CN102321134B

CN102321134B - 一种化合物、其制备方法及用途

Info

Publication number: CN102321134B
Application number: CN201110298219.0A
Authority: CN
Inventors: 周荣光
Original assignee: Kunming Pharmaceutical Corp
Current assignee: KPC Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2011-09-30
Filing date: 2011-09-30
Publication date: 2014-06-11
Anticipated expiration: 2031-09-30
Also published as: CN102321134A

Abstract

本发明涉及化学合成领域，特别涉及一种化合物、其制备方法及用途。该化合物结构如式I所示，经初步的药理试验表明，具有明显的抗血小板、红细胞凝聚及抑制肿瘤细胞生长的作用，可作为治疗心脑血管疾病和肿瘤的药物应用。

Description

一种化合物、其制备方法及用途

技术领域

本发明涉及医药学及化学合成领域，特别涉及一种化合物、其制备方法及用途。

背景技术

灯盏花乙素为植物灯盏细辛的有效成分之一，结构如下式所示。

研究表明，灯盏花乙素具有增加脑、冠状血管血流量，降低血管阻力，抗血小板、红细胞凝聚，降低血液粘稠度等作用。目前，以灯盏花乙素为主要活性成分的药物灯盏花素，已成为国内防治心脑血管疾病的一线药物。

目前，国内外已有大量文献报道了灯盏花乙素的结构改造和人工合成工作，如：周荣光等报道了四乙酰野黄芩素的合成，Cao等报道了灯盏乙素乙酯、苄酯和羟乙酰胺酯的合成，L.Farkas等以及Cui等先后报道了灯盏花乙素的人工全合成。

灯盏花乙素合成中最重要和关键的一步反应，是成苷化反应。在上述文献报道的灯盏花乙素合成中，为实现7-OH处的选择性成苷，采用乙酰基对黄酮的5，6，4′-OH进行保护，以昂贵的氧化银为催化剂，在喹啉中完成成苷化反应。该合成方法，每合成1克灯盏花乙素，至少需要1克以上的氧化银，仅仅该步成苷化反应所耗费的氧化银成本，就远远高于目前采用的从植物中提取灯盏花乙素的成本，因此该方法除具有一定的学术理论价值外，无经济实用价值。因此，如何经济实用地合成灯盏花乙素及其衍生物仍然是科学家需要研究和解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种化合物、其制备方法及用途。该化合物结构如式I所示。经初步的药理试验表明，具有明显的抗血小板、红细胞凝聚及抑制肿瘤细胞生长的作用，可作为治疗心脑血管疾病和肿瘤的药物应用。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种化合物，其结构如式I所示：

式I。

本发明还提供了所述式I所示化合物的制备方法，包括如下步骤：

步骤1：以醋酸为溶剂，5，6，7，4′-四羟基黄酮与醋酐在质子酸的催化下，于20～150℃温度下反应3～4h，得到5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮；所述5，6，7，4′-四羟基黄酮、醋酐和质子酸的摩尔比为1.0∶(3.0～3.5)∶(0.0005～0.01)；所述质子酸选自硫酸、盐酸、磷酸、硝酸、高氯酸；

步骤2：以丙酮为溶剂，所述5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮与苄溴在铜粉和碳酸钾的催化下，反应3～4h，加入卤代乙烷，用碱调节pH值为10～12，于40～80℃温度下反应1～4h，得到5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮；所述5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮、苄溴、铜粉、碳酸钾、卤代乙烷的摩尔比为1.0∶(1.0～1.5)∶(0.1～2.0)∶(1.0～5.0)∶(2.0～3.0)；所述卤代乙烷选自溴乙烷、氯乙烷或碘乙烷；

步骤3：所述5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮在钯碳催化下，于20～40℃温度下，通入氢气反应3～8h，得到5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮；所述5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮与钯碳的摩尔比为1.0∶(0.0002～0.01)(钯碳摩尔量以Pd计)；

步骤4：以丙酮为溶剂，所述5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮与α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯在碱的催化作用下反应，即得；所述5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮与所述α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯、所述碱的摩尔比为1.0∶(1.0～2.0)∶(1.5～5.0)，优选在20～50℃温度下，反应4～5h。

在本发明提供的一些实施例中，所述式I所示化合物的制备方法，步骤1中所述5，6，7，4′-四羟基黄酮、醋酐和质子酸的摩尔比为1.0∶(3.0～3.2)∶(0.001～0.005)。

在本发明提供的一些实施例中，所述式I所示化合物的制备方法，步骤1中所述温度为50～80℃。

在本发明提供的一些实施例中，所述式I所示化合物的制备方法，步骤2中所述5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮、苄溴、铜粉、碳酸钾、卤代乙烷的摩尔比为1.0∶(1.1～1.2)∶(0.5～1.5)∶(1.5～3.0)∶(2.2～2.6)。

在本发明提供的一些实施例中，所述式I所示化合物的制备方法，步骤3中所述5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮与钯碳的摩尔比为1.0∶(0.0005～0.005)(钯碳摩尔量以Pd计)。

在本发明提供的一些实施例中，所述式I所示化合物的制备方法，步骤4中所述5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮与所述α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯、所述碱的摩尔比为1.0∶(1.2～1.5)∶(2.0～4.0)。

在本发明提供的一些实施例中，所述碱可以为氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸三钠、磷酸三钾、碳酸钠、碳酸钾等。

本发明还提供了式I所示化合物在制备治疗心脑血管疾病或/和肿瘤药物中的应用。

在本发明提供的一些实施例中，所述治疗心脑血管疾病的药物具体为灯盏花乙素。

本发明还提供了式I所示化合物制备灯盏花乙素的方法，所述化合物与吡啶盐酸盐在150～180℃温度下反应2～3h，即得；所述化合物与所述吡啶盐酸盐的摩尔比为1.0∶1.0～10.0。

作为优选，本发明还提供了式I所示化合物制备灯盏花乙素的方法，所述化合物与吡啶盐酸盐在150～180℃温度下反应2～3h，即得；所述化合物与所述吡啶盐酸盐的摩尔比为1.0∶5.0～7.0。

本发明还提供了一种药物组合物，包括式I所示化合物及药学上可接受的辅料。

本发明还提供了一种包含上述药物组合物的临床制剂。

本发明提供的临床制剂为口服制剂或注射制剂。

在本发明的一些实施例中，本发明提供的口服制剂具体为片剂或胶囊。

在本发明的另一些实施例中，本发明提供的注射制剂具体为注射液或冻干粉针剂。

本发明以5，6，7，4′-四羟基黄酮为原料，采用耐强碱的乙氧基保护黄酮母体上的6，4′-OH后(5-OH由于受4-位上的C＝O影响，缺乏活性，无需保护)，以价格低廉的氢氧化钠等普通碱类物质代替昂贵的氧化银为催化剂，在普通溶剂丙酮中完成成苷化反应，以一种经济实用的方法，成功合成了式I所示化合物。采用本发明方法得到的，具有6，4′-二羟基的灯盏花乙素系列衍生物：5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮、5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮、5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-O-β-D-葡萄糖醛酸黄酮苷(式I所示化合物)为全新化合物，同时经式I所示化合物制备灯盏花乙素，制备过程操作简单，经济实用。经初步的药理试验表明，具有明显的抗血小板、红细胞凝聚及抑制肿瘤细胞生长的作用，可作为治疗心脑血管疾病和肿瘤的药物应用。

附图说明

图1示结构如式I所示化合物的结构及关键HMBC和ROESY相关；其中，

示HMBC(异核多重键相关谱)，示多键碳氢关系；

示ROESY(旋转座标系NOE谱)，示氢氢键空间关系；

图2示结构如式I所示化合物的IR谱图；

图3示结构如式I所示化合物的¹³C NMR谱图；

图4示结构如式I所示化合物的ROESY谱图；

图5示结构如式I所示化合物的HMBC谱图。

具体实施方式

本发明公开了一种化合物、其制备方法及用途。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明提供了一种化合物，其结构如式I所示：

式I。

步骤3：所述5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮在钯碳催化下，于20～40℃通入氢气反应3～8h，得到5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮；所述5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮与钯碳的摩尔比为1.0∶(0.0002～0.01)(钯碳摩尔量以Pd计)；

步骤4：以丙酮为溶剂，所述5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮与α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯在碱的催化作用下反应，即得；所述5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮与所述α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯、所述碱的摩尔比为1.0∶(1.0～2.0)∶(1.5～5.0)作为优选，反应在20～50℃温度下，反应4～5h。

本发明还提供了式I所示化合物制备灯盏花乙素的方法，所述化合物与吡啶盐酸盐在150～180℃温度下反应2～3h，即得；所述化合物与所述吡啶盐酸盐的摩尔比为1.0∶1.0～10.0。(优选为1.0∶5.0～7.0)。

在本发明提供的一些实施例中，药物组合物的处方：

制备方法：混合过筛即得。

在本发明提供的另一些实施例中，药物组合物的处方：

本发明提供的式I所示化合物 5～15％

干淀粉 65～90％

硬脂酸镁 3～20％

制备方法：混合过筛即得。

本发明还提供了一种包含上述药物组合物的临床制剂。

本发明提供的临床制剂为口服制剂或注射制剂。

在本发明提供的一些实施例中，本发明提供的片剂处方为：

将本发明提供的化合物、淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁，混合后于压片机上压片，即得。

在本发明提供的另一些实施例中，本发明提供的胶囊处方为：

本发明提供的式I所示化合物 5～15％

干淀粉 65～90％

硬脂酸镁 3～20％

将本发明提供的化合物、干淀粉和硬脂酸镁，混合后填充入硬明胶胶囊中，即得。

在本发明的一些实施例中，本发明提供的注射液处方：

将本发明提供的化合物加乙醇搅拌溶解，加氯化钠及适量注射用水，搅拌均匀，加入0.1％针用活性碳，吸附，过滤脱碳，补加注射用水至规定量，微孔过滤膜过滤，按1mL/支灌封，100℃湿热灭菌20min，经灯检合格，即得。

在本发明的另一些实施例中，本发明提供的冻干粉针剂处方：

将本发明提供的化合物加乙醇搅拌溶解，加氯化钠、甘露醇及适量注射用水，搅拌均匀，加入0.1％针用活性碳，吸附，过滤脱碳，补加注射用水至规定量，微孔过滤膜过滤，按4mL/支分装，冷冻干燥，封装，经检验合格，即得。

本发明以5，6，7，4′-四羟基黄酮为原料，采用耐强碱的乙氧基保护黄酮母体上的6，4′-OH后(5-OH由于受4-位上的C＝O影响，缺乏活性，无需保护)，以价格低廉的氢氧化钠代替昂贵的氧化银为催化剂，在普通溶剂丙酮中完成成苷化反应，以一种经济实用的方法，成功合成了式I所示化合物。采用本发明方法得到的，具有6，4′-二羟基的灯盏花乙素系列衍生物：5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮、5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮、5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-O-β-D-葡萄糖醛酸黄酮苷(式I所示化合物)为全新化合物，同时经式I所示化合物制备灯盏花乙素，制备过程操作简单，经济实用。经初步的药理试验表明，具有明显的抗血小板、红细胞凝聚及抑制肿瘤细胞生长的作用，可作为治疗心脑血管疾病和肿瘤的药物应用。

本发明中所用试剂、肿瘤细胞均可由市场购得。其中，所用5，6，7，4′-四羟基黄酮、α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯由昆明制药集团股份有限公司药物研究院按已有文献自制，其余试剂、肿瘤细胞等均可由市场购得。其中，醋酸、醋酐、硫酸、盐酸、磷酸、硝酸、高氯酸、苄溴、铜粉、溴乙烷、氯乙烷、碘乙烷、钯碳、氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸三钠、碳酸钠、碳酸钾、丙酮、二氯甲烷等化学试剂由天津化学试剂股份有限公司提供；Hela、A-549、Bel-7402、HL-60肿瘤细胞由德国Diarect AG公司提供；动物实验用大鼠和沙土鼠由昆明医学院实验动物中心提供。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1结构如式I所示化合物的制备

称取5，6，7，4′-四羟基黄酮28.6g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入醋酸50mL，醋酐33.7g(0.33mol)，1％高氯酸5.0g(0.0005mol)，加热至80℃反应4h，加水200mL，搅拌，有大量固体析出，静置，过滤，得淡黄色固体5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮39.3g，产率95％。

称取5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮41.2g(0.100mol)于500mL三口烧瓶中，加入丙酮100mL，苄溴18.0g(0.105mol)，碳酸钾20.7g(0.15mol)，铜粉5.0g(0.078mol)，加热回流反应4h。加入溴乙烷27.3g(0.250mol)，滴加5％氢氧化钠溶液控制反应液pH值10，于50℃加热3h。经TLC检测反应完全后，减压回收丙酮溶剂，降至室温，加入稀盐酸调节pH值至7，有大量黄色固体析出，静置8h后过滤，得黄棕色的5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮41.5g，产率96％。

称取5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮43.2g(0.100mol)于500mL三口烧瓶中，加入二氯甲烷300mL，5％钯碳10g(0.0047mol，以Pd计)，于20℃、常压下通入氢气反应3.5h。至氢气不再为反应液所吸收，过滤反应液，滤液减压回收二氯甲烷溶剂，得黄色固体5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮32.5g，产率95％。

称取5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮34.2g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入丙酮150mL，α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯66.0g(0.150mol)，通入氮气保护，滴加浓度为1.5mol/L的氢氧化钠水溶液100ml(计0.15molNaOH)。滴加过程中，控制反应液pH值10-12，反应液温度低于35℃。滴加完毕后，加热回流反应6h。减压回收丙酮，降至室温，加入稀盐酸调节pH值至7，有大量黄色固体析出，静置8h后过滤。过滤后所得粗品，用甲醇重结晶，得呈浅黄色固体的式I化合物44.0g，产率85％，经HPLC检测纯度99.8％。

实施例2结构如式I所示化合物的制备

称取5，6，7，4′-四羟基黄酮28.6g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入醋酸80mL，醋酐30.6g(0.30mol)，98％浓硫酸0.5g(0.005mol)，加热至150℃反应3h，加水150mL，搅拌，有大量固体析出，静置，过滤，得淡黄色固体5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮33.8g，产率82％。

称取5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮41.2g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入丙酮200mL，苄溴25.7g(0.15mol)，碳酸钾41.4g(0.30mol)，铜粉9.6g(0.15mol)，加热回流反应3.2h。加入溴乙烷21.8g(0.20mol)，滴加10％氢氧化钾溶液控制反应液pH值12，于80℃加热1h。经TLC检测反应完全后，减压回收丙酮溶剂，降至室温，加入稀盐酸调节pH值至5，有大量黄色固体析出，静置2h后过滤，得黄棕色的5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮36.7g，产率85％。

称取5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮43.2g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入乙醇350mL，10％钯碳10g(0.0094mol，以Pd计)，于30℃、常压下通入氢气反应3h。至氢气不再为反应液所吸收，过滤反应液，滤液减压回收乙醇溶剂，得黄色固体5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮31.8g，产率93％。

称取5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮34.2g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入丙酮200mL，α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯88.0g(0.20mol)，通入氮气保护，滴加浓度为2.0mol/L的氢氧化钾水溶液100ml(计0.20molKOH)。滴加过程中，控制反应液pH值10-12，反应液温度低于35℃。滴加完毕后，加热回流反应5h。减压回收丙酮，降至室温，加入稀盐酸调节pH值至5，有大量黄色固体析出，静置4h后过滤。过滤后所得粗品，用乙醇重结晶，得呈浅黄色固体的式I化合物47.9g，产率92％，经HPLC检测纯度95.5％。

实施例3结构如式I所示化合物的制备

称取5，6，7，4′-四羟基黄酮28.6g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入醋酸100mL，醋酐35.7g(0.35mol)，36％浓盐酸1.0g(0.01mol)，20℃反应4h，加水250mL，搅拌，有大量固体析出，静置，过滤，得淡黄色固体5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮36.7g，产率89％。

称取5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮41.2g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入丙酮250mL，苄溴17.1g(0.10mol)，碳酸钾69.0g(0.50mol)，铜粉0.7g(0.011mol)，加热回流反应4h。加入氯乙烷19.4g(0.30mol)，滴加20％碳酸钠溶液控制反应液pH值11，于70℃加热2h。经TLC检测反应完全后，减压回收丙酮溶剂，降至室温，加入稀盐酸调节pH值至6，有大量黄色固体析出，静置8h后过滤，得黄棕色的5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮32.3g，产率75％。

称取5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮43.2g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入甲醇320mL，5％钯碳5g(0.0023mol，以Pd计)，于25℃、常压下通入氢气反应4h。至氢气不再为反应液所吸收，过滤反应液，滤液减压回收乙醇溶剂，得黄色固体5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮32.1g，产率94％。

称取5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮34.2g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入丙酮220mL，α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯44.0g(0.10mol)，通入氮气保护，滴加浓度为3.5mol/L的碳酸钠水溶液100ml(计0.35molNa₂CO₃)。滴加过程中，控制反应液pH值10-12，反应液温度低于35℃。滴加完毕后，加热回流反应6h。减压回收丙酮，降至室温，加入稀盐酸调节pH值至6，有大量黄色固体析出，静置6h后过滤。过滤后所得粗品，用丙酮重结晶，得呈浅黄色固体的式I化合物40.6g，产率78％，经HPLC检测纯度99.4％。

实施例4结构如式I所示化合物的制备

称取5，6，7，4′-四羟基黄酮28.6g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入醋酸120mL，醋酐32.6g(0.32mol)，85％磷酸0.3g(0.0026mol)，加热至50℃反应3.7h，加水200mL，搅拌，有大量固体析出，静置，过滤，得淡黄色固体5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮40.1g，产率97％。

称取5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮41.2g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入丙酮150mL，苄溴20.6g(0.12mol)，碳酸钾13.8g(0.1mol)，铜粉12.8g(0.2mol)，加热回流反应3.5h。加入碘乙烷34.3g(0.22mol)，滴加15％磷酸三钠水溶液控制反应液pH值10，于40℃加热4h。经TLC检测反应完全后，减压回收丙酮溶剂，降至室温，加入稀盐酸调节pH值至6，有大量黄色固体析出，静置8h后过滤，得黄棕色的5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮41.4g，产率96％。

称取5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮43.2g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入丙酮350mL，0.5％钯碳5g(0.00023mol，以Pd计)，于40℃、常压下通入氢气反应8h。至氢气不再为反应液所吸收，过滤反应液，滤液减压回收乙醇溶剂，得黄色固体5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮30.8g，产率90％。

称取5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮34.2g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入丙酮200mL，α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯52.8g(0.12mol)，通入氮气保护，滴加浓度为4.0mol/L的碳酸钾水溶液100ml(计0.40molK₂CO₃)。滴加过程中，控制反应液pH值10-12，反应液温度低于35℃。滴加完毕后，加热回流反应6h。减压回收丙酮，降至室温，加入稀盐酸调节pH值至6，有大量黄色固体析出，静置5h后过滤。过滤后所得粗品，用甲醇重结晶，得呈浅黄色固体的式I化合物45.5g，产率88％，经HPLC检测纯度97.5％。

实施例5结构如式I所示化合物的制备

称取5，6，7，4′-四羟基黄酮28.6g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入醋酸150mL，醋酐31.6g(0.31mol)，10％稀硝酸0.6g(0.001mol)，加热至120℃反应3.5h，加水200mL，搅拌，有大量固体析出，静置，过滤，得淡黄色固体5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮37.9g，产率92％。

称取5-羟基-6，7，4′-三乙酰氧基黄酮41.2g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入丙酮120mL，苄溴23.1g(0.135mol)，碳酸钾55.2g(0.40mol)，铜粉3.2g(0.05mol)，加热回流反应3.8h。加入溴乙烷28.4g(0.26mol)，滴加10％氢氧化钠水溶液控制反应液pH值12，于60℃加热3.5h。经TLC检测反应完全后，减压回收丙酮溶剂，降至室温，加入稀盐酸调节pH值至5，有大量黄色固体析出，静置8h后过滤，得黄棕色的5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮40.7g，产率94％。

称取5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮43.2g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入二氯甲烷400mL，0.5％钯碳10g(0.00047mol，以Pd计)，于30℃、常压下通入氢气反应6h。至氢气不再为反应液所吸收，过滤反应液，滤液减压回收乙醇溶剂，得黄色固体5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮31.6g，产率92％。

称取5，7-二羟基-6，4′-二乙氧基黄酮34.2g(0.10mol)于500mL三口烧瓶中，加入丙酮250mL，α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯57.2g(0.13mol)，通入氮气保护，滴加浓度为5.0mol/L的磷酸三钠水溶液100ml(计0.50molNa₃PO₄)。滴加过程中，控制反应液pH值10-12，反应液温度低于35℃。滴加完毕后，加热回流反应6h。减压回收丙酮，降至室温，加入稀盐酸调节pH值至5，有大量黄色固体析出，静置8h后过滤。过滤后所得粗品，用乙醇重结晶，得呈浅黄色固体的式I化合物47.3g，产率91％，经HPLC检测纯度95.8％。

实施例6结构如式I所示化合物的结构鉴定

取实施例1至5制得的结构如式I所示化合物，经旋光、紫外、红外、质谱、核磁共振谱、ROESY谱及HMBC谱测定，图谱数据如下：

[α]23D-128.9o(c 0.11，DMSO)；UV(MeOH)λmax(logε)275(4.42)，330(4.34)nm；IR(KBr)vmax 3425，2931，1656，1606，1453，1356，1249，1184，1082，838，594cm-1；FAB-MS m/z 517[M-H]-；HRESIMS m/z 517.1356[M-H]-(calcd for C₂₅H₂₅O₁₂，517.1346)；¹H、¹³C NMR。数据见表1。

表1 结构如式I所示化合物的NMR(核磁共振)数据(in DMSO)

ROESY谱中，可见H-1″(.5.15，d，J＝6.6Hz)与H-8(.7.01，s)相关。HMBC谱中，可见H-8(.7.01，s)与C-6(.131.0)、C-7(.156.8)，H-1″(.5.15，d，J＝6.6Hz)与C-7(.156.8)，H-7″(.4.04，3.98，each 1H，m)与C-6(.131.0)、C-8″(.15.5)，H-9″(.4.12，q，J＝6.9Hz)与C-4′(.161.7)、C-10″(.14.5)相关。综上数据，证明实施例1至5制得的化合物的结构如式I所示，其结构及关键HMBC和ROESY相关如图1所示，该化合物为一新的化合物，命名为5-羟基-6，4′-二乙氧基-7-O-β-D-葡萄糖醛酸黄酮苷。

实施例7结构如式I所示化合物的抗肿瘤作用实验

实验方法：采用MTT法(徐叔云，卞如濂，陈修.药理试验方法学.北京：人民卫生出版社，2002)，按不同肿瘤生成速率，将一定数量处于对数生长期的Hela、A-549、Bel-7402、HL-60肿瘤细胞90μL/孔分别接种于96孔培养板内，培养24h后加入含有本发明实施例1至5提供的结构如式I所示化合物的药液10μL/孔，对每个细胞株，每个浓度均为三个复孔。肿瘤细胞在37℃、5％CO₂条件下培养48h后，加MTT液(5mg/L，生理盐水配制)20μL/孔，继续培养4h后，加入三联液(10％SDS-5％异丁醇-0.01mol/L HCl)50μL/孔，于CO₂培养箱中过夜，然后用酶标仪在570nm下测定OD值。按下列公式计算被测物对肿瘤细胞生长的抑制率，半数抑制量IC50值采用Logit法计算。

实验结果见表2。

表2 结构如式I所示化合物的肿瘤细胞半数抑制量IC50(μmol/L)

上述实验结果表明，本发明实施例1至5提供的结构如式I所示化合物具有明显的抗肿瘤活性。

实施例8结构如式I所示化合物的抗脑缺血作用实验

选健康的成年沙土鼠，雌雄兼用，体重50-70克。随机分为两组，每组25只，分别灌胃给予本发明实施例1至5提供的结构如式I所示化合物20mg/Kg和等量溶媒(5％羧甲基纤维素钠)，每天1次，连续10天，10天后用2％的戊巴比妥钠(40mg/Kg)ip.麻醉，作颈部正中切口，用动脉夹夹闭侧颈总动脉20min，松夹后直视血管再通，缝合皮肤切口，放回原条件进行饲养，统计各组动物抗脑缺血后24h死亡率。结果溶媒组死亡13只，死亡率52％；本发明实施例1至5提供的化合物组死亡2只，死亡率8％，可见，本发明实施例1至5提供的结构如式I所示化合物具有显著的抗脑缺血作用。

实施例9结构如式I所示化合物的抗血栓作用实验

选健康大鼠50只，雌雄各半，体重210-270克。按性别、体重随机分为两组，每组25只，分别为等容量生理盐水组和本发明实施例1至5提供的结构如式I所示化合物组(20mg/Kg)。每日腹腔注射给药一次，连续7天，末次给药后10min，以乌拉坦1g/Kg剂量腹腔注射麻醉，固定，分离右侧颈总动脉及左侧颈外静脉，按旁路法进行血栓形成测定，使右侧动脉插管血液流经置有棉线的聚乙烯管进入左侧颈外静脉，循环15min后，立即取出棉线称重，计算血栓湿重及抑制率。结果生理盐水组血栓湿重25.18±3.49mg，本发明实施例1至5提供的结构如式I所示化合物组血栓湿重9.97±2.85mg，抑制率为60.41％。可见，本发明实施例1至5提供的结构如式I所示化合物具有显著的抗血栓作用(P＜0.05)。

实施例10结构如式I所示化合物的抗血小板凝集作用实验

体外：本发明实施例1至5提供的化合物浓度为500μg/mL时，对ADD诱导的血小板聚集抑制率为77％；在体内：当静注本发明实施例1至5提供的化合物15mg/Kg时，对胶原所致血小板聚集抑制率为69％。

实施例11用本发明提供的结构如式I所示化合物制备灯盏花乙素

称取按本发明实施例1制得的结构如式I所示化合物51.8g(0.100mol)于500mL三口烧瓶中，加入吡啶盐酸盐100.0g(0.870mol)，通入氮气保护，加热至150℃下反应3h，至反应液呈棕色，趁热加入1mol/L的盐酸水溶液500mL中)，搅拌30min，过滤。过滤后所得粗品，用甲醇重结晶，得黄色固体灯盏花乙素41.7g，收率约90％。mp 298-300℃；¹HNMR(500MHz，DMSO)：12.74(s，1H，-COOH)，10.35(s，1H，C₄-OH)，8.56(s，1H，C₅-OH)，7.92(d，2H，C_2′-H，C_6′-H，J＝8.6Hz)，7.12(d，2H，C_3′-H，C_5′-H，J＝8.6Hz)，6.90(s，1H，C₃-H)，6.83(s，1H，C₈-H)，5.42(s，br，2H，)，5.23(d，1H，J＝6.8Hz)，4.05(d，1H，J＝9.0Hz)，3.45-3.33(m，4H)。

实施例12用本发明提供的结构如式I所示化合物制备灯盏花乙素

称取按本发明实施例2制得的结构如式I所示化合物51.8g(0.100mol)于500mL三口烧瓶中，加入吡啶盐酸盐11.6g(0.1mol)，通入氮气保护，加热至180℃下反应2h，至反应液呈棕色，趁热加入1mol/L的盐酸水溶液300mL中，搅拌30min，过滤。过滤后所得粗品，用乙醇重结晶，得黄色固体灯盏花乙素42.9g，收率约93％。mp 298-300℃；¹HNMR(500MHz，DMSO)：12.74(s，1H，-COOH)，10.35(s，1H，C₄-OH)，8.56(s，1H，C₅-OH)，7.92(d，2H，C_2′-H，C_6′-H，J＝8.6Hz)，7.12(d，2H，C_3′-H，C_5′-H，J＝8.6Hz)，6.90(s，1H，C₃-H)，6.83(s，1H，C₈-H)，5.42(s，br，2H，)，5.23(d，1H，J＝6.8Hz)，4.05(d，1H，J＝9.0Hz)，3.45-3.33(m，4H)。

实施例13用本发明提供的结构如式I所示化合物制备灯盏花乙素

称取按本发明实施例3制得的结构如式I所示化合物51.8g(0.100mol)于500mL三口烧瓶中，加入吡啶盐酸盐57.5g(0.5mol)，通入氮气保护，加热至170℃下反应2.5h，至反应液呈棕色，趁热加入2mol/L的盐酸水溶液350mL中，搅拌30min，过滤。过滤后所得粗品，用丙酮重结晶，得黄色固体灯盏花乙素37.6g，收率约81％。mp 298-300℃；¹HNMR(500MHz，DMSO)：12.74(s，1H，-COOH)，10.35(s，1H，C₄-OH)，8.56(s，1H，C₅-OH)，7.92(d，2H，C_2′-H，C_6′-H，J＝8.6Hz)，7.12(d，2H，C_3′-H，C_5′-H，J＝8.6Hz)，6.90(s，1H，C₃-H)，6.83(s，1H，C₈-H)，5.42(s，br，2H，)，5.23(d，1H，J＝6.8Hz)，4.05(d，1H，J＝9.0Hz)，3.45-3.33(m，4H)。

实施例14用本发明提供的式I化合物制备灯盏花乙素

称取按本发明实施例4制得的结构如式I所示化合物51.8g(0.100mol)于500mL三口烧瓶中，加入吡啶盐酸盐115.6g(1mol)，通入氮气保护，加热至160℃下反应2.2h，至反应液呈棕色，趁热加入2mol/L的盐酸水溶液500mL中，搅拌30min，过滤。过滤后所得粗品，用甲醇重结晶，得黄色固体灯盏花乙素41.5g，收率90％。mp 298-300℃；¹HNMR(500MHz，DMSO)：12.74(s，1H，-COOH)，10.35(s，1H，C₄-OH)，8.56(s，1H，C₅-OH)，7.92(d，2H，C_2′-H，C_6′-H，J＝8.6Hz)，7.12(d，2H，C_3′-H，C_5′-H，J＝8.6Hz)，6.90(s，1H，C₃-H)，6.83(s，1H，C₈-H)，5.42(s，br，2H，)，5.23(d，1H，J＝6.8Hz)，4.05(d，1H，J＝9.0Hz)，3.45-3.33(m，4H).

实施例15用本发明提供的式I化合物制备灯盏花乙素

称取按本发明实施例5制得的结构如式I所示化合物51.8g(0.100mol)于500mL三口烧瓶中，加入吡啶盐酸盐80.5g(0.7mol)，通入氮气保护，加热至150℃下反应2.8h，至反应液呈棕色，趁热加入2mol/L的盐酸水溶液300mL中，搅拌30min，过滤。过滤后所得粗品，用甲醇重结晶，得黄色固体灯盏花乙素44.9g，收率约97％。mp 298-300℃；¹HNMR(500MHz，DMSO)：12.74(s，1H，-COOH)，10.35(s，1H，C₄-OH)，8.56(s，1H，C₅-OH)，7.92(d，2H，C_2′-H，C_6′-H，J＝8.6Hz)，7.12(d，2H，C_3′-H，C_5′-H，J＝8.6Hz)，6.90(s，1H，C₃-H)，6.83(s，1H，C₈-H)，5.42(s，br，2H，)，5.23(d，1H，J＝6.8Hz)，4.05(d，1H，J＝9.0Hz)，3.45-3.33(m，4H).

实施例16药物组合物

粉碎后过筛，混合即得。

实施例17药物组合物

粉碎后过筛，混合即得。

实施例18药物组合物

粉碎后过筛，混合即得。

实施例19药物组合物

粉碎后过筛，混合即得。

实施例20药物组合物

粉碎后过筛，混合即得。

实施例21药物组合物

本发明提供的式I所示化合物 5％

干淀粉 90％

硬脂酸镁 5％

粉碎后过筛，混合即得。

实施例22药物组合物

本发明提供式I所示的化合物 15％

干淀粉 65％

硬脂酸镁 20％

粉碎后过筛，混合即得。

实施例23药物组合物

本发明提供的式I所示化合物 5％

干淀粉 75％

硬脂酸镁 20％

粉碎后过筛，混合即得。

实施例24药物组合物

本发明提供的式I所示化合物 10％

干淀粉 80％

硬脂酸镁 10％

粉碎后过筛，混合即得。

实施例25药物组合物

本发明提供的式I所示化合物 12％

干淀粉 73％

硬脂酸镁 15％

粉碎后过筛，混合即得。

实施例26片剂

实施例27片剂

实施例28片剂

实施例29片剂

实施例30片剂

实施例31胶囊

本发明提供的式I所示化合物 5％

干淀粉 90％

硬脂酸镁 5％

实施例32胶囊

本发明提供的式I所示化合物 15％

干淀粉 65％

硬脂酸镁 20％

实施例33胶囊

本发明提供的式I所示化合物 5％

干淀粉 75％

硬脂酸镁 20％

实施例34胶囊

本发明提供的式I所示化合物 10％

干淀粉 80％

硬脂酸镁 10％

实施例35胶囊

本发明提供的式I所示化合物 12％

干淀粉 73％

硬脂酸镁 15％

实施例36注射液

实施例37注射液

实施例38注射液

实施例39注射液

实施例40注射液

实施例41注射液

实施例42冻干粉针剂

实施例43冻干粉针剂

实施例44冻干粉针剂

实施例45冻干粉针剂

实施例46冻干粉针剂

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种化合物，其特征在于，其结构如式Ⅰ所示：

式Ⅰ。

2.根据权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：以醋酸为溶剂，5,6,7,4′-四羟基黄酮与醋酐在质子酸的催化下，于20～150℃温度下反应3～4h，得到5-羟基-6,7,4′-三乙酰氧基黄酮；所述5,6,7,4′-四羟基黄酮、醋酐和质子酸的摩尔比为1.0:3.0～3.5:0.0005～0.01；所述质子酸选自硫酸、盐酸、磷酸、硝酸、高氯酸；

步骤2：以丙酮为溶剂，所述5-羟基-6,7,4′-三乙酰氧基黄酮与苄溴在铜粉和碳酸钾的催化下，反应3～4h，加入卤代乙烷，用碱调节pH值为10～12，于40～80℃温度下反应1～4h，得到5-羟基-6,4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮；所述5-羟基-6,7,4′-三乙酰氧基黄酮、苄溴、铜粉、碳酸钾、卤代乙烷的摩尔比为1.0:1.0～1.5:0.1～2.0:1.0～5.0:2.0～3.0；所述卤代乙烷选自溴乙烷、氯乙烷或碘乙烷；

步骤3：所述5-羟基-6,4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮在钯-碳催化下，于20～40℃通入氢气反应3～8h，得到5,7-二羟基-6,4′-二乙氧基黄酮；所述5-羟基-6,4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮与所述钯碳的摩尔比为1.0:0.0002～0.01；

步骤4：以丙酮为溶剂，所述5,7-二羟基-6,4′-二乙氧基黄酮与α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯在碱的催化作用下反应即得；所述5,7-二羟基-6,4′-二乙氧基黄酮与所述α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯、所述碱的摩尔比为1.0:1.0～2.0:1.5～5.0。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤1中所述5,6,7,4′-四羟基黄酮、醋酐和质子酸的摩尔比为1.0:（3.0～3.2）:（0.001～0.005）。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤1中所述温度为50～80℃。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤2中所述5-羟基-6,7,4′-三乙酰氧基黄酮、苄溴、铜粉、碳酸钾、卤代乙烷的摩尔比为1.0:1.1～1.2:0.5～1.5:1.5～3.0:2.2～2.6。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤3中所述5-羟基-6,4′-二乙氧基-7-苄氧基黄酮与所述钯碳的摩尔比为1.0:0.0005～0.005。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤4中所述5,7-二羟基-6,4′-二乙氧基黄酮与所述α-D-溴代三乙酰葡萄糖醛酸甲酯、所述碱的摩尔比为1.0:1.2～1.5:2.0～4.0。

8.根据权利要求1所述的化合物在制备治疗心脑血管疾病或/和肿瘤药物中的应用。

9.根据权利要求1所述的化合物在制备灯盏花素乙素中的应用。

10.根据权利要求1所述化合物制备灯盏花乙素的方法，其特征在于，所述化合物与吡啶盐酸盐在150～180℃温度下反应2～3h，即得；所述化合物与所述吡啶盐酸盐的摩尔比为1.0:1.0～10.0。

11.一种药物组合物，其特征在于，包括权利要求1所述的化合物及药学上可接受的辅料。

12.一种包含权利要求11所述药物组合物的临床制剂。

13.根据权利要求12所述的临床制剂，其特征在于，其为口服制剂或注射制剂。