CN108192855A - 一种胎牛血清的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种胎牛血清的提取方法，包括以下步骤：1)将怀孕9个月的母牛进行剖腹产；2)手术切口长为30cm；3)在洁净室的层流罩下对胎牛进行心脏穿刺采血，采血后立即将采集的血液输入带盖瓶体，带盖瓶体的瓶盖中部具有用于采血针穿过的小孔，待将采集的血液输入瓶体后，将带有采血针孔的瓶盖更换为密封瓶盖；4)带盖瓶体放入冷冻离心机中，以3800转/分的转速离心35分钟，析出的血清收集进已经过杀菌的容器内进行保存；5)在恒温27°的条件下解冻；6)化开的血清进行3次过滤后即得胎牛血清。本发明提取胎牛血清的工艺简单、各参数易控制，且保证胎牛血清的性质稳定、生产成本低，胎牛血清纯度高，适于体外细胞的培养。
Description
技术领域
本发明属于血清制备技术领域，特别涉及一种胎牛血清的提取方法。
背景技术
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛，胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。现有的胎牛血清制备工艺复杂、成本高，且纯度低，不利于体外细胞培养。
发明内容
针对现有技术中存在的技术问题，本发明提供一种胎牛血清的提取方法。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种胎牛血清的提取方法，包括以下步骤：
1)将怀孕9个月的母牛进行剖腹产，产前采用侧卧，剖腹产前进行局部麻醉；
2)手术切口位置选择选择在左腋窝腹壁的五分之二处，切口长为30cm；
3)胎牛拉出子宫后,在洁净室的层流罩下对胎牛进行心脏穿刺采血，心脏穿刺采血时采用消毒后的采血针，采血部位为胎牛的心脏，采血后立即将采集的血液输入带盖瓶体，带盖瓶体的瓶盖中部具有用于采血针穿过的小孔，待将采集的血液输入瓶体后，将带有采血针孔的瓶盖更换为密封瓶盖；
4)将步骤3)中的带盖瓶体放入冷冻离心机中，以3800转/分的转速离心35分钟，析出的血清收集进已经过杀菌的容器内进行保存；
5)将步骤4)中的血清在净化车间进行解冻，解冻温度为恒温27°；
6)对步骤5)中化开的血清进行3次过滤后即得胎牛血清。
作为优选，所述步骤6)中从上到下依次三层微孔过滤膜进行3次过滤均，过滤孔径依次为0.1μm。
与现有技术相比，本发明所具有的有益效果是：本发明提取胎牛血清的工艺简单、易操作，能够保证胎牛血清的性质稳定、生产成本低，胎牛血清纯度高。
具体实施方式
为使本领域技术人员更好的理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对本发明作详细说明。
一种胎牛血清的提取方法，包括以下步骤：
1.一种胎牛血清的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将怀孕9个月的母牛进行剖腹产，产前采用侧卧，剖腹产前进行局部麻醉；
2)手术切口位置选择选择在左腋窝腹壁的五分之二处，切口长为30cm；
3)胎牛拉出子宫后,在洁净室的层流罩下对胎牛进行心脏穿刺采血，心脏穿刺采血时采用消毒后的采血针，采血部位为胎牛的心脏，采血后立即将采集的血液输入带盖瓶体，带盖瓶体的瓶盖中部具有用于采血针穿过的小孔，待将采集的血液输入瓶体后，将带有采血针孔的瓶盖更换为密封瓶盖；
4)将步骤3)中的带盖瓶体放入冷冻离心机中，以3800转/分的转速离心35分钟，析出的血清收集进已经过杀菌的容器内进行保存；
5)将步骤4)中的血清在净化车间进行解冻，解冻温度为恒温27°；
6)对步骤5)中化开的血清进行3次过滤后即得胎牛血清。
本实施例中，步骤6)中从上到下依次三层微孔过滤膜进行3次过滤均，过滤孔径依次为0.1μm。
本发明提取胎牛血清的工艺简单、易操作，能够保证胎牛血清的性质稳定、生产成本低，胎牛血清纯度高。
以上实施例仅为本发明的示例性实施例，不用于限制本发明，本发明的保护范围由权利要求书限定。本领域技术人员可以在本发明的实质和保护范围内，对本发明做出各种修改或等同替换，这种修改或等同替换也应视为落在本发明的保护范围内。
Claims (2)
1.一种胎牛血清的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将怀孕9个月的母牛进行剖腹产，产前采用侧卧，剖腹产前进行局部麻醉；
2)手术切口位置选择选择在左腋窝腹壁的五分之二处，切口长为30cm；
3)胎牛拉出子宫后,在洁净室的层流罩下对胎牛进行心脏穿刺采血，心脏穿刺采血时采用消毒后的采血针，采血部位为胎牛的心脏，采血后立即将采集的血液输入带盖瓶体，带盖瓶体的瓶盖中部具有用于采血针穿过的小孔，待将采集的血液输入瓶体后，将带有采血针孔的瓶盖更换为密封瓶盖；
4)将步骤3)中的带盖瓶体放入冷冻离心机中，以3800转/分的转速离心35分钟，析出的血清收集进已经过杀菌的容器内进行保存；
5)将步骤4)中的血清在净化车间进行解冻，解冻温度为恒温27°；
6)对步骤5)中化开的血清进行3次过滤后即得胎牛血清。
2.根据权利要求1所述的一种胎牛血清的提取方法提取方法，其特征在于，所述步骤6)中从上到下依次三层微孔过滤膜进行3次过滤均，过滤孔径依次为0.1μm。
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
| CN201810233389.2A CN108192855A (zh) | 2018-03-21 | 2018-03-21 | 一种胎牛血清的提取方法 |
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Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN108192855A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108770782A (zh) * | 2018-06-14 | 2018-11-09 | 天津市正江现代生物技术有限公司 | 一种提高牛血清质量的方法 |
| CN111304143A (zh) * | 2020-03-12 | 2020-06-19 | 上海农笙生物科技有限公司 | 一种胎牛血清的提取方法 |
| CN111413173A (zh) * | 2020-04-17 | 2020-07-14 | 广州鸿泉生物科技有限公司 | 一种用于透析的抗凝牛血、牛血浆和牛血清的制备方法 |
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2018
- 2018-03-21 CN CN201810233389.2A patent/CN108192855A/zh active Pending
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Legal Events
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| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20180622 |
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |