CN101961381A - 一种丹参配方颗粒的制备方法及其检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种丹参配方颗粒的制备方法及其质量检测方法。该制备方法，是将丹参粉碎、分两步提取，第一步是加乙醇、加热提取、喷雾干燥、收集膏粉；第二步是加水、加热提取、喷雾干燥、收集膏粉；将两次的膏粉加入辅料，加适量水，制粒，干燥而得产品，其方法简单，成本低廉，适合工业化生产。该检测方法，包括性状、检查、鉴别和含量测定项目中的部分或全部，鉴别是用丹参对照药材进行丹参的鉴别，含量测定是对丹参酮IIA的含量测定和/或丹酚酸B的含量测定。所采用的鉴别方法简单，专属性强，含量测定方法简单，准确度高，重现性好，为生产单位、检测机构提供了检测指标、检测手段和技术方法等，以能更好的指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，在产品生产过程中，用该质量测定方法能有效的控制产品的质量，从而确保丹参配方颗粒的临床疗效和安全性。
Description
技术领域
本发明涉及以丹参为原料制成的代替丹参饮片的中药配方颗粒，具体地说，是涉及一种丹参配方颗粒的制备方法，及其该丹参配方颗粒的质量检测方法。
背景技术
丹参始载于《神农本草经》，列为上品。“一味丹参，功同四物”(地黄、当归、白芍、川芎)，传统医药认为：丹参集养血、活血、化瘀、止痛、生新血于一体，功效显著且性味平和，有补有散，无毒副作用。由于丹参具有活血调经，祛瘀止痛，凉血消痈，清心除烦，养血安神的功效，不少中药处方中均有丹参配伍使用。但是研究表明，丹参的主要有效成份丹参酮II A和丹酚酸B的性质均不稳定，所以传统的丹参饮片不仅杂质含量较大，携带服用不方便、而且稳定性不高，不易贮存。另外，丹参饮片传统的煎煮方法极为麻烦，病人对丹参饮片的加水量、浸泡时间、火候、煎煮时间、先煎、后下等不甚了解或怕麻烦，不按要求煎煮，而且丹参的主要有效成份丹参酮IIA和丹酚酸B性质不同，丹参酮IIA是脂溶性成份，传统的用水煎煮中药的方法不能使其溶出，丹酚酸B虽然是水溶性成份，传统的用水煎煮中药的方法能使其溶出，但是其热稳定性不高，在高于60℃的温度下煎煮10分钟左右即损失80％以上，所以传统的用丹参饮片配方使用于中药处方中，丹参的疗效得不到全面发挥甚至没有疗效。同时，尚无相关的质量控制标准，其有效成分得不到相应的保证，难以保证群众用药安全有效。
发明内容
本发明的首要目的，意在提供一种丹参配方颗粒的制备方法。本发明针对上述丹参饮片存在的问题(即：杂质含量较大，稳定性不高，不易贮存，携带服用不方便；煎煮麻烦，病人对加水量、浸泡时间、火候、煎煮时间、先煎、后下等不甚了解或怕麻烦，不按要求煎煮，影响疗效等缺点)，根据丹参药材的特性及丹参中主要有效成份的性质，分别采用乙醇和水两种溶剂提取丹参中的两种主要有效成份，并且用不同的温度进行浓缩和干燥来制干膏粉，制粒后用低温干燥颗粒，完全避免了以上问题，制成的颗粒直接供中药处方中配伍使用，能保证丹参的疗效得到全面发挥，而且单位质量有效成份比传统丹参饮片高若干倍；将丹参经本制法制成单一的代替中药丹参饮片用于中药处方配伍使用的颗粒。
本发明的另一目的，意在提供一种丹参配方颗粒的质量检测方法。本发明根据丹参药材的特性及丹参中主要有效成份的性质，研究拟订了对上述制备方法生产的丹参配方颗粒进行质量控制的技术手段。通过以下的技术方案，除了按照药典通则进行一般项目的检查外，还制定了以丹参对照药材进行对照的薄层色谱鉴别方法，还用高效液相色谱法测定其主要成份丹参酮IIA和/或丹酚酸B的含量，能全面地反映丹参配方颗粒的质量，保证其有效成份保留完全，含量稳定。
本发明采用的技术方案如下：
本发明所述的丹参配方颗粒是这样构成的：丹参1000g和适量辅料制备而成。
本丹参配方颗粒的制备方法：
取干燥的丹参1000克，粉碎成粗粉，将丹参粗粉装入提取罐中，加入浓度为60％～80％的乙醇3500ml～5000ml，加热回流提取1～2小时，收集提取液；将提取液过滤，滤液减压回收乙醇，喷雾干燥，收集所得的膏粉，备用；将提取罐中的残留药渣加水，加热煎煮1～2小时，收集煎煮液，过滤，取滤液，减压浓缩后，喷雾干燥，收集所得的膏粉，备用；取两次制得的膏粉，加入重量为膏粉总重量1～2倍的药用辅料作填充剂和润滑剂，混合均匀，制粒，干燥，分装成200袋，即得本品丹参配方颗粒。
更具体的制备方法：
取干燥无杂质的丹参1000克，用粉碎机粉碎成粗粉，将丹参粗粉装入提取罐中，加入浓度为68％～75％的乙醇4000ml，加热至沸腾，回流提取1.5小时，收集提取液；将提取液进行过滤，滤液于55～65℃减压回收乙醇，于80～90℃喷雾干燥，收集所得的膏粉，备用；将提取罐中的残留药渣加水，加热至沸腾，煎煮1.5小时，收集煎煮液，过滤，取滤液，于75～85℃减压浓缩至相对密度为1.03～1.20，于90～100℃喷雾干燥，收集所得的膏粉，备用；取两次制得的膏粉，加入重量为膏粉总重量1.5倍的药用辅料，混合均匀，加适量水，制粒，置于75～85℃沸腾干燥器中干燥，分装成200袋，即得本品丹参配方颗粒。
所述药用辅料为蔗糖粉，或者乳糖粉，或者其它适宜药用粉末。
所述乙醇提取液的滤液于60℃左右减压回收乙醇，乙醇回收完即可；喷雾干燥的温度为85℃左右；水煎煮液的滤液于78～82℃减压浓缩至相对密度为1.05～1.10即可；喷雾干燥的温度为92～98℃。
所述的干燥方法是用沸腾干燥器进行沸腾干燥，干燥温度为75～85℃。
本发明所述的丹参配方颗粒的检测方法，包括性状、检查、鉴别和含量测定项目中的部分或全部，其中：性状应为黄棕色至棕褐色的颗粒；检查应符合中国药典2005年版一部附录IC颗粒项下有关的各项规定；鉴别是以丹参对照药材为对照，采用薄层色谱法进行鉴别；含量测定是对丹参酮II A的含量测定和/或丹酚酸B的含量测定。
鉴别是以丹参对照药材为对照，采用薄层色谱法进行鉴别，具体鉴别方法为：
取本品1.5～2.5g，研细，加乙醚5ml，振摇，放置40～80分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液，取丹参对照药材1g，研细，加乙醚5ml，振摇，放置1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液，照中国药典2005版一部附录VIB薄层色谱法，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯∶乙酸乙酯＝17～21∶0.7～1.3为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
丹参酮IIA的含量测定是以丹参酮IIA为对照品，采用高效液相色谱法进行测定，具体含量测定方法为：
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水＝70～80∶20～30为流动相；检测波长为270nm；理论板数按丹参酮IIA峰计算应不低于2000；精密称取丹参酮IIA对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每1ml中含丹参酮IIA 16μg的对照品溶液；取本品0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，经功率120W、频率59KHZ超声处理15～25分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹参酮IIA不得少于10mg；
丹酚酸B的含量测定是以丹酚酸B为对照品，采用高效液相色谱法进行测定，具体含量测定方法为：
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶乙睛∶甲酸∶水＝25～35∶8～10∶0.5～1.5∶57～61为流动相；检测波长为286nm；理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000；精密称取丹酚酸B对照品适量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得对照品溶液；取本品0.4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，称定重量，经率120W、频率59KHZ超声处理15～25分钟，取出，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹酚酸B不得少于150mg。
本发明所述检测方法包括：
性状：本品应为黄棕色至棕褐色的颗粒；
鉴别：取本品2g，研细，加乙醚5ml，振摇，放置1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参对照药材1g，同法制成对照药材溶液，照中国药典2005版一部附录VIB薄层色谱法，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯∶乙酸乙酯＝19∶1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
检查：应符合中国药典2005年版一部附录IC颗粒项下有关的各项规定；
含量测定：
丹参酮IIA的含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水＝75∶25为流动相；检测波长为270nm；理论板数按丹参酮IIA峰计算应不低于2000；精密称取丹参酮IIA对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每1ml中含丹参酮IIA 16μg的对照品溶液；取本品0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹参酮IIA(C19H18O3)不得少于10mg。
丹酚酸B的含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶乙睛∶甲酸∶水＝30∶10∶1∶59为流动相；检测波长为286nm；理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000；精密称取丹酚酸B对照品适量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得对照品溶液；取本品0.4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，取出，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹酚酸B(C36H30O16)不得少于150mg。
为了确保本发明的制法和质量检测方法科学、合理、可行，本申请人对方法中成分鉴别、含量测定等方法进行了研究，具体实验资料如下：
(一)提取工艺的研究：
为了考察提取工艺的最佳条件，申请人设计了正交试验(见表1、表2)，第一次用乙醇提取，乙醇浓度分别为50％、65％、80％，第一次的提取时间分别为1小时、1.5小时、2小时；第二次用水提取，第二次的提取时间分别为1小时、1.5小时、2小时，提取溶剂量(第一次是乙醇，第二次是水)分别为4000ml、6000ml、8000ml，共进行了9次试验，分别考察收得的总干膏粉和含丹参酮IIA的总量。
表1正交试验计划表
表2总干膏粉的正交试验分析表
| A | B | C | D | |
| T1 | 760 | 749 | 723 | 764 |
| T2 | 754 | 768 | 756 | 757 |
| T3 | 771 | 768 | 806 | 764 |
| R | 17 | 19 | 83 | 7 |
从以上计算分析看，C因素(第二次提取时间)对干膏粉收率的影响最大，其次是第一次提取时间，第三是乙醇浓度，最后是溶剂量。总的来说，差别不大，但是从试验结果看，可能更好的因素水平组合是：乙醇浓度80％、第一次提取时间为1.5～2小时、第二次提取时间为2小时，溶剂量影响不大，选用比较小的溶剂量4000ml。
表3含丹参酮IIA的总量的正交试验分析表
| A | B | C | D | |
| T1 | 6042 | 6177 | 6115 | 6146 |
| T2 | 6174 | 6690 | 6184 | 6170 |
| T3 | 6228 | 5577 | 6145 | 6128 |
| R | 186 | 1113 | 69 | 42 |
从以上计算(见表3)分析看，B因素(第一次提取时间)对含丹参酮IIA的总量的影响最大，其次是乙醇浓度，第三是第二次提取时间，最后是溶剂量。总的来说，要特别控制好B因素(第一次提取时间)，其余因素差别不大，但是从试验结果看，可能更好的因素水平组合是：乙醇浓度80％、第一次提取时间为1.5小时，第二次提取时间为1.5小时，溶剂量影响不大，选用比较小的溶剂量4000ml。
综合以上两个表(表1、表2)的计算和分析来看影响因素：
乙醇浓度：乙醇浓度分别为50％、65％、80％，总干膏粉和含丹参酮IIA的总量与乙醇浓度影响不大，浓度高的效果略好，从安全和节约溶剂的角度出发，选择乙醇浓度为60％～70％比较合适。
第一次提取时间：考察时间分别为1小时、1.5小时、2小时，1.5至2小时对干膏粉收率效果好些，但是时间太长或者太短对含丹参酮IIA的总量都不好，所以选择提取时间为1.5小时。
第二次提取时间：考察时间分别为1小时、1.5小时、2小时，2小时对干膏粉收率效果好些，1.5小时对含丹参酮IIA的总量好些，考虑到第二次提取时间的长短对总干膏粉和含丹参酮IIA的总量的影响都不是很大，而丹参酮IIA的考察更是对其有效成份的考察，所以考虑对含丹参酮IIA的总量的影响，选择提取时间为1.5小时。
提取溶剂量：考察的提取溶剂量(第一次是乙醇，第二次是水)分别为4000ml、6000ml、8000ml，总的来看影响不大，说明溶剂量已经足够大，从节约能源和溶剂的角度了发，选择溶剂量为4000～5000ml。
(二)薄层色谱鉴别：
由于本品是丹参药材提取物，保留了原药材的全部有效成份，为了检验本品是否保留了原药材的全部有效成份，单纯用某一种或两种成份来控制是不行的，所以选用丹参对照药材进行对照，用薄层色谱法来进行鉴别。对于展开剂和薄层板的选择我们做了大量的试验。直接点样于硅胶G薄层板上，展开后效果比较理想，但是展开剂不同其分离度不同，所以考察了几个展开系统，从简单到复杂，有苯∶乙酸乙酯＝10∶5、苯∶乙酸乙酯＝10∶1、最后还是发现以以苯∶乙酸乙酯＝19∶1为展开剂，分离度好，斑点清晰，展开效果好。所以决定采用以下方法：
取本品2g，研细，加乙醚5ml，振摇，放置1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液，取丹参对照药材1g，研细，加乙醚5ml，振摇，放置1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液，照中国药典2005版一部附录VIB薄层色谱法，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯∶乙酸乙酯＝19∶1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
(三)丹参酮IIA的含量测定方法：
照高效液相色谱法测定：
指标成分的选择：参照丹参的成份分析，丹参酮IIA是其主要有效成份之一，所以选定丹参酮IIA为指标成份之一，进行成品含量控制。采用高效液相色谱法对丹参酮IIA行含量测定。
1.仪器与试药
SHIMADZU SPD-10AVP型高效液相色谱仪，UV762型双光束紫外分光光度计，FA2004电子分析天平。甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯，对照品为中检所提供。
2.检测波长的选择
借鉴中国药典2005年版一部丹参药材项下丹参酮IIA含量测定方法。选择相同的检测波长，为270nm，用紫外检测器检测。并通过如下实验确认：取丹参酮IIA对照品的甲醇溶液，在200～600nm波长处进行扫描测定，最大吸收波长与药典丹参酮IIA测定波长(270nm)是一致的。
3.流动相的选择
参照中国药典2005年版一部丹参药材项下丹参酮IIA含量测定方法对本品进行含量测定，即选择甲醇∶水＝75∶25为流动相。
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。
流速：1.0ml/min。
柱温：28℃。
4.供试溶液的制备
4.1对照品溶液的制备
精密称取丹参酮IIA对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得(每1ml中含丹参酮II A16μg)对照品溶液；
4.2样品溶液的制备
取本品约0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；
4.3提取溶剂的考察
取本品0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，加50％甲醇、甲醇、乙醇各50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，放冷，密塞，再称定重量，用相应溶剂补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；按上述色谱条件测定，计算，结果见表4。
表4提取溶剂考察结果
| 提取溶剂 | 50％甲醇 | 甲醇 | 乙醇 |
| 丹参酮IIA含量(mg/ml) | 0.038 | 0.041 | 0.037 |
由表4可知，以甲醇为提取溶剂，提取效率优于50％甲醇、乙醇，因此选用甲醇为提取溶剂。
4.4提取方法的考察
取本品0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，一份超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，另一份置水浴中加热回流20分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；按上述色谱条件进行测定，计算，结果见表2。
表5提取方法考察结果
| 提取方法 | 回流提取 | 超声提取 |
| 丹参酮IIA含量(mg/ml) | 0.040 | 0.041 |
由表5可知，两种方法提取含量几无差异，因此以上选用方便简单的超声处理(功率120W，频率59KHZ)进行提取。
4.5提取时间的考察
取本品0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，分别超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟、30分钟、40分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；按上述色谱条件进行测定，计算，结果见表6。
表6提取时间考察结果
| 提取时间(分钟) | 20 | 30 | 40 |
| 丹参酮IIA含量(mg/ml) | 0.040 | 0.041 | 0.040 |
由表6可知，几种提取时间均能较完全提取，含量测定的结果几无差异，因此提取时间选择为20分钟。
综上所述，供试品溶液的制备方法为：取本品0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；
5.耐用性试验
5.1稳定性试验取本品0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，室温下保存，取对照品溶液及供试品溶液分别于0小时、2小时、4小时、6小时、8小时，按以上拟定含量测定方法测定，结果见表7。
表7稳定性试验结果
| 放置时间(H) | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 |
| 含量(mg/ml) | 0.0401 | 0.0400 | 0.0401 | 0.0399 | 0.0400 |
由表7可知，对照品溶液与供试品溶液在配制后8小时内测定，结果稳定。
5.2不同比例的流动相
实验曾以甲醇∶水＝70∶25、甲醇∶水＝75∶25、甲醇∶水＝75∶20为流动相，流速：1.0ml/min，以SHIMADZUC18柱(5μm，4.6×250mm)为分析柱，柱温28℃，进行试验研究，均能达到满意的分离，测定结果分别为0.0403、0.0409、0.0396，RSD为1.61％。
5.3不同的色谱分析柱
实验曾用SHIMADZU C18柱(5μm，4.6×250mm)、ZIVCHROMI柱(5μ，4.6×150mm)与Kromsil C18柱(5μm，4.6×150mm)为分析柱，以甲醇∶水＝75∶25为流动相，测定结果分别为0.0408、0.0412、0.0399，RSD为1.64％。
综上所述，该方法的耐用性较好。
流动相的比例略作变化，丹参酮II A与其他组分均能达到基线分离，系统适应性好。分别用SHIMADZU、ZIVCHROMI和Kromsil三种品牌的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，丹参酮IIA与其他组分均能达到基线分离，系统适应性好。
6.含量测定方法学研究
6.1标准曲线与线性范围
精密称取丹参酮IIA对照品10.2986mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；分别精密量取该溶液1ml、3ml、5ml、7ml、9ml，置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。丹参酮IIA分别为4.11944ug、12.35832ug、20.59720ug、28.83608ug、37.07496ug，作为供试品溶液。分别精密吸取上述供试品溶液各10μl，按以上拟定色谱条件进行分析，测定峰面积，结果见表8。
表8丹参酮IIA对照品线性范围考察
| 对照品浓度C(μg/ml) | 4.11944 | 12.35832 | 20.59720 | 28.83608 | 37.07496 |
| 峰面积A | 115537 | 345300 | 614487 | 842320 | 1083206 |
丹参酮IIA浓度在4.11944～37.07496μg/ml范围内与峰面积呈很好的线性关系，回归方程及相关系数：A＝295.2328C-79.3553，γ＝0.9997(C为丹参酮IIA浓度，单位μg/ml，A为峰面积)；
6.2重复性试验
按拟定的含量测定方法，取样品共6份，分别制备供试品溶液，按上述色谱条件测定，结果见表9。
表9重复性试验结果
由表9可知，RSD＝0.508％，表明重复性良好。
6.3精密度
从同批本品样品中，同时取样5份，按本发明含量测定方法，分别制备样品供试液测定。列表统计各样的含量和平均含量、RSD。
表10精密度考察结果
从上表10可知，其精密度较好。
6.4样品测定
按照拟定的测定方法对三批样品(批号为091001、091002、091003)的丹参酮IIA含量进行了测定，每批平行测定2次，结果见表11。
表11样品中丹参酮IIA含量测定结果
(四)丹酚酸B的含量测定方法：
照高效液相色谱法测定：
指标成分的选择：参照丹参的成份分析，丹酚酸B是其主要有效成份之一，所以我们选定丹酚酸B为指标成份之一，进行成品含量控制。采用高效液相色谱法对丹酚酸B进行含量测定。
1.仪器与试药
SHIMADZU SPD-10AVP型高效液相色谱仪，UV762型双光束紫外分光光度计，FA2004电子分析天平。甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯，对照品为中检所提供。
2.检测波长的选择
借鉴中国药典2005年版一部丹参药材项下丹酚酸B的含量测定方法。选择相同的检测波长，为286nm，用紫外检测器检测。并通过如下实验确认：取丹酚酸B对照品的甲醇溶液，在200～600nm波长处进行扫描测定，最大吸收波长与药典丹酚酸B的测定波长(286nm)是一致的。
3.流动相的选择
参照中国药典2005年版一部丹参药材项下丹酚酸B的含量测定方法对本品进行含量测定，即选择甲醇∶乙睛∶甲酸∶水＝30∶10∶1∶59为流动相；
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
流速：1.0ml/min；
柱温：26℃。
4.供试溶液的制备
4.1对照品溶液的制备
取丹酚酸B对照品适量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得对照品溶液；
4.2样品溶液的制备
取本品0.4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，取出，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；
4.3提取溶剂的考察
取本品0.4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇、75％甲醇、甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，取出，放冷，再称定重量，用相应溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；按上述色谱条件测定，计算，结果见表12。
表12提取溶剂考察结果
| 提取溶剂 | 50％甲醇 | 75％甲醇 | 甲醇 |
| 丹酚酸B含量(mg/ml) | 0.511 | 0.518 | 0.492 |
由表12可知，以75％甲醇为提取溶剂，提取效率优于50％甲醇、甲醇，因此选用75％甲醇为提取溶剂。
4.4提取方法的研究
取本品0.4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，称定重量，一份超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，另一份置水浴中加热回流20分钟，出，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；按上述色谱条件进行测定，计算，结果见表13。
表13提取方法考察结果
| 提取方法 | 回流提取 | 超声提取 |
| 丹酚酸B含量(mg/ml) | 0.516 | 0.517 |
由表13可知，两种方法提取含量几无差异，因此以上选用方便简单的超声处理(功率120W，频率59KHZ)进行提取。
4.5提取时间的考察
取本品0.4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)10分钟、20分钟、30分钟，取出，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；按上述色谱条件进行测定，计算，结果见表14。
表14提取时间考察结果
| 提取时间(分钟) | 10 | 20 | 30 |
| 丹酚酸B含量(mg/ml) | 0.502 | 0.518 | 0.518 |
由表14可知，几种提取时间均能较完全提取，含量测定的结果差异不大，20分钟和30分钟已经没有差别，因此提取时间选择为20分钟。
综上所述，供试品溶液的制备方法为：取本品0.4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，取出，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；
5.耐用性试验
5.1稳定性试验
取本品0.4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，取出，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，室温下保存，取对照品溶液及供试品溶液分别于0小时、2小时、4小时、6小时、8小时，按含量测定方法测定，结果见表15。
表15稳定性试验结果
| 放置时间(H) | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 |
| 含量(mg/ml) | 0.517 | 0.516 | 0.518 | 0.518 | 0.516 |
由表15可知，对照品溶液与供试品溶液在配制后8小时内测定，结果稳定。
5.2不同比例的流动相
实验曾以甲醇∶乙睛∶甲酸∶水＝30∶10∶2∶58、甲醇∶乙睛∶甲酸∶水＝25∶15∶1∶59、甲醇∶乙睛∶甲酸∶水＝30∶10∶1∶59为流动相，流速：1.0ml/min，以SHIMADZUC18柱(5μm，4.6×250mm)为分析柱，柱温26℃，进行试验研究，均能达到满意的分离，测定结果分别为0.519、0.517、0.516，RSD为0.29％。
5.3不同的色谱分析柱
实验曾用SHIMADZU C18柱(5μm，4.6×250mm)、ZIVCHROMI柱(5μ，4.6×150mm)与Kromsil C18柱(5μm，4.6×150mm)为分析柱，以甲醇∶乙睛∶甲酸∶水＝30∶10∶1∶59为流动相，测定结果分别为0.506、0.514、0.519，RSD为1.28％。
综上所述，该方法的耐用性较好。
流动相的比例略作变化，丹酚酸B与其他组分均能达到基线分离，系统适应性好。分别用SHIMADZU、ZIVCHROMI和Kromsil三种品牌的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，丹酚酸B与其他组分均能达到基线分离，系统适应性好。
6.含量测定方法学研究
6.1标准曲线与线性范围
精密称取丹酚酸B对照品28.3147mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；分别精密量取该溶液1ml、3ml、5ml、7ml、9ml，置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。丹酚酸B分别为11.32588ug、33.97764ug、56.6294ug、79.28116ug、101.93292ug，作为供试品溶液。分别精密吸取上述供试品溶液各10μl，按以上拟定色谱条件进行分析，测定峰面积，结果见表16。
表16丹酚酸B对照品线性范围考察
| 对照品浓度(μg/ml) | 11.32588 | 33.97764 | 56.6294 | 79.28116 | 101.93292 |
| 峰面积A | 535949 | 1607917 | 2679786 | 3751541 | 4823517 |
丹酚酸B浓度在11.32588～101.93292μg/ml范围内与峰面积呈很好的线性关系，回归方程及相关系数：A＝473.213C-144.0953，γ＝0.9998(C为丹酚酸B浓度，单位μg/ml，A为峰面积)；
6.2重复性试验
按本发明的含量测定方法，取样品共6份，分别制备供试品溶液，按上述色谱条件测定，结果见表17。
表17重复性试验结果
由表17可知，RSD＝1.71％，表明重复性良好。
6.3精密度
从同批本品样品中，同时取样5份，按本发明的含量测定方法方法，分别制备样品供试液测定。列表统计各样的含量和平均含量、RSD。
表18精密度考察结果
从上表18可知，其精密度较好。
6.4样品测定
按照拟定的测定方法对三批样品(批号为091001、091002、091003)的丹酚酸B含量进行了测定，每批平行测定2次，结果见表19。
表19中丹酚酸B含量测定结果
本发明的有益效果：
本发明的制备方法：其方法简单，成本低廉，适合工业化生产。它是将原药料丹参粉碎，加乙醇，加热提取，喷雾干燥，收集膏粉，加入辅料，加适量水，制粒，干燥，分装而成的中药颗粒，该颗粒能直接供中药处方中配伍使用。本方法生产的丹参配方颗粒保持了丹参饮片的全部特征，其有效成分、性味、归经、主治、功效和传统丹参中药饮片完全一致，而单位质量有效成份比传统丹参饮片高若干倍；它既能保证中医传统的君、臣、佐、使和辩证施治、灵活加减的特点，同时又免去了病人传统煎煮的麻烦，具有不需要煎煮、直接冲服、服用量少、作用迅速、成份完全、疗效确切、安全卫生、携带保存方便等许多优点。
本发明的检测方法：由上述具体试验资料表明，本发明是一种具体可行的成分鉴别和含量测定方法，所采用的鉴别方法专属性强，含量测定准确度高，重现性好，为生产单位、检测机构提供了检测指标、检测手段和技术方法等，以能更好的指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，在产品生产过程中，用该质量测定方法能有效的控制产品的质量，从而确保丹参配方颗粒物的临床疗效和安全性。
具体实施方式
实施例1：丹参配方颗粒的制备方法一
取干燥无杂质的丹参1000克，用粉碎机粉碎成粗粉，将丹参粗粉装入提取罐中，加入浓度为70％的乙醇4000ml，加热至沸腾，回流提取1.5小时，收集提取液；将提取液进行过滤，滤液于55～65℃减压回收乙醇，乙醇回收完即可，于85℃左右喷雾干燥，收集所得的膏粉，备用；将提取罐中的残留药渣加水，加热至沸腾，煎煮1.5小时，收集煎煮液，过滤，取滤液，于75～85℃减压浓缩至相对密度为1.03～1.20，于95℃左右喷雾干燥，收集所得的膏粉，备用；取两次制得的膏粉，加入重量为膏粉总重量1.5倍的蔗糖粉(或乳糖粉)作填充剂和润滑剂，混合均匀，加适量水，制粒，置于沸腾干燥器中干燥(温度80℃左右)，分装成200袋，即得本品丹参配方颗粒。
实施例2：丹参配方颗粒的制备方法二
取干燥无杂质的丹参1000克，用粉碎机粉碎成粗粉，将丹参粗粉装入提取罐中，加入浓度为75％的乙醇4500ml，加热至沸腾，回流提取1.2小时，收集提取液；将提取液进行过滤，滤液于55～60℃减压回收乙醇，乙醇回收完即可，于85℃左右喷雾干燥，收集所得的膏粉，备用；将提取罐中的残留药渣加水，加热至沸腾，煎煮1.2小时，收集煎煮液，过滤，取滤液，于80℃左右减压浓缩至相对密度为1.05～1.10，于92℃左右喷雾干燥，收集所得的膏粉，备用；取两次制得的膏粉，加入重量为膏粉总重量1.3倍的蔗糖粉(或可溶性淀粉)作填充剂和润滑剂，混合均匀，加适量水，制粒，置于沸腾干燥器中干燥(温度78℃左右)，分装成200袋，即得本品丹参配方颗粒。
实施例3：丹参配方颗粒的检测方法一
性状：应为黄棕色至棕褐色的颗粒；
成分鉴别：
取本品2g，研细，加乙醚5ml，振摇，放置1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参对照药材1g，同法制成对照药材溶液，照中国药典2005版一部附录VIB薄层色谱法，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯∶乙酸乙酯＝19∶1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
检查：应符合中国药典2005年版一部附录IC颗粒项下有关的各项规定；
含量测定：
丹参酮IIA的含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水＝75∶25为流动相；检测波长为270nm；理论板数按丹参酮IIA峰计算应不低于2000；精密称取丹参酮IIA对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每1ml中含丹参酮IIA 16μg的对照品溶液；取本品0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹参酮IIA(C19H18O3)不得少于10mg；
丹酚酸B的含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶乙睛∶甲酸∶水＝30∶10∶1∶59为流动相；检测波长为286nm；理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000；精密称取丹酚酸B对照品适量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得对照品溶液；取本品0.4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，取出，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹酚酸B(C36H30O16)不得少于150mg。
实施例4：丹参配方颗粒的检测方法二
性状：应为黄棕色至棕褐色的颗粒；
成分鉴别：
取本品2g，研细，加乙醚5ml，振摇，放置1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参对照药材1g，同法制成对照药材溶液，照中国药典2005版一部附录VIB薄层色谱法，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯∶乙酸乙酯＝19∶1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
检查：应符合中国药典2005年版一部附录IC颗粒项下有关的各项规定；
实施例5：丹参配方颗粒的检测方法三
性状：应为黄棕色至棕褐色的颗粒；
检查：应符合中国药典2005年版一部附录IC颗粒项下有关的各项规定；
含量测定：
丹参酮IIA的含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水＝75∶25为流动相；检测波长为270nm；理论板数按丹参酮IIA峰计算应不低于2000；精密称取丹参酮IIA对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每1ml中含丹参酮IIA 16μg的对照品溶液；取本品0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹参酮IIA(C19H18O3)不得少于10mg；
丹酚酸B的含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶乙睛∶甲酸∶水＝30∶10∶1∶59为流动相；检测波长为286nm；理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000；精密称取丹酚酸B对照品适量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得对照品溶液；取本品0.4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，取出，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹酚酸B(C36H30O16)不得少于150mg。
实施例6：丹参配方颗粒的检测方法四
性状：应为黄棕色至棕褐色的颗粒；
成分鉴别：
取本品2g，研细，加乙醚5ml，振摇，放置1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参对照药材1g，同法制成对照药材溶液，照中国药典2005版一部附录VIB薄层色谱法，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯∶乙酸乙酯＝19∶1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
含量测定：
丹参酮IIA的含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水＝75∶25为流动相；检测波长为270nm；理论板数按丹参酮IIA峰计算应不低于2000；精密称取丹参酮IIA对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每1ml中含丹参酮IIA 16μg的对照品溶液；取本品0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹参酮IIA(C19H18O3)不得少于10mg；
丹酚酸B的含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶乙睛∶甲酸∶水＝30∶10∶1∶59为流动相；检测波长为286nm；理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000；精密称取丹酚酸B对照品适量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得对照品溶液；取本品0.4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率59KHZ)20分钟，取出，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹酚酸B(C36H30O16)不得少于150mg。
Claims (8)
1.一种丹参配方颗粒的制备方法，其特征在于：
取干燥的丹参1000克，粉碎成粗粉，将丹参粗粉装入提取罐中，加入浓度为60％～80％的乙醇3500ml～4500ml，加热回流提取1～2小时，收集提取液；将提取液过滤，滤液减压回收乙醇，喷雾干燥，收集所得的膏粉，备用；将提取罐中的残留药渣加水，加热煎煮1～2小时，收集煎煮液，过滤，取滤液，减压浓缩后，喷雾干燥，收集所得的膏粉，备用；取两次制得的膏粉，加入重量为膏粉总重量1～2倍的药用辅料，混合均匀，制粒，干燥，分装成200袋，即得本品丹参配方颗粒。
2.根据权利要求1所述丹参配方颗粒的制备方法，其特征在于：所述丹参配方颗粒是由如下具体方法制备而成：
取干燥无杂质的丹参1000克，用粉碎机粉碎成粗粉，将丹参粗粉装入提取罐中，加入浓度为68％～75％的乙醇4000ml，加热至沸腾，回流提取1.5小时，收集提取液；将提取液进行过滤，滤液减压回收乙醇，喷雾干燥，收集所得的膏粉，备用；将提取罐中的残留药渣加水，加热至沸腾，煎煮1.5小时，收集煎煮液，过滤，取滤液，减压浓缩后，喷雾干燥，收集所得的膏粉，备用；取两次制得的膏粉，加入重量为膏粉总重量1.5倍的药用辅料，混合均匀，加适量水，制粒，置于沸腾干燥器中干燥，分装成200袋，即得本品丹参配方颗粒。
3.根据权利要求1或2所述丹参配方颗粒的制备方法，其特征在于：所述药用辅料为蔗糖粉，或者乳糖粉，或者其它适宜药用粉末辅料。
4.根据权利要求1或2所述丹参配方颗粒的制备方法，其特征在于：所述乙醇提取液的滤液于55～65℃减压回收乙醇，乙醇回收完即可，喷雾干燥的温度为80～90℃；水煎煮液的滤液于75～85℃减压浓缩至相对密度为1.03～1.20，喷雾干燥的温度为90～100℃。
5.根据权利要求1或2所述丹参配方颗粒的制备方法，其特征在于：所述的干燥方法是用沸腾干燥器进行沸腾干燥，干燥温度为75～85℃。
6.一种权利要求1或2所述丹参配方颗粒的检测方法，该检测方法含性状、检查、鉴别和含量测定项目的部分或全部，其特征在于：性状应为黄棕色至棕褐色的颗粒；检查应符合中国药典2005年版一部附录IC颗粒项下有关的各项规定，鉴别是用丹参对照药材进行的丹参鉴别，含量测定是对丹参酮IIA的含量测定和/或丹酚酸B的含量测定；
鉴别是以丹参对照药材为对照，采用薄层色谱法进行鉴别；
丹参酮IIA的含量测定是以丹参酮IIA为对照品，采用高效液相色谱法进行测定；
丹酚酸B的含量测定是以丹酚酸B为对照品，采用高效液相色谱法进行测定。
7.根据权利要求6所述丹参配方颗粒的检测方法，其特征在于：
以丹参对照药材为对照，采用薄层色谱法进行鉴别，鉴别方法为：
取本品1.5～2.5g，研细，加乙醚5ml，振摇，放置40～80分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液，取丹参对照药材1g，研细，加乙醚5ml，振摇，放置1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液，照中国药典2005版一部附录VIB薄层色谱法，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯∶乙酸乙酯＝17～21∶0.7～1.3为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
含量测定是对丹参酮IIA的含量测定，测定方法为：
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水＝70～80∶20～30为流动相；检测波长为270nm；理论板数按丹参酮IIA峰计算应不低于2000；精密称取丹参酮IIA对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每1ml中含丹参酮IIA 16μg的对照品溶液；取本品0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，经功率120W、频率59KHZ超声处理15～25分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹参酮IIA不得少于10mg；
丹酚酸B的含量测定，测定方法为：
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶乙睛∶甲酸∶水＝25～35∶8～10∶0.5～1.5∶57～61为流动相；检测波长为286nm；理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000；精密称取丹酚酸B对照品适量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得对照品溶液；取本品0.4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，称定重量，经率120W、频率59KHZ超声处理15～25分钟，取出，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹酚酸B不得少于150mg。
8.根据权利要求6所述丹参配方颗粒的检测方法，其特征在于：所述检测方法包括：
性状：本品应为黄棕色至棕褐色的颗粒；
鉴别：取本品2g，研细，加乙醚5ml，振摇，放置1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参对照药材1g，同法制成对照药材溶液，照中国药典2005版一部附录VIB薄层色谱法，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯∶乙酸乙酯＝19∶1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
检查：应符合中国药典2005年版一部附录IC颗粒项下有关的各项规定；
含量测定：
丹参酮IIA的含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水＝75∶25为流动相；检测波长为270nm；理论板数按丹参酮IIA峰计算应不低于2000；精密称取丹参酮IIA对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每1ml中含丹参酮IIA 16μg的对照品溶液；取本品0.5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，经率120W、频率59KHZ超声处理25分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹参酮IIA不得少于10mg；
丹酚酸B的含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶乙睛∶甲酸∶水＝30∶10∶1∶59为流动相；检测波长为286nm；理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000；精密称取丹酚酸B对照品适量，加75％甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得对照品溶液；取本品0.4g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，称定重量，功率120W、频率59KHZ超声处理20分钟，取出，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每袋含丹酚酸B不得少于150mg。
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Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102614254A (zh) * | 2012-03-27 | 2012-08-01 | 安徽华佗国药股份有限公司 | 一种丹参的提取方法 |
| CN102846705A (zh) * | 2011-06-28 | 2013-01-02 | 亚宝药业集团股份有限公司 | 一种治疗心血管疾病的紫丹参有效部位及其制备方法 |
| CN104474016A (zh) * | 2014-12-24 | 2015-04-01 | 九寨沟天然药业集团有限责任公司 | 一种丹参冲剂的制备方法及其检测方法 |
| CN104523830A (zh) * | 2014-12-24 | 2015-04-22 | 四川逢春制药有限公司 | 一种丹参舒心胶囊的制备方法及其检测方法 |
| CN106265532A (zh) * | 2016-09-27 | 2017-01-04 | 龚志南 | 添加表面活性物质共同煎煮的中药配方颗粒制备方法 |
| CN109528824A (zh) * | 2018-12-10 | 2019-03-29 | 江西赣隆药业有限公司 | 一种紫丹参配方颗粒及其制备方法 |
| CN109528955A (zh) * | 2018-12-21 | 2019-03-29 | 江西赣隆药业有限公司 | 具有健脾开胃和清暑化湿功效的黔曲配方颗粒的制备方法以及由该方法制备的黔曲配方颗粒 |
| CN110716002A (zh) * | 2019-06-18 | 2020-01-21 | 南宁市妇幼保健院 | 十味参归灌肠液的质量控制方法 |
| CN112386574A (zh) * | 2020-11-30 | 2021-02-23 | 四川金辉药业有限公司 | 一种无糖型丹参颗粒的制备方法 |
| CN115969900A (zh) * | 2022-12-23 | 2023-04-18 | 贵州威利德制药有限公司 | 一种丹参膏药物的制备及其检测方法 |
-
2010
- 2010-09-17 CN CN 201010286015 patent/CN101961381A/zh active Pending
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| <<中华人民共和国药典2005年版第一部>> 20051231 国家药典委员会 丹参 52 6-8 , 1 * |
| > 20041231 谢胜新 HPLC法测定丹参和丹参配方颗粒中丹参酮IIA的含量的研究 52-53 1-8 第38卷, 第12期 2 * |
| > 20070831 付静等 中药配方颗粒工艺研究概况 522-524 1-8 第26卷, 第8期 2 * |
| > 20070831 吴婧等 丹参配方颗粒红外无损快速分析研究 1535-1537 1-8 第27卷, 第8期 2 * |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102846705A (zh) * | 2011-06-28 | 2013-01-02 | 亚宝药业集团股份有限公司 | 一种治疗心血管疾病的紫丹参有效部位及其制备方法 |
| CN102846705B (zh) * | 2011-06-28 | 2014-10-22 | 亚宝药业集团股份有限公司 | 一种治疗心血管疾病的紫丹参有效部位及其制备方法 |
| CN102614254A (zh) * | 2012-03-27 | 2012-08-01 | 安徽华佗国药股份有限公司 | 一种丹参的提取方法 |
| CN104474016A (zh) * | 2014-12-24 | 2015-04-01 | 九寨沟天然药业集团有限责任公司 | 一种丹参冲剂的制备方法及其检测方法 |
| CN104523830A (zh) * | 2014-12-24 | 2015-04-22 | 四川逢春制药有限公司 | 一种丹参舒心胶囊的制备方法及其检测方法 |
| CN106265532A (zh) * | 2016-09-27 | 2017-01-04 | 龚志南 | 添加表面活性物质共同煎煮的中药配方颗粒制备方法 |
| CN106265532B (zh) * | 2016-09-27 | 2019-07-23 | 龚志南 | 添加表面活性物质共同煎煮的中药配方颗粒制备方法 |
| CN109528824A (zh) * | 2018-12-10 | 2019-03-29 | 江西赣隆药业有限公司 | 一种紫丹参配方颗粒及其制备方法 |
| CN109528955A (zh) * | 2018-12-21 | 2019-03-29 | 江西赣隆药业有限公司 | 具有健脾开胃和清暑化湿功效的黔曲配方颗粒的制备方法以及由该方法制备的黔曲配方颗粒 |
| CN110716002A (zh) * | 2019-06-18 | 2020-01-21 | 南宁市妇幼保健院 | 十味参归灌肠液的质量控制方法 |
| CN112386574A (zh) * | 2020-11-30 | 2021-02-23 | 四川金辉药业有限公司 | 一种无糖型丹参颗粒的制备方法 |
| CN115969900A (zh) * | 2022-12-23 | 2023-04-18 | 贵州威利德制药有限公司 | 一种丹参膏药物的制备及其检测方法 |
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