CN102429913B

CN102429913B - 复方丙酸氯倍他索脂质体及其制剂

Info

Publication number: CN102429913B
Application number: CN 201110412475
Authority: CN
Inventors: 付劼; 周海滨; 张新明
Original assignee: JIANGSU SEMPOLL PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: Jiangsu Zhiyuan Pharmaceutical Co.,Ltd.
Priority date: 2011-12-13
Filing date: 2011-12-13
Publication date: 2013-04-10
Anticipated expiration: 2031-12-13
Also published as: CN102429913A

Abstract

本发明提供了一种复方丙酸氯倍他索脂质体及其制剂，主要用于治疗寻常性银屑病、皮炎、湿疹等疾病。它采用中性合成磷脂、带正电荷的脂质、胆固醇制备的脂质体能同时包裹丙酸氯倍他索和维A酸，并添加乳膏基质或凝胶基质，最终制成复方丙酸氯倍他索脂质体乳膏剂或脂质体凝胶剂，与普通乳膏剂相比，脂质体制剂具有更高的皮肤药物滞留量，更少的皮肤透过率，可以提高药物在局部皮肤的含药量，提高治疗指数，同时减少透皮吸收药量，从而降低药物的毒副作用。

Description

复方丙酸氯倍他索脂质体及其制剂

技术领域

本发明涉及一种复方丙酸氯倍他索和全反式维A酸脂质体的皮肤用组合物，主要用于治疗寻常性银屑病、皮炎、湿疹等疾病。

背景技术

丙酸氯倍他索(CP) 是一种强效激素, 具有较强的抗炎、抗瘙痒和血管收缩作用, 广泛用于治疗慢性湿疹、神经性皮炎、银屑病和其他皮质激素外用治疗有效的皮肤疾病。丙酸氯倍他索也是在西医治疗银屑病的几种常用方法中皮质类固醇药物的最主要代表。由于属于强效皮质类固醇，丙酸氯倍他索在使用过程中会产生比较明显的毒副作用，例如，可在用药部位产生红斑、灼热、瘙痒等刺激性以及毛囊炎、皮肤萎缩变薄、毛细血管扩张等症状，还可引起皮肤干燥、多毛、萎缩纹、增加感染的易感性等。长期用药可能引起皮质功能亢进症，表现为多毛、痤疮、满月脸、骨质疏松等症状，因此此种药物被严格限制在14天内使用。

维A酸可由视黄醇与视黄醛在体内转变而来,因末端-COOH链方向不同可构成两种维A酸：全反式维A酸(ATRA)和13-顺式维A酸(又称异维A酸，13-CRA)。本发明中所提到的维A酸所指的是“全反式维A酸”。全反式维A酸主要是调节表皮细胞的有丝分裂和更新，使病变皮肤的增生和分化恢复正常。临床上主要用于治疗寻常痤疮、银屑病、鱼鳞病、扁平苔癣、毛发红糠疹、毛囊角化病、鳞状细胞癌及黑色素瘤等疾病。外用维A酸的副作用主要是会引起比较强烈的皮肤刺激症状，如灼感、红斑及脱屑。另外动物实验表明，无论口服还是外用维A酸均会产生明确的胚胎毒性及致畸性，并可引起母体系统毒性。

丙酸氯倍他索和维A酸均为常用的外用皮肤病治疗药物，但使用过程中会产生皮肤刺激、皮肤萎缩等副作用，另外，药物透皮吸收进入血液循环系统则会产生系统性的毒副作用。为了降低副作用，采用制剂手段将其药物包裹于脂质体中，利用脂质体的类似细胞结构和所具有的生物膜特性和功能, 通过水合作用、融合作用以及穿透作用，脂质体可以携载活性物质透过角质层，并使更多药物滞留在表皮与真皮之间，达到相应的作用部位并维持一定时间，使吸收进入血液系统的功效分子数量减少, 可以提高药物在局部的疗效，有效避免全身不良反应。的皮肤外用

中国专利（CN 1234365C）公开了一种丙酸氯倍他索和维A酸的复方制剂，通过两种药物的配伍制剂组合，丙酸氯倍他索可以减轻维A酸的皮肤刺激性症状，而维A酸可以减轻丙酸氯倍他索引起的皮肤萎缩。临床实验结果表明，组成复方后，两者疗效增强，不良反应减轻。但依然会出现维A酸引起的皮肤刺激以及丙酸氯倍他索引起的皮肤萎缩等副作用。

中国专利（CN 100346773C）公开了一种丙酸氯倍他索的脂质体制剂，但该脂质体制剂粒度范围为2000nm-5000nm，粒度范围大，不利于药物穿透角质层发挥作用。

刘娟娟等报道了采用卵磷脂、胆固醇作为膜材，制备了一种丙酸氯倍他索的脂质体制剂，平均粒度分布为140 ±56.8 nm，包封率为90.1±2.3%，动物实验表明，脂质体制剂的治疗指数优于普通的乳膏制剂（南京医科大学学报( 自然科学版), 第28 卷,第10 期，P1240页）。张敬如等报道了采用磷脂、胆固醇作为膜材，制备了一种维A酸的脂质体制剂，平均粒度分布为351.5±178.6 nm, 三种不同配方脂质体的包封率分别为33.98%、42.11%、70.34%,包封率随着脂质用量的增加而升高(第三军医大学学报, 第28卷，第8期，P807页)。上述报道的脂质体制剂均为丙酸氯倍他索或维A酸的单方制剂，且采用的是天然磷脂，制备出的脂质体制粒度比较大、包封率不高且容易泄漏。郑佳昳等采用卵磷脂以及胆固醇为膜材，应用醋酸钙梯度法制备的维A酸脂质体，包封率率高（90.48%），粒度小（平均粒度35.8nm）,但其制备原理是利用维A酸为弱酸药物,能与脂质体双分子层内的钙离子结合生成溶解度小的盐而不易透过双分子层, 从而提高了包封率,减少了药物的泄漏。丙酸氯倍他索不能与钙离子结合,因此该方法不能同时兼顾维A酸和丙酸氯倍他索脂质体的制备（中国药房，2006 年，第17 卷，第8 期，P579页）。

为了克服现有技术的缺陷，我们采用中性合成磷脂、带正电荷的脂质以及胆固醇制备复方丙酸氯倍他索和维A酸脂质体制剂，本发明的脂质体制备技术可以同时包裹两种药物，药物包封率高、粒度分布小而均匀。与普通的复方丙酸氯倍他索维A酸软膏剂相比，在皮肤中，脂质体制剂具有更高的药物滞留量以及更低的药物透过率，可以达到更好的皮肤靶向效果，减少药物的透皮吸收进入血液循环的量，达到增加药物疗效，降低药物毒副作用目的。

发明内容

本发明目的是提供一种含有丙酸氯倍他索和维A酸的复方脂质体及其制剂。其特征在于它采用中性合成磷脂、带正电荷的脂质、胆固醇作为脂质体基本材料包裹药物制备成脂质体溶液，以脂质体溶液为水相，添加适量的油相基质、乳化剂以及其他药学上可接受的辅料，制备成复方丙酸氯倍他索和维A酸脂质体乳膏剂；或以脂质体溶液为溶剂，添加凝胶基质和其他药学上可接受的辅料，制备成凝胶剂。

本发明的组合物采用中性合成磷脂、带正电荷的脂质、胆固醇作为脂质体基本材料包裹药物制备成脂质体溶液。本发明意外地发现，添加了带正电荷的脂质后，该脂质体可以同时高效率地包裹丙酸氯倍他索和维A酸，包封率超过90%，粒度范围小而均匀，平均粒径小于200nm。该脂质体制剂与普通的外用软膏剂相比，活性成份在皮肤中滞留量更高，透过皮肤的百分率相对更低。

本发明提供的复方丙酸氯倍他索和维A酸的脂质体制剂，先将药物包裹制备成药物脂质体溶液。每1000mg脂质体溶液中含有：丙酸氯倍他索0.1-5mg、维A酸0.1-5mg、中性合成磷脂10-20mg、带正电荷的脂质 2-10mg、胆固醇 5-20mg。所述中性合成磷脂与带电荷的脂质的用量重量份优先配比为5：1；所述中性合成磷脂与胆固醇的用量重量份优先配比为2：1，所述中性合成磷脂由相变温度高于体温的磷脂以及相变温度低于体温的磷脂以1-3：1的比例混合使用，使最终的脂质体制剂即有一定的柔性，又具有适当的膜稳定性，减少药物泄漏。相变温度高于体温的磷脂选自氢化磷脂（HSPC）或二硬脂酰磷脂酰胆碱或二棕榈酰磷脂酰胆碱；相变温度低于体温的磷脂选自二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱或二月桂酰磷脂酰胆碱；带正电荷的脂质选自硬脂酰胺。

本发明提供的脂质体制剂同时包裹丙酸氯倍他索和维A酸，并意外地发现在脂质材料中添加带正电荷的脂质可以明显提高维A酸的包封率，并通过2种以上的不同相变温度的中性合成磷脂的配比，制备出能同时包裹丙酸氯倍他索和维A酸的脂质体制剂。

本发明提供的复方丙酸氯倍他索和维A酸的脂质体制剂，脂质材料中含有带正电荷的脂质。由于生理条件下细胞表面带负电荷, 因此脂质体带正电有利于包封物存留于皮肤。另外维A酸为弱酸性物质，电离后带有负电荷，因此与脂质膜表面电荷相反。药物与膜产生静电作用而紧密结合, 减少渗漏。此外带电荷的脂质将增加脂质双层间的阻力, 这样既可以得到较大的包封体积, 又能提高稳定性。

本发明提供的复方丙酸氯倍他索和维A酸的脂质体制剂，其制备步骤为：药物与脂类材料溶解于6倍重量的乙醇，然后将此药液经注射器缓缓注入加热至50℃（并用磁力搅拌）50mmol/L的pH7.4磷酸盐缓冲液中，加完后，不断搅拌至乙醇除尽为止，再将脂质体混悬液通过高压乳匀二次，最后通过100nm聚碳酸酯膜，即得脂质体溶液。所得的脂质体溶液中丙酸氯倍他索包封率大于90%；维A酸的包封率大于90%；平均粒度小于200nm。以药物的脂质体溶液为水相，添加适量的油相基质、乳化剂以及其他药学上可接受的辅料，制备成复方丙酸氯倍他索和维A酸脂质体乳膏剂；或以脂质体溶液为溶剂，添加凝胶基质和其他药学上可接受的辅料，制备成凝胶剂。

本发明提供的复方丙酸氯倍他索和维A酸的脂质体制剂，可以制成乳膏剂，所述乳膏剂由下列用量为重量份的原材料配置而成：药物的脂质体溶液400-700，油相基质50-300，乳化剂 30-200，维生素E 1-20，尼泊金乙酯 0.1-5，纯化水 100-150，油相基质选自为硬脂酸、液体石蜡、凡士林、十八醇中的一种或几种；乳化剂选自吐温80、月桂醇硫酸钠、单硬脂酸甘油酯中的一种或几种。

制备步骤：取油相基质加热至80℃融熔；另取包载药物的脂质体水溶液，加纯化水稀释，加入乳化剂、尼泊金乙酯搅拌溶解；在80℃条件，将脂质体水相以细流加入至油相，边加边搅拌，至冷凝至室温。即得乳膏剂。

本发明提供的复方丙酸氯倍他索和维A酸的脂质体制剂，可以制成凝胶剂，所述凝胶剂由下列用量为重量份的原料配置而成：药物的脂质体溶液 400-700，凝胶基质5-50，甘油30-150，乙醇 30-150，尼泊金乙酯0.1-5，三乙醇胺5-60，纯化水200-300，凝胶基质选自卡波姆934、940、941中的一种或几种联合使用；

制备步骤：取载药物的脂质体水溶液中，加纯化水稀释，加入凝胶基质分散、充分溶涨，依次加入甘油、乙醇、尼泊金乙酯、三乙醇胺，搅拌均匀，即得。

本发明与现有的技术的优点在于：本发明脂质体的制备技术能兼顾丙酸氯倍他索和维A酸的包封率，且制备的脂质体粒度小而均匀，平均粒径小于200nm,有利于药物透过角质层并滞留与皮肤部位。体外研究实验结果表明：1、见说明书附图1，普通乳膏剂的丙酸氯倍他索药物体外透皮累积释放百分率明显高于脂质体乳膏剂或脂质体凝胶剂；2、见说明书附图2，普通乳膏剂的维A酸药物体外透皮累积释放百分率明显高于脂质体乳膏剂或凝胶剂；3、见说明书附图3，普通乳膏剂的皮肤中的含药量明显低于脂质体乳膏剂或凝胶剂。

本发明采用鼠阴道上皮和鼠尾鳞片表皮实验模型,模拟银屑病的两种重要的病理改变,进行药效学试验。结果表明，脂质制剂的药效明显优于同等浓度的普通乳膏制剂，甚至优于浓度高1倍的普通乳膏制剂。

附图说明

附图1，本发明的丙酸氯倍他索的体外累积释放试验效果图。

附图2，本发明的维A酸的体外累积释放试验效果图。

附图3，本发明的丙酸氯倍他索和维A酸的体外皮肤滞留实验效果图。

以下实施例主要是用于进一步说明本发明，而不是限制本发明的范围。

实施例1：药物脂质体溶液的制备

表1 复方丙酸氯倍他索维A酸脂质体溶液的处方表

名称	量，g/100g
		丙酸氯倍他索	0.10
维A酸	0.05
		HSPC	1.00
二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱	1.00
		硬脂酰胺	0.40
胆固醇	1.00
		pH7.4磷酸盐缓冲液	96.35

制备工艺：取丙酸氯倍他索、维A酸、HSPC、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、硬脂酰胺、胆固醇溶解于6倍重量的乙醇中，然后将此药液经注射器缓缓注入加热至50℃（并用磁力搅拌）的pH7.4磷酸盐缓冲液中，加完后，不断搅拌至乙醇除尽为止，再将脂质体混悬液通过高压乳匀二次，最后通过100nm聚碳酸酯膜，即得脂质体溶液。

所得的脂质体溶液中丙酸氯倍他索包封率为92.3%；维A酸的包封率大于98.7%；平均粒度小于112nm。

实施例2：药物脂质体溶液的制备

表2复方丙酸氯倍他索维A酸脂质体溶液的处方表

名称	量，g/100g
		丙酸氯倍他索	0.50
维A酸	0.50
		二棕榈酰磷脂酰胆碱	1.50
二月桂酰磷脂酰胆碱	0.50
		硬脂酰胺	0.20
胆固醇	0.70
		pH7.4磷酸盐缓冲液	96.10

制备工艺：取丙酸氯倍他索、维A酸、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、硬脂酰胺、胆固醇溶解于6倍重量的乙醇中，然后将此药液经注射器缓缓注入加热至50℃（并用磁力搅拌）的pH7.4磷酸盐缓冲液中，加完后，不断搅拌至乙醇除尽为止，再将脂质体混悬液通过高压乳匀二次，最后通过100nm聚碳酸酯膜，即得脂质体溶液。

所得的脂质体溶液中丙酸氯倍他索包封率为89.7%；维A酸的包封率大于92.4%；平均粒度小于134nm。

实施例3：药物脂质体溶液的制备

表3复方丙酸氯倍他索维A酸脂质体溶液的处方表

名称	量，g/100g
		丙酸氯倍他索	0.10
维A酸	0.05
		HSPC	0.50
二月桂酰磷脂酰胆碱	0.50
		硬脂酰胺	0.50
胆固醇	1.00
		pH7.4磷酸盐缓冲液	97.35

制备工艺：取丙酸氯倍他索、维A酸、HSPC、二月桂酰磷脂酰胆碱、硬脂酰胺、胆固醇溶解于6倍重量的乙醇中，然后将此药液经注射器缓缓注入加热至50℃（并用磁力搅拌）的pH7.4磷酸盐缓冲液中，加完后，不断搅拌至乙醇除尽为止，再将脂质体混悬液通过高压乳匀二次，最后通过100nm聚碳酸酯膜，即得脂质体溶液。

所得的脂质体溶液中丙酸氯倍他索包封率为88.2%；维A酸的包封率大于91.5%；平均粒径为145nm。

实施例4：药物脂质体溶液的制备

表4复方丙酸氯倍他索维A酸脂质体溶液的处方表

名称	量，g/100g
		丙酸氯倍他索	0.20
维A酸	0.10
		二棕榈酰磷脂酰胆碱	0.80
二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱	0.80
		硬脂酰胺	0.20
胆固醇	0.90
		pH7.4磷酸盐缓冲液	97.00

制备工艺：取丙酸氯倍他索、维A酸、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、硬脂酰胺、胆固醇溶解于6倍重量的乙醇中，然后将此药液经注射器缓缓注入加热至50℃（并用磁力搅拌）的pH7.4磷酸盐缓冲液中，加完后，不断搅拌至乙醇除尽为止，再将脂质体混悬液通过高压乳匀二次，最后通过100nm聚碳酸酯膜，即得脂质体溶液。

所得的脂质体溶液中丙酸氯倍他索包封率为91.3%；维A酸的包封率大于95.7%；平均粒径为115nm。

实施例5：脂质体制剂的制备

表5 复方丙酸氯倍他索维A酸脂质体的处方表

名称	量，g/100g
		丙酸氯倍他索	0.01
维A酸	0.01
		二棕榈酰磷脂酰胆碱	0.50
二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱	0.50
		硬脂酰胺	0.20
胆固醇	0.50
		pH7.4磷酸盐缓冲液	98.25

制备工艺：取丙酸氯倍他索、维A酸、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、硬脂酰胺、胆固醇溶解于乙醇，然后将此药液经注射器缓缓注入加热至50℃（并用磁力搅拌）的pH7.4磷酸盐缓冲液中，加完后，不断搅拌至乙醇除尽为止，再将脂质体混悬液通过高压乳匀二次，最后通过100nm聚碳酸酯膜，即得脂质体溶液。

所得的脂质体溶液中丙酸氯倍他索包封率为96.3%；维A酸的包封率大于99.2%；平均粒径为115nm。

实施例6：复方丙酸氯倍他索脂质体乳膏的制备（每克乳膏剂中含丙酸氯倍他索0.5mg；维A酸0.25 mg），原料用量为重量份。

实施例1制备的脂质体溶液500，硬脂酸100，液体石蜡100，吐温80 75，单硬脂酸甘油酯50，维生素E 20，尼泊金乙酯5，纯化水150；

制备步骤：取硬脂酸、液体石蜡、单硬脂酸甘油酯、维生素E加热至80℃融熔；另取包载药物的脂质体水溶液，加纯化水稀释，加入吐温80、月桂醇硫酸钠、尼泊金乙酯搅拌溶解；在80℃条件，将脂质体水相以细流加入至油相，边加边搅拌，至冷凝至室温。即得O/W乳膏剂。

实施例7：复方丙酸氯倍他索脂质体乳膏的制备（每克乳膏剂中含丙酸氯倍他索0.5mg；维A酸0.25 mg），原料用量为重量份。

实施例1制备的脂质体溶液500，凡士林50，十八醇100，液体石蜡100，吐温80 75，单硬脂酸甘油酯50，维生素E 20，尼泊金乙酯 5，纯化水100；

制备步骤：取液体石蜡、凡士林、十八醇、单硬脂酸甘油酯、维生素E加热至80℃融熔；另取包载药物的脂质体水溶液，加纯化水稀释，加入吐温80、月桂醇硫酸钠、尼泊金乙酯搅拌溶解；在80℃条件，将脂质体水相以细流加入至油相，边加边搅拌，至冷凝至室温。即得O/W乳膏剂。

实施例8：复方丙酸氯倍他索脂质体凝胶剂的制备（每克凝胶剂中含丙酸氯倍他索0.5mg；维A酸0.25 mg），原料用量为重量份。

实施例1制备的脂质体溶液500，卡波姆934 25，卡波姆940 25，甘油100，乙醇100，尼泊金乙酯5，三乙醇胺60，纯化水245；

制备步骤：取载药物的脂质体水溶液中，加纯化水稀释，加入卡波姆934、卡波姆940分散、充分溶涨，依次加入甘油、乙醇、尼泊金乙酯、三乙醇胺，搅拌均匀，即得。

实施例9：复方丙酸氯倍他索脂质体凝胶剂的制备（每克凝胶剂中含丙酸氯倍他索0.5mg；维A酸0.25 mg），原料用量为重量份。

实施例1制备的脂质体溶液500，卡波姆934 25，卡波姆941 25，甘油100，乙醇100，尼泊金乙酯5，三乙醇胺5，纯化水245；

制备步骤：取载药物的脂质体水溶液中，加纯化水稀释，加入卡波姆934、卡波姆941分散、充分溶涨，依次加入甘油、乙醇、尼泊金乙酯、三乙醇胺，搅拌均匀，即得。

实验一：体外释放试验。

采用实施例6制备的复方丙酸氯倍他索脂质体乳膏剂、实施例8制备的复方丙酸氯倍他索脂质体凝胶剂、以及复方丙酸氯倍他索软膏剂；进行体外透皮累计释放实验以及皮肤滞留实验，结果见说明书附图1和说明书附图2。

实验二：脂质体制剂对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂的影响。

取雌性小鼠50只，腹腔注射乙烯雌酚,0.2 mg/ 只，每天1次，连续3天给药。第4 天将小鼠随机等分A、B、C、D 、E 5组进行试验，分别于5组阴道内灌注空白生理盐水、低浓度复方丙酸氯倍他索乳膏（丙酸氯倍他索0.05%；维A酸0.025%）、高浓度复方丙酸氯倍他索乳膏（丙酸氯倍他索0.1%；维A酸0.05%）、复方丙酸氯倍他索脂质体乳膏（实施例6制备的样品）、复方丙酸氯倍他索脂质体凝胶（实施8制备的样品）各50mg，每天1次 ,连续3天给药。为排除细胞有丝分裂的日夜节律对实验结果的影响,最后一次给药1小时后，分别于各鼠腹腔注射秋水仙碱2mg·kg^- 1 (使纺锤体无法形成,有丝分裂停止于M期的中期而便于计数) 。6小时后处死小鼠, 切取阴道组织,作常规组织切片,用光学显微镜观察有丝分裂,计数300个基底细胞中的有丝分裂数,最后计算出每100 个基底细胞的有丝分裂数,即为有丝分裂指数(mitotic index , MI) 。结果见下表。

分组	药品名称	药物浓度（g/g）	分裂指数（MI)
				A	空白生理盐水	/	17.68±0.39
B	复方丙酸氯倍他索乳膏	丙酸氯倍他索0.05%；维A酸0.025%	10.34±0.19^a
				C	复方丙酸氯倍他索乳膏	丙酸氯倍他索0.1%；维A酸0.05%	6.14±0.21^a、b
D	复方丙酸氯倍他索脂质体乳膏	丙酸氯倍他索0.05%；维A酸0.025%	4.12±0.13^a、b、c
				E	复方丙酸氯倍他索脂质体凝胶	丙酸氯倍他索0.05%；维A酸0.025%	3.45±0.29^a、b、c

注：与A组比较，^aP<0.01；与B组比较，^bP<0.01；与C组比较，^cP<0.01。

t检验结果表明，治疗组（B组、C组、D组、E组）的分裂指数明显低于空白对照组（A组），有显著性差异（P<0.01）。脂质体组（D组、E组）的分裂指数明显低于相同浓度的乳膏组（B组），甚至低于高浓度的乳膏组（C组），有显著性差异（P<0.01）。

雌鼠阴道上皮模型是通过雌激素诱导小鼠处于雌激素周期时, 小鼠阴道上皮增殖活跃, 上皮细胞转换加快。注射秋水仙碱使上皮细胞有丝分裂周期停滞于有丝分裂中期, 观察药物对上皮细胞有丝分裂的影响。此模型用于评价药物对角阮细胞过度增生的抑制作用。试验结果显示，与空白对照组（A组）相比，治疗组（B组、C组、D组、E组）对上皮细胞有丝分裂有明显抑制作用，脂质体组（D组、E组）的抑制作用显著强于同浓度的乳膏剂组（B组），甚至显著强于浓度高1倍的乳膏剂组（C组）。

实验三：脂质体制剂小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成的影响。

取50只雄性小鼠随机分成5 组,分别以空白生理盐水、低浓度复方丙酸氯倍他索乳膏（丙酸氯倍他索0.05%；维A酸0.025%）、高浓度复方丙酸氯倍他索乳膏（丙酸氯倍他索0.1%；维A酸0.05%）、复方丙酸氯倍他索脂质体乳膏（实施例6制备的样品）、复方丙酸氯倍他索脂质体凝胶（实施8制备的样品）各50mg涂抹尾部，每天1次,连续涂药10 天后处死小鼠,取鼠尾根部1～3cm 表皮,常规组织切片。HE 染色，光镜下观察,凡是一个鳞片有连续成行的颗粒层细胞者，判定为有颗粒层形成的鳞片。计数每100 个鳞片中有颗粒层的鳞片数。结果见下表。

分组	药品名称	药物浓度（g/g）	分裂指数（MI)
				A	空白生理盐水	/	10.21±0.47
B	复方丙酸氯倍他索乳膏	丙酸氯倍他索0.05%；维A酸0.025%	25.12±0.23^a
				C	复方丙酸氯倍他索乳膏	丙酸氯倍他索0.1%；维A酸0.05%	36.32±0.98^a、b
D	复方丙酸氯倍他索脂质体乳膏	丙酸氯倍他索0.05%；维A酸0.025%	45.11±0.79^a、b、c
				E	复方丙酸氯倍他索脂质体凝胶	丙酸氯倍他索0.05%；维A酸0.025%	47.67±0.54^a、b、c

t检验结果表明，治疗组（B组、C组、D组、E组）的有颗粒层形成的鳞片数明显高于空白对照组（A组），有显著性差异（P<0.01）。脂质体组（D组、E组）的分颗粒层形成的鳞片数明显高于相同浓度的乳膏组（B组），甚至高于高浓度的乳膏组（C组），有显著性差异（P<0.01）。

小鼠尾部鳞片模型是基于小鼠尾部鳞片因表皮正常角化缺乏颗粒层, 其天然的角化形成与人类银屑病表皮相似, 故可模拟银屑病角化不全的原理。此模型可用于评价药物促进颗粒层形成的作用。试验结果显示，与空白对照组（A组）相比，治疗组（B组、C组、D组、E组）对颗粒层形成具有明显促进作用，脂质体组（D组、E组）的促进作用显著强于同浓度的乳膏剂组（B组），甚至显著强于浓度高1倍的乳膏剂组（C组）。

Claims

1.一种复方丙酸氯倍他索与维A酸的脂质体制剂，其特征是先将药物包裹制备成药物脂质体溶液，每1000 mg脂质体溶液中含有：丙酸氯倍他索0.1-5mg、维A酸0.1-5mg、中性合成磷脂10-20mg、带正电荷的脂质 2-10mg、胆固醇 5-20mg，所述中性合成磷脂由相变温度高于体温的磷脂以及相变温度低于体温的磷脂以1-3:1的比例混合使用，相变温度高于体温的磷脂选自HSPC或二硬脂酰磷脂酰胆碱或二棕榈酰磷脂酰胆碱；相变温度低于体温的磷脂选自二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱或二月桂酰磷脂酰胆碱；带正电荷的脂质选自硬脂酰胺，所述中性合成磷脂与带电荷的脂质的用量重量份比为5：1；中性合成磷脂与胆固醇的用量重量份比为2：1，所述脂质体制剂的丙酸氯倍他索和维A酸的包封率均在90%以上，平均粒径小于200nm。

2.一种根据权利要求1所述的脂质体制剂制成的乳膏剂，其特征所述乳膏剂由下列用量为重量份的原料配制而成：药物的脂质体溶液400-700，油相基质50-300，乳化剂30-200，维生素E 1-20，尼泊金乙酯0.1-5，纯化水100-150，所述油相基质选自为硬脂酸、液体石蜡、凡士林、十八醇中的一种或几种；所述乳化剂选自吐温80、月桂醇硫酸钠、单硬脂酸甘油酯中的一种或几种，其制备工艺如下：取油相基质加热至80℃融熔；另取包载药物的脂质体水溶液，加纯化水稀释，加入乳化剂、尼泊金乙酯搅拌溶解；在80℃条件，将脂质体水相以细流加入至油相，边加边搅拌，至冷凝至室温，即得乳膏剂。

3.一种根据权利要求1所述的脂质体制剂制成的凝胶剂，其特征是所述凝胶剂由下列用量为重量份的原料配制而成：药物的脂质体溶液 400-700，凝胶基质5-50，甘油30-150，乙醇 30-150，尼泊金乙酯0.1-5，三乙醇胺5-60，纯化水200-300，所述凝胶基质选自卡波姆934、940、941中的一种或几种联合使用，其制备工艺如下：取载药物的脂质体水溶液中，加纯化水稀释，加入凝胶基质分散、充分溶涨，依次加入甘油、乙醇、尼泊金乙酯、三乙醇胺，搅拌均匀，即得。