CN102274341A - 玄参药用成分的提取精制工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种玄参药用成分的提取精制工艺，即环烯醚萜和苯丙素类成分的提取精制工艺：将玄参干燥根粉碎，浸泡，水提，提取液浓缩，乙醇沉淀，树脂吸附，乙醇洗脱，浓缩干燥等工序制得。本发明提取精制工艺提取率高，可达50％以上，质量稳定可控，方法简单，成分低廉，适于大规模工业化生产，从而为玄参的开发利用提供了新的途径。
Description
技术领域
本发明涉及一种玄参中环烯醚萜和苯丙素类成分的提取精制方法。
背景技术
玄参中含有多种环烯醚萜和苯丙素类成分，如哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷、安格洛苷C等，药理研究表明这些成分具有镇痛、抗炎、抗菌、保肝、抗氧化、增强免疫等作用。值得一提的是，玄参中环烯醚萜和苯丙素类成分对心血管系统的作用比较突出，有扩张冠状动脉、降血压、抗血小板聚集、促进纤溶、改善血液流变性等作用，对于充血性心力衰竭有较好的疗效。
近年来，有关玄参中环烯醚萜和苯丙素类成分的提取的研究也有少量报道，如超声波提取、半仿生提取等，这些方法制取的产品环烯醚萜和苯丙素类成分含量较低，且含有大量的蛋白质、糖类等杂质，质量难以控制，难以实现大规模工业化生产，限制了产品的应用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种适合大规模工业生产，环烯醚萜和苯丙素类成分含量较高，质量稳定可控的玄参药用成分的提取精制工艺。
本发明为解决上述技术问题而提供的技术方案是：一种玄参药用成分的提取精制工艺，包括将玄参干燥根粉碎，浸泡，水煎煮，提取液浓缩，乙醇沉淀，树脂吸附，乙醇洗脱，浓缩干燥等工序，其中：
所说的玄参干燥根粉碎过程是将玄参于30～60℃烘干，粉碎，备用；
所说的浸泡过程是将粉碎后的玄参用5～10倍量的水浸泡2～5小时；
所说的水提过程是将浸泡后的玄参以料液比1∶5～1∶10加入提取罐，水提2～3次，每次2～4小时；提取液过滤后合并，真空浓缩至每毫升含生药量1～2g；
所说的乙醇沉淀过程是指玄参浓缩液加95％乙醇至终浓度为60～80％，冷藏沉淀1～3次，每次24～48小时，醇沉液过滤，真空浓缩至每毫升含生药量2～3g；
所说的树脂吸附过程是指浓缩后的醇沉液以树脂与生药质量比为1∶1～1∶3的比例上样，静态吸附0.25～1小时；
所说的乙醇洗脱过程是指玄参醇沉液静态吸附完毕后，先用8～12倍柱体积的水洗，再用5～10倍柱体积的40％～60％的乙醇洗脱；
所说的浓缩干燥过程是指收集40％～60％乙醇洗脱液，真空浓缩收膏，并采用冷冻干燥或60℃以下真空干燥制得提取物。
采用本发明的上述提取精制工艺，环烯醚萜和苯丙素类成分提取率高，可达到50％以上，质量稳定可控，能够满足药品的质量要求，且方法简便，成本低廉，适于大规模工业化生产，从而为玄参资源的开发利用提供了新的途径。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求所限定的范围。
本发明以下实施例均用高效液相色谱多波长梯度洗脱法测定产品中哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷和安格洛苷C 5种成分的总含量。方法：色谱柱为Agilent SB-C18(5μm，4.6mm×250mm)，流动相为乙腈-0.03％磷酸水溶液，梯度洗脱(乙腈：0min，3％；10min，10％；30min，30％；35min，50％；37min，3％；42min，3％)，流速为1mL/min，检测波长为210、280、330nm，温度为30℃。
实施例1
玄参干燥根15kg于35℃烘干，粉碎。加入75L水浸泡2小时，然后将浸泡后的玄参以料液比1∶6加入提取罐，提取3次，每次3小时。提取液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液7.5L。浓缩液加95％乙醇至终浓度为60％，冷藏沉淀2次，每次24小时，醇沉液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液5L。浓缩液用15kg D1400型大孔树脂静态吸附0.5小时后，先用8倍柱体积的水洗，再用5倍柱体积的40％的乙醇洗脱。收集40％乙醇洗脱液，真空浓缩收膏，并采用冷冻干燥制得产品。经测定，该产品中环烯醚萜和苯丙素类成分(哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷和安格洛苷C)的总含量为53％。
实施例2
玄参干燥根15kg于40℃烘干，粉碎。加入90L水浸泡3小时，然后将浸泡后的玄参以料液比1∶6加入提取罐，提取2次，每次2小时。提取液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液10L。浓缩液加95％乙醇至终浓度为80％，冷藏沉淀1次，每次48小时，醇沉液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液7.5L。浓缩液用5kg D1400型大孔树脂静态吸附0.75小时后，先用12倍柱体积的水洗，再用10倍柱体积的40％的乙醇洗脱。收集40％乙醇洗脱液，真空浓缩收膏，并采用60℃真空干燥制得产品。经测定，该产品中环烯醚萜和苯丙素类成分(哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷和安格洛苷C)的总含量为52％。
实施例3
玄参干燥根15kg于60℃烘干，粉碎。加入105L水浸泡2小时，然后将浸泡后的玄参以料液比1∶8加入提取罐，提取2次，每次3小时。提取液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液10L。浓缩液加95％乙醇至终浓度为70％，冷藏沉淀3次，每次48小时，醇沉液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液7.5L。浓缩液用5kg D1300型大孔树脂静态吸附0.25小时后，先用10倍柱体积的水洗，再用5倍柱体积的60％的乙醇洗脱。收集60％乙醇洗脱液，真空浓缩收膏，并采用50℃真空干燥制得产品。经测定，该产品中环烯醚萜和苯丙素类成分(哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷和安格洛苷C)的总含量为51％。
实施例4
玄参干燥根15kg于60℃烘干，粉碎。加入120L水浸泡2小时，然后将浸泡后的玄参以料液比1∶10加入提取罐，提取2次，每次4小时。提取液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液10L。浓缩液加95％乙醇至终浓度为75％，冷藏沉淀3次，每次24小时，醇沉液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液7.5L。浓缩液用15kg D300型大孔树脂静态吸附0.5小时后，先用12倍柱体积的水洗，再用10倍柱体积的40％的乙醇洗脱。收集40％乙醇洗脱液，真空浓缩收膏，并采用冷冻干燥制得产品。经测定，该产品中环烯醚萜和苯丙素类成分(哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷和安格洛苷C)的总含量为52％。
实施例5
玄参干燥根15kg于45℃烘干，粉碎。加入75L水浸泡4小时，然后将浸泡后的玄参以料液比1∶5加入提取罐，提取2次，每次4小时。提取液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液7.5L。浓缩液加95％乙醇至终浓度为80％，冷藏沉淀2次，每次48小时，醇沉液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液15L。浓缩液用15kg DM130型大孔树脂静态吸附1小时后，先用8倍柱体积的水洗，再用5倍柱体积的60％的乙醇洗脱。收集60％乙醇洗脱液，真空浓缩收膏，并采用冷冻干燥制得产品。经测定，该产品中环烯醚萜和苯丙素类成分(哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷和安格洛苷C)的总含量为57％。
实施例6
玄参干燥根15kg于55℃烘干，粉碎。加入90L水浸泡5小时，然后将浸泡后的玄参以料液比1∶10加入提取罐，提取2次，每次3小时。提取液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液7.5L。浓缩液加95％乙醇至终浓度为70％，冷藏沉淀1次，每次48小时，醇沉液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液5L。浓缩液用5kg DM130型大孔树脂静态吸附0.75小时后，先用10倍柱体积的水洗，再用10倍柱体积的40％的乙醇洗脱。收集40％乙醇洗脱液，真空浓缩收膏，并采用冷冻干燥制得产品。经测定，该产品中环烯醚萜和苯丙素类成分(哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷和安格洛苷C)的总含量为60％。
实施例7
玄参干燥根15kg于35℃烘干，粉碎。加入90L水浸泡3小时，然后将浸泡后的玄参以料液比1∶6加入提取罐，提取3次，每次2小时。提取液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液10L。浓缩液加95％乙醇至终浓度为75％，冷藏沉淀3次，每次48小时，醇沉液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液7.5L。浓缩液用7.5kg HPD100型大孔树脂静态吸附0.25小时后，先用10倍柱体积的水洗，再用5倍柱体积的50％的乙醇洗脱。收集50％乙醇洗脱液，真空浓缩收膏，并采用60℃真空干燥制得产品。经测定，该产品中环烯醚萜和苯丙素类成分(哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷和安格洛苷C)的总含量为54％。
实施例8
玄参干燥根15kg于60℃烘干，粉碎。加入75L水浸泡5小时，然后将浸泡后的玄参以料液比1∶10加入提取罐，提取3次，每次2小时。提取液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液10L。浓缩液加95％乙醇至终浓度为70％，冷藏沉淀1次，每次48小时，醇沉液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液7.5L。浓缩液用5kg HPD100型大孔树脂静态吸附1小时后，先用12倍柱体积的水洗，再用10倍柱体积的40％的乙醇洗脱。收集40％乙醇洗脱液，真空浓缩收膏，并采用60℃真空干燥制得产品。经测定，该产品中环烯醚萜和苯丙素类成分(哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷和安格洛苷C)的总含量为55％。
实施例9
玄参干燥根15kg于55℃烘干，粉碎。加入90L水浸泡2小时，然后将浸泡后的玄参以料液比1∶8加入提取罐，提取2次，每次3小时。提取液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液7.5L。浓缩液加95％乙醇至终浓度为80％，冷藏沉淀3次，每次24小时，醇沉液过滤后合并，进行真空浓缩，得浓缩液5L。浓缩液用10kg DA101型大孔树脂静态吸附0.25小时后，先用10倍柱体积的水洗，再用6倍柱体积的60％的乙醇洗脱。收集60％乙醇洗脱液，真空浓缩收膏，并采用冷冻干燥制得产品。经测定，该产品中环烯醚萜和苯丙素类成分(哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷和安格洛苷C)的总含量为58％。
Claims (1)
1.一种玄参药用成分的提取精制工艺，其特征在于，该提取精制工艺依次包括如下步骤：
将玄参于30～60℃烘干，粉碎，备用；
将粉碎后的玄参用5～10倍量的水浸泡2～5小时；
将浸泡后的玄参以料液比1∶5～1∶10加入提取罐，水提2～3次，每次2～4小时；提取液过滤后合并，真空浓缩至每毫升含生药量1～2g；
玄参浓缩液加95％乙醇至终浓度为60～80％，冷藏沉淀1～3次，每次24～48小时，醇沉液过滤，真空浓缩至每毫升含生药量2～3g；
浓缩后的醇沉液以树脂与生药质量比为1∶1～1∶3的比例上样，静态吸附0.25～1小时；
玄参醇沉液静态吸附完毕后，先用8～12倍柱体积的水洗，再用5～10倍柱体积的40％～60％的乙醇洗脱；
收集40％～60％乙醇洗脱液，真空浓缩收膏，并采用冷冻干燥或60℃以下真空干燥制得提取物，即环烯醚萜和苯丙素类成分。
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