CN102028093A - 玉米醒酒肽的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种玉米醒酒肽及其制备方法，发明产品是以玉米黄粉为原料，采用碱性蛋白酶Alcalase在其最适条件下水解2h后，再加入复合蛋白酶Protamex在其最适条件下水解3h后，通过粗分离、超滤、浓缩和喷雾成型获得玉米醒酒肽粉。该产品中分子量小于1200Da的肽段占73.19％，丙氨酸和亮氨酸的含量分别大于6.43％和12.42％。本发明产品可以通过提高血液中的丙氨酸和亮氨酸浓度产生稳定的辅脱氢酶NAD⁺，增强乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的活性，促进体内乙醇的分解和代谢，从而降低血液中乙醇的浓度，增加辅酶的供给，有保肝护肝作用，对酒精引起的肝脏损害，如脂肪肝等可起到预防作用。

Description

玉米醒酒肽的制备方法

技术领域

本发明涉及一种玉米醒酒肽，本发明还涉及一种该活性肽的制备方法。

背景技术

中国是酒的故乡，中华民族五千年历史长河中，酒和酒类文化一直占据着重要地位。酒是一种特殊的食品，即属于物质，又融于人们的精神生活之中。酒文化作为一种特殊的文化形式，在传统的中国文化中有其独特的地位。在几千年的文明史中，酒几乎渗透到社会生活中的各个领域。可以说，在我国的饮食文化中，有宴必有酒。尤其是近年来，随着人类生活环境的变化，饮酒的机会大大增加。医学证明，少量饮酒可加速血液循环、消除疲劳，一些药酒还有治病的效果。但长期过量饮酒则对人体健康十分不利，会损害肝、胃、脾等内脏器官，造成胃溃疡、脂肪肝、肝硬化、大脑皮质萎缩等疾病。

近年来，随着保健意识的增强，人们已经注意到了解酒保肝的重要性，几种解酒药已经问世。国内有些单位利用中药研制出一些口服液或饮料，供人们饮酒时饮用，以加速酒精在体内的代谢，保护肝脏等。

玉米黄粉是湿法玉米淀粉加工中产量最大、含蛋白质量最高的副产物。玉米黄粉中的主要蛋白质是醇溶蛋白，因其水溶性差且氨基酸组成不平衡，限制了其在食品工业的应用。玉米醇溶蛋白含有高比例的亮氨酸、丙氨酸、异亮氨酸和脯氨酸，这种独特的氨基酸组成为其制备生物活性肽提供了良好的原料优势。采用特定的酶及酶解条件以及现代化生物分离技术来生产富含丙氨酸和亮氨酸的醒酒肽，可以有效的提高玉米资源的利用率。

目前有许多资料显示，摄入含有大量氨基酸的蛋白饮料可以促进酒精的分解和代谢。动物实验表明，一定剂量的玉米肽确有抑制和减轻酒精的急性毒性的效果。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种玉米醒酒肽，本发明要解决的另外一个技术问题是提供一种该活性肽的制备方法。

本发明产品玉米醒酒肽是用Alcalase碱性蛋白酶和Protamex复合蛋白酶复合水解玉米黄粉，以水解度、水解液中蛋白质含量和氨基酸含量为指标进行生产条件和分离条件的优化，并采用粗分离、超滤、浓缩、喷雾成型等工艺条件对该混合物进行分离得到的多肽混合物粉状固体。该产品的水解度≥40％，水解液中可溶性蛋白含量≥40mg/mL，丙氨酸和亮氨酸的含量分别大于6.43％和12.42％，分子量小于1200Da。

本发明所使用的Alcalase碱性蛋白酶具有高度的安全性，符合FAO/WHO/JECFA/FCC推荐的食品级酶制剂标准。Alcalase碱性蛋白酶是一种非特异性肽键内切酶，主要作用于含疏水性羧基的肽键，由选育出的地衣芽抱杆菌生产而得，其主要有效成分枯草杆菌蛋白酶A，它是一种高效的细菌蛋白酶，属内切蛋白酶类。Protamex是枯草杆菌蛋白酶，这类酶的活性中心是丝氨酸残基，属于丝氨酸蛋白酶，这两种蛋白酶均已工业化生产，价格便宜，适合玉米醒酒肽的工业化生产的要求。

以下是本发明产品玉米醒酒肽的具体制备方法：

1、原料预处理

玉米蛋白粉与水≥1∶2.5比例混合，在0.1MPa条件下蒸煮30min后，配置成底物浓度为10％-25％混合液，待用。

2、玉米醒酒肽的制备

取碱性蛋白酶Alcalase，在底物浓度10-25％，E：S 3％，温度60℃，pH 8.5最适条件下水解玉米黄粉120min后，调节pH值至7.0，加入复合蛋白酶Protamex，在底物浓度10-25％，E：S 1％，温度50℃，pH 7.0最适水解条件下，水解玉米黄粉180min。

3、超滤

玉米黄粉酶解液经3000r/min离心15min后，上清液首先用100kDa截断分子量的超滤膜进行超滤，其滤过液用10-6kDa截断分子量的超滤膜进行超滤，小于10-6kDa的超滤分级产物备用。

4、浓缩

水解液浓缩条件：将上述滤液用蒸发器浓缩至固形物25-55％。

5、喷雾干燥

喷雾干燥条件：入口温度为110℃，流速为15％，抽气量为80％。在此条件下，玉米肽粉的回收率≥50％。

本发明的有益效果是：玉米醒酒肽可以促进体内乙醇脱氢酶代谢途径的生化反应，通过提高血液中的丙氨酸和亮氨酸浓度产生稳定的辅脱氢酶NAD⁺，增强乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的活性，促进体内乙醇的分解和代谢，从而降低血液中乙醇的浓度，增加辅酶的供给，有护肝作用，对酒精引起的肝脏损害，如脂肪肝等可起到预防作用。由于防止酒醉的成分来自植物蛋白，以其为原料的这种饮料与其它解酒、醒酒药物不同，属天然食品，即使多喝也不会对健康造成损害，所以它作为一种健康的饮料，必将为那些嗜酒或不会节制饮酒的人们带来安全。且玉米肽的小鼠动物功效表明，玉米肽具有明显的解酒功效。

具体实施方式

实施例1：

1、玉米黄粉的预处理

玉米黄粉与水≥1∶2.5比例混合，在0.1MPa条件下蒸煮30min后，配置成底物浓度为10％-25％混合液，待用。

实施例2：

1、原料的预处理方法同实施例1

2、酶：Alcalase碱性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶

3、主要检测方法

(1)蛋白含量测定：Folin-酚法

(2)氨基酸测定：全自动氨基酸分析仪

4、水解液的制备：

在碱性蛋白酶Alcalase最适水解条件下：底物浓度10-25％，E：S 3％，温度60℃，pH 8.5，水解玉米黄粉120min，调节pH值至7.0，加入复合蛋白酶Protamex，在其酶的最适水解条件：底物浓度10-25％，E：S 1％，温度50℃，pH 7.0，水解玉米黄粉180min。

实施例3：

1、原料的预处理方法同实施例1

2、水解液的制备同实施例2

3、玉米肽定性方法：考马斯亮蓝法

4、醒酒肽的分离纯化：

玉米黄粉酶解液经3000r/min离心15min后，上清液首先用100kDa截断分子量的超滤膜进行超滤，其滤过液用10-6kDa截断分子量的超滤膜进行超滤，小于10-6kDa的超滤分级产物冻干备用。

实施例4：

1、原料的预处理方法同实施例1

2、水解液的制备同实施例2

3、醒酒肽的分离纯化同实施例3

4、醒酒肽的浓缩：

将分离纯化后的醒酒肽的分离纯化液，用单效蒸发器或双效蒸发器(视生规模确定蒸发器的效数)浓缩至固形物25-55％。

实施例5：

1、原料的预处理方法同实施例1

2、水解液的制备同实施例2

3、醒酒肽的分离纯化同实施例3

4、醒酒肽的浓缩同实施例4：

5、醒酒肽的喷雾干燥

将醒酒肽的浓缩液进行喷雾干燥得玉米醒酒肽肽粉，玉米肽粉回收率≥50％。以下是本发明产品中和玉米醇溶蛋白中的氨基酸组成。

醒酒肽粉及玉米醇溶蛋白的氨基酸组成表(％)

Claims (5)

1.一种玉米醒酒肽，是以玉米黄粉为原料，采用碱性蛋白酶Alcalase水解2h后，再用Protamex复合蛋白酶水解3h，获得具有醒酒活性的多肽混合物，通过粗分离、超滤、浓缩、喷雾成型获得醒酒肽粉；该肽粉的收率为50％，其中分子量小于1,200Da的肽段占73.19％以上，丙氨酸和亮氨酸的含量分别大于6.43％和12.42％。

2.如权利要求1所述玉米醒酒肽的制备方法，取碱性蛋白酶Alcalase，在底物浓度10-25％，E：S 3％，温度60℃，pH 8.5最适条件下水解玉米黄粉120min后，调节pH值至7.0，加入复合蛋白酶Protamex，在底物浓度10-25％，E：S 1％，温度50℃，pH 7.0最适水解条件下，水解玉米黄粉180min后，水解液于3000r/min离心15min，除去未水解的杂质和固形物，上清液为醒酒肽混合物。

3.如权利要求1所述醒酒肽的制备方法，所述的超滤具体工序如下：上清液首先用100kDa截断分子量的超滤膜进行超滤，其滤过液用10-6kDa截断分子量的超滤膜进行超滤，小于10-6kDa的超滤分级产物备用。

4.如权利要求1所述醒酒肽的制备方法，所述的浓缩具体工序如下：将分离纯化后的醒酒肽的分离纯化液，蒸发浓缩至固形物25-55％。

5.如权利要求1所述醒酒肽的制备方法，所述的喷雾干燥，具体步骤是：将醒酒肽的浓缩液进行喷雾干燥得玉米醒酒肽肽粉，玉米肽粉回收率≥50％。