CN102422835A

CN102422835A - 一种血液保养液及其制备方法与应用

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Publication number: CN102422835A
Application number: CN2011103205495A
Authority: CN
Inventors: 王全立; 冯双利; 陆颖; 韩颖; 杜为; 陈民才; 陈廷友; 卓海龙
Original assignee: Affiliated Hospital of Academy of AMMS
Current assignee: Affiliated Hospital of Academy of AMMS
Priority date: 2011-10-20
Filing date: 2011-10-20
Publication date: 2012-04-25
Anticipated expiration: 2031-10-20
Also published as: CN102422835B

Abstract

本发明公开了一种血液保养液及其制备方法。该血液保养液是包含以下摩尔浓度组分的pH5.5的水溶液：枸橼酸钠88.85-90.00mmol/L，枸橼酸15.10-16.20mmol/L，无水葡萄糖136.50-146.60mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.00-14.31mmol/L，腺嘌呤5.30-5.58mmol/L，L-精氨酸2.20-3.00mmol/L。本发明从根本上改变血液保养液只为维持红细胞携氧功能的目的，赋予了库存血扩张血管和增加局部血液量的新功能，输注时提高血管舒张活性，增加组织灌流量，增加组织供血供氧，从而提高临床输血安全性和有效性，是血液保存和血液质量控制的一次革命。

Description

一种血液保养液及其制备方法与应用

技术领域

本发明属于血液保存领域中的血液保养液及其制备方法与应用。

背景技术

随着我国医疗技术的不断进步，输血量也在逐年递增，我国2006年用血量为1600吨，2009年达到3000吨。输血在救治失血和贫血病人中发挥着重要的作用。目前，应用的血液保养液主要有ACD、CPD或CPDA，他们的主要功能就是抗凝，并为红细胞提供能量。然而，一些研究表明：输库存血对病人的生存和健康存在着很大的威胁，输血会引起重症病人局部器官组织的严重缺血、缺氧和再灌注损伤，尤其是心脏功能不全的病人表现更为明显。主要原因是血液在现有保养液中保存时，一氧化氮急剧下降，导致外周组织的血管不能有效扩张，引起组织或器官供血不足。迄今为止，国内关于改善库存血这一缺陷的研究还未见报道。国外有研究者用直接冲NO的方法来增加库存血中NO的含量，达到扩张血管，增加组织供氧的目的。但是直冲NO要开放性操作，增加了细菌污染的几率，同时，很难控制S-亚硝基血红蛋白(SNO-Hb)的生成量，导致NO含量过多，从而引起多器官衰竭等多种严重的副作用。

发明内容

为解决现有血液保养液只具有提供能量和抗凝的功能，且对血液副作用大(使血液中一氧化氮含量急剧下降，从而导致组织或器官供血不足)的缺陷，本发明提供了一种可提高库存血的乏氧性血管舒张功能，输注时提高血管舒张活性，增加组织灌流量，改善组织的缺血缺氧(增加组织供血供氧)，从而提高临床输血安全性和有效性的血液保养液。

为解决上述技术问题，本发明采取以下技术方案：一种血液保养液，是包含以下摩尔浓度组分的pH 5.5的水溶液：枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)88.85-90.00mmol/L，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)15.10-16.20mmol/L，无水葡萄糖136.50-146.60mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.00-14.31mmol/L，腺嘌呤5.30-5.58mmol/L，L-精氨酸2.20-3.00mmol/L。

优选的本发明血液保养液的配方是包含以下摩尔浓度组分的pH 5.5的水溶液：枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)89.40mmol/L，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)15.56mmol/L，无水葡萄糖141.50mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.20mmol/L，腺嘌呤5.46mmol/L，L-精氨酸2.60mmol/L。

另一优选的本发明血液保养液的配方是包含以下摩尔浓度组分的pH 5.5的水溶液：枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)88.85mmol/L，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)15.10mmol/L，无水葡萄糖136.50mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.00mmol/L，腺嘌呤5.30mmol/L，L-精氨酸2.20mmol/L。

再一优选的本发明血液保养液的配方是包含以下摩尔浓度组分的pH 5.5的水溶液：枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)89.2mmol/L，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)15.36mmol/L，无水葡萄糖139.10mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.1mmol/L，腺嘌呤5.38mmol/L，L-精氨酸2.40mmol/L。

还一优选的本发明血液保养液的配方是包含以下摩尔浓度组分的pH 5.5的水溶液：枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)89.7mmol/L，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)15.91mmol/L，无水葡萄糖143.10mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.25mmol/L，腺嘌呤5.52mmol/L，L-精氨酸2.80mmol/L。

又一优选的本发明血液保养液的配方是包含以下摩尔浓度组分的pH 5.5的水溶液：枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)90.0mmol/L，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)16.20mmol/L，无水葡萄糖146.60mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.31mmol/L，腺嘌呤5.58mmol/L，L-精氨酸3.00mmol/L。

本发明的第二个目的是提供一种上述血液保养液的制备方法。

本发明所提供的血液保养液的制备方法，可包括以下步骤：

1)按上述配方将浓度换算成重量称取各组分；

2)将步骤1)中的各组分混合均匀后用医用水溶解，定容，调pH值至5.5，得到血液保养液。

具体来讲，制备1L本发明血液保养液的方法，可包括以下步骤：

1)按配方称取各组分：如按实施例3的组配，称取枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)26.29g，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)2.99g，无水葡萄糖25.49g，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)1.70g，腺嘌呤0.74g，L-精氨酸0.45g；

2)将步骤1)中的各组分混合均匀后用医用水溶解，定容至1L，调pH值至5.5，得到1L血液保养液。

本发明另一目的是提供所述血液保养液在库存血保存中的应用。本发明血液保养液的使用方法为：将14mL保养液与采集的100±10mL血液混合，在血液采集过程中，要不断轻摇混匀，确保血液保养液与血液充分混合。

本发明还以目的是提供L-精氨酸的一种新功用，即其在制备库存血的血液保养液中的应用，该应用是在现有血液保养液中加入2.20-3.00mmol/L的L-精氨酸。现有血液保养液包括本发明中具体列举的和那些没有具体列举的。

本发明以上技术方案，是利用红细胞自身的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)，通过添加NO合成底物L-arg的方法，提高库存血Hb-NO的含量，使库存血液重新亚硝基化，从而达到恢复库存血舒张血管活性的目的。该新型血液保养液在保持血液质量的同时还能够维持血液保存期间NO的含量，与现有的血液保养液保存的红细胞相比，能够保持其舒张血管的活性，减少受血者的组织缺氧状况，提高临床输血的安全性和有效性。本发明将从根本上改变血液保养液只为维持红细胞携氧功能的目的，赋予了库存血扩张血管和增加局部血液量的新功能，是血液保存和血液质量控制的一次革命，有望替代现有的血液保养液，并将产生巨大的社会效益和经济效益，应用前景广阔。

下面结合具体实施例对本发明做进一步详细说明。

附图说明

图1为Western Blotting鉴定红细胞膜上的NOS蛋白结果

图2为红细胞膜上NOS的WB鉴定结果的灰度分析结果

图3为红细胞膜上的NOS的免疫荧光法鉴定结果

图4为不同保存时间的库存血的NOS活性检测结果

图5为光解-化学发光法检测血液中NO含量的示意图

图6为L-arg对血管舒张功能影响的检测结果

图7为本发明血液保养液和对照CPDA对库存血液pH值影响的检测结果

图8为本发明血液保养液和对照CPDA对库存血液K⁺影响的检测结果

图9为本发明血液保养液和对照CPDA对库存血液Na⁺影响的检测结果

图10为本发明血液保养液和对照CPDA对库存血液Cl^-影响的检测结果

图11为本发明血液保养液和对照CPDA对库存血液ME影响的检测结果

图12为本发明血液保养液和对照CPDA对库存血液标准碳酸氢盐(酸碱代谢指标之一)影响的检测结果

图13为本发明血液保养液和对照CPDA对库存血液实际碳酸氢盐(酸碱代谢指标之一)影响的检测结果

图14为本发明血液保养液和对照CPDA对库存血液PO₂影响的检测结果

图15为本发明血液保养液和对照CPDA对库存血液PCO₂影响的检测结果

图16为本发明血液保养液和对照CPDA对库存血液SO₂影响的检测结果

图17为本发明血液保养液和对照CPDA对库存血液红细胞变形性影响的检测结果

图18为本发明血液保养液和对照CPDA对库存血液红细胞聚集性影响的检测结果

图19为本发明血液保养液和对照CPDA对库存血液游离血红蛋白影响的检测结果

具体实施方式

本发明是为解决现有血液保养液的缺陷，提供了一种保持血液质量的同时还能够维持血液保存期间NO的含量，从而可提高库存血的乏氧性血管舒张功能，输注时提高血管舒张活性，增加组织灌流量，增加组织供血供氧，从而提高临床输血安全性和有效性的血液保养液。

本发明的血液保养液，是包含以下摩尔浓度组分的pH 5.5的水溶液：枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)88.85-90.00mmol/L，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)15.10-16.20mmol/L，无水葡萄糖136.50-146.60mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.00-14.31mmol/L，腺嘌呤5.30-5.58mmol/L，L-精氨酸2.20-3.00mmol/L。其中，枸橼酸钠、枸橼酸、无水葡萄糖、磷酸二氢钠和腺嘌呤的组合使用为较为经典的现有血液保养液，具有基础的抗凝功能，并能为红细胞提供能量；L-精氨酸(L-arg)是本发明精心筛选确定的功能组分，本发明设计利用红细胞自身的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)，通过添加NO合成底物L-arg的方法来提高血液中Hb-NO的含量，使库存血液重新亚硝基化，而不是使用直接加入NO的方式。

本发明血液保养液组配中各组分功能为：

葡萄糖：红细胞代谢的底物；

枸橼酸：与钙离子能形成一种难于解离的可溶性络合物，因而降低了血中钙离子浓度，使血液凝固受阻；

枸橼酸盐：抗凝，减少乳酸产生；

磷酸盐：缓冲物，稳定血液保养液的pH值；

钠离子：减少葡萄糖消耗，降低乳酸的形成，延长保存时间，稳定红细胞膜；

腺嘌呤：生成ATP，为红细胞的新陈代谢提供能量，并且是eNOS的激动剂；

L-精氧酸：做为内皮型一氧化氮合酶的底物，生成NO，使血液重新亚硝基化。

实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。

下述实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法。

试验例1、红细胞膜上的eNOS蛋白的鉴定、分析

(1)方法：采用免疫印迹和免疫荧光技术对红细胞的NOS进行鉴定、分析，具体操作方法参照《免疫学实验技术》；采用南京建成公司的一氧化氮合酶检测试剂盒，对红细胞的NOS活力进行了检测，具体操作方法见试剂盒说明书；采用碧云天公司的一氧化氮荧光探针，结合单一类型的NOS抑制剂，鉴定分析了红细胞内发挥作用的NOS类型，具体操作方法见试剂盒说明书。

(2)结果

①Western Blotting法鉴定红细胞膜上的NOS

库存去除白细胞的红细胞悬液(红细胞个数3.5×10⁹-5.5×10⁹个/mL)分别在4℃保存0d、7d、14d、21d、28d、35d后进行免疫印迹(WB)鉴定，一抗为mouse anti-eNOS，二抗为goat anti-mouse IgG，阴性对照为人红细胞(实验时不加一抗)，阳性对照为人脐静脉内皮细胞，以α-Tublin为内参。鉴定结果如图1所示，表明红细胞内含有NOS，且从保存开始至保存期末均能检测出NOS，与新鲜红细胞(0d)相似。

②红细胞膜上的NOS的半定量分析

用LabWorks软件对上述红细胞膜上NOS的WB鉴定结果的图像进行灰度分析。结果如图2所示(横坐标表示时间，纵坐标表示eNOS/Tubulin；a表示分别与新鲜血两两比较的结果)，方差分析结果显示，时间因素对于NOS/Tubulin灰度的影响没有统计学意义(F＝0.67，P＞0.05)；在各保存时间点，NOS/Tubulin灰度分析结果与新鲜血(0d)差异不显著(P＞0.05)，从而说明随库存血保存时间的延长，NOS含量保持稳定。

③免疫荧光法鉴定红细胞膜上的NOS及其类型

免疫荧光鉴定红细胞膜上NOS的结果如图3所示，a幅为红细胞，可见圆盘状绿色光坏，与红细胞形状一致，表明结果为阳性；b幅为阴性对照，未发现红细胞荧光物质，结果为阴性；c幅为阳性对照(脐静脉内皮细胞)，阳性对照细胞的检测结果为阳性。以上检测结果进一步表明红细胞膜上确实存在NOS蛋白，类型为eNOS。

④不同保存时间的库存血的eNOS活性检测

库存血液在4℃分别保存0d、10d、20d、35d时检测NOS活性(U/gHb)。检测结果如图4所示(横坐标表示时间，纵坐标表示eNOS活性；a表示分别与新鲜血两两比较的结果)，分别为31.28±8.97、36.95±9.44、36.13±3.9、37.93±5.14，方差分析结果显示，时间对eNOS活性的影响没有统计学意义(P＞0.05)，各组之间的eNOS活性与新鲜血(0d)比较没有显著性差异(P＞0.05)。检测结果表明库存血的eNOS活性没有随保存时间的延长而发生改变。

试验例2、L-Arg对库存血液NO含量的影响

L-精氨酸(L-arg)临床应用已经比较普遍，它作为一种半必需氨基酸，是尿素、鸟氨酸及肌丁胺的直接前体，是合成肌肉素的重要原素，且被用作聚胺、瓜氨酸及谷氨酰胺的合成，在细胞分裂、伤口愈合、免疫功能、分泌激素等过程中都起到重要的作用。目前，L-精氨酸作为氨基酸类药物，也是婴幼儿生长必需的氨基酸，并且常用其盐酸盐。L-精氨酸能参与体内鸟氨酸循环，促进尿素生成而降低血氨，对外科烧伤、肝功能不全所致的高氨血症及肝性脑病患者有效。同时，精氨酸是精子蛋白的主要成分，口服能增加精子的数量和活动力，因而可用于治疗男性不育症。此外，静脉注射精氨酸能刺激垂体释放生长激素，因而还可用于辅助测定垂体功能。

本发明在库存血中加入L-arg的目的，与其上述药理作用完全不同。在血液中加入L-arg后，利用红细胞自身的eNOS，来生增加库存血中NO的含量，使总Hb-NO含量增加，来改善血液舒张血管的功能，从而改善组织或局部器官的灌流量，提高血液的运氧功能。

(1)方法：

发明人分析得知，L-Arg可作为合成NO的底物，为了保持库存血中NO的含量，加入不同浓度的L-Arg来提高总Hb-NO(与Hb结合的NO)的含量，具体方法为：库存血液在4℃保存前，分别加入0μmol/L、3μmol/L、30μmol/L、300μmol/L、3000μmo/L的L-Arg，在0d、3d、7d、14d、21d、28d、35d时检测总Hb-NO的含量。采用光解-化学发光法(图5)对血液中的NO含量进行检测，具体步骤如下：

①打开氦气瓶开关，将与之相联的橡胶管一端放入水中，用来调节气体流量。用微调旋钮缓慢调节气体压力，以每分钟100左右个气泡为宜。

②接通蠕动泵电源，打开电源开关，调整蠕动泵转速，以25rpm为宜，速度过快会影响紫外线照射检测样本的时间。

③接通紫外光分解器电源，先打开风扇，然后打开紫外灯开关，用紫外光强度测定仪检测紫外线强度，紫外线强度要大于1000μW/cm²，达不到要求的，需更换紫外灯灯管。

④按图5所示，用不同直径橡胶管连接好各个仪器，详细检查管路的连接是否漏气，漏气会影响检测结果。

⑤打开每个仪器和三通开关，用氦气充分置换管路中的空气15min，去除管路中的氧气，氧气存在会与NO反应生成可溶于水的NO₂ ^-+NO₃ ^-，影响NO的检测。

⑥关闭氦气管路，让Hb样品随蠕动泵运动通过三通，进入管路，注意不要让空气通过三通，即刻停止进样，进样量为10mL。

⑦关闭待检样品进样管路，打开氦气管路，让氦气缓慢推动样品前进，进入紫外光分解器。

⑧此时，氦气推动Hb溶液不断进入封闭的细口瓶内，沉入底部。与Hb相联的NO气体分子通过紫外线照射后产生的NO也一并进入瓶内，气体中的水分由于瓶内接近0℃而凝结，氦气和NO通过封闭细口瓶上端的另一个管路出口，进入到气体留样袋内。

⑨先将氮氧化物检测仪开机预热30min，用氦气置换检测仪内的空气，待检测仪稳定，再将留样袋内的气体通过样品采集泵进入氮氧化物检测仪内，记录最大检测结果值。

⑩每次实验完成后要去离子水反复冲洗管路，去除管路内的残留蛋白，保持管路通风和干燥，下次实验前再冲洗。

(2)结果

检测结果及方差分析结果如表1所示(F＝88.77，P＜0.01；与同时间点对照组比较^aP＜0.01，^bP＞0.05)，L-Arg能对库存血中总Hb-NO含量的影响具有统计学意义(P＜0.01)；L-Arg在300μmol/L和3000μmo/L浓度时，与同时间点对照组比较，总Hb-NO含量均明显增加(P＜0.01)，3000μmo/L增加最明显。以上实验结果说明，L-Arg对提高库存血中总Hb-NO的含量有明显作用。

表1L-Arg对总Hb-NO含量的影响(n＝4单位：ppb)

注：方差分析，L-arg对库存血中总Hb-NO含量的影响具有统计学意义F＝88.77，P＜0.01；与同时间点对照组比较^aP＜0.01，^bP＞0.05。

试验例3、舒血管功能重建后的血液功能试验

(1)方法

3个月左右的SD大鼠，体重300g～400g，由中国军事医学科学院实验动物中心提供。实验分组：实验组：在CPD-A保养液(购自威高生物技术有限公司)中加入L-精氨酸，终浓度为3000μmmol/L；对照组：用等体积的生理盐水代替L-精氨酸。电解质和血气分析采用ABL735血气分析仪(丹麦，Radiometer公司)。红细胞(RBC)变形性和聚集性采用LBY-BX红细胞变形仪(北京，普利生仪器有限公司)。均按照仪器或试剂说明书操作。

大鼠主动环实验具体操作步骤如下：

①取SD大鼠，用断头的方法迅速处死大鼠，迅速剪开胸腔，从胸腔底部，用弯剪贴内壁剪下血管，严禁牵拉血管。迅速放入4℃并通氧气的K-H平衡液中。

②用弯剪剪去血管外脂肪等组织时，应小心，勿牵拉，以防伤及血管。然后用直剪将血管剪成3-5mm长的小段。

③先用微调旋钮将带挂钩的转换器降低到容易挂线的位置，将血管穿在小三角环上时，应小心勿损伤内皮。挂好后，再慢慢升上去，但不要升太高，张力在1g以下，两三角环穿挂血管的两条底边应平行，使力的方向与换能器金属弹片保持垂直。挂血管环用的线要用无弹性的棉线或丝线。勿牵拉，防血管及张力换能器受损。

④浴槽内为37℃的K-H平衡液(NaCl 6.9g，KCl 0.35g，KH₂PO₄ 0.16g，MgSO₄0.142g，NaHCO₃ 2.1g，Glucose 2.0g，加水到1000ml，用HCl调pH至7.4)10m L，持续通95％的O₂和5％的CO₂。血管环挂入后，给予2.0g的前负荷，温浴30min～60min。不断调整张力，使之稳定，每15min换一次营养液。

⑤将前负荷归零，用60mmol/L KCl多次刺激动脉环，当连续2次引起的收缩幅度差别＜10％时，开始试验。

⑥当血管环预收缩至平台时，加入不含L-精氨酸的血液(将1.4mL含生理盐水的CPD-A保养液与采集的10mL血液混合)，等待15min左右，等其效用达平台，记录曲线，采集信号。

⑦放掉血液，重新用K-H液平衡45min，每15min换一次液。待张力恢复到0g左右时，重复第⑤步，用KCl重新建立收缩平台。

⑧加入含L-精氨酸的血液(将1.4mL含3000μmmol/L L-精氨酸的CPD-A保养液与采集的10mL血液混合)，待15min后，等其效用达平台，记录曲线，采集信号。

(2)结果

L-arg组与对照组血管舒张功能检测：L-arg实验组与对照组分别在7d、16d、35d时，用大鼠主动脉环实验检测血管舒张功能。结果如图6所示(横坐标为时间，纵坐标为血管舒展程度；a表示和同时间点的对照组比较)，对照组结果为44.2±3.47、37.02±12.70、24.36±6.12，L-arg实验组结果为76.23±5.46、63.97±24.62、55.17±12.1。方差分析结果显示，L-arg对血管舒张功能的影响具有统计学意义(F＝145.76，P＜0.01)。L-arg组的血管舒张功能与对照组在各相同时间点进行两两比较，结果显示有显著性差异(P＜0.01)。以上实验结果可以证明库存血中加入L-arg后，舒张血管功能明显增强。

实施例1-5、本发明血液保养液的制备

本发明实施例1-5血液保养液的配方(1L)如表2所示。

表2本发明实施例1-5血液保养液的配方

本发明血液保养液的制备方法，包括以下步骤：

1)按上述配方称取各组分；

本发明血液保养液的使用方法为：将14mL血液保养液与采集的100±10mL血液混合，在血液采集过程中，要不断轻摇混匀，确保血液保养液与血液充分混合。

实施例6、检测本发明血液保养液对血管舒张功能的影响

实验分二组：1、本发明实施例1-5血液保养液为实验组，对应L-精氨酸终浓度分别为2.2、2.4、2.6、2.8、3.0mmol/L；2、CPD-A保养液(购自威高生物技术有限公司)为对照组。将14mL保养液与采集的100±10mL血液混合，在血液采集过程中，要不断轻摇混匀，确保血液保养液与血液充分混合。用实验例3中的方法检测本发明血液保养液对血管舒张功能的影响。

结果表3所示，经方差分析，各实验组对血管舒张功能的影响具有统计学意义P＜0.01；各组分别与同时间点对照组比较P＜0.01，具有统计学意义。表明本发明的血液保养液对于改善血管的舒张功能有明显的作用。

表3保养液对血管舒展功能的影响

实施例7、检测本发明血液保养液的血液保存时间

以市售的血液保养液CPDA为对照(对照组)，检测本发明血液保养液(L-arg组，以实施例3为代表)的血液保存时间，具体实验方案为：在库存血(将每14mL血液保养液与采集的100±10mL血液混合后入库保存)保存0d、7d、14d、21d、28d、35d时，对加入本发明血液保养液后血液保存期限和质量进行了初步评价，检测血液的pH值、K⁺、Na⁺、Cl^-、SO₂(血氧饱和度)、PO₂(氧分压)、PCO₂(二氧化碳分压)、HCO₃ ^-、ME(乳酸)、红细胞变形性和聚集性，具体结果如图7-图18所示，结果与对照组比较，均没有显著差异(P＞0.05)；最后，检测了保存不同时间库存血游离血红蛋白的含量，结果如图19所示，在保存21d、28d、35d本发明血液保养液组游离血红蛋白浓度(mg/L)分别为200.53±42.72、364.07±71.72和455.32±65.58，低于同期对照组(283.51±90.72、486.53±103.44和595.74±112.53)(P＜0.01)。以上检测结果说明L-arg在改善库存血的血管舒张功能的同时，未对库存血液的保存期和质量产生影响，对血液保存后期游离血红蛋白的产生有一定的抑制作用。

Claims

1.L-精氨酸在制备库存血的血液保养液中的应用，是在现有血液保养液中加入2.20-3.00mmol/L的L-精氨酸。

2.一种血液保养液，是包含以下摩尔浓度组分的pH 5.5的水溶液：枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)88.85-90.00mmol/L，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)15.10-16.20mmol/L，无水葡萄糖136.50-146.60mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.00-14.31mmol/L，腺嘌呤5.30-5.58mmol/L，L-精氨酸2.20-3.00mmol/L。

3.根据权利要求2所述的血液保养液，其特征在于：所述血液保养液的配方是包含以下摩尔浓度组分的pH 5.5的水溶液：枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)89.40mmol/L，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)15.56mmol/L，无水葡萄糖141.50mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.20mmol/L，腺嘌呤5.46mmol/L，L-精氨酸3.00mmol/L。

4.根据权利要求2所述的血液保养液，其特征在于：所述血液保养液的配方是包含以下摩尔浓度组分的pH 5.5的水溶液：枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)88.85mmol/L，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)15.10mmol/L，无水葡萄糖136.50mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.00mmol/L，腺嘌呤5.30mmol/L，L-精氨酸2.20mmol/L。

5.根据权利要求2所述的血液保养液，其特征在于：所述血液保养液的配方是包含以下摩尔浓度组分的pH 5.5的水溶液：枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)89.2mmol/L，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)15.36mmol/L，无水葡萄糖139.10mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.1mmol/L，腺嘌呤5.38mmol/L，L-精氨酸2.40mmol/L。

6.根据权利要求2所述的血液保养液，其特征在于：所述血液保养液的配方是包含以下摩尔浓度组分的pH 5.5的水溶液：枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)89.7mmol/L，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)15.91mmol/L，无水葡萄糖143.10mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.25mmol/L，腺嘌呤5.52mmol/L，L-精氨酸2.80mmol/L。

7.根据权利要求2所述的血液保养液，其特征在于：所述血液保养液的配方是包含以下摩尔浓度组分的pH 5.5的水溶液：枸橼酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)90.0mmol/L，枸橼酸(C₆H₈O₇·H₂O)16.20mmol/L，无水葡萄糖146.60mmol/L，磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)14.31mmol/L，腺嘌呤5.58mmol/L，L-精氨酸3.00mmol/L。

8.一种制备权利要求2-7任一项所述血液保养液的方法，包括以下步骤：

1)按配方将各组分浓度换算成重量，称取各组分；

9.权利要求2-7任一项所述的血液保养液在库存血保存中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：在所述应用中，14重量份保养液与采集的100±10重量份血液充分混合。