CN107236776A - 一种林蛙皮多肽及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种林蛙皮多肽及其制备方法,所述制备方法包括以下步骤:S1,将林蛙皮干燥并粉碎后加入蒸馏水中,煮沸1‑2h后,冷却至室温,得到林蛙皮水溶液;S2,调节所述林蛙皮水溶液的pH值至5‑9,然后加入复合酶对所述林蛙皮水溶液中的蛋白质进行酶解,得到酶解液;S3,将所述酶解液进行过滤脱色处理,得到脱色液,将所述脱色液依次进行膜过滤、浓缩和喷雾干燥后得到林蛙皮多肽。本发明的制备方法能够有效的提取林蛙皮中的多肽物质,使得林蛙皮中的活性多肽能够有效利用,且提取效率高。
Description
技术领域
本发明涉及多肽技术领域,具体涉及一种林蛙皮多肽及其制备方法。
背景技术
林蛙是我国传统的名贵药用动物,俗称哈士蟆,是集药用、食补、美容等功能于一体的珍稀两栖类动物。林蛙以其特有的药用价值与营养价值日益被人们所重视,成为蛙类中经济价值最高的一种。在各地所产的林蛙中,以东北地区的林蛙体格大、产油率高、体制健壮、繁殖率高而成为林蛙中的极品。林蛙富含4种激素、9种维生素、13种微量元素和18种氨基酸,在药用、滋补和美容方面具有很高的利用价值。
林蛙皮肤湿润、裸露,为抵御环境有害因子的侵袭,在自然选择的过程中经长期进化,其皮肤分泌液中含有大量具有防御功能的抗菌活性物质。抗菌肽不仅抗菌谱广,而且可以抑杀某些真菌、病毒及原虫,并对多种癌细胞及动物实体瘤有明显的杀伤作用,又不破坏正常细胞。两栖动物皮肤抗菌肽具有高效、广谱、不易产生耐药性等特点。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足,提供一种林蛙皮多肽及其制备方法。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下:一种林蛙皮多肽的制备方法,包括以下步骤:
S1,将林蛙皮干燥并粉碎后加入蒸馏水中,煮沸1-2h后,冷却至室温,得到林蛙皮水溶液;
S2,调节所述林蛙皮水溶液的pH值至5-9,然后加入复合酶对所述林蛙皮水溶液中的蛋白质进行酶解,得到酶解液;
S3,将所述酶解液进行过滤脱色处理,得到脱色液,将所述脱色液依次进行膜过滤、浓缩和喷雾干燥后得到林蛙皮多肽。
本发明的有益效果是:本发明的制备方法能够有效的提取林蛙皮中的多肽物质,使得林蛙皮中的活性多肽能够有效利用,且提取效率高。
在上述技术方案的基础上,本发明还可以做如下改进。
进一步,S2中,所述酶解为:在所述林蛙皮水溶液中加入所述复合酶后,将所述林蛙皮水溶液维持在第一预设温度范围内2h-4h,再进行灭酶处理。
采用上述进一步方案的有益效果是:通过将林蛙皮水溶液维持在一定的温度范围内进行酶解,酶解效率高。
进一步,所述第一预设温度范围为50℃-60℃。
采用上述进一步方案的有益效果是:通过对温度进行限定,使得林蛙皮中的多肽提取效率更高。
进一步,S3中,所述过滤脱色处理为:将所述酶解液过滤并去除残渣后,在所述酶解液中加入活性炭并维持在第二预设温度范围内20min-60min。
采用上述进一步方案的有益效果是:通过在酶解液中加入活性炭进行脱色,使得脱色效果更好。
进一步,所述活性炭的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的1%-5%。
采用上述进一步方案的有益效果是:通过对活性炭的添加量进行限定,使得脱色效率更高。
进一步,所述第二预设温度范围为40℃-70℃。
采用上述进一步方案的有益效果是:通过对脱色温度进行限定,提高了脱色效率。
进一步,所述复合酶包括重量比为1:1的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶。
采用上述进一步方案的有益效果是:通过将木瓜蛋白酶和动物蛋白酶进行复合,能够有效提高林蛙皮水溶液中蛋白质的酶解效率。
进一步,所述动物蛋白酶为碱性蛋白酶或中型蛋白酶。
进一步,S2中,所述复合酶的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的0.3%-1.0%。
采用上述进一步方案的有益效果是:通过对复合酶添加量进行合理限定,使得林蛙皮中的多肽能够快速的分解出。
一种林蛙皮多肽,采用如上所述的制备方法制成。
本发明的有益效果是:本发明的林蛙皮多肽纯度高,复水时间短,水溶性好。
具体实施方式
以下对本发明的原理和特征进行描述,所举实例只用于解释本发明,并非用于限定本发明的范围。
实施例1
本实施例的一种林蛙皮多肽的制备方法,包括以下步骤:
S1,将林蛙皮干燥并粉碎至40目,称取林蛙皮粉末100g,并将称取的林蛙皮粉末加入蒸馏水中,煮沸并1h后(煮沸过程要持续搅拌),冷却至室温,得到林蛙皮水溶液;
S2,调节所述林蛙皮水溶液的pH值至5,然后加入复合酶对所述林蛙皮水溶液中的蛋白质进行酶解,得到酶解液;
S3,将所述酶解液进行过滤脱色处理,得到脱色液,将所述脱色液依次进行膜过滤、浓缩和喷雾干燥后得到林蛙皮多肽。
S2中的所述酶解为:在所述林蛙皮水溶液中加入所述复合酶后,将所述林蛙皮水溶液维持在第一预设温度范围内2h,再进行灭酶处理。所述复合酶的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的0.3%,即复合酶的添加量为0.3g。所述第一预设温度范围为50℃。
S3中的所述过滤脱色处理为:将所述酶解液过滤并去除残渣后,在所述酶解液中加入活性炭并维持在第二预设温度范围内20min。所述第二预设温度范围为40℃。所述活性炭的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的1%,即活性炭的添加量为1g。
所述复合酶包括重量比为1:1的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶。所述动物蛋白酶为碱性蛋白酶或中型蛋白酶。
采用上述制备方法即制得本实施例的林蛙皮多肽,得到的林蛙皮多肽的重量为32g,提取率为32%。林蛙皮多肽成品呈微黄色,复水时间短,水溶性好。
实施例2
本实施例的一种林蛙皮多肽的制备方法,包括以下步骤:
S1,将林蛙皮干燥并粉碎至40目,称取林蛙皮粉末100g,并将称取的林蛙皮粉末加入蒸馏水中,煮沸并1.2h后(煮沸过程要持续搅拌),冷却至室温,得到林蛙皮水溶液;
S2,调节所述林蛙皮水溶液的pH值至6,然后加入复合酶对所述林蛙皮水溶液中的蛋白质进行酶解,得到酶解液;
S3,将所述酶解液进行过滤脱色处理,得到脱色液,将所述脱色液依次进行膜过滤、浓缩和喷雾干燥后得到林蛙皮多肽。
S2中的所述酶解为:在所述林蛙皮水溶液中加入所述复合酶后,将所述林蛙皮水溶液维持在第一预设温度范围内2.5h,再进行灭酶处理。所述复合酶的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的0.5%,即复合酶的添加量为 0.5g。所述第一预设温度范围为52℃。
S3中的所述过滤脱色处理为:将所述酶解液过滤并去除残渣后,在所述酶解液中加入活性炭并维持在第二预设温度范围内30min。所述第二预设温度范围为50℃。所述活性炭的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的 1.2%,即活性炭的添加量为1.2g。
所述复合酶包括重量比为1:1的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶。所述动物蛋白酶为碱性蛋白酶或中型蛋白酶。
采用上述制备方法即制得本实施例的林蛙皮多肽,得到的林蛙皮多肽的重量为33g,提取率为33%。林蛙皮多肽成品呈微黄色,复水时间短,水溶性好。
实施例3
本实施例的一种林蛙皮多肽的制备方法,包括以下步骤:
S1,将林蛙皮干燥并粉碎至40目,称取林蛙皮粉末100g,并将称取的林蛙皮粉末加入蒸馏水中,煮沸并1.4h后(煮沸过程要持续搅拌),冷却至室温,得到林蛙皮水溶液;
S2,调节所述林蛙皮水溶液的pH值至7,然后加入复合酶对所述林蛙皮水溶液中的蛋白质进行酶解,得到酶解液;
S3,将所述酶解液进行过滤脱色处理,得到脱色液,将所述脱色液依次进行膜过滤、浓缩和喷雾干燥后得到林蛙皮多肽。
S2中的所述酶解为:在所述林蛙皮水溶液中加入所述复合酶后,将所述林蛙皮水溶液维持在第一预设温度范围内3h,再进行灭酶处理。所述复合酶的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的0.6%,即复合酶的添加量为 0.6g。所述第一预设温度范围为55℃。
S3中的所述过滤脱色处理为:将所述酶解液过滤并去除残渣后,在所述酶解液中加入活性炭并维持在第二预设温度范围内40min。所述第二预设温度范围为55℃。所述活性炭的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的2%,即活性炭的添加量为2g。
所述复合酶包括重量比为1:1的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶。所述动物蛋白酶为碱性蛋白酶或中型蛋白酶。
采用上述制备方法即制得本实施例的林蛙皮多肽,得到的林蛙皮多肽的重量为34g,提取率为34%。林蛙皮多肽成品呈微黄色,复水时间短,水溶性好。
实施例4
本实施例的一种林蛙皮多肽的制备方法,包括以下步骤:
S1,将林蛙皮干燥并粉碎至40目,称取林蛙皮粉末100g,并将称取的林蛙皮粉末加入蒸馏水中,煮沸并1.8h后(煮沸过程要持续搅拌),冷却至室温,得到林蛙皮水溶液;
S2,调节所述林蛙皮水溶液的pH值至8,然后加入复合酶对所述林蛙皮水溶液中的蛋白质进行酶解,得到酶解液;
S3,将所述酶解液进行过滤脱色处理,得到脱色液,将所述脱色液依次进行膜过滤、浓缩和喷雾干燥后得到林蛙皮多肽。
S2中的所述酶解为:在所述林蛙皮水溶液中加入所述复合酶后,将所述林蛙皮水溶液维持在第一预设温度范围内3.5h,再进行灭酶处理。所述复合酶的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的0.6%,即复合酶的添加量为 0.6g。所述第一预设温度范围为57℃。
S3中的所述过滤脱色处理为:将所述酶解液过滤并去除残渣后,在所述酶解液中加入活性炭并维持在第二预设温度范围内50min。所述第二预设温度范围为60℃。所述活性炭的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的 3.5%,即活性炭的添加量为3.5g。
所述复合酶包括重量比为1:1的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶。所述动物蛋白酶为碱性蛋白酶或中型蛋白酶。
采用上述制备方法即制得本实施例的林蛙皮多肽,得到的林蛙皮多肽的重量为34g,提取率为34%。林蛙皮多肽成品呈微黄色,复水时间短,水溶性好。
实施例5
本实施例的一种林蛙皮多肽的制备方法,包括以下步骤:
S1,将林蛙皮干燥并粉碎至40目,称取林蛙皮粉末100g,并将称取的林蛙皮粉末加入蒸馏水中,煮沸并2h后(煮沸过程要持续搅拌),冷却至室温,得到林蛙皮水溶液;
S2,调节所述林蛙皮水溶液的pH值至9,然后加入复合酶对所述林蛙皮水溶液中的蛋白质进行酶解,得到酶解液;
S3,将所述酶解液进行过滤脱色处理,得到脱色液,将所述脱色液依次进行膜过滤、浓缩和喷雾干燥后得到林蛙皮多肽。
S2中的所述酶解为:在所述林蛙皮水溶液中加入所述复合酶后,将所述林蛙皮水溶液维持在第一预设温度范围内4h,再进行灭酶处理。所述复合酶的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的1.0%,即复合酶的添加量为1g。所述第一预设温度范围为60℃。
S3中的所述过滤脱色处理为:将所述酶解液过滤并去除残渣后,在所述酶解液中加入活性炭并维持在第二预设温度范围内60min。所述第二预设温度范围为70℃。所述活性炭的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的5%,即活性炭的添加量为5g。
所述复合酶包括重量比为1:1的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶。所述动物蛋白酶为碱性蛋白酶或中型蛋白酶。
采用上述制备方法即制得本实施例的林蛙皮多肽,得到的林蛙皮多肽的重量为35g,提取率为35%。林蛙皮多肽成品呈微黄色,复水时间短,水溶性好。
在本发明的描述中,需要理解的是,术语“第一”、“第二”仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。在本发明的描述中,“多个”的含义是至少两个,例如两个,三个等,除非另有明确具体的限定。
在本发明中,除非另有明确的规定和限定,术语“安装”、“相连”、“连接”、“固定”等术语应做广义理解,例如,可以是固定连接,也可以是可拆卸连接,或成一体;可以是机械连接,也可以是电连接;可以是直接相连,也可以通过中间媒介间接相连,可以是两个元件内部的连通或两个元件的相互作用关系,除非另有明确的限定。对于本领域的普通技术人员而言,可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
在本发明中,除非另有明确的规定和限定,第一特征在第二特征“上”或“下”可以是第一和第二特征直接接触,或第一和第二特征通过中间媒介间接接触。而且,第一特征在第二特征“之上”、“上方”和“上面”可是第一特征在第二特征正上方或斜上方,或仅仅表示第一特征水平高度高于第二特征。第一特征在第二特征“之下”、“下方”和“下面”可以是第一特征在第二特征正下方或斜下方,或仅仅表示第一特征水平高度小于第二特征。
在本说明书的描述中,参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中,对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且,描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外,在不相互矛盾的情况下,本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例,可以理解的是,上述实施例是示例性的,不能理解为对本发明的限制,本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (10)
1.一种林蛙皮多肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1,将林蛙皮干燥并粉碎后加入蒸馏水中,煮沸1-2h后,冷却至室温,得到林蛙皮水溶液;
S2,调节所述林蛙皮水溶液的pH值至5-9,然后加入复合酶对所述林蛙皮水溶液中的蛋白质进行酶解,得到酶解液;
S3,将所述酶解液进行过滤脱色处理,得到脱色液,将所述脱色液依次进行膜过滤、浓缩和喷雾干燥后得到林蛙皮多肽。
2.根据权利要求1所述一种林蛙皮多肽的制备方法,其特征在于,S2中,所述酶解为:在所述林蛙皮水溶液中加入所述复合酶后,将所述林蛙皮水溶液维持在第一预设温度范围内2h-4h,再进行灭酶处理。
3.根据权利要求2所述一种林蛙皮多肽的制备方法,其特征在于,所述第一预设温度范围为50℃-60℃。
4.根据权利要求1至3任一项所述一种林蛙皮多肽的制备方法,其特征在于,S3中,所述过滤脱色处理为:将所述酶解液过滤并去除残渣后,在所述酶解液中加入活性炭并维持在第二预设温度范围内20min-60min。
5.根据权利要求4所述一种林蛙皮多肽的制备方法,其特征在于,所述活性炭的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的1%-5%。
6.根据权利要求4所述一种林蛙皮多肽的制备方法,其特征在于,所述第二预设温度范围为40℃-70℃。
7.根据权利要求1至3、5至6任一项所述一种林蛙皮多肽的制备方法,其特征在于,所述复合酶包括重量比为1:1的木瓜蛋白酶和动物蛋白酶。
8.根据权利要求7所述一种林蛙皮多肽的制备方法,其特征在于,所述动物蛋白酶为碱性蛋白酶或中型蛋白酶。
9.根据权利要求1至3、5至6、8任一项所述一种林蛙皮多肽的制备方法,其特征在于,S2中,所述复合酶的添加量为蒸馏水中加入的林蛙皮重量的0.3%-1.0%。
10.一种林蛙皮多肽,其特征在于,采用如权利要求1至9任一项所述的制备方法制成。
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