CN101967449B - 具有除去有机废物难闻气味的活性的微生物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及具有从有机废物中除去臭味之功效的新型微生物及其应用。更特别地,该新型微生物具有从有机废物中阻止或除去臭味、杀死昆虫和真菌、阻止分解以及促进消化和发酵的功效。本发明的微生物具有从有机废物中阻止或除去臭味以及杀死有害昆虫和植物致病性真菌的功效,既可将所述微生物用作饲料添加剂和抗生素替代品,也可将其用于制备发酵的健康食品。

Description

具有除去有机废物难闻气味的活性的微生物及其应用
技术领域
本发明涉及具有从有机废物中除去臭味之功效的新型微生物及其应用,并且更特别地,涉及具有从有机废物中阻止或除去臭味、杀死昆虫和真菌、阻止分解和促进消化和发酵功效的微生物,及其应用。 
背景技术
在合适的湿度和温度下,通过土壤中的矿物质、金属、盐和微生物的作用生物降解人类生活不可避免地形成的污水废水和废物,以及有机废物例如动物或牲畜形成的牲畜粪便,因此导致各种气味。形成的气味是硫化氢、石碳酸或其化合物,以及其它在日常生活中散发出不受欢迎气味的刺激性气体物质,其中,无机物质和碱性物质基本上是无味的,但是几乎所有的有机物质都产生气味。特别地,硫化物和氮化物是气味的主导原因。 
因此,现有除去气味的方法包括掩蔽法、吸附法、中和法、消毒法等。掩蔽法是形成比臭味更强烈的不同气味,从而无法感知臭味的方法,但是该方法需要昂贵的香料并且难于根本除去臭味。吸附法是将臭味吸附至活性炭等之上并同时通过排气系统将臭味排放至户外的物理方法,并且该方法的缺点在于需要高的建造成本,并且由于必须定期使用昂贵的活性炭,使得维持费用很高。同样,中和法是在酸性或碱性物质中中和臭味的化学方法,从而使得臭味在其使用期间暂时消失。然而,中和法的缺点在于臭味的消失并不持久,难于处理既具有酸性基团又具有碱性基团的引发气味的物质,并且当引发气味的物质是中性时,这种方法不会有任何功效。消毒法是杀死降解有机物质的细菌的方法,从而阻止有机物质的分解以及从有机物质中散发出的气味,但其缺点在于需要昂贵的杀菌剂或防腐剂以长久维持无味状态。特别地,由于消毒法的目标是阻止有机物质分解和发酵的发生,因此不能将其用于其中仅通过有机废物的分解或发酵形成的气味而获得所 需物质的情况。 
因此,从经济的角度来看,通过使用微生物例如细菌氧化和分解有机废物的生物方法将是优选的。 
在韩国专利10-0536456和10-0581738中分离并鉴定了发酵有机废物的新型酵母菌株和杆菌属菌株,并且确认这些菌株具有阻止臭味和杀死并抑制有害昆虫和致病细菌的功效。 
另外,大多数发酵食品,包括酒精饮料、面包、醋、发酵大豆食品(大豆沙司、豆豉酱、与红辣椒混和的浓稠大豆酱等)、发酵的奶制品(奶酪、黄油、酸奶等)、盐腌食品(朝鲜泡菜、盐腌鱼等)、红参,和鳐(skates)是由天然微生物制备的,且所述发酵食品具有特有的气味。近年来,随着对发酵的兴趣的增加,已经开展了各种研究,包括制备除去了特有气味的发酵人参、Chungkookjang糖食和乳酸发酵食品。 
因此,本发明人做出了巨大的努力以开发使用微生物从有机废物中除去臭味的方法。结果,本发明人已分离并鉴定具有除去有机废物臭味之功效的新型微生物,并还发现所述新型微生物具有除去有机废物臭味、杀死昆虫和真菌、阻止分解以及促进发酵的功效,从而完成了本发明。 
发明内容
本发明的目的之一是提供具有从有机废物除去臭味之功效的微生物。 
本发明的另一个目的是提供包含所述微生物的用于发酵有机废物的微生物制剂。 
本发明的另一个目的是提供包含所述微生物的用于从有机废物阻止或除去臭味的制剂。 
本发明的另一个目的是提供包含所述微生物的杀虫剂、杀菌剂和防腐剂。 
本发明的另一个目的是提供包含所述微生物的食品添加剂和益生素制剂(probiotic agent)。 
本发明进一步的目的是提供一种制备发酵食品的方法,所述方法 包括使用所述微生物发酵食品,以及用所述方法制备的发酵食品。 
为了实现上述目的,一方面,本发明提供下列的微生物组:多粘芽孢杆菌SJP6735B6其保藏号为KCCM-10678P和干酪乳杆菌SJP6841L2其保藏号为KCCM-10729P。 
另一方面,本发明提供用于发酵有机废物的微生物制剂,所述微生物制剂包含所述微生物。 
在进一方面,本发明提供用于从有机废物阻止或除去臭味的制剂,所述制剂包含所述微生物。 
在进一方面,本发明提供杀虫剂、杀菌剂和防腐剂,其包含所述微生物。 
在另一方面,本发明提供食品添加剂或益生素制剂,其包含所述微生物。 
在进一方面,本发明提供用于制备发酵食品的方法,该方法包括使用所述微生物发酵食品,以及通过所述方法制备的发酵食品。 
通过下文的详细描述以及权利要求书将会更全面地理解本发明的其它特征和具体实施方案。 
附图说明
图1显示了本发明的微生物抗蝇幼虫的功效。在图1中,A说明了显示本发明微生物抗六种蝇幼虫之杀虫功效的图片,B是可观察到在抗所述蝇幼虫的杀虫测试中放置了3天之后的鱼的状态的照片。 
图2显示了本发明微生物的抗菌活性和抗真菌活性。 
图3说明了显示了测量本发明微生物的酒精发酵能力的照片。在图3中,A是显示测量用本发明微生物处理的食品废水中的酒精的蒸馏法的照片,B是显示测量在所述测量A中产生的蒸馏水的比重的照片。 
图4说明了用含有本发明微生物的饲料饲养的牲畜之粪便的照片。在图4中,A是用含有SJP6278AF1菌株培养液的饲料饲养之牲畜的粪便的照片,B是用含有SJP6729AF2菌种培养液的饲料饲养之牲畜的粪便的照片。 
图5显示了使用本发明微生物发酵的大蒜的照片。 
图6显示了使用本发明微生物发酵的人参的照片。 
本发明的详细描述和具体实施方案 
在本发明中,首先通过下列方式分离出具有除去有机废物臭味之功效的微生物。从毒性植物中提取毒性物质,所述毒性植物包括Aconiti ciliare、乌头(Aconitum carmichaeli)、使君子(Quisqualisindica)、黄花乌头(Aconitum koreanum)、Melia azedarah var.japonica、野茉莉(Styrax japonica)等,并将所述毒性物质涂至土壤上以诱导土壤中微生物的突变。将所述土壤应用于有机废物,结果,观察到该土壤具有除味功效。随后,从土壤中分离出24种微生物。 
在上述分离的微生物中,鉴定出六种具有除去有机废物臭味、杀死真菌和昆虫以及阻止分解的功效的微生物(SJP6728AF1、SJP6729AF2、SJP6730AF3、SJP6722A5、SJP6731B1和SJP6735B6),并且将其保藏在韩国微生物培养中心(KCCM),该中心是布达佩斯条约下的国际保藏机构,其地址:韩国首尔120-091西大门区弘济1洞,保藏编号KCCM-10678P的微生物保藏日期为2005年8月31日。同样,在上述24种微生物中,检测出11种微生物具有除去有机废物臭味、杀死真菌和昆虫以及阻止分解的功效,所述微生物不含营养素且可在低温环境下存活,然后鉴定了显示所述功效的11种微生物(SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6276AF6、SJP6843AF7、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3、SJP6723L4和SJP6742L5),并将其保藏在KCCM,保藏编号KCCM-10729P的微生物保藏日期为2005年12月29日。在上述保藏的17种微生物中,7种被鉴定为酵母菌,另外10种被鉴定为杆菌属。 
所述17种SJP微生物发酵有机材料的能力、阻止分解的能力、阻止气味的能力和杀虫/杀真菌能力是极好的。特别地,被鉴定为酵母菌的微生物菌株(SJP6728AF1、SJP6729AF2、SJP6730AF3、SJP6840AF4、SJP6726AF6、SJP6843AF7和SJP6723L4)易于在厌氧和好氧环境下培养,并且除杀真菌能力外,所述菌株比被鉴定为杆菌属的微生物菌株(SJP6722A5、SJP6731B1、SJP6735B6、SJP6844AF5、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3和SJP6742L5)具有更好的能力。所述功效随培养基的组成而变化。 
另外,分析本发明SJP微生物中的杆菌的功效,结果,发现所述杆菌与酵母菌相比具有较弱的发酵能力和杀虫能力,但是在抗菌测试中显示出高的抗菌功效,抗菌功效依次为SJP6735B6、SJP6841L2、SJP6722A5、SJP6732B2、SJP6719B3和SJP6734B4。 
当在特定的体系中连续使用所述微生物三个月或更久,其阻止气味和控制有害昆虫的功效会慢慢降低,但是当在位于其它位置的其它体系中使用所述微生物时,其再次显示在起初体系中所显示的功效。这表明了由于微生物(腐败细菌)对特定微生物具有改善耐性,所述微生物阻止气味和控制有害昆虫的活性相对降低。因此,当工业培养1-2种所述微生物时,以特定比例将所述微生物互相混和并使用的同时,以一个月的间隔用其它微生物替换它们,可阻止由有害细菌的耐受性而引起的功效降低。 
另外,当将所述微生物添加至饲料中时,促进了消化,并且当使用这些微生物制备发酵食品时,发酵食品具有比现有发酵法制备的发酵食品更好的效果。 
在本发明的7种SJP酵母菌中,可将属于酵母菌属(genusSaccharomyces)的SJP6728AF1和SJP6729AF2用于发酵食品。其原因在于,尽管所述7种酵母菌具有相同的发酵能力,但是根据由韩国食品及药物机构提供的韩国食品添加剂代码,允许使用属于酵母属(Saccharomyces)的酵母菌。将新型菌株SJP6728AF1和SJP6729AF2的特性与现有的S.Exiguous菌株相比,结果,当把S.Exiguous接种在食品废物中时,即使24小时之后也不产生酒精气味,但是当使用SJP6728AF1和SJP6729AF2处理食品废物时,90分钟后便可感知酒精气味。 
实施例
在下文中,参考具体实施例将进一步详细描述本发明。然而,本领域技术人员应理解,这些实施例并不限制本发明的范围,并且可在本发明的精神和范围之内做出各种改变和修改。 
实施例1:新型微生物的分离和鉴定,及其杀虫、杀菌和阻止气味的功效
1-1:微生物的分离 
为了筛选具有强耐毒性和强存活性的微生物并诱导其突变,以相同的量稀释300g毒性植物,包括Aconiti ciliare、乌头(Aconitumcarmichaeli)、使君子(Quisqualis indica)、黄花乌头(Aconitumkoreanum)、Melia azedarah var.Japonica和野茉莉(Styraxjaponica),将其添加水至3升,并在70-80℃下热水提取2-3小时,随后提取毒性物质。 
连续6个月,将所述的提取物和盐周期性涂至各种土壤上,包括贫土(barren soil)、富土(rich soil)、腐叶土壤和蚯蚓粪,并且随后收集用提取物处理的土壤,并且将其用于位于朝鲜Shiheung-shi,Kyunggi-do的食品废物堆肥发酵研究室(food waste compostfermentation facility)。结果,检测12种臭味(包括氨和硫化氢)为0.00ppm(表1)。 
表1:食品废物处理植物中的气味 
  测试项   标准(ppm)   结果(ppm)
  氨   ≤2   0.00
  甲基硫醇   ≤0.004   0.000
  硫化氢   ≤0.06   0.00
  二甲硫   ≤0.05   0.00
  二甲基二硫化物   ≤0.03   0.000
  三甲基氨   ≤0.02   0.000
  乙醛   ≤0.1   0.00
  苯乙烯   ≤0.8   0.03
  丙醛   ≤0.1   0.00
  丁醛   ≤0.1   0.000
  正戊醛   ≤0.02   0.000
  异戊醛   ≤0.006   0.000
  难闻气味   ≤20   8次
同样,在食品废物堆肥发酵研究室中,以12-13吨/天的量制备堆肥并且其水含量为65-70%,但是当把使用提取物处理的土壤用于植物时,堆肥的制备降低至5-6吨/天,其水含量为45-48%,并且其体积也减少至1/3。 
另外,当将用提取物处理的土壤用于食品废物堆肥发酵研究室中的用于分离和储藏不可回收材料(乙烯袋、猪头、鱼等)的容器中时,不产生蝇幼虫。 
为了确认导致所述功效的微生物,收集用所述提取物处理的土壤发酵了10天的堆肥和用所述土壤发酵了30天的堆肥,并在韩国农业科学和技术国际协会(Korean National Institute of AgriculturalScience and Technology)分析收集的所述堆肥。结果,检测出24种微生物。在起初不用提取物处理的土壤处理的堆肥中则不存在所述微生物,然后分离每种微生物。 
1-2:抗蝇幼虫的杀虫功效,食品废物发酵功效和阻止气味功效 
在所述的24种微生物中,首先随机选择10种微生物,随后检测其抗蝇幼虫的杀虫功效及其阻止气味的功效。 
通过与传统的培养酵母菌、乳酸菌或杆菌属微生物的方法相同的方式,将含有营养素,例如碳源、氮源、维他命和矿物质的动物和植物在121℃下蒸煮并提取以制备培养基,并且将所述10种微生物的每一种接种至形成的培养基中并在30-45℃下培养24-62小时。通过将所述10种微生物的每一种接种至有机固体,例如消毒的锯屑、米糠、小麦糠、米粉和谷物粉中,然后发酵接种的有机固体以制备固体微生物制剂。 
为了检测所述微生物抗蝇幼虫的杀虫功效,在室温下将5升腐烂的鱼肉、鸡肉和猪肉放置4天以产生蝇幼虫。随后,以至少约500-1,000个幼虫的密度将蝇幼虫置于每个容器中,并且将各10ml的10种微生物培养液添加至100ml水中并应用于每个容器中。之后检测蝇幼虫被杀死时的时间和状态。结果,当使用SJP6728AF1、SJP6722AF2、SJP6730AF3、SJP6722A5和SJP6735B6处理食品废物时,蝇幼虫被杀死(表2和图1)。 
表2:抗蝇幼虫的杀虫功效 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300051
为了检测所述微生物发酵食品废物的功效,将各20ml的10种微生物培养液涂至20升含水量为约65%的食品废物上,随后搅动。之后,加热食品废物并保持在40-50℃的温度。微生物处理3天后,通过感官测试和气味计测量形成气味的程度。 
结果,当用SJP6728AF1、SJP6722AF2、SJP6730AF3、SJP6722A5、SJP6731B1和SJP6735B6微生物菌株处理食品废物时,其新鲜度不改变并且其为无味的(表3)。这表明了SJP6728AF1、SJP6722AF2、SJP6730AF3、SJP6722A5、SJP6731B1和SJP6735B6具有极好的阻止分 解的能力。 
表3:食品废物发酵的结果 
  微生物   除臭功效(%)   周期(天)   感官测试结果
  SJP6728AF1   100   3   无味
  SJP6722AF2   100   3   无味
  SJP6730AF3   100   3   无味
  SJP6722A5   100   3   无味
  SJP6731B1   100   3   无味
  SJP6735B6   100   3   无味
同样,为了检测所述微生物阻止气味的功效,将各5ml的所述10种微生物培养液用于食品废物中形成的废水中(BOD 100,100ppm),并使用气味计测量废水臭味的改变。 
结果,当用SJP6728AF1、SJP6722AF2和SJP6730AF3处理废水时,在微生物处理90分钟后,除去了90%以上的臭味,并且即使在微生物处理6天之后也不产生臭味(表4)。 
表4:食品废水的气味 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300061
收集食品废物至食品废物收集容器中之前和之后,将各10ml所述6种微生物培养液(SJP6728AF1、SJP6722AF2、SJP6730AF3、SJP6722A5、 SJP6731B1和SJP6735B6)涂至食品废物中,不仅在收集容器中不产生废水的臭味,在收集工具和预处理体系中也不产生臭味,并且即使3-5天(最多10天)不收集食品废物也不产生臭味和蝇幼虫。 
1-3:抗菌和抗真菌活性的检测 
在韩国农业科学和技术国际协会的植物病理学部的生物学分部、检测所述6种微生物(SJP6728AF1、SJP6722AF2、SJP6730AF3、SJP6722A5、SJP6731B1和SJP6735B6)抗植物致病菌的抗菌和抗真菌活性。将细菌和真菌接种至SDA(沙堡氏葡萄糖琼脂块)中并培养48小时。之后,将分别在所述6种微生物培养液中浸入5分钟琼脂块接种至其中培养了细菌和真菌的培养基中,并且在15℃的黑暗环境中培养24小时,并且以毫米为单位测量细菌形成的菌落直径。结果,显示SJP6728AF1、SJP6722AF2、SJP6730AF3、SJP6722A5、SJP6731B1和SJP6735B6微生物具有高的抗菌和抗真菌活性(表5和图2)。 
表5:SJP微生物的抗菌和抗真菌活性 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300071
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300081
1-4:微生物的鉴定 
在韩国微生物培养中心(KCCM)鉴定SJP6728AF1、SJP6722AF2、SJP6730AF3、SJP6722A5、SJP6731B1和SJP6735B6,结果,SJP6728AF1(SEQ ID NO:1)和SJP6729AF2(SEQ ID NO:2)的18S rDNA与啤酒酵母(Saccharomyces exiguus)的有97%同源性,SJP6730AF3(SEQ ID NO:3)的18S rDNA与Candida fructus的有97%同源性。同样,SJP6722A5(SEQ ID NO:4)的16S rDNA与Lactobacilluparaplantarum的有98%同源性,SJP6731B1(SEQ ID NO:5)的16S rDNA与栗褐芽胞杆菌(Bacillus badius)的有99%同源性,SJP6735B6(SEQ IDNO:6)的16S rDNA与多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)的有99%同源性。所述微生物菌株都被保藏在韩国微生物培养中心(KCCM)(表6)。 
表6:SJP微生物的名称和保藏号 
  名称   保藏号
  SJP6728AF1   Saccharomyces exiguous KCCM-10675P
  SJP6722AF2   Saccharomyces exiguous KCCM-10677P
  SJP6730AF3   Candida fructus KCCM-10679P
  SJP6722A5   Lactobacillu paraplantarum KCCM-10676P
  SJP6731B1   栗褐芽胞杆菌(Bacillus badius)KCCM-10680P
  SJP6735B6   芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)KCCM-10678P
实施例2:微生物的二级分离和鉴定及其杀虫、杀菌和阻止气味的功效
2-1:微生物的二级分离 
将实施例1中分离的24种菌种培养液在3℃的冰箱中储存90天,然后检查存活的微生物菌株。结果,8种微生物(SJP6840AF1、SJP6844AF5、SJP6726AF4、SJP6843AF7、SJP6841L2、SJP6819B3、 SJP6734B4、SJP6723L4)存活。测量所述14种起初未测试的菌株和所述8种二级分离的菌株抗蝇幼虫的杀虫功效、发酵有机废物的功效和阻止气味的功效,以及抗菌和抗真菌的功效。 
2-2:检测抗蝇幼虫的杀虫功效、发酵食品废物的功效和阻止气味的功效 
将各5ml腐烂的鱼肉、鸡肉和猪肉置于容器中并在室温下放置4天以产生蝇幼虫。以最少约500-1,000个蝇幼虫的密度将蝇幼虫放置在每个容器中,然后将各10ml所述22种微生物培养液(14种起初未测试的微生物菌株和8种二级分离的菌株)添加至100ml水中,然后将其应用于含有蝇幼虫的容器中。之后检查蝇幼虫被杀死时的时间和状态。 
结果,当用11种微生物(SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6、SJP6843AF7、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3、SJP6723L4和SJP6742L5)的每一种处理食品废物时,微生物处理2-6小时之后50-100%的蝇幼虫被杀死。在分别用SJP6732B2、SJP6719B3和SJP6841L处理的情况下,2天后再次开始产生蝇幼虫,并且3天后又产生了气味。然而,在分别用SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6、SJP6843AF7、SJP6734B4和SJP6841L2处理的情况下,即使在微生物处理3天后鱼肉和鸡肉的新鲜度也不改变,并且在微生物处理6天后,新鲜度改变70%以上,但是不产生食品废物的臭味(表7)。 
表7:抗蝇幼虫的杀虫功效 
同样,将各20ml的所述22种微生物培养液(14种起初未测试的菌 株和8种二级分离的菌株)应用于水含量约为65%的10升食品废物中。之后,稀释食品废物并随后加热保持于40-50℃。微生物处理3天后,使用感官测试和气味计连续测量产生气味的程度。 
结果,显示出极好的抗蝇幼虫杀虫功效的所述11种微生物(SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6、SJP6843AF7、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3、SJP6723L4和SJP6742L5)也显示出极好的发酵功效(表8)。 
表8:发酵食品废物的功效 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300101
测量所述11种微生物(SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6、SJP6843AF7、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3、SJP6723L4和SJP6742L5)阻止在食品废物中产生废水之臭味的功效。将各5ml所述11种微生物培养液应用于10升食品废水(BOD100,000ppm)中,并使用气味计测量废水臭味的变化(图3)。 
结果,在分别用SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6和SJP6843AF7菌株处理的组中,微生物处理1小时后其臭味消失,在微生物处理90分钟后开始产生酒精气味。蒸馏具有酒精气味的处理组的液体以测量其比重,测量结果显示分别用SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6和SJP6843AF7处理的组具有6-8%的酒精浓度(表9)。 
表9:食品废物的酒精浓度 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300102
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300111
同样,测量食品废物的酸度,测量结果表明分别用SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6和SJP6843AF7菌株处理的组的pH值为3.7,分别用SJP6732B2和SJP6719B3处理的组的pH值为4.2,分别用SJP6841L2和SJP6720L3处理的组的pH值为4.1。另外,即使在35-40℃下在堆肥发酵体系放置1个月以上,分别用所述11种微生物处理的组也不产生气味。 
2-3:抗菌和抗真菌活性 
为了检测所述11种微生物(SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6、SJP6843AF7、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3、SJP6723L4和SJP6742L5)针对损坏农作物的细菌和真菌是否有抗菌活性,在韩国农业科学和技术国际协会植物病理学部门的生物学分部,使用保藏在韩国农业科学和技术国际协会中的细菌和真菌检测所述微生物的抗菌和抗真菌活性。 
将细菌和真菌接种至SDA(沙堡氏葡萄糖琼脂块)中并培养48小时。之后,将分别在所述11种微生物培养液中浸入5分钟的琼脂块接种至其中培养了细菌和真菌的培养基中,然后在15℃的黑暗环境中培养24小时。以毫米为单位测量细菌形成的菌落直径(表10)。 
同样,将30升食品废物放置在堆肥发酵室中7天使其完全分解,并且使用划线平板法分析形成氨、硫化氢等的腐败细菌的密度。结果,检测出腐败细菌的密度为3-15×108细菌/ml。分别用各10mlSJP6840AF4、SJP6719B3和SJP6841L2菌种培养液接种腐败细菌并培养2小时,并且使用稀释平板分离法检查腐败细菌在每个菌种培养液中的密度。结果,用SJP6840AF4处理的组的腐败细菌的密度为约2-5×102/ml,用SJP6719B3处理的组的腐败细菌的密度为约2-5×103/ml,用SJP6841L2处理的组的腐败细菌的密度为约2-5×103/ml。这说明SJP6840AF4、SJP6719B3和SJP6841L2具有抗菌活性。 
表10:SJP微生物的抗菌和抗真菌活性 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300121
2-4:微生物的鉴定 
在韩国微生物培养中心鉴定所述11种微生物(SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6、SJP6843AF7、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3、SJP6723L4和SJP6742L5),结果,SJP6840AF4(SEQ ID NO:7)和SJP6843AF7(SEQ ID NO:8)的16S rDNA与涎沫念珠菌的有99%同源性,SJP6844AF5(SEQ ID NO:9)的16S rDNA与Kazachstania aerobia的有99%同源性,SJP6726AF6(SEQ ID NO:10)的16S rDNA与Candida humilis的有99%同源性。此外,SJP6732B2(SEQID NO:11)的16S rDNA与Paenibacillus lactis的有99%同源性,SJP6719B3(SEQ ID NO:12)的16S rDNA与类芽孢杆菌AY397772的有99%同源性,并且SJP6734B4(SEQ ID NO:13)的16S rDNA与短芽孢杆菌的有99%同源性。另外,SJP6841L2(SEQ ID NO:14)的16S rDNA与干酪乳杆菌的有99%同源性,SJP6720L3(SEQID NO:15)的16S rDNA与短乳杆菌的有99%同源性,SJP6723L4(SEQID NO:16)的16S rDNA与柠檬明串珠菌的有99%同源性,并且SJP6742L5(SEQ ID NO:17)的16S rDNA与Camobacterium maltaromaticum的有99%同源性。这些微生物菌株的每一种均被保藏在韩国微生物培养中心(KCCM)(表11)。 
表11:SJP微生物的名称和保藏号 
  名称   保藏号
  SJP6840AF4   涎沫念珠菌KCCM-10695P
  SJP6844AF5   Kazacbstania aerobia KCCM-10696P
  SJP6726AF6   Candida humilis KCCM-10697P
  SJP6843AF7   涎沫念珠菌KCCM-10698P
  SJP6732B2   Paenibacillus lactis KCCM-10726P
  SJP6719B3   类芽孢杆菌AY397772KCCM-10727P
  SJP6734B4   短芽孢杆菌KCCM-10728P
  SJP6841L2   干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)KCCM-10729P
  SJP6720L3   短乳杆菌KCCM-10730P
  SJP6723L4   柠檬明串珠菌KCCM-10731P
  SJP6742L5   Camobacterium maltaromaticum KCCM-10732P
对比实施例1:相似微生物菌株的杀死蝇幼虫的功效和发酵食品废物的功效
从韩国农业菌株保藏(KACC)、韩国微生物菌株保藏(KCCM)和韩国标准菌株保藏(KCTC)购买或分配得到与本发明的微生物最相似的微生物菌株。根据上述方法检查分配的微生物菌株是否具有抗蝇幼虫的杀虫功效、阻止气味功效和发酵有机废物的功效(表12和表13)。 
表12:抗蝇幼虫的杀虫功效 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300141
表13:食品废物的发酵功效 
抗蝇幼虫的杀虫功效的检查结果表明在使用类芽孢杆菌处理的情况下死亡率为30%,但是仅在微生物处理10小时后,再次产生强壮的蝇幼虫。同样,分配的微生物的阻止气味的功效明显低于分别用本发 明的17种微生物菌株(SJP6728AF1、SJP6729AF2、SJP6730AF3、SJP6722A5、SJP6731B1、SJP6735B6、SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6、SJP6843AF7、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3、SJP6723L4和SJP6742L5)处理的情况。 
实施例3:抗蚊幼虫的杀虫功效
为了检查实施例2中鉴定的微生物抗蚊幼虫的杀虫功效,将各自10ml的所述11种微生物培养液(SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6、SJP6843AF7、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3、SJP6723L4和SJP6742L5)应用于蚊幼虫。在分别用SJP6734B4和SJP6841L2处理的组中,微生物处理6小时后蚊幼虫开始被杀死,微生物处理9小时后所有的蚊幼虫都被杀死。在用SJP6732B2处理的组中,微生物处理8小时后蚊幼虫开始被杀死,并且微生物处理12小时后所有的蚊幼虫都被杀死。 
实施例4:用SJP微生物发酵的堆肥的分析
用本发明的17种微生物发酵10天和30天的堆肥不进行热处理,另一方面,在70℃下将在上述条件下发酵的堆肥热处理10分钟。之后,使用划线平板法测量堆肥中每种微生物的密度(表14)。 
结果,在使用本发明的微生物处理的发酵堆肥中,检测出的微生物的量大约比对照组中的那些大12-56倍,并且真菌的密度相对的低。然而,在使用本发明的微生物发酵10天的堆肥中,酵母菌的密度比对照组大。 
表14:堆肥样品中微生物的密度(单位:×106CFU/g) 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300151
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300161
同样,发现在用本发明微生物处理的堆肥中检测出的微生物主要由杆菌和酵母菌组成,在用本发明微生物处理的堆肥中检测出具有降低气味功效和抗蝇幼虫功效的微生物,并且在用本发明的微生物处理的堆肥中检测出具有抗植物致病菌之抗菌活性的微生物,以及促进植物生长的微生物。这表明,具有降低气味功效的微生物可用于食品废物和牲畜粪便中,而且具有抗菌活性、促进植物生长功效和抗蝇幼虫杀虫功效的微生物可被用作控制疾病和有害昆虫的制剂。 
将起初分离并鉴定的SJP6728AF1、SJP6729AF2和SJP6730AF3以及二级分离和鉴定的SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6743B4、SJP6841L2和SJP6720L3于在35℃在培养基中培养3天,并测量其发酵有机废物的功效及其抗蝇幼虫的杀虫功效。结果,发现与单独使用微生物菌株相比,使用两种或多种本发明微生物菌株的混合物么能有极好的功效。 
同样,本发明微生物的功效随培养基的组成而变化。换句话说,将本发明的17种微生物接种并培养至仅由米糠制备的培养基中,然后检测其抗蝇幼虫的杀虫功效,SJP6728AF1、SJP6726AF6和SJP6719B3是最有效的。然而,在仅由小麦糠制备的培养基中,SJP6844AF5、SJP6743B4和SJP6841L2的功效最好。 
实施例5:阻止气味的功效
在Sejong大学的土壤和环境科学系分析本发明17种微生物(SJP6728AF1、SJP6729AF2、SJP6730AF3、SJP6722A5、SJP6731B1、SJP6735B6、SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6、SJP6843AF7、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3、SJP6723L4和SJP6742L5)阻止气味的功效。使鱼肉和猪肉腐烂之后,将所述17种微生物接种至腐烂的鱼肉和猪肉中。之后,微生物处理30天后使用气味计测量鱼肉和猪肉的臭味的改变。 
结果,微生物处理1小时至1天后,鱼肉和猪肉的臭味降低了几千倍。7天后臭味随传代的次数而降低,并降低至1/7。特别地,硫化氢减少了99.9%,因此没有臭味的痕迹,但30天后臭味再次产生。然而,考虑到多数有机废物在2-3天之内被处理,可以认为本发明微生物具有阻止气味的功效。同样,由于本发明的微生物显示长达30天的阻止气味的功效和阻止分解的功效,因此,可将其用作保持鱼肉、蔬菜等的新鲜度的防腐剂。 
实施例6:牛、猪和鸡饲料的测试
将固体有机材料,例如米糠、小麦糠和大豆,与水混和至含水量达到65-70%,并搅拌,使得水均匀地吸收在有机材料上。用蒸汽消毒搅拌的材料,随后用至少一种本发明所述微生物接种。将形成的材料培养30-40小时,干燥并研磨,随后制成饲料添加剂。 
在另一个方法中,将一种或多种本发明所述17种微生物(SJP6728AF1、SJP6729AF2、SJP6730AF3、SJP6722A5、SJP6731B1、SJP6735B6、SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6、SJP6843AF7、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3、SJP6723L4和SJP6742L5)在液体培养基中培养,之后与固体有机材料例如米糠、小麦糠和大豆混和,由此制备牲畜饲料添加剂。在另一个方法中,将一种或多种本发明17种微生物(SJP6728AF1、SJP6729AF2、SJP6730AF3、SJP6722A5、SJP6731B1、SJP6735B6、SJP6840AF4、SJP6844AF5、SJP6726AF6、SJP6843AF7、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3、SJP6723L4和SJP6742L5)液体培养基中培养,然后干燥,之后将干燥的微生物与固体有机材料例如米糠、小麦糠和大豆混和,由此制备饲料添加剂或饲料。作为水的添加剂,将三种或三种以上本发明微生物以特定比例互相混合,并以1-2%的浓度用水稀释。 
在不使用上述制备的饲料添加剂或水添加剂饲养的对照组的牛粪便中,被用作牛饲料的谷物未经消化便从牛体内排出,但是在使用饲料添加剂或水添加剂饲养的牛的粪便中,看不到被用作饲料的谷物(图4)。这说明本发明的SJP微生物具有促进消化的功效。 
同样,富含黄色素(叶黄素、胡萝卜素等)的植物例如玉米和黄芩(Scutellaria baicalensis)发酵时显示深黄色。因此,当将本发明的SJP微生物培养液添加至鸡饲料中时,鸡的皮肤、鸡蛋的壳,以及蛋黄均显示深黄色。 
实施例7:替代猪饲料中促进增长的抗生素
在猪体上确定本发明的微生物替代抗生素、促进增长功效、节省饲料功效以及阻止气味和阻止苍蝇的功效。将40%米糠、30%小麦糠和30%红辣椒种子、黄芩(Scutellaria baicalensis)、人参、桂皮和甘草的混合物磨粉、消毒,然后分别与SJP6728AF1、SJP6720L3和SJP6732B2一起培养,由此制备饲料添加剂。使用饲料添加剂饲养猪以确定微生物是否可替代抗生素。将成猪(50.5kg)分成三个处理组(每个处理重复4次),并且为了减少体重的偏差以及由分开雌性猪和雄性猪所导致的误差,根据体重和性别将所有测试的猪分成四组(两个雌性组和两个阉割的雄性组)。在对照组中,添加抗生素(55ppm新霉素+110ppm土霉素)。同样,使用不含抗生素的对照组,并且以2.5%的浓度将本发明的微生物培养液添加至水中,之后用水饲养猪以确定替代抗生素的功效(表15)。 
表15:使用SJP微生物替代抗生素的测试 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300181
a饲料效率a=饲料摄入/体重增加 
结果,使用接种本发明SJP微生物的饲料添加剂饲养、不经过抗生素处理的组与使用含抗生素饲料饲养的对照组日均体重增长方面相似,并且饲料效率为2.25,与使用含抗生素饲料饲养的对照组相似。这表明可用本发明的微生物替代抗生素。 
此外,分析本发明的SJP微生物对于粪便内细菌的数目以及气味产生的功效。在粪便落入土壤之前收集牲畜的粪便,并且使用划线平板法测量所收集粪便中的总细菌数目,大肠杆菌数目和乳酸菌数目。使用气味分析仪分析氨和硫化氢以测量产生的有害气体的量,并且使用SAS包的ANOVA对数据进行变量分析。使用Duncan新复极差法(Duncan’s new multiple range test)(Steel和Torrie)进行组之间的显著性测试,可信度为95%(表16)。 
结果,在使用三种SJP微生物培养液给药至猪的情况下,在猪肠内没有出现总细菌数目的变化,但是作为有害细菌的大肠杆菌的数目大大减少。同样,有害气体的分析结果表明,当使用本发明微生物处理饲料添加剂时,猪粪便内有害气体中的氨和硫化氢的产生减少。 
表16:添加SJP微生物后粪便中的细菌数目和形成有害气体的量 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300191
实施例8:替代鸡饲料中促进增长的抗生素
测量含有本发明微生物(SJP6728AF1、SJP67225A5和SJP6841L2)的饲料添加剂对于鸡生产的功效。将270只鸡分成3个处理组(每个处理重复3次),将动物分成用稀释抗生素(0.05%维及尼霉素和0.03%抗双孢子球菌(anticoccidium)制剂)给药的对照组,以及用0.5%和1.0%饲料添加剂处理的组,所述添加剂用本发明SJP微生物培养液(SJP6728AF1、SJP67225A5和SJP6841L2)发酵。将动物组饲养5周以分析鸡的生产(表17)。 
同样,根据5周的鸡饲养周期中死亡的鸡的数量分析死亡率和生长率(表18),分析鸡肠内的微生物(表19),并且使用气味计测量鸡粪便的臭味(表20)。 
表17:含有SJP微生物的饲料添加剂对于鸡生产的功效 
a饲料需求率=饲料摄入/体重增加 
表18:鸡的死亡率和生长率 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300202
表19:肠微生物的数目(5周) 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300211
表20:鸡粪便的气味 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300212
结果,用本发明SJP微生物处理的组与用抗生素处理的组相比,生产速度快、死亡率低、饲料量减少,而且气味减少。同样,在纯水中蒸煮测试的猪肉和鸡肉并让50个人品尝。结果,50个人均评价本发明的肉与现有的肉相比更加柔软,具有减少的特有气味和良好的口感。因此,本发明SJP微生物的处理能够在不使用抗生素的条件下制备环境友好型牲畜产品。 
实施例9:用中草药发酵的食品添加剂
使用由毒性植物制成的天然杀虫剂后,本发明的SJP微生物能够存活,因此检测本发明的微生物是否可解决银杏叶和中草药中存在的毒性的问题。首先,将200g银杏叶在1.5升水中进行热水提取,然后分别用本发明所述17种SJP微生物培养液接种提取物。将所得提取物与不使用本发明的微生物接种的对照组一起放置在40℃的加热箱中,随后发酵24小时。之后,分析处理组和对照组中是否产生气体。结果,对照组中不产生气体,然而用本发明SJP微生物处理的组中产生气体。 
在使用所述17种微生物处理的所有提取物中,7天之内没有产生气体,并且因此认为提取物的发酵终止。为了检测本发明的微生物是否削弱了毒性功效,通过使用口中的舌头感知提取物的感官测试对提取物进行毒性测试。结果,使用本发明SJP微生物发酵的提取物具有不排斥的柔和的感觉。然而,未发酵的提取物有让人痛苦的感觉、呕吐症状、苦味,以及毒性臭味。因此,当使用本发明SJP微生物处理银杏叶或中草药时,可降低银杏叶或中草药材料的毒性。 
人们认为,如果发酵银杏叶并将其用作猪、家禽和牛饲料或饲料添加剂,可积累银杏叶的医药成份。因此,按如下方式发酵银杏叶。使用17种SJP微生物接种并发酵银杏叶,干燥并研磨,由此制备发酵的银杏叶组合物。以相同的量稀释苦参(sophora flavescens)、红辣椒种子、甘草、桂皮和黄芩(Scutellaria baicalensis),然后使用17种本发明的微生物接种。之后,将植物与不使用本发明微生物接种的对照组一起放置在40℃的加热箱中,随后发酵24小时,由此制备发酵的中草药组合物。在所述的发酵银杏叶组合物中,以相同的比例将一种用酵母菌(SJP6844AF5)发酵的组合物和两种用杆菌细菌(SJP6734B4)发酵的组合物互相混和。以1∶1的比例将混合物与发酵的中草药组合物中用酵母菌(SJP6732B2)发酵的组合物混和,由此制备中草药饲料添加剂。 
以1%的浓度稀释本发明SJP微生物的每一种菌种培养液、含有发酵中草药组合物的中草药饲料添加剂和用SJP微生物培养液发酵的银杏组合物。用该饲料饲养鸡,并检测饲养之初的平均体重和8天后的平均体重增长。 
结果,用仅含有本发明SJP微生物培养液处理的对照组体重增加约400g,但是用SJP微生物培养液发酵的中草药饲料添加剂处理的组体重增加约600g。同样,所有处理的牲畜组的粪便2米之外均感觉不到气味,并且基本不产生蝇幼虫(50-100%)。 
因此,可以看出,与仅在饲料中添加本发明SJP微生物培养液相比,当用经SJP微生物培养液发酵的银杏叶和中草药材料而获得的饲料添加剂进行饲养时,促进了鸡的生长。 
表21:SJP微生物和用SJP微生物培养液发酵的中草药饲料添加剂的促进生长、阻止气味和防止蝇幼虫的功效 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300231
实施例10:阻止有机材料分解的功效
为了检查本发明17种SJP微生物阻止有机材料分解的功效,将豆腐浸入水中,分别用所述17种SJP微生物接种,然后放置在25-30℃。在对照组中,24小时后开始产生气味,但是在所有用SJP微生物处理的组中,直至3天也未感觉到气味。然而,在使用SJP微生物中除酵母菌的杆菌(SJP6722A5、SJP6731B1、SJP6735B6、SJP6844AF5、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L 3和SJP6742L5)处理的组中,微生物处理4天后开始产生细微气味。5天后,在酵母菌处理的组中产生一些气味,并且在7天后,产生剧烈气味。 
将豆腐从水中取出,并检查豆腐的气味和组织。结果可看出,气味产生于豆腐的表面,但是豆腐内部仍保持完好,并且豆腐的组织和稳固性与初期相同。 
同样,分别用本发明的17种微生物接种至鲭鱼,并在室温下放置,然后检查其气味。1天后,对照组产生臭味,并且4天后,使用SJP 微生物中的杆菌(SJP6722A5、SJP6731B1、SJP6735B6、SJP6844AF5、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3和SJP6742L5)处理的组产生臭味。7天后,在对照组中产生蝇幼虫。微生物处理7天后,用SJP微生物中的7种酵母菌(SJP6728AF1、SJP6729AF2、SJP6730AF3、SJP6840AF4、SJP6726AF6、SJP6843AF7和SJP6723L4)处理的组开始产生气味,并且用SJP微生物中的杆菌处理的组开始产生蝇幼虫。然而,即使15天后,用SJP微生物中的酵母菌处理的组不产生蛆。在盐腌的对照组中,15天后可感受到一些气味。 
将大豆浸入水中2小时,之后分别用本发明的17种SJP微生物培养液接种。将处理组和对照组在20-25℃放置。结果,5天后对照组开始产生霉菌和气味。20天后,用SJP微生物中的杆菌(SJP6722A5、SJP6731B1、SJP6735B6、SJP6844AF5、SJP6732B2、SJP6719B3、SJP6734B4、SJP6841L2、SJP6720L3和SJP6742L5)处理的组变黑,同时出现分解现象,但是没有臭味。然而,用SJP微生物中的酵母菌(SJP6728AF1、SJP6729AF2、SJP6730AF3、SJP6840AF4、SJP6726AF6、SJP6843AF7和SJP6723L4)处理的组在42天之内保持原始状态,并缓慢变为棕色,在60天之后变黑。 
同样,将大豆浸入水中10分钟使大豆吸水。之后,以1∶10的比例将使用本发明SJP微生物中的酵母菌通过实施例6的方法制备的饲料添加剂粉末添加至大豆中并放置。结果,即使3个月之后大豆仍保持原始状态。这说明可将本发明的SJP微生物用作谷物、水果、蔬菜、鱼和贝类的防腐剂。 
实施例11:豆芽培养测试
用水分别稀释本发明的17种SJP微生物培养液,随后用该水浇灌豆芽,或者,若不是浇水时间时,每天将SJP微生物的每一种应用于豆芽2-3次。结果,在所有用SJP微生物培养液处理的组中,促进了豆芽的生长并且不产生分解。 
实施例12:大豆、谷物和牛骨培养液的发酵以及奶酪的制备
蒸熟大豆,分别用本发明的SJP6728AF1和SJP6729AF2接种,并 发酵30小时。之后,干燥发酵的大豆并将其磨成粉,由此制备酶食品补充剂。之后,选择50个50岁年龄以上的人并使其食用所述发酵的大豆酶食品。 
结果,用SJP6728AF1和SJP6729AF2发酵的大豆形成好像烘烤大豆面粉的坚果味道和香味,并且大多数实验者称在摄取所述发酵大豆30天之内排气及排泄时未感觉到臭味,并且所述发酵的大豆具有极好的促消化和缓解疲劳的功效。 
表22:摄入用SJP微生物发酵的大豆食品的功效 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300251
同样,以相同的比例将谷类食物例如糙米、大麦、小麦、豆类和芝麻互相混和、蒸熟,随后分别用SJP6728AF1和SJP6729AF2接种。之后,在35-40℃将该混合物发酵2天、揉捏并制成酶丸。当将所述酶丸给药至人时,其具有促进吸收、清除宿便和阻止气味的功效。 
分别用本发明的SJP微生物培养液接种通过在热水中降解牛骨头例如牛蹄而获得的牛骨培养液,并发酵2天。结果,牛骨培养液的特有气味消失,并且其颜色清澈。 
用一种或多种本发明的17种SJP微生物接种消毒的牛奶,随后发酵12小时。当纯白色奶酪凝结时,将其脱水并品尝。结果,该奶酪具有微生物发酵所特有的酸味和坚果味,并且其具有促进消化和阻止排泄物气味的功效。同样,将奶酪放置在40℃的加热箱中,2天后酵母菌生长,但是奶酪的味道不改变。在传统的奶酪制备方法中,存在形成大量臭味的问题,并且必须经长时间发酵过程;然而,使用本发明的SJP微生物发酵的奶酪没有臭味,并且即使在凝结之后食用也没有油腻味。此外,本发明的奶酪具有坚果味。 
实施例13:豆腐的制备
将通过蒸煮豆汁并除去豆腐渣获得的豆子提取物调整到40.5℃,随后分别用SJP6728AF1和SJP6729AF2培养液接种。之后,在40℃下将豆子提取物发酵12小时,由此制备柔软的豆腐。按照传统的豆腐脱水法,将柔软的豆腐放置在袋中,然后在10kg的重量下挤压使其脱水6小时,由此制备豆腐。品尝由此制备的豆腐,结果,所述豆腐具有与传统豆腐相同的味道,但是具有酸味,说明其发酵了。 
将5升豆子提取物添加至5升生牛奶中,将所述混合物用本发明的SJP微生物接种,然后发酵24小时,因此制备由奶酪/豆腐混合物形成的发酵的半固态产品。 
将巧克力添加至豆子提取物中,发酵所述混合物,结果,制备的巧克力豆腐没有酸味。将松叶提取物添加至生牛奶中,发酵该混合物,结果,制备了具有松叶香味的奶酪。同样,将盐和桃汁饮料添加至豆子提取物中,发酵该混合物,结果,形成的产物具有桃子香味并且没有酸味。因此,也可用蒿叶和绿茶作为调和所述豆腐和奶酪的味道和香味的食品材料,因此本发明的微生物可以有更大范围的应用。 
将使用本发明的SJP微生物处理的豆腐和传统的豆腐浸入水中并将其放置在40℃的加热箱中,然后检查豆腐是否腐败。结果,24小时后传统的豆腐产生腐败的豆腐气味。然而,即使5天之后用SJP微生物处理的豆腐也未腐败,并且其表面覆盖棕色的酵母菌。因此,可以认为本发明的SJP微生物阻止分解的功效可持续至少10天。另外,当把使用SJP微生物处理的豆腐或奶酪储藏在冰箱中时,冰箱中产生的臭味消失。 
实施例14:大蒜发酵
为了测量本发明的SJP微生物的发酵功效,将5kg大蒜加至30升水中,加热至130℃,随后冷却至30℃。分别用SJP6728AF1和SJP6729AF2培养液接种形成的大蒜溶液,随后在室温下放置30天。结果,大蒜发酵,但感觉不到其气味。 
以固态蒸煮大蒜,分别用SJP6728AF1、SJP6729AF2和SJP6731B1培养液接种。之后,将所述大蒜在35-40℃发酵2天,然后干燥2天,并将发酵和干燥过程重复三次。结果,在首先发酵时大蒜变红,但在 二级发酵和三级发酵(图5)时变黑。黑色的大蒜有大蒜特有气味或蒜辣素辣味的减少,因此可以认为发酵的大蒜酶易于给药,并可用于治疗癌症。 
实施例15:人参发酵
分别用本发明的SJP微生物培养液接种300g通过干燥和研磨6年生新鲜人参而获得的人参粉,然后在35-40℃发酵10天。蒸煮发酵的人参并使用HPLC测量发酵人参的成份。 
对照组的天然皂苷的含量为5.12重量/重量%,并且其Rb1含量为0.037重量/重量%,然而使用本发明的SJP微生物培养液接种的发酵人参的天然皂苷的含量为5重量/重量%,并且其Rb1含量为0.538重量/重量%(表23)。表24显示了用本发明的微生物培养液处理之前和之后的新鲜人参的含水量,表25显示了新鲜人参的HPLC分析结果。 
表23:用SJP微生物发酵的人参的成份 
  测试项   成份(重量/重量%)
  天然皂苷   5.000
  人参皂苷Rh2   -
  Rh1   0.538
  Rg2   1.111
  Rg 3   1.769
  Rg1   11.212
  Rf   2.338
  Re   2.044
  Rd   -
  Rc+Rb2   7.935
  Rb1   14.743
表24:新鲜人参的含水量 
   用SJP菌种培养  用SJP菌种培养   含水量(%)
   液处理之前(g)  液处理之后(g)  
  头部  0.635  0.165   74.0
  主根  9.592  2.999   68.7
  支根  4.046  1.268   68.7
表25:新鲜人参HPLC分析结果 
Figure DEST_PATH_GSB00000375837300281
这表明当使用本发明的SJP微生物接种的新鲜人参发酵时,可以以大于传统制备红参提取物方法两倍以上的量制备红参提取物。特别地,即使使用SJP6728AF1或SJP6728AF2培养液发酵新鲜人参的细根,也可以制成如图6中所示的红参。 
实施例16:米糠饮料的制备和动物提取物及果汁的发酵
分别用SJP6728AF1和SJP6729AF2培养液接种通过在121℃下提取米糠而获得的提取物,然后发酵48小时。之后,消毒提取物,然后通过在其中添加糖将糖含量调节至11.5-12.5%,使其具有甜味和酸味以及SJP微生物的特有香味,因此不需要在其中添加其它的香料。然而,当提取物在添加香草例如松叶、薄荷、药草、柠檬和绿茶之后发酵时,可制备具有各种香味的酵母菌饮料,通过离心分离和纯化酵母菌后,可制备具有无味道变化的酶饮料。 
同样,将8kg新鲜水鳗、软壳龟、鲫鱼、鹿和蛇鱼与500g甘草根混和,然后提取混合物,用SJP6728AF1接种,发酵2天,随后高温消毒,由此制备食品。当摄入该食品时,其具有补充能量的功效。 
从市场上购得由橙、梨、桃、苹果、胡萝卜、西红柿、石榴和葡萄制成的饮料并测量其糖含量和pH值。测量结果显示糖含量为11.5-12.5%,pH值为3.3-3.8。分别用SJP6728AF1和SJP6729AF2接种所述饮料,放置在35-45℃的发酵桶中。发酵24小时后,测量发酵饮料的糖含量和pH值,结果,pH值为3.3-3.8,与未发酵饮料的pH值相同,但是糖含量为10-11.5%,比未发酵饮料的糖含量低约1-15%。将发酵的饮料进一步发酵24小时,然后测量其糖含量和pH值,结果,pH值未改变,但是糖含量进一步降低约2-3%。同样,进一步发酵的饮料闻起来有酒精气味并且比发酵24小时的饮料具有更强烈的酸味。加热消毒发酵的饮料,通过在其中添加糖将糖含量调节至11.5-12.5%,然后并品尝。结果,制备水果饮料,其中水果香味比未发酵饮料更强烈并且具有甜味和酸味。 
实施例17:中国草药材料的发酵
为了检查使用本发明的微生物发酵中草药材时,中草药材的苦味是否改变,将500g桑黄菌丝(Phellinus liteus)加至15升水中并进行热水提取。分别用SJP6728AF1和SJP6729AF2接种提取物,随后将其置于35-40℃的发酵桶中。发酵24小时后,观察提取物。结果,产生大量气体,说明提取物进行了发酵。发酵2天后,将发酵提取物的味道与未使用SJP微生物接种的对照组对比,结果,在用SJP微生物处理的组中感觉不到苦味,但是在对照组中仍具有苦味。 
同样,分别用SJP6728AF1和SJP6729AF2培养液接种具有高表面保湿功效的中草药,例如东川芎(Cnidium officinale)、朝鲜当归(Angelica gigas Nakai)和阔叶麦冬(Liriope platyphylla)以及动物蛋白(例如鳗),然后发酵。之后,在其中添加化妆品材料例如陶瓷粉末,并将该混合物按摩至脸部一周。结果,面部皮肤变柔软,脸色变得明亮,并且减少了皱纹。 
分别用SJP6728AF1和SJP6729AF2培养液接种具有抗皮肤病功效的中草药例如苦参(Sophora flavescens)、小窃衣(Torillis japonica)和黄芩(Scutellariae baicalensis),然后发酵。之后,检查该草药是否可用于治疗足癣,结果,当给药2-3次该草药时,被极好地治愈 了足癣,并且5个月之内足癣没有再复发。 
分别用SJP6728AF1和SJP6729AF2培养液接种中草药例如黄芩(Scutellariae baicalensis),然后发酵,由此制备发酵溶液。当该发酵的培养液被用作洗浴用水时,其不仅具有治疗足癣的功效,也具有治疗皮肤病包括遗传性过敏疾病的功效。 
同样,分别用SJP6728AF1和SJP6729AF2培养液接种中草药例如葛根(Pueraria lobata)和Pueraria flos,然后发酵,由此制备饮料。当摄入该饮料时,所述饮料具有清除宿便(hangover)的功效。分别用SJP6728AF1和SJP6729AF2培养液接种野菊花(Chrysan themumindicum),然后发酵,由此制备饮料。当摄入该野菊花饮料时,其具有消除头疼和稳定血压的功效。将6kg葛根(Pueraria lobata)加至25升水中,然后将该溶液进行热水提取获得提取物,分别用SJP6728AF1和SJP6729AF2培养液接种该提取物,然后发酵5天,并测量其糖含量。结果,糖含量为5%。通过在其中添加糖将发酵提取物的糖含量调节至10%,当摄入所述提取物时,其具有清除宿便的功效。 
蒸煮三年生桔梗(Platycodon grandiflorum)固体,分别用SJP6728AF1和SJP6729AF2培养液接种,然后发酵2天,结果,桔梗(Platycodon grandiflorum)的毒性消失。将桔梗(Platycodongrandiflorum)发酵三次并干燥三次,其因此变黑。桔梗(Platycodongrandiflorum)的问题在于其不易于消化,但是黑色桔梗(Platycodongrandiflorum)可以解决消化吸收的问题。 
实施例18:吸附在固态有机材料上的液态有机材料的发酵方法
将300g三白草(Saururus chinesis)和鱼腥草(Houttuyniacordata)加至3升水中,摇动2小时,随后脱水,由此获得2升三白草液态有机材料。将大豆在上述制备的液体有机材料中浸入4小时,结果,约95%的液态有机材料被吸收至大豆中。蒸煮形成的材料,使用SJP6728AF1培养液接种,然后30℃发酵48小时。干燥并研磨发酵材料,由此制备发酵组合物。该发酵组合物具有低分子量,因为三白草的聚合物成份被微生物分解。因此,发酵组合物的优点在于其增加了的吸收效率并可吸收含微生物的发酵大豆的营养。 
同样,将300g新鲜人参加至3升水中并进行热水提取,由此获得2升新鲜人参的液态有机材料。将黑豆在新鲜人参的液态有机材料中浸入2小时,结果,90%的液态有机材料被吸附至豆子中。蒸煮形成的材料,使用SJP6729AF2培养液接种,在40℃下发酵48小时,随后干燥,由此制备发酵组合物。当摄入该发酵组合物时,产生发酵人参的功效,同时也可摄入低分子量的大豆成份。 
将通过粉碎大豆、糙米、绿豆(Phaseolus radiatus)和大麦获得的1升谷类粉末与0.5升中草药黄芩(Scutellaria baicalensis)提取物混和并揉捏以获得半固态有机材料。使用水蒸气对该半固态材料进行消毒,使用SJP6729AF2微生物培养液接种,并在30-40℃发酵60小时,由此制备发酵组合物。中草药黄芩(Scutellaria baicalensis)提取物是可以减轻由湿热病引发的黄疸并能激活肝脏和胆囊功能的医用草药,并且具有抑制绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)、志贺氏菌(Shigella sp.)、大肠杆菌、百日咳杆菌、皮肤真菌等生长的抗菌功效。因此,将不具有抗菌活性的草药完全发酵48小时,并且在其中添加黄芩(Scutellaria baicalensis),发酵时间延长12小时。 
将黑豆和黑芝麻浸入十全大补汤(人参热水提取物、关苍术(Atractylodes japonica)、白茯苓(Schw.)Wlof.、甘草根、干燥的地黄(Rehmannia glutinosa Liboschitz var.purpurea Makino)根、山芍药(Paeonia Japonica)、东川芎(Cnidium officinale)、朝鲜当归(Angelica gigas Nakai)、黄芪(Astragalus membranaceus)、箘桂(Cinnamomum cassia Blume)皮、椰枣和人参)中并蒸煮以制备半固态有机材料。用SJP6728AF1培养液接种半固态有机材料,然后发酵3天,由此制备发酵组合物。结果,与用传统热水提取方法摄入十全大补汤相比,通过用SJP6728AF1培养液接种十全大补汤并发酵该接种的材料而获得的发酵组合物具有最大效能。 
工业实用性 
如上文的详细描述,能够除去有机废物中气味的本发明的新型微生物具有从有机废物中阻止或除去气味以及阻止有机废物分解的功效,并且因此改善了环境。同样,本发明的微生物具有抗有害昆虫的 杀虫功效和抗植物致病性真菌的抗真菌功效,还可将其用作食品添加剂和抗生素替代品,并且也可用于制备发酵食品。 
尽管通过具体特征详细描述了本发明,然而对于本领域技术人员来说,所述描述显然只是优选的具体实施方案,而不会限制本发明的范围。因此,将由权利要求及其等同物限定本发明的实质范围。 
Figure ISA00000244742900021
Figure ISA00000244742900041
Figure ISA00000244742900051
Figure ISA00000244742900061
Figure ISA00000244742900071
Figure ISA00000244742900081
Figure ISA00000244742900101
Figure ISA00000244742900111
Figure ISA00000244742900121
Figure ISA00000244742900141
Figure ISA00000244742900161
Figure ISA00000244742900171
Figure ISA00000244742900181
Figure ISA00000244742900191
Figure ISA00000244742900211
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Figure ISA00000244742900241
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Figure ISA00000244742900261
Figure ISA00000244742900291

Claims (10)

1.一种微生物制剂,其包括:多粘芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa SJP6735B6其保藏号为KCCM-10678P和干酪乳杆菌Lactobacillus casei SJP6841L2其保藏号为KCCM-10729P。
2.一种用于发酵有机废物的微生物制剂,其包含下列的微生物:多粘芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa SJP6735B6其保藏号为KCCM-10678P和干酪乳杆菌Lactobacillus casei SJP6841L2其保藏号为KCCM-10729P。
3.一种阻止或除去有机废物中的臭味的制剂,其包含下列的微生物:多粘芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa SJP6735B6其保藏号为KCCM-10678P和干酪乳杆菌Lactobacillus casei SJP6841L2其保藏号为KCCM-10729P。
4.一种用于蚊蝇幼虫的杀虫剂,其包含下列的微生物:多粘芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa SJP6735B6其保藏号为KCCM-10678P和干酪乳杆菌Lactobacillus casei SJP6841L2其保藏号为KCCM-10729P。
5.一种用于选自生防菌株Agrobacterium vitis、番茄细菌性溃疡病菌Cla vibacter michiganensis subsp.Michiganensis、Pectobacterium carotovorum subsp.Carotovorum、Erwinia carotovora subsp.Carotovora或野油菜黄单胞菌Xanthomonas campes tris pv.Campes tris的细菌和选自Collec totrichum gloeosporides、尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum、辣椒疫霉Phytophthora capsici、立枯丝核菌Rhizoctonia solani或核盘菌Sclerotinia sclerotiorum的真菌的杀菌剂,其包含下列的微生物:多粘芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa SJP6735B6其保藏号为KCCM-10678P和干酪乳杆菌Lactobacillus casei SJP6841L2其保藏 号为KCCM-10729P。
6.一种用于防止豆腐、鲭鱼和大豆分解的防腐剂,其包含下列的微生物:多粘芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa SJP6735B6其保藏号为KCCM-10678P和干酪乳杆菌Lactobacilius casei SJP6841L2其保藏号为KCCM-10729P。
7.一种饲料添加剂,其包含下列的微生物:多粘芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa SJP6735B6其保藏号为KCCM-10678P和干酪乳杆菌Lactobacillus casei SJP6841L2其保藏号为KCCM-10729P。
8.一种制备发酵食品的方法,该方法包含使用下列的微生物发酵食品:多粘芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa SJP6735B6其保藏号为KCCM-10678P和干酪乳杆菌Lactobacillus casei SJP6841L2其保藏号为KCCM-10729P。
9.一种根据权利要求8所述的方法制备的发酵食品,其包含下列的微生物:多粘芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa SJP6735B6其保藏号为KCCM-10678P和干酪乳杆菌Lactobacillus casei SJP6841L2其保藏号为KCCM-10729P。
10.一种益生素制剂,其包含下列的微生物:多粘芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa SJP6735B6其保藏号为KCCM-10678P和干酪乳杆菌Lactobacillus casei SJP6841L2其保藏号为KCCM-10729P。 
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