CN102372720A

CN102372720A - 一种高含量水黄皮素的提纯方法

Info

Publication number: CN102372720A
Application number: CN2010102630445A
Authority: CN
Inventors: 李法庆; 郭琴; 刘东锋
Original assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2010-08-26
Filing date: 2010-08-26
Publication date: 2012-03-14

Abstract

本发明涉及一种高含量水黄皮素的提纯方法，具体方法包括：将干花豆茎枝粉碎，用一定浓度乙醇提取、浓缩，石油醚萃取两次，萃余液上大孔树脂，洗脱液浓缩再上聚酰胺柱分离纯化，95％乙醇重结晶即得。该方法生产成本低，简单易行，易于批量制备。且以茎枝为原料，具有较好的资源优势。

Description

一种高含量水黄皮素的提纯方法

技术领域：

本发明涉及一种高含量水黄皮素的提纯方法，属于天然药用植物化学领域。

背景技术：

水黄皮素(Kranjin)；

分子式：C₁₈H₁₂O₄；分子量：292.29；

分子结构式：

理化性质：无色针状结晶，mp.157～158℃，溶于甲醇、乙醇、氯仿、苯、乙醚、浓硫酸、硝酸、醋酸、盐酸，几乎不溶于石油醚。水黄皮素天然存在于蝶形花科植物干花豆Fordia cauliflora Hem sl.的根和茎枝、豆科植物水黄皮[Pongamiapinnata(L.)Merr.]的根皮和种子中，具有抗结核杆菌的作用，可用于白癜风的治疗。

戴斌等从有益智作用的醇提取物氯仿溶出部分得到结晶物质水黄皮素，并测定水罗伞根水黄皮素含量为0.25％～1.48％，因产地不同而有差异，以百色产者为高(1.48％)，其次为南宁(0.90％)、天等(0.61％)、大新(0.46％)、龙州(0.29％)和靖西(0.25％)。茎枝亦含有一定量的水黄皮素(约0.12％)。中国专利申请号200710050173.4公开的“水罗伞总黄酮的提取方法”采用超临界二氧化碳流体萃取方法，并用乙醇作携带剂，从水罗伞药材中提取含水罗伞黄酮化合物的萃取物，再用回流提取的方法从萃取物中提取水罗伞总黄酮。尚无水黄皮素提取分离纯化方面的文献报道。

发明内容：

本发明是以天然药用植物水罗伞的茎枝为原料，用溶剂提取法、树脂吸附富集、聚酰胺分离纯化的方法提纯水黄皮素，其制备方法如下：将水罗伞茎枝粉碎，30-85％乙醇提取，浓缩提取液，石油醚萃取2次，萃余液上大孔树脂，先用水洗脱杂质，再用15-85％低碳醇或低碳酮洗脱树脂柱，洗脱液浓缩得水黄皮素浸膏，再通过聚酰胺柱层析，洗脱液浓缩成干浸膏，用95％乙醇多次热回流重结晶。

所述乙醇用量为药材重量的4-20倍，提取的方法为冷浸法、渗漉法或回流法，提取2-4次，每次2-4小时，合并提取液。

所述石油醚加入量为浓缩液体积的1-2倍。

所述大孔树脂为苯乙烯型大孔吸附树脂，先用水洗至无色，然后用3-8BV低碳醇或低碳酮洗脱，所述低碳醇为乙醇或甲醇，所述低碳酮为丙酮。

所述聚酰胺柱层析洗脱液为乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇(9∶1、9∶4)梯度洗脱，洗脱用量为3-6BV。

本发明具有以下优势：

1)本发明所用原料为干花豆茎枝，资源丰富，含量较高；

2)本发明所用富集柱层析填料为大孔树脂，吸附量大，可再生重复利用；

3)本发明采用聚酰胺柱层析分离纯化，分离效果好，产品纯度高；

4)本发明工艺简单，可行性强。

具体实施方式：

实施例1

以干花豆茎枝为原料，粉碎后称取1kg投入渗漉筒中，加入7倍80％乙醇渗漉提取3次，每次4小时，合并提取液；将提取液浓缩至原体积的1/4，用等体积量的石油醚超声萃取2次，弃去萃取液，将萃余液上AB-8大孔吸附树脂柱(径高比1∶5)，先用水洗脱至无色，然后用6倍柱体积70％乙醇洗脱，收集，减压回收试剂，浓缩，所得浸膏通过聚酰胺柱层析，依次用乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇(9∶1)、乙酸乙酯-甲醇(9∶4)梯度洗脱，收集洗脱液，回收试剂，浓缩至干得粗晶，用95％乙醇反复重结晶3次，即得948mg高纯度水黄皮素产品，含量98.3％。

实施例2

以干花豆茎枝为原料，粉碎后称取3.5kg投入提取罐中，加入10倍70％乙醇加热回流提取2次，每次3小时，合并提取液；将提取液浓缩至原体积的1/5，用等体积量的石油醚超声萃取2次，弃去萃取液，将萃余液上D101大孔吸附树脂柱(径高比1∶10)，先用水洗脱至无色，然后用5倍柱体积80％甲醇洗脱，收集，减压回收试剂，浓缩，所得浸膏通过聚酰胺柱层析，依次用乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇(9∶1)、乙酸乙酯-甲醇(9∶4)梯度洗脱，收集洗脱液，回收试剂，浓缩至干得粗晶，用95％乙醇反复重结晶5次，即得3.27g高纯度水黄皮素产品，含量98.6％。

实施例3

以干花豆茎枝为原料，粉碎后称取5kg投入提取罐中，加入8倍60％乙醇冷浸提取2次，每次4小时，合并提取液；将提取液浓缩至原体积的1/7，用等体积量的石油醚超声萃取2次，弃去萃取液，将萃余液上NKA-9大孔吸附树脂柱(径高比1∶15)，先用水洗脱至无色，然后用8倍柱体积75％丙酮洗脱，收集，减压回收试剂，浓缩，所得浸膏通过聚酰胺柱层析，依次用乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇(9∶1)、乙酸乙酯-甲醇(9∶4)梯度洗脱，收集洗脱液，回收试剂，浓缩至干得粗晶，用95％乙醇反复重结晶6次，即得4.5g高纯度水黄皮素产品，含量98.5％。

实施例4

以干花豆茎枝为原料，粉碎后称取8kg投入提取罐中，加入10倍75％乙醇加热回流提取2次，每次3小时，合并提取液；将提取液浓缩至原体积的1/5，用等体积量的石油醚超声萃取2次，弃去萃取液，将萃余液上D101大孔吸附树脂柱(径高比1∶10)，先用水洗脱至无色，然后用5倍柱体积80％乙醇洗脱，收集，减压回收试剂，浓缩，所得浸膏通过聚酰胺柱层析，依次用乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇(9∶1)、乙酸乙酯-甲醇(9∶4)梯度洗脱，收集洗脱液，回收试剂，浓缩至干得粗晶，用95％乙醇反复重结晶4次，即得7.4g高纯度水黄皮素产品，含量98.6％。

实施例5

以干花豆茎枝为原料，粉碎后称取10kg投入渗漉筒中，加入5倍60％乙醇渗漉提取3次，每次2小时，合并提取液；将提取液浓缩至原体积的1/6，用等体积量的石油醚超声萃取2次，弃去萃取液，将萃余液上ADS-5大孔吸附树脂柱(径高比1∶8)，先用水洗脱至无色，然后用7倍柱体积80％丙酮洗脱，收集，减压回收试剂，浓缩，所得浸膏通过聚酰胺柱层析，依次用乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇(9∶1)、乙酸乙酯-甲醇(9∶4)梯度洗脱，收集洗脱液，回收试剂，浓缩至干得粗晶，用95％乙醇反复重结晶3次，即得9.2g高纯度水黄皮素产品，含量98.4％。

实施例6

以干花豆茎枝为原料，粉碎后称取20kg投入提取罐中，加入6倍85％乙醇加热回流提取4次，每次2小时，合并提取液；将提取液浓缩至原体积的1/4，用等体积量的石油醚超声萃取2次，弃去萃取液，将萃余液上AB-8大孔吸附树脂柱(径高比1∶5)，先用水洗脱至无色，然后用6倍柱体积80％甲醇洗脱，收集，减压回收试剂，浓缩，所得浸膏通过聚酰胺柱层析，依次用乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇(9∶1)、乙酸乙酯-甲醇(9∶4)梯度洗脱，收集洗脱液，回收试剂，浓缩至干得粗晶，用95％乙醇反复重结晶5次，即得18.7g高纯度水黄皮素产品，含量98.8％。

Claims

1.一种高含量水黄皮素的提纯方法，其特征在于包括以下步骤：将水罗伞茎枝粉碎，30-85％乙醇提取，浓缩提取液，石油醚萃取2次，萃余液上大孔树脂，先用水洗脱杂质，再用15-85％低碳醇或低碳酮洗脱树脂柱，洗脱液浓缩得水黄皮素浸膏，通过聚酰胺柱层析，洗脱液浓缩成干浸膏，用95％乙醇加热回流重结晶。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：乙醇用量为药材重量的4-20倍，提取的方法为冷浸法、渗漉法或回流法，提取2-4次，每次2-4小时，合并提取液。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：石油醚加入量为浓缩液体积的1-2倍。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述大孔树脂为苯乙烯型大孔吸附树脂，先用水洗至无色，然后用3-8BV低碳醇或低碳酮洗脱，所述低碳醇为乙醇或甲醇，所述低碳酮为丙酮。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述聚酰胺柱层析洗脱液为乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇(9∶1、9∶4)梯度洗脱，洗脱用量为3-6BV。