CN102284036A - 骨筋丸胶囊及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗肥大性脊椎炎，颈椎病跟骨刺，增生性关节炎，大骨节病中药的制备方法，取乳香、没药、延胡索、马钱子、三七、血竭采用气流粉碎机将浸膏粉碎成超细粉体a，混匀；郁金、木香、独活、桂枝采用酶解法，得清膏b，药渣加入白芍、红花、牛膝、秦艽四味采用二氧化碳超临界萃取法得上清液c，将b与c合并，浓缩至稠膏烘干，采用气流粉碎机将浸膏粉碎成超细粉体d，将a与d混匀，加入药学上可接受的赋形剂混匀装囊，本发明具有活性成分提取完全、生物利用度高、吸收好、质量稳定、重现性好等优点。

Description

骨筋丸胶囊及其制备方法

一 技术领域

本发明涉及中药领域，具体来说，涉及一种治疗肥大性脊椎炎，颈椎病跟骨刺，增生性关节炎，大骨节病的骨筋丸胶囊及其制备方法。

二 背景技术

骨筋丸胶囊，活血化瘀，祛风止痛。用于治疗肥大性脊椎炎，颈椎病跟骨刺，增生性关节炎，大骨节病等症状，但存在活性成份提取不完全、生物利用度低等不足，虽然获得了一些疗效，但治愈率仍不理想，尤其远期反弹性高，所以，人们仍在寻找一种能治疗骨病效果更好，并且无远期反弹的没有毒副作用的中药。

三 发明内容

为克服上述不足，本发明的目的是采用现代高科技手段，提供一种活性成份提取完全、生物利用度高、质量稳定，治疗骨病效果好，无远期反弹，没有毒副作用的骨筋丸胶囊及其制备方法。

骨筋丸胶囊是通过下列方法制备：

取乳香13.5g、没药23g、白芍45.5g、延胡索(醋制)13.5g、三七23g、木香13.5g、红花23g、郁金45.5g、独活91.5g、牛膝23g、秦艽91.5g、桂枝23g、血竭13.5g、马钱子(制)13.5g，以上十四味，乳香、没药、延胡索、马钱子、三七、血竭采用气流粉碎机将浸膏粉碎成粒径＜50微米(完全通过300目筛)的超细粉体a，混匀；郁金、木香、独活、桂枝采用纤维素酶，50-70％乙醇酶解，乙醇量为药材量的5-9倍，酶解温度为30-50℃，PH值3-5，酶用量5-15mg/g，酶解时间为0.5-3h，得清膏b，药渣加入白芍、红花、牛膝、秦艽四味采用二氧化碳超临界萃取法提取，萃取压力20-50Mpa，萃取温度30-60℃，分离器压力5-10Mpa，分离器温度40-60℃，分离时间2-6小时，二氧化碳流量为20-30L/H。得上清液c，将b与c合并，浓缩至稠膏烘干，采用气流粉碎机将浸膏粉碎成超细粉体d，将a与d混匀，加入药学上可接受的赋形剂混匀装囊，制成1000粒。

上述实施方案所提到的中药材来源如下：

乳香：为榄榄科植物乳香树Boswellia carterii Birdw.及同属植物Boswelliabhaw-dajiana Birdw.树皮渗出的树脂。具有活血定痛，消肿生肌的功效。用于胸痹心痛，胃脘疼痛，痛经经闭，产后瘀阻，癥瘕腹痛，风湿痹痛，筋脉拘挛，跌打损伤，痈肿疮疡。

没药：为橄榄科植物地丁树Commiphora myrrha Engl.或哈地丁树Commiphoramolmol Engl.的干燥树脂。有散瘀定痛，消肿生肌的功效，用于胸痹心痛，胃脘疼痛，痛经经闭，产后瘀阻，癥瘕腹痛，风湿痹痛，跌打损伤，痈肿疮疡。

白芍：为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根。有养血调经，敛阴止汗，柔肝止痛，平抑肝阳的功效。用于血虚萎黄，月经不调，自汗，盗汗，胁痛，腹痛，四肢挛痛，头痛眩晕。

延胡索(醋)：为罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wag的干燥块茎的醋制加工品。具有活血，行气，止痛的功效。用于胸胁、脘腹疼痛，胸痹心痛，经闭痛经，产后瘀阻，跌扑肿痛。

三七：为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根和根茎。具有散瘀止痛，消肿定痛的功效。用于咯血，吐血，衄血，便血，崩漏，外伤出血，胸腹刺痛，跌扑肿痛。

木香：菊科植物木香Aucklandia lappa Decne.的干燥根。具有行气止痛，健脾消食的功效。用于胸胁、脘腹胀痛，泻痢后重，食积不消，不思饮食。

红花：为菊科植物红花Carthamus tinctorius L.的干燥花。具有活血通经，散瘀止痛的功效。用于经闭，痛经，恶露不行，癥瘕痞块，胸痹心痛，瘀滞腹痛，胸胁刺痛，跌扑损伤，疮疡肿痛。

郁金：为姜科植物温郁金Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling、姜黄Curcumalonga L.、广西莪术Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang或蓬莪术Curcuma phaeocaulis Val.的干燥块根。具有活血止痛，行气解郁，清心凉血，利胆退黄的功效。用于胸胁刺痛，胸痹心痛，经闭痛经，乳房胀痛，热病神昏，癫痫发狂，血热吐衄，黄疸尿赤。

独活：为伞形科植物重齿毛当归Angelica pubescens Maxim.f.biserrata Shanet Yuan的干燥根。具有祛风除湿，通痹止痛的功效。用于风寒湿痹，腰膝疼痛，少阴伏风头痛，风寒挟湿头痛。

牛膝：为苋科植物牛膝Achyranthes bidentata Bl.的干燥根。具有逐瘀通经，补肝肾，强筋骨，利尿通淋，引血下行的功效。用于经闭，痛经，腰膝酸痛，筋骨无力，淋证，水肿，头痛，眩晕，牙痛，口疮，吐血，衄血。

秦艽：为龙胆科植物秦艽Gent iana macrophylla Pall、麻花秦艽Gentianastraminea Maxim.、粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.或小秦艽Gentiana dahurica Fisch.的干燥根。具有祛风湿，清湿热，止痹痛，退虚热的功效。用于风湿痹痛，中风半身不遂，筋脉拘挛，骨节酸痛，湿热黄疸，骨蒸潮热，小儿疳积发热。

桂枝：为樟科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl的干燥嫩枝。具有发汗解肌，温通经脉，助阳化气，平冲降气的功效。用于风寒感冒，脘腹冷痛，血寒经闭，关节痹痛，痰饮，水肿，心悸，奔豚。

血竭：为棕榈科植物麒麟竭Daemonorops draco Bl.果实渗出的树脂经加工制成。具有活血定痛，化瘀止血，生肌敛疮的功效。用于跌打损伤，心腹瘀痛，外伤出血，疮疡不敛。

马钱子(制)：马钱科植物马钱Strychnos nux-wmica L.的干燥成熟种子的加工品。具有通络止痛，散结消肿的功效。用于跌打损伤，骨折肿痛，风湿顽痹，麻木瘫痪，痈疽疮毒，咽喉肿痛。

骨筋丸胶囊所用到的原料药均可从普通医药商店购买得到，其规格符合国家医药标准。

四 具体实施方式

下列实施例仅用于说明本发明，而不是以任何方式限制本发明。

本发明的具体实施例1

取乳香6.75g、没药11.5g、白芍22.75g、延胡索(醋制)6.75g、三七11.5g、木香6.75g、红花11.5g、郁金22.75g、独活45.75g、牛膝11.5g、秦艽45.75g、桂枝11.5g、血竭6.75g、马钱子(制)6.75g，以上十四味，乳香、没药、延胡索、马钱子、三七、血竭采用气流粉碎机将浸膏粉碎成粒径＜50微米(完全通过300目筛)的超细粉体a，混匀；郁金、木香、独活、桂枝采用纤维素酶50％乙醇酶解，乙醇量为药材量的5倍，酶解温度为30℃，PH值3，酶用量5mg/g，酶解时间为0.5h，得清膏b，药渣加入白芍、红花、牛膝、秦艽四味采用二氧化碳超临界萃取法提取，萃取压力20Mpa，萃取温度30℃，分离器压力5Mpa，分离器温度40℃，分离时间2小时，二氧化碳流量为20L/H。得上清液c，将b与c合并，浓缩至稠膏烘干，采用气流粉碎机将浸膏粉碎成超细粉体d，将a与d混匀，加入药学上可接受的赋形剂混匀装囊制成1000粒。

本发明的具体实施例2

取乳香20.25g、没药34.5g、白芍68.25g、延胡索(醋制)20.25g、三七34.5g、木香20.25g、红花34.5g、郁金68.25g、独活137.25g、牛膝34.5g、秦艽137.25g、桂枝34.5g、血竭20.25g、马钱子(制)20.25g，以上十四味，乳香、没药、延胡索、马钱子、三七、血竭采用气流粉碎机将浸膏粉碎成粒径＜50微米(完全通过300目筛)的超细粉体a，混匀；郁金、木香、独活、桂枝采用纤维素酶70％乙醇酶解，乙醇量为药材量的9倍，酶解温度为50℃，PH值5，酶用量15mg/g，酶解时间为3h，得清膏b，药渣加入白芍、红花、牛膝、秦艽四味采用二氧化碳超临界萃取法提取，萃取压力50Mpa，萃取温度60℃，分离器压力10Mpa，分离器温度60℃，分离时间6小时，二氧化碳流量为30L/H。得上清液c，将b与c合并，浓缩至稠膏烘干，采用气流粉碎机将浸膏粉碎成超细粉体d，将a与d混匀，加入药学上可接受的赋形剂混匀装囊制成1000粒。

本发明最优选的具体实施例3

取乳香13.5g、没药23g、白芍45.5g、延胡索(醋制)13.5g、三七23g、木香13.5g、红花23g、郁金45.5g、独活91.5g、牛膝23g、秦艽91.5g、桂枝23g、血竭13.5g、马钱子(制)13.5g，以上十四味，乳香、没药、延胡索、马钱子、三七、血竭采用气流粉碎机将浸膏粉碎成粒径＜50微米(完全通过300目筛)的超细粉体a，混匀；郁金、木香、独活、桂枝采用纤维素酶60％乙醇酶解，乙醇量为药材量的7倍，酶解温度为40℃，PH值4，酶用量10mg/g，酶解时间为2h，得清膏b，药渣加入白芍、红花、牛膝、秦艽四味采用二氧化碳超临界萃取法提取，萃取压力35Mpa，萃取温度45℃，分离器压力8Mpa，分离器温度50℃，分离时间4小时，二氧化碳流量为25L/H。得上清液c，将b与c合并，浓缩至稠膏烘干，采用气流粉碎机将浸膏粉碎成超细粉体d，将a与d混匀，加入药学上可接受的赋形剂混匀装囊制成1000粒。

(一)骨筋丸胶囊实施例的检验方法：

【鉴别】(1)取本品内容物3g，加乙醇20ml，温浸30分钟，滤过；取滤液2ml，蒸干，加稀盐酸使成酸性，滤过，滤液加碘化铋钾试液1-2滴，即生成橙红色沉淀；另取滤液10ml，蒸干，加沸水15ml使溶解，趁热滤过，放冷，用三氯甲烷提取二次，每次10ml，弃去三氯甲烷层，水溶液用乙酸乙酯10ml提取，提取液点于层析滤纸上，置紫外光灯(365nm)下观察，显亮蓝色荧光。

(2)取本品内容物0.6g，研细，加无水乙醇5ml，超声处理15分钟，滤过，滤液挥干，残渣加石油醚(30～60℃)1ml使溶解，作为供试品溶液。另取乳香对照药材0.3g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯-甲苯(10∶1.5∶1.5)的水饱和溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(3)取本品内容物2g，研细，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，弃去乙醚液，残渣挥干，加水饱和的正丁醇20ml，超声处理30分钟，放冷，滤过，滤液用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次20ml，正丁醇蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷R_g1、R_b1与三七皂苷R₁对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(4)取本品内容物2g，研细，加乙醚5ml，振摇10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液，另取血竭对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相对应的位置上，显相同颜色的斑点。

(5)含量测定秦艽项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。

秦艽 照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥD)测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(1∶3)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按龙胆苦苷峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备 精密称取龙胆苦苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备 取本品装量差异项下内容物，研细，取约0.5g，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇约40ml，超声处理30分钟，放冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过。取续滤液，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每粒含秦艽以龙胆苦苷(C₁₆H₂₀O₉)计，不少于1.6mg。

规格 每粒装0.15g

(二)骨筋丸胶囊药效学临床实验

1.骨筋丸对关节炎的临床实验

1.1一般资料

1.1.1纳入标准

参照美国风湿协膝OA(ACR1986)的诊断标准，同时采用膝Kellgren-LanrenceX线分级标准对膝骨性关节炎患者的X线片进行分级。将符合诊断标准、自愿接受2个月治疗和检查，X线片示Kellgren-Lanrence分级在Ⅰ-Ⅲ级的患者纳入治疗。

1.1.2排除标准

有以下情形之一的患者不予纳入本研究：(1)有严重的心、肝、肾、肺等器官疾患及活动性溃疡患者；(2)恶性肿瘤患者(除非已手术切除，且5年以上无复发者)；(3)诊断有炎性关节炎、痛风、骨结核、骨髓炎或急性膝关节创伤及血管神经损伤患者；(4)继发性膝骨性关节炎患者；(5)精神疾病患者；(6)孕妇或哺乳期妇女。

1.1.3病例分组资料

共纳入符合上述标准的膝骨性关节炎患者71例。其中男24例，女47例；年龄47-76岁，平均59.4岁；单膝发病56例，双膝发病15例；共86膝；病程5个月12年，平均4.7年。根据随机原则按就诊时间顺序依次分为治疗组和对照组。治疗组37例，男13例，女24例；单膝发病29例，双膝8例，共45膝。对照组34例，男11例，女34例；单膝发病27例，双膝7例，共41膝。

1.2研究方法

1.2.1治疗方法

采用随机对照的研究方法，治疗组予以本发明骨筋丸(规格：0.3g，剂型：胶囊剂)治疗，每天3次，每次2-3粒，4周为一疗程；对照组服用戴芬胶囊(先锋医药有限公司，规格：75mg，剂型：胶囊剂)75mg，每天1次，4周为一疗程。2个疗程后作疗效对比。治疗期间所有患者避免负重，尽量休息。

1.2.2观察指标

采用Lysholm膝关节功能评分，评价治疗前后患者的膝关节功能状况。该评分有疼痛、不稳定、绞锁、肿胀、上下楼梯、下蹲、跛行、需要支持等8个指标，满分100分，正常应在84分以上，66-84分为尚可，少于65分为差。

1.2.3疗效评价标准

根据治疗前后进行Lysholm评分，采用以下公式计算改善率＝(治疗后评分-治疗前评分)/(满分-治疗前评分)。根据改善率将疗效分为缓解、显效、有效和无效。改善率为100％为缓解，改善率＞60％为显效，改善率为25％-60％为有效，改善率＜25％为无效。在治疗前后所有研究对象均做血常规、尿常规、便常规、血沉、血糖、肝功、肾功能检查。

1.3结果

1.3.1一般资料分析

采用随机对照的研究方法，骨筋丸组与戴芬胶囊组在年龄、性别、病程等方面均具有可比性，经统计学处理无显著性差异(P＞0.05)。

1.3.2临床疗效分析

本研究对71例膝骨性关节炎患者共86膝分别进行骨筋丸及戴芬胶囊口服，2个疗程共8周，停药后4周进行疗效总结，结果表明两组均可明显缓解疼痛，改善患者膝关节功能，骨筋丸组总有效率为89.2％，戴芬胶囊组总有效率为88.2％，两组治疗前后膝关节Lysholm功能评分比较有显著性差异(P＜0.05)，组间比较无差异(P＞0.05)。见表1-2

表1 两组治疗前后Lysholm评分

组别	治疗前	治疗后
			治疗组	32.54±10.22	79.82±12.32
对照组	31.96±11.04	78.91±11.67

两组治疗前后比较P＜0.05，差别有统计学意义。

表2 两组治疗后改善率比较

组别

例数

缓解

显效

有效

无效

总有效率

治疗组

37

6(16.2％)

11(29.7％)

62(43.2％)

4(10.8％)

89.2％

对照组

34

4(11.8％)

11(32.4％)

15(44.1％)

4(11.8％)

88.2％

两组组间比较P＞0.05，差别无统计学意义。

1.4.结论

两组疗效评定结果所示，治疗组总有效率为89.2％，对照组总有效率为88.2％，两组治疗前后比较，差别无统计学意义(P＞0.05)；两组治疗前后自身比较，差别有统计学意义(P＜0.05)，两组间比较差别无统计学意义(P＞0.05)。综上，骨筋丸胶囊组与戴芬胶囊组对早、中期膝骨性关节炎均有明显的治疗作用，能有效缓解疼痛和改善患者膝关节的功能状态，从而促进和提高患者的生活质量。

2骨筋丸对颈椎病的临床实验

2.1一般资料

本组诊断参考第二届颈椎病专题座谈会议纪要所定颈椎病诊断分型标准，确诊为颈椎病100例，随机分为治疗组及对照组。治疗组60例，男36例，女24例；年龄24-68岁，平均41岁；病程3个月18年，平均5年；职业：教师21例，会计12例，农民7例，司机20例；其中颈型7例，神经根型26例，椎动脉型25例，交感神经1型例，脊髓型1例，对照组40例，情况与治疗组相似。

2.2治疗方法

对照组：采取牵引后按摩：取坐位，头轻度前屈，颈椎带牵引，重量因人而异，约3-6Kg，每次30min，每日1次，15次为1个疗程。牵引后行手按摩，颈背部及患肢，每次20min，15次为1个疗程。

治疗组：既常规牵引后按摩重量外加口服骨筋丸胶囊，每日3次，每次2-3粒，连续15天为1个疗程。

2.3疗效评定标准与结果

2.3.1疗效标准

优：临床症状完全消失，活动功能恢复，能恢复原工作。

良：疼痛消失，活动仍受限，能恢复原工作。

可：疼痛症状明显减轻，能从事轻工作。

差：临床症状无改善。

2.3.2结果见表3。经统计学处理，治疗组优于对照组(P＜0.01)。疗程：治疗组最短8天，最长30天，平均15天；对照组最短12天，最长45天，平均20天。疗效差的1例，属病情较重脊髓型颈椎病患者。

表3 两组疗效比较

组别	例数	优	良	可	差	总有效率％
							治疗组	60	41	12	6	1	53％
对照组	40	18	6	15	1	24％

半年后随访，治疗组有10例复发，对照组11例复发，复发率分别为18.9％和45.8％，两组比较差异有显著意义(P＜0.05)

2.4结论：骨筋丸胶囊为治疗颈椎病的有效药物。

3.骨筋丸胶囊镇痛作用药效学研究

3.1材料

3.1.1实验药物 本发明骨筋丸胶囊；市售骨筋丸胶囊，哈药集团三精千鹤制药有限公司生产，国药准字：Z20063516，批号20100802。万通筋骨片，通化万通药业股份有限公司生产，国药准字：Z20025183，批号070212M。盐酸吗啡，沈阳第一制药厂生产，辽卫药准字(1996)第002747号，批号980402。

3.1.2动物 健康ICR品系小白鼠，18-22g，购自西安交通大学医学院实验动物中心。室温在20-25℃，相对湿度为38％-41％，人工照明，明暗各12H，供固体饲料和自来水，自由摄食饮水，良好通风。每日打扫室内卫生2次，保持室内没有明显的氨臭味。

3.1.3仪器 YLS-6B智能热板仪，山东省医学科学院设备站生产，型号：YLS-6B，编号：0060900257；YLS-12A鼠尾光照测痛仪，山东省医学科学院设备站生产，型号：YLS-12A，编号：006080058，YLS-Q1型小鼠固定筒架，山东省医学科学院设备站生产，型号：YLS-Q1。

3.2方法

3.2.1本发明骨筋丸胶囊对小鼠热板法痛阈的影响 选取(55±0.5)℃热板上筛选合格雌性小白鼠药(5S＜舔后足时间＜30S)120只，随机分为7组，每组12只，每日给药1次，每10g体重0.2ml，除吗啡组外，其余各组连续3天，分别灌胃给药，最后一次给药后45min、90min测定小鼠60S内舔后足时间，大于60S以60S计。

3.2.2本发明骨筋丸胶囊对醋酸扭体法小鼠药扭体次数的影响 小鼠98只，雌雄兼备，随机分为7组，组别、给药剂量、途径、容量同3.2.1，连续给药6天。于末次给药后45min腹腔注射0.7％冰醋酸0.1ml/10g，记录注射后20min内扭体次数。

3.2.3本发明骨筋丸胶囊对光照甩尾潜伏期的影响

雌性小鼠70只随机分为7组，组别、给药剂量、途径、容量同3.2.1，连续给药5天。于末次给药后45min测定小鼠甩尾时间。

3.3结果

3.3.1本发明骨筋丸胶囊对小鼠热板法痛阈时间的影响

由表4可知，本发明骨筋丸胶囊、市售骨筋丸胶囊、万通筋骨片在给药45min后明显延长痛阈时间，并且可持续到90min。

与对照组比*P＜0.05，**P＜0.01(下同)

3.3.2本发明骨筋丸胶囊对醋酸扭体法小鼠扭体次数的影响

由表5可知，本发明骨筋丸胶囊小、中、大剂量组对醋酸扭体法小鼠扭体次数与对照组比较有显著减少。

3.3.3本发明骨筋丸胶囊对光照甩尾法小鼠甩尾潜伏期的影响

由表6可知，与对照组比较各组均有延长小鼠甩尾时间的作用，且与对照组比甩尾潜伏期延长百分率本发明骨筋丸胶囊小、中、大剂量组高于市售骨筋丸胶囊、万通筋骨片。

表5骨筋丸胶囊小鼠醋酸扭体法镇痛试验

表6本发明骨筋丸胶囊小鼠光热甩尾镇痛试验

3.4结论：本发明骨筋丸胶囊能明显延长小鼠痛阈时间，减少扭体次次，延长甩尾潜伏期，该药具有明显镇痛作用，且该作用呈明显量效关系。其镇痛作用优于同类中药复方制剂骨筋丸胶囊、万通筋骨片。

(三)本发明骨筋丸胶囊的急性毒性及耐受性研究

1.实验材料

1.1动物昆明种小鼠，体重18-20g，由山西医科大学实验动物中心提供，实验动物合格证号：晋医动字第07-0102；于(20±2)℃恒温室内饲养。全价营养颗粒饲料及消毒垫料均由山西医科大学实验动物中心提供。

1.2药物 骨筋丸胶囊由哈药集团三精千鹤制药有限公司提供。批号20100801。用时以0.5％CMC配制成所需浓度混悬液应用。

2实验方法

2.1急性毒性试验 根据预试结果，取小鼠分别按体重随机分为6组，每组10只，雌雄各半。组间比为1∶0.85。药液用0.5％CMC配成所需浓度，小鼠给药前禁食禁水16H，按体重每20g给药0.4ml，观察7d中小鼠中毒反应，累计7d中各组鼠死亡数。用NDST统计软件程序“Bliss法”计算LD₅₀及其95％可信限。

2.2蓄积性毒性及耐受性试验 根据文献用蓄积系数测定法中的剂量定期递增染毒法实验，根据实验前测定骨筋丸LD₅₀，而后再取动物40只，随机分成给药组和对照组，每组雌雄各10只，给药组每天给药，4d为一期，每期递增1次，每期称重1次，开始给0.1 LD₅₀量，以后按等比级数1.8倍逐期递增，连续给药20d。按蓄积性指数K＝LD₅₀(总剂量)/LD₅₀(单剂量)计算蓄积性指数K值。如未见动物死亡或死亡数少于50％，则对照组和给药组都给1次LD₅₀量，测定动物死亡率，计算给药组动物死亡率与对照组动物死亡及比值，以观察动物在小剂量长期给药情况下是否出现药物的耐受性。

3实验结果

3.1急性毒性试验 小鼠ig骨筋丸后很快出现兴奋症状，活动明显增多，烦燥不安，最后四肢出现强直性惊厥，很快死亡。死亡时间发生在15min内，少数在2H内。结果见表1。计算得LD₅₀为(1.2207±0.1563)g/Kg，95％可信限为1.067 5-1.380 1g/Kg。

表7 NDST统计软件程序“Bliss”法计算LD₅₀及其95％可信限

3.2蓄积性毒性试验 给药剂量及时间见表8。小鼠蓄积性毒性试验结果见表9。

表8 给药剂量及时间表

表9 蓄积性毒性试验实验结果表

结果显示，实验20d时，本发明骨筋丸胶囊经口灌胃对小鼠的总量为10.928g/Kg。按蓄积性指数K＝LD₅₀(总剂量)/LD₅₀(单剂量)计算，蓄积性指数K＞5，表明本发明骨筋丸胶囊经口灌胃对小鼠无蓄积性毒性。

3.3耐受性试验 取蓄积性毒性实验后对照组及用药组给药20d后存活小鼠，再一次灌胃给予相当于LD₅₀剂量的本发明骨筋丸胶囊后，记录动物死亡率，观察对小鼠是否具有耐受性。结果：对照组死亡率为70％(14/20)，用药组死亡率为0％(15/15)；表明本发明骨筋丸胶囊经口灌胃对小鼠具有明显耐受性。

上述各实验结果表明，本发明制备的骨筋丸胶囊在治疗肥大性脊椎炎，颈椎病跟骨刺，增生性关节炎，大骨节病症状时，相对于同类药品具有活性成分提取完全、服用剂量小、崩解速度快、批量生产节约能源、药效稳定无急毒及蓄积性毒性等显著优点，同时微米技术加工的药粉粒度更加细微均匀，使药物的总表面积增加，服用后与胃肠黏膜的接触面积也随之增加，能更好地在胃肠道里分散、溶解和吸收，大大提高了药物的生物利用度。

Claims (4)

1.一种治疗肥大性脊椎炎，颈椎病跟骨刺，增生性关节炎，大骨节病的中药，其特征在于取乳香13.5g、没药23g、白芍45.5g、延胡索(醋制)13.5g、三七23g、木香13.5g、红花23g、郁金45.5g、独活91.5g、牛膝23g、秦艽91.5g、桂枝23g、血竭13.5g、马钱子(制)13.5g，以上十四味，乳香、没药、延胡索、马钱子、三七、血竭采用气流粉碎机将浸膏粉碎成超细粉体a，混匀；郁金、木香、独活、桂枝采用酶解法，得清膏b，药渣加入白芍、红花、牛膝、秦艽四味采用二氧化碳超临界萃取法得上清液c，将b与c合并，浓缩至稠膏烘干，采用气流粉碎机将浸膏粉碎成超细粉体d，将a与d混匀装囊制成1000粒。

2.根据权利要求1所述药物的制备方法，其特征在于采用气流粉碎机将浸膏粉碎成粒径＜50微米的超细粉体。

3.根据权利要求1所述药物的制备方法，其特征在于采用纤维素酶，50-70％乙醇酶解，乙醇量为药材量的5-9倍，酶解温度为30-50℃，PH值3-5，酶用量5-15mg/g，酶解时间为0.5-3h。

4.根据权利要求1所述药物的制备方法，其特征在于二氧化碳超临界萃取法提取，萃取压力20-50Mpa，萃取温度30-60℃，分离器压力5-10Mpa，分离器温度40-60℃，分离时间2-6小时，二氧化碳流量为20-30L/H。