CN102036673A - 特应性皮炎预防剂和/或治疗剂 - Google Patents

Abstract

本发明人为了提供产生副作用等的可能性低、安全性高的特应性皮炎的预防剂和/或治疗剂进行了认真研究，结果发现，用极性溶剂从山竹(Garcinia mangostana L.)的果皮萃取的提取物可预防或治疗特应性皮炎。即，本发明提供由用极性溶剂从山竹的果皮萃取的提取物组成的特应性皮炎预防剂和/或治疗剂。此外，本发明提供含有所述特应性皮炎预防剂和/或治疗剂的食品。

Description

特应性皮炎预防剂和/或治疗剂

技术领域

本发明涉及由山竹的果皮提取物组成的特应性皮炎预防剂和/或治疗剂。

背景技术

特应性皮炎是反复恶化、缓解且以发痒的湿疹为主要病变的疾病，患者多具有特应性素质。特应性素质是指：(1)家族史、既往史，(2)容易产生IgE抗体的素质。

特应性皮炎的主要病变有皮肤的红斑或丘疹、耳下裂纹、干皮症、伴有糠秕状鳞屑的毛孔一致性角化性丘疹，患者皮肤的抓挠会产生印痕。根据近年的调查，特应性皮炎的患病率为：4个月大的儿童12.8％，1岁半的儿童9.8％，3岁的儿童13.2％，小学一年级学生11.8％，小学六年级学生10.6％，大学一年级学生8.2％，在儿童中患病率高达每10人中有1人患病。病因、恶化因素主要有食物、出汗、环境因子、细菌真菌、接触抗原、精神压力等。

特应性皮炎的治疗通过以下方法进行：1)病因、恶化因素的检索和应对，2)皮肤护理，3)药物疗法。用方法1)、2)无法减轻症状时进行药物治疗。药物中使用最广泛的是类固醇外用药，有多种类固醇外用药。这些类固醇外用药根据临床效果分为从弱到最强的5级，根据患者的患病严重程度和年龄分别使用。另一方面，作为非类固醇类外用药，免疫调节剂普特彼(protopic)的有用性在近年得到了确认。此外，作为口服药，使用抗组胺药、抗过敏药等，但对于患病程度最严重的患者，有时会暂时使用类固醇的内服药。

但是，类固醇在用作外用药时，可能会伴有皮肤的萎缩、血管扩张、毛囊炎等副作用，根据由厚生劳动科学研究班制作的指导手册的指导，在面部应尽可能避免使用类固醇外用药。此外，对于类固醇药物，有很多患者担心其副作用而表现出排斥反应。另一方面，普特彼是于1999年11月认可使用的较新的药剂，对于未满16岁的患者只认可低浓度下的使用，对于2岁以下的幼儿，低浓度下的使用也不被认可。作为内服药的抗组胺药、抗过敏药可能会引起困倦、乏力或伴随抗胆碱作用的痰的咳出困难等副作用。

因此，要求开发出副作用小且可简便地使用的药物，进行了在来源于天然物的提取物中寻找能作为特应性皮炎的预防剂或治疗剂的物质的研究。

此外，已知特应性皮炎在狗、猫、家畜等人以外的动物中也会发病，要求进行其预防、治疗。

金丝桃科植物山竹(Garcinia mangostana L.)的果皮在泰国作为偏方用于止泻或炎症治疗，近年有报道称山竹果皮中所含的α-倒捻子素、γ-倒捻子素可抑制过敏反应。

日本专利特许第3968405中揭示：从山竹提取物中纯化的α-倒捻子素和γ-倒捻子素具有抗组胺效果或抗5-羟色胺效果，且α-倒捻子素和γ-倒捻子素显示出对人花粉症的抑制效果。日本专利特开2005-298379中揭示：山竹提取物、即α-倒捻子素、γ-倒捻子素具有对IκB激酶的抑制效果。日本专利特开2001-278770中揭示：金丝桃科植物的提取物具有缓解精神压力的影响的效果。

此外，也进行了用于阐明山竹提取物的抗过敏效果的机理的研究。Biol.Pharm.Bull.，25，p1137(2002)中揭示：山竹提取物可抑制组胺的释放以及前列腺素E的合成。Eur.J.Pharmacol.，314，p351(1996)中揭示：α-倒捻子素是组胺H受体的拮抗剂。Mol.Pharmacol.，66，p667(2004)中揭示：γ-倒捻子素可抑制IκB激酶活性，抑制前列腺素E的释放，其结果是抑制环加氧酶2基因的表达。Biochem.Pharmacol.，63，p73(2002)中揭示：γ-倒捻子素可抑制环加氧酶和前列腺素E2的合成。

对山竹果皮的提取物进行了各种安全性试验。日本专利特开平5-17365的0015段中用小鼠进行了采用口服给药的急性毒性试验，结果显示，即使给予10g/Kg的山竹果皮提取物，也未观察到死亡例。另外，在日本专利特开平4-244004的0047段所示的安全性试验中，进行了将山竹果皮提取物涂布于人皮肤的刺激性试验，结果显示，刺激性极低，其安全性高。

发明的揭示

日本专利特许第3968405和日本专利特开2005-298379中揭示：从山竹提取物中纯化的α-倒捻子素、γ-倒捻子素具有抗过敏效果，且α-倒捻子素和γ-倒捻子素显示出对人花粉症的抑制效果。但是，这些文献中未研究对特应性皮炎的效果。本发明的目的是提供从山竹的果皮提取的特应性皮炎的预防剂和/或治疗剂。

本发明人为了获得产生副作用等的可能性低、安全性高的特应性皮炎的预防剂和/或治疗剂进行了认真研究，结果发现，用极性溶剂从山竹的果皮萃取的物质可预防或治疗特应性皮炎，从而完成了本发明。

即，本发明提供由用极性溶剂从山竹的果皮萃取的提取物组成的特应性皮炎预防剂和/或治疗剂。此外，本发明提供含有所述特应性皮炎预防剂和/或治疗剂的食品。

本发明的由用极性溶剂从山竹的果皮萃取的提取物组成的特应性皮炎预防剂和/或治疗剂也可用于宠物、家畜和/或家禽、特别是狗和/或猫。此外，本发明提供含有由用极性溶剂从山竹的果皮萃取的提取物组成的特应性皮炎预防剂和/或治疗剂的饲料。

山竹的果皮可使用从山竹果实(新鲜或干燥物)得到的果皮。山竹的果皮可直接使用，但如果考虑到提高萃取率，则较好是在粉碎或制成粉末后进行萃取。此外，也可在萃取前用非极性溶剂将山竹果皮脱脂。

采用选自作为极性溶剂的甲醇、乙醇、正丙醇、2-丙醇、正丁醇、丙酮、乙酸乙酯和水的至少1种极性溶剂来实施萃取。也可将2种以上的溶剂组合起来实施萃取。另外，如果考虑到用作口服剂或饮食品、饲料等的情况，则作为萃取溶剂，从安全性的角度来看优选使用乙醇或水与乙醇的组合。萃取的温度无特别限定，从萃取效率的角度来看，较好是在室温到溶剂的沸点温度的范围内。萃取时间根据溶剂的种类、果皮的状态(新鲜或干燥物、粉碎物或粉末等)和萃取温度而变化，较好是在0.5～24小时的范围内。

提取物可根据需要用蒸发器等将萃取溶剂浓缩或除去。此外，提取物也可根据需要通过溶剂分提或色谱法进行纯化后使用。

本发明的特应性皮炎预防剂和/或治疗剂可添加于清凉饮料、点心、冷饮、乳制品、酒类和肉类等食品以及饲料。

作为特应性皮炎预防剂和/或治疗剂的山竹果皮提取物的给药量根据给药方法和所需的治疗而变化，不能一概而论，提取物的量为每1kg动物60～250mg，对人而言是0.3mg～300mg/kg体重/天、更好是0.5mg～200mg/kg体重/天。

本发明的特应性皮炎预防剂和/或治疗食品可按照作为食品的1天的常规摄取量满足上述有效量的条件来规定掺入量。1天的量也可分数次摄取。

此外，本发明的特应性皮炎预防剂和/或治疗用饲料可按照作为饲料的1天的常规摄取量满足上述有效量的条件来规定掺入量。1天的量也可分数次摄取。

根据本发明，可利用山竹的果皮提取物来预防或治疗特应性皮炎。此外，本发明的提取物是用极性溶剂从山竹中萃取的，即使不进行进一步的纯化也可获得上述效果。如果给予本发明的山竹果皮提取物，则可观察到与涂布普特彼软膏的组同等或在其之上的效果。通过给予本发明的山竹果皮提取物，血中总IgE值的上升得到抑制，提示过敏反应得到了全身性的抑制。

此外，山竹被称为果后，其果实可供食用，知名度也高，是印象良好的素材。因此，由山竹果皮的提取物组成的特应性皮炎预防剂和/或治疗剂不会带来由风评引起的不安，容易让患者接受。此外，含有由山竹果皮的提取物组成的特应性皮炎预防剂和/或治疗剂的饲料在用于将来会被用作食品的家畜时也容易让人接受，此外，在用于狗、猫等宠物时也容易让宠物爱好者接受。

附图的简单说明

图1是表示各组的临床症状评分随时间的变化的图。

图2是表示各组的试验开始前后的抓挠行为次数的图。

图3是表示各组的试验开始前后的抓挠行为时间的图。

图4是表示各组的试验开始前后的血中IgE值的图。

图5是表示各组的经表皮水分丢失量随时间的变化的图。

图6是表示各组的体重随时间的变化的图。

实施发明的最佳方式

下面例举本发明的例子进行说明，但本发明的范围不限定于以下的例子。

实施例1

如下所述获得山竹果皮提取物。即，将山竹的100g未干燥果皮粉碎，在11的70％乙醇中于80℃搅拌萃取1小时。对其进行过滤，用蒸发器对滤液进行减压干燥，得到27.4g提取物。

实施例2

对山竹果皮提取物的摄取对由过敏引起的皮炎的症状改善所起到的效果进行了特应性皮炎自然发病模型小鼠验证。

试验中，使用5-6周龄的特应性皮炎自然发病模型小鼠NC/NgaTnd小鼠。这些实验动物在实验开始前进行1周的预饲养后，分成山竹果皮提取物喂食组、对照饲料喂食组、普特彼软膏涂布组这3组(N＝7)来进行实验。统计学处理用Dunnett的多重比较检验或斯氏检验(t检验)。

将实施例1中得到的山竹果皮提取物按照0.25％W/W的比例混入饲料(CRF-1，东方酵母公司(オリエンタル酵母社)制)，制成山竹果皮提取物粉末混合饲料。按照山竹提取物的摄取量为250mg/kg/天的量让山竹果皮提取物喂食组的NC/NgaTnd小鼠自然摄取该饲料。让对照饲料喂食组的NC/NgaTnd小鼠自然摄取普通饲料(CRF-1)。让普特彼软膏涂布组的NC/NgaTnd小鼠与对照饲料喂食组同样地自然摄取普通饲料(CRF-1)，以1天1次、1周5次的频率进行普特彼(0.1％软膏)的涂布。各组中，饲料和水均自由摄取。

对上述3组进行皮炎评分的判定。判定方法以Matsuda，H.等.，Int.Immunol.9：461-466，1997为参考如下所述进行。即，从开始喂食试验食物的前一天及开始喂食当天起到最后一次喂食的后一天为止，每周2次对“挠痒症状”、“红斑/出血”、“浮肿”、“擦伤/糜烂”、“落屑/干燥”这5个项目进行判定，判定分为“0：无”、“1：轻度”、“2：中度”、“3：重度”4级。另外，判定人员和喂食人员在试验期间由不同人员进行，判定人员不知道动物属于哪一组。结果示于表1、图1。图1中，○表示山竹果皮提取物喂食组，△表示对照饲料喂食组，□表示普特彼软膏涂布组。

表1各组的临床症状评分的平均值和标准差

(A：山竹果皮提取物喂食组N＝8，B：对照饲料喂食组N＝7，C：普特彼软膏涂布组N＝7)

所有组中，试验开始时的临床症状评分为0(未发病)。对照饲料喂食组中，自试验开始3天后起可观察到临床症状评分随时间上升，试验结束时的临床症状评分为5.0±1.0。普特彼软膏涂布组中，自试验开始14天后起可观察到轻度的皮炎发病，试验结束时的临床症状评分为2.6±0.8。山竹果皮提取物喂食组中，自试验开始3天后起可观察到极轻度的皮炎症状，但未表现出明显的恶化，试验结束时的临床症状评分仍保持较低，为1.3±0.4。普特彼软膏涂布组中，从试验开始第3天到第28天为止维持了显著低于对照饲料喂食组的临床症状评分，但试验开始第31天后未观察到统计学上的显著差异。另一方面，山竹果皮提取物喂食组中，从试验开始第14天后到试验结束为止，在临床症状评分的抑制方面未观察到统计学上的显著差异。此外，在整个试验期间，未见因山竹果皮提取物喂食而导致的明显副作用。

实施例3

对与上述同样的3组进行了挠痒次数和持续时间的测定，对山竹果皮提取物的摄取对由过敏引起的皮炎的症状改善所起到的效果进行了验证。测定以Orito，K.等.Brit.J.Dermatol.150：1-6，2004为参考如下所述进行。为了使所有组的小鼠适应测定环境，自开始喂食试验食物前3天起，使所有组的小鼠在抓挠次数测定装置(SCLABA，诺华泰克公司(ノベルテツク社)制)内进行适应，频率为1天1次，共进行2天，每次20分钟。试验开始前的抓挠次数和持续时间的测定中，在开始喂食的前一天使小鼠适应20分钟后，进行20分钟的拍摄和记录。与上述同样地在结束喂食试验食物前使小鼠适应后，在试验结束日的后一天进行抓挠次数及持续时间的拍摄和记录。另外，拍摄中记录拍摄日期和个体编号，在12点～18点间进行拍摄。

结果示于图2、图3。所有组中，试验开始时的抓挠频率(Scratching Frequency)和抓挠时间(Scratching Duration)(秒)在每20分钟的拍摄时间内分别为1次和0.2秒左右。在任何一组中，与试验开始前(喂食试验食物的前一天)相比，试验结束后(结束喂食试验食物的后一天)均显示出抓挠行为增加的倾向，但山竹果皮提取物喂食组和普特彼软膏涂布组无统计学上的显著差异。另一方面，对照饲料喂食组中，与试验开始前相比，在试验结束时观察到抓挠行为的显著增加。

实施例4

对与上述同样的3组进行了血中IgE浓度的测定，对山竹果皮提取物的摄取对由过敏引起的皮炎的症状改善所起到的效果进行了验证。IgE浓度测定以Tanaka，A.等，J.Invest.Dermatol.127：855-863，2007为参考如下所述进行。开始喂食前通过尾静脉采集约1ml血液，在结束喂食当天进行抓挠次数和持续时间的拍摄/记录后，进行乙醚麻醉，然后用经肝素处理的注射器通过腹大动脉采集约1ml血液。所采集的血液通过4℃下的离心分离得到血浆，于-20℃冻存。IgE的测定采用识别2种不同的表位的抗小鼠IgE抗体(ME-01-DE及ME-02-B，均为雅玛山公司(ヤマサ社)制)通过三明治ELISA法进行。

结果示于图4。试验开始前的血中总IgE(ng/ml)在山竹果皮提取物喂食组中为531±104，在对照饲料喂食组中为782±108，在普特彼软膏涂布组中为556±207，在组间未观察到统计学上的显著差异。在任一组中，与试验开始前相比，试验结束后均显示出血中总IgE值增加的倾向，与对照饲料喂食组相比，在山竹果皮提取物喂食组和普特彼软膏涂布组中均观察到血中总IgE值上升的统计学上的显著抑制。

实施例5

对与上述同样的3组进行了经表皮水分丢失量(TEWL)的测定，对山竹果皮提取物的摄取对由过敏引起的皮炎的症状改善所起到的效果进行了验证。TEWL的测定中，在测定前一天将小鼠背部剃毛，用多探头皮肤测试系统(Multi Probe Adapter)(CK电子公司(CK electronic社)制)测定背部的TEWL。对每1个体测定3次，将其平均值作为TEWL值。在试验前和试验结束后进行总共2次测定，并且在此期间的2周内进行1次测定。

结果示于图5。所有组中，试验开始时的TEWL为5g/hr/m²，处于正常范围内。试验开始第2周后，TEWL显示出上升的倾向，特别是对照饲料喂食组中，TEWL随时间上升，在试验结束时显示出29.7±7.6g/hr/m²的高值。普特彼软膏涂布组中，TEWL到试验开始第4周为止都同样地上升，但在试验结束时为17.1±7.6g/hr/m²，显示出低于对照饲料喂食组的倾向，但未观察到统计学上的显著差异。另一方面，山竹果皮提取物喂食组中，TEWL在整个试验期间均维持在低于10g/hr/m²的正常范围内，在试验结束时与对照饲料喂食组相比显示出统计学上显著较低的值。

实施例6

对与上述同样的3组进行了体重测定。用电子天平(HL-320，阿斯顿汉森公司(ア一ストハンセン社)制)自开始喂食试验食物的前一天起每隔2周进行体重测定。

结果示于图6。试验开始时的体重为20.0～23.6g。然后，各组的体重均随时间增加，对于体重增加率未观察到组间差异，未观察到由山竹给药引起的副作用。

实施例7

用实施例1中制备的植物提取物如下所述制备含片剂。

葡萄糖          72.3％

乳糖            18.0

阿拉伯树胶      6.0

香料            1.0

单氟磷酸钠                        0.7

山竹果皮提取物                    2.0

                                                    

                                  100.0％

实施例8

用实施例1中制备的植物提取物如下所述制备口香糖。

胶基                              20.0％

砂糖                              54.7

葡萄糖                            14.5

糖稀                              9.3

香料                              0.5

山竹果皮提取物                    1.0

                                                    

                                  100.0％

实施例9

用实施例1中制备的植物提取物如下所述制备糖果。

砂糖                              50.0％

糖稀                              33.4

柠檬酸                            1.0

香料                              0.2

山竹果皮提取物                    1.0

水                                14.4

                                                    

                                  100.0％

实施例10

用实施例1中制备的植物提取物如下所述制备软糖。

明胶                              60.0％

糖稀                              23.0

砂糖                              7.5

植物油                            4.5

甘露糖醇                          2.9

柠檬汁                            1.0

山竹果皮提取物                      1.0

                                                    

                                    100.0％

实施例11

用实施例1中制备的植物提取物如下所述制备巧克力。

糖粉                                40.8％

可可苦料                            20.0

全脂奶粉                            20.0

可可脂                              17.0

甘露糖醇                            1.0

山竹果皮提取物                      1.0

香料                                0.2

                                                    

                                    100.0％

实施例12

用实施例1中制备的植物提取物如下所述制备雪糕。

橙汁                                25.0％

砂糖                                25.0

蛋白                                10.0

山竹果皮提取物                      0.1

香料                                0.1

水                                  39.8

                                                    

                                    100.0％

实施例13

用实施例1中制备的植物提取物如下所述制备冰淇淋。

脱脂奶粉                            50.0％

鲜奶油                              25.0

砂糖                                10.0

蛋黄                                10.0

山竹果皮提取物                      1.0

香料                                0.1

水                                3.9

                                                    

                                  100.0％

实施例14

用实施例1中制备的植物提取物如下所述制备饼干。

低筋面粉1级                       25.0％

中筋面粉1级                       22.0

精制白糖                          5.0

食盐                              1.0

葡萄糖                            1.0

棕榈起酥油                        12.0

碳酸氢钠                          0.2

亚硫酸氢钠                        0.2

米粉                              2.0

全脂奶粉                          1.0

代奶粉                            0.6

山竹果皮提取物                    1.0

水                                29.0

                                                    

                                  100.0％

实施例15

用实施例1中制备的植物提取物如下所述制备糖片。

砂糖                              75.8％

葡萄糖                            19.0

蔗糖脂肪酸酯                      0.2

香料                              0.2

山竹果皮提取物                    0.8

水                                4.0

                                                    

                                  100.0％

实施例16

用实施例1中制备的植物提取物如下所述制备饮料。

橙汁                            30.0

高果糖浆                        15.14

柠檬酸                          0.1

维生素C                         0.04

香料                            0.1

山竹果皮提取物                  0.2

水                              54.42

                                                    

                                100.0％

实施例17

用实施例1中制备的植物提取物如下所述制备狗饲料。

肉类食物原料(鸡肉、牛肉)        40.3

猪背脂肪                        2.5

冰                              19.0

植物蛋白                        30.3

骨粉                            3.8

食盐                            0.4

聚合磷酸盐                      0.2

糖类、调味料                    2.5

山竹果皮提取物                  1.0

                                                    

                                100.0％

实施例18

用实施例1中制备的植物提取物如下所述制备猫饲料。

玉米                            30.0

小麦粉                          35.0

鱼粉                            15.0

肉粉                            8.9

牛油                            4.0

食盐                            1.0

鲣鱼提取物                    5.0

维生素类                      0.4

矿物质类                      0.4

山竹果皮提取物                0.3

                                                    

                              100.0％

实施例19

用实施例1中制备的植物提取物如下所述制备猪饲料。

玉米                          65.0

高粱                          5.0

脱脂糠                        3.0

玉米胚芽粕                    2.0

大豆粕                        17.0

鱼粉                          4.0

动物性油脂                    2.0

碳酸钙                        1.0

预混合料                      0.9

山竹果皮提取物                0.1

                                                    

                              100.0％

本申请主张基于2008年5月22日提出申请的日本专利申请号2008-134246的优先权，引用其内容作为本申请的一部分。

Claims (7)

1.一种特应性皮炎预防剂和/或治疗剂，其特征在于，由用极性溶剂从山竹(Garcinia mangostana L.)的果皮萃取的提取物组成。

2.如权利要求1所述的特应性皮炎预防剂和/或治疗剂，其特征在于，极性溶剂是乙醇或乙醇水溶液。

3.一种特应性皮炎预防剂和/或治疗剂，其特征在于，含有用乙醇或乙醇水溶液从山竹(Garcinia mangostana L.)的果皮萃取的提取物作为有效成分，可抑制IgE抗体的产生。

4.一种食品，其特征在于，含有权利要求1～3中的任一项所述的特应性皮炎预防剂和/或治疗剂。

5.一种瘙痒预防和/或治疗用食品，其特征在于，含有山竹(Garcinia mangostana L.)果皮的乙醇或乙醇水溶液提取物作为有效成分。

6.一种饲料，其特征在于，含有权利要求1～3中的任一项所述的特应性皮炎预防剂和/或治疗剂。

7.一种瘙痒预防和/或治疗用饲料，其特征在于，含有山竹(Garcinia mangostana L.)果皮的乙醇或乙醇水溶液提取物作为有效成分。

Images