻、口服液或胶囊产品。
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