CN102276455A - 一种阴香干果实中提取有效成分的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种阴香干果实中提取有效成分的方法,旨在提供一种从阴香干果实中提取花色苷、原花青素、果胶、黄樟油素及甘油三月桂酸酯的方法;属于天然产物提取分离技术领域;其技术要点依次包括下述步骤:挑选阴香果实清洗,干燥粉碎后加热,压榨出油脂;榨出的油脂室温冷却结晶,固液分离后,分别收集液体黄樟油素与固体甘油三月桂酸酯;然后将压榨除油后的物料超声波处理,大孔吸附树脂静态吸附,层析柱动态解吸;收集解吸液,干燥后即得花色苷及原花青素粉状混合物;分离的清液减压浓缩后加醇沉淀,离心收集沉淀,干燥得阴香果实的果胶;清液减压回收乙醇,然后喷雾干燥得果实内的糖分等物质。
Description
技术领域
本发明涉及一种提取方法,特别是从阴香干果实中提取甘油三月桂酸酯、果胶、花色苷、原花青素和糖分物质的方法,属于天然产物提取分离技术领域。
背景技术
阴香,别名粘连树、梓樟、香桂树,属樟科木本植物,主要分布广东、福建及东南亚等地。阴香树常绿乔木,扦插树冠木状,抗逆性强、长势旺、树冠茂盛,对氯气和二氧化硫均有较强的抗性,是华南地区常用的优良行道树和庭园绿化树种。阴香是重要的经济林木,其树皮、叶提取的芳香油,可食用或作皂用香精;茎皮可入药;木材可作细工用才。阴香树每年结大量椭圆形果实,成熟果实大小6-9×8-11mm。阴香果肉内含花色苷的1.62%及原花青素3.47%。花色苷与原花青素都是清除自由基与抗氧化的生物活性物质,抗变异、抗肿瘤、抗过敏、延缓衰老、提高人体免疫力等,可以降低冠状动脉心脏病发病率;抑制胆固醇吸收,降低低密度脂蛋白胆固醇含量。因而花色苷是开发保健品的重要功能性成分,在食品加工、医药、化妆品等行业广泛应用的安全的着色剂。
阴香果内的大量果胶,在食品业中可作增稠剂、稳定剂、乳化剂和凝胶剂,还可作为水溶性膳食纤维。近年来随着果胶在医药、食品和其他工业中的广泛应用,它越来越受到研究和加工行业的重视。阴香果肉黄樟油素23.91%,果核中61.15%甘油三月桂酸酯。黄樟油素是制造洋茉莉醛、乙基香兰素等合成香料的主要天然原料。甘油三月桂酸酯可用于合成甘油单月桂酸酯,它不仅是一种安全高效广谱抗菌剂,能抑制HIV等多种病毒及细菌,抗菌效果优于山梨酸、苯甲酸钠,也是一种优良的食品抗菌剂和乳化稳定剂,为公认用于食品的安全化合物,广泛用于食品、医药及化妆品行业中。
发明内容
本发明的目的是提供一种提取方法简单、提取率高,从阴香干果实中提取花色苷、原花青素、果胶、黄樟油素及甘油三月桂酸酯的方法。
本发明的技术要点是这样的:一种阴香干果实中提取有效成分的方法,依次包括下述步骤:
(1)挑选无腐烂的阴香果实清洗后干燥、粉碎;
(2)将步骤(1)获得的阴香干果颗粒加热至30~90℃,压榨出颗粒内的油脂;
(3)将步骤(2)榨出的油脂冷却、静置析出白色结晶后进行固液分离,固体部分再加热至40~80℃,融化后再冷却、静置,结晶后再次进行固液分离,分别收集分离后的液体与固体;
(4)将步骤(3)得到的固体部分与无水甲醇按体积比1~6∶1混合,40~80℃加热使固体融化,冷却,静置,结晶后再次进行固液分离,分别收集分离后的液体与固体物料;将收集的固体进行减压蒸馏除去残留甲醇,即得甘油三月桂酸酯;收集的液体减压蒸馏回收甲醇后与步骤(2)分离后的液体合并即为黄樟油素;
(5)将步骤(2)压榨除油后的固体物料用石油醚回流浸提残余脂类物质2~10小时,然后减压蒸馏除去石油醚、干燥后粉碎得无脂物料粉末;
(6)将步骤(5)获得的无脂物料粉末与去离子水按质量比1∶5~20混合,搅拌浸泡0.5~6小时,再超声波处理,使胶体液化,过滤,收集滤液;
(7)调节步骤(6)所得的滤液pH值为1~10,再与大孔吸附树脂按10~50∶1体积比混合,搅拌浸提0.5~6小时后,分离清液与树脂,以1~5倍树脂体积的去离子水漂洗大孔吸附树脂树脂2~10分钟;
(8)将步骤(7)分离所得的树脂装入层析柱,以醇溶液为解吸液,流速0.3~4倍柱床体积/小时,解吸树脂上吸附的花色苷及原花青素,收集含花色苷及原花青素的解吸液;
(9)将步骤(8)收集的解吸液减压蒸馏回收醇溶剂,然后干燥,得花色苷及原花青素混合粉状物;
(10)将步骤(7)分离的清液减压蒸馏浓缩至原体积的1/2~1/5,再加入醇溶剂使溶液的醇浓度为30~95%,充分混匀,固液分离后分别收集沉淀和清液,干燥沉淀即得阴香果实的果胶;
(11)将步骤(10)的清液减压回收乙醇,然后喷雾干燥,得果实内的糖分物质。
上述的阴香干果实中提取有效成分的方法,步骤(1)中阴香果实粉碎后以30~140目筛过筛。
上述的阴香干果实中提取有效成分的方法,步骤(8)中的醇溶液是乙醇水溶液或甲醇水溶液。
上述的阴香干果实中提取有效成分的方法,步骤(7)中的树脂是DA201、DM301、DS401、DM-18或NKA-II的其中之一。
上述的阴香干果实中提取有效成分的方法,其特征在于,所述的干燥为真空喷雾干燥;真空喷雾干燥的温度为:30~100℃。
上述的阴香干果实中提取有效成分的方法,步骤(8)所述的解吸液pH值为1~10、30~95%。
上述的阴香干果实中提取有效成分的方法,采用盐酸或氢氧化钠水溶液调节pH值。
上述的从阴香干果实中提取有效成分的方法,步骤(7)中所述的减压蒸馏温度为50~100℃。
上述的阴香干果实中提取有效成分的方法,所述的超声波处理时间为1~60分钟。
上述的阴香干果实中提取有效成分的方法,所述的有效成分为花色苷、原花青素、果胶、黄樟油素、甘油三月桂酸酯和糖分物质。
本发明具有如下优点:
1、综合利用阴香果实的有效成分。阴香干果实中含丰富的有花色苷、原花青素、果胶、黄樟油素及甘油三月桂酸酯,以及糖和蛋白质等多种成分,本技术包括阴香干果实各重要成分的提取,使阴香干果实得到充分利用。
2、阴香果实成分的开发成本低。阴香为多年生常绿树、栽植后不用精细管理,可数十年采集果实,原料成本较低。阴香在华南沿海省区广泛用于庭园与行道的绿化,近年还大量用于水源涵养林种植。华南沿海省区的阴香树每年果实的产量极高,果实内含丰富具较高开发价值的物质,但一直没被开发利用,采集被废弃的阴香果实为原料进行开发,其原料成本比以农产品开发相应产品的低。
3、提取效率高。阴香干果实的果肉与果核中含有大量的果胶、糖及蛋白,因而若直接加溶剂从干的阴香果实物料中提取主要成分,需要加数十倍的溶剂使果胶充分稀释。但本技术先以较少的水浸泡物料后,以超声波处理既可使胶体物质粘性大大降低后进行固液分离,又有利于果实成分的溶解,大大提高了目的物质的提取效率。
4、提取费用低。本技术关键采用超声波处理阴香干果实的物料,促进了细胞内物质在溶剂中的溶解,同时溶液中的花色苷及原花青素2种价值最高的生物活性物质可用同一种树脂进行吸附,又几乎同时解吸流出层析柱,而且是以同一材料提取多种成分,所以本技术提取阴香果内多种成分,其提取的费用很低。
5、有机溶剂用量少。本技术先使物料中果胶溶出、并经超声波处理后使果胶的粘性大大降低,从而使物料中的花色苷、原花青素等易于溶于溶剂中,因而提取时不必使用有机溶剂,而只是在树脂解吸精制才使用醇溶液。
具体实施方式
下面结合实施例,对本发明作进一步的描述,但其不代表为本发明的唯一实施方式。
实施例1
1、果实的采摘
当年12月至次年2月果皮褪绿至紫色的阴香果实,以去离子水漂洗1~2次,洗净果实表面的灰尘,捞取果实,去除杂物与伤果等,风干后备用。
2、果实油脂的分离
粉碎风干后的阴香果实,以30~140目筛过筛,于30~90℃的榨油机内压榨出物料中的粗脂肪,颗粒的粒径越小,所用的压榨温度越低,反之亦然,即颗粒榨油后的阴香果实饼以石油醚回流浸提残余脂类物质3小时。
3、油脂的初步分离
将压榨榨出的油脂室温冷却20小时,析出白色结晶后,离心脱水机1000转/分离心分离15分钟,固体部分再加热至40~60℃,融化后再冷却至15~40℃,静置1~48小时,冷却的温度和静置的时间主要以析出沉淀晶体为准,结晶后再次进行固液离心分离,分别收集分离后的液体与固体。得到的固体部分与无水甲醇按体积比1~6∶1混合,40~60℃加热使固体融化,冷却至15~40℃,静置1~48小时,结晶后再次进行固液分离,分别收集分离后的液体与固体物料。将收集的固体进行减压蒸馏除去残留甲醇,即得甘油三月桂酸酯;收集的液体减压蒸馏回收甲醇后与离心分离后的液体合并即为黄樟油素;
4、无脂物料粉碎
将榨除油后的固体物料用2~5倍固体物料体积的石油醚回流浸提残余脂类物质2~10小时,石油醚的用量越大所需浸提时间越短,石油醚的用量越小所需浸提时间越大,然后减压蒸馏除去石油醚,再粉碎物料,30~140目过筛,得无脂物料粉末;
5、物料超声波处理
在阴香干果实粉末物料中加入去离子水混合,物料与水质量比1∶5~20混合,室温浸泡,同时连续100转/分搅拌0.5~6小时,去离子水的用量越大所需浸提时间越短,去离子水的用量越小所需浸提时间越大,然后超声波处理1~60分钟至胶体全部液化为止,所用的去离子水的量越大则超声波处理的时间越长,反之亦然。过滤,收集滤液。滤渣再加入去离子水,物料与水以质量比1∶5混合,同时连续100转/分搅拌0.5小时,过滤,收集滤液,然后再重复提取3次。
6、静态吸附
将过滤滤液与DM301(对于DA201、DM301、DS401、DM-18或NKA-II也同样适用)大孔树脂按10~50∶1体积比(V/V)混合,搅拌器50~500转/分,搅拌浸提0.5~6小时后,树脂用量越大,所需的浸提时间越短,然后再分离清液与树脂,以1~5倍树脂体积的去离子水漂洗大孔吸附树脂2~10分钟后将树脂装入层析柱。
7、吸附物解吸
以pH值为1~10、30~95%的醇溶液为解吸液,流速0.3~4倍柱床体积/小时,解吸树脂上吸附的花色苷及原花青素,收集含花色苷及原花青素的解吸液,以pH值为1~10、30~95%的乙醇或甲醇溶液通入吸附花色苷与原花青素的DM301(对于DA201、DM301、DS401、DM-18或NKA-II也同样适用)大孔树脂层析柱,以0.3~4倍柱床体积/小时流速,从流出液达0.3倍柱床体积时开始收集解吸液,至4倍柱床体积时停止。
8、溶剂回收与干燥
将收集的解吸液减压蒸发回收溶剂,当溶液中溶剂浓度降至10%以下后50~100℃喷雾干燥,得含花色苷及原花青素的粉状物产品。
9、果胶的分离
将静态吸附提取液中花色苷及原花青素后的液体50~100℃蒸发、浓缩,液体体积减小至原体积的1/2~1/5时停止,室温冷却至40度以下加入乙醇,使液体内乙醇浓度达30~95%,静置、沉淀,先去除中、上层的清液,剩余的部分液体离心,收集沉淀30~100℃喷雾真空干燥后得阴香果实的果胶。
10、果实糖分的获取
将已去除了花色苷、原花青素及果胶的清液喷雾干燥,获得阴香干果实糖分等可溶性物质。
实施例2
本发明的一个优选试验方案
1、果实的采摘
当年12月至次年2月果皮褪绿至紫色的阴香果实,以去离子水漂洗1~2次,洗净果实表面的灰尘,捞取果实,去除取杂物与伤果等,风干后备用。
2、果实油脂的分离
以粉碎机粉碎风干的阴香果实,粉碎后以90目筛过筛,于60~70℃的榨油机内压榨出物料中的粗脂肪,榨油后的阴香果实饼以石油醚回流浸提残余脂类物质3小时。
3、油脂的初步分离
将压榨榨出的油脂室温冷却20小时,析出白色结晶后,离心脱水机1000转/分离心分离15分钟,固体部分再加热至50℃,融化后再冷却至15℃,静置24小时,结晶后再次进行固液离心分离,分别收集分离后的液体与固体。得到的固体部分与无水甲醇按体积比1∶3混合,40~60℃加热使固体融化,冷却至115℃,静置24小时,结晶后再次进行固液分离,分别收集分离后的液体与固体物料。将收集的固体进行减压蒸馏除去残留甲醇,即得甘油三月桂酸酯;收集的液体减压蒸馏回收甲醇后与离心分离后的液体合并即为黄樟油素;
4、无脂物料粉碎
将榨除油后的固体物料用石油醚回流浸提残余脂类物质5小时,然后减压蒸馏除去石油醚,再粉碎物料,100目过筛,得无脂物料粉末;
5、物料超声波处理
在阴香干果实粉末物料中加入去离子水混合,物料与水质量比1∶10,室温浸泡,同时连续100转/分搅拌4小时,然后超声波处理20分钟至胶体全部液化为止,过滤,收集滤液。滤渣再加入去离子水,物料与水以质量比1∶5混合,同时连续100转/分搅拌0.5小时,过滤,收集滤液,然后再重复提取3次,各次花色苷及原花青素的提取得率见附表1。
表1不同浸提次数浸提花色苷及原花青素提取效果
6、静态吸附
将过滤滤液与DM301按40∶1(体积/体积)混合,连续100转/分搅拌,3小时后分离已吸附滤液中花色苷与原花青素的树脂,以2倍树脂体积的去离子水漂洗2分钟后将树脂装入层析柱。
7、吸附物解吸
以80%的乙醇醇溶液通入吸附花色苷与原花青素的DM301层析柱,以1.0倍柱床体积/小时流速,从流出液达0.3倍柱床体积时开始收集解吸液,至1.4倍柱床体积时停止,层析柱流出的不同解吸液体积与花色苷及原花青素解吸率的关系见表2。
表2不同洗脱体积的花色苷及原花青素的解吸率(%)
8、溶剂回收与干燥
将收集的解吸液减压蒸发回收溶剂,当溶液中溶剂浓度降至5%后70℃喷雾干燥,得含花色苷及原花青素的粉状物产品。
9、果胶的分离
将静态吸附提取液中花色苷及原花青素后的液体90℃蒸发、浓缩,液体体积减小至原体积的1/5时停止,室温冷却至40度以下加入乙醇,使液体内乙醇浓度达70%,静置、沉淀,先去除中、上层的清液,剩余的部分液体离心,收集沉淀喷雾真空干燥后得阴香果实的果胶。
10、果实糖分的获取
将已去除了花色苷、原花青素及果胶的清液喷雾干燥,获得阴香干果实糖分物质。
Claims (10)
1.一种阴香干果实中提取有效成分的方法,其特征在于,依次包括下述步骤:
(1)挑选无腐烂的阴香果实清洗后干燥、粉碎;
(2)将步骤(1)获得的阴香干果颗粒加热至30~90℃,压榨出颗粒内的油脂;
(3)将步骤(2)榨出的油脂冷却、静置析出白色结晶后进行固液分离,固体部分再加热至40~80℃,融化后再冷却、静置,结晶后再次进行固液分离,分别收集分离后的液体与固体;
(4)将步骤(3)得到的固体部分与无水甲醇按体积比1~6∶1混合,40~80℃加热使固体融化,冷却,静置,结晶后再次进行固液分离,分别收集分离后的液体与固体物料;将收集的固体进行减压蒸馏除去残留甲醇,即得甘油三月桂酸酯;收集的液体减压蒸馏回收甲醇后与步骤(2)分离后的液体合并即为黄樟油素;
(5)将步骤(2)压榨除油后的固体物料用石油醚回流浸提残余脂类物质2~10小时,然后减压蒸馏除去石油醚、干燥后粉碎得无脂物料粉末;
(6)将步骤(5)获得的无脂物料粉末与去离子水按质量比1∶5~20混合,搅拌浸泡0.5~6小时,再超声波处理,使胶体液化,过滤,收集滤液;
(7)调节步骤(6)所得的滤液pH值为1~10,再与大孔吸附树脂按10~50∶1体积比混合,搅拌浸提0.5~6小时后,分离清液与树脂,以1~5倍树脂体积的去离子水漂洗大孔吸附树脂树脂2~10分钟;
(8)将步骤(7)分离所得的树脂装入层析柱,以醇溶液为解吸液,流速0.3~4倍柱床体积/小时,解吸树脂上吸附的花色苷及原花青素,收集含花色苷及原花青素的解吸液;
(9)将步骤(8)收集的解吸液减压蒸馏回收醇溶剂,然后干燥,得花色苷及原花青素混合粉状物;
(10)将步骤(7)分离的清液减压蒸馏浓缩至原体积的1/2~1/5,再加入醇溶剂使溶液的醇浓度为30~95%,充分混匀,固液分离后分别收集沉淀和清液,干燥沉淀即得阴香果实的果胶;
(11)将步骤(10)的清液减压回收乙醇,然后喷雾干燥,得果实内的糖分物质。
2.根据权利要求1所述的阴香干果实中提取有效成分的方法,其特征在于,步骤(1)中阴香果实粉碎后以30~140目筛过筛。
3.根据权利要求1所述的阴香干果实中提取有效成分的方法,其特征在于,步骤(8)中的醇溶液是乙醇水溶液或甲醇水溶液。
4.根据权利要求1所述的阴香干果实中提取有效成分的方法,其特征在于,步骤(7)中的树脂是DA201、DM301、DS401、DM-18或NKA-II的其中之一。
5.根据权利要求1所述的阴香干果实中提取有效成分的方法,其特征在于,所述的干燥为真空喷雾干燥;真空喷雾干燥的温度为:30~100℃。
6.根据权利要求1所述的阴香干果实中提取有效成分的方法,其特征在于,步骤(8)所述的解吸液pH值为1~10、30~95%。
7.根据权利要求1所述的阴香干果实中提取有效成分的方法,其特征在于,采用盐酸或氢氧化钠水溶液调节pH值。
8.根据权利要求1所述的从阴香干果实中提取有效成分的方法,其特征在于,步骤(7)中所述的减压蒸馏温度为50~100℃。
9.根据权利要求1所述的阴香干果实中提取有效成分的方法,其特征在于,所述的超声波处理时间为1~60分钟。
10.根据权利要求1所述的阴香干果实中提取有效成分的方法,其特征在于,所述的有效成分为花色苷、原花青素、果胶、黄樟油素、甘油三月桂酸酯和糖分物质。
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