CN102334419A - 一种白蚁巢上炭角菌属种的分离培养方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种白蚁巢上炭角菌属种的分离培养方法，它包括以下步骤：（1）白蚁巢的获取方法；（2）炭角菌培养方法；（3）菌种分离方法；（4）菌种培养方法；（5）菌种保藏。利用本发明的分离培养方法，菌种具有不受地区、季节与气候限制，便于工厂化生产等优势，大大提高了白蚁巢上炭角菌属种产量，保障了菌种的产量和产值。

Description

一种白蚁巢上炭角菌属种的分离培养方法
技术领域
本发明涉及一种菌种的分离培养方法，特别是白蚁巢上炭角菌属种的分离培养方法。
背景技术
炭角菌属有黑柄炭角菌Xylaria nigripes (Klotzsch) Sacc.、痂状炭角菌Xylaria escharoidea（Berk.）Sacc.等，黑柄炭角菌中文别名乌灵参、鸡茯苓、地炭棍，菌核生长在废弃的白蚁窝上。经济用途：药用菌核，其性温，味微苦。民间药用，能除湿、镇惊、止心悸，催乳、补肾、安眠的作用。治产后失血，跌打损伤，可与肉炖食，作为补药。
由于炭角菌生长环境的特殊性，其菌种的自然繁殖远远不能满足人们对该药源植物的需求，为了解决供需矛盾，人们多采用人工栽培的方法扩大药源，但在人工栽培中，如果以常规方法育种，菌种产量产值均较低。
发明内容
本发明的目的即在于克服现有技术的缺点，提供一种白蚁巢上炭角菌属种的分离培养方法，它能大大提高白蚁巢上炭角菌属种产量，杜绝了菌种的病毒危害，保障了菌种的产量和产值。
本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种白蚁巢上炭角菌属种的分离培养方法，它包括以下步骤：
（1）白蚁巢的获取方法
  从生长蚁巢伞地方挖开土壤，从中取出白蚁巢，将白蚁巢装入塑料袋内，密封保藏；
（2）炭角菌培养方法
 将获得的白蚁巢取100～300克，装入250ml～300 ml的三角瓶内，瓶口用塑料薄膜密封；或者将白蚁巢装入塑料袋内，密封袋口；在室内25～30℃下培养，培养至形成黑色棒状子实体为止；
（3）菌种分离方法
A、培养基a配制：培养基按以下组分及重量比配制：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g，按以上比例称取，然后加入水1000mL；培养基b配制：培养基按以下组分及重量比配制：酵母粉5g、葡萄糖20g、琼脂20g，按以上比例称取，然后加入水1000mL；
B、分离方法
将培养出的炭角菌子实体取出，用70%～75%的酒精棉球擦洗子实体表面，然后在无菌环境下将子实体折断，手术刀在酒精灯火焰上灼烧杀菌并冷却后，切取子实体内部组织，放在培养基a或培养基b上；
（4）菌种培养方法
 将放入子实体组织块的培养基，在22℃～25℃下培养，培养至形成黑色子实体为止，将形成黑色子实体的菌种，确定为炭角菌属菌种，选择无细菌和霉菌感染的菌种使用；
（5）菌种保藏
将菌种用纸包裹，在室内20℃～30℃下保藏，间隔2～3个月转接培养一次。
通过上面的叙述可以看出，本发明具有以下优点：利用本发明的分离培养方法，菌种具有不受地区、季节与气候限制，便于工厂化生产等优势，大大提高了白蚁巢上炭角菌属种产量，保障了菌种的产值。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明做进一步的描述：
实施例1：一种白蚁巢上炭角菌属种的分离培养方法，它包括以下步骤：
（1）白蚁巢的获取方法
  从生长蚁巢伞地方挖开土壤，从中取出白蚁巢，将白蚁巢装入塑料袋内，密封保藏；
（2）炭角菌培养方法
 将获得的白蚁巢取100克，装入250ml的三角瓶内，瓶口用塑料薄膜密封；或者将白蚁巢装入塑料袋内，密封袋口；在室内25℃下培养，培养至形成黑色棒状子实体为止；
（3）菌种分离方法
A、培养基配制：培养基a配制：培养基按以下组分及重量比配制：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g，按以上比例称取，然后加入水1000mL；
B、分离方法
将培养出的炭角菌子实体取出，用70%的酒精棉球擦洗子实体表面，然后在无菌环境下将子实体折断，在酒精灯火焰上灼烧杀菌并冷却后，切取子实体内部组织，放在培养基上；
（4）菌种培养方法
 将放入子实体组织块的培养基，在22℃下培养，培养至形成黑色子实体为止，将形成黑色子实体的菌种，确定为炭角菌属菌种，选择无细菌和霉菌感染的菌种使用；
（5）菌种保藏
将菌种用纸包裹，在室内20℃下保藏，间隔2个月转接培养一次。
实施例2：一种白蚁巢上炭角菌属种的分离培养方法，它包括以下步骤：
（1）白蚁巢的获取方法
  从生长蚁巢伞地方挖开土壤，从中取出白蚁巢，将白蚁巢装入塑料袋内，密封保藏；
（2）炭角菌培养方法
 将获得的白蚁巢取300克，装入300 ml的三角瓶内，瓶口用塑料薄膜密封；或者将白蚁巢装入塑料袋内，密封袋口；在室内30℃下培养，培养至形成黑色棒状子实体为止；
（3）菌种分离方法
A、培养基配制：培养基b配制：培养基按以下组分及重量比配制：酵母粉5g、葡萄糖20g、琼脂20g，按以上比例称取，然后加入水1000mL；
B、分离方法
将培养出的炭角菌子实体取出，用75%的酒精棉球擦洗子实体表面，然后在无菌环境下将子实体折断，手术刀在酒精灯火焰上灼烧杀菌并冷却后，切取子实体内部组织，放在培养基上；
（4）菌种培养方法
 将放入子实体组织块的培养基，在25℃下培养，培养至形成黑色子实体为止，将形成黑色子实体的菌种，确定为炭角菌属菌种，选择无细菌和霉菌感染的菌种使用；
（5）菌种保藏
将菌种用纸包裹，在室内30℃下保藏，间隔3个月转接培养一次。
实施例3：一种白蚁巢上炭角菌属种的分离培养方法，它包括以下步骤：
（1）白蚁巢的获取方法
  从生长蚁巢伞地方挖开土壤，从中取出白蚁巢，将白蚁巢装入塑料袋内，密封保藏；
（2）炭角菌培养方法
 将获得的白蚁巢取200克，装入300 ml的三角瓶内，瓶口用塑料薄膜密封；或者将白蚁巢装入塑料袋内，密封袋口；在室内28℃下培养，培养至形成黑色棒状子实体为止；
（3）菌种分离方法
A、培养基配制：培养基a配制：培养基按以下组分及重量比配制：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g，按以上比例称取，然后加入水1000mL；
B、分离方法
将培养出的炭角菌子实体取出，用75%的酒精棉球擦洗子实体表面，然后在无菌环境下将子实体折断，在酒精灯火焰上灼烧杀菌并冷却后，切取子实体内部组织，放在培养基上；
（4）菌种培养方法
 将放入子实体组织块的培养基，在23℃下培养，培养至形成黑色子实体为止，将形成黑色子实体的菌种，确定为炭角菌属菌种，选择无细菌和霉菌感染的菌种使用：
（5）菌种保藏
将菌种用纸包裹，在室内28℃下保藏，间隔2.5个月转接培养一次。
实施例4：一种白蚁巢上炭角菌属种的分离培养方法，它包括以下步骤：
（1）白蚁巢的获取方法
  从生长蚁巢伞地方挖开土壤，从中取出白蚁巢，将白蚁巢装入塑料袋内，密封保藏；
（2）炭角菌培养方法
 将获得的白蚁巢取250克，装入300 ml的三角瓶内，瓶口用塑料薄膜密封；或者将白蚁巢装入塑料袋内，密封袋口；在室内27℃下培养，培养至形成黑色棒状子实体为止；
（3）菌种分离方法
A、培养基配制：培养基b配制：培养基按以下组分及重量比配制：酵母粉5g、葡萄糖20g、琼脂20g，按以上比例称取，然后加入水1000mL；
B、分离方法
将培养出的炭角菌子实体取出，用72%的酒精棉球擦洗子实体表面，然后在无菌环境下将子实体折断，手术刀在酒精灯火焰上灼烧杀菌并冷却后，切取子实体内部组织，放在培养基上；
（4）菌种培养方法
将放入子实体组织块的培养基，在24℃下培养，培养至形成黑色子实体为止，将形成黑色子实体的菌种，确定为炭角菌属菌种，选择无细菌和霉菌感染的菌种使用；
（5）菌种保藏
将菌种用纸包裹，在室内27℃下保藏，间隔2个月转接培养一次。 

Claims (1)

1.一种白蚁巢上炭角菌属种的分离培养方法，其特征在于，它包括以下步骤：
（1）白蚁巢的获取方法
从生长蚁巢伞地方挖开土壤，从中取出白蚁巢，将白蚁巢装入塑料袋内，密封保藏；
（2）炭角菌培养方法
将获得的白蚁巢取100～300克，装入250mL～300 mL的三角瓶内，瓶口用塑料薄膜密封；或者将白蚁巢装入塑料袋内，密封袋口；在室内25～30℃下培养，培养至形成黑色棒状子实体为止；
（3）菌种分离方法
A、培养基a配制：培养基按以下组分及重量比配制：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g，按以上比例称取，然后加入水1000mL；培养基b配制：培养基按以下组分及重量比配制：酵母粉5g、葡萄糖20g、琼脂20g，按以上比例称取，然后加入水1000mL；
B、分离方法
将培养出的炭角菌子实体取出，用70%～75%的酒精棉球擦洗子实体表面，然后在无菌环境下将子实体折断，手术刀在酒精灯火焰上灼烧杀菌并冷却后，切取子实体内部组织，放在培养基a或培养基b上；
（4）菌种培养方法
将放入子实体组织块的培养基，在22℃～25℃下培养，培养至形成黑色子实体为止，将形成黑色子实体的菌种，确定为炭角菌属菌种，选择无细菌和霉菌感染的菌种使用；
（5）菌种保藏
将菌种用纸包裹，在室内20℃～30℃下保藏，间隔2～3个月转接培养一次。
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