CN102229972A - 制备林蛙皮胶原蛋白肽的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种制备林蛙皮胶原蛋白肽的方法,该方法是:将干燥的蛙皮在清水中浸泡24小时,加入蛙皮湿重3倍的水,调pH8~10,加入碱性蛋白酶,碱性蛋白酶的加入量为蛙皮湿重的0.5~1.0%,在50℃恒温条件下进行酶解反应4~6小时,在酶解过程中维持pH810,水解后100℃灭酶活10分钟,过滤;过滤后得到的液体中加入液体重量的0.3~0.6%活性炭,于50℃条件下搅拌作用45分钟,pH4.5~6.5,过滤后4500r/min离心15分钟,得上清液,经膜设备纯化后进行喷雾干燥,即可制的微黄色粉末状林蛙皮胶原蛋白肽;本发明对林蛙皮进行了有效的利用。
Description
技术领域
本发明涉及一种制备林蛙皮胶原蛋白肽的方法。
背景技术
林蛙皮含有丰富的具有特殊分子结构、功能复杂多样的生物活性物质,通常作为饲料和废弃物,将其开发利用可以提升林蛙的附加值,具有重要的应用价值及较大的开发利用潜力。
目前,市场上的胶原蛋白肽多是从鱼皮、猪皮、牛皮等动物皮肤中提取的,牛皮和猪皮经常受到疯牛病和禽流感等疾病的威胁,鱼皮同样受到水环境的污染,而林蛙生长在长白山山脉,本身就有抗恶劣环境的功能,蛙皮本身就有良好的呼吸性,富含胶原蛋白和微量元素,具有抑菌功能,使皮肤富于弹性、抗衰老等功效,与牛、猪和鱼皮相比具有价格廉价易得,功效显著之特点。
发明内容
本发明的目的是提供一种制备林蛙皮胶原蛋白肽的方法。
本发明之方法是:
(1)、将干燥的蛙皮在清水中浸泡24小时,加入蛙皮湿重3倍的水,调pH8~10,加入碱性蛋白酶,碱性蛋白酶的加入量为蛙皮湿重的0.5~1.0%,在50℃恒温条件下进行酶解反应4~6小时,在酶解过程中维持pH8~10,水解后100℃灭酶活10分钟,过滤;
(2)、过滤后得到的液体中加入液体重量的0.3~0.6%活性炭,于50℃条件下搅拌作用45分钟,pH4.5~6.5,过滤后4500r/min离心15分钟,得上清液,经膜设备纯化后进行喷雾干燥,即可制的微黄色粉末状林蛙皮胶原蛋白肽。
所得到的林蛙皮胶原蛋白肽之分子量为1500~3000Da。
其中步骤(1)是酶解林蛙皮;步骤(2)中的加入0.3~0.6%活性炭,在温度50℃和pH4.5~6.5条件下,搅拌作用45分钟,目的是为了脱色脱腥。
本发明的有益效果是:本发明之方法对林蛙皮进行了有效的利用。
附图说明
图1是本发明所制备的产物使用高压液相色谱所得到的色谱图。
具体实施方式
取300g林蛙皮,加水浸泡24小时,清洗后加林蛙皮湿重3的水,于水浴中调温至50℃并保持恒定,调节pH810,加入1.5m1~2.4ml碱性蛋白酶,边搅拌边酶解,计时4~6小时后终止酶解反应,沸水浴10分钟进行灭酶活处理,过滤残渣;过滤后得到的液体中加入3~6g活性炭,调节pH4.5~6.5,在50℃水浴中搅拌作用45分钟,过滤后4500r/min离心15分钟,取上清液,上膜设备进行纯化处理,最后喷雾干燥,制得的产物经过高压液相色谱检测,得到如图1所示生物色谱图,确定得到的产物是林蛙皮胶原蛋白肽。
所用碱性蛋白酶的活性为200000u/g。
所用碱性蛋白酶的编号为CAS9014-01-1。
所得到的林蛙皮胶原蛋白肽之分子量为1500~3000Da。
Claims (2)
1.一种制备林蛙皮胶原蛋白肽的方法,该方法是:
(1)、将干燥的蛙皮在清水中浸泡24小时,加入蛙皮湿重3倍的水,调pH8~10,加入碱性蛋白酶,碱性蛋白酶的加入量为蛙皮湿重的0.5~1.0%,在50℃恒温条件下进行酶解反应4~6小时,在酶解过程中维持pH8~10,水解后100℃灭酶活10分钟,过滤;
(2)、过滤后得到的液体中加入液体重量的0.3~0.6%活性炭,于50℃条件下搅拌作用45分钟,pH4.5~6.5,过滤后4500r/min离心15分钟,得上清液,经膜设备纯化后进行喷雾干燥,制得微黄色粉末状林蛙皮胶原蛋白肽。
2.权利要求1所述方法所制备的林蛙皮胶原蛋白肽,林蛙皮胶原蛋白肽之分子量为1500~3000Da。
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