CN102539596A - 返魂草浸膏的质量检测方法 - Google Patents
返魂草浸膏的质量检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102539596A CN102539596A CN2010106100645A CN201010610064A CN102539596A CN 102539596 A CN102539596 A CN 102539596A CN 2010106100645 A CN2010106100645 A CN 2010106100645A CN 201010610064 A CN201010610064 A CN 201010610064A CN 102539596 A CN102539596 A CN 102539596A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- peak
- medicinal extract
- groundsel herb
- hempleaf groundsel
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 71
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title abstract description 3
- 241001146184 Jacobaea cannabifolia Species 0.000 title abstract 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 39
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 32
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 24
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims abstract description 22
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000010276 construction Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims abstract description 5
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical group CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims abstract description 5
- 240000003705 Senecio vulgaris Species 0.000 claims description 74
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 63
- QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N trans-caffeic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N 0.000 claims description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 19
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 19
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 claims description 17
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 claims description 17
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 claims description 17
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 claims description 17
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 claims description 17
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 claims description 17
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 claims description 17
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 14
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims description 12
- ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N (E)-3,4,5-trihydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 235000004883 caffeic acid Nutrition 0.000 claims description 11
- 229940074360 caffeic acid Drugs 0.000 claims description 11
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 9
- 239000002398 materia medica Substances 0.000 claims description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 7
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 claims description 4
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 claims description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 4
- 238000010606 normalization Methods 0.000 claims description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 abstract 3
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 29
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 24
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 16
- 239000000463 material Substances 0.000 description 14
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 13
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 10
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 9
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 9
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 8
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 7
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 7
- 206010062717 Increased upper airway secretion Diseases 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 208000026435 phlegm Diseases 0.000 description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 235000014676 Phragmites communis Nutrition 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 3
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 3
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000002567 autonomic effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 3
- RGHHSNMVTDWUBI-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzaldehyde Chemical compound OC1=CC=C(C=O)C=C1 RGHHSNMVTDWUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XQXPVVBIMDBYFF-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxyphenylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XQXPVVBIMDBYFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 101800004538 Bradykinin Proteins 0.000 description 2
- 102400000967 Bradykinin Human genes 0.000 description 2
- 206010006458 Bronchitis chronic Diseases 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH Natural products NC(N)=NCCCC(N)C(=O)N1CCCC1C(=O)N1C(C(=O)NCC(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CO)C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000037656 Respiratory Sounds Diseases 0.000 description 2
- 206010047924 Wheezing Diseases 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 230000036592 analgesia Effects 0.000 description 2
- 230000000954 anitussive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001088 anti-asthma Effects 0.000 description 2
- 239000000924 antiasthmatic agent Substances 0.000 description 2
- 229940124584 antitussives Drugs 0.000 description 2
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 2
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 2
- QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N bradykinin Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N 0.000 description 2
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000007451 chronic bronchitis Diseases 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 2
- 230000001408 fungistatic effect Effects 0.000 description 2
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 2
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 2
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- LHDVONJKFJRQTI-UHFFFAOYSA-N 2-(1,4-dihydroxycyclohexyl)acetic acid Chemical compound OC1CCC(O)(CC(O)=O)CC1 LHDVONJKFJRQTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010370 Adenoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 206010060931 Adenovirus infection Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 201000006306 Cor pulmonale Diseases 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 241000175212 Herpesvirales Species 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000003797 Neuropeptides Human genes 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 239000008896 Opium Substances 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- URLKBWYHVLBVBO-UHFFFAOYSA-N Para-Xylene Chemical group CC1=CC=C(C)C=C1 URLKBWYHVLBVBO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 208000004186 Pulmonary Heart Disease Diseases 0.000 description 1
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 208000011589 adenoviridae infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000001618 algogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 230000002924 anti-infective effect Effects 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 208000002352 blister Diseases 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 1
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 description 1
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 description 1
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003532 endogenous pyrogen Substances 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 1
- 239000007888 film coating Substances 0.000 description 1
- 238000009501 film coating Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 1
- 150000008131 glucosides Chemical class 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N hydroquinone O-beta-D-glucopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000002267 hypothalamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 108010052620 leukocyte endogenous mediator Proteins 0.000 description 1
- 150000002617 leukotrienes Chemical class 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000002075 main ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002175 menstrual effect Effects 0.000 description 1
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 210000004493 neutrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229960001027 opium Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 150000007965 phenolic acids Chemical group 0.000 description 1
- 235000009048 phenolic acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- 238000012372 quality testing Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 210000001044 sensory neuron Anatomy 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000003393 splenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 210000003371 toe Anatomy 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000008736 traumatic injury Effects 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 1
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 1
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 1
- 150000008505 β-D-glucopyranosides Chemical class 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明涉及返魂草浸膏HPLC指纹图谱的构建方法，该方法包括：(1)对照品溶液的制备；(2)供试品溶液的制备；(3)色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液(7-9∶91-93)的混合溶液；检测波长为327nm；(4)测定：得到返魂草浸膏指纹图谱。本发明还涉及返魂草浸膏的质量检测方法及标准指纹图谱。本发明的方法能有效表征返魂草浸膏的质量，有利于监控产品的质量；具有方法简便、稳定性好、精密度高、重现性好的特点；可快速、准确地鉴别产品的真伪优劣。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药质量检测方法，具体涉及返魂草浸膏HPLC指纹图谱的构建方法，以及返魂草浸膏的质量检测方法。
背景技术
中药材返魂草主产于我国长白山，大小兴安岭等地。返魂草以地上全草入药，具有清热解毒、散血、消肿、下气通经。用于瘀血胀痛、跌打损伤的功效。同时还具有抑菌作用，临床用治疗肺源性心脏病、慢性支气管炎、急性肺感染，有显著疗效。另具有防治流感、润肺、提高人体免疫力等功效。由于以返魂草为原料研制的新药疗效显著，近几年众多制药企业开始用其开发生产治疗肺病新药。
目前，返魂草还没有作为法定药材被国家药品标准收录，其质量指标也没有法定标准。目前市售的产品肺宁颗粒、肺宁胶囊、肺宁片都是以返魂草为原料的治疗呼吸道感染的纯中药制剂。通过检测分析，本发明人发现，由于产地不同，或采摘季节不同，返魂草药材内在质量存在很大的差异，仅以其中指标成分绿原酸的检测结果为例，含量上的差异可达到十几倍。绿原酸是返魂草药材中一个重要的有效成分，而含量相差悬殊，会导致制剂的内在质量失去可控性，其临床疗效更是无法保证。这样，势必导致产品内在质量难以保证，无法达到临床效果。中药材质量的不可控性，是制约我国传统中药走向世界的一个难以解决的瓶颈问题。
当前世界很多国家和地区都很重视中药的指纹图谱的研究工作，我国台湾省已经对所有中成药都实行指纹图谱控制。国际上出现的标准植物药制剂的概念，就是对制剂中的主要特性施行控制，制定标准的指纹图谱，使植物药由原料到成品都有稳定的标准，使质量更有保证。美国FDA对中国中药市场的准入，一再的强调质量标准的提高，FDA要求中国的原料、半成品、制剂都要有相应的指纹图谱。我们以返魂草浸膏为基础，研究建立药材提取物的指纹图谱，正是顺应了现代中药发展潮流，力争在未来的植物药市场上保待一席之地。
到目前为止，在中药生产和流通中，还没有一种质量控制手段能够全面地、综合地反映出中药产品的质量变异，可以有效地进行全过程的质量控制。通过对返魂草药材浸膏的系统研究，证明采用高效液相色谱方法用指纹图谱作为指控标准是可行的。从药材的来源、生产、加工、贮存、中间品、成品、流通样品等各个角度和方面，进行中药样品的理化分析，通过相似性和相关性对比，发现质量变异和缺陷，从而全面、特异地把握住以返魂草浸膏为主药的系列产品例如肺宁系列产品的质量命脉。
发明内容
本发明的目的之一是提供返魂草浸膏HPLC指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：
(1)对照品溶液的制备：精密称取绿原酸、咖啡酸对照品，分别加入甲醇制成每1ml含12-16μg的溶液，避光保存；
(2)供试品溶液的制备：取返魂草，加9-11倍量煎煮2-3次，每次1-2h，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏、干燥；取所得浸膏0.4-0.6g，置于50ml容量瓶中，加甲醇35-45ml，超声处理30-60分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得，避光保存；
(3)色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液为7-9∶91-93的混合溶液；紫外检测波长为327nm；流速为1.0ml/min；
(4)测定：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到返魂草浸膏指纹图谱。
优选地，步骤(1)所述对照品的浓度为每1ml甲醇含15μg对照品。
优选地，步骤(2)所述供试品溶液的制备步骤如下：取返魂草，加水10倍量煎煮3次，第1次煎煮2h，第2、3次每次煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏、干燥；取所得浸膏0.5g，置于50ml容量瓶中，加甲醇40ml，超声处理45分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
优选地，步骤(3)所述流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液为8∶92的混合溶液。
本发明的另一个目的是提供返魂草浸膏的HPLC标准指纹图谱的构建方法，按照前述方法构建12批返魂草浸膏HPLC指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似性评价系统软件生成由6个共有峰构成的返魂草浸膏HPLC标准指纹图谱，共有峰中第5号峰为绿原酸峰，第6号峰为咖啡酸峰。
在标准指纹图谱中，以绿原酸峰为参照峰S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，所述相对保留时间应在第一规定值的±5％之内，所述第一规定值分别为：0.12-峰1、0.16-峰2、0.24-峰3、0.49-峰4、1.00-峰S、1.27-峰6；所述共有峰的峰面积应在第二峰面积的规定值±20％之内，采用面积归一化法计算，第二规定值分别为：9.91％-峰1、3.32％-峰2、3.27％-峰3、18.99％-峰4、36.28％-峰S、28.21％-峰6。
本发明的另一个目的是提供返魂草浸膏的质量检测方法，该方法包括如下步骤：
(1)对照品溶液的制备：精密称取绿原酸、咖啡酸对照品，分别加入甲醇制成每1ml含12-16μg的溶液，避光保存；
(2)供试品溶液的制备：取返魂草，加水9-11倍量煎煮2-3次，每次1-2h，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏、干燥；取所得浸膏0.4-0.6g，置于50ml容量瓶中，加甲醇35-45ml，超声处理30-60分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得，避光保存；
(3)色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液为7-9∶91-93的混合溶液；紫外检测波长为327nm；流速为1.0ml/min；
(4)测定：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到返魂草浸膏指纹图谱；
(5)取12批返魂草浸膏，按上述同法操作，构建12批返魂草浸膏HPLC指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似性评价系统软件生成由6个共有峰构成的返魂草浸膏HPLC标准指纹图谱，共有峰中第5号峰为绿原酸峰，第6号峰为咖啡酸峰；
在标准指纹图谱中，以绿原酸峰为参照峰S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，所述相对保留时间在第一规定值的±5％之内，所述第一规定值为：0.12-峰1、0.16-峰2、0.24-峰3、0.49-峰4、1.00-峰S、1.27-峰6；所述共有峰的峰面积在第二规定值±20％之内，采用面积归一化法计算，第二规定值分别为：9.91％-峰1、3.32％-峰2、3.27％-峰3、18.99％-峰4、36.28％-峰S、28.21％-峰6；
(6)取返魂草浸膏样品，按上述同法操作，得到返魂草浸膏样品指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似性评价系统软件对返魂草浸膏的标准指纹图谱和样品指纹图谱进行分析，相似度大于0.95为合格产品。
优选地，步骤(1)所述对照品的浓度为每1ml甲醇含15μg对照品。
优选地，步骤(2)所述供试品溶液的制备步骤如下：取返魂草，加水10倍量煎煮3次，第1次煎煮2h，第2、3次每次煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏、干燥；取所得浸膏0.5g，置于50ml容量瓶中，加甲醇40ml，超声处理45分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
优选地，步骤(3)所述流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液为8∶92的混合溶液。
在一个优选的实施方案中，返魂草HPLC标准指纹图谱中各共有峰的保留时间和峰面积如表1所示：
表1返魂草HPLC标准指纹图谱中共有峰的保留时间和峰面积
本发明的有益效果如下：
(1)本发明的方法以绿原酸和咖啡酸为对照品，建立的返魂草HPLC标准指纹图谱能有效、准确地表征返魂草浸膏的质量，有利于全面监控产品的质量，为药品的质量检测提供可靠的依据。
(2)返魂草的指纹图谱注重各个构成指纹特征峰的前后顺序和相互关系，注重整体面貌特征。
(3)本发明的质量检测方法能有效地监控返魂草浸膏的质量，保证其质量的稳定、均一、可控。具有方法简便，稳定性好、精密度高、重现性好等优点，可快速、准确地鉴别产品的真伪优劣。
附图说明
图1为返魂草浸膏的HPLC指纹图谱；
图2为返魂草浸膏的12批次原始指纹图谱；
图3为返魂草浸膏的标准指纹图谱。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1构建返魂草浸膏的HPLC指纹图谱
1.仪器、试药
1.1仪器：岛津LC-2010AHT高效液相色谱仪(四元泵、在线脱气机、柱温箱(柱温28℃)、自动进样器、UVD检测器)；BS210S电子天平；色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18(5μm，4.6×250mm)。
1.2试药：绿原酸对照品、咖啡酸对照品(中国药品生物制品鉴定所提供)。液相色谱分析用试剂为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。
2.高效液相色谱
2.1对照品溶液的制备：精密称取绿原酸、咖啡酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml分别含15μg的溶液，即得(避光保存)。
2.2供试品溶液的制备：取返魂草100g，加水10倍量煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成膏。取制得的浸膏0.5g，精密称定，至50ml量瓶中，加甲醇40ml，超声处理(功率300W，频率25KHZ)45分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得(避光保存)。
2.3色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液(8∶92)的混合溶液；紫外检测波长为327nm；流速为1.0ml/min。理论板数按绿原酸峰计算应不低于3000。
2.4测定：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱，如图1所示。
实施例2构建返魂草浸膏的HPLC标准指纹图谱
取返魂草浸膏12批次(分别来自长白山药材所3批、黑龙江药材所2批、吉林四平药材所3批、辽宁药材所2批、内蒙古药材所2批)，按实施例1条件进行检测，得12批次样品的HPLC图谱，如图2所示。通过12批HPLC图谱的比较，采用中国药典委员会推荐的《中药色谱指纹图谱相似性评价系统》软件对HPLC图谱进行相似度评价，确定共有特征峰，得到返魂草的标准指纹图谱。
在标准指纹图谱中，返魂草浸膏的指纹图谱中含有6个共有特征峰，其中参照峰为绿原酸(5号峰)和咖啡酸(6号峰)。
相似度评价：以《中药色谱指纹图谱相似性评价系统》软件分析，计算供试品指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，结果均大于0.95。相似度评价结果见表2。
表2HPLC指纹图谱相似度评价
| 批次 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 |
| 相似度 | 0.984 | 0.975 | 0.976 | 0.975 | 0.990 | 0.988 | 0.982 | 0.981 | 0.998 | 0.984 | 0.997 | 0.978 |
通过上述方法所建立的返魂草浸膏HPLC的标准指纹图谱如图3所示。
实施例3返魂草浸膏的质量检测方法
取20批返魂草浸膏样品(长白山一年生家种药材、长白山野生药材、黑龙江大兴安岭野生药材、吉林四平野生药材、内蒙古野生药材各四批，均在8月份采摘，晒干)，按实施例1的条件同法操作，得到返魂草浸膏样品指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似性评价系统软件对返魂草浸膏的标准指纹图谱和样品指纹图谱进行分析，相似度大于0.95为合格产品。
检测结果表明，长白山野生药材、黑龙江大兴安岭野生药材、吉林四平野生药材、内蒙古野生药材均在8月份采摘，晒干的药材样品为合格样品，批次编号分别为005--020；长白山一年生家种药材为不合格样品，批次编号为001-004。
综上所述，本发明质量检测方法的稳定性好、重复性好，因此，本发明的技术方案具有可行性。利用本发明质量检测方法监控获得的本发明的中药制剂，药效确切，作用稳定。以下利用实验例具体说明。
实验例1药理学实验
取合格批次返魂草浸膏样品，进行药理学实验，批次编号为20091001，结果表明本品具有如下的药理作用：
1.1抑菌作用及其机制
返魂草提取物有明显制炎症反应的作用，与体外抗菌作用相符。通过体外抑菌圈试验及利用色谱技术分离纯化，得到5个具有抗菌活性的化合物：5-羟基吡啶-2-甲酸甲酯、6羟基7、7a-二氢-2-(6H)-苯骈呋喃酮、2-(1，4-二羟基环己基)-乙酸、3-羟基环己酸、4-羟基苯甲醛。三个抗菌糖苷类：苄基-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基(1-7b)β-D-吡喃葡萄糖苷、(6S，9S)-6羟基-3-酮-α-紫罗兰醇-3-酮-9-O-β-D-葡糖苷、(6S，9R)-6羟基-3-酮-α-紫罗兰醇-3-酮-9-O-β-D葡糖苷。返魂草的水煎液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的作用比较明显，而其醇提液对绿脓杆菌、沙门氏菌和白色葡萄球菌的抑制作用均大于其水煎液，对链球菌的作用两者抑菌效果相当。返魂草的主要成分是酚酸类，从其中分得到三个结晶，分别鉴定为氢醌、对羟基苯乙酸、熊果苷，其作用是抑菌而非杀菌，对细菌的呼吸及DNA和蛋白质的合成都有抑制作用，从而呈现出抑菌效果。
1.2抗病毒作用
返魂草对病毒引起的感染性疾病有很好的疗效：引起疱疹单纯角膜炎的疱疹病毒能够在一定程度上被其抑制；鸡胚实验证明，该药物2.5mg/kg胚对FM1型流感病毒具有明显的抑制作用，促进新鸡瘟病毒诱导人全血细胞产生干扰素；给小鼠腹腔注射该不同剂量药物时，对鼻腔注射甲I型(FM1)鼠肺适应株流感病毒的小鼠具有保护作用，降低感染流感病毒小鼠的肺指数；对MDCK细胞具有离体抗感染病毒的作用其提取物咖啡酸和绿原酸对呼吸道合胞病毒、腺病毒感染的也具有一定的抑制作用。
1.3对免疫功能的抑制
宽叶返魂草水煎剂可使小鼠脾脏萎缩及其B淋巴细胞转化率下降，表明宽叶返魂草有抑制体液免疫应答的作用；碳廓清实验的结果显示，宽叶返魂草使小鼠碳廓清指数明显降低，表明该药对非特异性巨噬细胞吞噬功能亦有抑制作用；宽叶返魂草使小鼠胸腺萎缩，使脾脏T淋巴细胞转化率轻度下降，使脾细胞产生的IL-2轻度减少，说明宽叶返魂草对细胞免疫应答抑制不明显。以上证明宽叶返魂草对机体免疫功能具有一定调节作用。
1.4抗炎、解热、镇痛
1.4.1炎症的产生机制
一些致炎物质引起的以局部渗出、水肿为特征的急性炎症反应。当局部受到致病因子的刺激后，局部血管扩张，巨噬细胞、中性粒细胞聚集到炎症部位，释放炎性因子和水解酶类，如前列腺素、白三烯、缓激肽等，导致局部的炎症反应。返魂草提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀、1％角叉菜胶致大鼠足趾肿胀、大鼠棉球肉芽肿都有明显抑制作用。
1.4.2机体的发热反应
机体的发热反应是由于外原性致热物质如细菌、病毒、毒素及抗原抗体复合物等，刺激中性粒细胞释放内热源如IL-lp、IL-6、IFN-a、IFN-b和TNF-a等细胞因子，这些细胞因子又促使下丘脑视前区附近合成PGEZ，通过cAMP触发下丘脑的体温调解中枢增加产热，使体温升高。返魂草提取物能明显抑制内毒素致家兔体温升高和啤酒酵母致大鼠发热反应，作用强度与剂量呈一定相关性。
1.4.3疼痛的产生机制
疼痛的产生机制是局部组织损伤或发炎时，产生或释放止痛物质如缓激肽等，作用于感觉神经末梢引起疼痛，同时也产生与释放前列腺素P增加前者等致痛物质的敏感性，不但有致炎致痛作用，还能将其放大；感觉神经末稍受到刺激后释放谷氨酸、神经肽类等伤害性递质，沿感觉神经传入中枢神经。前者是解热、镇痛、抗炎药的作用部位，后者是阿片类镇痛药的作用部位。返魂草提取物具有显著提高小鼠热板法、小鼠光热辐射法疼痛反应的阈值，镇痛作用确定，作用呈量效关系。
实验例2临床疗效验证
试验制剂
取合格批次返魂草浸膏样品(批次为20091001)，制成胶囊(取返魂草浸膏加淀粉适量，干燥，粉碎，装入胶囊即得。1g生药/粒)，对300例临床患者口服给药。用法与用量：口服，一次4粒，一日3次，1个月为一个疗程。以芩暴红止咳片为对照药，薄膜衣每片重0.4g，对100例临床患者口服给药，一次3～4片，一日3次。
试验对象
临床研究采用多中心、随机、单盲、平行对照的方法。治疗组与对照组的比例为3∶1，在3家医院同时进行，受试病例数治疗组和对照组分别为300例和100例。观察单位及病例分配数见表3：
表3临床研究单位病例分配方法
治疗结果
一、治疗后两组病人咳嗽病疗效分析(见表4)
表4治疗后两组病人咳嗽病疗效分析
经Ridit分析说明P＜0.05，治疗组与对照组之间有显著性差异。说明治疗组疗效优于对照组。
二、治疗后两组病人中医证候疗效比较(见表5)
表5治疗后两组病人中医证候疗效比较
经Ridit分析说明P＜0.05，治疗组与对照组之间有显著性差异。说明治疗组疗效优于对照组。
三、治疗前后两组病人中医证候计分比较(见表6-7)
表6治疗前后两组病人中医证候计分比较
经Ridit分析，说明P＜0.05，治疗组与对照组之间有显著性差异，说明治疗组疗效优于对照组。组内比较，治疗组疗前疗后有显著性差异，而对照组疗前疗后无显著性差异。
表7治疗前两组病人痰中血丝情况比较表
经Ridit分析，说明P＜0.05，治疗组与对照组之间有显著性差异，说明治疗组疗效优于对照组。组内比较，治疗组疗前疗后有显著性差异，而对照组疗前疗后无显著性差异。
四、治疗后两组病人中医证候积分比较(见表8)
表8治疗前后两组病人中医证候积分比较
经t检验说明P＜0.01，治疗组与对照组之间有显著性差异，说明治疗组疗效优于对照组。组内比较，治疗组与对照组疗前疗后均有极显著性差异。
五、治疗过程中两组病人咳嗽病积分及中医证候起效时间比较(见表9)
表9治疗过程中两组病人咳嗽病积分及中医证候起效时间比较
Ridit分析：P＜0.05，治疗组与对照组之间有显著性差异，说明治疗组优于对照组。
平行试验
另取5个合格批次(20091005、200910010、20091012、20091016、20091020)，按上述同法进行药理和临床实验，结果各批次间的治疗效果无显著性差异。
讨论
经临床试验表明，本品具有清热祛痰，镇咳平喘的作用。用于肺内感染，慢性支气管炎，喘息性支气管炎，急性呼吸道感染等。治疗组总有效率90％，痊愈率29％，显效率43％，对照组总有效率72％，痊愈率22％，显效率29％，由返魂草浸膏制得的胶囊治疗慢支具有明显的优势，在改善病人中医证候积分及改善中医单项症状方面，与在对照组芩暴红止咳片相比具有显著差异。经统计学分析，本品对于咳嗽、咳痰、哮鸣音的改善具有显著差异。对于改善咳嗽病兼症口干，口渴，痰中血丝，舌象，脉象也具有显著差异。在起效时间方面，本品在咳嗽起效时间上：1～4天起效的占77％，1～7天起效的占88％。而对照组芩暴红1～4天起效的占44％，1～7天起效的占68％。咳痰起效时间：1～4天起效的占70.6％，1～7天起效的占78.7％。而对照组芩暴红止咳片1～4天起效的占32％，1～7天起效的占49％。在安全性指标方面：治疗组与对照组肝功，肾功，心电治疗前后均正常，提示本品是一种安全有效的治疗咳嗽，痰热郁肺证的中药制剂。
结论
经过临床观察，本品具有清热祛痰，镇咳平喘的功效，对于咳嗽，痰热郁肺证的治疗具有明显的优势，无论是改善中医证候总积分，还是对咳嗽，咳痰，哮鸣音，喘息等单项症状的改善具有显著的作用。
通过以上药理药效和临床试验证明，利用本发明质量检测方法监控获得的本发明的中药胶囊剂，药效确切、作用稳定、疗效好，质量稳定。
Claims (8)
1.返魂草浸膏HPLC指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：
(1)对照品溶液的制备：精密称取绿原酸、咖啡酸对照品，分别加入甲醇制成每1ml含12-16μg的溶液；
(2)供试品溶液的制备：取返魂草，加水9-11倍量煎煮2-3次，每次1-2h，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏、干燥；取所得浸膏0.4-0.6g，置于50ml容量瓶中，加甲醇35-45ml，超声处理30-60分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(3)色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液为7-9∶91-93的混合溶液；紫外检测波长为327nm；流速为1.0ml/min；
(4)测定：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到返魂草浸膏指纹图谱。
2.根据权利要求1所述的方法，所述对照品的浓度为每1ml甲醇含15μg对照品。
3.根据权利要求1所述的方法，所述供试品溶液的制备步骤如下：取返魂草，加水10倍量煎煮3次，第1次煎煮2h，第2、3次每次煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏、干燥；取所得浸膏0.5g，置于50ml容量瓶中，加甲醇40ml，超声处理45分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
4.根据权利要求1所述的方法，所述流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液为8∶92的混合溶液。
5.返魂草浸膏的HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，按照权利要求1-4任一项所述的方法构建12批返魂草浸膏HPLC指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似性评价系统软件生成由6个共有峰构成的返魂草浸膏HPLC标准指纹图谱，所述共有峰中第5号峰为绿原酸峰，第6号峰为咖啡酸峰。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述标准指纹图谱中，以绿原酸峰为参照峰S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，所述相对保留时间在第一规定值的±5％之内，所述第一规定值分别为：0.12-峰1、0.16-峰2、0.24-峰3、0.49-峰4、1.00-峰S、1.27-峰6；所述共有峰的峰面积在第二规定值±20％之内，采用面积归一化法计算，第二规定值分别为：9.91％-峰1、3.32％-峰2、3.27％-峰3、18.99％-峰4、36.28％-峰S、28.21％-峰6。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述6个共有峰的保留时间分别为2.54、3.19、4.95、9.98、20.51、26.01，峰面积分别为152999、59692、72272、322837、495408、385225。
8.返魂草浸膏的质量检测方法，其特征在于，取返魂草浸膏样品，按权利要求1-4任一项同法操作，得到返魂草浸膏样品指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似性评价系统软件对所述样品指纹图谱和权利要求5-7任一项所述的返魂草浸膏的标准指纹图谱进行分析，相似度大于0.95为合格产品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201010610064.5A CN102539596B (zh) | 2010-12-17 | 2010-12-17 | 返魂草浸膏的质量检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201010610064.5A CN102539596B (zh) | 2010-12-17 | 2010-12-17 | 返魂草浸膏的质量检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102539596A true CN102539596A (zh) | 2012-07-04 |
| CN102539596B CN102539596B (zh) | 2015-01-21 |
Family
ID=46347000
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201010610064.5A Expired - Fee Related CN102539596B (zh) | 2010-12-17 | 2010-12-17 | 返魂草浸膏的质量检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102539596B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107589191A (zh) * | 2017-09-26 | 2018-01-16 | 山东宏济堂制药集团股份有限公司 | 金贝口服液hplc 指纹图谱建立和检测方法 |
-
2010
- 2010-12-17 CN CN201010610064.5A patent/CN102539596B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 刘艳清等: "RP-HPLC测定返魂草颗粒中绿原酸和咖啡酸含量", 《中成药》 * |
| 南敏伦等: "HPLC法测定不同产地返魂草中绿原酸的含量", 《沈阳药科大学学报》 * |
| 姜振邦等: "RP-HPLC法同时测定返魂草中3种酚酸类成分", 《中草药》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107589191A (zh) * | 2017-09-26 | 2018-01-16 | 山东宏济堂制药集团股份有限公司 | 金贝口服液hplc 指纹图谱建立和检测方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102539596B (zh) | 2015-01-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101002841B (zh) | 玫瑰花有效部位及其制备方法 | |
| EP2596798B1 (en) | Plectranthus amboinicus fraction having anti-arthritis activity | |
| CN111789918A (zh) | 一种抗冠状病毒的中药组合物及其制备方法和用途 | |
| WO2007006171A1 (fr) | Composition de médecine chinoise traditionnelle, préparation et procédé de contôle de la qualité de celle-ci | |
| CN110755386B (zh) | 百蕊颗粒在制备治疗病菌感染导致高热症的药物中的应用 | |
| CN103463156B (zh) | 一种黑骨藤提取物及其制备方法和用途 | |
| CN103479963A (zh) | 一种治疗类风湿关节炎的中药胶囊及其制备方法 | |
| CN102861255A (zh) | 一种治疗流感的药物及其制剂的制备方法及质量控制方法 | |
| CN102579519A (zh) | 翼首草总苷提取物及其制备方法和用途 | |
| CN105434511A (zh) | 一种雪胆饮片及其制备方法和用途 | |
| CN102579559B (zh) | 一种龙须藤乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物及其制备方法和用途 | |
| CN101934032B (zh) | 一种治疗糖尿病的中药复方外用制剂及其制备方法和应用 | |
| CN102697932B (zh) | 治疗皮肤瘙痒的药物组合物及质量检测方法 | |
| CN102539596B (zh) | 返魂草浸膏的质量检测方法 | |
| CN102362877B (zh) | 一种雾水葛提取物的应用 | |
| CN101904894B (zh) | 独一味总苷在制备药物中的用途 | |
| CN106620541A (zh) | 一种治疗慢性湿疹的外用中药组合物及其制备方法 | |
| CN113244343A (zh) | 一种治疗寒湿蕴肺困脾证候的中药组合物 | |
| Yang et al. | Protective Effects of Herba Houttuyniae Aqueous Extract against OVA‐Induced Airway Hyperresponsiveness and Inflammation in Asthmatic Mice | |
| CN101375954B (zh) | 一种药物组合物、其制备方法及用途 | |
| CN104042928A (zh) | 一种治疗糖尿病的药物组合物及其制备方法和用途 | |
| CN105435162B (zh) | 一种治疗过敏性鼻炎的中药组合物、制备方法及中药制剂 | |
| CN102284036A (zh) | 骨筋丸胶囊及其制备方法 | |
| Choi et al. | Scutellaria baicalensis inhibits mast cell-mediated anaphylactic reactions | |
| KR101131108B1 (ko) | 도라지 막분리 추출물 또는 플라티코시드 ｅ를 유효성분으로 함유하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C53 | Correction of patent of invention or patent application | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Ding Aiying Inventor after: Li Yanru Inventor after: Xu Youzhang Inventor before: Xu Youzhang Inventor before: Li Yanru Inventor before: Ding Aiying |
|
| COR | Change of bibliographic data |
Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: XU YOUZHANG LI YANRU DING AIYING TO: DING AIYING LI YANRU XU YOUZHANG |
|
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: JILIN YIMINGTANG PHARMACEUTICAL CO., LTD. Free format text: FORMER OWNER: XU YOUZHANG Effective date: 20141203 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| C53 | Correction of patent of invention or patent application | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Ding Aiying Inventor after: Luo Min Inventor after: Cui Yebo Inventor after: Li Yanru Inventor after: Xu Yang Inventor after: Ma Xiaojing Inventor before: Ding Aiying Inventor before: Li Yanru Inventor before: Xu Youzhang |
|
| COR | Change of bibliographic data |
Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: DING AIYING LI YANRU XU YOUZHANG TO: DING AIYING LUO MIN CUI YEBO LI YANRU XU YANG MA XIAOJING |
|
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20141203 Address after: 136001 No. 3288, development zone, Siping City, Jilin Applicant after: Jilin Yimintang Pharmaceutical Co.,Ltd. Address before: 136001 No. 3288, development zone, Siping City, Jilin Applicant before: Xu Youzhang |
|
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20150121 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |