MX2007010408A - Composiciones que comprenden actinidia y sus metodos de uso. - Google Patents

Abstract

Se revelan preparaciones novedosas de Actinidia, y particularmente especies de la fruta de kiwi resistente, como tambien las composiciones que comprenden las mismas. Tambien se revela el uso de dichas preparaciones de Actinidia para prevenir y/o tratar una variedad de enfermedades en la cual la regulacion de la respuesta inmune es efectiva, que incluye las enfermedades alergicas y no-alergicas, infeccion viral y cancer, en conjunto. Tambien se describen los metodos relacionados para elaborar y utilizar dichas composiciones.

Description

COMPOSICIONES QUE COMPRENDEN ACTINIDIA Y SUS MÉTODOS DE USO Campo de la Invención La presente invención se refiere a Actinidia, y particularmente a especies de frutos de kiwi enriquecidas y varias fracciones y preparaciones de las mismas, así como composiciones que comprenden las mismas, todas con la capacidad de prevenir y/o tratar una variedad de enfermedades en las cuales la regulación de la inmunorespuesta sea efectiva, incluyendo la enfermedad inflamatoria alérgica y no alérgica, infección viral y cáncer. También se describen métodos relacionados para fabricar y utilizar estas composiciones. Antecedentes de la Invención Las enfermedades que involucran la inflamación son caracterizadas por la afluencia de ciertos tipos y mediadores celulares, la presencia de los cuales puede conducir al daño y a veces, a la muerte del tejido. Las enfermedades que involucran la inflamación son particularmente dañinas cuando afligen ciertos órganos y sistemas, tal como el sistema respiratorio, que pueden dar lugar a la respiración obstruida, hipoxemia, hipercapnia y daño al tejido pulmonar. En otras enfermedades o condiciones, el desarrollo de ciertos tipos de inflamación puede ser un componente importante para controlar la enfermedad, tal como en una infección viral, aunque el daño a tejidos en el área de infección sigue siendo un riesgo. Las enfermedades alérgicas son mediadas en parte por la inmunoglobulina E (IgE), mientras que las células auxiliares T tipo 2 (Th2), mastocitos y eosinófilos también han demostrado que desempeñan papeles importantes en el proceso de la enfermedad (Maggi E., ImmunoteClinology, 3:233-244, 1998; Pawankar R., Curr. Opin. Allergy Clin. Immunol., 1:3-6, 2001; Vercelli D., Clin. Allergy Immunol., 16:179-196, 2002). La IgE se enlaza a dos ¡soformas de los receptores de IgE: receptores de IgE de áltaafinidad (FceRI) presentes en la superficie de los mastocitos y basófilos, y receptores de IgE de baja afinidad (FceRII o CD23) presentes en las superficies de los linfocitos, eosinófilos, plaquetas y macrófagos. Se cree que un factor importante que gobierna la patogénesis de los trastornos alérgicos es la unión de los receptores de IgE en mastocitos, después de encontrar el alérgeno y la desgranulación consiguiente de los mastocitos. Las moléculas liberadas por los mastocitos incluyen histamina, heparina, proteasas y radicales libres, que median una variedad de efectos biológicos incluyendo la vasodilatación, contracción del músculo liso intestinal y/o bronquial, secreción mucosa y proteólisis local. Después de una reacción inmediata inicial de los mastocitos, una afluencia de eosinófilos, basófilos y linfocitos ocurre 6-24 horas después. Esta respuesta en fase tardía puede conducir a la inflamación crónica del tejido en tejidos que se exponen continuamente a antígenos.

La desgranulación de los mastocitos dependientes de IgE y la acumulación de eosinófilos en los sitios de la inflamación, se consideran que resultan de la superactivación desequilibrada de las células Th2 y por lo tanto la superproducción mediada por Th2 de IgE (Abbas y colaboradores, 1991, Nature 383:787-93; Vercelli, 2001, Curr Opin Allergy Clin Immunol 2001, 1:61-5). Las citocinas representativas de células Th2, tal como I L-4, I L-5, !L-10 y IL-13, se conocen por desempeñar papeles importantes en estas reacciones. Además, las citocinas mediadas por Th1 tal como IFN-? e IL-12 reportaron que regulan negativamente las trayectorias de Th2. Por ejemplo, la IFN-? induce el intercambio del ¡sotipo a lgG2a en células B, mientras IL-12 convierte la respuesta de Th2 ya establecida al dominio de Th1 en ciertas situaciones (Umetsu and DeKruyff, 1997, J Allergy Clin Immunol 100:1-6; Coffman and Carty, 1986, J Immunol 136:949-54; Gavett y colaboradores, 1995, J Exp Med 182:1527-36). Varios factores de transcripción celular, tal como GATA3 y T-bet, controlan la diferenciación de las células Th1 y Th2 y la producción de citocinas en estas células (Lee y colaboradores, 2000, J Exp Med 192:105-15; Ting y colaboradores, 1996, Nature 384:474-8; Lighvani y colaboradores, 2001, Proc Nati Acad Sci USA 98:15137-42; Szabo y colaboradores, 2000, Cell 100:655-69). Las enfermedades alérgicas tal como anafilaxis, rinitis alérgica, asma, dermatitis atópica, alergias a alimentos y urticaria, afectan hasta 20% de la población en muchos países y se incrementan en prevalecencía (Wuthrich B., Int. Arch. Alergia Appl. Immunol. 90:3-10, 1989). Por ejemplo, el asma es una enfermedad significativa del pulmón que afecta a millones de personas en todo el mundo. El asma es caracterizado generalmente por la limitación del flujo de aire periódico y/o hipersensibilidad de varios estímulos que resulta en el estrechado excesivo de las vías respiratorias. Otras características pueden ¡ncluir la inflamación de las vías respiratorias, eosinofília y fibrosis de vías respiratorias. La sensibilidad aumentada de las vías respiratorias se desea para el resultado de una cascada inflamatoria compleja que involucra varios tipos celulares, incluyendo linfocitos T y eosinófilos. En asma alérgico, las citocinas Th2 predominan sobre las citocinas Th1. La dermatitis atópica (AD) es una enfermedad de la piel inflamatoria crónica y reincidente caracterizada por lesiones de piel prurítica y eczematosa, junto con niveles de IgE elevados. La incidencia de AD parece aumentar en todo el mundo en infantes y niños. Las lesiones de piel de pacientes con AD se caracterizan por la infiltración de células inflamatorias incluyendo linfocitos T, monocitos/macrófagos, eosinófilos y mastocitos. Estas células están involucradas en la patogénesis y el desarrollo de la AD a través de la liberación de varias citocinas y quimocinas tal como IL-4, IL-5, IL-10, IL-13, eotaxina, y TARC. Entre muchos tipos celulares, las células Th2 que producen IL-4, IL-5, IL-10 e 1L-13 desempañan un papel crítico en la fase inicial de la progresión de la enfermedad (Leung, 1997, Clin Exp Immunol 107(suppl. 1):25-30). IL-4 y I L-13 actúan como inductores del isotipo importantes que cambian a IgE, e I L-5 induce la activación de los eosinófilos, que secreta varias quimocinas tal como eotaxina. IL-10 es producido por los monocitos/macrófagos así como las células Th2 aumentan la producción de TARC, que es una quimocina de Th2 específica y se conoce por ser sobreexpresada en lesiones de AD. Aunque las citocinas tipo Th1, tal como IFN-?, también se encuentran en las lesiones de piel de la AD durante la fase final de la enfermedad, el desarrollo de la AD se piensa por ser causado sobre en primer lugar por la superproducción de las citocinas/quimocinas mediada por Th2 e IgE, así como la producción defectuosa de IFN-? e IL-12 (Jonathan y colaboradores, 1999, J Clin Invest 103:1103-11 Christian y colaboradores, 1999, J Clin Invest 104:1097-105 Tomomi y colaboradores, 2001 , J Allergy Clin Immunol 107:353-8 Weilie y colaboradores, 2002, J Clin Invest 109:621-8). Sin embargo, los mecanismos exactos asociados con la hiperproducción de IgE y el desequilibrio de las respuestas de Th1/Th2 no se han clarificado. Debido a que una cantidad de evidencia ha sugerido que los tipos Th1 y Th2 de reacciones son regulados recíprocamente in vivo, la modulación de Th1/Th2 se ha pensado por ser una estrategia racional para desarrollar la terapéutica de enfermedades alérgicas (Kato y colaboradores, 1999, J Immunol 162:7470-9). Por ejemplo, las citocinas recombinantes tal como IL-12 e IFN-? o antagonistas del receptor de citocina a I L-4 e I L-5 se han probado por su capacidad para controlar el equilibrio entre las respuestas de Th1 y Th2 (Hofstra y colaboradores, 1998, J Immunol 161:5054-60; Tomkinson y colaboradores, 2001, J Immunol 166:5792-800). Sin embargo, la administración directa de estos agentes causa a menudo efectos secundarios indeseables. Los leucotrienos también se asocian con una variedad de enfermedades asociadas con la inflamación, y particularmente, con la inflamación alérgica. Los leucotrienos se derivan del ácido araquidónico, el precursor de prostaglandinas. Existen dos familias de leucotrienos. El primer grupo actúa en primer lugar en condiciones en las cuales la inflamación es dependiente de neutrófilos, tal como fibrosis cística, enfermedad inflamatoria del intestino y psoriasis. El segundo grupo (cisteinil-leucotrienos) se refiere en primer lugar a la broncoconstricción inducida en mastocitos y eosinoflia en asma. Uniéndose a receptores altamente selectivos en el músculo liso bronquial y otro tejido de las vías respiratorias (O'Byrne y colaboradores, Annals of Interna! Medicine 1997;127:472-80). Los leucotrienos también se conocen por ser importantes en la patofisiología de la rinitis alérgica, urticaria crónica y dermatitis atópica o eczema. Los antagonistas de leucotrieno, que incluyen los inhibidores de la síntesis del leucotrieno y antagonistas del receptor de cisteinil-leucotrieno, son útiles para inhibir específicamente la producción o acciones de estos mediadores inflamatorios. La hipótesis que reduce los niveles de IgE en suero podrá mejorar los síntomas alérgicos se ha demostrado por ensayos clínicos usando el anticuerpo anti-lgE quimérico (CGP-51901) y el anticuerpo monoclonal humanizado recombinante (rhuMAB-E25) (Fahy y colaboradores, Am. J. Respir. Crit. Care. Med., 155:1828-1834, 1997). Los análogos del bencimidazol de diacilo y polisacáridos bacterianos que inhiben la síntesis y secreción de IgE se han descrito en la Patente Norteamericana No. 6,369,091 y Publicación de Patente Norteamericana No. 20020041885, respectivamente. La Solicitud de Patente Coreana No. 92-11752 describió un fármaco antiinflamatorio, antialérgico y antirreumático que comprende el biflavonoide tal como ocnaflavona de 4'-O-metilo aislado de Lonicera japónica, que muestra eficacia en el tratamiento de varios síntomas asociados con alergia o inflamación. La Patente Coreana Registro No. 100744 describió un fármaco antiinflamatorio, antialérgico y antirreumático que comprende varios compuestos de biflavonoide aislados de los niveles de Ginko biloba. Varias recetas medicinales orientales que comprenden Siegesbeckia glabrescens se han descrito por tener actividad que reduce el IgE (Kim y colaboradores, Phytother. Res., 15:572-576, 2001). Adicionalmente, muchas hierbas medicinales se han encontrado por ser fuentes ricas de inhibidores liberadores de histamina o compuestos antiinflamatorios. Otros fármacos convencionales para el tratamiento de trastornos alérgicos incluyen fármacos antihistamínicos, antiinflamatorios esteroidales o no-esteroidales y antagonistas de leucotrieno. Estos agentes, sin embargo, tienen el potencial del efecto secundario serio, incluyendo, pero sin limitarse a, susceptibilidad incrementada a infección, toxicidad del hígado, enfermedad del pulmón inducida por fármaco, y supresión de la médula ósea. Así, tales fármacos se limitan en su uso clínico para el tratamiento de la inflamación, y particularmente inflamación alérgica. El uso de agentes de alivio antiinflamatorio y sintomático es un problema serio debido a sus efectos secundarios o su falta para atacar la causa fundamental de una respuesta inflamatoria. Existe un requerimiento de continuación para agentes menos dañinos y más efectivos para tratar la inflamación. Así, permanece una necesidad de productos nuevos con perfiles de efecto secundario inferior, toxicidad menor y mayor especificidad para la causa fundamental de la inflamación.

Finalmente, la obtención de una inmunorespuesta que favorezca la activación de células T tipo Th1, la producción de lgG2a, y la producción de las citocinas tipo Th1 asociadas (por ejemplo, IFN-?, IL-6, IL-12, IL-1), está en contraste a la inmunorespuesta asociada con la inflamación alérgica discutida antes. Este tipo de inmunorespuesta puede tener propiedades fuertes, sistémicas, antitumorales y antivirales. Existe una necesidad continuada en la técnica de proporcionar productos con tales propiedades. Breve Descripción de la Invención Una modalidad de la presente ¡nvención se relaciona con un método para regular una ¡nmunorespuesta en un mamífero. El método ¡ncluye administrar una preparación de fruto del kiwi enriquecido al mamífero en una cantidad suficiente para regular una inmunorespuesta en el mamífero, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido se selecciona de: fruta fresca, fruta comprimida, fruta hervida, fruta cocida, fruta prensada, fruta condensada, fruta seca y un concentrado de jugo de fruto del kiwi enriquecido. En esta modalidad, no se ha eliminado la preparación de fruto del kiwi enriquecido. En un aspecto de la modalidad anterior, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por un método que incluye una etapa de secar la fruta. Otra modalidad de la presente invención se relaciona con un método para regular una inmunorespuesta en un mamífero, incluyendo administrar una preparación de fruto del kiwi enriquecido al mamífero en una cantidad suficiente para regular una inmunorespuesta en el mamífero, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido se selecciona del grupo que consiste de: un extracto o concentrado de hoja, y un extracto o concentrado de corteza. Aún otra modalidad de la presente invención se relaciona con un método para regular una inmunorespuesta en un mamífero. El método incluye administrar al mamífero en una cantidad suficiente para regular una inmunorespuesta en el mamífero: (a) una preparación de fruto del kiwi enriquecido; y (b) un componente seleccionado de: probióticos; paredes y fragmentos celulares bacterianos; proteína e suero; alanina; ácidos grasos; esteres del ácido graso; monoglicéridos; diglicéridos; triglicéridos; inositol; turmérico (cúrcuma); curcumina; metilsulfonilmetano (MSM); ginseng; jengibre; y proantocianidina.

En la modalidad anterior, la preparación de fruto del kiwi enriquecido puede incluir, sin limitarse a: un extracto o concentrado de fruta, un extracto o concentrado de hoja, un extracto o concentrado de tallo, un extracto o concentrado de corteza, un extracto o concentrado de raíz, fruta fresca, fruta comprimida, fruta hervida, fruta cocida, fruta prensada, fruta condensada, fruta seca, un concentrado de jugo de fruto del kiwi enriquecido, una preparación producida por la extracción en agua de la fruta que tiene una temperatura de 0°C a aproximadamente 80°C; una preparación producida por la extracción directa de un concentrado soluble en agua de fruto del kíwi enriquecido con acetato de etilo, una preparación producida por la extracción de fruto del kiwi enriquecido en agua destilada, y una preparación producida por la extracción secuencial de fruto del kiwi enriquecido en agua, cloroformo y acetato de etilo. En un aspecto de la modalidad anterior, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por un método que ¡ncluye una etapa de secar la fruta. En otro aspecto, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por la extracción de fruta en agua que tiene una temperatura de aproximadamente 0°C a aproximadamente 25°C. En otro aspecto, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por la extracción de fruta en agua a temperatura ambiente. En aún otro aspecto, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por la extracción directa de un concentrado soluble en agua de fruto del kiwi enriquecido con acetato de etilo. Otra modalidad de la presente invención se relaciona con un método para regular una inmunorespuesta en un mamífero, que comprende administrar al mamífero en una cantidad suficiente para regular una inmunorespuesta en el mamífero: (a) una preparación de fruto del kiwi enriquecido; y (b) un componente seleccionado de: esteroides, antihistamínicos, anticuerpos, antibióticos, ciclosporinas, antimicóticos, reguladores de la función respiratoria, analgésicos, agonistas ß, modificadores de leucotrieno, citocina o antagonistas del receptor de citocina, inhibidores de fosfodiesterasa, cromoglicato de sodio, nedocrimiloo, cafeína, teofilina, carbobenzoxi beta-alanil taurina, e inhibidores de la función de la célula T. En la modalidad anterior, la preparación de fruto del kiwi enriquecido puede incluir, pero sin limitarse a: un extracto o concentrado, un extracto o concentrado de fruta, un extracto o concentrado de hoja, un extracto o concentrado de tallo, un extracto o concentrado de corteza, un extracto o concentrado de raíz, fruta fresca, fruta comprimida, fruta hervida, fruta cocida, fruta prensada, fruta condensada, fruta seca, un concentrado de jugo de fruto del kiwi enriquecido, una preparación producida por la extracción en agua de la fruta que tiene una temperatura de 0°C a aproximadamente 80°C; una preparación producida por la extracción directa de un concentrado soluble en agua de fruto del kiwi enriquecido con acetato de etilo, una preparación producida por la extracción de fruto del kiwi enriquecido en agua destilada, y una preparación producida por la extracción secuencial de fruto del kiwi enriquecido en agua, cloroformo y acetato de etilo. En un aspecto de la modalidad anterior, la preparación de fruto del kiwí enriquecido es producida por un método que incluye una etapa de secar la fruta. En otro aspecto, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por la extracción de la fruta en agua que tiene una temperatura de aproximadamente 0°C a aproximadamente 25°C. En otro aspecto, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por la extracción de la fruta en agua a temperatura ambiente. En aún otro aspecto, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por la extracción directa de un concentrado soluble en agua de fruto del kiwi enriquecido con acetato de etilo.

En cualquiera de las modalidades descritas anteriormente, la preparación de fruto del kiwi puede proporcionarse en una cantidad suficiente para regular una inmunorespuesta Th2 y Th1 en el mamífero. En un aspecto, la preparación de fruto del kiwí se proporciona en una cantidad suficiente para regular la cantidad de un isotipo de anticuerpo producido por el mamífero seleccionado del grupo que consiste de IgE, lgG2a e lgG1. En otro aspecto, la preparación de fruto del kiwi se proporciona en una cantidad suficiente para disminuir la producción y/o niveles de por lo menos una citocina Th2 en el mamífero o aumentar el nivel de por lo menos una citocina Th1 en el mamífero. En aún otro aspecto, la preparación de fruto del kiwi se proporcionan en una cantidad suficiente para disminuir el nivel de o producción de por lo menos un leucotrieno en el mamífero. En otro aspecto, la preparación de fruto del kiwi se proporciona en una cantidad suficiente para disminuir el nivel de la expresión de un factor de transcripción seleccionado del grupo que consiste de: GAT A-3, T-bet y NFATc2 en el mamífero. En otro aspecto, el mamífero tiene o está en riesgo de desarrollar una condición en la cual el mejoramiento de una respuesta y/o supresión de Th1 de una respuesta Th2 es deseable. Por ejemplo, el mamífero puede tener o estar en riesgo de desarrollar una enfermedad alérgica o enfermedad inflamatoria no-alérgica. Tal enfermedad alérgica puede ser una enfermedad que es regulada por leucotrienos. Tales enfermedades alérgicas incluyen, pero no se limitan a, asma y dermatitis atópica. Como otro ejemplo, el mamífero puede tener o estar en riesgo de desarrollar una infección viral o un cáncer. En cualquiera de las modalidades descritas anteriormente, el fruto del kiwi enriquecido puede incluir, sin limitarse a: Actinidia arguta, Actinidia kolomikta y Actinidia polygama, con Actinidia arguta es una modalidad preferida. En cualquiera de las modalidades descritas anteriormente, la preparación de fruto del kiwi enriquecido puede proporcionarse en una composición en una cantidad de entre aproximadamente 0.01% y aproximadamente 95% en peso basado en el peso total de la composición. En un aspecto de cualquiera de las modalidades descritas anteriormente, la etapa de administración comprende administrar la preparación de fruto del kiwi enriquecido con un portador, adyuvante, o diluyente al mamífero. En otro aspecto, la etapa de administración comprende proporcionar la preparación de fruto del kiwí enriquecido al mamífero como una tableta, polvo, tableta efervescente, polvo efervescente, cápsula, líquido, suspensión, granulo o jarabe. En otro aspecto, la etapa de administración comprende proporcionar la preparación de fruto del kiwi enriquecido al mamífero en un alimento natural. Los alimentos naturales incluyen, pero no se limitan a: artículos para pastelería fina, pan, rollos, cereales para desayuno, queso procesado, queso sin procesar, condimentos, productos lácteos, budines, postres de gelatina, bebidas carbonatadas, tés, mezclas de bebidas en polvo, productos pesqueros procesados, bebidas a base de frutas, bebidas a base de verdura, chicles, confitería dura, productos lácteos congelados, productos de carne procesados, alimentos para untar basados en nuez, pastas, productos de aves de corral procesados, caldos y salsas, obleas de papa, obleas de vegetales, patatas a la inglesa, chocolate, galletas, caramelo, licor, helado, alimentos deshidratados, productos alimenticios cortados, productos alimenticios procesados, especias, bebidas alcohólicas, tallarines, alimentos fermentados, sopas, mezclas de sopas, productos basados en soja, alimentos para untar basados en aceite vegetal y bebidas basadas en vegetales. En otro aspecto, la etapa de administración comprende la aplicación de una composición cosmética que comprende la preparación de fruto del kiwi enriquecido al mamífero. Las composiciones cosméticas pueden proporcionarse en una forma que incluye, pero no se limita a: loción, crema, esencia, polvo fino, emulsión, compresa, jabón, champú, enjuague, limpiador, solución de lavado corporal, solución o tratamiento de lavado. En un aspecto, la etapa de administración comprende proporcionar la preparación de fruto del kiwi enriquecido al mamífero en un aditivo alimenticio. En otro aspecto de cualquiera de las modalidades descritas anteriormente, el método además puede ¡ncluir administrar al mamífero un agente seleccionó de: ácidos grasos; policétidos; ácidos orgánicos; compuestos orgánicos pequeños; aminoácidos aromáticos; fenilpropanoides; terpenoides; esteroides; alcaloides; corrinas; porfirinas; péptidos lineales; péptidos cíclicos; depsipéptidos; derivados de aminoácidos; nucleósidos; nucleótidos; carbohidratos; proteínas; células; fragmentos celulares; preparaciones herbales; especias; minerales; esterilizadores; condimentos; vitaminas; y electrólitos. En aún otro aspecto de cualquiera de las modalidades descritas anteriormente, el método puede además incluir administrar al mamífero un agente seleccionado de: probióticos; paredes y fragmentos celulares bacterianos; proteína de suero; taurina; alanina; ácidos grasos; esteres del ácido graso; monoglicéridos; diglicéridos; triglicéridos; inositol; turmérico; curcumina; romero; ácido rosmarínico; metilsulfonilmetano (MSM); ginseng; jengibre; proantocianidina; y ß-caroteno. Los ácidos grasos incluyen, pero no se limitan: ácido linolénico conjugado, ácido eicosapentaenóico, ácido docosahexaenóico, ácido ?~ linolénico, ácido a-linolénico, ácido dihomo-?-linolénico y ácido estearidónico. En otro aspecto de cualquiera de las modalidades descritas anteriormente, el método además incluye administrar al mamífero una preparación de especie de Actinidia diferentes. La especie de Actinidia diferente puede incluir, sin limitarse a: A. chenensis, A. deliciosa, A. arguta, A. polygama y A. kolomikta. Aún otra modalidad de la presente ¡nvención se relaciona con una composición para regular una ¡nmunorespuesta en un mamífero. La composición incluye una preparación de fruto del kiwi enriquecido y por lo menos un compuesto activo adicional para regular una inmunorespuesta en un mamífero. En un aspecto, el compuesto activo adicional es para tratar o prevenir enfermedad alérgica en un mamífero. En un aspecto, el compuesto activo adicional se selecciona de: esteroides, antihistamínicos, anticuerpos, antibióticos, ciclosporinas, antimicóticos, reguladores de función respiratoria, analgésicos, agonistas ß, modificadores de leucotrieno, citocina o antagonistas del receptor de citocina, inhibidores de fosfodiesterasa, cromoglicato de sodio, nedocrimilo, cafeína, teofilina, carbobenzoxi beta-alanil taurina, e inhibidores de la función de la célula T. En aún otro aspecto, el compuesto activo adicional se selecciona del grupo que consiste de: probióticos; paredes y fragmentos celulares bacterianos; proteína de suero; alanína; ácidos grasos; esteres del ácido graso; monoglícéridos; diglicéridos; triglicéridos; inositol; turmérico; curcumina; metilsulfonilmetano (MSM) ginseng; jengibre; y proantocianidina. Los ácidos grasos incluyen, pero no se limitan a: ácido linolénico conjugado, ácido eicosapentaenóico, ácido docosahexaenóico, ácido ?-linolénico, ácido a-linolénico, ácido dihomo-?-linolénico y ácido estearidónico. Tal composición puede ¡ncluir, pero sin limitarse a, una composición farmacéutica, un alimento natural, un aditivo alimenticio, o un cosmético.

En la composición descrita anteriormente, el fruto del kiwi enriquecido puede incluir, pero sin limitarse a: Actinidia arguta, Actinidia kolomikta y Actinidia polygama. En un aspecto, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es un extracto o concentrado preparado de una parte de fruto del kiwi enriquecido seleccionado de: la fruta, hoja, tallo, corteza, raíz y cualquier combinación del mismo. En otro aspecto, el fruto del kiwi enriquecido se selecciona del grupo que consiste de: fruta fresca, fruta comprimida, fruta hervida, fruta cocida, fruta prensada, y fruta condensada. En otro aspecto, el fruto del kiwi enriquecido es fruta seca. En aún otro aspecto, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por un método que incluye una etapa de secar la fruta. En otro aspecto, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es un concentrado de jugo de fruto del kiwi enriquecido. En otro aspecto, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por la extracción del fruto en agua a temperatura ambiente. En aún otro aspecto, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por la extracción directa de un concentrado soluble en agua de fruto del kiwi enriquecido con acetato de etilo. En otro aspecto, el extracto es preparado por extracción de fruto del kiwi enriquecido en agua destilada. En otro aspecto, el extracto es un extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi enriquecido. Otra modalidad de la ¡nvención se relaciona con el uso de fruto del kiwi enriquecido o una preparación del mismo y un agente seleccionado de: un esteroide, antihistamínico, anticuerpo, antibiótico, ciclosporina, antimicótico, regulador de la función respiratoria, analgésico, agonistas ß, modificado de leucotrieno, antagonista de citocina, antagonista del receptor de citocina, inhibidor de fosfodiesterasa, cromoglicato de sodio, nedocrimiloo, cafeína, teofilina, carbobenzoxi beta-alanil taurina, y un inhibidor de la función de célula T, en la preparación de una composición para el tratamiento de una enfermedad o condición que se asocia con la disregulación de la función inmune. Otra modalidad de la presente invención se relaciona con el uso de fruto del kiwi enriquecido o una preparación del mismo y un agente seleccionado de: probióticos; paredes y fragmentos celulares bacterianos; proteína de suero; alanina; ácidos grasos; esteres del ácido graso; monoglicéridos; diglicéridos; triglicéridos; inositol; turmérico; curcumina; metilsulfonilmetano (MSM); ginseng; jengibre; y proantocianidina. Los ácidos grasos incluyen, pero no se limitan a: ácido linolénico conjugado, ácido eicosapentaenóico, ácido docosahexaenóico, ácido ?-linolénico, ácido a-linolénico, ácido dihomo-?-linolénico, y ácido estearidónico. En un aspecto de cualquiera de los usos descritos anteriormente, la composición puede utilizarse para el tratamiento de una enfermedad o condición que se asocie con la producción o actividad del leucotrieno. En otro aspecto de cualquiera de los usos descritos anteriormente, la enfermedad o condición puede incluir, pero sin limitarse a: dermatitis atópica, asma, alergia del alimento, rinitis alérgica y urticaria crónica. En otro aspecto de cualquiera de los usos descritos anteriormente, la preparación de fruto del kiwi enriquecido puede incluir, pero sin limitarse a: un extracto o concentrado de fruta, un extracto o concentrado de hoja, un extracto o concentrado de tallo, un extracto o concentrado de corteza, un extracto o concentrado de raíz, fruta fresca, fruta comprimida, fruta hervida, fruta cocida, fruta prensada, fruta condensada, fruta seca, un concentrado de jugo de fruto de kiwi enriquecido, una preparación producida por la extracción de la fruta en agua a temperatura ambiente; una preparación producida por la extracción directa de un concentrado soluble en agua de fruto del kiwi enriquecido con acetato de etilo, una preparación producida por la extracción de fruto del kiwi enriquecido en agua destilada, y una preparación producida por la extracción secuencial en agua, cloroformo y acetato de etilo. Aún otra modalidad de la presente invención se relaciona con un método para regular una inmunorespuesta en un mamífero. El método ¡ncluye administrar una preparación de fruto del kiwi común al mamífero en una cantidad suficiente para regular una inmunorespuesta en el mamífero, en donde la preparación de fruto del kiwi común se selecciona de: un extracto o concentrado de fruta, un extracto o concentrado de hoja, un extracto o concentrado de tallo, un extracto o concentrado de corteza, un extracto o concentrado de raíz, fruta fresca, fruta comprimida, fruta hervida, fruta cocida, fruta prensada, fruta condensada, fruta seca, un concentrado de fruta común, una preparación producida por la extracción de la fruta en agua a temperatura ambiente; una preparación producida por la extracción directa de un concentrado soluble en agua de fruto del kiwi común con acetato de etilo, una preparación producida por la extracción de fruto del kiwi común en agua destilada, y una preparación producida por la extracción secuencial en agua, cloroformo y acetato de etilo. Breve Descripción de los Dibujos La Fig. 1 muestra la actividad inhibidora de varias preparaciones de A. arguta en la producción de IgE en células U266B1. Los resultados se calcularon como el porcentaje del nivel de IgE producido de células U266B1 tratadas con LPS solamente, de tres experimentos independientes. La Fig. 2 muestra los efectos dependientes de dosis de PG102T y PG102E en la producción de I L-4 en esplenocitos estimulados con OVA. La actividad específica de PG102T y PG102E se determinó del valor de Cl50. Las Figs. 3A-3C ilustran los efectos de PG102T y PG102E en el número de células T que producen I L-4 o IFN-? (Fig. 3A) y de células B que producen IgE (Fig. 3B) y la biosíntesis de IgE dentro de las células B (Fig. 3C). Los datos son el medio de los porcentajes de cada población a partir de tres experimentos independientes *, P < 0.05 contra ratones tratados con DW.

Las Figs. 4A-4B muestra los efectos de PG102T y PG102E en la expresión de GATA3, T-bet y NFATc2, mediante Western blot (Fig. 4A) y análisis de PCR en tiempo real cuantitativo (Fig. 4b). Los resultados se expresan como el promedio ± SEM de tres experimentos independientes *, P < 0.05 y **, P < 0.01 contra ratones tratados con DW, ß-actinias y GAPDH se utilizaron como un control de carga. Las Figs. 5A-5B muestran los efectos de PG102T y PG102E en el desarrollo de la dermatitis en ratones NC usando el índice de dermatitis (Fig. 5A) e incidencia de rasguños (Fig. 5B). Los valores se expresan como el promedio ± SEM de 5-6 animales *, P<0.05; **, P<0.01, contra ratones tratados con DW. Las Figs. 6A-6C muestran los efectos de PG102T y PG102E en los niveles de plasma de IgE (fig. 6A), IgGI (fig. 6B) y lgG2a (Fig. 6C) en ratones NC. Los valores se expresan como el promedio ± SEM de 5 animales *, P<0.05; **, P<0.01, contra ratones tratados con DW. Las Figs. 7A-7B muestran el efecto de PG102T y PG102E en número total de leucocitos y eosinófilos (fig. 7A) y la producción de eotaxina y TARC (Fig. 7B) en sangre periférica. Los valores se expresan como el promedio ± SEM de 5 animales *, P<0.05; **, P<0.01, contra ratones tratados con DW. Las Figs. 8A-8B muestran los efectos de PG102T y PG102E en las lesiones en la piel en ratones NC de piel posterior (Fig. 8A) y piel frontal (Fig. 8B). *, P<0.05; **, P<0.01, contra ratones tratados con DW. Las Figs. 9A-9B muestran los efectos de PG102T y PG102E en la expresión de IL-4, I L-5, eotaxina, TARC, GATA3 y pSTAT6 en las lesiones en la piel, como se midió por ELISA (Fig. 9A) y Western blot (Fig. 9B). Los valores se expresan como el promedio ± SEM de 5 animales *, P<0.05; **, P<0.01, contra ratones tratados con DW. Los números entre paréntesis indican la actividad por ciento con relación a ratones tratados con DW. La Fig. 10 es un diagrama esquemático del proceso usado para producir cantidades mayores de PG102T; este concentrado de fruto del kiwi congelado o de otra manera secado también s,e refiere como FD001 (FG se refiere al portador grado alimenticio).

La Fig. 11 muestra el efecto de tres dosis (0.25, 1.0 y 10 mg/ml) de FD001 (PG102T) en el grado relativo de producción de las citocinas IL-4, I L-5 , IL-10, IL-13 e IFN-? por esplenocitos de ratón estimulados con OVA después de 3 días de exposición in vitro. Los niveles de citocina se midieron por ELISA. Cada punto representa el promedio de datos de los esplenocitos de diez ratones individuales. La Fig. 12 muestra el efecto de tres dosis (0.25, 1.0 y 10 mg/ml) de un extracto de acetato de etilo (EtOAc) de FD001 (PG102T) en el grado relativo de producción de las citocinas IL-4, I L-5 , IL-10, IL-13 e IFN-? por esplenocitos de ratón estimulados con OVA después de 3 días de exposición in vitro. Los niveles de citocina se midieron por ELISA. Cada punto representa el promedio de datos de los esplenocitos de diez ratones individuales. La Fig. 13 muestra el efecto de tres dosis (0.25, 1.0 y 10 mg/ml) de un concentrado de jugo de fruta de A. arguta en el grado relativo de la producción de las citocinas I L-4 , I L-5 , IL- 10, IL-13 e IFN-? por esplenocitos de ratón estimulados con OVA después de 3 días de exposición in vitro. Los niveles de citocina se midieron por ELISA. Cada punto representa el promedio de datos de esplenocitos de diez ratones individuales. Las Figs. 14A y 14B indican la actividad de tres dosis de compuestos inmunosupresores conocidos en el grado relativo de la producción de IL-13 e IFN-? por esplenocitos de ratón estimulados con OVA después de 3 días de exposición in vitro. La ciclosporina se probó a 0.0083, 0.083 y 4.15 µM y la dexametasona se probó a 0.01, 0J y 1 µM (Fig. 14A) con cada punto que representa el promedio de datos de los esplenocitos de diez ratones individuales. La quercetina se probó a 1.0, 10 y 25 µM con cada punto que representa el promedio de datos de los esplenocitos de dos ratones individuales (Fig. 14B). Los niveles de citocina se midieron por ELISA. Las Figs. 15A y 15B muestran el efecto de tres dosis (1.0, 3.0 y 10 mg/ml) de FD001 (PG102T), un extracto de acetato de etilo (EtOAc) de FD001, y el resto acuoso de este proceso en el grado relativo de producción de IL-13 (Fig. 15A) y IFN-? (Fig. 15B) por los esplenocitos de ratones estimulados con OVA después de 3 días de exposición in vitro. Los niveles de citocina se midieron por ELISA. Cada punto representa el promedio de datos de los esplenocitos de ocho ratones individuales. Las Figs. 16A y 16B muestran el efecto de tres dosis (1.0, 3.0 y 10 mg/ml) de FD001 (PG102T) y una forma en polvo de FD001 (creado para uso en cápsulas) en el grado relativo de producción de IL-13 (Fig. 16A) y IFN-? (Fig. 16B) por los esplenocitos de ratones estimulados con OVA después de 3 días de exposición in vitro. Los niveles de citocina se midieron por ELISA. Cada punto representa el promedio de datos de los esplenocitos de ocho ratones individuales. Las Figs. 17A y 17B muestran el efecto de las preparaciones alternativas de A. arguta en el grado relativo de producción de IL-13 (Fig. 17A) y IFN-? (Fig. 17B) por los esplenocitos de ratones estimulados con OVA después de 3 días de exposición in vitro.

Tres dosis (1.0, 3.0 y 10 mg/ml) cada una de FD001 (PG102T), un concentrado de jugo de fruta, de un extracto preparado hirviendo la fruta fresca en agua, y un extracto de agua a temperatura ambiente de la fruta se probaron. Los niveles de citocina se midieron por ELISA. Cada punto representa el promedio de datos de los esplenocitos de ocho ratones individuales. Las Figs. 18A y 18B muestran el efecto de las preparaciones de las partes de la planta alternativas de A. arguta en el grado relativo de producción de IL-13 (Fig. 18A) y IFN-? (Fig. 18B) por los esplenocitos de ratones estimulados con OVA después de 3 días de exposición in vitro. Tres dosis (1.0, 3.0 y 10 mg/ml) cada una de un concentrado de jugo de fruta, extractos individuales se preparó hirviendo la corteza, raíz o tallo en H2O, y FD001 se probaron. Los niveles de citocina se midieron por ELISA. Cada punto representa el promedio de datos de los esplenocitos de ocho ratones individuales. Las Figs. 19A-19C acentúan el cambio distribucional que ocurrió entre los días 1 y 14 de un ensayo clínico humano en el cual los sujetos respondieron positivamente al tratamiento para la dermatitis atópica (AD) como se midió por el Physician's Global Assessment (PGA) para AD (los criterios de calificación mostrados en la Fig. 19C). A los sujetos se administró el placebo o 600 mg de FD001 (PG102T) diariamente (Figs. 19A y 19B, respectivamente) y donde se utiliza concomitantemente el tratamiento con esteroides tópicos. Descripción Detallada de la Invención Los presentes inventores han descubierto previamente que el fruto del kiwi enriquecido, y particularmente ciertos extractos/concentrados derivados de los mismos, generalmente designados en la presente como PG102, incrementan los niveles de suero de las citocinas Th1 e lgG2a, reducen los niveles de suero de las citocinas Th2 e IgE, inhiben la liberación de histamina de los mastocitos, y suprimen las reacciones inflamatorias alérgicas, incluidas en un modelo murino alérgeno-sensibilizado de la inflamación alérgica e hípersensibilidad de las vías respiratorias, así como en un ensayo del edema de la pata de la rata (ver Publicación de Patente Norteamericana No. 2004/0037909, supra). PG102 es oralmente activo. Los presentes inventores proporcionan evidencia adicional en la presente en donde dos extractos específicos preparados de Actinidia arguta, denominados PG102T y PG102E (descritos detalladamente en los Ejemplos 1 y 2 más adelante), exhiben actividad inhibidora en la producción de IgE así como la capacidad de regular las citocinas Th1 y Th2 selectivas. Esta actividad reguladora es alcanzada muy probablemente por la regulación de los factores de transcripción celular, GATA-3, T-bet y NFATc2. Los datos de los presentes inventores indican el gran potencial de PG102T y PG102E como moduladores inmunes naturales de las trayectorias de Th1 y Th2, y en última instancia como agentes antialérgicos. La eficacia de estos extractos se demuestra en la presente in vivo en un modelo para la inflamación alérgica asociada con condiciones respiratorias, y en un modelo para la dermatitis atópica. Los presentes inventores también describen en la presente otras preparaciones de fruto del kiwí enriquecido, incluyendo preparaciones de la fruta completa, tallo, raíz, corteza, extractos nuevos, concentrados, jugos, preparaciones secas y preparaciones no extraídas, y demuestran que tales preparaciones de fruto del kiwi enriquecido tienen propiedades similares con respecto a su capacidad para regular las citocinas Th1 y Th2 y se cree por lo tanto que tienen propiedades antialérgicas similares. Además, los presentes inventores han mostrado que las preparaciones de fruto del kiwi enriquecido de la presente invención reducen los niveles de leucotrienos y la producción directa de los leucotrienos in vivo, indicando que las composiciones de la presente invención pueden utilizarse para tratar enfermedades mediadas por leucotrieno, incluyendo, pero sin limitarse a, dermatitis atópica, asma, alergia del alimento, rinitis alérgica y urticaria crónica. La identificación de fruto del kiwi enriquecido y preparaciones del mismo como mejoradores de las respuestas de Th1 hacen estos agentes particularmente atractivos para el tratamiento de enfermedades y condiciones que se beneficiarán de tal respuesta, incluyendo, pero sin limitarse a, infección viral y cáncer. Un proceso de extracción usado para producir un extracto soluble en agua total y un extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi enriquecido se describe en la Publicación de Patente Norteamericana No. 2004/0037909 y en los Ejemplos 1 y 2 de la presente solicitud. En modalidades adicionales de la presente invención, los presentes inventores ahora han descubierto que las preparaciones de fruto del kiwi enriquecido producidas por métodos de extracción, concentración o procesamiento alternantes también producen composiciones con actividad reguladora inmune, y particularmente, la capacidad de suprimir la producción de citocina en respuesta a un antígeno (por ejemplo, un alérgeno). Tales preparaciones alternas incluyen, pero no se limitan a, concentrado de jugo de fruta, concentrado de fruta fresca y preparaciones de fruta fresca hervida. Los presentes inventores también demuestran en la presente que los extractos u otras preparaciones de partes de la planta de fruto del kiwi enriquecido con excepción de la fruta por sí misma tienen actividad reguladora inmune equivalente o superior con respecto a los extractos de acetato de etilo solubles en agua o de la fruta. Por ejemplo, los presentes inventores han demostrado la eficacia de los extractos del tallo, raíz y corteza de la planta de fruto del kiwi enriquecido en suprimir la producción de citocina por los esplenocitos estimulados con antígeno de ratones sensibilizados con alérgenos. Los presentes inventores también han hecho el sorprendente descubrimiento que las preparaciones de fruto del kiwi enriquecido como se describe en la presente pueden servir como un auxiliar efectivo para otras terapias para varias condiciones atópícas, incluyendo, pero sin limitarse a, terapia basada en esteroide. Por ejemplo, los presentes inventores han descubierto que la administración de una forma en polvo del extracto soluble en agua de A. arguta como se describe en la presente a pacientes humanos adultos que sufren de dermatitis atópica de severidad moderada, significativamente reduce al valuación global del médico de los signos clínicos. También, la reducción significativa se logró en un síntoma clínico específico determinado por los mismos pacientes (Redness) y las tendencias de severidad disminuida se observaron en otros síntomas clínicos de la enfermedad en estos pacientes que concomitantemente utilizaron un esteroide tópico, con respecto a los pacientes que usaron el esteroide pero quiénes no recibieron el extracto de fruto del kiwi enriquecido. Cuando el uso del esteroide se interrumpió por los pacientes, los efectos del extracto de fruto del kiwi no fueron más significativos en el estudio piloto pequeño. Por lo tanto, la presente invención, en una modalidad, se relaciona con el uso de las preparaciones de fruto del kiwi enriquecido descrito en la presente en combinación con (o como un auxiliar para) otros agentes terapéuticos para tratar la enfermedad atópica u otras enfermedades asociadas con la disregulación inmune. Los presentes inventores creen que las composiciones de la presente invención pueden utilizarse para mejorar la eficacia de otras terapias terapéuticas y alimenticias, particularmente en pacientes con condiciones atópicas. Esta modalidad de la invención se discute detalladamente más adelante. En aún otra modalidad de la invención, los presentes inventores describen en la presente que asombrosamente, el proceso de secar el fruto del kiwi enriquecido no es apreciado previamente, excepto solamente el elemento importante para mejorar la bioactividad de fruto del kiwi enriquecido. Por otra parte, los presentes inventores muestran en la presente que el fruto del kíwi enriquecido secado, que es extraído solamente con agua a temperatura ambiente, exhibe bioactividad similar a la atribuida previamente a los extractos de agua caliente o extractos de solvente orgánico de fruto del kiwi enriquecido. El fruto del kiwi enriquecido seco extraído en agua fría o enfriada también se comprende, así extracción que se extiende a cualquier temperatura entre 0°C y 80°C. Los presentes inventores también indican en la presente que el fruto del kiwi enriquecido seco que no se ha extraído (por ejemplo, rebanadas secas de fruto de kiwi enriquecido) puede tener la bioactivídad que fue atribuida previamente a los extractos de fruto del kiwi enriquecido. Por lo tanto, la presente invención se relaciona con cualquier forma de fruto de kiwi enriquecido seco, incluyendo extractos producidos de fruto de kiwi enriquecido previamente secado, como un agente o para la preparación de una composición para regular la inmunorespuesta en un mamífero. Los usos más específicos para este agente o composición se describen más adelante. En otra modalidad, la invención además se relaciona con el uso de cualquier miembro de la familia, Actinidiaceae, y particularmente de cualquiera miembros del género Actinidia, incluyendo, pero sin limitarse a, kiwi común conocido como A. chinensis o A. deliciosa para proporcionar las composiciones de fruto del kiwi con actividad reguladora inmune. En una modalidad, sin limitase por teoría, los presentes inventores creen que el proceso de secar otros miembros de Actinidia puede proporcionar una composición de Actinidia seca que tiene por lo menos algunas de las actividades biológicas que se han reconocido para el fruto del kiwi enriquecido descrito en la presente. En otra modalidad, los presentes inventores creen que otras preparaciones de fruto del kiwi común (por ejemplo, A. chinensis o A. deliciosa), incluyendo, pero sin limitarse a, preparaciones de cualquier parte de la fruta, la fruta completa, tallo, hoja, corteza, o raíz, e incluyendo cualquier preparación o extracto de la misma, incluyendo preparaciones secas, preparaciones procesadas pero no extraídas, fruta fresca, jugo de fruta o cualquier extracto, concentrado o fracción de la misma, pueden tener por lo menos algunas de las propiedades biológicas que se han reconocido para el fruto del kiwi enriquecido descrito en la presente. Las A. arguta, A. polygama y A. kolomikta que pertenece a la Actinidiaceae, se distribuyen naturalmente en Siberia, el área norte de China, norte y sur de Corea. Más de 30 especies que pertenecen a la Actinidiaceae se han reportado. Entre ésas, la fruta de A. chinensis o A. deliciosa se ha nombrado "kiwi" y son frutas comestibles populares. La A. arguta y otra fruta del mismo género (por ejemplo, A. polygama y A. kolomikta) se han utilizado como materiales de la medicina China nombrados como 'mihudo' para tratar enfermedad del hígado, enfermedad gastrointestinal y litiasis urogenital sin toxicidad (Seoul National University Natural Products Science, Tradi-Medi Data Base, dongbang media Co. Ltd. 1999). Sin embargo, antes de la invención descrita en la Publicación de Patente Norteamericana No. 2004/0037909, no han habido informes o sugerencias sobre el tratamiento y prevención de la enfermedad alérgica y enfermedad inflamatoria no-alérgica que utilicen el fruto Actinidia. Por otra parte, antes de la presente invención, no han habido informes con respecto a la eficacia de preparaciones de fruto del kiwi enriquecido con excepción de los extractos descritos en Publicación de Patente Norteamericana No. 2004/0037909, con respecto a la eficacia de los extractos preparados de partes de fruto del kiwi enriquecido con excepción de la fruta (bayas), con respecto a la importancia de varias etapas en el proceso de preparación, tal como sequado, o del efecto de las composiciones de fruto del kiwi enriquecido en la eficacia de los tratamientos establecidos para ia enfermedad atópica u otras condiciones asociadas con la disregulación del sistema inmune mamífero (por ejemplo, terapia con esteroides). De acuerdo a la presente invención, la referencia a "fruto de kiwi enriquecido" se refiere a cualquiera de A. arguta, A. polygama y A. kolomikta, u otras especies del género Actinidia relacionado con el mismo que tiene las propiedades bioactivas de A. arguta, A. polygama, y A. kolomikta como se describe en la presente, particularmente con respecto a y las propiedades antialérgicas y las propiedades reguladoras de inmunorespuesta/citocina/leucotrieno demostradas en la presente (por ejemplo, ver Ejemplos). En la preparación de cualquier composición o preparación de la invención, incluyendo cualquier extracto descrito en la presente, uno puede utilizar cualquiera de una o más partes de fruto del kiwi enriquecido u otra especie de Actinidia, incluyendo, pero sin limitarse a, al fruto (también referido como las "bayas" o los "bayas de kiwi"), de la hoja, tallo, corteza y raíz del mismo. La referencia general en la presente para un extracto se refiere a una preparación concentrada de una sustancia (por ejemplo fruto de kíwi enriquecido) que es obtenida generalmente eliminando los componentes activos o deseados de la misma con un solvente adecuado, y después evaporando algo, todo o casi todo el solvente y ajustando la masa o polvo residual a un estándar prescrito. El término "concentrado" se refiere a una forma de sustancia que ha tenido la mayoría de su componente base, o solvente, eliminado. Por consiguiente, será evidente que el término "extracto" como se describe en la presente puede estar, en algunas modalidades, usado alternativamente con el término "concentrado". La referencia en la presente para un extracto crudo se refiere, en una modalidad, a un extracto de fruto del kiwi enriquecido que es obtenido extrayendo una preparación de un fruto de kiwi enriquecido con agua, alcoholes inferiores (por ejemplo, metanol, etanol y similares), o mezclas del mismo, y preferiblemente agua destilada o 50-90% de etanol, y más preferiblemente 70% de etanol. Un extracto soluble del solvente no polar del mismo puede obtenerse por extracción adicional del extracto soluble con un solvente no polar tal como hexano, acetato de etilo o solvente de diclorometano. Los procedimientos específicos para la producción de un extracto crudo y evaluación del mismo se describen en la Publicación de Patente Norteamericana No. 2004/0037909, supra, y todos tales procedimientos se incorporan en la presente por referencia. Los bioensayos adicionales para seguir, evaluar o confirmar las actividades biológicas preferidas de una composición de fruto del kiwi enriquecido de acuerdo a la presente invención se indican en los Ejemplos en la presente, e incluyen in vitro y ensayos in vivo.

De acuerdo a la presente invención, la referencia a "PG102T" se refiere generalmente a un extracto soluble en agua total (que también puede referirse en la presente como concentrado) de un fruto de kiwi enriquecido descrito en la presente (por ejemplo, A. arguta), preparado esencialmente como se describe en la Publicación de Patente Norteamericana No. 2004/0037909, supra (por ejemplo, ver Ejemplo 1 de esta publicación), o como se describe en el Ejemplo 1 en la presente. En una modalidad preferida, el extracto soluble en agua total es preparado de A. arguta, aunque será evidente para el experto en la técnica que los extractos solubles en agua totales equivalentes pueden prepararse de otro fruto de kiwi enriquecido, incluyendo, pero sin limitarse a, A. polygama y A. kolomikta. Cuando el extracto soluble en agua total es producido por un proceso a gran escala pero usando sustancialmente las mismas etapas básicas que para la preparación de PG102T, como se describe en el Ejemplo 3, la preparación resultante puede referirse en la presente como FD001. La referencia a "PG102E" en la presente se refiere a la fracción de acetato de etilo que resulta de la división del solvente sucesiva de una preparación de PG102T descrita anteriormente con cloroformo, acetato de etilo y n-butanol utilizando métodos de extracción convencionalmente conocidos en la técnica. Los métodos específicos para producir un extracto que es un extracto de PG102T y un extracto que es un extracto de PG102E se describen en el Ejemplo 1. En otra modalidad de la invención, un diferente extracto de acetato de etilo es producido directamente extrayendo FD001 (o PG102T) con acetato de etilo (es decir, no hay ninguna extracción de cloroformo antes de la fracción de acetato de etilo). De nuevo, en una modalidad preferida, un extracto de acetato de etilo es preparado de A. arguta, aunque será evidente para el experto en la técnica que los extractos equivalentes pueden prepararse de otro fruto de kiwi enriquecido, incluyendo, pero sin limitarse a, A. polygama y A. kolomikta. En algunas modalidades de la invención, particularmente cuando se seca la fruta, puesto que una etapa en el proceso o preparación del extracto o concentrado u otra preparación de un extracto o concentrado u otras preparaciones de la invención pueden producirse de cualquier especie de Actinidia. Por consiguiente, es un objeto de la presente invención proporcionar una composición, incluyendo una composición farmacéutica, una composición cosmética, o una composición útil como o con un producto alimenticio natural, alimento o bebida natural, o aditivo alimenticio (incluso aditivos alimenticios humanos y animales (incluso mascotas domésticas)), que comprende tales extractos de fruto de kiwi enriquecido u otra especie de Actinidia, si se desea. Tales composiciones se desean para uso en cualquier método de la invención, incluyen regular selectivamente las inmunorespuestas Th1 y Th2 en un paciente (es decir, en un mamífero), tal como el método para prevenir o tratar la enfermedad inflamatoria alérgica y no-alérgica o proporcionan un producto farmacéutico o nutracéutico antiviral o anticáncer por la administración de tales composiciones. Otros aditivos y componentes de las composiciones, así como las estrategias de dosificación y administración descritas en la presente se aplican a este objeto de la invención también. En la preparación de cualquier composición descrita en la presente, además de los extractos descritos en la presente, incluyendo los extractos/concentrados descritos específicamente antes, se incluye en la invención el uso de frutas completas de fruto del kiwi enriquecido, o preparaciones de la fruta que son procesadas, pero no extraídas, incluyendo, pero sin limitarse a, fruta fresca, fruta comprimida (seca o fresca), fruta hervida (seca o fresca), fruta cocida, fruta seca, fruta prensada, fruta congelada y fruta condensada. Por consiguiente, es un objeto de la presente invención proporcionar una composición, que incluye una composición farmacéutica, una composición cosmética, o una composición útil como o con un producto alimenticio natural, alimento o bebida natural, o aditivo alimenticio, que comprende tales frutas completas de fruto del kiwi enriquecido o preparaciones de fruta que e pueden procesarse de una cierta manera (por ejemplo, secado, hervido, etc.), pero que no se extraen necesariamente. Por lo tanto, en una modalidad, la presente invención se relaciona con las preparaciones de fruto del kiwi enriquecido (y fruto de kiwi común) que no se ha extraído. Cualquiera de tales composiciones descritas en la presente se desean para el uso en cualquier método de la invención, incluyendo regular selectivamente las inmunorespuestas Th1 y Th2 en un paciente (es decir, en un mamífero), tal como el método para prevenir o tratar enfermedad inflamatoria alérgica y no-alérgica o proporcionar una producto farmacéutico o nutracéutico antiviral o anticáncer por la administración de tales composiciones. Otros aditivos y componentes de las composiciones, así como las estrategias de dosificación y administración descritas en la presente se aplican a este objeto de la invención también. Adicionalmente, en la preparación de cualquier composición descrita en la presente, además de los extractos descritos en la presente, se ¡ncluye en la ¡nvención el uso del jugo de un fruto de kiwi enriquecido, producido de cualquier parte de fruto del kiwi enriquecido y por cualquier proceso adecuado. El jugo puede utilizarse produciéndose directamente de la fruta (es decir, sin diluirse o concentrado), el jugo puede diluirse, o puede concentrarse para formar un concentrado de jugo de fruta. Por ejemplo, como se describe en el Ejemplo 3, el fruto del kiwi fresco puede producirse a través de un exprimidor de cítricos convencional. El exprimidor de cítricos puede eliminar las cascaras de la fruta dando por resultado una mezcla de semillas, pulpa y jugo. Esta mezcla puede entonces tratarse (por ejemplo, mediante centrifugación o prensado) para eliminar el jugo de los sólidos y, si se desea, este jugo puede concentrarse (por ejemplo, mediante evaporación, destilación, ultrafiltración, etc.) para proporcionar un jugo de fruta concentrado (es decir, concentrado de jugo de fruta). Tales composiciones se desean para uso en cualquier método de la invención, y particularmente en el método para prevenir o tratar enfermedad inflamatoria alérgica y no-alérgica o proporcionar un producto farmacéutico o nutracéutico antivirus o anticáncer por la administración de tales composiciones. Otros aditivos y componentes de las composiciones, así como las estrategias de dosificación y administración descritas en la presente se aplican a este objeto de la ¡nvención también. Adicionalmente, en la preparación de cualquier composición descrita en la presente, como una alternativa para los extractos descritos en la Publicación de Patente Norteamericana No. 2004/0037909, incluida en la invención es el uso de otros productos para el procesamiento de fruto del kiwi enriquecido, incluyendo, pero sin limitarse a, un extracto en agua a temperatura ambiente de fruta, ¡ncluyendo fruta seca; un extracto en agua de fruto del kiwi enriquecido se realizó en agua que tiene una temperatura de menos de la temperatura ambiente; un extracto en agua u otro extracto de la raíz, hoja, tallo o corteza; o un extracto o concentrado en agua u otro extracto de cualquier fruta, hoja, tallo o corteza, que no se seca antes de la extracción (por ejemplo, fruta fresca extraída). Los presentes inventores proponen en la presente que el fruto del kiwi enriquecido puede extraerse en cualquier temperatura del agua que va de 0°C a 80°C, ¡ncluyendo la temperatura ambiente y enfriador (por ejemplo, de aproximadamente 0°C a aproximadamente 25°C). De acuerdo a la presente invención, la referencia gerreral a un "fruto de kiwi enriquecido secó" o un "fruto de kiwi seco" ¡ncluye cualquier forma de un fruto de kiwi enriquecido u otro fruto de kiwi (por ejemplo, kiwi común) que se ha secado por cualquier proceso. El término "fruto de kiwi" puede utilizarse en la presente genéricamente se referir a cualquier miembro del género Actinidia, e incluye los miembros de fruto del kiwi enriquecido como se discute anteriormente, así como miembros del kiwi común, también como se discute anteriormente. Por lo tanto, un fruto de kiwi seco incluye cualquier parte seca de fruto del kiwi (fruta, hoja, tallo, raíz, etc.), e incluye frutas completas secadas, fruta rebanada seca, fruta comprimida seca, fruta cortada en cubitos seca, y fruta condensada seca, así como cualquier extracto de fruto del kiwi, en donde el material que se extrae es primero secado antes de la extracción. Los extractos no necesitan secarse o procesarse adicionalmente, aunque está es generalmente la forma más útil para los extractos para la formulación en composiciones y para almacenamiento. Los métodos preferidos de concentración adicional de los extractos para uso adicionalmente incluyen, pero no se limitan a, evaporación, destilación, ultrafiltración, osmosis inversa, precipitación, adsorción a y elución de una fase estacionaria, y extracción en solventes alternativos. Los métodos preferidos para secar los extractos o concentrados para uso adicional incluyen, pero no se limitan a, secado en bandejas, secado con aerosol y liofilización, con o sin el uso de secar auxiliares o excipientes tal como maltodextrina, celulosa microcristalina y almidón. En una modalidad, un fruto de kiwi seco preferido para uso en la presente invención es una preparación de fruto del kiwi seca que no se extrae posteriormente. Por lo tanto, las composiciones y métodos descritos en la presente se aplican al uso de cualquier fruto de kiwi enriquecido, incluyendo el uso de cualquier parte de la fruta, tallo, hoja, corteza o raíz de fruto del kiwi enriquecido, o cualquiera extracto o concentrado o fracción del mismo, cualquier forma de la fruta completa o procesada pero sin extraer la fruta, jugo, fruta o cualquiera extracto o concentrado o fracción del mismo, e incluyendo adicionalmente partes de la planta de fruto del kiwi enriquecido (la parte de la planta incluye la fruta, tallo, hoja, corteza y/o raíz) y preparaciones de parte de la planta que se preparan usando un proceso que incluye una etapa de sequedad.

Es por lo tanto un objeto de la presente invención proporcionar una composición, que incluye una composición farmacéutica, composición nutracéutica, aditivo alimenticio, alimento natural (que incluye una bebida o material alimenticio), o una composición cosmética, que comprende, esencialmente consistiendo de, o que consiste de, el fruto del kiwi enriquecido descrito en la presente (es decir, incluyendo cualquier parte de la fruta, fruta completa, tallo, hoja, corteza o raíz, e incluyendo cualquier preparación o extracto o concentrado del mismo, que incluye preparaciones secas, preparaciones no extraídas pero procesadas, fruta fresca, jugo de fruta, o cualquier extracto, concentrado o fracción del mismo). En una modalidad, la presente invención proporciona un extracto crudo, un extracto soluble en agua total, o un extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi enriquecido. En todos los casos, la preparación de fruto del kiwi enriquecido es un ingrediente activo para uso para regulra selectivamente las inmunorespuestas Th1 y Th2 en un paciente (es decir, en un mamífero). En particular, la composición tiene una actividad biológica seleccionada por lo menos una de las siguientes actividades: (a) reducir el número de células B que producen IgE en un paciente; (b) reducir la cantidad de IgE producida en un paciente (por ejemplo, en el suero o plasma); (c) disminuir la producción y/o niveles de por lo menos una citocina Th2 (por ejemplo, I L-4, I L-5 , IL-10); (d) aumentar el nivel de por lo menos una citocina Th1 (por ejemplo, IL-12, IFN-?)¡ (e) disminuir el nivel de expresión del factor de transcripción, GATA-3; (f) aumentar el nivel de expresión del factor de transcripción T-bet; (g) aumentar el nivel de expresión del factor de transcripción NFATc2; (h) aumentar el número de células B que producen lgG2a en un paciente; (i) aumentar la cantidad de lgG2a producida en un paciente; (j) producción o actividad mejorada de linfocitos T Th1 (por ejemplo, CD4+, IFN-?+), particularmente en un sitio de inflamación; (k) disminuir la producción o actividad de los linfocitos T Th2 (por ejemplo, CD4 + , IL-4 + ), particularmente en un sitio de inflamación; (1) reducir el número de Células B que producen IgG 1 en un paciente; (m) reducir la cantidad de IgGI producido en un paciente; y/o (n) reducir el nivel de o producción de por lo menos un leucotrieno en el paciente. Las composiciones descritas anteriormente pueden utilizarse para la prevención y/o tratamiento de cualquier enfermedad o condición en donde la regulación de la inmunorespuesta de la manera descrita en la presente estará, o se podrá predecirse por ser, benéfica a un paciente.

Como se utiliza en la presente, la frase "protegido de una enfermedad" se refiere a reducir los síntomas de la enfermedad; reducir la ocurrencia de la enfermedad, y/o reducir la severidad de la enfermedad. La protección de un paciente puede referirse a la capacidad de una composición de la presente invención, cuando es administrada a un paciente, para prevenir que una enfermedad ocurra y/o para curar o aliviar por lo menos uno, y preferiblemente más de uno, de los síntomas de la enfermedad, los signos o causas. Como tal, para proteger a un paciente contra una enfermedad incluye prevenir la ocurrencia de la enfermedad (tratamiento profiláctico) y tratar a un paciente que tenga una enfermedad (tratamiento terapéutico) para reducir los síntomas de la enfermedad. En particular, la protección de un paciente contra una enfermedad o mejorar otra terapia es lograda regulando una actividad dada tal que un efecto benéfico es obtenido. Un efecto benéfico puede determinarse fácilmente por un experto en la técnica y/o por un médico entrenado que esté tratando al paciente. El término, "enfermedad" se refiere a cualquier desviación de la salud normal de un mamífero e ¡ncluye un estado cuando los síntomas de enfermedad están presentes, así como las condiciones en las cuales un desvío (por ejemplo, infección, mutación del gen, defecto genético, etc.) ha ocurrido, pero los síntomas todavía no se manifiestan. En general, la actividad biológica o acción biológica de un agente descrito en la presente, incluye una composición de fruto del kiwi enriquecido, extracto de fruto del kiwi enriquecido, o cualquier otra preparación del mismo, se refiere a cualquier función(es) exhibida o realizada por el agente que se atribuye a la forma que ocurre naturalmente del agente como se midió u observo in vivo (es decir, en un ambiente fisiológico natural en donde se utiliza el agente) o in vitro (es decir, bajo condiciones del laboratorio). Las modificaciones de un agente, tal como cambiando el proceso o preparación del agente o purificación del agente, pueden dar lugar a los agentes que tienen la misma actividad biológica como el agente que ocurre naturalmente, o en agentes que tienen actividad biológica disminuida o incrementada con respecto al agente que ocurre naturalmente. Por consiguiente, es un objeto de la presente invención proporcionar una composición, que incluye una composición farmacéutica o una composición nutracéutica (nutricional), que comprende el fruto del kiwi enriquecido descrito en la presente (es decir, que incluyendo cualquier parte de la fruta, fruta completa, tallo, hoja, corteza o raíz, y que incluyendo cualquiera preparación o extracto o concentradose del mismo, que incluye preparaciones secas, preparaciones procesadas pero no extraídas, fruta fresca, jugo de fruta, o cualquier extracto o concentrado o fracción del mismo), y en una modalidad, un extracto crudo, un extracto soluble en agua total, o un extracto de acetato de etilo de fruto del kíwi enriquecido (que puede colectivamente referirse como los ingredientes activos de la invención o como preparaciones de fruto del kiwi enriquecido de la invención), como un ingrediente activo para regular una inmunorespuesta en el mamífero, y más particularmente para regular una inmunorespuesta de Th2 y/o Th1 en un mamífero, y aún más particularmente, para mejorar una respuesta de Th1 en un mamífero y/o suprimir una respuesta de Th2 en un mamífero. Tales ingredientes activos son útiles para el tratamiento y/o prevención de una variedad de condiciones y enfermedades, que incluyen, pero no limitan a, enfermedad alérgica, enfermedad inflamatoria no-alérgica, infección viral y cáncer. La composición además puede comprenderse o utilizarse conjuntamente con agentes terapéuticos o nutracéuticos adicionales para la prevención, tratamiento y/o mejora de cualquiera de las condiciones o enfermedades anteriormente descritas. De acuerdo a la presente invención, las aplicaciones nutricionales incluyen cualquier aplicación de la invención dirigida al suministro de nutrientes y agentes alimenticios para mantener, estabilizar, mejorar, fortalecer o mejorar la salud de un individuo o proceso orgánico por el cual un organismo asimila y utiliza el alimento y líquidos para el funcionamiento, crecimiento y mantenimiento, y que incluye aplicaciones nutracéuticas. Las aplicaciones terapéuticas incluyen cualquiera de las aplicaciones de la ¡nvención dirigidas a la prevención, tratamiento, administración, curado, alivio y/o cura de una enfermedad o condición que sea un desvío de la salud de un individuo. Otras aplicaciones de la invención incluyen, por ejemplo, aplicaciones cosméticas Es también un objeto de la presente invención proporcionar un fruto de kiwi enriquecido descrito en la presente (es decir una preparación de fruto del kiwi enriquecido, que incluyendo cualquier parte-de la fruta, fruta completa, tallo, hoja, corteza o raíz, y que incluyendo cualquiera preparación o extracto o concentrado del mismo, que incluye preparaciones secas, preparaciones procesadas pero no extraídas, fruta fresca, jugo de fruta, o cualquier extracto o concentrado o fracción del mismo), y en una modalidad, un extracto crudo, un extracto soluble en agua total, o un extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi enriquecido, para la preparación de un agente terapéutico o nutracéutico para regular una i nmunorespuesta en el mamífero y más particularmente para regular una inmunorespuesta de Th1 y/o Th2 en un mamífero, y aún más particularmente, para mejorar una respuesta de Th1 en un mamífero y/o suprimir una respuesta de Th2 en un mamífero. Tales ingredientes activos son útiles para el tratamiento y/o prevención de una variedad de condiciones y enfermedades, que incluyen, pero no limitan a, enfermedad alérgica, enfermedad inflamatoria no-alérgica, infección viral y cáncer. El agente puede utilizarse conjuntamente con agentes terapéuticos o nutracéuticos adicionales para la prevención, tratamiento y/o mejora de cualquiera de las enfermedades o condiciones descritas anteriormente. Es otro objeto de la presente invención proporcionar un alimento natural o aditivos alimenticios que comprenden el fruto del kiwi enriquecido descrito en la presente (es decir una preparación de fruto del kiwi enriquecido, que incluyendo cualquier parte de la fruta, fruta completa, tallo, hoja, corteza o raíz e incluyendo cualquier preparación o extracto o concentrado del mismo, que incluye las preparaciones secas, preparaciones procesadas pero no extraídas, fruta fresca, jugo de fruta o cualquier extracto o concentrado o fracción del mismo), y en una modalidad, un extracto crudo, un extracto soluble en agua total, o un extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi enriquecido, junto con cualquier aditivo aceptable para regular una inmunorespuesta en el mamífero, y más particularmente, para regular una inmunorespuesta de Th1 y/o Th2 en un mamífero, y aún más particularmente, para mejorar una respuesta de Th1 en un mamífero y/o suprimir una respuesta de Th2 en un mamífero. Tal alimento natural o aditivos alimenticios naturales son útiles para el tratamiento y/o prevención de una variedad de condiciones y enfermedades, que incluyen, pero no limitan a, enfermedad alérgica, enfermedad inflamatoria no-alérgica, infección viral y cáncer. Todavía es otro objeto de la presente invención proporcionar un alimento animal o aditivo alimenticio que comprende el fruto del kiwi enriquecido descrito en la presente (es decir, una preparación de fruto del kiwi enriquecido, que incluyendo cualquier parte de la fruta, fruta completa, tallo, hoja, corteza o raíz, e incluyendo cualquier preparación o extracto o concentrado del mismo, incluyendo preparaciones secas, preparaciones procesadas pero no extraídas, fruta fresca, jugo de fruta, o cualquier extracto o concentrado o fracción del mismo), y en una modalidad, un extracto crudo, extracto soluble en agua total, o un extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi enriquecido, como un componente esencial para regular una inmunorespuesta en el mamífero, y aún más particularmente para regular una inmunorespuesta de Th1 y/o Th2 en un mamífero, y aún más particularmente, para mejorar una respuesta de Th1 en un mamífero y/o suprimir una respuesta de Th2 en un mamífero. Tal alimento natural o aditivos alimenticios animales son útiles para el tratamiento y/o prevención de una variedad de condiciones y enfermedades, que incluyen, pero no limitan a, enfermedad alérgica, enfermedad inflamatoria no-alérgica, infección viral y cáncer. Todavía es otro objeto de la presente invención proporcionar una composición tópica o cosmética que comprende el fruto del kiwi enriquecido descrito en la presente (es decir una preparación de fruto del kiwi enriquecido, incluyendo cualquier parte de la fruta, fruta completa, tallo, hoja, corteza o raíz, e incluyendo cualquier preparación o extracto o concentrado del mismo, incluyendo preparaciones secas, preparaciones procesadas pero no extraídas, fruta fresca, jugo de fruta, o cualquiera extracto o concentrado o fracción del mismo), y en una modalidad, un extracto crudo, extracto soluble en agua total, o un extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi enriquecido, para regular una inmunorespuesta en el mamífero, y aún más particularmente para regular una inmunorespuesta de Th1 y/o Th2 en un mamífero, y aún más particularmente, para mejorar una respuesta de Th1 en un mamífero y/o suprimir una respuesta de Th2 en un mamífero. Tales composiciones cosméticas son útiles para el tratamiento y/o prevención de una variedad de condiciones y enfermedades, que incluyen, pero no limitan a, enfermedad alérgica (incluso enfermedades alérgicas de o que afectan la piel), enfermedad inflamatoria no-alérgica, infección viral y cáncer. Cualquiera de las composiciones, aditivos o agentes descritos en la presente pueden adicionalmente comprender por lo menos un portador, adyuvante o diluyente convencional. Por ejemplo, la composición de acuerdo a la presente invención puede incluir portadores, adyuvantes o diluyentes farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, lactosa, dextrosa, sucrosa, sorbitol, manitol, xilitol, eritritol, maltitol, almidones, goma de acacia, alginato, gelatina, fosfato de calcio, silicato de calcio, celulosa, metilcelulosa, polivinilpirrolidona, agua, metilhidroxibenzoato, propilhidroxibenzoato, talco, estearato de magnesio y aceite mineral. Las formulaciones pueden adicionalmente incluir rellenos, agentes anti-aglutinantes, agentes lubricantes, agentes humectantes, agentes saborizantes, emulsificadores, conservadores y similares. Las composiciones de la invención pueden formularse para proporcionar liberación rápida, sostenida o retardada del ingrediente activo después de su administración a un paciente. Por ejemplo, las composiciones de la presente invención pueden disolverse en aceites, propilenglicol u otros solventes que se utilizan comúnmente para producir una inyección. Los ejemplos adecuados de los portadores incluyen salina fisiológica, propilenglicol, etanol, aceites vegetales, miristato de isopropilo, etc., pero no se limitan a estos portadores. Para la administración tópica, los compuestos de la presente invención pueden formularse en la forma de ungüentos y cremas. Las composiciones o formulaciones de la presente invención pueden prepararse en cualquier forma, tal como forma de dosificación oral (tableta efervescente, polvo efervescente, polvo, tableta, cápsula, cápsula blanda, medicina acuosa, jarabe, pildora de elixires, polvo, bolsa, granulo), o preparación tópica (crema, ungüento, loción, gel, bálsamo, parche, pasta, solución atomizada, aerosol y similares), o preparación inyectable (solución, suspensión, emulsión). La composición de la presente invención en formas de dosificación farmacéuticas puede utilizarse solas o en asociación o combinación apropiada con otros compuestos farmacéuticamente activos, ¡ncluyendo compuestos antiinflamatorios, compuestos antialérgicos, o cualquier otro compuesto o composición que puedan regular una inmunorespuesta o proporcionen un beneficio a un paciente. Los compuestos que son particularmente deseables para uso en las composiciones y formulaciones de la presente invención se describen detalladamente en la presente. La composición de la presente invención puede también proporcionarse como un alimento natural que incluya las preparaciones de fruto del kiwi enriquecido de la ¡nvención (por ejemplo, alimentos varios, bebida, goma, complejo de vitamina, alimento que mejoran la salud y similares). El alimento natural puede proporcionarse como producto alimenticio, polvo, granulo, tableta, tableta masticable, cápsula o bebida etc. Los alimentos para niños o infantiles también se incluyen en las composiciones de la invención, tal como leche en polvo modificada, fórmulas infantiles y alimento de niños e infantes modificado. Los productos alimenticios adecuados en los cuales una composición o agente de la invención pueden introducirse para producir un producto alimenticio saludable incluyen, pero no se limitan a, pastelería fina, pan y rollos, cereales para desayuno, queso procesado y no procesado, condimentos (salsa de tomate, mayonesa, etc.), productos lácteos (leche, yogur), budines y postres de gelatina, bebidas carbonatadas, tés, mezclas de bebidas en polvo, productos pesqueros procesados, bebidas a base de frutas (incluso jugos de fruta), bebidas a base de verdura (incluso jugos vegetales), chicle, confitería dura, productos lácteos congelados, productos de carne procesados, alimentos para untar de nuez y a base de nuez, pastas, productos de aves de corral procesados, caldos y salsas, patatas a la inglesa y otros crujientes, chocolate, y otras confiterías (galletas, dulces, licores), helados, comidas deshidratadas, corte o productos de alimentos procesados, (por ejemplo, frutas, verduras), especias, bebidas alcohólicas, tallarines, alimentos fermentados, sopas y mezclas de sopas, productos basados en soya (leches, bebidas, cremas, blanqueadores), alimentos para untar basados en aceite vegetal y bebidas basadas en verdura. Una composición de la invención presente también puede usarse con una comida, que se colocada en, se vierte en o mezcla en la comida al momento de servir. Las composiciones descritas anteriormente, y particularmente formulaciones cosméticas que contienen las composiciones anteriormente identificadas, pueden prepararse en cualquier forma tal como dérmica, loción, crema, esencia, polvo fino, emulsión, compresa, jabón, champú, enjuague, limpiador, solución de lavado corporal, solución de lavado, tratamiento, gel, bálsamo, solución en aerosol y similares. Cualquiera de las composiciones anteriores de la presente invención pueden además incluir una o más de lactosa, caseína, dextrosa, glucosa, sucrosa y sorbitol. Cualquiera de las composiciones, preparaciones, aditivos o agentes descritos en la presente pueden adicionalmente comprender por lo menos un agente activo (es decir, compuesto activo, componente activo). El agente activo adicional puede ser un agente farmacológicamente activo y/o un agente nutricionalmente activo. Los agentes activos generalmente contribuyen con por lo menos una propiedad, nutricional y/o terapéutica y/o farmacológica deseable adicional para una composición, además de la preparación de fruto del kiwi descrita en la presente. Los agentes activos pueden incluirse en una composición, preparación, aditivo u otra formulación de la invención en cualquier cantidad efectiva. Una cantidad efectiva es una cantidad suficiente para alcanzar el efecto deseado impartido por el agente, tal como un efecto en la salud o nutrición de un sujeto (por ejemplo, un efecto terapéutico o nutricional), un efecto sabroso, efecto aromático, efecto visual, etc. Un experto en la técnica podrá determinar la cantidad apropiada de agentes adicionales para agregar a una composición de la invención. Por ejemplo, cualquiera de las composiciones proporcionadas para o útiles en la presente invención pueden incluir uno o más productos naturales como un agente activo, que incluyen, pero no limitan a, ácidos grasos y policétidos; ácidos orgánicos y compuestos orgánicos pequeños misceláneos; aminoácidos aromáticos y fenilpropanoides; terpenoides y esteroides; alcaloides; corrinas y porfirinas; péptidos lineales y cíclicos, depsipéptidos, y otros derivados de aminoácidos; nucleósidos y nucleótidos; carbohidratos; proteínas, células y fragmentos celulares; preparaciones herbales y especias; minerales; esterilizadores; condimentos; vitaminas; electrólitos; y otros agentes naturales. Otros componentes (compuestos o agentes) que puede agregarse a una composición de la ¡nvención incluyen agentes saborizantes sintéticos, un agente colorante, agente de proceso, ácido algínico o sal del mismo, ácido orgánico, adhesivo coloidal protector, agente controlador de pH, estabilizador, conservador, glicerina, alcohol, agente de carbonación, o cualquier otro agente esencial de una formulación (para uso alimenticio o terapéutico por cualquier método de administración), un alimento o bebida. Los componentes particularmente preferidos (agentes activos) para combinarse con una preparación de fruto del kiwi enriquecido de la ¡nvención o agregarse a una composición que contiene tal preparación incluyen, pero no se limitan a: probióticos; paredes y fragmentos celulares bacterianos; proteína de suero; taurina; alanina; ácidos grasos (por ejemplo, ácido linolénico conjugado, ácido eicosapentaenóico, ácido docosahexaenóico, ácido ?-linolénico, ácido a-linolénico, ácido dihomo-?-linolénico, ácido estearidónico); mono-, di- y triglicéridos (compuestos por cualquier combinación de ácidos grasos descritos anteriormente); inositol; turmérico; curcumina; romero; ácido rosmarínico; metilsulfonilmetano (MSM); ginseng; jengibre; proantocianidina; ß-carotenos; y cualquier otra preparación de una especie diferente de fruto del kiwi que se use como el componente bioactivo primario, incluyendo cualquier miembro de Actinidiaceae, y particularmente cualquier miembros del género Actinidia, incluyendo la especie de kiwi común (por ejemplo, A. chinensis o A. deliciosa) y especie de fruto del kiwi enriquecido (por ejemplo, A. arguta, A. polygama y A. kolomikta).

Los ácidos grasos y policétidos incluyen, pero no se limitan a: ácidos grasos saturados (por ejemplo, ácido a-lipóico (R, S, o R,S); ácidos grasos insaturados (por ejemplo, ácido linolénico conjugado, ácido eicosapentaenóico, ácido docosahexaenóico, ácido ?-linolénico, ácido a-linolénico, ácido dihomo-?-linolénico, ácido estearidónico); esteres del ácido graso; monoglicéridos, diglicéridos y triglicéridos (compuestos por cualquier combinación de los ácidos grasos descritos anteriormente); ácidos grasos acetilénicos; ácidos grasos de cadenas ramificada; prostaglandinas; tromboxanos; leucotrienos; policétidos aromáticos; macrolidas y poliéteres; extractos de lípido (por ejemplo, aceites marinos, aceite de Echium, aceite de borraja, aceite de oliva); y lecitina. Los ácidos orgánicos y compuestos orgánicos pequeños misceláneos incluyen, pero no se limitan a, ácido cítrico; ácido fumárico; guaiacol; metilsulfonilmetano (MSM); y ácido ascórbico.

Los aminoácidos y fenilpropanoides aromáticos incluyen, pero no se limitan a, aminoácidos aromáticos y ácidos benzoicos (por ejemplo, ácido benzoico, ácido gálico, ácido gentísico, ácido p-hidroxibenzoico, ácido protocatecuico, ácido vanílico, ácido salicílico, ácido siríngico); ácidos cinámicos (por ejemplo, hidroxitirosol, curcumina, ácido rosmarínico, ar-turmerona, ácido caféico, eugenol, ácido clorogénico, ácido neoclorogénico, ácido cinámico, ácido ferúlico, ácido o-coumárico, ácido p-coumárico); lignanos y lignina; fenilpropenos; coumarinas; estirilpirones; flavonoides (por ejemplo, antocianidinas, tal como delfinidina; proantocianidinas; catecinas tal como catecina, epicatecina y teaflavina; flavonoles, tal como avicularina, hiperósido, quercitrina, isoquercitrina, caempferol, miricetina, rutina; flavanones, tal como naringenina; calcones, tal como floretina; isoflavonas, tal como vitexina); estilbenos; flavonolignanos; isoflavonoides; y quininas de terpenoide (por ejemplo, vitaminas K y tocoferoles (vitamina E) tal como tocotrienoles). Los terpenoides y esteroides incluyen, pero no se limitan a, monoterpenos (por ejemplo, ß-pineno, borneol, carvacvol, geraniol, timol, 1,8-cineol, terpineol); iridoides (por ejemplo, monotropeína); ß-iononas (por ejemplo, precursor de carbono trece a vitaminas A); sesquiterpenos (por ejemplo, cariofileno, farnesol); diterpenos (por ejemplo, vitaminas A); sesterterpenos; triterpenos (por ejemplo, a-amirina, lupeol, ácido ursólico); tetraterpenos; carotenoides (por ejemplo, licopeno, ß-carotenos, luteína, astaxantina, cantaxantina); y esteroides (por ejemplo, vitaminas D, ß-sitosterol). Los alcaloides incluyen, pero no se limitan a, alcaloides de pirrolidina, alcaloides de tropano, alcaloides de pirrolizidina, alcaloides de piperidina, alcaloides de quinolizidina, alcaloides de indolizidina, alcaloides de piridina, feniletilaminas, alcaloides de tetrahidroisoquinolina, galantaminas, alcaloides de indol, alcaloides de ß-carbolina, indol alcaloides de terpenoíde, alcaloides de quinolina, alcaloides de pirroloindol, alcaloides del ergot, alcaloides de quinazolina, quinolina y alcaloides de acridina, alcaloides de imizadol, alcaloides de piperidina, efedrinas, capsaisinas, monoterpena alcaloides de piridina, aconitinas, alcaloides esteroidales, alcaloides de purina (por ejemplo, alantoína, cafeína, teofilina). Las corrinas y porfirinas incluyen, pero no se limitan a, vitaminas B. Los péptidos lineales y cíclicos, depsipéptidos, y otros derivados de aminoácidos incluyen, pero no se limitan a, aminoácidos simples y sus derivados (por ejemplo, L-acetil carnitina, colina, taurina, alanina), péptidos lineales, péptidos cíclicos (por ejemplo, ciclosporinas), depsipéptidos cíclicos, ß-lactamas, glucósidos cianogénicos, glucosinolatos, sulfóxidos de cisteína. Los carbohidratos incluyen, pero no se limitan a, monosacáridos (por ejemplo, inositol), polisacáridos (por ejemplo, fructo-oligosacáridos, tal como inulina (cualquier longitud de cadena); galacto-oligosacáridos; citina y citosan). Otros materiales naturales incluyen, pero no se limitan a, proteínas (por ejemplo, proteína de suero y dismutasa de superóxido); células y fragmentos celulares (por ejemplo, probióticos, que significan microorganismos vivos, intactos tal como, por ejemplo, Lactobacillus spp., células bacterianas y fragmentos de pared celular, células fúngicas/levadura y fragmentos de pared celular); preparaciones herbales y especias (por ejemplo, ginseng, huang, turmérico, romero, jengibre); minerales (por ejemplo, K, Mg, Ca, Mn, Fe, Cu, Zn, B, Si, Se). Los metabolitos y derivados de cualquiera de estos compuestos también son comprendidos por la presente ¡nvención. En una modalidad de la ¡nvención, la composición de la ¡nvención se administra como una terapia adjunta para una terapia convencional para una condición o enfermedad. Por ejemplo, los presentes inventores han demostrado que la preparación del fruto kiwi enriquecido de acuerdo a la presente ¡nvención mejora el resultado clínico en pacientes con dermatitis atópica cuando se utiliza como una terapia de esteroide adjunta a tópica. Por lo tanto, las composiciones de la invención pueden incluir uno o más agentes terapéuticos (por ejemplo, medicinas), que también pueden referirse en la presente como agentes activos, usados para tratar una condición o enfermedad que puede tratarse o mejorar mediante la regulación de las inmunorespuestas. Tales agentes terapéuticos incluyen, pero no se limitan a, esteroides (incluyendo corticoesteroides e ¡ncluyendo oral, inhalado e inyectado), antihistamínicos (cualquier tipo, incluyendo sistémico, tópico, inhalado, e incluyendo bloqueadores de H1 y H2), anticuerpos (por ejemplo, anti-lgE, anti-IL-10), antibióticos, ciclosporinas, antimicóticos, reguladores de la función respiratoria, analgésicos, ß-agonistas (acción larga o corta), modificadores de leucotrieno (inhibidores o antagonistas del receptor), antagonistas del receptor de citocina o citocina, ¡nhibidores de fosfodiesterasa, cromoglicato de sodio, nedocrimilo, teofilina, cafeína, carbobenzoxi beta-alanil taurina, ¡nhibidores de la función de célula T y otros agentes antünflamatorios. Cualquiera de las composiciones anteriores pueden comprender adicionalmente uno o más de un ácido orgánico (por ejemplo, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido adípico, ácido láctico, ácido málico, ácido ascórbico), fosfato (por ejemplo, fosfato, fosfato de sodio, fosfato de potasio, pirofosfato ácido, polifosfato) y/o antioxidante naturales (por ejemplo, polifenol, catecina, a-tocoferol, extracto de romero, vitamina C, extracto de té verde, extracto de raíz de licor, citosan, ácido tánico, ácido fitíco, etc). Las composiciones de la presente invención, y particularmente composiciones cosméticas o composiciones que son formuladas mediante administración tópica, incluyendo composiciones terapéuticas (pero sin limitarse a cosmético u otras composiciones tópicas) pueden comprender aditivos adicionales incluyendo, pero sin limitarse a, vitamina soluble en agua, vitamina soluble en lípido, polímero de péptido, polímero de polisacárido, esfingolípido, glicosaminoglicanos, B-glucan y extracto de alga marina. Además, uno puede agregar las composiciones y agentes de la presente invención a cosméticos existentes y soluciones de lavado. Tales composiciones pueden utilizarse como cremas, lociones, paquetes o aceites de masaje, y soluciones de lavado corporal, jabón, champús y similares. Las vitaminas solubles en agua preferidas pueden ser cualquiera que pueda mezclarse con cosméticos u otras formulaciones tópicas, sin embargo, varias vitaminas tal como vitamina B1, B2, B6, piridoxina, HCl de piridoxina, vitamina B12, ácido pantoténico, ácido nicotíníco, niconamida, ácido fólico, vitamina C, vitamina H etc, su sal de la misma por ejemplo sal de HCl de tiamina, sal de Na del ácido ascórbico o sus derivados de la misma tal como sal de Na del ácido ascórbico-ácido-2-fosfónico, sal de Mg del ácido ascórbico-ácido-2-fosfónico son preferibles, y aquellas que pueden obtener por métodos convencionales tal como métodos de conversión microbianos, métodos de purificación de cultivos microbianos, métodos enzimáticos o métodos sintéticos químicos. Las vitaminas solubles de lípido preferidas son cualquiera de una que puede mezclarse con cosméticos u otras formulaciones tópicas, sin embargo, varia vitamina tal como vitamina A, D2, D3, E (dl-a-tocoferol, d-a-tocoferol, d-d-tocoferol) y sus derivados tal como ascorbato del ácido palmítico, ascorbato del ácido esteárico, ascorbato del ácido dipalmítico, ácido-dl-a- tocoferol, vitamina E de dl-a-tocoferol del acético nicotínico, alcohol dl-pantotenílico, alcohol d-pantotenílico, etiléter pantotenílico etc. que contienen la vitamina soluble en lípido usada en los ejemplos de la presente invención son preferibles y aquéllos que pueden obtener por métodos convencionales tal como métodos de conversión microbianos, métodos de purificación de los cultivos microbianos, métodos enzimáticos o métodos sintéticos químicos. Los polímeros de péptido preferidos son cualquiera que pueda mezclarse con cosméticos u otras formulaciones tópicas; sin embargo, son preferibles el colágeno, colágeno hidrolizable, gelatina, elastina, gelatina hidrolizable, o queratina, etc., que contienen el polímero de péptido usado en los ejemplos de la presente invención. Los polímeros de polisacárido preferidos son cualquiera que pueda mezclarse con cosméticos u otras formulaciones tópicas, sin embargo, son preferibles hidroxietilcelulosa, goma de xantina, Na del ácido hilaurónico, sulfato de condroitina o su sal (sal de de Na etc) y similares. Por ejemplo, el sulfato de condroitina o la sal del mismo etc. puede utilizarse purificándose de mamíferos o peces ordinariamente. Los esfingolípidos preferidos son cualquiera de los cuales puedan mezclarse con cosméticos u otras formulaciones tópicas, sin embargo, son preferibles el escualeno, ceramida, pit-esfingosína, esfingo-lipopolisacárido y similares. Los esfingo- lípidos pueden obtenerse por la purificación de mamíferos, peces, crustáceos, levadura, o plantan etc. usando métodos convencionales. Los extractos de alga marina preferidos pueden ser cualquiera que pueda mezclarse con cosméticos u otras formulaciones tópicas, sin embargo, son preferibles el extracto de algas marrones, algas rojas, algas verdes y similares, o carragenanos purificados, ácido algínico, ácido argínico, Na, K, o glicosaminoglicanos aislados de los mismos. Los extractos de algas marinas pueden obtener por la purificación del alga marina usando métodos convencionales. El cosmético y otras composiciones tópicas de la presente invención pueden combinarse con otros ingredientes o combinarse con un cosmético convencional o composición tópica, si es necesario, junto con las preparaciones del fruto kiwi enriquecido antes descritas. Tales otros ingredientes incluyen, pero no se limitan a, los ingredientes de aceite, humectantes, emoliente, agentes tensoactivos, tinte orgánico o inorgánico, polvo orgánico, agente absorbente de rayos ultravioleta, conservadores, antiséptico, antioxidantes, extracto de plantas, regulador de pH, alcohol, pigmentos, perfumes, refrigerantes, antihidrótico, agua destilada etc. Los ingredientes de aceite preferibles pueden comprender aceite de éster, aceite de hidrocarburo, aceite de silicona, aceite de fluoruro, aceite animal, aceite de plantas etcétera.

Los aceites del éster preferidos incluyen, pero no se limitan a, ácido gliceril tri-2-etil hexanóico, ácido cetil 2-etil hexanóico, ácido isopropil mirístico, ácido butil mirístico, ácido isopropil palmítico, ácido etil esteárico, ácido octil palmítico, ácido isocetil isoesteárico, ácido butil esteárico, ácido etil linoléico, ácido ¡sopropil linoléico, ácido etil oléico, ácido isocetil mirístico, ácido isoestearil mirístico, ácido isoestea l palmítico, ácido octildodecil mirístico, ácido isocetil isoesteárico, ácido dietil sebásico, ácido isopropil adípico, ácido isoalquil neopetanóico, gliceril t r i ( c a p r i I , ácido cáprico), ácido trimetilpropano tri-2-etil hexanóico, trimetilopropano ácido triisoesteárico, ácido pentaeritlirítol tetra-2 etil hexanóico, ácido cetil caprílico, ácido decil láurico, ácido hexil láurico, ácido decil mirístico, ácido miristil mirístico, ácido cetil mirístico, ácido estearil esteárico, ácido decil oiéico, ácido cetil licinoléico, ácido isoestearil láurico, ácido isotridecil mirístico, ácido ¡socetil palmítico, ácido octil esteárico, ácido isocetil esteárico, ácido isodecil oléico, ácido octildodecil oléico, ácido octildodecil linoléico, ácido isopropil isoesteárico, ácido cetoestearil 2-etil hexanóico, ácido estearil 2-etil hexanóico, ácido hexil isoesteárico, ácido etilenglicol dioctanóico, etilenglícol dioléico, ácido propilenglicol dicáprico, ácido propilenglicol d ¡(capril, ácido cáprico), ácido propilenglicol dicaprílico, ácido neopentílglicol dicáprico, ácido neopentilglicol dioctanóico, ácido gliceril tricaprílico, ácido gliceril triundecílico, ácido gliceril triisopalmítico, ácido gliceril triisoesteárico, ácido octildodecil neopentanóico, ácido isoestearil octanóico, ácido octil isononanóico, ácido hexildecil neodecanóico, ácido octildodecil neodecanóico, ácido isocetil isoesteárico, ácido isoestearil isoesteárico, ácido octildecil isoesteárico, éster del ácido polig Mee rin oleanóico, éster del ácido poligl icerin isoesteárico, ácido triisocetil cítrico, ácido triisoalquil cítrico, ácido triisooctil cítrico, ácido lauril láctico, ácido miristil láctico, ácido cetil láctico, ácido octildecil láctico, ácido trietil cítrico, ácido acetiltrietil cítrico, ácido acetil tributil cítrico, ácido trioctil cítrico, ácido diisoestearil maléico, ácido di 2-etilhexil hidroxiesteárico, ácido 2-etil hexil succínico, ácido diisobutil adípico, ácido diisopropil sebasínico, ácido dioctil sebacínico, ácido colesteril esteárico, ácido colesteril isoesteárico, ácido colesteril hidroxiesteárico, ácido colesteril hidroxiesteárico, ácido colesteril oléico, ácido dihidrocolesteril oléico, ácido pitsteril isoesteárico, ácido pitsteril oléico, ácido isocetil 12-stealoil hidroxiesteárico, ácido estearil 12-estealoil hidroxiesteárico, isoestearil ácido 12-estealoíl hidroxiesteárico. Los aceites de hidrocarburo preferidos descritos anteriormente pueden comprender parafina líquida, oligómero de a-olefina, isoparafina, ceresina, parafina, isoparafina líquida, polibudeno, cera microcristalina, vaselina y similares. Los aceites de sílicona preferidos pueden comprender polimetilsilicona, metilfenilsilicona, metilciclopolisiloxano, octametilpolisiloxano, decametilpolisiloxano, dodecametilciclosiloxano, copolímero de dimetil siloxan-metil cetiloxisiloxano, copolímero de dimetil siloxan-metil estealoxisiloxano, aceite de silicona de alquilo modificado, aceite de silicona de amino modificado y similares. El aceite de fluoruro preferido comprende perfluoropoliéter y similares. Los aceites de animal o planta preferidos pueden comprender aceite de aguacate, aceite de almendra, aceite de oliva, aceite de sésamo, aceite de la cascara del arroz, aceite de cártamo, aceite de soja, aceite de maíz, aceite de semillas de colsa, aceite de cañóla, aceite de semilla de palma, aceite de palma, aceite de girasol, aceite de algodón, aceite de palma de coco, aceite de nuez de cucui, aceite del brote del embrión de trigo, aceite del brote del embrión de arroz, mantequilla de shea, aceite de tarde-primavera, aceite de nuez de macadamia, aceite de menhaden y otros aceites del cuerpo de pescado, aceite de yema de huevo, lanolina, aceite de cañamón, aceite de visón, aceite de pez reloj anaranjado "Orange RoughyJ aceite de jojoba, cera de carnauba, lanolina líquida y similares. Los humectantes preferidos pueden comprender humectantes moleculares inferiores solubles en agua, humectantes moleculares inferiores lipofílicos, polímero soluble en agua y polímero soluble en lípido. Específicamente, los humectantes moleculares inferiores solubles en agua preferibles pueden comprender el cerina, glutamina, sorbitol, manitol, Na del ácido pirrolidon-carboxílico, glicerina, propilenglicol, 1 ,3-b utileng licol, etilenglicol, polietilenglicol (índice de polimerización >2), polipropilenglicol (índice de la polimerización >2), ácido láctico, sal de lactato y similares. Los humectantes moleculares inferiores solubles en lípido preferidos pueden comprender colesterol, éster de colesterilo y similares. Los polímeros solubles en agua preferidos pueden comprender el polímero de carboxivinilo, sal del ácido poli asparagínico, tragacanto, goma de xantina, HMC (hidroximetilcelulosa), HEC (hidroxietilcelulosa), HPC (hidroxipropilcelulosa), carboximetilcelulosa, citina soluble en agua, citosan, dextrina y similares. Los polímeros solubles en lípido preferidos pueden comprender copolímero de polivinilpirroiidona-eicoceno, copolímero de polivinilpirrolidona-hexadeceno, nitrocelulosa, éster del ácido graso de dextrina, polímero de silicona y similares. Los emolientes preferidos pueden comprender el colesteriléster del ácido glutámico de acilo de cadena larga, ácido colesteril hidroxi esteárico, ácido 12-hidroxi esteárico, ácido rógico, colesteril éster del ácido graso de lanolina y similares. Los agentes de superficie activa preferidos pueden comprender agentes tensioactivos no iónicos, agentes tensioactivos aniónicos, agentes tensioactivos catiónicos, agentes tensioactivos ambivalentes y similares. Específicamente, los agentes tensioactivos no iónicos preferidos pueden comprender glicerina del ácido monoesteárico emulsionado por sí mismo, éster del ácido graso de propilenglicol, éster del ácido graso de glicerina, éster del ácido graso de poliglicerina, éster del ácido graso de sorbitán, éster del ácido graso de polioxietilensorbitán (POE), éster del ácido graso de sorbitán POE, éster del ácido graso de glicerina POE, alquiléter POE, éster del ácido graso POE, aceite de pimaja sólido POE, aceite de pimaja POE, copolímero POE-POP, alquiléter POE-POP, silicona modificada con poliéter, alcanol amida del ácido láurico, óxido de alquilamina, fosfolípido de soja con adición de hidrógeno y similares. Los agentes tensioactivos aniónicos preferidos pueden comprender jabón del ácido graso, sal del ácido a-acilsulfónico, sal del ácido alquilsulfónico, ácido alq u ilalisu Ifón ico , sal del ácido alquilnaftalensulfónico, sal del ácido alquilsulfónico, sal de sulfato de alquiléter POE, sal de alquilamidasulfato, sal de alquilfosfato, sal de alquilfosfato POE, sal de alquilamidafosfato, sal de alquiloilalquiltaurina, sal del N-acil-aminoácido, sal del ácido alquiléter carboxílico POE, sal del ácido alquilsulfosuccínico, sal del ácido alquilsulfo-acético, sal del péptido de colágeno hidrolizable acilado, perfluoro alquil fosfato éster y similares.

Los agentes tensioactivos catiónicos preferidos pueden comprender cloruro de alquil trimetil amonio, cloruro de estearil trimetil amonio, bromuro de estearil trimetil amonio, cloruro de de setoesteariltrimetil amonio, cloruro de distearil dimetil amonio, cloruro de estearil dimetil bencil amonio, bromuro de feníl trimetil amonio, cloruro de benzalconio, ácido dietilamino etil amida esteárico, ácido dimetilaminopropil amida esteárico, derivados de lanolina de amonio cuaternario y similares. Los agentes tensioactivos ambivalentes preferidos pueden comprender tipo carboxibetaína, tipo amidabetaína, tipo hidroxisulfobetaína, tipo fosfobetaína, ácido aminocarboxílico, tipo derivados de imidazolina, tipo amida amina y similares. Los tintes orgánicos e inorgánicos preferidos pueden comprender ácido silícico, ácido silícico anhidro, ácido silícico de magnesio, talco, ceracito, mica, caolín, bengala, arcilla, bentonita, mica de película titán, oxicloro de bismuto, óxido de circonio, óxido de magnesio, óxido de zinc, óxido de titán, óxido de aluminio, sulfato de calcio, sulfato de bario, sulfato de magnesio, carbonato de calcio, carbonato de magnesio, óxido ferroso, óxido de cromo, hidróxido de cromo, calamina, negro de carbono y combinaciones de los mismos como tintes inorgánicos; poliamida, poliéster, polipropileno, poliestireno, poliuretano, resina de vinilo, resina de urea, resina de fenol, resina de fluoruro, resina de silicona, resina de acrilo, resina de melamina, resina epoxi, resina de policarbonato, copolímero de divinilbencen-estireno, polvo de seda, celulosa, pigmento amarillo de Cl, pigmento naranja de Cl como tintes orgánicos; y su complejo etc. Los polvos orgánicos preferidos pueden comprender jabones metalálicos tal como estearato de calcio; sal metálica como de fosfonato de alquilo tal como ácido cetílico de zinc sódico, ácido laurílico de zinc, ácido laurílico de calcio; sal metálica polivalente del ácido acilamino tal como N-lauroil-ß-alanina de calcio, N-lauroil-ß-alanina de zinc, N-lauroil-glicina de calcio etc.; sal metálica polivalente del ácido sulfónico de amida tal como N-lauroil-taurina de calcio, N-palmitoil-taurina de calcio; aminoácido básico de N-acilo tal como Ne-lauroil-L-lisina, Ne-palmitoil-lisina, Na-palmitoil ornitina, Na-lauroil arginina, acilarginina del ácido graso de lanolina endurecida y similares; N-acilpolipéptido tal como N-Iau roilgl icil glicina; ácido graso de a-amino tal como ácido caprílico de a-amino, ácido láurico de a-amino y similares; polietileno, polipropileno, nylon, polimetilmetacrilato, poliestireno, copolímero de divinilbencen-estireno, tetrafluoruro de etileno etcétera. Los agentes absorbentes ultravioleta preferidos pueden comprender ácido paraaminobenzóico, benzoato de paraamionoetilo, benzoato de paraamino amilo, benzoato de paraamino octilo, salicilato de etilenglicol, salicilato de fenilo, salicilato de octilo, salicilato de bencilo, salicilato de butilfenilo, salicilato de homometilo, ácido cinámico de bencilo, ácido cinámico de parametoxi 2-etoxi etilo, ácido cinámico de parametoxi octilo, ácido cinámico de diparametoxi mono-2-etilhexano glicerilo, ácido cinámico de parametoxi isopropilo, mezcla de diisopropil-diisopropi l-diisopropil cinamato éster, ácido urocánico, ácido urocánico de etilo, metoxi hidroxi benzofenona, ácido sulfónico de hidroximetoxi benzofenona y sal de los mismos, dihidroxi metoxi benzofenona, dihidroxi metoxi benzofenona disulfonato Na, dihidroxi benzofenona, tetrahidroxibenzofenona, 4-terc-butil-4'-metoxidibenzoil metano, 2,4,6-trianilino-p-(carbo-2'-etilhexil-1'-oxi)-1 ,3, 5-tri aci na, 2-(2-hidroxi-5-metilfenil)-benzotriazol y similares. Los conservadores preferidos pueden comprender hinocitiol, ácido triclórico, triclorohidroxidifeniléter, glucuronato de clorohexidina, fenoxietanol, resorcina, isopropilmetilfenol, azuleno, ácido salicílico, pilitiona de zinc, HCl de benzalconio, fotosensibilizador 301, Na de mononitroguaiacol, ácido undecilénico etc. Los antioxidantes preferidos pueden comprender butilhidroxianisol, galato de propilo, elisorbato y similares. Los reguladores de pH preferidos pueden comprender ácido cítrico, citrato de sodio, ácido málico, malato de sodio, ácido fumárico, ácido fumárico sódico, ácido succínico, ácido succínico sódico, hidróxido del sodio, fosfato de hidrógeno sódico y similares.

Los alcoholes preferidos pueden comprender alcohol cetílico, etc.

Además, otros ingredientes pueden agregarse a cualquiera de las composiciones descritas anteriormente. En una modalidad, la cantidad de los otros ingredientes va de 0.01 a 5%, preferiblemente, 0.01 a 3% en la composición total. Los ¡ngredientes descritos antes tal como vitamina soluble en agua, vitamina soluble en lípido, polímero de péptido, polímero de polisacárido, esfingolípido, extracto de algas marinas y otros ingredientes, pueden obtenerse por métodos convencionales descritos en la literatura (por ejemplo, ver Matsumoto Mithio, Manual for the development of transdermal applied preparations. Seisi Press, 1a Ed., 1985). Las preparaciones de fruto del kiwi enriquecido de la presente invención pueden utilizarse con seguridad. Estas no son tóxicas para animales y no exhiben sustancialmente ningún efecto nocivo. De acuerdo con la presente invención, cualquiera de las composiciones identificadas antes pueden formularse con las preparaciones de fruto del kiwi enriquecido de la presente invención (incluyendo cualquier parte de la fruta, la fruta entera, tallo, hoja, corteza o raíz, e incluyendo cualquier preparación o extraer de los mismos, incluyendo preparaciones secas, preparaciones procesadas pero no extraídas, fruta fresca, jugo de fruta, o cualquier extracto o fracción de los mismos), usando cualquier dosis o cantidad adecuada de la preparación de fruto del kiwi resistente que es suficiente para alcanzar la actividad biológica deseada para la preparación de fruto del kiwi resistente como se describe antes, cuando se administra una o más veces durante un período de tiempo adecuado. Las cantidades o dosis adecuadas pueden variar dependiendo del objetivo de la administración o la condición o la enfermedad a tratarse, y también del peso del sujeto, severidad, forma del fármaco, ruta y período de administración, y pueden elegirse por los expertos en la técnica. Una cantidad o dosis adecuada de la preparación de fruto del kiwi resistente de la presente invención puede incluir, en una modalidad, una cantidad de aproximadamente OJ g a aproximadamente 10 g por kilogramo de peso corporal del paciente, y preferiblemente, de aproximadamente 1 a 3 g por kilogramo por peso/día de la fruta de kiwi resistente inventiva o extracto de la presente invención. La dosis puede administrarse una vez por día, varias veces por día, o en incrementos mayores (por ejemplo, todos los días, semanalmente, mensualmente, etc.), como se desee. En los términos de las composiciones descritas en la presente, la cantidad de la preparación de fruto del kiwi resistente de la presente invención debe estar presente entre aproximadamente 0.01% a 100% por peeo, y preferiblemente entre aproximadamente 0.01% y aproximadamente 95% por peso, y preferiblemente 0.5 a 80% por peso basado en el peso total de la composición, incluyendo cualquier cantidad entre 0.01% y 100%, en incrementos de 0.01%. En una modalidad, una composición farmacéutica de la presente invención puede contener aproximadamente 0.01-50% en peso de la preparación de fruto del kiwi resistente de la presente invención basada en el peso total de la composición. En una modalidad, un extracto u otra preparación de la preparación de fruto del kiwi resistente de la presente invención se puede proporcionarse en cualquier composición de aproximadamente 20% a 90% del líquido, polvo o granulo altamente concentrado, incluyendo cualquier incremento entre 20% y 90%, en incrementos de O.01%. La relación de los componentes adicionales en la composición puede extenderse generalmente de aproximadamente 0 a 20% p/p por 100% p/p de la composición, incluyendo cualquier incremento entre 0 y 100% p/p, en incrementos de 1%. En una modalidad, una composición cosmética comprende la preparación de fruto del kiwi resistente de la presente invención en una cantidad de aproximadamente 0.01 a 30%, y más preferiblemente 0.01 a 5% por peso basado en el peso total de la composición, incluyendo cualquier incremento entre 0.01% y 30%, en incrementos de 0.01%. En otra modalidad, cuando una composición que comprende la preparación de fruto del kiwi resistente de la presente invención que se agrega al alimento, un aditivo alimenticio o una bebida, puede proporcionarse en una cantidad que va de aproximadamente 0.1 a 95% p/p, preferiblemente 1 a 80% p/p del peso total del alimento, aditivo o bebida, incluyendo cualquier incremento entre OJ y 95% p/p, en incrementos de 0.1% p/p, o aproximadamente 1 a 30 g por 100 ml y preferiblemente 3 a 10 g por 100 ml, incluyendo cualquier incremento entre 1 g por 100 ml y 30 g por 100 ml, en incrementos de 1 g, de una composición de bebida saludable. En una modalidad, un alimento natural de la presente invención comprende la preparación de fruto del kiwi resistente de la presente invención como 0.01 a 80%, preferiblemente 1 a 50% por peso basado en el peso total de la composición, incluyendo cualquier incremento entre 0.01% y 80%, en incrementos de 0.1%. En una modalidad, una bebida de alimento natural comprende la preparación de fruto del kiwi resistente de la presente invención en una cantidad de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 20% por peso del peso total de la composición, incluyendo cualquier incremento entre 0.01% y 20%, en incrementos de 0.01%. Los componentes adicionales pueden incluir: aminoácidos 0.001 a 5% por peso, vitaminas 0.001 a 2% por peso, azúcares 0.001 a 20% por peso, ácidos orgánicos 0.001 a 10% por peso, dulcificante y saborizantes en una cantidad adecuada. Proporcionando que la composición de la bebida saludable de la presente invención contiene la preparación de fruto del kiwi resistente descrita antes de la presente invención como componente esencial, no existe limitación particular en los otros componentes líquidos, en donde el otro componente puede ser varios dulcificantes y/o mejoradores del sabor, tal como pueden agregarse a una bebida convencional. Los ejemplos de tales dulcificantes o mejoradores del sabor incluyen, pero no se limitan a, dulcificantes convencionales o bajos en calorías, incluyendo monosacáridos tal como glucosa, fructosa etc; disacáridos tal como maltosa, sucrosa etc; azúcares convencionales tal como dextrina, ciclodextrinas; y alcoholes de azúcar tal como el xilitol, y eritritol etc. Los dulcificantes adicionales incluyen dulcificantes naturales tal como taumatina, extracto de stevia, levaudiosida A, glicirricina y derivados de los mismos, y dulcificantes bajos en calorías tal como sacarina, sucralosa, aspartame y sus derivados. La cantidad de dulcificantes o mejoradores de sabor descritos antes generalmente va de aproximadamente 1 a 20 g, y preferiblemente 5 a 12 g en la proporción de 100 ml de la composición de la bebida, incluyendo cualquier incremento entre 1 g y 20 g por 100 ml, en incrementos de 1 g. Un aditivo alimenticio puede agregarse a un alimento mediante deposición, aerosol o mezclado. La cantidad del aditivo con respecto a la composición total puede generalmente ir de aproximadamente 0.01 a 20% p/p por 100% p/p de la presente composición, incluyendo cualquier incremento entre 20% p/p y 100% p/p, en incrementos de 1% p/p. Los aditivos alimenticios también pueden mezclarse con un alimento, tal como un alimento para animal, en una cantidad de aproximadamente 5 a 100 g por 1 kilogramo por peso basado en el peso seco total del alimento, incluyendo cualquier incremento entre 5 g y 100 g por 1 kg por peso, en los incrementos de 1 g. Por consiguiente, es un objeto de la presente invención proporcionar un método para selectivamente regular las inmunorespuestas de Th1 y Th2 en un paciente administrando o proporcionando una composición, incluyendo una composición farmacéutica, composición n utracéutica, aditivo alimenticio, alimento natural (incluyendo una bebida o material alimenticio), o una composición cosmética, que comprende, consistiendo esencialmente de, o consistiendo de, cualquiera de las preparaciones de fruto del kiwi resistente descrito en la presente (incluyendo cualquier parte de la fruta, la fruta entera, tallo, hoja, corteza o raíz, e incluyendo cualquier preparación o extracto o concentrarse de los mismos, incluyendo preparaciones secas, preparaciones procesadas pero no extraídas, fruta seca, jugo de fruta, o cualquier extracto o concentrado o fracción de los mismos), y en una modalidad, extracto crudo, extracto soluble en agua total, o extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi resistente, como un ingrediente activo. Las composiciones de la invención se describen detalladamente antes. En particular, la administración o disposición de los resultados de la composición en por lo menos una de las siguientes actividades biológicas: (a) reduce el número de células B que producen IgE en un paciente; (b) reduce la cantidad de IgE producido en un paciente (por ejemplo, en el suero o plasma); (c) disminuye la producción y/o niveles de por lo menos una citocina Th2 (por ejemplo, IL-4, IL-5, IL-10); (d) aumenta el nivel de por lo menos una citocina Th1 (por ejemplo, IL-12, IFN-?); (e) disminuye el nivel de la expresión del factor de transcripción, GATA-3; (f) aumenta el nivel de la expresión del factor de transcripción T-bet; (g) aumenta el nivel de expresión del factor transcripción NFATc2; (h) aumenta el número de células B que producen lgG2a en un paciente; (i) aumenta la cantidad de lgG2a producido en un paciente; (j) la producción o actividad mejorada de linfocitos T Th1 (por ejemplo, CD4 + , IFN-? + ), particularmente en un sitio de la inflamación; (k) producción o actividad disminuida de los linfocitos T Th2 (por ejemplo, CD4 + , IL-4 + ), particularmente en un sitio de la inflamación; (1) reduce el número células B que producen IgGI en un paciente; (m) reduce la cantidad de IgGI producida en un paciente; y/o (n) reduce el nivel de o producción de por lo menos un leucotrieno en el paciente. Un método preferido de la presente invención incluye un método para reducir la producción de leucotrieno en un paciente, por consiguiente tratando o mejorando por lo menos un síntoma de una condición o enfermedad asociada con leucotrienos en un paciente. El método comprende administrar al mamífero una cantidad efectiva de cualquiera de las preparaciones de fruto del kiwi resistente descrita en la presente (incluyendo cualquier parte de la fruta, fruta entera, tallo, hoja, corteza o raíz, e incluyendo cualquiera preparación o extracto o concentrado de los mismos, incluyendo preparaciones secas, preparaciones procesadas pero no extraídas, fruta fresca, jugo de fruta, o cualquiera extracto o concentrado o fracción de los mismos), y en una modalidad, un extracto crudo, un extracto soluble del agua total, o un extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi resistente, junto con un portador farmacéutico aceptable del mismo. Preferiblemente, la administración de la composición de la invención da lugar a la reducción de la producción o niveles de leucotrieno en el paciente. Las enfermedades y condiciones asociadas con leucotrienos incluyen, pero no se limitan a, asma, alergia a alimentos, rinitis alérgica, urticaria crónica, y dermatitis alérgica. En esta modalidad, las rutas de administración preferidas incluyen administración oral, inhalada y tópica, además de las rutas sistémicas de administración. El método descrito antes puede utilizarse para la prevención y/o tratamiento de cualquier enfermedad o condición en la cual la regulación de la inmunorespuesta de la manera descrita en la presente estará, o podrá predecirse por ser, beneficioso a un paciente. Es por lo tanto un objeto de la presente invención proporcionar un método para tratar y/o prevenir una enfermedad alérgica y enfermedad inflamatoria no-alérgica en un mamífero, que comprende administrar al mamífero una cantidad efectiva de cualquiera de las preparaciones de fruto del kiwi resistente descritas en la presente (incluyendo cualquier parte de la fruta, la fruta entera, tallo, hoja, corteza o raíz, e incluyendo cualquier preparación o extracto o concentrado de los mismos, incluyendo preparaciones secas, preparaciones procesadas pero no extraídas, fruta fresca, jugo de fruta, o cualquiera extracto o concentrado o fracción de los mismos), y en una modalidad, un extracto crudo, extracto soluble en agua total o extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi resistente, junto con un portador farmacéuticamente aceptable del mismo. De acuerdo a la presente invención, las enfermedades alérgicas pueden incluirse, pero no se limitan a, asma, aspergilosis broncopulmonar alérgica, bronquiectasia de la bronquitis alérgica, pneumonitis por hipersensibilidad, sinusitis alérgica, anafilaxis, rinitis alérgica, conjuntivitis alérgica, dermatitis alérgica, dermatitis atópica, dermatitis contagiosa, urticaria crónica, alergias a insecto, alergias a alimentos y alergias a fármacos. En una modalidad, la enfermedad alérgica es dermatitis atópica. En un aspecto de esta modalidad, además de la administración de la composición que comprende, consistiendo esencialmente de o consistiendo de una preparación de fruto del kiwi resistente de la invención, el paciente se tratan concomitantemente con una terapia convencional para la dermatitis atópica, incluyendo pero sin limitarse a, una medicación esteroide tópica. En esta modalidad de la invención, la preparación de fruto del kiwi resistente es administrada más preferiblemente por administración oral o tópica, aunque la invención no se limita a tales rutas de administración. En otra modalidad, la enfermedad alérgica es asma. En un aspecto de esta modalidad, además de la administración de la composición que comprende, consistiendo esencialmente de o consistiendo de una preparación de fruto del kiwi resistente de la invención, el paciente se trata concomitantemente con una terapia convencional para el asma, incluyendo pero sin limitarse a, una medicación esteroide inhalada u otro regulador de asma. En esta modalidad de la invención, la preparación de fruto del kiwi resistente es administrada más preferiblemente por administración oral o inhalada, aunque la invención no se limita a tales rutas de administración. De acuerdo a la presente invención, las enfermedades de la piel con inflamación no-alérgicas pueden incluir, pero sin limitarse a, varias molestias de la piel causadas por la inflamación tal como espinillas, acné y similares. Las composiciones cosméticas descritas antes que comprenden cualquiera de las preparaciones de fruto del kiwi resistente descritas en la presente (incluyendo cualquier parte de la fruta, la fruta entera, tallo, hoja, corteza o raíz, e ¡ncluyendo cualquier preparación o extracto o concentrado de los mismos, ¡ncluyendo preparaciones secas, preparaciones procesadas pero no extraídas, fruta fresca, jugo de fruta, o cualquier extracto o concentrado o fracción de los mismos), y en una modalidad, un extracto crudo, extracto soluble en agua total o extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi resistente, son útiles para prevenir, tratar y/o mejorar la inflamación de la piel en un paciente. Otras enfermedades inflamatorias no-alérgicas que pueden prevenirse o tratarse usando las composiciones y métodos descritos en la presente incluye, pero no se limitan a, varias condiciones de dermatitis, lupus eritematoso sistémico (SLE), inflamación retiniana, gastritis, retinopatía, hepatitis, enteritis, pancreatitis, nefritis y condiciones similares donde la reducción de una inmunorespuesta tipo Th2 y/o mejoramiento de una inmunorespuesta tipo Th1 será benéfica. Es otro objeto de la presente invención proporcionar un método para tratar y/o prevenir una infección viral en un mamífero, comprender administrar al mamífero una cantidad efectiva de cualquiera de las preparaciones de fruto del kiwi resistente descrita en la presente (incluyendo cualquier parte de la fruta, la fruta entera, tallo, hoja, corteza o raíz, e incluyendo cualquier preparación o extracto o concentrado de los mismos, incluyendo preparaciones secas, preparaciones procesadas pero no extraídas, fruta fresca, jugo de fruta, o cualquier extracto o concentrado o fracción de los mismos), y en una modalidad, un extracto crudo, un extracto soluble en agua total, o un extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi resistente, junto con un portador farmacéuticamente aceptable del mismo. Los virus preferidos de los cuales se proteger un mamífero para prevenir o tratar una infección viral incluyendo, pero sin limitarse a, virus de Coxsackie, citomegalovírus, virus de Epstein-Barr, flavivirus, virus de la hepatitis, virus del herpes, virus de la gripe, virus del sarampión, virus de las paperas, virus del papiloma, virus de la parainfluenza, parvovirus, virus de la rabia, virus sincitial respiratorio, retrovirus y virus de la varicela. Entre estos virus, los retrovirus, virus del herpes y virus de la hepatitis son preferidos, con leucemia, limfotrófico, sarcoma y lentivirus que son aún más preferidos, al igual que otros virus de inmunodeficiencia o tumor. Los virus limfotróficos particularmente preferidos de los cuales se protege un mamífero previniendo o tratando una infección viral que incluye virus linfotrópicos T, tal como virus linfotrópicos de célula T humana (HTLVs, tal como HTLV-I y HTLV-II), virus de la leucemia bovina (BLVs) y virus de la leucemia felina (FLVs). Los lentivirus particularmente preferidos incluyen virus de inmunodeficiencia humana (VIH), simio (SIV), felino (FIV) y canino (CIV), con HIV-I y HIV-2 que son aún más preferidos. Es otro objeto de la presente invención proporcionar un método para tratar y/o prevenir un cáncer en un mamífero, que comprende administrar al mamífero una cantidad efectiva de cualquiera de las preparaciones de fruto del kiwi resistente descrita en la presente (incluyendo cualquier parte de la fruta, la fruta entera, tallo, hoja, corteza o raíz, e incluyendo cualquier preparación o extracto de los mismos, incluyendo preparaciones secas, preparaciones procesadas pero no extraídas, fruta fresca, jugo de fruta, o cualquier extracto o fracción de los mismos), y en una modalidad, un extracto crudo, un extracto soluble en agua total, o un extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi resistente, junto con un portador farmacéuticamente aceptable del mismo. Los cánceres pueden tratarse o prevenirse utilizando métodos y composiciones de la presente invención incluyendo, pero sin limitarse a, melanomas, carcinoma de células escamosas, cánceres de mama, carcinomas de cabeza y cuello, carcinomas de la tiroides, sarcomas tejido suave, sarcomas del hueso, cánceres testiculares, cánceres prostáticos, cánceres ováricos, cánceres de la vejiga, cánceres de la piel, cánceres del cerebro, angiosarcomas, hemangiosarcomas, tumores de mastocitos, cánceres hepáticos primarios, cánceres de pulmón, cánceres pancreáticos, cánceres gastrointestinales, carcinomas de células renales, neoplasias hematopoyéticas y cánceres metastáticos de los mismos. En cualquiera de los métodos anteriores para tratar o prevenir una enfermedad o condición, la preparación de fruto del kiwi resistente puede administrarse conjuntamente con otra terapia o composición que sea útil para tratar la condición particular. En estas modalidades, el fruto del kiwi resistente puede considerarse por ser un adjunto para una terapia convencional, para mejorar el avance, recuperación o progreso de los síntomas en el paciente. Los tipos preferidos particularmente de agentes o terapias convencionales que pueden utilizarse junto con una preparación de fruto del kiwi resistente de la invención incluyen, pero de no se limitan a, esteroides (incluyendo corticoesteroides, e incluyendo orales, inhalados e inyectados), antihistamínicos (cualquier tipo, incluyendo sistémicos, tópicos, inhalados), anticuerpos (por ejemplo, anti-lgE, anti-IL-10), antibióticos, ciclosporinas, antimicóticos, reguladores de la función respiratoria, analgésicos, agonistas ß (ación larga o corta), modificadores de leucotrieno (inhibidores o antagonistas del receptor), antagonistas de citocina o receptor de citocina, inhibidores de fosfodiesterasa, cromoglicato de sodio, nedocrimilo, cafeína, teofilina, carbobenzoxi beta-alanil taurina, inhibidores de la función de célula T y otros agentes antiinflamatorios. En el método de la presente invención, las composiciones pueden administrarse o proporcionarse a cualquier miembro de la clase Vertebrada, Mamífera, incluyendo, sin limitación, primates, roedores, ganado, caballos y animales domésticos. Los pacientes preferidos a protegerse son animales domésticos (por ejemplo, perros, gatos) y humanos, con humanos son particularmente preferidos. Todos los modos de administración se contemplan. De acuerdo a la presente invención, los términos "paciente", "sujeto" e "individuo" pueden utilizarse alternativamente. Las rutas de la administración incluyen rutas in vivo, in vitro y ex vivo. Ex vivo se refiere a la parte realizada de la etapa reguladora fuera del paciente. Las rutas in vivo incluyen, pero no se limitan a, administración intravenosa, administración intraperitoneal, administración intramuscular, administración intranodal, administración intracoronaria, administración intraarterial (por ejemplo, en una arteria carótida), administración subcutánea, liberación transdérmica, administración intratraqueal, administración intraarticular, administración intraventricular, inhalación (por ejemplo, aerosol), administración intracraneal, intraespinal, intraocular, auditiva, intranasal, oral, pulmonar, impregnación de un catéter, inyección intracutánea, intratecal, epidural, intracerebroventricular, e inyección directa en un tejido. En una modalidad de la presente invención, una composición es administrada por una ruta parenteral (por ejemplo, rutas subcutánea, intradérmica, intravenosa, intramuscular e intraperitoneal). Las administraciones intravenosa, intraperitoneal, intradérmica, subcutánea e intramuscular pueden realizarse usando métodos estándares en la técnica. La liberación auditiva puede incluir gotas para el oído, liberación intranasal puede incluir gotas para la nariz o inyección intranasal, y la liberación intraocular puede incluir gotas para el ojo. La liberación en aerosol (inhalación) puede también realizarse usando métodos estándares en la técnica (ver, por ejemplo, Stribling y colaboradores, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 189:11277-11281, 1992, que es incorpora en la presente por referencia en su totalidad). Por ejemplo, en una modalidad, una composición o vacuna de la invención puede formularse en una composición adecuada para administración nebulizada usando un dispositivo de inhalación o nebulizador adecuado. El suministro oral puede realizarse por la complejación de una composición de la presente ¡nvención a un portador capaz de soportar la degradación por enzimas digestivas en el intestino de un animal, por ejemplo, como las tabletas o cápsulas, así como formularse en productos alimenticios y bebidas. Los ejemplos de tales portadores, incluyen cápsulas o tabletas plásticas, tal como las conocidas en la técnica. Las técnicas de inyección directas son particularmente útiles para la administración en sitio-específico de un compuesto. El suministro oral o suministro tópico son rutas particularmente preferidas de suministro o administración de acuerdo a la presente invención. Las rutas de administración que modulan la inmunidad de la mucosa son útiles en el tratamiento de infecciones virales y algunas condiciones alérgicas. Tales rutas incluyen la bronquial, intradérmica, intramuscular, intranasal, otras rutas inhalada, rectal, subcutánea, tópica, transdérmica, vaginal y uretral. La presente invención es más explicada específicamente por los siguientes ejemplos. Sin embargo, debe entenderse que la presente invención no se limita a estos ejemplos de ninguna manera.

EJEMPLOS Eiemplo 1 El siguiente ejemplo demuestra que por lo menos dos extractos específicos preparados de A. arguta, designado PG102T y PG102E, contiene actividad inhibidora en la producción de IgE así como la capacidad de regular las citocinas Th1 y Th2 selectivas. Materiales y Métodos. Ratones. Ratones hembra BALB/c (6 semanas de edad) se obtuvieron de Daehan Biolink, Co. Ltd. (Corea), mantenidos en un cuarto con aire acondicionado y un cuarto libre de patógenos y aclimatado por al menos 1 semana. Todos los procedimientos experimentales mencionados más adelante se realizaron de acuerdo con el cuidado animal institucional y utilizan las instrucciones del Animal Experimental Center de la Seoul National University. Preparación de varios extractos de A. arguta. Los frutos de kiwís resistentes usados en este estudio se adquirieron de una granja que se especializa en el cultivo de esta fruta (Hurstberry Co. Ltd., Oregon, USA) y su identidad fue amablemente confirmada por el Dr. Ella I. Kolbasina (The Moscow Branch of Vavilov Plant Cultívation Research Institute, Rusia). La fruta seca (10 g) se extrajo tres veces calentando en agua destilada (DW). Después se concentró, liofilizó y disolvió en DW para producir PG102T a 100 mg/ml. PG102T disuelto en DW se extrajo sucesivamente con cloroformo, acetato de etilo y n-butanol dando por resultado PG102C, PG102E y PG102B, respectivamente. La capa acuosa restante se llamó PG102W. Cada fracción soluble en solvente y el residuo acuoso final se filtró, concentró, liofilizó y disolvió en concentraciones de 100 mg/ml. Todas las preparaciones se almacenaron a -80CC hasta el momento de necesitarse. Bioensayo en células U266B1. Los efectos inhibidores de IgE en células B de linfoblastoma humanas estimuladas por LPS, U266B1 (ATCC, Manassas, VA), se midieron como se describe por Kim y colaboradores con una alteración ligera (Kim y colaboradores, Phytother Res 2001; 15:572-6). El nivel de IgE humano en sobrenadantes un cultivo se detectaron por ELISA de IgE humano (IgE humano total; AlerChek, Portland, Maine) y la viabilidad celular se determinó por un kit de detección de LDH (Takara Bio, Japón). Efecto in vitro de PG102 en la producción de citocina a través de de la respuesta a llamada en esplenocitos estimulados con OVA. Ratones (7 semanas de edad) se inmunizaron individualmente y más tarde se estimularon mediante inyecciones intraperitoneales (i.p.) de 20 µg de ovalbúmina (OVA; grado V; Sigma, St. Louis, Mo) emulsionadas en 2.25 mg de hidróxido de aluminio (ImjectAlum; Perfore, Rockford, IL) en el día 0 y día 14, respectivamente. Ratones no-sensibilizados (na?ve) no recibieron ningún reactivo. El día 24, los ratones sensibilizados con OVA y na?ve se sacrificaron (n = 5/grupo), y cada bazo entonces se aisló para estudiar la producción de citocinas en esplenocitos usando la respuesta de memoria como se describe por Shibata y colaboradores (Yoshimi y colaboradores, J Immunol 2000;164;1314-21 ). Brevemente, los esplenocitos aislados se sembraron en una placa de cultivo de 24 pozos, y la concentración final se ajustó a 5x106 células/ml/pozo. Los esplenocitos se incubaron con OVA en 100 µg/ml en presencia de PG102T (1 mg/ml), PG102C, PG102E, PG102B, PG102W (todos en OJ mg/ml) o medio como un control durante 3 días. Después de la incubación, los sobrenadantes del cultivo se recolectaron para detectar el nivel de citocinas ( I L-4, IL-5, IL-12 e IFN-?) usando kits de ELISA (Endogen, Cambridge, MA). El procedimiento virtualmente idéntico se utilizó para determinar la actividad específica de PG102T y PG102E. Medida de citocinas e inmunoglobulinas en ratones sensibilizados con OVA. Los ratones se inmunizaron y estimularon como se describe antes. Para determinar los efectos in vivo de las preparaciones de PG102 en respuestas alérgicas inducidas con OVA, los ratones sensibilizados con OVA (n = 1 O/grupo) se trataron oralmente con PG102T (15 mg/kg/día) o PG102E (1.5 mg/kg/día) con dexametasona (DEX, 0.5 mg/kg/día) o DW (100 µl/ratón/día) como un control, una vez al día a partir del día 14 al día 24. Los ratones na?ve se trataron oralmente con DW. El día 21, la sangre se obtuvo de ratones individuales por sangrado del ojo y las muestras de plasma aisladas se guardaron a -80°C hasta el momento de uso. El nivel de IgE total se midió mediante un kit de detección de IgE de ratón (Shibayagi, Gunma, Japón). Los niveles de los subtipos de IgG totales e isotipos de Ig específicos de OVA se determinaron por el método de ELISA del emparedado (Hirano y colaboradores, J Immunol Methods 1989; 119:145-50). Para la medida de la producción de citocina, los esplenocitos se prepararon de animales el día 24, se volvieron a suspender en medio de cultivo (RPMI-1640 que contiene 10% de FBS), se sembraron en una placa de 24 pozos (5x106 células/ml/pozo) se incubaron con OVA solamente en 100 µg/ml durante 3 días. Los esplenocitos aislado de ratones na?ve se cultivaron en ausencia de OVA. Los niveles de I L-4 , IL-5, IL-10, IL-12, IL-13 e IFN-? en sobrenadantes se detectaron por ELISA (Endogen and R&D Systems, Minneapolis, MN). Análisis de Inmunomanchado. Los Esplenocitos se expusieron a GolgiStop (PharMingen, San Diego, CA) como un inhibidor del transporte de proteína intracelular durante 4 h y se prepararon para la detección de células que producen I L-4 o IFN-Y. Las células se fijaron, permeabilizaron, e incubaron con PE o anticuerpos conjugados con FITC específicos para ratones CD4, I L-4 o IFN-? como se describe por Kyoko y colaboradores (Kyoko y colaboradores, J Derm Science 2002;29:19-25). Para el análisis de productos de IgE, las células se incubaron con anti-ratón CD19 conjugado con PE, seguido por anti-ratón IgE conjugado con FITC (todo de PharMingen). Las células entonces se examinaron analizando los linfocitos bloqueados en esplenocitos usando un analizador FACSort y software Cell Quest (Becton Dickinson, San José, CA). Para el análisis microscópico confocal, los esplenocitos se cultivaron con OVA en tiras cubiertas durante 2 días, se fijaron, permeabilizaron y mancharon usando anti-ratón IgE conjugado con FITC y anti-ratón CD 19 conjugado con PE, y finalmente observado por el sistema MRC-1024 Láser Scanning Confocal Image (Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, CA) como se describe por Semper y colaboradores (Semper y colaboradores, J Allergy Clin Immunol 2003;112:141-9). Western blot. Los esplenocitos del grupo individual de ratones se cultivaron con OVA durante 2 días, se recolectaron (107 células/grupo), y después se lisaron para la preparación de muestras de proteína. El Inmunomanchado se realizó usando anticuerpos específicos para ratón GATA-3, T-bet, NFATc2 (Santa Cruz BioteClinology, Santa Cruz, CA) o ß-actina (Sigma) como control de carga. Preparación de ARN y PCR en tiempo real cuantitativo. El ARN total se aisló de esplenocitos cultivados con OVA durante 2 días usando el reactivo TRIzol (GIBCOBRL, Carlsbad, CA). El ARN total aislado se utilizó en la transcripción inversa (RT)-PCR por el AMV RT System (Roche, Mannheim, Alemania), seguido por el PCR en tiempo real cuantitativo usando el ABl PRISM 7700 Sequence Detection System (Applied Biosystems, Foster City, CA). Los conjuntos de cebadores delantero e inverso para genes de ratón se diseñaron usando el Primer Express Software (Applied Biosystems) y las secuencias de nucleótidos son como sigue: GATA3 delantero 5'-CCTCGGCCATTCGTACATG-S' (SEC ID NO:1) inverso 5'-CGTAGTAGGACGGGACGTGG-S ' (SEC ID NO:2) T-bet delantero d'-TGTGGATGTGGTCTTGGTGG-S' (SEC ID NO:3) inverso 5'-ATAAGCGGTTCCCTGGCAT-S' (SEC ID NO:4) NFATc2 delantero 5'-GCACATAAGGCCATCAGCTCA-S' (SEC ID NO:5) inverso 5'-TCGCCAGAGAGACTGGCAA-S' (SEC ID NO:6) GAPDH delantero 5'-TGCAGTGGCAAAGTGGAGATT-S' (SEC ID « NO:7) inverso 5'-TTGAATTTGCCGTGAGTGGA-S' (SEC ID NO:8). Las diferencias en los niveles de mARN de genes celulares entre cada grupo de ratones se calcularon de la conversión del valor ?Ct. Estadística. Los datos se expresaron como promedio ± SEM, y las diferencias entre los valores promedio se analizaron mediante la prueba t de Student no pareada. Los valores P menores de 0.05 o 0.01, que se calcularon como valores P de una cola, se consideraron por ser estadísticamente significativos. Resultados Efectos de varias preparaciones de A. arguta en la línea celular U266B1 B humana estimulada con LPS y esplenocitos de ratón estimulados con OVA. Los inventores inicialmente prepararon un extracto soluble en agua total (PG102T) de A. arguta, y lo extrajeron sucesivamente con cloroformo (PG102C), acetato de etilo (PG102E), n-butanol (PG102B) y agua (PG102W), para obtener cuatro fracciones de diferente polaridad. Los efectos de PG102T y estas cuatro fracciones en la producción de IgE se probaron usando células U266B1 de linfoblastoma B humanas (Fig. 1). Cuatro preparaciones, excepto para PG102W, se encontraron para inhibir la producción de IgE de células U266B1 estimuladas con LPS. El PG102E exhibió la actividad inhibidora más alta, mostrando un 50% del efecto inhibitorio a 25 µg/ml (Cl50). El PG102T es también activo, su valor de Cl50 es 126 µg/ml. En todas las concentraciones probadas en este análisis, ni PG102T ni PG102E mostró cualquier efecto citotóxico en las células U266B1. Además, los inventores estudiaron los efectos de varias preparaciones de A. arguta en la producción de citocinas involucradas en las trayectorias de Th1 y Th2 usando el modelo respuesta a llamada. Los ratones se inmunizaron con OVA el día 0 y estimulados el día 14. Diez días más adelante, los ratones se sacrificaron y los bazos se tomaron para aislar los esplenocitos.

Los esplenocitos derivado de ratones sensibilizados con OVA se estimularon con OVA y cultivaron durante 3 días en presencia de cinco preparaciones de PG102. Como se muestra en la Tabla I, cuando las células se hicieron crecer en presencia de OVA, los niveles de IFN-?, I L-4 y I L-5 se incrementaron a cientos de picogramos o nanogramos. En el caso de IL-12, el nivel antecedente fue mayor, pero la estimulación con OVA disminuyó el nivel por aproximadamente 3 veces a 415 ± 48 pg/ml. El tratamiento con PG102T resultó en un aumento de casi 150% en el nivel de IL-12. IFN-? se comportó diferentemente. Los esplenocitos de animales na?ve produjeron niveles ¡ndetectables de IFN-?, pero los esplenocitos estimulados con OVA secretaron casi 2.5 ng/ml. El tratamiento con PG102T disminuyó el nivel de IFN-? por 40%. Cuando los esplenocitos de estimulados con OVA se hicieron crecer en presencia de PG102T, los niveles de I L-4 e I L-5 se disminuyeron por 62% y 39%, respectivamente.

Tabla I. Efectos in vitro de PG102 en la producción de citocina por esplenocitos Tratamiento IL-12 IFN-? IL-4 IL-5 Na?ve 1277±275(308) ÑD 8 ±1(2) 15 ± 3(2) Intermedio 415 ±48 (100) 2525 ± 1474 (100) 324 ±15 (100) 847 ±137 (100) Sensibilizado con Ova Tratamiento IL-12 IFN-? IL-4 IL-5 PG102T 622 ±56 (150)* 1478 ± 1214(59) 124 ±34 (38)** 523 ±30 (61) PG102C 342 ±12 (82) ND 90 ± 57 (28)* 84 ±26 (10)* PG102E 927 ±218 (223)* 703 ± 406 (28) 70 ± 5 (22)** 345 ±166 (41)* PG102B 575 ± 136 (139) 666 ± 366 (26) 290 ± 44 (90) 623 ± 20 (74) PG102W 501 ±128 (121) 897 ± 592 (36) 280 ± 73 (87) 676 ± 61 (80) Todos los esplenocitos de ratones sensibilizados con OVA se estimularon otra vez con OVA durante el cultivo. Los valores se expresan como el promedio ± SEM para cinco animales *, P<0.05 y **, P<0.01, contra esplenocitos estimulados con OVA tratados con medio solamente (prueba T de Student). ND = no detectable. PG102E, que mostró el efecto inhibitorio más alto sobre la producción de IgE en el experimento anterior, también redujo los niveles de I L-4 e I L-5 por 78% y 59%, mientras indujo el nivel de I L-12 por 220%. En contraste, PG102C redujo el nivel de todas las citocinas medidas en este estudio debido a su efecto citotóxico sobre los esplenocitos. PG102B y PG102W aumentaron el nivel de IL-12 y disminuyeron el de IFN-?, I L-4 e IL-5, pero no de una manera estadísticamente significativa. Tomados juntos, estos resultados indicaron que PG102T y PG102E pueden contener el compuesto(s) que inhibe la producción de IgE y controlan la expresión de las citocinas Th1 y Th2 selectivas. Basado en los datos anteriores, los inventores eligieron utilizar dos preparaciones, PG102T y PG102E, para otros estudios in vivo.

Determinación de la actividad específica de PG102T y PG102E. Basado en sus actividades pleiotrópicas en el sistema inmune, PG102T y PG102E puesto que se derivan de una fuente de plantas deseada por contener más de un compuesto activo. Por lo tanto, para cuantitativamente realizar la experimentación adicional, los inventores desarrollaron un bioensayo confiable basado en la actividad inhibidora de PG102 en la producción de IL-4 en esplenocitos estimulados con OVA como se describe antes. Cuando las células se estimularon con OVA, el nivel de IL-4 se indujo de un nivel indetectable a algunos cientos picogramos. Con la presencia de PG102T y PG102E, la producción de I L-4 fue inhibida de una manera dependiente de dosis (Fig. 2). En todas las concentraciones probadas en este ensayo, ni PG102T ni PG102E demostró cualquier efecto citotóxico. La concentración de PG102T con 50% de actividad inhibidora (Cl50) fue 806.9 µg/ml y el de PG102E fue 91.8 µg/ml. El valor de Cl50 de cada preparación se definió como una unidad de actividad, y se obtuvieron las unidades totales. Cuando la actividad específica de PG102T y PG102E se calculó usando las unidades y rendimientos totales, PG102T y PG102E contuvieron la actividad específica de 1.2 unidades/mg y 10.9 unidades/mg, respectivamente. Este método se utilizó para el control de calidad de muestras experimentales de A. arguta. Efectos de PG102T y PG102E en la producción de citocinas Th1 y Th2 en el modelo murino sensibilizando con OVA. Para confirmar los datos in vitro anteriores en el modelo animal, los efectos de PG102T y PG102E se probaron en la producción de varias citocinas involucradas en la modulación de las trayectorias Th1 y Th2 usando el modelo murino sensibilizado con OVA. Los ratones se inmunizaron con OVA el día 0 y se estimularon el día 14. Después de la estimulación, los animales se dosificaron oralmente con PG102T (15 mg/kg/día = 18 unidades/kg/día) o PG102E (1.5 mg/kg/día = 16.4 unidades/kg/día) y como un control, DEX (0.5 mg/kg/día) o DW durante una base diaria del día 14 al día 24. Los ratones Na?ve no tratados con OVA se alimentaron oralmente con DW. Las concentraciones de PG102T y PG102E utilizadas en estos experimentos son la dosificación mínima que tiene actividad máxima como para el experimento dosis-respuesta preliminar. El día 24, los ratones se sacrificaron, y los bazos se aislados para preparar los esplenocitos. Los esplenocitos de cada grupo de ratones se incubaron en presencia de OVA durante 3 días, y los sobrenadantes cultivados se recolectaron midiendo el nivel de citocinas (Tabla II). Comparado con los esplenocitos na?ve, el nivel de IL-12 se disminuyó en ratones tratados con DW. Sin embargo, las administraciones orales de PG102T y PG102E aumentaron su nivel por 1.7- y 2.6-veces, respectivamente. A diferencia de IL-12, el nivel de IFN-? se realzó por estimulación de OVA, y PG102T o PG102E aumentó además el nivel de IFN-?. Contrario a PG102T y PG102E, DEX suprimió el nivel IL-12 e IFN-?.

Tabla II. Efectos in vivo de PG102 en la producción de citocina Th1 y Th2 por esplenocitos Fuentes I L-12 IFN-? Na?ve 1353 ±201 ND ND ND 77 ± 54(2) 23 ±17 (394) (1.5) Intermedio 343 ± 33 1023 ±19 460 ± 42 1345 ±68 3254 ± 298 1564 ±132 Sensibilizado (100) (100) (100) (100) (100) (100) con Ova PG102T 584 ± 136 1970 ±142 258 ± 31 913 ±79 1812 ±296 1220 ±96 (170)* (193)** (56)* (68)* (56)** (78) PG102E 889 ± 68 1778 ±237 164 ±4 412 ±45 1591 ± 114 976 ± 304 (259)** (174)* (36)* (31)** (49)** (62) DEX 227 ± 44 (66) 224 ±118 28 ±21 160 ±159 392 ± 157 912 ±371 (22) (6)* (12)* (12)** (58) Todos los esplenocitos de ratones sensibilizados con OVA se estimularon de nuevo con OVA. Los valores se expresaron como el promedio ± SEM para diez animales. *, P<0.05 y **, P<0.01 contra ratones tratados con DW (prueba T de Student).

ND = no detectable. El nivel de todas las citocinas Th2 probadas en este estudio fue aumentado altamente en los esplenocitos estimulados con OVA. Sin embargo, el tratamiento con PG102T suprimió la superproducción mediada con OVA de I L-4, I L-5 e IL-10 por 44%, 32% y 44%, respectivamente. PG102E también inhibió el nivel de estas tres citocinas por 64%, 69% y 51%, respectivamente. DEX también bajó la concentración de las tres citocinas. I L-13 se disminuyó por PG102 o DEX, pero no de una manera estadísticamente significativa. Tomados juntos, estos resultados indicaron que PG102T y PG102E pueden controlar la producción de las citocinas Th1 y Th2 selectivas. A diferencia de DEX que suprime virtualmente todas las citocinas de una manera no-discriminante, PG102T y PG102E parecen tener actividades biológicas distintivas que pueden diferencialmente modular la producción de las citocinas Th1 y Th2.

Efectos de PG102T y PG102E en niveles de plasma de isotipos de inmunoglobulina. Los resultados anteriores indicaron que PG102T y PG102E pueden infra-regular la superproducción mediada con Th2 de IgE in vivo. Por lo tanto, se probó si el tratamiento oral con PG102T y PG102E en ratones sensibilizados con OVA puede controlar los niveles de plasma de IgE y otras inmunoglobulinas. El día 21 durante el mismo tipo de experimento como se describió antes, los ratones na?ve produjeron aproximadamente 140 ng/ml de IgE total, pero la sensibilización con OVA aumentó su nivel en aproximadamente 20-veces. Cuando los animales se trataron con PG102T y PG102E, el nivel de plasma de IgE total se disminuyó por aproximadamente 2-veces. La capacidad de PG102T o PG102E para infra-regular el nivel de IgE total en plasma fue comparable a la de DEX. Cuando el nivel de varios subtipos IgG se midió, la administración de PG102T y PG102E disminuyó el nivel de IgGI mediado con Th2, mientras el nivel de lgG2a mediado con Th1 se elevó altamente de una manera estadísticamente significativa. El nivel de lgG2b no se afectó significativamente en todas las situaciones (Tabla MÍA). Un resultado virtualmente idéntico se obtuvo cuando se determinaron los niveles de subtipos IgE e IgG de OVA-específica (Tabla IIIB). El tratamiento oral con PG102T o PG102E disminuyó el nivel de IgE e IgGI de OVA-específíca, mientras se incrementa el lgG2a de OVA-específica por más de 2-veces. Estos resultados, junto con datos en varias citocinas Th1 y Th2, indicaron que PG102T y PG102E contienen compuestos que pueden regular el balance de Th1 y Th2, eventualmente dando por resultado un aumento en el nivel lgG2a y una disminución en los niveles de IgE e IgGI.

Tabla lll. Efectos de PG102 en niveles de plasma del total e isotipos de inmunoglobulina de OVA-específica A. lg Total Fuentes IgE (ng/ml) IgGl (µg/ml) le )G2a (µg/ml) lgG2b (µg/ml) Na?ve 139 ±23 (5) 450 ± 81 (26) 46+1 (159) 229 ± 52 (85) DW Sensibilizado 2783 ±485 (100) 1700 ±21 (100) 29 ±3 (100) 270 ±36 (100) con OVA PG102T 1669 ±319 (60)* 1009 ±443 (59)* 67 ±4 (231)* 325 ± 17(120) PG102E 1271 ±247(46)* 1446 ±288 (85) 44 ± 4 (152)* 220 ±65 (81) DEX 1190 ±317 (43)* 1614 ±36 (95) 41 ±7(141) 313 ±82 (116) B. lg de OVA-específica (% control de OD) uepies igE igGi lgG2a lgG2b Na?ve 13 ± 1 5±1 17 ± 1 51 ±13 DW Sensibilizado 100 100 100 100 con OVA PG102T 29 ± 7** 76 ±7* 217 ±54* 104 ±12 PG102E 27 ± 8" 69 ±9* 304 ± 53** 84 ±9 DEX 27 ±8** 79 ±11* 89 ±25 84±9 Los valores muestran el promedio ± SEM para diez animales *, P<0.05 y **, P<0.01 contra los ratones tratados con DW (Prueba T de Student). Puesto que los anticuerpos de OVA-específica no están disponibles, el nivel relativo de anticuerpos se calculó como el porcentaje del control de OD. OD = densidad óptica. Efectos de PG102T y PG102E en población de células T y B en esplenocitos. Para entender la base celular de las actividades de PG102T y de PG102E descritas antes, los inventores probaron cómo la administración de PG102 afectó las poblaciones de célula T y célula B presentes en los esplenocitos. Los esplenocitos se aislaron de ratones sensibilizados con OVA y na?ve y se hicieron crecer en presencia de OVA durante 2 días, seguido por FACS y análisis microscópico confocal. Como se muestra en la Fig. 3A, la estimulación con OVA aumentó la proporción de células CD4 + IL-4+ de 4.7% a 9.3%. La administración de PG102T o PG102E redujo el número por más de 30%. En contraste, las células CD4 + IFN-?+ se incrementaron ligeramente de 7.2% a 9.2 o 9.6% cuando los animales se tratados con PG102T o PG102E, aunque ninguno de una manera estadísticamente significativa. Habiendo un cambio pequeño en el número de ambos tipos celulares en animales administrados con DEX. Estos resultados indicaron que PG102T y PG102E pueden regular la proporción de células T que producen I L-4- y IFN-?. Después, los inventores analizaron los efectos de PG102T y PG102E en células B que produce IgE. Comparado con el tratamiento de DW, la administración oral de PG102T o PG102E resulta de una disminución de aproximadamente 40% en el número de células B CD19 + lgE + . DEX disminuye el número de tales células B por más de 60% (Fig. 3B). El análisis microscópico confocal encontró que existe una reducción significativa en el nivel de la producción de IgE en cualquier célula B dada. La intensidad de señal de I g E en células B se incrementó dramáticamente en ratones sensibilizados con OVA, pero se disminuyó mayormente cuando los animales se tratados con PG102T. El efecto de PG102E parece ser más potente que PG102T, mientras que el nivel de intensidad de fluorescencia se disminuyó adicionalmente. Estos resultados indicaron que PG102T y PG102E no solamente disminuyen el número de células B que producen IgE, pero también infra-regula la producción de IgE dentro de una célula B dada. Efectos de PG102T y PG102E en factores de transcripción celular. Para entender los mecanismos moleculares fundamentales de las actividades biológicas de PG102T y PG102E, se investigaron si estas dos preparaciones tienen cualquier efecto en los factores de transcripción celular involucrados en las trayectorias de Th1 y Th2. Esto fue debido a los efectos de PG102T o PG102E en tales citocinas múltiples e IgE podría ser explicado más fácilmente si PG102, directa o indirectamente, regula un factor(s) de transcripción. Es bien conocido que los factores de transcripción que incluyen GATA-3, T-bet and NFATc2 desempañan un papel importante en el equilibrio de las respuestas de Th1/Th2 (Lee y colaboradores, J Exp Med 2000;192:105-15; Ting y colaboradores, Nature 1996;384:474-8; Lighvani y colaboradores, Proc Nati Acad Sd USA 2001;98:15137-42; Szabo y colaboradores, Cell 2000;100:655-69; Kiani y colaboradores, Blood 2001;98:1480-8).

Los esplenocitos aislados de ratones sensibilizados con OVA se cultivaron durante 2 días como se describe antes y se prepararon para análisis de inmunomanchado. El nivel de proteína de GATA-3 se disminuyó mayormente por PG102T y PG102E, mientras que T-bet y NFATc2 fueron sobrereguladas (Fig. 4A). DEX suprimió todos estos factores de transcripción probados como se describió previamente (Adcock, Pulm Pharmacol Ther 2001 ;14:211-9). Para verificar en qué nivel ocurre esta regulación, los niveles de mARN de los factores de transcripción respectivos se determinaron usando una técnica de PCR en tiempo real cuantitativa (Fig. 4b). El tratamiento de PG102T disminuyó el nivel de mARN de GATA-3 por al menos tres veces, mientras que se incrementó el T-bet y NFATc2 por aproximadamente 14-veces y 2-veces, respectivamente. Es interesante observar que PG102E, que mostró una actividad biológica mayor en términos del efecto inhibidor de IgE, cambió los niveles de GATA3, T-bet y NFATc2 en un grado inferior de PG102T. DEX disminuyó los niveles de GATA3 y NFATc2, y elevó ligeramente el de T-bet. Estos resultados indicaron que PG102T y PG102E pueden controlar la producción de citocinas Th1/Th2 regulando el nivel de los factores de transcripción tal como GATA-3 y T-bet en el nivel de ARN. Discusión Las actividades biológicas de PG102T y PG102E observadas en este estudio indican mayormente que los extractos de A. arguta son candidatos excelentes para un agente potente y antialérgico único. PG102T y PG102E disminuyen el número de células B que producen I g E así como la cantidad de ig E producida dentro de las células B, finalmente dando por resultado la disminución de los niveles de IgE en plasma. PG102 parece que tiene tal actividad biológica para modular el balance de Th1 y Th2 a través de la disminución en el nivel de las citocinas Th2 selectivas y el aumento en el de las citocinas Th1. Los efectos de PG102T y PG102E en los factores de transcripción celular pueden explicar cómo dos preparaciones trabajan en el nivel molecular. PG102T y PG102E disminuyeron el nivel de GATA-3, mientras que aumentan el T-bet y NFATc2. GATA-3 se conoce por trans-activar mayormente el promotor I L-5 y el elemento mejorado I L-4 (Lee y colaboradores, J Exp Med 2000;192:105-15; Ting y colaboradores, Nature 1996;384:474-8).

T-bet se involucra en el propósito de las células Th1 induciendo la síntesis de IFN-? en células Th1 (Lighvani y colaboradores, Proc Nati Acad Sd USA 2001;98:15137-42; Szabo y colaboradores, Cell 2000;100:655-69). En estudios recientes, también se describió que T-bet regula el intercambio del isotipo a lgG2a y la producción de IFN-? en células B (Gerth y colaboradores, Int Immunol 2003;15:937-44). Los datos de los presentes inventores son constantes con estas funciones conocidas de los factores de transcripción respectivos; es decir infra-regulación de la expresión dependiente de GATA-3 de I L-4 e I L-5, y sobre-regulación de la producción dependiente de T-bet de IFN-? e lgG2a en esplenocitos. A diferencia de T-bet y GATA-3, NFATc2 es un factor de transcripción inducible de antígeno no selectivamente expresado. Aunque esta proteína se une al mejorador de I L-4 y el promotor IFN-? en células Th estimuladas, se ha asumido que NFATc2 desempeña un papel más importante en conducir células T na?ve T para realizar células Th1. De hecho, las células T de NFATc2 -/ - ratón secretaron niveles mucho mayores de I L-4 que las de células T tipo silvestre (Kiani y colaboradores, Blood 2001;98: 1480-8; Erb y colaboradores, Infect Immun. 2003;71 (11 ):6641-7). El presente estudio mostró que PG102T o PG102E aumentó el nivel de expresión de NFATc2. El mecanismo molecular actual mediante el cual las respuestas de Th1 favorecen a PG102T o PG102E y suprimen la biosíntesis de IgE aún está bajo investigación. Una posibilidad es que PG102T o PG102E actúe en el antígeno que presenta las células, que desempeñan un papel importante en la diferenciación celular Th a través de la secreción de los factores solubles incluyendo IL- 12 y la expresión de las moléculas co-estimulantes tal como B7-1 (Th1) y B7-2 (Th2) (Kuchroo y colaboradores, Cell 1995;80:707-18). Otra posibilidad es que trabajan directamente en el proceso de diferenciación de células progenitor de th o en la regulación de células B que producen IgE. Los efectos reguladores de PG102T o PG102E Th1 en sistemas Th1 y Th2 pueden ser debido a los compuestos biológicamente activos múltiples. Para obtener diferentes preparaciones de PG102 de una manera confiable, los presentes inventores idearon el sistema de bioensayo basado en su efecto sobre la producción de IL-4, un inductor importante del isotipo Ig que cambiaba a IgE, en esplenocítos estimulados con OVA. Este ensayo fue sensible y reproducible lo suficiente para calcular la actividad específica de PG102 y utilizado para estudiar varios factores que influenciaron las actividades biológicas de PG102, tal como el tiempo de cosecha y diferentes locaiizaciones geográficas para A. arguta. Este ensayo basado en I L-4 ahora se utiliza para la purificación del compuesto(s) activo así como el control de calidad de los reactivo PG102 usados en una variedad de experimentos. Los datos de toxicidad de los inventores indican que PG102T es seguro. En repetidos experimentos de toxicidad de dosis, la administración oral de PG102T (500, 1000, 2000 mg/kg/día) durante 4-12 semanas no produjo ningún efecto nocivo en ratas. Estos resultados están en estricto contraste con los datos obtenidos de DEX administrado a los ratones (0.5 mg/kg/día), que mostraron reducciones severas en pesos corporales y masa de los bazos (datos no mostrados). Estos datos, que describen las varias actividades biológicas de PG102T y PG102E, indican que los extractos de A. arguta son preparaciones seguras, naturales, con un riesgo mínimo de efectos secundarios, para uso potencial en el tratamiento de varios trastornos alérgicos. Eiemplo 2 El siguiente ejemplo demuestra que por lo menos dos extractos específicos prepararon de A. arguta, indicados PG102T y PG102E, tiene un efecto terapéutico en dermatitis atópica. Los ratones NC/Nga se establecieron como una cepa innata en 1957 basada en ratones selectos japoneses (Nishiki-Nezumi). Cuando se mantuvieron bajo condiciones libres de patógenos específico (SPF), los ratones permanecieron normales y sanos.

Sin embargo, cuando se colocaron en entornos convencionales, los signos clínicos iniciaron con comportamiento de rasguño que inicia a la edad de 8 semanas seguido por el inicio de la condición eczematosa. El eczema inmediatamente desarrollado se localiza generalmente en la cara, orejas, cuello y región posterior. Los ratones afectados exhiben varios signos clínicos incluyendo hemorragia, erosión superficial, excoriación profunda, escamación, sequedad de la piel y retraso de crecimiento (Hiroshi y colaboradores, Int Immunol 1997;9(3):461-466). En las lesiones de la piel, se observaron la infiltración de numerosas células T CD4+ y los eosinófilos y el número creciente de mastocitos con desgranulación. Además, el nivel de plasma de IgE se eleva marcadamente a partir de la edad de 8 semanas, coincidiendo con la aparición de las lesiones de la piel. Las células infiltradas en las lesiones de la piel expresan IL-4, IL-5 y TARC, pero poco o nada de IFN-?, dando por resultado la manifestación de las reacciones inmunes de Th2-dominante (Masayuki y colaboradores, Int Ach Allergy Immunol 2003;132:355-63; Christian y colaboradores, Mol Med Today 2000;5:209-10). Estos resultados se asemejan a los varios caracteres inherentes para pacientes de AD, sugiriendo que un ratón NC/Nga puede ser un modelo animal excelente para el AD humano y también que la modulación de Th1/Th2 y la supresión de la biosíntesis de IgE pueden ser una estrategia terapéutica que puede mejorar fundamental los síntomas clínicos de AD en seres humanos y ratones.

Materiales y Métodos Animales. Los ratones NC/Nga (NC) hembra libres de patógenos específicos (SPF) se adquirieron de SLC (Tokio, Japón). Los ratones (5-6 semanas de edad) se mantuvieron en un ambiente de SPF (ratones SPF NC) y se les suministró alimento esterilizado en autoclave y agua por al menos 1 semana antes de uso. A las siete semanas de edad, ratones SPF NC se trasladaron a un cuarto convencional sin control de aire (ratones convencionales NC). Los experimentos con animales se conformaron con los estándares indicados en las instrucciones del University Animal Care and Use Committee de la Seoul National University. Administración oral de PG102T o PG102E. PG102T y PG102E usados en este estudio se preparados a partir de A. arguta como se describe previamente (Park y colaboradores, J.

Allergy Clin. Immunol., 116:1151-1157, 2005 y Ejemplo 1). Los ratones convencionales NC se dividieron en tres grupos (n=6-8/grupo) y se trataron oralmente con PG102T (50 mg/kg/día), PG102E (5 mg/kg/día), DEX (2.5 mg/kg/día) o agua destilada (DW; 100 µl/ratón/día) una vez al día durante 7 semanas a 14 semanas. Los ratones SPF NC, como un control negativo, recibieron DW. Efectos ofPG102T o PG102E en el desarrollo de dermatitis en ratones NC/Nga. La severidad de la dermatitis de cada grupo de ratones fue determinada una vez por semana de 7 semanas a 14 semanas de edad por dos personas ajenas (protegidas) a las asignaciones del tratamiento, de acuerdo a una modificación ligera del criterio descrito por Leung y colaboradores (Leung y colaboradores, J Allergy Clin Immunol 1990;85:927-33). Los signos y síntomas clínicos vistos en ratones convencionales NC comenzaron con comezón, eritema y hemorragia, seguida por edema, erosión superficial, excoriación profunda, escamación y resequedad de la piel y crecimiento retardado. Antes de que las condiciones de la piel se anotaran, el comportamiento de rasguñar se observó durante 20 minutos por ratón y el índice de comezón se evaluó midiendo el tiempo de rasguñado total durante 20 minutos. Una marcación de severidad clínica total para lesiones tal como AD se definió como la suma de las marcaciones individuales clasificadas como 0 (ninguna), 1 (media), 2 (moderada) y 3 (severa) para cada uno cinco señales y síntomas (comezón, eritema/hemorragia, edema, excoriación/erosión y escamación/ re sequedad). Medición del nivel de plasma de inmunoglobulinas, citocinas y quimocina. Las respuestas alérgicas espontáneamente inducidas se monitorearon midiendo los niveles de plasma de las inmunoglobulinas incluyendo IgE e lgG2a, citocinas y quimocinas. La sangre se recolectó del plexo retro-orbital con tubos capilares de vidrio a las edades de 7, 10, 12, y 14 semanas, y las muestras de plasma separadas se almacenadas a -80°C hasta uso. El nivel de IgE se determinó por un kit de detección IgE de ratón (Shibayagi, Gunma, Japón) y donde se midió el lgG2a por el método de ELISA del emparedado como se describe por Hirano y colaboradores (Hirano y colaboradores, J Immunol Methods 1989; 119: 145-50). El límite de detección fue 1 ng/ml de I g E: Los niveles de plasma de los ratones IL-4, IL- 12, eotaxina y TARC también se midieron por kits de ELISA (Endogen, Cambridge, MA and R&D Systems, Minneapolis, MN) de acuerdo a las instrucciones del fabricante. Producción de citocina Th1/Th2 por esplenocitos derivados de ratones NC/Nga. A la edad de 14 semanas, los ratones NC convencionales tratados oralmente con PG102T, PG102E, DEX o DW y ratones SPF NC se sacrificaron mediante decapitación. Para estudiar la producción de citocinas por esplenocitos, los bazos de un grupo individual se obtuvieron, y los esplenocitos aislados de los bazos se suspendieron de nuevo en medio de cultivo (RPMI-1640 que contiene 10% de FBS inactivado con calor). La suspensión de esplenocitos se sembró en una placa de cultivo de 24 pozos, y la concentración final se ajustó a 5x106 células/ml/pozo. Estas células entonces también se incubaron en ausencia o presencia de ConA en 2 µg/ml durante 3 días. La concentración de Con A se optimizó a partir de los experimentos dosis-respuesta preliminares y no se encontró ninguna citotoxicidad en las concentraciones usadas en este experimento. Después de la incubación, los sobrenadantes del cultivo se recolectaron para determinar el nivel de citocinas ( I L-4, IL-5, IL- 10, IL-12, I L-13 e IFN-?) por ELISA como se describió antes. Análisis de leucocitos y eosinófilos totales en sangre periférica. A las 14 semanas de edad, la sangre se reciolectó de un grupo individual de ratones. El número de leucocitos y eosinófilos totales en la sangre heparinizada se contó usando un hemocitómetro de Celldyn (Abbott; Santa Clara, Ca). Análisis histológico y medición del espesor epidérmico y cutáneo en lesiones de la piel similar a AD. Para el examen histológico, las biopsias pequeñas se obtuvieron de la cabeza, cuello y piel dorsal de ratones convencionales y SPF NC a la edad de 14 semanas. Las secciones de piel se fijaron en 10% de formalina amortizada con fosfato (pH 7,2), integradas en parafina, corte de 4 µM, y manchadas con H&E para detectar varias células inflamadas. Las células entre el epitelio y panículo carnoso se observaron bajo un microscopio en una ampliación de 400X.

Después de que los campos microscópicos se fotografiaron, el espesor de la epidermis y dermis se midió como la distancia de la capa córnea de la epidermis a la membrana de basamento de la dermis. La distancia se expresó como el medio de tres campos aleatorios para que se promediaran 5 medidas. Determinación de la expresión de citocina y quimocina en las biopsias de piel. Los niveles de IL-4, I L-5 , eotaxina y TARC en las biopsias de piel de la cara se midieron por ELISA. Brevemente, el tejido de lesiones de piel facial se extirpó, homogeneizó en amortiguador de lisis, y después el procedimiento de congelación/descongelación se repitió tres veces. Después de la centrifugación, los sobrenadantes que contenían la proteína celular total se cuantificados y utilizaron para detectar el nivel de citocinas y quimocinas. Los resultados se normalizados a la cantidad total de proteína preparada a partir de lisados de tejido. Las muestras de lisado de proteína se prepararon del tejido de piel facial como se describió antes, también se sometieron a Western blotting utilizando anticuerpos específicos de ratones GATA-3, pSTAT6 (Santa Cruz BioteClinology, Santa Cruz, CA) o ß-actina (Sigma) como un control de carga. Estadística. Los datos se expresaron como promedio ± SEM, y las diferencias entre los valores promedios se analizaron mediante la prueba t de Student no pareada. Los valores P menores de 0.05 o 0.01, que se calcularon como los valores P de una cola, se consideraron estadísticamente significativos. Resultados La administración oral de PG102T y PG102E inhibe el desarrollo de la dermatitis espontáneo en ratones NC convencionales. Para examinar los efectos posibles de PG102 en dermatitis atópica, los inventores utilizaron ratones NC como modelo para la dermatitis atópica humana, que muestra lesiones de la piel similares a la dermatitis atópica con el envejecimiento bajo condiciones convencionales. A ratones NC convencionales se les administró oralmente PG102T [50 mg (60 unidades)/kg/día], PG102E [50 mg (60 unidades)/kg/día], PG102E [5 mg (54.5 unidades)/kg/día], DEX (2.5 mg/kg/día) o DW (100 µl/ratón/día) en una base diaria durante 7 semanas y la progresión de la dermatitis atópica se observó. La dosificación de PG102T y PG102E se basó en la concentración que dio los efectos terapéuticos en el modelo murino sensibilizado con OVA usado en los experimentos previos (ver Ejemplo 1 y Park y colaboradores, J. Allergy Clin. Immunol., 116:1151-1157, 2005). El aumento en las marcas de severidad de la dermatitis de los ratones NC convencionales tratada con DW mostró que el desarrollo de la dermatitis progresó de una manera dependiente de la edad (Fig. 5A). Sin embargo, la administración oral de PG102T o PG102E disminuyó significativamente la marca de 9 semanas de edad. La mejora de severidad de la dermatitis se acompañó por una reducción en la incidencia de rasguños. El tratamiento con PG102T bajó grandemente el tiempo de rasguño de 9 semanas de edad. Los resultados similares se observaron en animales tratados con PG102E (Fig. 5B). Por otra parte, estos resultados fueron constantes con la observación hecha a través del análisis de las características visuales clínicas totales de los ratones (datos no mostrados). DEX también disminuyó la severidad de la dermatitis y comportamiento de rasguño. Estos datos indicaron que PG102T y PG102E pudieron suprimir la dermatitis espontáneamente inducida en este modelo animal. PG102T y PG102E disminuyen la producción IgE e IgGI, mientras que aumentan el lgG2a en plasma. Además de las características clínicas visuales que imitan la dermatitis atópica humana, los ratones NC convencionales también muestran el nivel elevado de IgE en plasma después del inicio de la dermatitis. Por lo tanto, se probó si la administración oral de PG102T o PG102E podrá controlar el nivel de plasma de IgE y IgGI mediado con Th2 e lgG2a mediado con Th1. A partir de 7 semanas de edad, los animales se alimentaron oralmente con PG102T, PG102E, DEX o DW en una base diaria, y las muestras de sangre se obtuvieron a la edad de 7, 10, 12 y 14 semanas. Bajo condiciones de SPF, los ratones NC normalmente produjeron aproximadamente 150 ng/ml de IgE total, pero cuando los animales se colocaron bajo condiciones convencionales, los niveles de IgE gradualmente aumentaron con el envejecimiento, a más o menos 17 µg/ml en 14 semanas de edad. La administración de PG102T o PG102E disminuyó el nivel de plasma de IgE a partir de 10 semanas de edad de una manera estadísticamente significativa, dando por resultado un nivel inferior de 5-veces del de IgE al final del experimento. El efecto inferior de IgE de PG102T y PG102E fue comparable al de DEX usado como un control positivo (Fig. 6A). A las 12 semanas de edad, el nivel de IgGI, se midió otra clase de Ig mediada por Th2. Bajo condiciones convencionales, los ratones tratados con DW produjeron un nivel de IgGI mayor de 5 mg/ml. Sin embargo, la administración de PG102T y PG102E disminuyó su nivel por 75% y 90%, respectivamente. El nivel de lgG2a, que pertenece a la clase de Ig mediada por Th1, aumentó por aproximadamente 180% en ratones NC convencionales tratados con PG102T. PG102E también indujo el nivel de lgG2a en plasma (Fig. 6B). Estos datos indicaron que PG102T y PG102E pudieron suprimir el desarrollo de la dermatitis disminuyendo los niveles de IgE e IgGI y aumentando el de lgG2a. PG102T o PG102E puede regular el equilibrio de la producción de citocina Th1/Th2 en plasma y esplenocitos. Los datos anteriores indicaron que PG102T y PG102E afectan la expresión de las citocinas Th1 y Th2. Para entender la actividad de PG102T y PG102E en un nivel molecular y celular, los niveles de I L-4 y IL-12, que representan las trayectorias de Th2 y Th1, respectivamente, se midieron en plasma a las 12 semanas de edad. Comparado con ratones NC convencionales tratados con DW, el nivel de 1 L-4 disminuyó en ratones tratados con PG102T o PG102E por 60% y 76%, respectivamente (Tabla IVA). La administración oral de PG102T o PG102E elevó el nivel de I L-12 de una manera estadísticamente significativa. Los inventores también analizaron los efectos de Th1 y Th2 en la producción las citocinas PG102T y PG102E en esplenocitos aislados de ratones NC. Los ratones se sacrificaron a las 14 semanas de edad y los bazos se obtuvieron para aislar los esplenocitos. Los esplenocítos de cada grupo de ratones se estimularon con un mitógeno específico de célula T, ConA, durante 3 días, y se detectaron los niveles de varias citocinas. En presencia de ConA, el nivel de todas las citocinas Th2 se elevado altamente, pero el tratamiento con PG102T o PG102E redujo los niveles de IL-4, de I L-5 e I L-10 por 24% a 78% (Tabla IVB). DEX también inhibió los niveles de todas las tres citocinas Th2, aunque la disminución de I L-5 por DEX no fue estadísticamente significativa. El nivel de IL-13 no fue influenciado por PG102 o DEX. Tabla IV. Efectos de PG102T y PG102E en el nivel de las citocinas Th1 y Th2 en plasma y esplenocitos en cultivos A. Niveles de Plasma Fuentes Ratones NC Convencionales DW 474 ± 31 (100) 859 ± 17 (100) PG102T 189 ±64 (40)** 1217 ± 140 (142)* PG102E 113 ±69 (24)** 1106 ± 77 (129)* DEX 80 ±56 (17)** 236 ±140 (27) Ratones NC SPF 13 ±5 (3) 1708 ± 116 (199) B. Niveles esplénicos Fuentes I L-4 I L-5 IL-10 IL-13 IL-12 IFN-? Ratones NC Convencionales DW 134 ±17 680 ± 98 782 ± 21 448 ± 1 656 ± 71 10407 ±160 (100) (100) (100) (100) (100) (100) PG102T 30 ±6 357 ± 52 621 ±1 348 ±7 957 ± 68 15848 ±2074 (22)** (53)* (79)* (78) (146)* (152)* PG102E 54 ±7 203 ± 6 (30)** 594 ± 19 406 ± 11 1636 ±42 18050 ±1380 (40)** (76)* (91) (249)** (173)** Fuentes I L-4 IL-5 IL-10 IL-13 IL-12 IFN-? Ratones NC Convencionales DEX 54 ±11 531 ±283 416 ±30 417 ±2 (93) 149 ±22 10096 ±236 (40)** (78) (53)** (23) (97) Ratones 12 ±2 (9) 33 ± 8 (5) 37 ± 3 (5) ND 166 ± 1 390 ± 88 (4) NCSPF (25) Las muestras de plasma se aislaron de cada grupo de ratones a la edad de 12 semanas. Todos los esplenocitos de ratones NC se estimularon con ConA durante el cultivo. Los valores se expresan como el promedio ± SEM para cinco animales *, P<0.05 y **, P<0.01, contra ratones tratados con DW (prueba T de Student). ND, no detectable. Cuando las células de ratones NC convencionales se hicieron crecer en presencia de ConA, los niveles de IL-12 e IFN-Y se aumentaron. En ratones NC SPF, el nivel de IL-12 fue 166 pg/ml, pero la estimulación con ConA aumentó hasta por 4-veces.

El tratamiento con PG102T o PG102E además indujo el nivel de IL-12 por aproximadamente 150% o 250%, respectivamente. El nivel de IFN-? también se incrementó dramáticamente en presencia de ConA a casi 11 ng/ml. La administración de PG102T elevó el nivel de esta citocina por aproximadamente 150%.

PG102E parece ser más potente que PG102T. DEX suprimió potentemente el nivel de IL-12, mientras que no afectó el de IFN-Y. En resumen, PG102T y PG102E aumentaron el nivel de citocinas Th1, mientras que disminuyó en de las citocinas Th2 selectivas, a diferencia de DEX, que inhibió indistintamente la expresión de casi todas las citocinas medidas en este estudio. PG102 no sólo previene la eosinofília, sino también disminuye el nivel de eotaxina y TARC. La infiltración dérmica de células inflamatorias incluyendo eosinófilos es una característica importante de la dermatitis atópica en ratones NC. Debido a que la presencia de células inflamatorias en las lesiones de la piel pudo haber resultado de su movilización de la médula en la sangre, los inventores primero analizaron el número leucocitos y eosinófilos totales en la sangre periférica a las 12 semanas de edad. Como se muestra en la Fig. 7A, el número de leucocitos totales de ratones NC convencionales se incrementó durante el inicio de la dermatitis. En particular, el número de eosinófilos se incrementó mayormente en ratones tratados con DW bajo condiciones convencionales, dando por resultado la eosinofília. Sin embargo, la administración de PG102T o PG102E disminuyó el número de leucocitos y eosinófilos totales, contribuyendo probablemente a la prevención de la eosinofília. Los cambios en el número de eosinófilos circulantes pueden manifestarse por la producción de quimocinas, que conducen a la quimioatracción en respuesta a la inflamación (3-6). Por lo tanto, se determinaron los niveles de plasma de la eotaxina y TARC, que son quimioatrayentes representativos para los eosinófilos y células Th2. En el ambiente convencional, los ratones tratados con DW produjeron un nivel creciente de eotaxina y TARC, pero estos niveles disminuyeron en ratones tratados con PG102T o PG102E por aproximadamente 25% a 50% (Fig. 7B). Habiendo un pequeño cambio en los animales administrado con DEX. Estos resultados mostraron que PG102T y PG102E inhibieron la producción de eotaxina y TARC, dando por resultado la prevención de la eosinofíiia mediada por Th2, que coincide generalmente con el inicio de la dermatitis en ratones NC. La administración de PG102T o PG102E inhibe la infiltración de células inflamatorias en dermis y el espesor en la epidermis y dermis. La mejora de la condición de la piel clínica e inhibición de la respuesta de Th2 por PG102T y PG102E también se confirmaron por el análisis de secciones manchadas de H&E a 14 semanas de edad. Los ratones se alimentaron con DW exhibiendo un espesor marcado de la epidermis y dermis, hiperqueratosis prominente, infiltración de células inflamatorias, y hemorragia. El estudio morfológico indicó que estas células de infiltración en la dermis son eosinófílos, mastocitos y linfocitos. Sin embargo, el tratamiento con PG102T o PG102E durante 7 semanas inhibió el espesor de la epidermis y dermis y la infiltración de células inflamatorias en la dermis, dando por resultado el ambiente histológico muy similar al de los ratones NC SPF (Fig. 8A). La administración de DEX también produjo resultados similares, pero expandió mayormente la región del adipocito. La medición del espesor epidérmico y dérmico en la cara y piel posterior también demostró de que PG102T y PG102E previnieron la hiperplasia la epidermis y dermis de una manera estadísticamente significativa (Fig. 8B). Estos resultados indicaron que la toma oral de PG102T o PG102E podrá suprimir efectivamente el desarrollo de la dermatitis en ratones NC con poco o nada de efectos secundarios. PG102 o PG102E reduce la expresión de citocinas mediadas con Th2 y quimocinas a través de la infra-regulación de GATA3. Para investigar los efectos de PG102T o PG102E en la producción mediada con Th2 de citocinas y quimocinas en la piel de ratones, los niveles de I L-4, de I L-5 , eotaxina y TARC se midieron por ELISA a las 14 semanas de la edad. En la piel de ratones NC SPF, todas las cuatro proteínas se expresaron débilmente, pero sus niveles se incrementaron notablemente en ratones NC convencionales. La administración PG102T o PG102E disminuyó los niveles de IL-4, eotaxina y TARC por más del 30%. El efecto sobre la expresión de IL-5 fue más prominente, con su nivel se incrementó por casi 90%. Por el contrario, DEX inhibió los niveles de I L-5 y TARC, pero no de I L-4 y eotaxina (Fig. 9A). Basado en estos resultados, la expresión de los factores de transcripción incluyendo STAT6 y GATA3 se determinó por inmunomanchado. STAT6 y GATA3 son bien conocidos por desempeñar papeles críticos en la diferenciación de células Th2 y la producción de citocinas y quimocinas de Th2 específica (Arakawa y colaboradores, Clin Exp Immunol 2004;135(3):505-10; Gunther y colaboradores, J Allergy Clin Immunol 2004; 113:987- 94; Konishi y colaboradores, Proc Nati Acad Sci 2002;99(17): 11340-5). Como se muestra en la Fig. 9B, el nivel de proteína GATA-3 fue disminuido por PG102T y PG102E. La expresión de STAT6 fosforilado (pSTATdu) también fue disminuida en los ratones NC convencionales tratados con PG102T, mientras que no pudo ser el caso don PG102E. DEX suprimió el nivel de GATA3 y pSTAT6. Estos resultados demostraron que PG102T y PG102E pudieron infra-regular el nivel de las citocinas de Th2 específica y quimocinas inhibiendo la expresión de GATA3. Discusión AD es una enfermedad alérgica importante que inicia a menudo durante la infancia. Una fracción significativa de individuos afectados desarrolla asma y/o rinitis alérgica más adelante en la vida (Leung, Clin Exp Immunol 1997;107(supl. 1):25-30). AD resulta de la inflamación dérmica causada por una inmunorespuesta anormal, en particular, la sobrereactivación de la trayectoria de Th2. Los inventores han descubierto que PG102T y PG102E, fracciones solubles en agua derivadas de A. arguta, controlan la producción de citocinas mediadas por Th1 y Th2 selectivos y también que IgE en el modelo ratón OVA-sensibilizado (ver Ejemplo 1). Basado en estos datos, se razonó que estos extractos de plantas pueden ser útiles para el tratamiento de varias enfermedades alérgicas (Mayaumi y colaboradores, J Allergy Clin Immunol 2000;106:159-66; Hisae y colaboradores, Phytother Res 2001; 15:506-10). En este ejemplo, los inventores investigaron si PG102 podrá producir algún efecto(s) terapéutico real en la dermatitis atópica usando ratones NC/Nga como un sistema modelo. Los resultados indicaron que PG102T y PG102E suprimieron el desarrollo de la dermatitis espontáneamente inducida, que, sin limitarse por la teoría, se creen que es a través del control de varios factores de Th1- y Th2-asociados, es decir la regulación hacia abajo de IL-4, I L-5 , I L-10 e IgE, así como la regulación al alza de IL-12 e IFN-?. Las consecuencias biológicas de tales cambios bioquímicos en el modelo ratón NC/Nga incluyen el número altamente disminuido de eosinófilos en la sangre periférica así como en ias lesiones de la piel, la supresión del espesor de la epidermis y dermis, y la inhibición de la infiltración de varias células inflamatorias. De interés particular está una disminución en los niveles regionales de expresión de la eotaxina, TARC, I L-4 e IL-5. Los niveles de estas proteínas son anormalmente altos en las lesiones de la piel de los ratones NC/Nga crecidos bajo el ambiente convencional. Cuando a los animales se les administró oralmente PG102, sin embargo, estas quimocinas y citocinas se encontraron por estar en el nivel virtualmente normal. La eotaxina, junto con I L-5 , se conocen por ser un quimioatrayente potente para los eosinófilos, mientras TARC es producido por los queratinocitos (y también las células Th2) se piensa para atraer las células Th2, e inducir las respuestas patológicas generalmente asociadas con la dermatitis atópica. En este respeto, vale observar que los receptores para la eotaxina y TARC son CCR3 y CCR4, respectivamente, que ambos son altamente expresados en las células Th2 (Christian y colaboradores, J Clin Invest 1999J04: 1097-105; Tomomi y colaboradores, J Allergy Clin I mmunol 2110;107:353-8; Weilie y colaboradores, J Clin Invest 2002;109:621-8; Masayuki y colaboradores, Int Ach Allergy Immunol 2003;132:355-63). El mecanismo(s) molecular detallado y la secuencia exacta que están por debajo de los efectos terapéuticos de PG102, observados en el modelo ratón NC/Nga, todavía se están investigando. Es posible que PG102 actúe primero en factores de transcripción celular, por ejemplo GATA-3, y posteriormente en la expresión de los participantes de citocina importantes involucrados en los sistemas de Th1 y Th2 tal como I L-4 e IFN-?, que inducen la reacción en cascada, conduciendo a una disminución del nivel IgE y quimocinas respectivas (Zhu y colaboradores, Nat Immunol. 2004;11:1157-65).

Alternativamente, PG102 puede trabajar inicialmente en el nivel local; por ejemplo, disminuyendo el nivel de eotaxina y TARC, inhibiendo sus funciones quimioatractivas, que disminuyen el número de eosinófilos en los niveles sistémicos y locales, y suprimen el desarrollo histopatológico visto en ratones crecidos convencionalmente NC/Nga. La actividad de PG102 puede ser debido a compuestos múltiples que actúan en varios niveles de trayectorias bioquímicas relacionadas a alergias. En general, PG102 parece operar los factores biológicos importantes relacionados con la dermatitis atópica en este modelo animal, tratando la condición en su fuente en lugar de simplemente proporcionar el alivio de los síntomas. PG102T y PG102E se derivan de una fruta comestible. No se encontró ninguna toxicidad en los experimentos de toxicidad de dosis repetidas, en los cuales 2000 mg/kg/día, 40-veces mayores que la concentración usada en este estudio, se administrados en una base diaria durante 12 semanas. Junto con los datos de los experimentos anteriores que involucran ratones sensibilizados con OVA, los resultados de los ratones NC/Nga demuestran que PG102 es un reactivo seguro y efectivo para el tratamiento de varias enfermedades alérgicas incluyendo dermatitis atópica. Dado que el predominio de las enfermedades atópicas es incrementado en todos los países desarrollados importantes y virtualmente ningún reactivo está disponible para el tratamiento fundamental de la dermatitis atópica, las preparaciones tal como las descritas en la presente representan avances en el campo. Eiemplo 3 El siguiente ejemplo muestra la preparación de varias preparaciones que comprenden A. arguta que es utilizada en los ejemplos más adelante. Material de plantas Tallos (que consisten de cañas y raíces tubulares fructíferas), raíces, y corteza de Actinidia arguta (Sieb. Et Zuce.) Planch, ex Miq. (Actinidaceae) cultivar 'Ananasnaya' se recolectaron en Hurst Berry Farm, Sheridan, OR. A voucher specimen (#518640) se autenticó por Mr. Tim Hogan, Collection Manager, University of Colorado Herbarium, The University of Colorado, Boulder, CO, y depositado en la misma localización. El material de plantas se secó al aire 48 horas y se almacenó a temperatura ambiente antes de la extracción u otro proceso. Madurez, la fruta A. arguta lista para comer se recolectó por Hurst Berry Farm, congelada inmediatamente, enviada y almacenada congelada (-20°C) antes de la extracción u otro proceso. Extractos y Otras Preparaciones Tallos en polvo (126.6 g), raíces en polvo (79.0 g), y corteza dividida finalmente (126.2 g) cada uno se extrajo con agua destilada (1 I) a 94°C durante 4 h. Las mezclas entonces se filtraron, y el filtrado se concentrado hasta sequedad mediante evaporación giratoria para proporcionar un extracto de tallo (9.9 g), un extracto de raíz (8.6 g), y un extracto de corteza (2.4 g). Veinte bayas de A. arguta congeladas (154.4 g) se descongelaron a temperatura ambiente, se machacaron y extrajeron con agua destilada (1 I) 91°C durante 5 h. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró para producir un extracto de fruta fresca 'hervido' (12.8 g). El fruto del kiwi congelado fresco adicional (341.6 g) se descongeló y produjo a través de un exprimidor. El exprimidor eliminó las cascaras de la fruta dando por resultado una mezcla de semillas, pulpa y jugo. Esta mezcla se centrifugada (30 min., -3500 rpm) para proporcionar 150 ml de jugo. Este jugo se concentró mediante evaporación giratoria dando por resultado un concentrado de jugo de fruta (24.2 g). Para generar cantidades mayores de un extracto equivalente a PG102T (como se describe en el Ejemplo 1), se realizado una extracción a escala del proceso de fruto del kiwi (Sungil Bioex Co., Ltd., Bibong, Corea). El fruto del kiwi congelado (1242 kg) se rebanó (1/4" a 3/8" de espesor) y se secó en un secador de convección (65-80°C) a un contenido de humedad de 5-20%. La extracción por lote (Fíg. 10) de la fruta seca (239 kg) se realizó en un reactor de acero inoxidable cubierto con una pantalla de filtro interna para soportar la carga de extracción. Un condensador externo se utiliza para prevenir la pérdida de agua durante la extracción. La cantidad de solvente de extracción (agua) se basa en 5-10 veces el peso de la fruta seca a extraerse. El contenido del recipiente de extracción se calentó de 0 a 90°C durante un período de 2 h vía la introducción de vapor en la cubierta del reactor. El agua (90°C) entonces se recirculó a través de la biomasa usando un bucle de recirculación externo durante 4-12 h. Posteriormente, la biomasa consumida se retira por disposición y el extracto acuoso se filtró a través de un filtro de 10 micrones. El líquido filtrado entonces se concentró bajo vacío (-600 mmHg) a 55-65°C en un reactor de acero inoxidable agitado equipado de un condensador externo y un receptor de destilado. Una vez que el material se concentró, se mantuvo a 80°C durante 30 minutos adicionales para esterilizar el extracto. El material resultante (101 kg), equivalente a PG102T, se designó FD001. De este material, 3 kg se pusieron aparte para prueba adicional. Las Good Manufacturing Practices se utilizaron a través del proceso. Para crear un material en polvo apropiado para encapsulación y útil en las aplicaciones clínicas descritas en la presente, el concentrado de FD001 producido antes (98 kg) se bombeó a un mezclador horizontal de paletas y se mezcló con un peso igual, basado en el contenido de sólidos calculado, de celulosa microcristalina (MCC). Después de esto, la mezcla sólida se transfirió a las bandejas de acero inoxidable que se colocaron en un secador de aire caliente forzado (70-80°C) durante 24 h. los sólidos secos, grumosos entonces se molieron en un molino de martillos tipo Fitzmill para producir un polvo de malla 40 (118 kg). Este material se encapsuló (GMP Laboratories of America, Inc., Anaheim, CA) en cápsulas clasificadas de 300 mg o 600 mg, cada uno conteniendo una mezcla de 1:1 de FD001 y MCC para uso en experimento clínicos caninos y humanos. Fruta A. arguta seca (7.0 g) del material de proceso a escala, rebanada y seca como en las etapas iniciales anteriores (pero no se sometieron a la extracción de lote), se pulverizaron y este material se extrajo con agua (250 ml) 25°C durante 4 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró hasta sequedad mediante evaporación giratoria para proporcionar un extracto en agua a temperatura ambiente de la fruta seca (4.2 g). FD001 (79.9 g) se mezcló con 1.5 I de H2O destilada y esta solución se extrajo sucesivamente con cuatro porciones de 500 ml de acetato de etilo (EtOAc). Las capas orgánicas combinadas y la capa acuosa se concentraron hasta sequedad in vacuo dando por resultado un extracto de EtOAc (7.4 g) y el residuo acuoso (41.5 g). Eiemplo 4 El siguiente ejemplo describe in vitro probado para actividad inmunomoduladora en preparaciones de A. arguta. El propósito de este estudio se comparó con la capacidad relativa de varios extractos y preparaciones producidas de A. arguta para modular la producción de citocina (I L-4, I L-5 , IL-10, IL-13 y IFN?) en cultivos de esplenocitos derivados de ovalbúmina (OVA, grado V, Sigma) - ratones sensibilizados usando el análisis de ELISA (kits Quantikine, sistemas R&D). Las siguientes muestras (preparadas como se describe en el Ejemplo 3 antes) se probaron: FD001 (PG102T), el concentrado de jugo de fruta, y el extracto de EtOAc. Aislamiento y cultivo de Esplenocitos Ratones hembra, Balb/c (Harían, Indianapolis, IN) se sensibilizaron mediante inyección IP de 20 µg de OVA los días 0 y 14. El día 24, después de la eutanasia por la dislocación cervical, los bazos se eliminaron asépticamente de ratones individuales e inmediatamente se procesaron para el desarrollo del cultivo de esplenocitos usando la técnica estéril. Los bazos se disociados en presencia de 10 mM de HEPES-amortiguado RPMI-1640, forzando ligeramente los tejidos a través de la rejilla de una malla de nylon de 70 micrones usando el émbolo de una jeringa de 3 cc. Los agregados celulares mayores se eliminaron de la suspensión resultante utiliza un gradiente FCS. Los esplenocitos entonces se centrifugaron (1500 rpm, 5 min.) y las pelotillas celulares resultantes se trataron con amortiguador de lisis de RBC (10 min., temperatura ambiente) para eliminar la contaminación de eritrocitos. La mayoría del amortiguador de lisis de RBC después se eliminó mediante centrifugación (1500 rpm, 5 minutos) y los esplenocitos granulados después se lavaron 3X con 10 mM de HEPES-amortiguado RPMI-1640. Después del lavado final, los esplenocitos granulados se suspendidos de nuevo en un volumen de RPMI- 1640 que contiene 10% de FCS y Penn/Strep (medio completo) diseñado para liberar una densidad celular final de 5 x 106 células/ml. Para cada análisis, 5 x 106 esplenocitos se colocaron en placas de pozos individuales de una placa de 24 pozos. El día 3, los sobrenadantes de estos pozos se recolectaron y congelaron en preparación para la determinación de resultados experimentales. Los cultivos de esplenocitos control también se establecieron de ratones na?ve (no-sensibilizado) de la manera descrita antes y se colocaron en placas de pozos individuales de una placa de 24 pozos para alcanzar una densidad celular fina de 5 x 106 células/ml. Estos esplenocitos se establecieron en RPMI-1640 que contiene 10% de suero de becerro fetal, Penn/Strep, y no recibieron ningún tratamiento adicional. El día 3, los sobrenadantes de estos pozos se recolectaron y congelaron para servir como controles experimentales negativos. Estimulación de los cultivos de esplenocitos con preparaciones de A. arguta Diez ratones sensibilizados con OVA se utilizaron para cada preparación probada. Los esplenocitos de cada ratón se colocaron en placas (5 x 106 células/ml) en 8 pozos individuales de una placa de 24 pozos en medio RPMI-1640 completo que contiene 100 µg/ml de OVA, 0.5% de DMSO y o ninguna concentración se eligió de cada una de las preparaciones específicas de prueba bajo examen. 6 de los 8 pozos se dividieron en 2 conjuntos de 3 pozos. Cada uno de los pozos en los conjuntos de 3 se trataron con preparaciones de A. arguta en las concentraciones de 0.25, 1.0 o 10 mg/ml. Para servir como controles positivos, los 7os pozos se trataron con 2 µM de dexametasona (DEX), un antiinflamatorio de glucocorticoide potente. Los 8V0S pozos no recibieron ningún tratamiento adicional y sirvieron como un control experimental solamente con OVA. Después de 3 días de cultivo, los sobrenadantes de cada uno de los únicos 8 pozos por ratón sensibilizado con OVA se recolectaron y congelaron. Estos sobrenadantes se utilizaron para determinar los niveles de las citocinas IL-4, IL-5, IL-10, IL- 13 e IFN-? presentes en el medio de cultivo. Determinación de los niveles de citocina en sobrenadantes de cultivo Los niveles de citocina en los sobrenadantes de cultivo derivados de los esplenocitos tratados de la preparación de A. arguta, esplenocitos tratados con DEX, esplenocitos tratados solamente con OVA, y esplenocitos no tratados de ratones control no-sensibilizados se determinaron por ensayo de ELISA. Dos réplicas a los pozos en placa de ELISA se utilizaron para cada determinación del nivel de citocina. Resultados Este trabajo in vitro confirmó actividad en el PG102T-equivalente FD001 (Fig. 11), el extracto de EtOAc (Fig. 12), y el concentrado de jugo de fruta (Fig. 13) de A. arguta. Se observó que todas las tres preparaciones (en 10 mg/ml) ocasionaron la supresión sustancial, a grados variantes, de las citocinas I L-4, IL-5, IL-10, IL-13 e IFN?. Los efectos más pronunciados se ven en IL-13 e IFN-? para todas las muestras examinadas, constantes con el trabajo in vitro anterior (Tabla I; Ejemplo 1). Puesto que la actividad se observada en el extracto de EtOAc, es evidente que los constituyentes activos presentes en FD001 son extraíbles en solventes orgánicos, y pueden purificarse adicionalmente por métodos cromatográficos tradicionales. Significativamente, el concentrado de jugo de fruta también suprimió la producción de citocina por los esplenocitos, indicando que la extracción de fruto del kiwi como se muestra en los Ejemplos 1 y 2 no es el requerimiento único para la producir preparaciones activas de fruto del kiwi resistente. Se observa que la supresión relativamente menor de citocinas fue evidente en el concentrado del jugo de fruta, sugiriendo que el proceso de secado o calentamiento usado para preparar FD001 puede ser importante para mejorar la actividad. Eiemplo 5 El siguiente ejemplo describe una comparación de la actividad in vitro de extractos de partes sin fruta de A. arguta, así como preparaciones de fruta alternativas de A. arguta. El propósito de este estudio fue determinar la capacidad de los extractos de A. arguta que se originan de partes de la planta con excepción de la fruta, o de preparaciones alternativas de la fruta (es decir, con excepción de los extractos descritos en los Ejemplos 1 y 2), para modular la producción de citocina (IL-13 e IFN?) en cultivos de esplenocitos derivados de ratones sensibilizados con ovalbúmina, usando el ensayo de ELISA. Las siguientes muestras (preparadas como se describe antes) se probaron: los extractos de agua del tallo, raíz, corteza de A. arguta, se prepararon como se describe en el Ejemplo 3; preparaciones de fruta fresca "hervidas"; el concentrado de jugo de fruta preparado como se describe en el Ejemplo 3; FD001 (equivalente a escala grande de PG102T) preparado como se describe en el Ejemplo 3; Polvo de FD001 preparado como se describe en el Ejemplo 3 (usado para experimentos clínicos descritos más adelante); un extracto de agua a temperatura ambiente de la fruta seca de A. arguta; el extracto de EtOAc preparado como se describe en el Ejemplo 3; y residuo acuoso, también descrito en el Ejemplo 3. Además, la actividad de tres compuestos inmunosupresivos conocidos, la cíclosporina, dexametasona y quercetina se evaluaron como controles. Aislamiento y cultivo del Esplenocitos La preparación de los esplenocitos se realizó de una manera idéntica a la descrita con respecto al ejemplo 4. Estimulación de cultivos de esplenocitos con extractos de A. arguta Las células de esplenocitos de 8 ratones sensibilizados con OVA (8 réplicas) se utilizaron para el ensayo de cada extracto o preparación probada. 5 x 106 células de células de esplenocitos de cada ratón donde se colocaron en placas en los pozos individuales de una placa de 24 pozos en medio RPMI-1640 completo que contiene 100 µg/m de OVA y 25 mM de HEPES (pH 7.3), 1 ml por pozo. Las preparaciones de fruto del kiwi se examinaron a concentraciones de 1.0, 3.0 y 10 mg/ml. Análisis de ciclosporina, quercetina y dexametasona Los esplenocitos de 8 ratones sensibilizados con OVA (8 réplicas) se utilizaron para el análisis de cada compuesto probado, a excepción de quercetina donde los esplenocitos derivados de solamente 2 ratones sensibilizados con OVA se examinaron. 5 x 106 células de esplenocitos de cada ratón se colocaron en placas en pozos individuales de una placa de 24 pozos en medio de RPMI-1640 completo que contiene 100 µg/ml de OVA y 25 mM de HEPES (pH 7.3), 1 ml por pozo. La ciclosporina se examinó en concentraciones de 0.0083, 0.083 y 4.15 µM. La dexametasona se examinó en concentraciones de 0.01, 0.1 y 1 µM. La quercetina se examinó en concentraciones de 1, 10 y 25 µM. Los pozos tratados con 1 µM de dexametasona, un antiinflamatorio de glucocorticoide potente, sirven como controles experimentales positivos. Los pozos que recibieron solamente RPMI-1640 completo que contiene 100 µg/ml de OVA y 25 mM de HEPES (pH 7.3) sirven como controles experimentales solamente con OVA. Después de 3 días de cultivo, los sobrenadantes se recolectaron y congelaron. Estos sobrenadantes se utilizaron para determinar los niveles de IL-13, e IFN-? presentes en varios medios de cultivo, bajo condiciones experimentales examinadas. Determinación de los niveles de citocina en sobrenadantes de cultivo Los niveles de citocina en los sobrenadantes de cultivo de todos los pozos de tratamiento y control se determinaron por el ensayo de ELISA. Dos réplicas a los pozos en placa de ELISA se utilizaron para cada determinación del nivel de citocina. Basado en los resultados de la prueba in vitro descrita en el Ejemplo 4, solamente la expresión de IL-13 e IFN-? se analizó para el propósito de estimar los niveles de la presente actividad en los materiales probados. Resultados Como se demuestra antes, se incrementó una supresión mayor de las citocinas examinados se observó como las concentraciones de los materiales de prueba de A. arguta. En general, la supresión fue más pronunciada contra IFN-?. La actividad de los compuestos inmunosupresores prescritos fue similar a las preparaciones de A. arguta en este ensayo. La ciclosporina de péptido y la glucocorticoide esteroide dexametasona exhibieron actividad potente (<1 µM) como se muestra,, en la Fig. 14A. La flavonoide quercetina mostró actividad potente sobre un intervalo de concentración ligeramente mayor (1-25 µM, Fig. 14B). La confirmación adicional de la capacidad de EtOAc pera extraer la actividad de FD001 se demuestra en las Figs. 15A y a 15B. Interesantemente, la actividad también se observó por estar presentes en el residuo acuoso, que indica que los componentes polar y no polar pueden ser responsables del efecto inmunosupresor in vitro. El polvo de FD001, que fue el material usado en los experimentos clínicos caninos y humanos (descritos más adelante), se confirmó por ser activo en este ensayo como se muestra en las Figs. 16A y 16B. Como se describe en el Ejemplo 4, los métodos alternativos para preparar los extractos de fruto del kiwi, con excepción de los procedimientos descritos en los Ejemplos 1 y 2, se exploraron. Todos los extractos derivados de fruta, se secaron o enfriaron, o extrajeron en agua caliente o a temperatura ambiente, actividad similar exhibida en este ensayo como se ve en las Figs. 17A y 17B. Basado en este ensayo, los presentes inventores creen que existen varios métodos alternativos viables para preparar el fruto del kiwi para propósitos terapéuticos. Interesantemente, los extractos en agua caliente preparados de la corteza, raíz y tallo de A. arguta exhibió actividad igual o superior en este ensayo (Figs. 18A y 18B) cuando se comparó con FD001 (PG102T) y el concentrado del jugo de fruta. Estos resultados indican que estas otras partes de la planta pueden representar fuentes alternativas de compuestos de interés terapéutico con respecto a la modulación de marcadores inmunes o supresión de citocinas pro-inflamatorias. Eiemplo 6 El ejemplo siguiente describe los resultados de un estudio del paciente no internado con placebo-controlado, doble-ciego, de la efectividad de FD001 (PG102T) en sujetos adultos con dermatitis atópica de severidad moderada. El objetivo de este estudio fue obtener la evidencia preliminar de la efectividad de FD001 (PG102T), administrado oralmente durante 42 días, en un número pequeño de voluntarios adultos con dermatitis atópica (AD) de severidad moderada. Los objetivos secundarios del estudio fueron determinados de la tolerabilidad y variabilidad de la respuesta a FD001. Diseño del estudio Los sujetos consumieron polvo de FD001 (preparado según lo descrito en el ejemplo 3) en dos cápsulas de 600 mg (600 mg de dosis total de FD001) por la mañana, o dos cápsulas de placebo que consisten de MCC, por un período de 42 días que comienza el día 1 del estudio. Los sujetos fueron instruidos para parar el uso de medicaciones esteroides después del día 14. La sangre fue extraída para el panel de bioquímica rutinario y hematología en cuatro puntos de tiempo: en la visita de investigación para la elegibilidad, y en los días 1, 14 y 42 del estudio. Los niveles de IgE y proteína C-reactiva fueron medidos en la sangre los días 1, 14 y 42. La orina se recolectada en los cuatro días para el urinálisis rutinario. Las valoraciones de efectividad fueron hechas en cada investigación de la post-visita.

Los sujetos fueron varones o hembras, de 19 a 65 años de edad, y en salud generalmente buena. Los sujetos tenían dermatitis activa, atópica de severidad moderada definida por la marcación de Physician's Global Assessment (Feldman and Krueger, Annals of the Rheumatic Diseases, 64:ii65-ii68, 2005) de tres en la escala de severidad de 0 a 4. Los sujetos tuvieron AD que involucra un mínimo de 10% del área superficial del cuerpo (BSA). Los sujetos utilizaron un esteroide tópico para el tratamiento de AD y no podían estar embarazados o ser lactantes. La seguridad y la tolerabilidad fueron determinadas usando el reporte de reacción adversa y la química sanguínea, hematología y urinálisis estándares. Métodos estadísticos La variable de efectividad primaria fue el cambio de la línea base en la Physician's Global Assessment el día 42, con análisis usando la prueba de Cochran Mantel-Haenszel (Armitage y colaboradores, Statistical Methods in Medical Research, 4th Ed., Blackwell, Oxford, 2002). Las variables secundarias fueron los cambios del día 42 de la línea base en los indicios de AD (marcaciones de severidad de eritema, induración, escamado/costras y prurito), y en BSA total según lo analizado usando una prueba t de dos-muestra. La estadística descriptiva se presentó para todos los datos del estudio de línea base y post-línea base por el grupo de tratamiento los días 1, 14, 28 y 42. Esta estadística incluyó tamaño de muestra, medio, desviaciones estándares, frecuencias, porcentajes, e intervalos de confianza, como fue apropiado. Los resultados de cuestionarios de autovaloración de los sujetos fueron marcados y presentados por el grupo de tratamiento. Cualquier caso adverso que ocurrió durante el estudio se registró. Las descripciones de casos adversos incluyeron la fecha de inicio, la fecha del caso terminado o continuado, la severidad del caso, la atribución, la acción tomada, terapia tomada, y el resultado. Estos datos fueron categorizados por el número de sujetos que reportaron casos adversos, sistema del cuerpo, severidad, seriedad, y relación al artículo de prueba. Las comparaciones entre grupos de tratamiento fueron hechas tabulando la frecuencia de sujetos con uno o más para casos adversos clasificados en los términos de MedDRA (Medical Dictionary for Regulatory Activities, http://www.meddramsso.com) durante el estudio. La estadística sumaria descriptiva para los valores del laboratorio y su cambio asociado de la línea base (día 1) se determinó para todas las valoraciones clínicas de laboratorio.

Los valores fuera del rango normal fueron señalados en los listados de datos. Además, las "tablas de cambio" fueron generadas mostrando el número y por ciento de sujetos que experimentó cambios en parámetros de laboratorio durante el curso del estudio (por ejemplo, cambio de normal a mayor, basado en los intervalos de referencia de laboratorio). TABLA V No de respondedores % del total No. de % del total grupo * sujetos respondedores A FD001 25 16 64.0 9 36.0 Placebo 26 11 42.3 14 53.8 B FD001 18 11 61.1 7 38.9 Placebo 24 11 45.8 13 54.2 C FD001 14 8 57.1 6 42.9 Placebo 17 6 35.3 11 64.7 * A= todos los sujetos B= usuarios de clobestasol y ultravato eliminados C= solo usuarios de HDRCRT-cortoide o triamcinolona Resultados de efectividad Un análisis interino conducido en los primeros 17 sujetos para completar el estudio dio lugar a tendencias estadísticas marcadas en dos puntos finales de efectividad secundaria: eritema (p = 0.13, ITT 17) e induración (p = 0.09, ITT 17). A la hora del análisis interino, ninguna diferencia estadística se podía detectar en los puntos finales de efectividad primaria en este tamaño de muestra pequeño. En el análisis del día 42 final, no había significación estadística demostrada entre los brazos de tratamiento en la efectividad primaria variable (Physician's Global Assessment) o las variables de efectividad secundaria (cambio de la línea base en las señales de AD y por ciento del cambio en BSA). En el día 14, sin embargo, un cambio distribucional significativo se observó en el punto final de efectividad primaria. Este cambio, que ocurre entre el día 1 y 14, se puede observar en las Figs. 19A y 19B para las respuestas de los recipientes del artículo de prueba y placebo, respectivamente (criterios de anotaciones de PGA indicados). Cuando los sujetos fueron clasificados en grupos que respondían y no que respondían para el análisis del día 14 (tabla V, grupo A), un porcentaje más alto de respondedores fue observado en el grupo de tratamiento de FD001, mientras que los no respondedores representaron un porcentaje más alto del grupo de placebo. Estos resultados permanecieron relativamente constantes cuando los sujetos en esteroides más potentes (grupo B) fueron excluidos, así como para los sujetos solamente de moderado a medio de tratamientos esteroides (grupo C). Los análisis post-hoc complementarios revelaron la significación estadística (p = 0.02) para la punto final primario de PGA y para la autovaloración del sujeto para la rojez (p=0.03) en el día 14.

Además las tendencias estadísticas marcadas fueron detectadas en las autovaloraciones el día 14 para la picazón, y para las valoraciones clínicas de las muestras para el escamado/costras (p = 0.08 y p=0.07, respectivamente). La efectividad observada del grupo de tratamiento se comparó al grupo de placebo en el día 14 vía el punto final de PGA disipada por el día 42. Estos resultados indican que el uso de FD001 (PG102T) como un adjunto a la terapia tópica de corticoesteroide puede ser beneficioso en el tratamiento de AD. Los resultados de prueba de laboratorio por los días 1, 14 y 42 no mostraron ninguna tendencia relacionada a la seguridad para cualquiera de las pruebas realizadas incluyendo la química clínica, conteo completo de sangre con diferencial, coagulación, bilirrubina indirecta, y macroscopía de orina. No se encontró ninguna diferencia entre los grupos de tratamiento para IgE, proteína C-reactiva, o conteos eosinófilos. Resultados de seguridad No se reportó ningún caso adverso serio para el tratamiento o placebo de FD001. Hubo 12 casos no-serios reportados para FD001 y 13 para el placebo. De éstos, hubo 10 de medio a moderado y 2 casos severos para FD001, y 13 casos de medio a moderado para el placebo. No se consideró ninguno de los casos probables o relacionados para el artículo de prueba del estudio o placebo.

Conclusiones Los resultados del análisis previsto no demostraron ninguna significación estadística entre los brazos de tratamiento en los puntos finales primarios o secundarios en el día 42. Un cambio distribucional marcado fue observado, sin embargo, en el punto final primario (PGA) en el día 14. Por esta razón, un análisis post-hoc fue conducido para este punto de tiempo que reveló una diferencia estadística significativa entre los brazos de tratamiento en el punto de tiempo del día 14. Además, algunos puntos finales secundarios demostraron estadístico tendencias estadísticas significativas (eritema p = 0.03 en la autovaloración) o marcadas (mejora de comezón p = 0.08 en la autovaloración y escamado/costras p = 0.07 en las señales de la valoración de la AD). No hubo casos adversos serios reportados en el análisis. El número de casos adversos reportados en los grupos del artículo de prueba y placebo fue comparable, y no atribuible al artículo de prueba. No hubo problemas de seguridad detectados en los valores clínicos del laboratorio. Estos datos reafirman los estudios del mamífero pequeño preclínico y del humano anecdótico que indican que los extractos de la fruta A. arguta son seguros y bien-tolerados por los receptores.

Ejemplo 7 El ejemplo siguiente describe un estudio con placebo-controlado, aleatorio, doble-ciego, para evaluar el uso de un extracto de fruto del kiwi fortificado para disminuir las marcaciones de CADESI (Olivry y colaboradores, Vet. Dermatol, 13:77-87, 2002; Hanifin y colaboradores, Exp. Dermatol, 10:11-18, 2001; Kunz y colaboradores., Dermatology, 1997, 195, 10-19) de perros atópicos. El objetivo de este estudio era evaluar la efectividad del extracto de fruta A. arguta FD001 (PG102T) como una terapia adjunta a un tratamiento con esteroides estándar para la dermatitis atópica (AD) en perros. La respuesta al tratamiento se determinó usando la evaluación global del investigador que incorpora la escala de CADESI y las valoraciones de Pruritis del poseedor. Los objetivos adicionales del estudio era determinar la efectividad del extracto de fruto del kiwi como una monoterapia para disminuir la necesidad del uso de esteroides en el control de signos clínicos de la AD, y para determinar la seguridad. Diseño del estudio Un período de dos semanas, con dosis bajas de esteroide-solamente (0.2 mg/kg) (prednisolona) fue administrado para determinar la sensibilidad a los esteroides en los perros, mientras que se mantienen los síntomas residuales de la AD. Todos los perros estaban sanos, excepto con la enfermedad no-estacional de la piel con AD. La diagnosis de la AD incluyó por lo menos tres reacciones positivas a una prueba intradérmica de alergia de la piel. Los perros recibieron el tratamiento de control de pulgas (Advantage), y experimentaron un ensayo dietético para eliminar alergias al alimento como la causa principal de la sintomología. Los perros estaban libres de medicaciones concomitantes tal como antihistamínicos y esteroides inyectables de acción retardada, y libres de cualquier infección secundaria. Una marcación de la línea base mínima (día 1) de 25 en la escala de CADESI, fue requerida para la inclusión. Durante la terapia adjunta (días 14-42) los perro recibieron prednisolona vía oral (0.2 mg/kg) cada día además del artículo de prueba. Los sujetos de estudio consumieron el polvo de FD001 (inscripción de 60 participantes) (preparado según lo descrito en el ejemplo 4) en una dosis de 30 mg/kg una vez al día, o placebo (MCC), por un período de 28 días. Los sujetos fueron seleccionados al azar en grupos del artículo de prueba y del placebo en una relación de 1:1. Los sujetos fueron determinados usando la escala de CADESI y por el grado de Pruritis del poseedor en los diarios semanales. Los especímenes de sangre se colectan para determinar seguridad y los puntos finales secundarios en el primer día del período de esteroide-solamente y en los días 1 y 28 del estudio. Los análisis de estas muestras incluyen la medida del conteo completo de sangre, química clínica, IgE total, alérgeno IgE específico, y la quimocina TARC. Al final del período de tratamiento con terapia adjunta, ningún perro que mostró mejora en su evaluación global será avanzado al día 28, una segunda etapa de etiqueta abierta del estudio, que consiste en el artículo de prueba FD001 (30 mg/kg/día) como una monoterapia para AD. Los sujetos experimentaron una recaída en signos de la AD, o requirieron medicaciones de ayuda serán considerados como fallas del tratamiento de la etapa dos y descontinuados del estudio. Los sujetos que mantienen su mejora en la etapa dos se considerarán como los respondedores del tratamiento. La valoración por la escala de CADESI y diarios de Pruritis serán hechos cada siete días. Los especímenes de la sangre serán colectados durante la etapa dos los días 14 y 28. El panel de sangre del laboratorio será idéntico al de la etapa uno del estudio. Métodos estadísticos El análisis de efectividad primaria será la proporción de sujetos con respuesta positiva al tratamiento basado en la evaluación global del investigador usando la prueba Chi-cuadrado. Un análisis interino puede ser conducido cuando la primera mitad de los participantes termina el estudio. Un p<0.05 se considera significativo. Conclusiones La dermatitis atópica es la segunda alergia más común en los perros, que ocurre en aproximadamente 10% de la población canina (Scott y colaboradores, Small Animal Dermatology, 5th Ed., WB Saunders, 500-518, 1995). Generalmente, la AD en perros tiende a empeorarse con la edad. Los animales afectados sufren de infecciones recurrentes de la piel y oído que disminuyen grandemente su calidad de la vida. A pesar del hecho que la AD es una enfermedad muy común, las opciones terapéuticas disponibles son limitadas. Los tratamientos sistémicos tal como glucocorticoides y ciclosporina pueden ser eficaces pero tienen el potencial para efectos nocivos (Olivry y colaboradores., Vet. Dermatol, 13:77-87, 2002; Ryffel, y colaboradores., Arch. Toxicol., 53:107-141, 1983). Los glucocorticoides tienden a ser menos eficaces con el uso crónico, la ciclosporina oral puede ser de costo-prohibitivo en perros de casta grandes, y el índice de éxito de antihistamínícos es frecuentemente bajo ((Scott y colaboradores, Small Animal Dermatology, 5th Ed., WB Saunders, 500-518, 1995). La identificación de un tratamiento seguro y efectivo para disminuir los signos y síntomas de la AD canina será de enorme ventaja. La efectividad de FD001, como un tratamiento adjunto o como monoterapia, puede disminuir la necesidad del uso de esteroides en el control de la AD en perros. También se prevé que los extractos de fruto del kiwi serán utilizados como terapia adjunto para disminuir la potencia de los esteroides usados. Es concebible que el extracto se podría administrar como cápsula, un polvo mezclado con alimentos, o como componente del alimento. El suplemento dietético con las preparaciones de fruto del kiwi puede ser efectivo en el soporte de la piel sana en perros con atopia cuando es utilizado solo o conjuntamente con los esteroides de dosis baja. Eiemplo 8 El ejemplo siguiente describe el uso de A. arguta y extractos de la misma para la regulación de la inmunorespuesta en una enfermedad inflamatoria alérgica y no-alérgica. El objetivo de este estudio será obtener la evidencia preliminar de la efectividad de FD001 (PG102T), administrado oralmente durante 28 días, en voluntarios adultos con enfermedad alérgica tal como dermatitis atópica (AD), asma, o rinitis alérgica de moderada a severa. Un objetivo secundario del estudio será medir la biodisponibilidad del producto usando formas alternativas de liberación (por ejemplo cápsulas, un concentrado agregado a una bebida, emulsión, o ingrediente de alimento). Otro objetivo del estudio será determinar el efecto de FD001 en niveles de los marcadores pro-inflamatorios de la sangre tal como citocinas, quimocinas, leucotrienos, o anticuerpos, en la proliferación de células mieloides (por ejemplo leucocitos, macrófagos, mastocitos, etc.), y en factores relacionados a la expresión y transcripción del gen. Un estudio del paciente no internado doble-ciego, con placebo-controlado, será conducido en el cual los sujetos serán administrados con FD001 como el artículo de prueba o placebo. Los brazos de tratamiento del estudio pueden incluir FD001 como monoterapia o como terapia adjunta a los esteroides orales de potencia media a moderada. Alternativamente, el tratamiento de esteroides para los sujetos con AD puede ser tópico. El uso de esteroides puede ser como un aerosol intranasal o inhalador para los sujetos con rinitis alérgica y asma, respectivamente. Los criterios de inclusión para el sujeto, las valoraciones de efectividad, seguridad, y tolerabilidad, y los análisis estadísticos serán determinados usando los métodos similares a los descritos en el ejemplo 6. Una manifestación de la alergia, dermatitis atópica, es un trastorno común de la piel en niños y se observa generalmente durante los primeros 6 meses de vida (Spergel and Paller, J. Allergy Clin. Immunol., 112:S128-S139, 2003). El predominio de la AD parece aumentar por todo el mundo, al igual que otros trastornos atópicos, incluyendo asma (Larsen and Hanikin, Immunology and Allergy Clinics of North America, 22:1-25, 2002; Wollenberg y colaboradores, Clin. Exp. Dermatol, 25:530-534, 2000; Mannino y colaboradores, Mor Mortal Wkly Rep CDC Surveill Summ., 47:1-27, 1998; Linneberg y colaboradores, Allergy, 55:767-772, 2000). Los pacientes con AD experimentan efectos negativos serios en la calidad de vida, y los tratamientos disponibles actualmente pueden ser una fuente de efectos secundarios adversos, y una carga financiera para la familia y sociedad. Las manifestaciones cutáneas de atopia representan a menudo el principio de crisis atópicas. En base de varios estudios longitudinales, aproximadamente la mitad de los pacientes de AD desarrollará asma, particularmente con AD severa, y dos terceras partes desarrollarán rinitis alérgica (Leung y colaboradores, J. Clin. Invest., 113:651-657, 2004; Spergel y colaboradores, J. Clin. Invest., 101:1614- 1622, 1998). La identificación de un tratamiento seguro y efectivo para la AD será bienvenido. La efectividad de FD001 puede también disminuir la cantidad o potencia de esteroides u otras medicaciones usadas en el control de AD, asma, o rinitis alérgica. Como el sujeto del último análisis, uno puede también prever el uso de los extractos de fruto del kiwi, concentrados, otras preparaciones, o de extractos de otras partes de la planta (por ejemplo la corteza, tallo, raíz, hojas), para el tratamiento adjunto o como una monoterapia para la AD, asma, rinitis alérgica, u otras condiciones mediadas con leucotrieno tal como alergias a alimentos y urticaria crónica. Como una extensión lógica de este trabajo, el uso de los productos de fruto del kiwi como terapia para condiciones alérgicas en mamíferos pequeños (por ejemplo, perros, ver también ejemplo 7) se puede explorar aún más. Cada referencia o publicación descrita adjunto es incorporada en su totalidad en la presente por referencia. Mientras que varias modalidades de la presente invención se han descrito detalladamente, es evidente que las modificaciones y adaptaciones de estas modalidades ocurrirán a los expertos en la técnica. Debe expresamente entenderse, sin embargo, que tales modificaciones y adaptaciones están dentro del alcance de la presente invención, según lo indicado en las reivindicaciones ejemplificadas siguientes:

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES 1. Un método para regular una inmunorespuesta en un mamífero, que comprende administrar una preparación de fruto del kiwi enriquecido al mamífero en una cantidad suficiente para regular una inmunorespuesta en el mamífero, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido se selecciona del grupo que consiste de: fruta fresca, fruta comprimida, fruta hervida, fruta cocida, fruta prensada, fruta condensada, fruta seca y un concentrado de jugo de fruto del kiwi enriquecido en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido no ha sido extraído. 2. Un método para regular una inmunorespuesta en un mamífero, que comprende administrar una preparación de fruto del kiwi enriquecido al mamífero en una cantidad suficiente para regular una inmunorespuesta en el mamífero, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido es selecciondo del grupo que consiste de: un extracto o concentrado de la hoja, y un extracto o concentrado de la corteza. 3. Un método para regular una inmunorespuesta en un mamífero, que comprende administrar al mamífero una cantidad suficiente para regular una inmunorespuesta en el mamífero: a) una preparación de fruto del kiwi; y b) un componente seleccionado del gurpo que consiste de: probióticos; paredes y fragmentos celulares bacterianos; proteína de suero; alanina; ácidos grasos; esteres de ácido graso; monoglicéridos; diglicéridos; triglicéridos; inositol; turmérico; curcumina; metilsulfonilmetano (MSM); ginseng; jengibre; y proantocianidina. 4. Un método para regular una inmunorespuesta en un mamífero, que comprende administrar al mamífero una cantidad suficiente para regular una inmunorespuesta en el mamífero: a) una preparación del fruto kiwi enriquecido; y b) un componente seleccionado del grupo que consiste de: esteroides, antihistamínicos, anticuerpos, antibióticos, ciclosporinas, antimicóticos, reguladores de la función respiratoria, analgésicos, agonistas ß, modificadores de leucotrieno, citocina o antagonistas del receptor de citocina, inhibidores de fosfodiesterasa, cromoglicato de sodio, nedocrimilo, cafeína, teofilina, carbobenzoxi beta-alanil taurina, e inhibidores de la función de la célula T. 5. El método de conformidad con la reivindicación 3 o reivindicación 4, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido se selecciona del grupo que consiste de: un extracto o concentrado de fruta, extracto o concentrado de hoja, extracto o concentrado de tallo, extracto o concentrado de corteza, extracto o concentrado de raíz, fruta fresca, fruta comprimida, fruta hervida, fruta cocida, fruta prensada, fruta condensada, fruta seca, un concentrado de jugo de fruto del kiwi enriquecido, una preparación producida por la extracción en agua de la fruta que tiene una temperatura de 0°C a aproximadamente 80°C; una preparación producida por la extracción directa de un concentrado soluble en agua de fruto del kiwi enriquecido con acetato de etilo, una preparación producida por la extracción de fruto del kiwi enriquecido en agua destilada, y una preparación producida por la extracción secuencial de fruto del kiwi enriquecido en agua, cloroformo y acetato de etilo. 6. Un método de conformidad con la reivindicación 3 o reivindicación 5, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido es un extracto o concentrado preparado de una parte de fruto del kiwi enriquecido seleccionado del grupo consistente de: hoja, tallo, corteza, raíz, y cualquier combinación de los mismos. 7. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 3 a 5, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido se selecciona del grupo que consiste de: fruta fresca, fruta comprimida, fruta hervida, fruta cocinada, fruta presionada, y fruta condensada. 8. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 3 a 5, en donde el fruto del kiwi enriquecido es fruta seca. 9. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 3 a 5, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producido por un método que incluye una etapa de secar la fruta. 10. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 3 a 5, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido es un concentrado del jugo del fruto kiwi enriquecido. 11. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 3 a 5, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por la extracción del fruto en el agua que tiene una temperatura de aproximadamente 0°C a aproximadamente 25°C. 12. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 3 a 5, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por la extracción del fruto en agua a temperatura ambiente. 13. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 3 a 5, en donde la preparación de fruto del kiwi es producido por la extracción directa de un concentrado soluble en agua de fruto del kiwi enriquecido con acetato de etilo. 14. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en donde la preparación de fruto del kiwi es proporcionada en una cantidad suficiente para regular una inmunorespuesta Th2 y una Th1 en el mamífero. 15. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en donde la preparación de fruto del kiwi es proporcionado en una cantidad suficiente para regular la cantidad de un isotipo del anticuerpo producido por el mamífero seleccionado del grupo que consiste de IgE, lgG2a, e IgG 1. 16. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en donde la preparación de fruto del kiwi es proporcionado en una cantidad suficiente para disminuir la producción y/o niveles de por lo menos una citocina Th2 en el mamífero o aumentar el nivel de por lo menos una citocina Th1 en el mamífero. 17. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en donde la preparación de fruto del kiwi es proporcionada en una cantidad suficiente para disminuir el nivel de o producción de por lo menos un leucotrieno en el mamífero. 18. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en donde la preparación de fruto del kiwi es proporcionada en una cantidad suficiente para disminuir el nivel de la expresión de un factor de transcripción seleccionado del grupo que consiste de: GATA-3, T-bet y NFATc2 en el mamífero. 19. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18, en donde el mamífero tiene o está en riesgo de desarrollar una condición en la cual es desdeable el mejoramiento de una respuesta Th1 y/o supresión de una respuesta Th2. 20. Un método de conformidad con la reivindicación 19, en donde el mamífero tiene o está en riesgo de desarrollar una enfermedad alérgica o enfermedad inflamatoria no-alérgica. 21. Un método de conformidad con la reivindicación 20, en donde la enfermedad alérgica es regulada por los leucotrienos. 22. Un método de conformidad con la reivindicación 20, en donde la enfermedad alérgica es asma. 23. Un método de conformidad con la reivindicación 20, en donde la enfermedad alérgica es dermatitis atópica. 24. Un método de conformidad con la reivindicación 19, en donde el mamífero tiene o está en riesgo de desarrollar una infección viral. 25. Un método de conformidad con la reivindicación 19, en donde el mamífero tiene o está en riesgo de desarrollar un cáncer. 26. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 25, en donde el fruto del kiwi se selecciona del grupo que consiste de: Actinidia arguta, Actinidia kaomikta y Actinidia polygama. 27. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 25, en donde el fruto del kiwi enriquecido es Actinidia arguta. 28. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido es proporcionada en una composición en una cantidad de entre aproximadamente 0.01 % y aproximadamente 95 % en peso basado en el peso total de la composición. 29. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 28, en donde la etapa de administrar comprende administrar la preparación de fruto del kiwi enriquecido con un portador, adyuvante, o diluyente al mamífero. 30. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 29, en donde la etapa de administrar comprende proporcionar la preparación de fruto del kiwi enriquecido al mamífero como una tableta, polvo, tableta efervescente, polvo efervescente, cápsula, líquido, suspensión, granulo o jarabe. 31. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 29, en donde la etapa de administrar comprende proporcionar la preparación del de fruto del kiwi enriquecido al mamífero en un alimento natural. 32. Un método de conformidad con la reivindicación 31, en donde el alimento natural se selecciona del grupo que consiste de: mercancías de panadería fina, pan, rollos, cereales para desayuno, queso procesado, queso sin procesar, condimentos, productos lácteos, pudines, postres de gelatina, bebidas carbonatadas, tés, mezclas de bebida en polvo, productos pesqueros procesados, bebidas a base de frutas, bebidas a base de verdura, chicle, confitería dura, productos lácteos congelados, productos de carne procesados, extensiones a base de nuez, pastas, productos procesados de aves de corral, jugos y salsas, papas picadas, vegetales picados, papas fritas a la inglesa, chocolate, galletas, caramelo, regaliz, helados, alimentos deshidratados, productos alimenticios cortados, productos alimenticios procesados, especias, bebidas alcohólicas, tallarines, alimentos fermentados, sopas, mezclas de sopa, productos a base de soya, productos para untar a base de aceite vegetal, y bebidas a base de vegetales. 33. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 29, en donde la etapa comprende aplicar una composición cosmética que comprende la preparación de fruto del kiwi enriquecido al mamífero. 34. Un método de conformidad con la reivindicación 33, en donde la composición cosmética es proporcionada en una forma seleccionada del grupo consistente de: loción, crema, esencia, polvo fino, emulsión, compresa, jabón, champú, aclaración, purificador, solución para lavado de cuerpo, solución para lavado o tratamiento. 35. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 29, en donde la etapa de administrar comprende proporcionar la preparación de fruto del kiwi enriquecido al mamífero en un aditivo alimenticio. 36. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 35, que además comprende administrar al mamífero un agente seleccionado del grupo consistente de: ácidos grasos; policétidos; ácidos orgánicos; compuestos orgánicos pequeños; aminoácidos aromáticos; fenilpropanoides; terpenoides; esteroides; alcaloides; corinas; porfirinas; péptidos lineales; péptidos cíclicos; depsipéptidos; derivados de aminoácidos; nucleósidos; nucleótidos; carbohidratos; proteínas; células, fragmentos celulares; preparaciones herbarias; especias; minerales; esterilizadores; condimentos; vitaminas; y electrólitos. 37. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 35, que además comprende administrar a un mamífero un agente seleccionado del grupo que consiste de: probióticos; paredes y fragmentos celulares bacterianos; proteína del suero; taurina; alanina; ácidos grasos; esteres del ácido graso; monoglicéridos; diglicéridos; triglicéridos; inositol; turmérico; curcumina; romero; ácido rosmarínico; metiisulfonilmetano (MSM); ginseng; jengibre; proantocianidina; y ß-carotenos. 38. Un método de conformidad con la reivindicación 37, en donde los ácidos grasos son seleccionados del grupo que consiste de: ácido linolénico conjugado, ácido eicosapentaénoico, ácido docosahexaenóico, ácido ?-linolénico, ácido a-linolénico, ácido de dihomo ?-linolénico, y ácido estearidónico. 39. Método de conformidad con las reivindicaciones 1 a 38, que además comprende administrar al mamífero una preparación diferente de especies Actinidia. 40. Un método de conformidad con la reivindicación 39, en donde las diferentes especies de Actinidia son seleccionadas del grupo que consiste de: A. chenensis, A. deliciosa, A. arguta, A polygama, y A. kolomikta. 41. Composición que regula una inmunorespuesta en un mamífero, que comprende una preparación de fruto del kiwi enriquecido y por lo menos un compuesto activo adicional para regular una inmunorespuesta en un mamífero. 42. Composición de conformidad con la reivindicación 41, en donde el compuesto activo adicional es para tratar o prevenir enfermedades alérgicas en un mamífero. 43. Composición de conformidad con la reivindicación 41, en donde el compuesto activo adicional se selecciona del grupo que consiste de: esteroides, antihistamínicos, anticuerpos, antibióticos, ciclosporinas, antimicóticos, reguladores de la función respiratoria, analgésicos, ß-agonistas, modificadores leucotrieno, antagonistas receptores de citocina o citocina, inhibidores de fosfodiesterasa, cromoglicato de sodio, nedocrimilo, cafeína, teofilina, carbobenzoxi beta-alanil taurina, e inhibidores de la función celular T. 44. Composición de conformidad con la reivindicación 41, en donde el compuesto activo adicional se selecciona del grupo que consiste de: probióticos; paredes y fragmentos celulares bacterianos; proteína del suero; alanina; ácidos grasos; esteres del ácido graso; monoglicéridos; diglicéridos; triglicéridos; inositol; turmérico; curcumina; metiisulfonilmetano (MSM); ginseng; jengibre; y proantocianidina. 45. Composición de conformidad con la reivindicación 44, en donde los ácidos grasos son seleccionados del grupo que consiste de: ácido linolénico conjugado, ácido eicosapentaénoico, ácido docosahexaenóico, ácido ?-linolénico, ácido a-linolénico, ácido dihomo-?-linolénico, y ácido estearidónico. 46. Composición de conformidad con la reivindicación 41, en donde la composición es una composición farmacéutica. 47. Composición de conformidad con la reivindicación 40, en donde la composición es un alimento natural. 48. Composición de conformidad con la reivindicación 41, en donde la composición es un aditivo alimenticio. 49. Composición de conformidad con la reivindicación 41, en donde la composición es un cosmético. 50. Composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 41 a 49 en donde el fruto del kiwi enriquecido se selecciona del grupo que consiste de: Actinidia arguta, Actinidia kolomikta y Actinidia polygama . 51. Composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 41 a 49, en donde el fruto del kiwi enriquecido es Actinidia arguta. 52. Composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 41 a 49, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido es un extracto o concentrado preparado de una parte de fruto del kiwi enriquecido seleccionado del grupo que consiste de la fruta, hoja, tallo, corteza, raíz, y cualquier combinación de los mismos. 53. Composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 41 a 49, en donde el de fruto del kiwi resistente se selecciona del grupo que consiste de: fruta fresca, fruta comprimida, fruta hervida, fruta cocida, fruta prensada, fruta condensada, fruta seca y un concentrado de jugo de fruto del kiwi enriquecido en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido no ha sido extraído. 55. Composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 41 a 49, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido producido por un método que incluye una etapa de secar la fruta. 56. Composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 41 a 49, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido es un concentrado de jugo de fruto del kiwi. 57. Composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 41 a 49, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por la extracción del fruto en agua a temperatura ambiente. 58. Composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 41 a 49, en donde la preparación de fruto del kiwi enriquecido es producida por la extracción directa de un concentrado soluble en agua de fruto del kiwi enriquecido con el acetato de etilo. 59. Composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 41 a 49, en donde el extracto es preparado por la extracción de fruto del kiwi enriquecido en agua destilada. 60. Composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 41 a 49, en donde el extracto es un extracto de acetato de etilo de fruto del kiwi enriquecido. 61. Uso del fruto del kiwi enriquecido o preparación del mismo y un agente seleccionado del grupo que consiste de: un esteroide, antihistamínicos, anticuerpos, antibióticos, ciclosporinas, antimicóticos, reguladores de la función respiratoria, analgésicos, ß-agonistas, modificadores leucotrieno, antagonistas receptores de citocina o citocina, inhibidores de fosfodiesterasa, cromoglicato de sodio, nedocrimilo, cafeína, teofilina, carbobenzoxi beta-alanil taurina, e inhibidores de la función celular T, en la preparación de una composición para el tratamiento de una enfermedad o condición que está asociada con la desregulación de la función inmune. 62. Uso del fruto del kiwi enriquecido o de una preparación del mismo y de un agente seleccionado del grupo que consiste de: probióticos; paredes y fragmentos celulares bacterianos; proteína del suero; alanina; ácidos grasos; esteres del ácido graso; monoglicéridos; diglicéridos; triglicéridos; inositol; turmérico; curcumina; metiisulfonilmetano (MSM); ginseng; jengibre; y proantocianidina. 63. Uso de conformidad con la reivindicación 62, en donde los ácidos grasos son seleccionados del grupo que consiste de: ácido linolénico conjugado, ácido eicosapentaenoico, ácido docosahexaenóico, ácido ?-linolénico, ácido a-linolénico, ácido dihomo ?-linolénico, y ácido estearidónico. 64. Uso de cualquiera de las reivindicaciones 61 a 63, en donde la composición es para el tratamiento de una enfermedad o condición que está asociada con la producción del leucotrieno o actividad. 65. Uso de cualquiera de las reivindicaciones 61 a 63, en donde la enfermedad o condición es seleccionada del grupo que consiste de: dermatitis atópica, asma, alergia al alimento, rinitis alérgica, y urticaria crónica. 66. Uso de cualquiera de las reivindicaciones 61 a 63, en donde la preparación del de fruto del kiwi enriquecido se selecciona del grupo que consiste de: un extracto o concentrado de fruta, extracto o concentrado de hoja, extracto o concentrado de tallo, extracto o concentrado de corteza, extracto o concentrado de raíz, fruta fresca, fruta comprimida, fruta hervida, fruta cocida, fruta prensada, fruta condensada, fruta seca, concentrado de jugo de fruto del kiwi enriquecido, una preparación producida por la extracción directa de un concentrado soluble en agua de fruto del kiwi enriquecido con acetato de etilo, una preparación producida por la extracción de fruto del kiwi enriquecido en agua destilada, y una preparación producida por la extracción secuencial en agua, cloroformo y acetato de etilo. 67. Un método para regular una inmunorespuesta en un mamífero, que comprende administrar una preparación común de fruto del kiwi al mamífero en una cantidad suficiente para regular una inmunorespuesta en el mamífero, en donde la preparación común de fruto del kiwi es seleccionada del grupo que consiste de: un extracto o un concentrado de fruta, extracto o un concentrado de hoja, extracto o concentrado del tallo, extracto o concentrado de corteza, extracto o concentrado de raíz, fruta fresca, fruta comprimida, fruta hervida, fruta cocida, fruta prensada, fruta condensada, fruta seca, concentrado de jugo de fruto del kiwi, una preparación producida por la extracción del fruto en agua a temperatura ambiente; una preparación producida por la extracción directa de un concentrado soluble en agua común de fruto del kiwi con acetato de etilo, preparación producida por la extracción común de fruto del kiwi en agua destilada, y una preparación producida por la extracción secuencial en agua, cloroformo y acetato de etilo.