CN101868537A - 具有改变性质的葡糖淀粉酶变体 - Google Patents

具有改变性质的葡糖淀粉酶变体 Download PDF

Info

Publication number
CN101868537A
CN101868537A CN200880116695A CN200880116695A CN101868537A CN 101868537 A CN101868537 A CN 101868537A CN 200880116695 A CN200880116695 A CN 200880116695A CN 200880116695 A CN200880116695 A CN 200880116695A CN 101868537 A CN101868537 A CN 101868537A
Authority
CN
China
Prior art keywords
glucoamylase
variant
parent
seq
sequence
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN200880116695A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101868537B (zh
Inventor
W·埃赫勒
R·R·博特
M·舍费尔斯
P·范索林恩
C·弗勒门
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Danisco USA Inc
Danisco US Inc
Original Assignee
Danisco USA Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=40352212&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CN101868537(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Danisco USA Inc filed Critical Danisco USA Inc
Publication of CN101868537A publication Critical patent/CN101868537A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101868537B publication Critical patent/CN101868537B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14Hydrolases (3)
    • C12N9/24Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405Glucanases
    • C12N9/2408Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2411Amylases
    • C12N9/2428Glucan 1,4-alpha-glucosidase (3.2.1.3), i.e. glucoamylase
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/02Monosaccharides
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/14Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/02Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
    • C12P7/04Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
    • C12P7/06Ethanol, i.e. non-beverage
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02EREDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
    • Y02E50/00Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
    • Y02E50/10Biofuels, e.g. bio-diesel

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

本公开文本涉及具有改变性质(例如:改善的热稳定性和/或比活性)的亲本葡糖淀粉酶的变体。特别的,本公开文本提供包含变体葡糖淀粉酶的组合物,包括淀粉水解组合物和清洁组合物。公开文本还涉及编码变体的DNA构建体,和在宿主细胞内生产葡糖淀粉酶变体的方法。

Description

具有改变性质的葡糖淀粉酶变体
相关申请的交叉引用
本申请要求于2007年11月20日提交的美国临时申请第60/989,426号的权益。
序列表
还附加有包括SEQ ID NO:1-167的序列表,其以整体引入作为参考。
发明领域
具有改变的性质(例如:改善的热稳定性和/或比活性)的葡糖淀粉酶变体。提供了包含变体葡糖淀粉酶的组合物,编码变体的DNA构建体,和在宿主细胞内生产葡糖淀粉酶变体的方法。
发明背景
葡糖淀粉酶(葡聚糖1,4-α-葡糖水解酶,EC3.2.1.3)是淀粉水解的外切糖酶,催化从淀粉或相关的寡糖和多糖分子的非还原末端移除连续的葡萄糖单元。葡糖淀粉酶可以水解淀粉(例如:直链淀粉和支链淀粉)的直链和分支的糖苷键。
多种细菌、真菌、酵母和植物都生产葡糖淀粉酶。特别有趣的,且商业上重要的是,葡糖淀粉酶是胞外生产的真菌酶,例如来自以下属的菌株:曲霉属(Aspergillus)(Svensson等人,(1983)Carlsberg Res.Commun.48:529-544;Boel等人,(1984)EMBO J.3:1097-1102;Hayashida等人,(1989)Agric.Biol.Chem.53:923-929;US专利5,024,941;US专利4,794,175和WO88/09795);踝节菌属(Talaromyces)(US专利4,247,637;US专利6,255,084和US专利6,620,924);根霉属(Rhizopus)(Ashikari等人,(1986)Agric.Biol.Chem.50:957-964;Ashikari等人,(1989)App.Microbiol.Biotech.32:129-133和US专利4,863,864);腐质霉属(Humicola)(WO 05/052148和US专利4,618,579)和毛霉属(Mucor)(Houghton-Larsen等人,(2003)Appl.Microbiol.Biotechnol.62:210-217)。编码这些酶的许多基因都已经在酵母、真菌和/或细菌细胞内得到克隆和表达。
在商业上,葡糖淀粉酶是非常重要的酶,已经在多种需要淀粉水解的应用中使用(例如从淀粉中生产葡萄糖和其它单糖)。葡糖淀粉酶用于生产高果糖的玉米增甜剂.其占据超过50%的美国增甜剂市场。一般,在淀粉水解过程中,葡糖淀粉酶可以是且通常是与α淀粉酶一起使用,将淀粉水解为糊精,再水解为葡萄糖。然后,葡萄糖可以通过其它酶转化为果糖(例如:葡萄糖异构酶);结晶;或在发酵中使用来生产多种终产物(例如:乙醇、柠檬酸、乳酸、琥珀酸盐、抗坏血酸中间体、谷氨酸、甘油和1,3丙二醇)。在含有淀粉和/或纤维素的材料的发酵中使用葡糖淀粉酶生产的乙醇可以作为燃料来源或用于醇消费。
虽然葡糖淀粉酶已经成功用于商业应用多年,但是仍然需要具有改变性质的新型葡糖淀粉酶,所述性质例如改善的比活性和增加的热稳定性。
曲霉属的葡糖淀粉酶已经产生了不同的突变,其增加了热稳定性和比活性,参考US专利6,537,792;US专利6,352,851;Chen等人,(1996)Prot.Eng.9:499-505,Chen等人,(1995)Prot Eng.8:575-582;Fierobe等人,(1996)Biochem.35:8698-8704;和Li等人,(1997)Prot.Eng.10:1199-1204,但是仍然需要提供葡糖淀粉酶变体,相对于它们的亲本具有改变的性质。
发明概述
本公开文本涉及亲本葡糖淀粉酶的葡糖淀粉酶变体。葡糖淀粉酶变体在催化结构域和/或淀粉结合结构域含有氨基酸取代。变体表现出具有改变的性质,例如改善的热稳定性和/或比活性。
在一个方面,本公开文本涉及这样的葡糖淀粉酶变体,所述变体在相应于SEQ ID NO:2的第61、73、417、430、431、503、511、535、539或563位和/或亲本葡糖淀粉酶中的等价位置上具有两个或多于两个的氨基酸取代。在另一个方面,本公开文本涉及这样的葡糖淀粉酶变体,所述变体具有与SEQ ID NO:1、2、3、5、6、7、8或9的亲本葡糖淀粉酶至少80%、85%、90%、95%或99.5%的序列同一性。在一个实施方案中,亲本葡糖淀粉酶具有这样的催化结构域,所述结构域与SEQ ID NO:1、2、3、5、6、7、8或9具有至少80%的序列同一性,或者具有这样的淀粉结合结构域,所述结构域与SEQ ID NO:1或2具有至少80%的序列同一性。在其他方面,亲本葡糖淀粉酶是SEQ ID NO:1或2。本公开文本的另一方面涉及这样的葡糖淀粉酶变体,所述变体还在相应于SEQ ID NO:2的第4、5、12、24、43、44、45、46、47、49、51、70、75、6、94、100、108、114、116、119、122、124、125、137、141、143、146、148、169、171、172、175、178、180、181、208、211、228、242、243、245、292、294、197、309、310、313、314、315、316、317、321、340、341、350、353、356、363、368、369、375、376、395、398、401、408、409、412、415、418、421、433、436或451位或亲本葡糖淀粉酶中等价的位置,包含一个或多个氨基酸取代。在一些方面,葡糖淀粉酶变体还在相应于SEQ ID NO:2的第4、5、24、29、43、44、49、70、75、76、100、108、119、124、137、146、148、169、171、172、175、178、181、208、211、243、292、294、297、314、316、317、340、341、350、356、363、368、369、376、395、401、412、433、436或451位或亲本葡糖淀粉酶中等价的位置,包含一个或多个氨基酸取代。在一些方面,葡糖淀粉酶变体还在相应于SEQ ID NO:2的第5、24、43、44、49、70、75、76、94、119、141、146、148、172、175、178、180、181、208、211、243、294、309、314、353、369、375或409位或亲本葡糖淀粉酶中等价的位置,包含一个或多个氨基酸取代。在一些方面,葡糖淀粉酶还在相应于SEQ ID NO:2的第43、44或294位或亲本葡糖淀粉酶中等价的位置,包含一个或多个氨基酸取代。
在本发明的其它方面,葡糖淀粉酶变体在对应于SEQ ID NO:2的N61I、G73F、L417R/V、T430A/M、A431L/Q、E503A/V、Q511H、A535R、A539R或N563I/K的位置中,或亲本葡糖淀粉酶中等价的位置中,包括两个或多于两个的氨基酸取代。在一些方面,葡糖淀粉酶变体还包括一个或多个下列取代:SEQ ID NO:2的D4L/E/R/S/C/A/Q/W、F5C/M/N/R/S/T/V/W、I12L/R、D24E/L/Y/T、F29L/I/D/C/S/V/W、I43F/R/D/Y/S/Q、D44E/H/K/S/N/Y/F/R/C、Y47W、Y49N、Q70R/K/M/P/G/L/F、Q75R/K/A、R76L/M/K/T/P、P94L、D100W/I/Q/M/P/A/N、N119P/T/Y/D/E、N146S/G/C/H/E/D/T/W/L/F/M、Q148V/Y/H/A/C/D/G/M/R/S/T、Y169D/F、Q172C/A/D/R/E/F/H/V/L/M/N/S/T/V、F175H/A/G/R/S/T/C/W/Y、W178A/C/D/E/F/G/H/K/N/R/S/T/V/Y、E180A/C/G/H/I/L/N/P/Q/R/S/T/V/Y/、V181E/C/D/G/H/I/P/T/Y/S/L/K/F/A、Q208L/A/C/E/N/F/H/T、S211C/R/E/A/Y/W/M/H/L/I/R/Q/T、E243S/R/N/M/Y/A/L、R245A/E/M/I/P/V、I292D/H/P/R/T/N/V/F/L、G294C/D/E/T/Q/I/A、K297F/L/P/T/M/D/N/Q/A/Y/H/S/R/W、R309A/C/G/H/I/N/P/Q/S/T/W/Y/L、Y310E/G/L/P/S/W/R/Q、D313Q、V314A/R/N/D/C/E/Q/G/H/I/L/K/M/F/P/S/T/W/Y、Y315F、Y316Q/R、N317T/H、K340D/T、K341F/D/P/V/G/S、T350S/E/A/N、Q356H/D/E、T363L/R/C/H/W、S368W/D/F/L、S369F、N376Q/T/H/S/V、Y395Q/R/S、A398S/I/T、S401C/V、R408S、N409W/T/K、T412A/H/K/G、R433H/Q、I436A/T或S451M/T/H,或在亲本葡糖淀粉酶中等价的位置中。在一些方面,葡糖淀粉酶变体还包括一个或多个下列取代:SEQ ID NO:2的I43F/R/D/Y/S/Q、D44E/H/K/S/N/Y/F/R/C或G294C/D/E/T/Q/I/A,或在亲本葡糖淀粉酶中等价的位置中。
在一个方面,本公开文本涉及这样的葡糖淀粉酶,其在对应于SEQ IDNO:2的I43Q/D44C、D44C/G294C、I43Q/G294C或I43Q/D44C/G294,或亲本葡糖淀粉酶中的等价位置的位置中包括氨基酸取代。葡糖淀粉酶变体具有与SEQ ID NO:1、2、3、5、6、7、8或9至少80%、85%、90%、95%或99.5%的序列同一性。在一个实施方案中,亲本葡糖淀粉酶具有与SEQID NO:1、2、3、5、6、7、8或9至少80%序列同一性的催化结构域,或者具有与SEQ ID NO:1或2至少80%序列同一性的淀粉结合结构域。
亲本葡糖淀粉酶可以是获得自任意下列属的物种的酶:木霉属(Trichoderma)、曲霉属、腐质霉属、青霉属(Penicillium)、踝节菌属(Talaromycese),或裂殖酵母属(Schizosaccharmyces)。在一些方面,亲本葡糖淀粉酶可以来自木霉属或曲霉属的物种。
在一个方面,与亲本葡糖淀粉酶相比,变体葡糖淀粉酶表现出改变的热稳定性。改变的热稳定性可以是增加的热稳定性。可选的,或者此外,变体还表现出与亲本葡糖淀粉酶相比改变的比活性。改变的比活性可以是增加的比活性。
本公开文本的另一方面是编码所述变体的多核苷酸。另一方面是包含多核苷酸的载体。另一方面是含有载体的宿主细胞。
本公开文本的另一方面是包括葡糖淀粉酶变体的酶组合物。在一个方面,酶组合物用于淀粉转化过程或醇发酵过程中。
发明的另一方面是生产变体葡糖淀粉酶的方法,这是通过在适合葡糖淀粉酶变体表达和生产的条件下培养含有多核苷酸的宿主细胞,并生产变体。方法还可以包括从培养物中回收葡糖淀粉酶变体的步骤。
附图简述
图lA描述了具有632个氨基酸的里氏木霉葡糖淀粉酶(TrGA)的亲本葡糖淀粉酶(SEQ ID NO:1)。信号肽用下划线标出,催化区域(SEQ IDNO:3)用粗体标出,开始于氨基酸残基SVDDFI(SEQ ID NO:160),具有453个氨基酸残基;接头区用斜体标出;淀粉结合结构域(SEQ IDNO:161)既用斜体又用下划线标出。成熟的蛋白质由SEQ ID NO:2表示,包括催化结构域(SEQ ID NO:3)、接头区域和淀粉结合结构域(SEQ IDNO:161)。图1B示例了编码TrGA的cDNA(SEQ ID NO:4)。
图2描述了质粒pDONR-TrGA,其包括亲本TrGA的cDNA(SEQ IDNO:4)。
图3描述了质粒pREP3Y-DEST(A)和pREP3Y-TrGA(C)。
图4A-4B描述了亲本葡糖淀粉酶的催化结构域的比对比较,包括来自泡盛曲霉(Aspergillus awamori)(AaGA)(SEQ ID NO:5);黑曲霉(Aspergillus niger)(AnGA)(SEQ ID NO:6);米曲霉(Aspergillus orzyae)(AoGA)(SEQ ID NO:7);里氏木霉(Trichoderma reesei)(TrGA)(SEQ ID NO:3);灰腐质霉(Humicola grisea)(HgGA)(SEQ ID NO:8);和Hypocrea vinosa(HvGA)(SEQ ID NO:9)的葡糖淀粉酶。用星号(*)指示了相同的氨基酸。
图4C-4D描述了亲本葡糖淀粉酶的淀粉结合结构域(SBD)的比对比较,包括里氏木霉(TrGA)(SEQ ID NO:161);灰腐质霉(HgGA)(SEQID NO:162);太瑞斯梭孢壳霉(Thielavia terrestris)(TtGA)(SEQ IDNO:163);疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)(ThGA)(SEQID NO:164);埃默森踝节菌(Talaromyces emersonii)(AnGA)(SEQID NO:165);黑曲霉(AnGA)(SEQ ID NO:166);和泡盛曲霉(AaGA)(SEQ ID NO:167)的葡糖淀粉酶。用点号(.)指示了相同的氨基酸。
图5A描述了质粒pTrex 3g-DEST。图5B描述了质粒pTrex3g-TrGA。质粒用作表达载体,用于在里氏木霉宿主中表达和生产变体葡糖淀粉酶。
图6描述了在60℃和32℃下,亲本(野生型)TrGA和变体V314、S211R、Q172F和Q208N之间的Vmax(μM葡萄糖/秒)比较,在实施例8中进一步进行讨论。
图7描述了组合变体对淀粉底物的活性。本文描述的组合变体包括ET7-1(D24Y/V181L/Q208C/G294A/T353R/N375N/N409W)、LR8(Q172F/Q208N)、LR12(Q172F/S211R)、LR6(Q172F/Q208N/V314H)、ET8-1(D24E/V181K/E243Y/I292V/G294Q/N409K)和ET7-2(Q24L/V181L/Q208C/G294A/T353R/N375Q/N409W)。活性以在340nm处作为所示纳克的葡糖淀粉酶变体的函数的吸收单位表示。
图8描述了单位点变体对玉米淀粉底物的活性。本文描述的单位点变体包括V314H、G294Q、S211R、Q208N、Q172F、G294I和P94N。活性以在340nm处作为所示纳克的葡糖淀粉酶变体的函数的吸收单位表示。
图9描述了TrGA和TrGA变体LR8(Q172F/Q208N)对玉米醪液液化物(liquefact)(NE)样品的葡糖淀粉酶活性。
图10描述了TrGA和TrGA变体LR8(Q172F/Q208N)对玉米醪液液化物(BSE)样品的活性谱。
图11描述了TrGA和TrGA变体LR8(Q172F/Q208N)对可溶性玉米淀粉底物样品的活性谱。
图12是从侧面观察里氏木霉葡糖淀粉酶(黑色)(SEQ ID NO:2)和泡盛曲霉葡糖淀粉酶(灰色)三维结构的比较。
图13是从顶部观察里氏木霉葡糖淀粉酶(黑色)和泡盛曲霉葡糖淀粉酶(灰色)三维结构的比较。
图14A描述了质粒pTTT-Dest。图14B描述了质粒pTTT-TrGA(B)。
发明的详细描述
葡糖淀粉酶是在多种需要水解淀粉的应用中,具有商业重要意义的酶。本文描述的葡糖淀粉酶变体在催化结构域或淀粉结合结构域内含有氨基酸取代。变体可以表现出改变的性质,例如改善的热稳定性和/或比活性。具有改善的热稳定性和/或比活性的变体可以显著增加从例如玉米淀粉生产葡萄糖和燃料乙醇的效率。
I.定义
除非另外定义,本文中使用的所有技术和科学术语都具有与本发明所属领域技术人员常规理解的相应术语相同的含义。Singleton等人,DICTIONARY OF MICROBIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY,第2版,John Wiley and Sons,New York(1994),和Hale & Markham,THEHARPER COLLINS DICTIONARY OF BIOLOGY,Harper Perennial,N.Y.(1991)为技术人员提供了本文中使用的许多术语的常规含义。但是,出于清楚和便于参考的原因,下文仍然定义了一些术语。
如本文中使用的,术语“葡糖淀粉酶(EC 3.2.1.3)”指催化从淀粉和相关的寡糖和多糖的非还原端释放D-葡萄糖的酶。
术语“亲本”或“亲本序列”指宿主细胞内天然的或天然存在的序列。亲本系列包括但不限于SEQ ID NO:1、2、3、5、6、7、8和9中提出的葡糖淀粉酶序列。
如本文中使用的,“等价的位置”意指基于对所讨论的亲本葡糖淀粉酶氨基酸序列以及对所讨论的亲本葡糖淀粉酶三维结构与TrGA参照葡糖淀粉酶氨基酸序列(SEQ ID NO:2)和三维序列的比对,两条亲本序列共同的位置。
术语“TrGA”指具有SEQ ID NO:2中所示成熟蛋白质序列的亲本里氏木霉葡糖淀粉酶序列,其包括具有SEQ ID NO:3中所示序列的催化结构域。TrGA的分离、克隆和表达描述在美国专利7,413,887中,其通过引入本文作为参考。在一些实施方案中,亲本序列指作为蛋白质工程起点的葡糖淀粉酶。本文的葡糖淀粉酶氨基酸的编号方式是基于葡糖淀粉酶与TrGA(SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3)的序列比对。
词组“蛋白质或多肽的成熟形态”指蛋白质或多肽的最终功能形态。作为示例,TrGA的成熟形态具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列,包括催化结构域、接头区域和淀粉结合结构域。
如本文中使用的,术语“葡糖淀粉酶变体”和“变体”用于指与亲本葡糖淀粉酶序列具有一定程度的氨基酸序列同一性,并可以保留葡糖淀粉酶的功能特征的葡糖淀粉酶。变体与亲本序列相似,但在其氨基酸序列中具有至少一个取代、缺失或插入,使其不同于亲本葡糖淀粉酶的序列。在一些情况下,已操作和/或改造变体,使其在其氨基酸序列中具有至少一个取代、缺失或插入,从而不同于亲本的序列。
“变体”意指当优化比对进行比较时,与多肽序列具有至少99.5%、至少99%、至少98%、至少97%、至少96%、至少95%、至少94%、至少93%、至少92%、至少91%、至少90%、至少88%、至少85%、至少80%、至少75%、至少70%,至少65%、至少60%、至少55%、至少50%或至少45%的序列同一性。在一些实施方案中,葡糖淀粉酶变体可以与亲本葡糖淀粉酶的催化结构域具有至少99.5%、至少99%、至少98%、至少97%、至少96%、至少95%、至少94%、至少93%、至少92%、至少91%、至少90%、至少88%、至少85%、至少80%、至少75%、至少70%,至少65%、至少60%、至少55%、至少50%或至少45%的序列同一性。在一些实施方案中,葡糖淀粉酶变体可以与亲本葡糖淀粉酶的淀粉结合结构域具有至少99.5%、至少99%、至少98%、至少97%、至少96%、至少95%、至少94%、至少93%、至少92%、至少91%、至少90%、至少88%、至少85%、至少80%、至少75%、至少70%,至少65%、至少60%、至少55%、至少50%或至少45%的序列同一性。可以在亲本或变体序列的全长测量序列同一性。
使用本领域已知的标准技术确定序列同一性(参见例如,Smith和Waterman,Adv.Appl.Math.2:482(1981);Needleman和Wunsch,J.Mol.Biol.48:443(1970);Pearson和Lipman,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85:2444(1988);程序例如Wisconsin Genetics Software Package(GeneticsComputer Group,Madison,WI)中的GAP、BESTHT、FASTA和TFASTA;以及Devereux等人,Nucleic Acid Res.,12:387-395(1984))。
“百分比(%)核酸序列同一性”或“百分比(%)氨基酸序列同一性”定义为候选序列中与起始序列(例如,TrGA)的核苷酸残基或氨基酸残基相同的核苷酸残基或氨基酸残基的百分比。可以在起始序列(例如,SEQ ID NO:2)的全长上测量序列同一性。
通过已知的序列比对方法确定序列同一性。常用的比对方法是Altschul等人描述的BLAST(Altschul等人,J.Mol.Biol.215:403-410(1990);和Karlin等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:5873-5787(1993))。特别有效的BLAST程序是WU-BLAST-2程序(参见,Altschul等人,Meth.Enzymol.266:460-480(1996))。WU-BLAST-2利用了一些搜索参数,其中大部分都设定为缺省值。用下列值设定可调节的参数:重叠跨度(overlap span)=1,重叠分数(overlap fraction)=0.125,字节阈值(word threshold)=11。HSP S和HSP S2参数是动态值,由程序本身根据特定序列的组成和进行目标序列搜索的特定数据库的组成来决定。然而,可以调节值来增加灵敏度。%氨基酸序列同一性值是由匹配相同的残基数除以比对区域内“较长”序列的残基总数确定的。“较长”序列是在比对区域内具有最多真实残基的序列(忽视为了使比对分数最大化,由WU-Blast-2引入的空位)。
其它方法也可以用于比对序列。一个有效算法的实例是PILEUP。PILEUP利用渐进式成对比对,从一组相关序列中创建多重序列比对。它还可以绘制显示群关系的树图,用于创建比对。PILEUP利用了Feng和Doolittle的渐进比对方法的简化版(Feng和Doolittle,J.Mol.Evol.,35:351-360[1987])。所述方法与Higgins和Sharp描述的相似(Higgins和Sharp,CABIOS 5:151-153[1989])。有用的PILEUP参数包括缺省的空位权重3.00,缺省的空位长度权重0.10,和加权的末端空位。
术语“优化比对”指产生最高百分比同一性分数的比对。
如本文中使用的,术语“催化结构域”指多肽的结构性区域,其含有用于底物水解的活性位点。
术语“接头”指通常具有3至40个氨基酸残基之间的短氨基酸序列,其共价的连接了包含淀粉结合结构域的氨基酸序列,和包含催化结构域的氨基酸序列。
术语“淀粉结合结构域”指优选地与淀粉底物结合的氨基酸序列。
如本文中使用的,术语“突变序列”和“突变基因”是可互换的使用的,指这样的多核苷酸序列,其具有存在于宿主细胞的亲本序列中至少一个密码子的改变。突变序列的表达产物是相对于亲本具有改变的氨基酸序列的变体蛋白质。表达产物可以具有改变的功能能力(例如:增加的酶活)。
如本文中使用的,对于多肽,术语“性质”或其语法的等价体指可以被选择或检测的多肽的任何性质或属性。这些性质包括但不限于,氧化稳定性、底物特异性、催化活性、热稳定性、pH活性谱、蛋白水解的耐受性、KM、KCAT、KCAT/KM比值、蛋白质折叠、结合底物的能力和分泌的能力。
如本文中使用的,对于核酸,术语“性质”或其语法的等价体指可以被选择或检测的核酸的任何性质或属性。这些性质包括但不限于,影响基因转录的性质(例如:启动子强度或启动子识别),影响RNA加工的性质(例如:RNA剪切和RNA稳定性),影响翻译的性质(例如:调控,mRNA与核糖体蛋白质的结合)。
术语“热学上稳定的”和“热稳定的”指本发明的葡糖淀粉酶变体,在暴露于一定温度下给定时间段后,仍然维持规定量的酶活性,其中处于在淀粉底物水解过程中常见的条件下,例如:暴露在改变的温度下。
在涉及例如热稳定性的性质时,术语“增加的稳定性”指经过一段时间后,与另一个参照(即亲本)葡糖淀粉酶相比,保留较高的淀粉水解活性。
在涉及例如热稳定性的性质时,术语“减少的稳定性”指经过一段时间后,与另一个参照葡糖淀粉酶相比,保留较低的淀粉水解活性。
术语“比活性”定义为每毫克葡糖淀粉酶蛋白质的活性。在一些实施方案中,通过本文描述的乙醇检测法来测定葡糖淀粉酶的活性,表示为从淀粉底物产生的葡萄糖的量。在一些实施方案中,可以使用本文描述的Caliper检测法来测定蛋白质浓度。
术语“活性”和“生物学活性”指与特定蛋白质相关的生物学活性。给定蛋白质的生物学活性指本领域技术人员归属于所述蛋白质的任何生物学活性。例如,与葡糖淀粉酶相关的酶活性是水解的,因此,活性葡糖淀粉酶具有水解活性。
在本文中,术语“多核苷酸”和“核酸”可互换使用,指任意长度的核苷酸的多聚合形式,不论是核糖核苷酸还是脱氧核糖核苷酸。这类术语包括但不限于单链、双链或三链DNA,基因组DNA,cDNA,RNA,DNA-RNA杂合体或包含嘌呤和嘧啶碱基,或者其它天然、化学、生物化学修饰的,非天然或衍生的核苷酸碱基的聚合物。
如本文中使用的,术语“DNA构建体”、“转化DNA”和“表达载体”可互换使用,指用于将序列引入宿主细胞或生物内的DNA。DNA可以通过PCR或任何其它本领域技术人员已知的合适技术在体外产生。DNA构建体,转化DNA或重组表达盒可以整合到质粒、染色体、线粒体DNA、质体DNA、病毒或核酸片段中。通常,表达载体、DNA构建体或转化DNA的重组表达盒部分包括将被转录的核酸序列和启动子。在一些实施方案中,表达载体具有在宿主细胞内掺入和表达异源DNA片段的能力。
如本文中使用的,术语“载体”指设计用于将核酸引入一种或多种细胞类型中的多核苷酸构建体。载体包括克隆载体、表达载体、穿梭载体、质粒、盒等。
如本文中使用的,涉及将核酸序列引入细胞时,术语“引入”指适合将核酸序列转移到细胞内的任何方法。此类用于引入的方法包括但不限于原生质体融合、转染、转化、接合和转导。
如本文中使用的,术语“转化的”和“稳定转化的”指这样的细胞,所述细胞具有整合到其基因组内,或作为附加体质粒维持至少两代的非天然的(异源的)多核苷酸序列。
如本文中使用的,术语“选择性标记”和“选择标记”指能够在宿主细胞内表达的核酸(例如:基因),其允许方便的选择含有载体的宿主。通常,选择性标记是使宿主细胞产生抗生素抗性或代谢优势的基因,使含有外源DNA的细胞区别于在转化过程中未接受任何外源序列的细胞。
如本文中使用的,术语“启动子”指发挥指导下游基因转录的功能的核酸序列。启动子,以及其它转录和翻译调控核酸序列(也被称为“控制序列”)是表达给定基因必需的。一般,转录和翻译调控序列包括但不限于启动子序列、核糖体结合位点、转录起始和终止序列、翻译起始和终止序列,以及增强子或激活子序列。
当核酸与另一核酸序列处于功能性关联时,它是“有效连接的”。例如,如果表达为参与多肽分泌的前蛋白,则编码分泌前导序列(即,信号肽)的DNA与多肽的DNA是有效连接的。一般,“有效连接”意指所连接的DNA序列是连续的,在分泌前导序列的情况下,是连续的且处于阅读相(reading phase)。
如本文中使用的,术语“基因”指编码多肽的多核苷酸(例如:DNA片段),包括在编码区域前后的区域,和位于单个编码片段(外显子)之间的间插序列(内含子)。
如本文中使用的,“直向同源物”和“直向同源基因”指不同物种中从共同祖先基因(即,同源基因)通过物种形成进化成的基因。通常,直向同源物在进化过程中保留了相同的功能。直向同源物的鉴别可用于对新测序基因组中的基因功能进行可靠预测。
如本文中使用的,“旁系同源物”和“共生同源基因”指基因组内通过复制相关的基因。直向同源物在进化过程中保留了相同的功能,而旁系同源物则进化出新的功能,虽然一些功能通常是与原始功能相关的。共生同源基因的实例包括但不限于编码胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶和凝血酶的基因,它们都是丝氨酸蛋白酶,并同时存在于相同的物种内。
如本文中使用的,如本领域已知的,术语“杂交”指核酸链通过碱基配对与互补链结合的过程。
如果在中至高严谨杂交和洗涤条件下,两条序列特异的彼此杂交,则认为核酸序列与参照核酸序列是“选择性可杂交的”。杂交条件是基于核酸结合复合体或探针的解链温度(Tm)的。例如,“最大严谨”通常发生在约Tm-5℃(比探针的Tm低5℃);“高严谨”比Tm低约5-10℃;“中等严谨”比探针的Tm低约10-20℃;“低严谨”比Tm低约20-25℃。从功能上讲,最大严谨条件可用于鉴别与杂交探针具有严格同一性或接近严格同一性的序列;而中等或低严谨条件可用于鉴别或检测多核苷酸序列同源物。
中等和高严谨杂交条件是本领域普遍已知的。高严谨条件的实例包括在约42℃下,在50%甲酰胺、5×SSC、5×Denhardt氏溶液、0.5% SDS和100μg/ml变性的载体DNA中杂交,然后在室温用2×SSC和0.5% SDS洗涤两次,在42℃用0.1×SSC和0.5% SDS再洗涤两次。中等严谨条件的实例包括在37℃下,在包含20%甲酰胺、5×SSC(150mM NaCl,15mM柠檬酸三钠)、50mM磷酸钠(pH7.6)、5×Denhardt氏溶液、10%硫酸葡聚糖和20mg/ml变性的剪切鲑精DNA中杂交过夜,然后在约37-50℃,用1×SSC洗涤滤膜。本领域技术人员已知当需要适应例如探针长度等因子时,如何调节温度、离子强度等。
如本文中使用的,“重组”包括涉及细胞或载体,其已通过引入异源或同源的核酸序列而修饰,或者细胞从所述修饰的细胞衍生而来。因此,例如,作为人类有意干预的结果,重组细胞表达在天然(非重组)形态的细胞中未发现相同形态的基因,或表达天然基因,其否则异常表达,低表达或根本不表达。
在本发明的实施方案中,在至少一个密码子上用位点饱和诱变来产生突变的DNA序列。在另一个实施方案中,位点饱和诱变实施于两个或更多的密码子。在其它的实施方案中,突变DNA序列与亲本序列具有多于50%,多于55%,多于60%,多于65%,多于70%,多于75%,多于80%,多于85%,多于90%,多于95%,或者多于98%的同源性。在可选的实施方案中,利用任何已知的突变方法在体内产生突变DNA,例如:辐射、亚硝基胍等。然后分离所需的DNA序列并用于本文中提供的方法。
如本文中使用的,“异源蛋白质”指在宿主细胞内非天然存在的蛋白质或多肽。
如果酶在细胞内表达的水平比在相应的野生型细胞内表达的水平更高,则酶在宿主细胞内是“过表达”的。
术语“蛋白质”和“多肽”在本文中可互换使用。在本公开文本和权利要求中,氨基酸使用常规的三字母和一字母代码。氨基酸的3字母代码与IUPAC-IUB生物化学命名联合委员会(JCBN)一致。还应理解,由于遗传密码的简并性,多肽可以由一个以上核苷酸序列编码。
公开文本的变体按以下命名法描述:[原始氨基酸残基/位置/取代的氨基酸残基]。例如,亮氨酸取代第76位的精氨酸表示为R76L。当在一个给定位置取代多个氨基酸时,取代表示为1)Q172C、Q172D或Q172R;2)Q172C、D、或R或3)Q172C/D/R。当本文中鉴别的适合取代的位置没有提示特定的氨基酸时,应该理解任何氨基酸都可以取代所述位置上出现的氨基酸残基。当变体葡糖淀粉酶与其它葡糖淀粉酶相比,含有缺失时,用“*”表示缺失。例如,R76位的缺失表示为R76*。两个或多个连续的氨基酸的缺失表示为例如(76-78)*
“前序列”是位于信号肽和成熟蛋白质之间的氨基酸序列,是蛋白质分泌必需的。前序列的切除可获得成熟的活性蛋白。
术语“信号序列”或“信号肽”指任何参与成熟蛋白质或蛋白质前体形态分泌的核苷酸和/或氨基酸序列。该信号序列的定义是功能性的,意指包括由蛋白质基因的N-末端部分编码的所有氨基酸序列,其参与实现蛋白质的分泌。它们通常,但并非全部,结合在蛋白质的N-末端部分,或结合在前体蛋白质的N-末端部分。信号序列可以是内源的或外源的。信号序列可以是一般与蛋白质相关的(例如:葡糖淀粉酶),或者可以是来自另一个编码分泌蛋白的基因。
术语蛋白质或肽的“前体”形态指成熟形态的蛋白质,其具有与蛋白质的氨基端或羧基端有效连接的前序列。前体还可以具有与前序列的氨基端有效连接的“信号”序列。前体还可以具有在翻译后活性中涉及的其它多核苷酸(例如:从其上切除以留下成熟形态的蛋白质或肽的多核苷酸)。
“宿主株”或“宿主细胞”指适合含有根据本公开文本的DNA的表达载体的宿主。
术语“来自”和“获得自”不仅指由讨论的生物的株生产或可生产的葡糖淀粉酶,而且还指由从此类株中分离的DNA序列编码,并在含有此类DNA序列的宿主生物中生产的葡糖淀粉酶。此外,术语还指由合成的和/或cDNA起源的DNA序列编码的葡糖淀粉酶,并具有讨论的葡糖淀粉酶的已鉴别的特征。
在该定义范围内的“衍生物”一般保留了在野生型、天然或亲本形态中观察到的特征性水解活性,达到使衍生物可用于与野生型、天然或亲本形态相似目的的程度。葡糖淀粉酶的功能衍生物涵盖了天然存在的、合成或重组生产的肽或肽片段,其具有本发明的葡糖淀粉酶的一般特征。
术语“分离的”指如果其是天然存在的,则从其天然环境中移出的材料。
“纯化的”蛋白质指至少部分纯化为均质的蛋白质。在一些实施方案中,通过SDS-PAGE确定,纯化的蛋白质是超过10%纯的,任选的超过20%纯的,任选的超过30%纯的。公开文本的其它方面涵盖了通过SDS-PAGE确定,高度纯化形态的蛋白质(即,超过40%纯的,超过60%纯的,超过80%纯的,超过90%纯的,超过95%纯的,超过97%纯的,甚至超过99%纯的)。
如本文中使用的,术语“组合诱变”指产生起始序列的变体文库的方法。在这类文库中,变体含有选自预定义的突变集合的一个或多个突变。此外,方法提供引入随机突变的方式,所述突变不是预定义的突变集合的成员。在一些实施方案中,方法包括在US专利6,582,914中提出的,其通过引入本文作为参考。在可选的实施方案中,组合诱变方法涵盖了可商购的试剂盒(例如:QuikChange
Figure GPA00001139245100161
Multisite,Stratagene,San Diego,CA)。
如本文中使用的,术语“突变体文库”指其基因组大部分相同,但包括一个或多个基因的不同同源物的细胞群体。此类文库可用于,例如,鉴别具有改善性状的基因或操纵子。
如本文中使用的,术语“干燥固体含量(DS或ds)”指的是浆液的总固体基于干重的百分比。
如本文中使用的,术语“初始命中(initial hit)”指通过筛选组合共同诱变文库鉴别的变体。在一些实施方案中,与起始基因相比,初始命中具有改良的性能特征。
如本文中使用的,术语“改良命中(improved hit)”指通过筛选增强的组合共同诱变文库鉴别的变体。
如本文中使用的,术语“目标性质(target property)”指待改变的起始基因的性质。其不意味着本发明限于任何特定的目标性质。然而,在一些优选的实施方案中,目标特性是基因产物的稳定性(例如:对变性、蛋白水解或其它降解因素的抗性),而在其他实施方案中,生产宿主中的生产水平得到改变。事实上,预期起始基因的任何特性都在本发明中得到应用。其它术语定义也可以出现在说明书的全文。
当提供数值范围时,除非上下文另外清楚的指出,应理解为该范围上下限之间的每个中间值(到下限单位的十分之一),也都是具体公开的。任何陈述值之间的每个更小范围或陈述范围内的中间值和任何其它公开的或所述公开范围内的中间值都包括在本发明内。这些更小范围的上限或下限可以独立地包括于或排除于该范围,两个端点之一,两个端点都不或都包括在更小范围的每个范围也包括在本发明之内,其受限于公开范围内任何具体排除的界限。如果公开的范围包括一个或两个端点,排除一个或者两个所述被包括端点的范围也包括在本发明内。
在详细描述示例性的实施方案之前,还应理解本发明不限于所描述的特定的实施方案,其当然可以变化。与本文公开的内容相似或等价的任何方法和材料都可用于实践或测试本公开文本,但目前仍描述了示例性的方法和材料。
除非上下文另外清楚的指出,如本文中和所附权利要求中使用的单数形态“一个”、“一种”和“这”都包括了复数的指示物。因此,例如,讨论“基因”包括了复数的此类候选物质,讨论“细胞”包括了讨论一个或多个细胞及其本领域技术人员已知的等价物,等等。
本文中讨论的出版物只有其公开早于本申请的申请日,才被提供。本文不承认本发明无权由于是在先发明而早于此类出版物。
2、亲本葡糖淀粉酶
在一些实施方案中,本发明提供了葡糖淀粉酶变体。葡糖淀粉酶变体是亲本葡糖淀粉酶的变体,其同时包括催化结构域和淀粉结合结构域。在一些实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包括这样的催化结构域,所述结构域具有SEQ ID NO:1、2、3、5、6、7、8或9中所示的氨基酸序列,或者具有与SEQ ID NO:1、2、3、5、6、7、8或9中所示一个或多个氨基酸序列有至少80%序列同一性的氨基酸序列。在其他实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包括由这样的DNA序列编码的催化结构域,所述DNA序列在中、高或严谨条件下与编码葡糖淀粉酶催化结构域的DNA杂交,所述葡糖淀粉酶具有SEQ IDNO:1、2或3之一的氨基酸序列。
在一些实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包括这样的淀粉结合结构域,所述结构域具有SEQ ID NO:1、2、161、162、163、164、165、166或167中所示的氨基酸序列,或者具有与SEQ ID NO:1、2、161、162、163、164、165、166或167所示一个或多个氨基酸序列有至少80%序列同一性的氨基酸序列。在其他实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包括由这样的DNA序列编码的淀粉结合结构域,所述DNA序列在中、高或严谨条件下与编码葡糖淀粉酶淀粉结合结构域的DNA杂交,所述葡糖淀粉酶具有SEQ ID NO:1或2之一的氨基酸序列。
在真菌物种之间,葡糖淀粉酶的预测结构和已知序列都是保守的(Coutinho等人,1994 Protein Eng.,7:393-400和Coutinho等人,1994,Protein Eng.,7:749-760)。在一些实施方案中,亲本葡糖淀粉酶是丝状真菌的葡糖淀粉酶。在一些实施方案中,亲本葡糖淀粉酶是获得自木霉属菌株(例如:里氏木霉、长梗木霉(T.longibrachiatum)、严紧木霉(T.strictipilis)、棘孢木霉(T.asperellum)、康长木霉(T.konilangbra)和哈茨木霉(T.hazianum)),曲霉属菌株(例如:黑曲霉(A.niger)、构巢曲霉(A.nidulans)、A.kawachi、泡盛曲霉(Aspergillus awamori)和米曲霉(A.orzyae)),踝节菌属菌株(例如:埃默森踝节菌(T.emersonii),湿热踝节菌(T.thermophilus)和T.duponti),肉座菌属(Hypocrea)菌株(例如:胶质肉座菌(H.gelatinosa),东方肉座菌(H.orientalis),H.vinosa和淡黄肉座菌(H.citrina)),镰孢属菌株(例如:尖镰孢(F.oxysporum)、粉红镰孢(F.roseum)和腹状镰孢(F.venenatum)),脉孢属(Neurospora)菌株(例如:粗糙脉孢菌(N.crassa))和腐质霉属菌株(例如:灰腐质霉、特异腐质霉(H.insolens)和面包腐质霉(H.lanuginose)),青霉属菌株(例如:点青霉(P.notatum)或产黄青霉(P.chrysogenum)),或者复膜孢酵母属菌株(例如:扣囊复膜孢酵母(S.fibuligera))。
在一些实施方案中,亲本葡糖淀粉酶可以是细菌葡糖淀粉酶,例如,多肽可以获得自革兰氏阳性菌株例如芽孢杆菌属(例如:嗜碱芽孢杆菌(B.alkalophilus)、解淀粉芽胞杆菌(B.amyloliquefaciens)、迟缓芽胞杆菌(B.lentus)、地衣芽胞杆菌(B.licheniformis)、嗜热脂肪芽胞杆菌(B.stearothermophilus)、枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌),或链霉属菌株(例如:浅青紫链霉菌(Streptomyces lividans))。
在一些实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包括催化结构域,所述结构域与SEQ ID NO:3的TrGA氨基酸序列的催化结构域具有至少80%序列同一性,至少85%序列同一性,至少90%序列同一性,至少95%序列同一性,至少97%序列同一性,至少98%序列同一性。
在其它实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包括催化结构域,所述结构域具有与SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6的曲霉属亲本葡糖淀粉酶的催化结构域至少90%序列同一性,至少93%序列同一性,至少95%序列同一性,至少96%序列同一性,至少97%序列同一性,至少98%序列同一性,和至少99%序列同一性。
在其它实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包括催化结构域,所述结构域具有与SEQ ID NO:8的灰腐质霉亲本葡糖淀粉酶(HgGA)的催化结构域至少90%序列同一性,至少95%序列同一性,至少97%序列同一性,和至少99%序列同一性。
在一些实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包括淀粉结合结构域,所述结构域具有与SEQ ID NO:1、2或161的TrGA氨基酸序列的淀粉结合结构域至少80%序列同一性,至少85%序列同一性,至少90%序列同一性,至少95%序列同一性,至少97%序列同一性,和至少98%序列同一性。
在其它实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包括淀粉结合结构域,所述结构域具有与SEQ ID NO:162的灰腐质霉葡糖淀粉酶(HgGA)的催化结构域至少90%序列同一性,至少95%序列同一性,至少97%序列同一性,和至少99%序列同一性。
在其它实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包括淀粉结合结构域,所述结构域具有与SEQ ID NO:163的太瑞斯梭孢壳霉葡糖淀粉酶(TtGA)的催化结构域至少90%序列同一性,至少95%序列同一性,至少97%序列同一性,和至少99%序列同一性。
在其它实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包括淀粉结合结构域,所述结构域具有与SEQ ID NO:164的疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)葡糖淀粉酶(ThGA)的催化结构域至少90%序列同一性,至少95%序列同一性,至少97%序列同一性,和至少99%序列同一性。
在其它实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包括淀粉结合结构域,所述结构域具有与SEQ ID NO:165的埃默森踝节菌(Talaromyces emersoniit)葡糖淀粉酶(TeGA)的催化结构域至少90%序列同一性,至少95%序列同一性,至少97%序列同一性,和至少99%序列同一性。
在其它实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包括淀粉结合结构域,所述结构域具有与SEQ ID NO:166或167的曲霉属亲本葡糖淀粉酶的淀粉结合结构域至少90%序列同一性,至少93%序列同一性,至少95%序列同一性,至少96%序列同一性,至少97%序列同一性,至少98%序列同一性和至少99%序列同一性。
在一些实施方案中,亲本葡糖淀粉酶具有与SEQ ID NO:2的TrGA氨基酸序列至少80%序列同一性,至少85%序列同一性,至少88%序列同一性,至少90%序列同一性,至少93%序列同一性,至少95%序列同一性,至少96%序列同一性,至少97%序列同一性,至少98%序列同一性和至少99%的序列同一性。
在其它实施方案中,可以自木霉属或肉座菌属菌株中获得木霉属葡糖淀粉酶的同源物。一些优选的木霉属葡糖淀粉酶同源物描述在美国专利7,413,887中,特别涉及所述文献中SEQ ID NOs:17-22和43-47所示的氨基酸序列。
在一些实施方案中,亲本葡糖淀粉酶是包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的TrGA,或与TrGA序列(SEQ ID NO:2)具有至少80%,至少85%,至少88%,至少90%,至少93%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%序列同一性的木霉属葡糖淀粉酶同源物。
可以使用标准的重组DNA技术分离和/或鉴别亲本葡糖淀粉酶。可以使用的任何标准技术都是本领域技术人员已知的。例如,可以使用特异性针对葡糖淀粉酶保守区的探针和/或引物来鉴别细菌或真菌细胞中的同源物(催化结构域,活性位点等)。可选的,可以使用简并PCR来鉴别细菌或真菌细胞中的同源物。在一些情况下,可以分析例如数据库中的已知序列与某一已知葡糖淀粉酶(包括SEQ ID NO:2)或已知淀粉结合结构域(包括SEQ ID NO:161)的序列和/或结构同一性。还可以使用功能性测定来鉴别细菌或真菌细胞中的葡糖淀粉酶活性。可以分离并反向测序具有葡糖淀粉酶活性的蛋白质,来分离相应的DNA序列。此类方法是本领域技术人员已知的。
3、葡糖淀粉酶结构同源性:
分子生物学的中心法则是,编码特定酶的基因的DNA序列,决定蛋白质的氨基酸序列,该序列依次决定酶的三维折叠。该折叠将分离的残基放到一起,形成催化中心和底物结合表面,从而获得所讨论的酶的高特异性和活性。
葡糖淀粉酶由三个不同的结构域组成,约450个残基的催化结构域(其在所有葡糖淀粉酶中都是结构上保守的),一般连接了由30至80个残基组成的接头区域,后者连接至约100个残基的淀粉结合结构域上。具有所有三个完整区域的里氏木霉葡糖淀粉酶的结构在本文中确定至1.8埃解析度(参见表20和实施例13)。利用坐标(参见表20),将结构与以前确定的泡盛曲霉菌株X100的催化结构域坐标进行比对(Aleshin,A.E.,Hoffman,C.,Firsov,L.M.,和Honzatko,R.B.1994 Refined crystal structures ofglucoamylase from Aspergillus awamori var.X100.J Mol Biol 238:575-591)。泡盛曲霉的晶体结构仅包括催化结构域。如图12和13中所见,催化结构域的结构重叠非常紧密,基于该结构重叠能够鉴别等价的残基。发明人相信,所有的葡糖淀粉酶共享图12和13中描述的基本结构。
图12是从侧面观察,SEQ ID NO:1的木霉属葡糖淀粉酶(黑色)(氨基酸序列参见图1)和泡盛曲霉葡糖淀粉酶(灰色)的三维结构比较。在此观察中可见催化结构域、接头区域和淀粉结合结构域之间的关系。
图13是从顶面观察,木霉属葡糖淀粉酶(黑色)和泡盛曲霉葡糖淀粉酶(灰色)的三维结构比较。图中所示的葡糖淀粉酶,和实际上目前所有已知的葡糖淀粉酶都享有该结构同源性。结构的保守与所有葡糖淀粉酶的活性的保守和保守的作用机制相关。考虑到该高同源性,引起功能变化的木霉属葡糖淀粉酶位点特异性突变所导致的改变,将也具有在其它葡糖淀粉酶中相似的结构,从而具有相似的功能结果。因此,何种变体产生理想优势的教导可用于其它葡糖淀粉酶。
使用表20中的坐标还对淀粉结合结构域(SBD)生成了晶体结构。将TrGA的SBD与黑曲霉的SBD进行比对。如图13所示,黑曲霉和TrGA SBD的结构重叠紧密。发明人相信,所有的淀粉结合结构域共享至少部分的图13中所示的基本结构,而一些SBD在结构上比其他的更相似。例如,TrGASBD可以分类在CAZY数据库(cazy.org)的碳水化合物结合模块20家族中。CAZY数据库描述了酶的结构相关的催化和碳水化合物结合模块(或功能性结构域)的家族,所述酶降解、修饰或创造糖苷键。考虑到高的结构同源性,引起功能变化的TrGA SBD的位点特异性变体也将具有在其它具有与TrGA SBD结构相似的SBD(特别是分类在碳水化合物结合模块20家族中的那些)的葡糖淀粉酶中相似的结构,从而具有相似的功能结果。因此,何种变体产生理想优势的教导可用于具有结构相似性的其它SBD。
因此,本文中讨论的氨基酸位置数指那些指定给图1所示成熟的里氏木霉葡糖淀粉酶序列的位置数。然而,本发明不限于木霉属葡糖淀粉酶的变体,而延伸至包含这样的位置上的氨基酸残基的葡糖淀粉酶,所述位置上的氨基酸残基与里氏木霉葡糖淀粉酶(SEQ ID NO:2)中特定的已鉴别残基是“等价的”的。在本公开文本的实施方案中,亲本葡糖淀粉酶是踝节菌属葡糖淀粉酶,在踝节菌葡糖淀粉酶中等价的氨基酸残基位置上如本文所述进行取代。在其它实施方案中,亲本葡糖淀粉酶是表1中列举的任一个。在其它实施方案中,亲本葡糖淀粉酶是青霉属葡糖淀粉酶,例如产黄青霉。
结构同一性决定氨基酸残基是否是等价的。结构同一性是当比对两个结构(三维和氨基酸结构)时,一对一的拓扑学等价。如果与里氏木霉葡糖淀粉酶中的特定残基或所述残基的部分是同源(即,初级或三级结构中相应的位置)或者同功的(具有相同或相似的化学结合、反应或相互作用的功能能力),则葡糖淀粉酶的(氨基酸)残基位置与里氏木霉葡糖淀粉酶的残基是等价的。
为了建立初级结构的同一性,可以将葡糖淀粉酶的氨基酸序列与里氏木霉葡糖淀粉酶的初级结构直接比较,特别是直接比较在序列已知的葡糖淀粉酶中已知不变的残基集合。例如,本文中的图4A和B显示了葡糖淀粉酶之间的保守残基。本文中的图4C和D显示了不同的葡糖淀粉酶的淀粉结合结构域的比对。在比对保守残基后,允许进行必要的插入和删除从而维持比对(即,避免通过随意的删除和插入而除去保守残基),定义与里氏木霉葡糖淀粉酶的初级序列中特定氨基酸等价的残基。保守残基的比对典型地应该保守100%的此类残基。然而大于75%或少至50%的保守残基的比对,也足以定义等价残基。此外,可以结合使用结构同一性和序列同一性来鉴别等价的残基。
例如,在图4A和B中,比对了来自六种生物的葡糖淀粉酶的催化结构域,提供氨基酸序列之间的最大量同源性。这些序列的比较显示,每个序列中都含有多个保守残基,用星号指示。因此,这些保守残基可用于在其它葡糖淀粉酶,例如来自黑曲霉的葡糖淀粉酶中,定义与里氏木霉葡糖淀粉酶相应的等价氨基酸残基。相似的,图4C和D显示了比较来自7种生物的葡糖淀粉酶的淀粉结合结构域,来鉴别等价的残基。
结构同一性涉及在两个结构之间等价残基的鉴别。对于酶,可以通过在酶三级结构水平上测定同源性(结构同一性)来定义“等价残基”,所述酶的三级结构已经通过X射线晶体学确定。等价残基定义为,在比对后,与里氏木霉葡糖淀粉酶(N对N,CA对CA,C对C和O对O)的特定氨基酸残基的两个或多个主链原子的原子坐标在0.13nm之内,优选的在0.1nm之内的那些残基。在将最佳模型定向和定位,使所讨论的葡糖淀粉酶与里氏木霉葡糖淀粉酶的非氢蛋白质原子的原子坐标产生最大重叠之后,实施比对。最佳模型是在可获得的最高解析度下,对实验衍射数据产生最低R因子的晶体学模型。
Figure GPA00001139245100241
与里氏木霉葡糖淀粉酶的特定残基功能性类似的等价残基定义为酶的那些氨基酸,其可以采用这样的构象,使得其以确定的和属于里氏木霉葡糖淀粉酶特定残基的方式改变,修饰或者促进蛋白质结构、底物结合或催化。进而,它们是酶(已经通过X射线晶体学获得了三级结构)的残基,所述残基占据同功位置到这样的程度:尽管给定残基的主链原子可能不满足以占据同源位置为基础的等价标准,但是该残基的至少两个侧链原子的原子坐标位于里氏木霉葡糖淀粉酶相应侧链原子的0.13nm内。表15中提出了里氏木霉属葡糖淀粉酶的三维结构的坐标,其可以如上述使用以确定三级结构水平上的等价残基。
一些鉴别用于取代的残基是保守残基,而另一些不是。在残基不保守的情况下,一个或多个氨基酸的取代被限于这样的取代,其产生的变体具有与天然发现的序列不一致的氨基酸序列。在保守残基的情况下,此类取代不应当获得天然存在的序列。
4、变体
根据本公开文本的变体包括在亲本葡糖淀粉酶的氨基酸序列中至少一个取代、缺失或插入,使变体与亲本葡糖淀粉酶的序列不同。在一些实施方案中,公开文本的变体具有SEQ ID NO:2的TrGA活性的至少20%、至少40%、至少60%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%和至少100%的葡糖淀粉酶活性。
在一些实施方案中,根据本发明的变体包含在亲本TrGA(SEQ IDNO:2)的至少一个氨基酸位置上,或者在另一个亲本葡糖淀粉酶序列的等价位置上的取代、缺失或插入,所述另一个亲本葡糖淀粉酶具有和TrGA序列至少80%的序列同一性,包括但不限于:至少90%、至少93%、至少95%、至少97%和至少99%序列同一性。
在其它实施方案中,根据公开文本的变体包含在亲本TrGA片段的至少一个氨基酸位置上的取代、缺失或插入,其中片段包含TrGA序列的催化结构域(SEQ ID NO:3),或者在下述片段的等价位置上的所述取代、缺失或插入,所述片段包含亲本葡糖淀粉酶的催化结构域,其与TrGA序列的片段具有至少80%的序列同一性,包括但不限于至少90%、至少95%、至少97%和至少99%序列同一性。在一些实施方案中,片段包含至少400、425、450和/或500个氨基酸残基。
在其它实施方案中,根据公开文本的变体包含在亲本TrGA片段的至少一个氨基酸位置上的取代、缺失或插入,其中片段包含TrGA序列的淀粉结合结构域(SEQ ID NO:161),或者在下述片段的等价位置上的所述取代、缺失或插入,所述片段包含亲本葡糖淀粉酶的淀粉结合结构域,其与TrGA序列的片段具有至少80%的序列同一性,包括但不限于至少90%、至少95%、至少97%和至少99%序列同一性。在一些实施方案中,片段包含TrGA淀粉结合结构域(SEQ ID NO:161)的至少40、50、60、70、80、90、100和/或109个氨基酸残基。
在一些实施方案中,当亲本葡糖淀粉酶包括催化结构域、接头区域和淀粉结合结构域时,变体将在包括部分接头区域的片段的至少一个氨基酸位置上包括取代、缺失或插入。在一些的实施方案中,在TrGA序列(SEQID NO:2)片段的氨基酸序列中,变体可以包括取代、缺失或插入。
关于氨基酸取代的结构同一性,意指取代发生在同源葡糖淀粉酶或亲本葡糖淀粉酶中的等价氨基酸位置上。术语等价位置意指两个亲本序列共有的位置,这是基于讨论的亲本葡糖淀粉酶的氨基酸序列以及三维结构与TrGA序列葡糖淀粉酶的氨基酸序列和三维结构的比对。例如,参考图5,TrGA(SEQ ID NO:2或3)中的位置24是D24,黑曲霉(SEQ ID NO:6)的等价位置是位置D25,米曲霉(SEQ ID NO:7)的等价位置是位置D26。参见图12和13的三维序列的示例性比对。
在一些实施方案中,葡糖淀粉酶变体在亲本的氨基酸序列中包括至少一个取代。在其它实施方案中,变体可以具有一个以上的取代(例如,2、3或4个取代)。
在一些实施方案中,葡糖淀粉酶变体包括取代、缺失或插入,通常是取代,这是在与图5示例的非保守氨基酸区域相对应位置(例如:对应于图5中没有用“*”指示的那些位置的氨基酸位置)中的至少一个氨基酸位置上。
尽管变体可以发生在成熟蛋白质序列(SEQ ID NO:2)中的任何位置,在一个实施方案中,葡糖淀粉酶变体包含一个或多个取代,其在SEQ IDNO:2所示的氨基酸序列的下列位置中:4、5、12、24、29、43、44、45、46、47、49、51、61、70、73、75、76、94、100、108、114、116、119、122、124、125、137、143、146、148、169、171、172、175、178、180、181、208、211、228、242、243、245、292、294、297、309、310、313、314、315、316、317、321、340、341、350、353、356、363、368、369、375、376、395、398、401、408、409、412、415、417、418、421、430、431、433、436、451、503、511、535、539或563;或者在亲本葡糖淀粉酶的等价位置上。在一些实施方案中,亲本葡糖淀粉酶具有和SEQ ID NO:2至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%,以及至少99%的同一性。在其它实施方案中,亲本葡糖淀粉酶可以是木霉属葡糖淀粉酶同源物。
在一些实施方案中,葡糖淀粉酶变体包含一个或多个取代,其发生在SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列中的下列位置上:
D4、F5、I12、D24、F29、I43、D44、P45、D46、Y47、Y49、W51、N61、Y70、G73、Q75、R76、P94、D100、K108、K114、F116、N119、R122、Q124、R125、G137、N146、Q148、Y169、N171、Q172、F175、W178、E180、V181、Q208、S211、W228、N242、E243、R245、I292、G294、K297、R309、Y310、D313、V314、Y315、Y316、N317、W321、K340、K341、T350、Q356、T363、S368、S369、N376、Y395、A398、S401、R408、N409、T412、L417、H418、W421、T430、A431、R433、I436、S451、E503、Q511、A535、A539或N563;或者在亲本葡糖淀粉酶中的等价位置上(例如:木霉属葡糖淀粉酶同源物)。
在其它实施方案中,亲本葡糖淀粉酶变体包含一个或多个取代,其在SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的下列位置中:4、5、24、29、43、44、49、61、70、73、75、76、100、108、119、124、137、146、148、169、171、172、175、178、181、208、211、243、292、294、297、314、316、317、340、341、350、356、363、368、369、376、395、401、409、412、417、430、431、433、436、451、503、511、535、539或563;或者在亲本葡糖淀粉酶中的等价位置上(例如:木霉属葡糖淀粉酶同源物)。
在其它实施方案中,亲本葡糖淀粉酶变体包含至少一个下列取代,其在SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的下列位置中:D4L/E/R/S/C/A/Q/W,F5C/M/N/R/S/T/V/W,I12L/R,D24E/L/Y/T,F29L/I/D/C/S/V/W,I43F/R/D/Y/S/Q,D44E/H/K/S/N/Y/F/R/C,Y47W,Y49N,N61D/I/L/Q/V/W,Q70R/K/M/P/G/L/F,G73F/C/L/W,Q75R/K/A,R76L/M/K/T/P,P94L,D100W/I/Q/M/P/A/N,N119P/T/Y/D/E,N146S/G/C/H/E/D/T/W/L/F/M,Q148V/Y/H/A/C/D/G/M/R/S/T,Y169D/F,Q172C/A/D/R/E/F/H/V/L/M/N/S/T/V,F175H/A/G/R/S/T/C/W/Y,W178A/C/D/E/F/G/H/K/N/R/S/T/V/Y,E180A/C/G/H/I/L/N/P/Q/R/S/T/V/Y/,V181E/C/D/G/H/I/P/T/Y/S/L/K/F/A,Q208L/A/C/E/N/F/H/T,S211C/R/E/A/Y/W/M/H/L/I/R/Q/T,E243S/R/N/M/Y/A/L,R245A/E/M/I/P/V,I292D/H/P/R/T/N/V/F/L,G294C/D/E/T/Q/I/A,K297F/L/P/T/M/D/N/Q/A/Y/H/S/R/W,R309A/C/G/H/I/N/P/Q/S/T/W/Y/L,Y310E/G/L/P/S/W/R/Q,D313Q,V314A/R/N/D/C/E/Q/G/H/I/L/K/M/F/P/S/T/W/Y,Y315F,Y316Q/R,N317T/H,K340D/T,K341F/D/P/V/G/S,T350S/E/A/N,Q356H/D/E,T363L/R/C/H/W,S368W/D/F/L,S369F,N376Q/T/H/S/V,Y395Q/R/S,A398S/I/T,S401C/V,R408S,N409W/T/K,T412A/H/K/G,L417A/D/E/F/G/I/K/Q/R/S/T/V/W/Y,T430A/E/F/G/H/I/K/M/N/Q/R/V,A431C/E/H/I/L/M/Q/R/S/W/Y,R433H/Q,I436A/T,S451M/T/H,E503A/C/D/H/S/V/W,Q511C/G/H/I/K/T/V,A535E/F/G/K/L/N/P/R/S/T/V/W/Y,A539E/H/M/R/S/W或N563/A/C/E/I/K/L/Q/T/V;或者在亲本葡糖淀粉酶同源物中的等价位置上。
在一些实施方案中,葡糖淀粉酶变体包含至少一个取代,发生在相应于下述SEQ ID NO:2所示的氨基酸残基位置的位置上:5、24、43、44、49、61、70、73、75、76、94、119、146、148、172、175、178、180、181、208、211、245、294、353、315、375、409、309、314、369、412、417、430、431、503、511、535、539或563;或者在亲本葡糖淀粉酶同源物中的等价位置上。
在一些示例性的实施方案中,葡糖淀粉酶变体包含对应于SEQ ID NO:2所示的位置,或者同源的亲本葡糖淀粉酶中的等价位置的至少一个选自以下的取代:F5W,D24E,I43R,I43Y,I43Q,I43S,I43F,D44C,D44R,Y47W,Y49N,N61I,Q70K,G73F,Q75R,R76L,P94L,N119P/T/Y/D,N146S/D/T/E/W/L,Q148V N171D,Q172C/D/R/E/F/V/L/T,F175R/W/Y,W178K/N/Y,E180H/N/V/R,V181E/F/G/I/H,Q208A/T/N,S211H/M/L/R,R245E,R245M,G294C,R309W,V314F/G/H/K/P/R/Y,Y315F,S369F,T412K,L417R,L417V,T430A,T430M,A431L,A431Q,E503A,E503V,Q511H,A535R,A539R,N563I和N563K。
在其它特定的实施方案中,葡糖淀粉酶变体包含氨基酸残基的至少一个取代,所述氨基酸残基选自与SEQ ID NO:2的位置5、43、44、61、73、75、76、94、108、119、124、146、148、171、172、175、178、180、181、208、211、294、297、314、316、412、417、430、431、503、511、535、539或563,或者与木霉属葡糖淀粉酶同源物中的等价位置对应的位置上。在一些实施方案中,取代发生在与SEQ ID NO:2的位置编号43、44、61、73、148、172、175、178、180、208、211、294、297、314、412、417、430、431、503、511、535、539或563,或者与木霉属葡糖淀粉酶同源物的等价位置相对应的位置上。
在一些示例性的实施方案中,取代是在与SEQ ID NO:2或同源的亲本葡糖淀粉酶(例如:木霉属葡糖淀粉酶同源物)的位置编号43、44、61、73、108、124、171、172、208、211、294、314、316、417、430、431、503、511、535、539或563对应的位置上。
在一些实施方案中,葡糖淀粉酶变体包含多个取代。一些多个取代包括在一个或多个位置上的取代,所述位置等价于且包括SEQ ID NO:2的位置24、43、44、108、124、171、175、181、208、243、292、294、297、310、314、363、417、430、431、503、511、535、539或563。一些典型的多个取代包括一个或多个位置,所述位置等价于和对应于SEQ ID NO:2的位置43、44、61、73、08、124、171、208、211、294、314、417、430、431、503、511、535、539或563。
具有多个取代的变体的一些实例包括在以下位置的取代:
SEQ ID NO:2的
D24/I43/D44/F175/V181/V314/T363;
D24/Q208/I292/G294/K297/Y310;
V181/E243/I292/k297/N317/Y395;
D24/V181/Q208/G294/T363/N376/N409;
D24/V181/I292/G294/E243/N409;
I43R/E243/I292/G294/K297;
I43/D44/N61/L417/E503/Q511/A539;
I43/D44/L417/E503/Q511/A539;
I43/N61/L417/T430/Q511/A539;
I43/N61/L417/E503/Q511/A539;
I43/N61/T430/A431/Q511/A539;
I43/N61/T430/Q511;
I43/N61/T430/Q511/A539;
I43/N61/Q511;
I43/N61/Q511/A539;
I43/G73/T430;
I43/L417/E503/Q511/A539;
I43/L417/Q511;
I43/L417/T430/A431/Q511/A539;
I43/L417/T430/Q511;
I43/L417/T430/Q511/A539;
I43/L417/E503/A539;
I43/L417/E503/Q511/A539;
I43/T430;
I43/T430/A431/E503/Q511;
I43/T430/A431/Q511;
I43/T430/A431/Q511/A539;
I43/T430/E503/Q511;
I43/T430/Q511;
I43Q/T430/Q511/A539;
I43/A431/Q511;
I43/T430/E503/Q511/N563;
I43/T430/E503/A535/N563;
I43/E503/Q511/A539;
I43/Q511/A539;
D44/G73/L417/N563;
D44/G73/E503/Q511;
D44/G73/N563;
D44/L417/N563;
D44/T430/Q511/A535;
D44/E503/Q511/N563;
G73/T430/E503/Q511;
G73/T430/Q511;
G294/L417/A431;
G294/L417/A431;
G294/L417/A431/Q511;
L417/T430/A431/Q511/A535/A539/N563;
L417/A431/Q511;
L417/T430/Q511/A535/N563;
L417/T430/Q511/A539/N563;和
E503/N563;
或者在亲本葡糖淀粉酶特别是木霉属葡糖淀粉酶同源物中的等价位置上。
一些具有多个取代的变体可以包括以下位置上的取代:
SEQ ID NO:2的
Y47F/W,Y315F/W;
D24E,L/I43F,R/D44H,N/F175H/V181K,L/V314D,H,K/T363R;
D24L,W,Y/Q208F/I292F,N,V/G294A,I,Q/K297A/Y310F,Q,R;
V181F,K,L/E243A,N,M,R,Y/I292F,L,N,V/K297A,D,H,M,N,Q/N317H/Y395Q,R;
D24E,L,Y/V 181F,K,L/Q208C,F/G294A,I,Q/T363R/N376Q/N409K,W;
D24E,L,Y/V181F,K,L/I292F,L,N,V/G294A,I,Q/E243A,M,N,R,Y/N409K,W;
I43R/E243A,M,N,R,Y/I292F,L,N,V/G294A/K297A,D,H,M,N,Q,S,R,W,Y;
I43Q/D44C/N61I/L417V/E503A/Q511H/A539R;
I43Q/D44C/L417V/E503A/Q511H/A539R;
I43Q/N61I/L417V/E503A/Q511H/A539R;
I43Q/N61I/L417V/T430M/Q511H/A539R;
I43R/N61I/L417R,V/E503A/Q511H/A539R;
I43Q/N61I/T430A/A431L/Q511H/A539R;
I43Q/N61I/T430A/Q511H;
I43Q/N61I/T430A/Q511H/A539R;
I43Q/N61I/T430M/Q511H/A539R I43Q/N61I/Q511H;
I43Q/N61I/Q511H/A539R;
I43R/G73F/T430A;
I43Q/L417V/T430A/A431L/Q511H/A539R;
I43Q/L417V/T430A/Q511H;
I43Q/L417V/T430A/Q511H/A539R;
I43R/L417R/E503A/A539R;
I43R,Q/L417V/E503A/Q511H/A539R;
I43Q/L417V/Q511H;
I43R,Q/T430A;
I43Q/T430A/A431L/E503A/Q511H;
I43Q/T430A/A431L/Q511H;
I43Q/T430A/A431L/Q511H/A539R;
I43Q/T430A/E503A/Q511H;
I43Q/T430A/Q511H;
I43Q/T430A,M/Q511H/A539R;
I43R/T430A/E503A,V/Q511H/N563K;
I43Q/A431L/Q511H;
I43Q/E503A/Q511H/A539R;
I43Q/Q511H/A539R;
D44C/G73F/E503V/Q511H;
D44C/G73F/L417R/N563K;
D44C/G73F/N563K;
D44C/L417R/N563K;
D44R/E503A/Q511H/N563I;
D44R/T430A/Q511H/A535R;
G73F/T430A/E503V/Q511H;
G73F/T430A/Q511H;
G294C/L417R/A431L;
G294C/L417R/A431L,Q/Q511H;
G294C/L417V/A431Q;
L417R,V/A431L,Q/Q511H;
L417V/T430A/A431L,Q/Q511H/A535R/A539R/563I;
L417V/T430A/Q511H/A535R/N563I;
L417V/T430A/Q511H/A539R/N563I;和
E503A/N563I
或者在亲本葡糖淀粉酶特别是木霉属葡糖淀粉酶同源物中的等价位置。
已经比对了多个亲本葡糖淀粉酶和TrGA的氨基酸序列。图4A和4B包括下列亲本葡糖淀粉酶的催化结构域:泡盛曲霉(AaGA)(SEQ ID NO:5);黑曲霉(AnGA)(SEQ ID NO:6);米曲霉(AoGA)(SEQ ID NO:7);灰腐质霉(HgGA)(SEQ ID NO:8)和Hypocrea vinosa(HvGA)(SEQ ID NO:9)。下表1中显示了催化结构域的%同一性。图4C和4D包括下列亲本葡糖淀粉酶的淀粉结合结构域:里氏木霉(TrGA)(SEQ ID NO:161);灰腐质霉(HgGA)(SEQ ID NO:162);太瑞斯梭孢壳霉(Thielaviaterrestris)(TtGA)(SEQ ID NO:163);疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyceslanuginosus)(ThGA)(SEQ ID NO:164);埃默森踝节菌(Talaromycesemersonii)(TeGA)(SEQ ID NO:165);黑曲霉(AnGA)(SEQ ID NO:166)和泡盛曲霉(AaGA)(SEQ ID NO:167)。在一些实施方案中,例如,变体葡糖淀粉酶来自是曲霉属葡糖淀粉酶的亲本葡糖淀粉酶,并且变体将包括至少一个取代,其发生在与SEQ ID NO:2所示的位置等价的位置上,特别是在对应的D4、F5、I12、D24、F29、I43、D44、P45、D46、Y47、Y49、W51、N61、Y70、G73、Q75、R76、P94、D100、K108、K114、F116、N119、R122、Q124、R125、G137、N146、Q148、Y169、N171、Q172、F175、W178、E180、V181、Q208、S211、W228、N242、E243、R245、I292、G294、K297、R309、Y310、D313、V314、Y315、Y316、N317、W321、K340、K341、T350、Q356、T363、S368、S369、N376、Y395、A398、S401、R408、N409、T412、L417、H418、W421、T430、A431、R433、I436、S451、E503、Q511、A535、A539或N563的位置上。
内切-H去除里氏木霉葡糖淀粉酶的N-连接糖,具有稳定化效果(观察Tm时)。因此,具有N171D取代的变体与野生型相比,可具有增加的热稳定性。在一些实施方案中,提供了在具有N-连接糖的位置具有一个或多个取代的变体,包括里氏木霉(SEQ ID NO:2)中的N171D。
表1
  AaGA   AnGA   AoGA   HgGA   HvGA   TrGA
  AaGA   100   95   58   53   57   56
  AnGA   100   59   53   57   56
  AoGA   100   55   56   56
  HgGA   100   61   63
  HvGA   100   91
  TrGA   100
本公开文本还提供与亲本葡糖淀粉酶,特别是与TrGA相比,具有至少一个改变性质(例如:改善的性质)的葡糖淀粉酶变体。在一些实施方案中,至少一个改变的性质(例如:改善的性质)选自酸稳定性、热稳定性和比活性。通常,改变的性质是增加的酸稳定性、增加的热稳定性和/或增加的比活性。通常,增加的热稳定性是在较高温度下。在一个实施方案中,增加的pH稳定性是在高pH下。在另一个实施方案中,增加的pH稳定性是在低pH下。
与亲本葡糖淀粉酶相比,本公开文本的葡糖淀粉酶变体还可以提供在低底物浓度下,较高的淀粉水解速率。当在相同条件下测试时,变体可具有比亲本葡糖淀粉酶较高的Vmax或较低的Km。例如,变体葡糖淀粉酶可具有在温度范围为25℃至70℃下较高的Vmax(例如:25℃至35℃;30℃至35℃;40℃至50℃;50℃至55℃和55℃至62℃)。可以利用已知的标准方法方便的确定米-曼常数(Michaelis-Menten constant)、Km和Vmax值。
5、热稳定性(热稳定变体)
在一个方面,公开文本涉及与亲本或野生型相比,在改变的温度下,具有改变的热稳定性的变体葡糖淀粉酶。改变的温度包括增加的或降低的温度。在一些实施方案中,葡糖淀粉酶变体具有改善的热稳定性,例如在暴露于改变的温度下给定的时间后,保留至少50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、92%、95%、96%、97%、98%或99%酶活性,所述时间例如至少60分钟、120分钟、180分钟、240分钟、300分钟等。在一些实施方案中,变体与亲本葡糖淀粉酶相比,在40-80℃范围内的选定温度下,具有增加的热稳定性,还可以是50-75℃的范围内,和60-70℃的范围内,并且pH范围通常是4.0-6.0。在一些实施方案中,按实施例描述的确定热稳定性。
在一些实施方案中,与热稳定性的改良有关的特别有兴趣的变体包括一个或多个缺失、取代或插入,特别是取代,它们发生在SEQ ID NO:2所示的氢基酸序列的下列位置上:D4、F5、I12、D24、F29、143、D44、P45、D46、Y47、Y49、W51、N61,Y70、G73、Q75、R76、P94、D100、K108、K114、F116、N119、R122、Q124、R125、G137、N146、Q148、Y169、N171、Q172、F175、W178、E180、V181、Q208、S211、W228、N242、E243、R245、I292、G294、K297、R309、Y310、D313、V314、Y315、Y316、N317、W321、K340、K341、T350、Q356、T363、S368、S369、N376、Y395、A398、S401、R408、N409、T412、L417、H418、W421、T430、A431、R433、I436、S451、E503、Q511、A535、A539或N563;或亲本葡糖淀粉酶中等价的位置上。在一些实施方案中,亲本葡糖淀粉酶是木霉葡糖淀粉酶同源物,在典型的实施方案中,亲本葡糖淀粉酶具有与SEQ ID NO:2至少90%、至少95%和至少98%序列同一性。
6、嵌合的葡糖淀粉酶:
本公开文本的葡糖淀粉酶变体还可以包括嵌合的或杂合的葡糖淀粉酶,具有例如来自一种葡糖淀粉酶的淀粉结合结构域(SBD)和来自另一种的催化结构域和接头。例如,可以通过将AnGA的SBD与TrGA的SBD互换,产生具有AnGA SBD和TrGA催化结构域和接头的杂化物,来制造杂合的葡糖淀粉酶。可选的,来自AnGA的SBD和接头可以与TrGA的SBD和接头互换。
7、比活性
在另一方面,公开文本涉及与亲本或野生型葡糖淀粉酶相比,具有改变的比活性的变体葡糖淀粉酶。
在一些实施方案中,与比活性的改良有关的特别有兴趣的变体包括一个或多个缺失、取代或插入,特别是取代,发生在SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的下列位置上:D4、F5、I12、D24、F29、I43、D44、P45、D46、Y47、Y49、W51、N61、Y70、G73、Q75、R76、P94、D100、K108、K114、F116、N119、R122、Q124、R125、G137、N146、Q148、Y169、N171、Q172、F175、W178、E180、V181、Q208、S211、W228、N242、E243、R245、I292、G294、K297、R309、Y310、D313、V314、Y315、Y316、N317、W321、K340、K341、T350、Q356、T363、S368、S369、N376、Y395、A398、S401、R408、N409、T412、L417、T430、A431、H418、W421、R433、I436、S451、E503、Q511、A535、A539或N563;或在亲本葡糖淀粉酶中等价的位置上。在一些实施方案中,具有改善的比活性的公开文本的变体包括取代,其发生在SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的下列位置上:D4、D24、I43、D44、N61、Y70、G73、Q75、R76、D100、K108、N119、Q124、N146、Q148、N171、Q172、F175、V181、Q208、S211、E243、R245、I292、G294、K297、V314、Y316、N317、K340、K341、T350、Q356、T363、S368、N376、Y395、A398、S401、N409、T412、L417、T430、A431、I436、S451、E503、Q511、A535、A539或N563;或在亲本葡糖淀粉酶中等价的位置上。在一些实施方案中,亲本葡糖淀粉酶包含与SEQ ID NO:2的序列具有至少90%或95%序列同一性的序列。
8、多核苷酸:
本公开文本还涉及编码本发明的变体葡糖淀粉酶的分离的多核苷酸。编码变体葡糖淀粉酶的多核苷酸可以通过本领域已知的常规技术制备。可以合成制备多核苷酸,例如通过自动化DNA合成仪。DNA序列可以是通过将片段连接在一起而制备的混合的基因组(或cDNA)和合成的起源。多核苷酸还可以是通过聚合酶链式反应(PCR)利用特异引物制备的。一般,参考Minshull J.等人,(2004),Engineered protein function by selectiveamino acid diversification,Methods 32(4):416-427。而且,目前多家公司都合成DNA,例如Geneart AG,Regensburg,德国。
本公开文本还提供包含下述核苷酸序列的分离的多核苷酸:所述序列(i)具有与SEQ ID NO:4至少70%同一性,或(ii)在中等至高严谨条件下,能够与来自SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列的探针杂交,或(iii)与核苷酸序列互补,所述核苷酸序列与SEQ ID NO:4所示的序列具有至少90%序列同一性。根据本公开文本有效的探针可以包括SEQ ID NO:4的至少50、100、150、200、250、300或更多个连续的核苷酸。
本公开文本还提供了编码变体葡糖淀粉酶的分离的多核苷酸,所述变体葡糖淀粉酶包含的氨基酸序列具有与SEQ ID NO:2至少80%氨基酸序列同一性。在一些实施方案中,变体葡糖淀粉酶具有与SEQ ID NO:2至少80%氨基酸序列同一性。在一些实施方案中,变体葡糖淀粉酶具有与SEQID NO:2至少90%氨基酸序列同一性。在一些实施方案中,变体葡糖淀粉酶具有与SEQ ID NO:2至少93%氨基酸序列同一性。在一些实施方案中,变体葡糖淀粉酶具有与SEQ ID NO:2至少95%氨基酸序列同一性。在一些实施方案中,变体葡糖淀粉酶具有与SEQ ID NO:2至少97%氨基酸序列同一性。在一些实施方案中,变体葡糖淀粉酶具有与SEQ ID NO:2至少98%氨基酸序列同一性。在一些实施方案中,变体葡糖淀粉酶具有与SEQID NO:2至少99%氨基酸序列同一性。本发明还提供包含任何上述多核苷酸的表达载体。
本公开文本还提供编码本文中提供的变体葡糖淀粉酶的DNA片段(即,部分)。这些片段可用于获得部分长度的DNA片段,其能够用于从丝状真菌细胞(例如:木霉属、曲霉属、镰孢属、青霉属、裂殖酵母属和腐质霉属)中分离或鉴别编码本文中描述的成熟的葡糖淀粉酶或其具有葡糖淀粉酶活性的区段的多核苷酸。在一些实施方案中,DNA片段可以包含至少50、100、150、200、250、300或更多个连续的核苷酸。在一些实施方案中,SEQ ID NO:4中提供的DNA的部分可用于从其它物种,例如编码葡糖淀粉酶的丝状真菌中,获得亲本葡糖淀粉酶,特别是木霉葡糖淀粉酶同源物。
9、DNA构建体和载体
根据公开文本的一个实施方案,组装包括上述编码本发明涵盖的变体葡糖淀粉酶的多核苷酸并且有效连接至启动子序列的DNA构建体,用于转移至宿主细胞内。
可以利用载体将DNA构建体引入宿主细胞。载体可以是任何载体,当其被引入宿主细胞时,通常被整合到宿主细胞基因组内并复制。载体包括克隆载体、表达载体、穿梭载体、质粒、噬菌体颗粒、盒等。在一些实施方案中,载体是表达载体,其包含与葡糖淀粉酶编码序列有效连接的调控序列。
Sambrook等人,(1989)如上,和Ausubel(1987)如上,和van den Hondel等人,(1991)在Bennett和Lasure(编著)More Gene Manipulations in Fungi,Academic Press第396-428页中,和美国专利5,874,276中提供了合适的表达和/或整合载体的实例。Fungal Genetics Stock center catalogue of Strains(FGSC,<WWW.fgsc.net>)也公开了有用的载体。特别有效的载体包括获得自例如英杰生命科学公司(Invitrogen)和普罗米加公司(Promega)的载体。
适合用于真菌宿主细胞的特定载体包括载体例如pFB6、pBR322、pUC18、pUC100、pDONRTM201、pDONRTM221、pENTRTM、pGEM
Figure GPA00001139245100381
3Z和pGEM
Figure GPA00001139245100382
4Z。用于曲霉属的通用表达载体包括具有glaA启动子的pRAX,在肉座菌属/木霉属中包括具有cbh1启动子的pTrex3g。
在细菌细胞中使用的合适质粒包括能在大肠杆菌(E.coli)中进行复制的pBR322和pUC19,以及例如允许在芽孢杆菌属中复制的pE194。
在一些实施方案中,启动子在细菌或真菌宿主细胞内表现出转录活性,可来自编码与宿主细胞同源或异源蛋白质的基因。启动子可以是突变的、截短的和/或杂合的启动子。上述启动子是本领域已知的。
用于真菌细胞,特别是丝状真菌细胞例如木霉属或曲霉属细胞的合适的启动子的实例包括以下示例性启动子,如里氏木霉启动子cbh1、cbh2、egl1、egl2、eg5、xln1和xln2。其它有效的启动子的实例包括来自泡盛曲霉和黑曲霉葡糖淀粉酶基因(glaA)的启动子(参见:Nunberg等人,(1984)Mol.Cell Biol.4:2306-2315和Boel等人,(1984)EMBO J.3:1581-1585),米曲霉TAKA淀粉酶启动子,来自酿酒酵母的TPI(丙糖磷酸异构酶)启动子,来自构巢曲霉(Aspergillus nidulans)乙酰胺酶基因和米赫根毛霉(Rhizomucor miehei)脂肪酶基因的启动子。
用于细菌细胞的合适的启动子的实例包括自以下获得的启动子:大肠杆菌lac操纵子;地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)α淀粉酶基因(amyL),嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus)淀粉酶基因(amyM);枯草芽孢杆菌xylA和xylB基因,β-内酰胺酶基因,和tac启动子。
在一个实施方案中,启动子是宿主细胞天然的启动子。例如,当里氏木霉是宿主时,启动子是天然的里氏木霉启动子。在另一个实施方案中,启动子是真菌宿主细胞异源的启动子。在一些实施方案中,启动子是亲本葡糖淀粉酶的启动子,例如TrGA启动子。
在一些实施方案中,DNA构建体包括编码信号序列的核酸,所述信号序列是连接在多肽氨基端的氨基酸序列,指导编码的多肽进入细胞的分泌途径。核酸序列的编码序列的5’端可天然的包含信号肽编码区,其在翻译阅读框中天然的连接至葡糖淀粉酶编码序列的区段上,编码分泌的葡糖淀粉酶,或者核酸序列的编码序列的5’端可以包括对该编码序列是外来性的信号肽。在一些实施方案中,DNA构建体包括与亲本葡糖淀粉酶基因天然相关的信号序列,其中从所述亲本葡糖淀粉酶获得变体葡糖淀粉酶。在一些实施方案中,信号序列是SEQ ID NO:1描述的序列,或与其具有至少90%,至少94%和至少98%序列同一性的序列。有效的信号序列可以包括自其它丝状真菌酶的葡糖淀粉酶获得的信号序列,例如来自木霉属(里氏木霉葡糖淀粉酶),腐质霉属(特异腐质霉的纤维素酶或灰腐质霉的葡糖淀粉酶),曲霉属(黑曲霉葡糖淀粉酶和米曲霉TAKA淀粉酶),和根霉属。
在其它实施方案中,包含信号序列的DNA构建体或载体与待被引入宿主细胞的启动子序列来自相同的来源。在一些实施方案中,可以使用木霉葡糖淀粉酶同源物的天然葡糖淀粉酶信号序列,例如来自肉座菌属菌株的信号序列。
在一些实施方案中,表达载体还可以包括终止序列。本发明可以使用任何在宿主细胞内有功能的终止序列。在一个实施方案中,终止序列和启动子序列来自相同的来源。在另一个实施方案中,终止序列是与宿主细胞同源的。有效的终止序列包括自以下基因获得的终止序列:里氏木霉cbh1;黑曲霉或泡盛曲霉葡糖淀粉酶(Nunberg等人,(1984)如上,和Boel等人,(1984)如上),构巢曲霉的邻氨基苯甲酸合酶,米曲霉TAKA淀粉酶,或构巢曲霉trpC(Punt等人,(1987)Gene 56:117-124)。
在一些实施方案中,表达载体包括选择性标记。典型的选择性标记的实例包括产生抗微生物抗性(例如:潮霉素和腐草霉素)的标记。营养择性标记也可用于本发明,包括本领域已知的标记,如amdS(乙酰胺酶),argB(鸟氨酸氨甲酰基转移酶)和pyrG(乳清苷-5’磷酸脱羧酶)。对于木霉转化,在载体系统中有效的标记是本领域已知的(参见例如:Finkelstein,Biotechnology of Filamentous Fungi,第6章,Finkelstein等编著,Butterworth-Heinemann,Boston,MA(1992);Kinghorn等人,(1992)Applied Molecular Genetics of Filamentous Fungi,Blackie Academic andProfessional,Chapman and Hall,London;Berges和Barreau(1991)Curr.Genet.19:359-365;以及van Hartingsveldt等人,(1987)Mol.Gen.Genet.206:71-75)。在典型的实施方案中,选择性标记是amdS基因,其编码乙酰胺酶,允许转化的细胞以乙酰胺为氮源生长。使用构巢曲霉amdS基因作为选择性标记的应用描述在Kelley等人,(1985)EMBO J.4:475-479和
Figure GPA00001139245100401
等人,(1987)Gene 61:155-164中。
连接包含编码变体葡糖淀粉酶的核酸序列的DNA构建体、启动子、终止子和其它序列,并将它们插入合适的载体所使用的方法是本领域普遍已知的。一般通过在合适的限制性酶切位点实现连接。如果不存在此类位点,则根据常规实践使用合成的寡核苷酸接头。(参见Sambrook(1989)如上,和Bennett和Lasure,More Gene Manipulations in Fungi,Academic Press,San Diego(1991)第70-76页)。此外,可以利用已知的重组技术构建载体(例如:英杰生命技术公司(Invitrogen Life Technologies),Gateway技术)。
10、宿主细胞
本公开文本还涉及包含编码本发明的变体葡糖淀粉酶的多核苷酸的宿主细胞,其用于生产本发明的葡糖淀粉酶。在一些实施方案中,宿主细胞选自细菌、真菌、植物和酵母细胞。术语宿主细胞既包括细胞,细胞的后代,以及从细胞产生的原生质体,它们用于生产根据本发明的变体葡糖淀粉酶。
在一些实施方案中,宿主细胞是真菌细胞,通常是丝状真菌宿主细胞。术语“丝状真菌”指真菌亚门的所有丝状体(参见:Alexopoulos,C.J.(1962),Introductory Mycology,Wiley,New York)。这类真菌的特征是营养菌丝体具有包含壳多糖、纤维素和其它复杂多糖的细胞壁。本公开文本的丝状真菌与酵母是在形态学上、生理学上和遗传学上不同的。丝状真菌的营养生长是通过菌丝伸长,碳分解代谢是专性需氧的。在本公开文本中,丝状真菌亲本细胞可以是但不限于以下种的细胞:木霉属(例如:里氏木霉,红褐肉座菌(Hypocrea jecorina)的无性型,原分类为长梗木霉;绿色木霉(Trichoderma viride);康宁木霉(Trichoderma koningii);哈茨木霉(Trichoderma harzianum)(Sheir-Neirs等人,(1984)Appl.Microbiol.Bioteehnol 20:46-53;ATCC No.56765和ATCC NO.26921);青霉属物种;腐质霉属物种(例如:特异腐质霉,面包腐质霉(H.lanuginosa)和灰腐质霉);金小孢子菌属(Chrysosporium)物种(例如:C.lucknowense);粘帚霉属(Gliocladium)物种;曲霉属物种(例如:米曲霉、黑曲霉、酱油曲霉(A sojae)、日本曲霉(A.japonicus)、构巢曲霉和泡盛曲霉)(Ward等人,(1993)Appl.Microbiol.Biotechnol.39:738-743和Goedegebuur等人,(2002)Genet 41:89-98):镰孢属物种(Fusarium sp.)(例如:粉红镰孢、禾赤镰孢(F.graminum)、F.cerealis、尖镰孢(F.oxysporuim)和腹状镰孢(F.venenatum));脉孢属物种(粗糙脉孢菌(N.crassa));肉座菌属(Hypocrea)物种;毛霉属(Mucor)物种(米黑毛霉(M.miehei));根霉属物种和裸孢壳属(Emericella)物种(还参见:Innis等人,(1985)Sci.228:21-26)。术语“木霉”或“木霉属”或“木霉菌”都指原来或现在分类为木霉属的任何真菌属。
在一些实施方案中,宿主细胞是革兰氏阳性菌细胞。非限制性实例包括链霉菌属(例如:浅青紫链霉菌(S.lividans)、天蓝色链霉菌(S.coelicolor)和灰色链霉菌(S.griseus))和芽孢杆菌属的菌。如本文中使用的,“芽孢杆菌属”包括本领域技术人员已知的在“芽孢杆菌”属中的所有种,包括但不限于枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)、迟缓芽孢杆菌(B.lentus)、短芽孢杆菌(B.brevis)、嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus)、嗜碱芽孢杆菌(B.alkalophilus)、解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)、克劳氏芽孢杆菌(B.clausii)、耐盐芽孢杆菌(B.halodurans)、巨大芽孢杆菌(B.megaterium)、凝结芽孢杆菌(B.coagulans)、环状芽孢杆菌(B.circulans)、灿烂芽孢杆菌(B.lautus)和苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)。认识到芽孢杆菌属不断进行着分类重构。因此,意味着属包括已经重分类的种,包括但不限于如嗜热脂肪芽孢杆菌一类的生物,其现在命名为“嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillusstearothermophilus)”。
在一些实施方案中,宿主细胞是革兰氏阴性菌株,例如大肠杆菌或假单胞菌属物种(Pseudomonas sp.)。在其它实施方案中,宿主细胞可以是酵母细胞,例如酵母属物种(Saccharomyces sp.)、裂殖酵母属物种(Schizosaccharomyces sp.)、毕赤酵母属物种(Pichia sp.)或假丝酵母属物种(Candida sp.)。
在其它实施方案中,宿主细胞是遗传改造的宿主细胞,其中天然的基因已经失活,例如在细菌或真菌细胞内通过缺失。当希望获得具有一个或多个失活基因的真菌宿主细胞时,可使用已知的方法(例如:在美国专利5,246,853,美国专利5,475,101和WO 92/06209中描述的方法)。通过完全或部分缺失,插入失活或任何其它导致基因对于其意图的目的无功能的方法,都可以实现基因失活(使基因不能表达功能性蛋白质)。在一些实施方案中,当宿主细胞是木霉属细胞,特别是里氏木霉宿主细胞时,cbh1、cbh2、egl1和egl2基因将被失活和/或通常被缺失。典型的,里氏木霉宿主细胞具有四删除的蛋白质,提出并描述在美国专利5,847,276和WO05/001036中。在其它实施方案中,宿主细胞是蛋白酶缺陷的,或蛋白酶减小的菌株。
11、宿主细胞转化
将DNA构建体或载体引入宿主细胞内包括以下技术,例如:转化;电穿孔;核显微注射;转导;转染(例如:脂质体介导和DEAE-Dextrin介导的转染);用磷酸钙DNA沉淀孵育;用DNA-包被的微粒高速轰击;和原生质体融合。常规的转化技术是本领域已知的(参见例如:Ausubel等人,(1987),如上,第9章;和Sambrook(1989)如上和Campbell等人,(1989)Curr.Genet.16:53-56)。
多个文献都公开了用于芽孢杆菌的转化方法,包括Anagnostopoulos C和J.Spizizen(1961)J.Bacteriol.81:741-746,以及WO 02/14490。
用于曲霉属的转化方法描述在Yelton等人,(1984)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81:1470-1474;Berka等人,(1991),在Applications of EnzymeBiotechnology,Kelly和Baldwin编著,Plenum Press(NY);Cao等人,(2000)Science 9:991-1001;Campbell等人,(1989)Curr.Genet.16:53-56和EP 238023中。在木霉属表达异源蛋白描述在美国专利6,022,725;美国专利6,268,328;Harkki等人,(1991);Enzyme Microb.Technol.13:227-233;Harkki等人,(1989)Bio Technol.7:596-603;EP 244,234;EP 215,594;和Nevalainen等人,“The Molecular Biology of Trichoderma and itsApplication to the Expression of Both Homologous and Heterologous Genes”,MOLECULAR INDUSTRIAL MYCOLOGY,Leong和Berka编著,Marcel DekkerInc.,NY(1992)第129-148页。还可参考W096/00787和Bajar等人,(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88:8202-8212用于镰孢属菌株转化。
在一个特定的实施方案中,制备用于转化的木霉属物种涉及从真菌菌丝体制备原生质体(参见:Campbell等人,(1989)Curr.Genet.16:53-56;Pentilla等人,(1987)Gene 61:155-164)。根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导的丝状真菌转化是已知的(参见:de Groot等人,(1998)Nat.Biotechnol.16:839-842)。还可参考美国专利6,022,725和美国专利6,268,328的使用丝状真菌宿主的转化方法。
典型的,使用载体系统构建基因稳定的转化体,由此编码变体葡糖淀粉酶的核酸稳定整合到宿主菌株染色体中。然后利用已知技术纯化转化体。
在其它一些实施方案中,宿主细胞是植物细胞,例如来自单子叶植物的细胞(例如:玉米、小麦和高粱),或来自双子叶植物的细胞(例如:大豆)。生产用于转化植物的DNA构建体的方法,和转化植物的方法是已知的。一些这类方法包括根癌农杆菌介导的基因转移;微粒轰击;PEG介导的原生质体转化;电穿孔等。参考美国专利6,803,499,美国专利6,777,589;Fromm等人(1990)Biotechnol.8:833-839;Potrykus等人,(1985)Mol.Gen.Genet.199:169-177。
12、蛋白质的生产
本公开文本还涉及生产变体葡糖淀粉酶的方法,包括用含有编码本发明的变体葡糖淀粉酶的多核苷酸的表达载体转化宿主细胞,任选的在适合生产变体葡糖淀粉酶的条件下培养宿主细胞,和任选的回收葡糖淀粉酶。
在本公开文本的表达和生产方法中,在合适条件下培养宿主细胞,在摇瓶培养,实验室或工业发酵罐的小规模或大规模发酵(包括连续发酵,批次发酵和补料分批发酵),其中使用含有生理盐和营养物的合适培养基(参见例如:Pourquie,J.等人,BIOCHEMISTRY AND GENETICS OFCELLULOSE DEGRADATION,Aubert编辑,J.P.等人,Academic Press,第71-86页,1988和Ilmen,M.等人,(1997)Appl.Environ.Microbiol.63:1298-1306)。本公开文本可使用常规商业制备的培养基(例如:酵母麦芽提取物(YM)培养基、Luria Bertani(LB)培养基和沙氏葡萄糖(SD)培养基)。用于细菌和丝状真菌细胞的典型培养条件是本领域已知的,可以从科技文献和/或真菌来源处获得,例如美国典型培养物保藏中心(AmericanType culture Collection)和真菌品种中心(Fungal Genetics Stock Center)。当葡糖淀粉酶编码序列处于可诱导的启动子控制下时,将诱导剂(例如糖、金属盐或抗微生物剂)以有效诱导葡糖淀粉酶表达的浓度添加到培养基中。
在一些实施方案中,本公开文本涉及生产变体葡糖淀粉酶的方法,包括在适合生产变体的条件下,培养含有编码本发明的变体葡糖淀粉酶的多核苷酸的植物或植物细胞,和任选的回收葡糖淀粉酶。
在一些实施方案中,为了评估已经用编码本发明涵盖的变体葡糖淀粉酶的多核苷酸转化的细胞系对变体葡糖淀粉酶的表达,在蛋白质水平、RNA水平进行测定,和/或使用特别针对葡糖淀粉酶活性和/或生产的功能性生物测定。一些这类测定包括Northern印迹、斑点印迹(DNA或RNA分析)、RT-PCR(逆转录酶聚合酶链式反应),或利用合适的标记探针(基于核酸编码序列)的原位杂交,和常规的Southern印迹和放射自显影。
此外,可以直接测量样品中的变体葡糖淀粉酶的生产和/或表达,例如通过在培养基中直接测量还原糖例如葡萄糖的测定,和通过测量葡糖淀粉酶活性、表达和/或生产的测定。特别的,可以通过3,5-二硝基水杨酸(DNS)方法(参见:Goto等人,(1994)Biosci.Biotechnol.Biochem.58:49-54)测定葡糖淀粉酶活性。在其它实施方案中,通过免疫学方法评估蛋白质表达,例如细胞的免疫组织化学染色,组织切片或组织培养基的免疫测定(例如:通过Western印迹或ELISA)。此类免疫测定可用于定性和定量地评估葡糖淀粉酶的表达。此类方法的细节是本领域技术人员已知的,许多用于实践此类方法的试剂也是可商购的。
本发明的葡糖淀粉酶可以从培养基中通过本领域已知的多种方法回收或纯化,包括离心、过滤、提取、沉淀等。
13、组合物:
变体葡糖淀粉酶可以用于酶组合物中,所述酶组合物包括但不限于淀粉水解和糖化组合物,清洁和去污组合物(例如:衣物去污剂、碗碟洗涤去污剂,和硬表面清洁组合物),醇发酵组合物,和动物饲料组合物。进一步的,变体葡糖淀粉酶可用于烘烤用途,例如面包和蛋糕生产、酿造、健康护理、纺织品、环境废弃物转化过程、生物浆处理,和生物质转化应用。
在一些实施方案中,酶组合物包括本发明涵盖的变体葡糖淀粉酶,其自培养基获得或从培养基中回收和纯化,所述酶组合物任选的与任一种或组合的下列酶联合使用:α淀粉酶、蛋白酶、支链淀粉酶、异淀粉酶、纤维素酶、半纤维素酶、木聚糖酶、环糊精葡糖转移酶(cyclodextringlycotransferase)、脂肪酶、植酸酶、漆酶、氧化酶、酯酶、角质酶(cutinase)、木聚糖酶、粒状淀粉水解酶和其它葡糖淀粉酶。在一个实施方案中,蛋白酶是酸性真菌蛋白酶(AFP)。在另一个实施方案中,酸性真菌蛋白酶是来自木霉属(例如:NSP-24,还参见US 2006/0154353,公开于2006年7月13日,通过整体引入本文作为参考)。在另一个实施方案中,植酸酶来自Buttiauxiella物种(例如:BP-17,还参见PCT专利公开WO 2006/043178中公开的变体)。
在一些典型的组合物中,公开文本的变体葡糖淀粉酶与α淀粉酶组合,例如真菌α淀粉酶(例如:曲霉属)或细菌α淀粉酶(例如:芽孢杆菌属物种如嗜热脂肪芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌),及其变体和杂合体。在一个实施方案中,α淀粉酶是酸稳定的α淀粉酶。在一个实施方案中,α淀粉酶是颗粒淀粉水解酶(GSHE)。在一个实施方案中,α淀粉酶是Aspergillus kawachi的α淀粉酶(AKAA),参见US 7,037,704。考虑用于本发明的组合物的可商购的α淀粉酶是已知的,包括GZYMEG997、SPEZYME FRED、SPEZYME XTRA、STARGEN(美国丹尼斯克有限公司杰能科子公司(Danisco US、lnc、Genencor Division))、TERMAMYL 120-L和SUPRA(诺和酶生物技术公司(Novozymes,Biotech.))和VIRIDIUM(Diversa)。
在其它实施方案中,公开文本的变体葡糖淀粉酶可以与其它葡糖淀粉酶组合。在一些实施方案中,公开文本的葡糖淀粉酶与一种或多种来自曲霉属菌株(例如米曲霉、黑曲霉、A.kawachi和泡盛曲霉)的葡糖淀粉酶;来自腐质霉属菌株(特别是灰腐质霉)的葡糖淀粉酶或其变体,例如与WO05/052148中公开的SEQ ID NO:3具有至少90%、93%、95%、96%、97%、98%和99%序列同一性的葡糖淀粉酶;来自踝节菌属菌株的葡糖淀粉酶或其变体,特别是埃默森踝节菌(T.emersonii)的葡糖淀粉酶;来自阿太菌属(Athelia)菌株,特别是罗氏阿太菌(A.rolfsii)的葡糖淀粉酶;来自青霉属菌株,特别是产黄青霉的葡糖淀粉酶进行组合。
14、用途
特别的,变体葡糖淀粉酶可用于淀粉转化过程,特别是生产用于果糖浆液的葡萄糖、特制糖,以及从包含淀粉的底物发酵中来生产醇和其它终产物(例如有机酸、抗坏血酸和氨基酸)中(G.M.A van Beynum等人编著,(1985)STARCH CONVERSION TECHNOLOGY,Marcel Dekker Inc.NY)。利用本发明的变体葡糖淀粉酶组合物生产的糊精可以获得至少80%、至少85%、至少90%和至少95%的葡萄糖产量。利用本发明涵盖的葡糖淀粉酶从淀粉底物发酵中生产醇可以包括燃料用醇或可饮用醇的生产。在一些实施方案中,当使用变体葡糖淀粉酶时,与亲本葡糖淀粉酶在相同条件下,醇产量较大。在一些实施方案中,醇产量比亲本葡糖淀粉酶多约0.5%和2.5%之间,包括但不限于,比亲本葡糖淀粉酶多0.6%、0.7%、0.8%、0.9%、1.0%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2.0%、2.1%、2.2%、2.3%和2.4%。
在一个典型的实施方案中,本公开文本的变体葡糖淀粉酶可用于从多种基于植物的底物中水解淀粉,其用于醇生产。在一些实施方案中,基于植物的底物包括玉米、小麦、大麦、黑麦、高粱、稻、甘蔗、马铃薯及其组合。在一些实施方案中,基于植物的底物可以是分级分离的植物原料,例如谷类如玉米,其被分级分离为例如纤维,胚芽,蛋白质和淀粉(胚乳)成分(美国专利6,254,914和美国专利6,899,910)。醇发酵的方法描述在THEALCOHOL TEXTBOOK,A REFERENCE FOR THE BEVERAGE,FUEL ANDINDUSTRIAL ALCOHOL INDUSTRIES,第3版,K.A.Jacques等人编著,1999,Nottingham University Press,UK中。在一些实施方案中,醇可以是乙醇。特别的,醇发酵生产过程的特征是湿磨或干磨法。在一些实施方案中,变体葡糖淀粉酶可用于湿磨法发酵过程,在其它实施方案中,变体葡糖淀粉酶可用于干磨法。
谷粒干磨涉及多个基本步骤,一般包括:研磨、蒸煮、液化、糖化、发酵和固液分离来生产醇和其它副产品。植物材料,特别是全谷粒,例如玉米、小麦或黑麦是是被研磨的。在一些情况下,谷类可以先被分级分离组分部分。研磨的植物原料可以被碾碎以获得粗制的或精细的颗粒。研磨的植物原料与液体(例如,水和/或酒槽水)在浆料槽中混合。浆体在喷射蒸煮器中接受高温(例如90℃到105℃或更高)和液化酶(例如,α淀粉酶)以溶解和水解谷物中的淀粉为糊精。混合物被冷却,进一步地,用糖化酶,例如包含在本发明中的葡糖淀粉酶处理,以产生葡萄糖。含有葡萄糖的醪液于是在发酵微生物,例如生产醇的微生物,尤其是酵母(酿酒酵母属)存在条件下,发酵约24到120小时。从液相中分离醪液中的固体,获得醇例如乙醇和有用的副产品,例如酒糟。
在一些实施方案中,将糖化步骤和发酵步骤组合,该过程被称为同时糖化和发酵或同时糖化、酵母增殖和发酵。
在其它实施方案中,在淀粉水解的过程中使用变体葡糖淀粉酶,其中,所述过程的温度是在30℃和75℃之间的温度下进行,以及在40℃和65℃之间的温度下进行,其中pH范围在pH3.0和pH6.5之间。一些实施方案中的发酵过程包括碾磨谷物或分级分离谷物和混合碾磨的谷物和液体以形成浆体,所述浆体接着在单独容器中与根据本发明的变体葡糖淀粉酶以及任选地,其它酶例如,但不限于,α淀粉酶、其它的葡糖淀粉酶、植酸酶、蛋白酶、支链淀粉酶、异淀粉酶或其它具有颗粒淀粉水解活性的酶和酵母混合,以产生乙醇和其它的副产品(美国专利4,514,496,WO 04/081193和WO 04/080923)。
在一些实施方案中,发明涉及糖化液体淀粉溶液的方法,包括利用本发明的变体葡糖淀粉酶的酶促糖化步骤。
本公开文本还提供包含至少一种本公开文本涵盖的变体葡糖淀粉酶的动物饲料。2002年12月13日提交的WO 03/049550(通过完整并入本文作为参考)中,提供了在生产包含淀粉的饲料中利用葡糖淀粉酶的方法。简而言之,葡糖淀粉酶变体与包含淀粉的饲料混合。葡糖淀粉酶能够降解抗性淀粉供动物使用。
本发明的其它目标和优势根据本说明书是显而易见的。
实施例
提供下列实施例是为了证实并进一步示例一些典型的实施方案以及本公开文本的一些方面,并非视为限制本发明的范围。
在下列公开内容和实验部分,使用以下缩写:GA(葡糖淀粉酶);GAU(葡糖淀粉酶单元);wt%(重量百分比);℃(摄氏度);rpm(每分钟转数);H2O(水);dH2O(去离子水);dIH2O(去离子水,Milli-Q过滤);aa或AA(氨基酸);bp(碱基对);kb(千碱基对);kD(千道尔顿);g或gm(克);μg(微克);mg(毫克);μL(微升);ml和mL(毫升);mm(毫米);μm(微米);M(摩尔);mM(毫摩尔);μM(微摩尔);U(单位);V(伏特);MW(分子量);sec(s)或s(s)(秒);min(s)或m(s)(分钟);hr(s)或h(s)(小时);DO(溶解氧);ABS(吸光度);EtOH(乙醇);PSS(生理盐溶液);m/v(质量/体积);和MTP(微量滴定板);N(正常);DPI(单糖);DP2(二糖);DP>3(寡糖,具有聚合度大于3的糖);ppm(百万分之一)。
下文描述了用于提供变体的方法。然而,应该注意到可以使用不同的方法提供亲本分子的变体,发明不限于实施例中使用的方法。意指可以使用任何适合产生变体和选择变体的方式。
96孔微量滴定板的pNPG葡糖淀粉酶活性测定:
试剂溶液是:NaAc缓冲液:200mM乙酸钠缓冲液,pH4.5;底物:在NaAc缓冲液中(0.3g/20m1)的50mM对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(SigmaN-1377),和终止溶液:800mM甘氨酸-NaOH缓冲液,pH10。在新96孔平底MTP中置入30μl过滤的上清液。每个孔加入50μl NaAc缓冲液和120μl底物,在50℃孵育30分钟(Thermolab系统iEMS培养箱/摇床HT)。通过加入100μl终止溶液结束反应。在MTP读板器(Molecular DevicesSpectramax 384 plus)中,测量405nm吸光度,利用0.011μM/cm的摩尔消光系数计算活性。
热稳定性测定:
将粗制上清液(100μl)加入到100μl 150mM NaAc缓冲液(pH4.5)中。将样品等分至2个MTP。一个MTP(初始板)在4℃孵育1小时,另一MTP(剩余板)在60℃孵育(Thermolab系统iEMS培养箱/摇床HT)1小时。剩余板在冰上冷却15分钟。利用下文描述的乙醇应用测定法测量两种平板的活性,具有下列改变:取作热稳定性测定的样品量是25μl,30mM NaAc缓冲液(pH4.0)的量是35μl。
如下计算热稳定性为残余活性百分比:
Figure GPA00001139245100501
在生长期后,就培养基中的剩余葡萄糖测试粗制上清液材料。如果发现剩余葡萄糖,就从初始活性和剩余活性的测量的吸光度值中减去该吸光度值。
在96孔微量滴定板用Bradford测定定量蛋白质:
试剂溶液是Bradford Quickstart工作溶液(BioRad cat#500-0205)。在新的96孔平底板中置入100μl的10kD-过滤的上清液。在每个孔中加入200μl试剂,在室温孵育5分钟。在MTP读板器(Molecular DevicesSpectramax 384 plus)中,测量595nm吸光度。根据牛血清白蛋白(BSA)(0-50μg/m1)标准曲线计算蛋白质浓度。
己糖激酶活性测定:
己糖激酶混合物:在使用前10-15分钟,向BoatIL容器葡萄糖HK R1(IL检测葡萄糖(HK)试剂盒,Instrument Laboratory#182507-40)中加入90ml水,轻柔混合。将85μl己糖激酶混合物加入到100μl的dH2O中。混合物中加入15μl样品,在黑暗室温下孵育5分钟。在MTP读板器中,读出340nm处的吸光度。根据葡萄糖(0-1mg/m1)标准曲线计算葡萄糖浓度。
乙醇应用测定条件:
为了制备8%储液:将8g可溶性玉米淀粉(Sigma#S4180)在室温下悬浮于40ml dH2O中。在250ml的烧瓶中向浆液中加入50ml煮沸的dH2O,煮5分钟。将淀粉溶液冷却至25℃,用dH2O调节体积至100ml。通过用100mMpH3.7的乙酸钠缓冲液稀释储液(1∶1),来制备4%(m/v)可溶性淀粉工作溶液。
对于筛选测定,在平底的96孔MTP中,用175μl的50mM NaAc缓冲液pH4.5稀释5μl粗制上清液。向120μl 4%可溶性玉米淀粉中加入60μl该稀释液,并在32℃ 900rpm(Thermolab系统iEMS培养箱/摇床HT)孵育2小时。加入90μl 4℃-冷却的终止溶液(800mM甘氨酸-NaOH缓冲液,pH10.0)来终止反应。样品置于冰上。在15℃,1118×g旋转沉降淀粉5分钟(SIGMA6K15),在上述己糖激酶活性测定中使用15μl上清液,来确定葡萄糖含量。
在生长期后,就培养基中的剩余葡萄糖测试粗制上清液材料。如果发现剩余葡萄糖,不计算由葡糖淀粉酶产生的葡萄糖的量。
增甜剂应用测定条件:
为了制备8%储液:将8g可溶性玉米淀粉(Sigma#S4180)在室温下悬浮于40ml水中。在250ml的烧瓶中向浆液中加入50ml煮沸的dH2O,煮5分钟。将淀粉溶液冷却至25℃,用dH2O调节体积至100ml。通过用100mMpH4.5的乙酸钠缓冲液1∶1稀释储液,来制备4%(m/v)可溶性淀粉工作溶液。
在新的96孔平底板中放置50微升80mM NaAc缓冲液(pH4.5)。每个孔加入120μl 4%可溶性玉米淀粉和5μl 10kD-过滤的上清液,在60℃孵育1小时。加入90μl 4℃冷却的终止溶液(800mM甘氨酸-NaOH缓冲液,pH10.0)来终止反应。样品置于冰上30分钟。在15℃,716rpm下旋转沉降淀粉5分钟(Sigma 6K15,离心),在上述己糖激酶活性测定中使用15μl上清液,来确定葡萄糖含量。
实施例1
pREP3Y-TrGA载体的构建
TrGA表达盒包括编码TrGA信号肽,前序列和成熟蛋白质的DNA序列(SEQ ID NO:4),所述成熟蛋白质包括催化结构域、接头区域和淀粉结合结构域,将所述表达盒克隆到pDONRTM201中,它是Gateway
Figure GPA00001139245100521
进入(Entry)载体(英杰生命科学公司(Invitrogen),Carlsbad,CA,USA)。通过Gateway
Figure GPA00001139245100522
LR重组反应将TrGA表达盒克隆到Gateway相容性目标载体pREP3Y-DEST(图3)中。
pRep3Y-TrGA表达载体(图3B)使TrGA蛋白质(SEQ ID NO:2)能够在粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中表达。
利用pDONR-TrGA进入载体(图2)作为模板,和表2中列举的引物,构建65个TrGA位点饱和诱变(SSM)文库。在实验中使用的诱变引物在下述位置均包含三联体DNA序列密码子NNS(N=A、C、T、G和S=C或G),苷酸所述位置对应于TrGA序列(SEQ ID NO:2)中要被突变的密码子,并且该位置允许随机掺入核苷酸。每个SSM文库的构建都始于两步PCR扩增,所述PCR扩增利用Gateway正向引物(pDONR201-FW)和特异的反向诱变引物(表3),和Gateway反向引物(pDONR201-RV)和特异的正向诱变引物(表2)(诱变引物的等价位置)。根据法恩酶公司(Finnzymes)提供的方案,PCR扩增反应(0.2μM引物,25个循环)使用Phusion高保真DNA聚合酶(法恩酶公司(Finnzymes OY),Espoo,Finland)。简而言之,在48μl新鲜的PCR反应溶液中,加入lμl(SEQ ID NO:1)都靶向相同密码子的两种特异PCR混合物的DNA片段,以及引物Gatewav Fw和GatewayRV(英杰生命科学公司(Invitrogen))并混合。该融合PCR扩增(22个循环)获得具有特异的随机突变的TrGA密码子,以及两端具有独特的Gateway重组位点的线性表达盒DNA片段。该DNA片段的纯化(ChargeSwitch
Figure GPA00001139245100531
PCR提纯,英杰生命科学公司(Invitrogen),CarlsbadUSA),和与pDONR201(英杰生命科学公司(Invitrogen))的BP重组反应(英杰生命科学公司(Invitrogen),Carlsbad,USA),产生了环状的多聚DNA(进入载体),其随后被转化至大肠杆菌Max efficiency DH5α(英杰生命科学公司(Invitrogen)),并放置于补充了50μg/mL卡那霉素的2xTY培养基中[Bacto胰蛋白胨(Difco)16g/L,Bacto酵母提取物(Difco)10g/L,NaCL 5g/L]。
表2.用于产生TrGA SSM文库的正向引物
引物 DNA序列从5’到3’  SEQID NO:
  pDONR201-FW TCGCGTTAACGCTAGCATGGATCTC  10
  D4F   TCTGTTGACNNSTTCATCAGCACCGAGACGC  11
  F5F   TCTGTTGACGACNNSATCAGCACCGAGACGCCTA  12
  I12F   ATCAGCACCGAGACGCCTNNSGCACTGAACAATCTTCTTT  13
  D24F   CTTTGCAATGTTGGTCCTNNSGGATGCCGTGCATTCGGCA  14
  F29F   CCTGATGGATGCCGTGCANNSGGCACATCAGCTGGTGCGG  15
  I43F   ATTGCATCTCCCAGCACANNSGACCCGGACTACTATTACA  16
  D44F   GCATCTCCCAGCACAATTNNSCCGGACTACTATTACATGT  17
  P45F   TCTCCCAGCACAATTGACNNSGACTACTATTACATGTGGA  18
  D46F   CCCAGCACAATTGACCCGNNSTACTATTACATGTGGACGC  19
  Y47F   AGCACAATTGACCCGGACNNSTATTACATGTGGACGCGAG  20
  Y49F   ATTGACCCGGACTACTATNNSATGTGGACGCGAGATAGCG  21
引物 DNA序列从5’到3’  SEQID NO:
  W51F   CCGGACTACTATTACATGNNSACGCGAGATAGCGCTCTTG  22
  Y70F   GACCGCTTCACCGAAACGNNSGATGCGGGCCTGCAGCGCC  23
  Q75F   ACGTACGATGCGGGCCTGNNSCGCCGCATCGAGCAGTACA  24
  R76F   TACGATGCGGGCCTGCAGNNSCGCATCGAGCAGTACATTA  25
  P94F   CTCCAGGGCCTCTCTAACNNSTCGGGCTCCCTCGCGGACG  26
  D100F   CCCTCGGGCTCCCTCGCGNNSGGCTCTGGTCTCGGCGAGC  27
  K114F   AAGTTTGAGTTGACCCTGNNSCCTTTCACCGGCAACTGGG  28
  F116F   GAGTTGACCCTGAAGCCTNNSACCGGCAACTGGGGTCGAC  29
  N119F   CTGAAGCCTTTCACCGGCNNSTGGGGTCGACCGCAGCGGG  30
  R122F   TTCACCGGCAACTGGGGTNNSCCGCAGCGGGATGGCCCAG  31
  R125F   AACTGGGGTCGACCGCAGNNSGATGGCCCAGCTCTGCGAG  32
  N146F   AAGTGGCTCATCAACAACNNSTATCAGTCGACTGTGTCCA  33
引物 DNA序列从5’到3’  SEQID NO:
  Q148F   CTCATCAACAACAACTATNNSTCGACTGTGTCCAACGTCA  34
引物 DNA序列从5’到3’  SEQID NO:
  Y169F   CTCAACTATGTTGCCCAGNNSTGGAACCAAACCGGCTTTG  35
  Q172F   GTTGCCCAGTACTGGAACNNSACCGGCTTTGACCTCTGGG  36
  F175F   TACTGGAACCAAACCGGCNNSGACCTCTGGGAAGAAGTCA  37
  W178F   CAAACCGGCTTTGACCTCNNSGAAGAAGTCAATGGGAGCT  38
  E180F   GGCTTTGACCTCTGGGAANNSGTCAATGGGAGCTCATTCT  39
  V181F   TTTGACCTCTGGGAAGAANNSAATGGGAGCTCATTCTTTA  40
  Q208F   CTTGCTGCCACTCTTGGCNNSTCGGGAAGCGCTTATTCAT  41
  S211F   ACTCTTGGCCAGTCGGGANNSGCTTATTCATCTGTTGCTC  42
  W228F   TGCTTTCTCCAACGATTCNNSGTGTCGTCTGGTGGATACG  43
  N242F   GACTCCAACATCAACACCNNSGAGGGCAGGACTGGCAAGG  44
引物 DNA序列从5’到3’  SEQID NO:
  E243F   TCCAACATCAACACCAACNNSGGCAGGACTGGCAAGGATG  45
  R245F   ATCAACACCAACGAGGGCNNSACTGGCAAGGATGTCAACT  46
  I292F   GTCGACTCCTTCCGCTCCNNSTACGGCGTGAACAAGGGCA  47
  G294F   TCCTTCCGCTCCATCTACNNSGTGAACAAGGGCATTCCTG  48
  K297F   TCCATCTACGGCGTGAACNNSGGCATTCCTGCCGGTGCTG  49
  R309F   GCTGCCGTCGCCATTGGCNNSTATGCAGAGGATGTGTACT  50
  Y310F   GCCGTCGCCATTGGCCGGNNSGCAGAGGATGTGTACTACA  51
  D313F   ATTGGCCGGTATGCAGAGNNSGTGTACTACAACGGCAACC  52
  V314F   GGCCGGTATGCAGAGGATNNSTACTACAACGGCAACCCTT  53
  Y315F   CGGTATGCAGAGGATGTGNNSTACAACGGCAACCCTTGGT  54
  Y316F   TATGCAGAGGATGTGTACNNSAACGGCAACCCTTGGTATC  55
  N317F   GCAGAGGATGTGTACTACNNSGGCAACCCTTGGTATCTTG  56
引物 DNA序列从5’到3’  SEQID NO:
  W321F   TACTACAACGGCAACCCTNNSTATCTTGCTACATTTGCTG  57
  K340F   GATGCCATCTACGTCTGGNNSAAGACGGGCTCCATCACGG  58
  K341F   GCCATCTACGTCTGGAAGNNSACGGGCTCCATCACGGTGA  59
  T350F   TCCATCACGGTGACCGCCNNSTCCCTGGCCTTCTTCCAGG  60
  Q356F   ACCTCCCTGGCCTTCTTCNNSGAGCTTGTTCCTGGCGTGA  61
  T363F   GAGCTTGTTCCTGGCGTGNNSGCCGGGACCTACTCCAGCA  62
  S368F   GTGACGGCCGGGACCTACNNSAGCAGCTCTTCGACCTTTA  63
引物 DNA序列从5’到3’  SEQID N0:
  S369F   ACGGCCGGGACCTACTCCNNSAGCTCTTCGACCTTTACCA  64
  N376F   AGCTCTTCGACCTTTACCNNSATCATCAACGCCGTCTCGA  65
  Y395F   CTCAGCGAGGCTGCCAAGNNSGTCCCCGCCGACGGTTCGC  66
  A398F   GCTGCCAAGTACGTCCCCNNSGACGGTTCGCTGGCCGAGC  67
引物 DNA序列从5’到3’  SEQID NO:
  S401F   TACGTCCCCGCCGACGGTNNSCTGGCCGAGCAGTTTGACC  68
  R408F   CTGGCCGAGCAGTTTGACNNSAACAGCGGCACTCCGCTGT  69
  N409F   GCCGAGCAGTTTGACCGCNNSAGCGGCACTCCGCTGTCTG  70
  T412F   TTTGACCGCAACAGCGGCNNSCCGCTGTCTGCGCTTCACC  71
  H418F   ACTCCGCTGTCTGCGCTTNNSCTGACGTGGTCGTACGCCT  72
  W421F   TCTGCGCTTCACCTGACGNNSTCGTACGCCTCGTTCTTGA  73
  R433F   TTGACAGCCACGGCCCGTNNSGCTGGCATCGTGCCCCCCT  74
  I436F   ACGGCCCGTCGGGCTGGCNNSGTGCCCCCCTCGTGGGCCA  75
  S451F   AGCGCTAGCACGATCCCCNNSACGTGCTCCGGCGCGTCCG  76
表3:用于产生TrGA SSM文库的引物
引物 DNA序列从5’到3’   SEQ IDNO:
  pDON201-RV GTAACATCAGAGATTTTGAGACAC   77
  D4R   GCGTCTCGGTGCTGATGAASNNGTCAACAGA   78
  F5R   TAGGCGTCTCGGTGCTGATSNNGTCGTCAACAGA   79
  I12R   AAAGAAGATTGTTCAGTGCSNNAGGCGTCTCGGTGCTGAT   80
  D24R   TGCCGAATGCACGGCATCCSNNAGGACCAACATTGCAAAG   81
  F29R   CCGCACCAGCTGATGTGCCSNNTGCACGGCATCCATCAGG   82
  I43R   TGTAATAGTAGTCCGGGTCSNNTGTGCTGGGAGATGCAAT   83
  D44R   ACATGTAATAGTAGTCCGGSNNAATTGTGCTGGGAGATGC   84
  P45R   TCCACATGTAATAGTAGTCSNNGTCAATTGTGCTGGGAGA   85
  D46R   GCGTCCACATGTAATAGTASNNCGGGTCAATTGTGCTGGG   86
  Y47R   CTCGCGTCCACATGTAATASNNGTCCGGGTCAATTGTGCT   87
  Y49R   CGCTATCTCGCGTCCACATSNNATAGTAGTCCGGGTCAAT   88
引物 DNA序列从5’到3’   SEQ IDNO:
  W51R   CAAGAGCGCTATCTCGCGTSNNCATGTAATAGTAGTCCGG   89
  Y70R   GGCGCTGCAGGCCCGCATCSNNCGTTTCGGTGAAGCGGTC   90
  Q75R   TGTACTGCTCGATGCGGCGSNNCAGGCCCGCATCGTACGT   91
  R76R   TAATGTACTGCTCGATGCGSNNCTGCAGGCCCGCATCGTA   92
  P94R   CGTCCGCGAGGGAGCCCGASNNGTTAGAGAGGCCCTGGAG   93
  D100R   GCTCGCCGAGACCAGAGCCSNNCGCGAGGGAGCCCGAGGG   94
  K114R   CCCAGTTGCCGGTGAAAGGSNNCAGGGTCAACTCAAACTT   95
  F116R   GTCGACCCCAGTTGCCGGTSNNAGGCTTCAGGGTCAACTC   .96
引物 DNA序列从5’到3’   SEQ IDNO:
  N119R   CCCGCTGCGGTCGACCCCASNNGCCGGTGAAAGGCTTCAG   97
  R122R   CTGGGCCATCCCGCTGCGGSNNACCCCAGTTGCCGGTGAA   98
  R125R   CTCGCAGAGCTGGGCCATCSNNCTGCGGTCGACCCCAGTT   99
  N146R   TGGACACAGTCGACTGATASNNGTTGTTGATGAGCCACTT   100
  Q148R   TGACGTTGGACACAGTCGASNNATAGTTGTTGTTGATGAG   101
  Y169R   CAAAGCCGGTTTGGTTCCASNNCTGGGCAACATAGTTGAG   102
  Q172R   CCCAGAGGTCAAAGCCGGTSNNGTTCCAGTACTGGGCAAC   103
  F175R   TGACTTCTTCCCAGAGGTCSNNGCCGGTTTGGTTCCAGTA   104
  W178R   AGCTCCCATTGACTTCTTCSNNGAGGTCAAAGCCGGTTTG   105
  E180R   AGAATGAGCTCCCATTGACSNNTTCCCAGAGGTCAAAGCC   106
  V181R   TAAAGAATGAGCTCCCATTSNNTTCTTCCCAGAGGTCAAA   107
  Q208R   ATGAATAAGCGCTTCCCGASNNGCCAAGAGTGGCAGCAAG   108
  S211R   GAGCAACAGATGAATAAGCSNNTCCCGACTGGCCAAGAGT   109
  W228R   CGTATCCACCAGACGACACSNNGAATCGTTGGAGAAAGCA   110
  N242R   CCTTGCCAGTCCTGCCCTCSNNGGTGTTGATGTTGGAGTC   111
  E243R   CATCCTTGCCAGTCCTGCCSNNGTTGGTGTTGATGTTGGA   112
  R245R   AGTTGACATCCTTGCCAGTSNNGCCCTCGTTGGTGTTGAT   113
  I292R   TGCCCTTGTTCACGCCGTASNNGGAGCGGAAGGAGTCGAC   114
  G294R   CAGGAATGCCCTTGTTCACSNNGTAGATGGAGCGGAAGGA   115
  K297R   CAGCACCGGCAGGAATGCCSNNGTTCACGCCGTAGATGGA   116
  R309R   AGTACACATCCTCTGCATASNNGCCAATGGCGACGGCAGC   117
引物 DNA序列从5’到3’   SEQ IDNO:
引物 DNA序列从5’到3’   SEQ IDNO:
  Y310R   TGTAGTACACATCCTCTGCSNNCCGGCCAATGGCGACGGC   118
  D313R   GGTTGCCGTTGTAGTACACSNNCTCTGCATACCGGCCAAT   119
  V314R   AAGGGTTGCCGTTGTAGTASNNATCCTCTGCATACCGGCC   120
  Y315R   ACCAAGGGTTGCCGTTGTASNNCACATCCTCTGCATACCG   121
  Y316R   GATACCAAGGGTTGCCGTTSNNGTACACATCCTCTGCATA   122
  N317R   CAAGATACCAAGGGTTGCCSNNGTAGTACACATCCTCTGC   123
  W321R   CAGCAAATGTAGCAAGATASNNAGGGTTGCCGTTGTAGTA   124
  K340R   CCGTGATGGAGCCCGTCTTSNNCCAGACGTAGATGGCATC   125
  K341R   TCACCGTGATGGAGCCCGTSNNCTTCCAGACGTAGATGGC   126
  T350R   CCTGGAAGAAGGCCAGGGASNNGGCGGTCACCGTGATGGA   127
  Q356R   TCACGCCAGGAACAAGCTCSNNGAAGAAGGCCAGGGAGGT   128
  T363R   TGCTGGAGTAGGTCCCGGCSNNCACGCCAGGAACAAGCTC   129
  S368R   TAAAGGTCGAAGAGCTGCTSNNGTAGGTCCCGGCCGTCAC   130
  S369R   TGGTAAAGGTCGAAGAGCTSNNGGAGTAGGTCCCGGCCGT   131
  N376R   TCGAGACGGCGTTGATGATSNNGGTAAAGGTCGAAGAGCT   132
  Y395R   GCGAACCGTCGGCGGGGACSNNCTTGGCAGCCTCGCTGAG   133
  A398R   GCTCGGCCAGCGAACCGTCSNNGGGGACGTACTTGGCAGC   134
  S401R   GGTCAAACTGCTCGGCCAGSNNACCGTCGGCGGGGACGTA   135
  R408R   ACAGCGGAGTGCCGCTGTTSNNGTCAAACTGCTCGGCCAG   136
  N409R   CAGACAGCGGAGTGCCGCTSNNGCGGTCAAACTGCTCGGC   137
引物 DNA序列从5’到3’   SEQ IDNO:
  T412R   GGTGAAGCGCAGACAGCGGSNNGCCGCTGTTGCGGTCAAA   138
  H418R   AGGCGTACGACCACGTCAGSNNAAGCGCAGACAGCGGAGT   139
  W421R   TCAAGAACGAGGCGTACGASNNCGTCAGGTGAAGCGCAGA   140
  R433R   AGGGGGGCACGATGCCAGCSNNACGGGCCGTGGCTGTCAA   141
  I436R   TGGCCCACGAGGGGGGCACSNNGCCAGCCCGACGGGCCGT   142
  S451R   CGGACGCGCCGGAGCACGTSNNGGGGATCGTGCTAGCGCT   143
对于每个文库,在37℃孵育过夜后,将克隆重悬在PSS中合并菌落。从合并的大肠杆菌转化体中,利用标准技术分离总质粒(强基因公司(Qiagen))。简而言之,将1μl粒溶液加入到1μl的pRep3Y目标载体(图1A)溶液中,并根据英杰生命科学公司(Invitrogen)提供的方案,加入LR CLONASETM II酶混合物。产生了环状多聚DNA,如供应商所述将其转化到大肠杆菌Max EfficiencyDH5α中。
在37℃孵育过夜后,从具有100μg/ml青霉素的2xTY琼脂平板上挑取每个文库96个单个菌落,并在MTP中37℃生长24小时,所述MTP含有具100μg/ml青霉素的200μL 2xTY培养基。培养物用于序列分析(BaseClearB.V.,Leiden,Netherlands)。
文库数从1至65不等,具有额外的涉及随机突变的TrGA序列的密码子。在选择后,每个文库都包含最多19个TrGA变体。根据生产商的指导(Zymo Research,Orange CA.USA)将这些变体单独转移到粟酒裂殖酵母中。
将粟酒裂殖酵母转化体放置在选择培养基(EMM琼脂,Qbiogene,Irvine,USA目录号4110-232)上,在28℃孵育4天。通过在EMM琼脂上划线分离菌落,从转化平板上纯化转化体。
实施例2
生长条件和样品预处理的描述
将粟酒裂殖酵母转化体接种在含有选择培养基(2xEMM-C)的96孔微量滴定板(MTP)中[64.4g/L EMM培养基(Qbiogene目录号4110-032),0.62g/L完全补充混合物(Complete Supplement Mixture)(CSM-HIS-LEU-TRP,Qbiogene,目录号4530-122)],在28℃孵育过夜。从孵育过夜的微量滴定板中,将200μl生长的粟酒裂殖酵母培养物接种在100ml摇瓶中的20ml的2xEMM-C液体培养基中,在26℃在Multitron振荡孵育器(Infors AG,Bottmingen,Switzerland)中280rpm下孵育4天。从生长培养物中取样2ml的粟酒裂殖酵母培养物,在14,000rpm(Sigma)离心5分钟。将上清液转移至10 kD Vivaspin 500 HT过滤装置中(VivaScience AG,Hannover,Germany),在1000g离心25分钟。将存留物用补充了0.015%Tween-80的50mM NaAc pH4.5稀释至初始体积。该溶液用于不同的测定。
实施例3
4种TrGA变体的组合文库的构建
(A)进行实验构建携带下列单位点突变组合的TrGA变体:Q172F;Q208N;S211R和V314H。变体的概述显示如下:
a)Q172F;Q208N    
b)Q172F;S211R
c)Q172F;V314H
d)Q208N;S211R
e)Q208N V314H
f)S211R;V314H
g)Q172F;Q208N;S211R
h)Q172F;Q208N;V314H
i)Q172F;S211R;V314H
j)Q208N;S211R;V314H
k)Q172F;Q208N;S211R;V314H
使用Quikchange多位点定向诱变(QCMS)试剂盒(Stratagene)构建文库。用于创建文库的5’磷酸化引物显示在表4中。通过使用HPLC、PAGE或任何其它类型的纯化引物(Invitrogen),可以获得全长引物掺入以及引物导致错误显著降低的最佳结果。
表4:用于构建选定的组合变体的引物
引物 序列   SEQIDNO:
  I43R   GCATCTCCCAGCACACGAGACCCGGACTACTAT   144
  I43Y   GCATCTCCCAGCACATACGACCCGGACTACTAT   145
  R76L   GATGCGGGCCTGCAGCTGCGCATCGAGCAGTAC   146
  N119T   CTGAAGCCTTTCACCGGCACCTGGGGTCGACCGCAGCGGG   147
  N119Y   TGAAGCCTTTCACCGGCTACTGGGGTCGACCGCAGCGGG   148
  N119D   CTGAAGCCTTTCACCGGCGACTGGGGTCGACCGCAGCGGG   149
  N146   AGTGGCTCATCAACAACGASTATCAGTCGACTGTGT   150
  N146T   AGTGGCTCATCAACAACACCTATCAGTCGACTGTGT   151
  N146W   GTGGCTCATCAACAATGGTATCAGTCGACTGTGT   152
  N146L   AGTGGCTCATCAACAACCTGTATCAGTCGACTGTGT   153
  N146S   AGTGGCTCATCAACAACTCCTATCAGTCGACTGTGT   154
  Q172D/E   TTGCCCAGTACTGGAACGASACCGGCTTTGACCTCTGG   155
  Q172V/L   TTGCCCAGTACTGGAACSTGACCGGCTTTGACCTCTGG   156
  Q172T   TTGCCCAGTACTGGAACACCACCGGCTTTGACCTCTGG   157
  Q172R   TTGCCCAGTACTGGAACCGAACCGGCTTTGACCTCTGG   158
  Q172C   TTGCCCAGTACTGGAACTGCACCGGCTTTGACCTCTGG   159
利用Stratagene的QCMS试剂盒,使用模板质粒pDONR-TrGA(图2)构建组合文库。根据供应商描述,用反应中使用的改良的引物浓度,构建文库。特别地,将4μl pDONR-TrGA(25-50ng)与11μl无菌蒸馏水、1.5μl的dNTP、2.5μl的10×QCMS-缓冲液、1μl酶混合物和1μl各种突变引物混合物(在每种反应中提供总共100ng的引物)混合。PCR条件是在MJResearch热循环仪中,使用薄壁的0.2ml PCR管,在95℃下1分钟,然后进行30个循环的在95℃下1分钟、55℃下1分钟和65℃下6分钟。用来自QCMS试剂盒的1μl的Dpn1在37℃孵育过夜,消化反应产物。使用PCR纯化试剂盒(Qiagen)进行样品纯化,并在37℃用Dpnl(Stratagene)进行1小时的第二轮消化。
将反应混合物转化到大肠杆菌Max efficiency DH5α(Invitrogen)中,并在选择性琼脂(补充了50μg卡那霉素/mL的2xTY)上铺板。在37℃孵育过夜后,挑取96个单个菌落进行序列分析(BaseClear B.V.,Leiden,Netherlands)。克隆组合变体,并如下述和WO06/060062所述,在里氏木霉宿主菌株中表达。
(B)还通过Geneart公司(Regensburg,Germany)合成生产了其它6个组合文库(表5),测试热稳定性,以及在如本文所述的乙醇和增甜剂应用测定中测试。
表5:重组文库
  1   D24E,L/I43F,R/D44H,N/F175H/V181K,L/V314D,H,K/T363R
  2   D24L,W,Y/Q208F/I292F,L,N,V/G294A,I,Q/K297A/Y310F,Q,R
  1   D24E,L/I43F,R/D44H,N/F175H/V181K,L/V314D,H,K/T363R
  3   V181F,K,L/E243A,N,M,R,Y/I292F,L,N,V/K297A,D,H,M,N,Q/N317H/Y395Q,R
  4   D24E,L,Y/V181F,K,L/Q208C/F/G294A,I,Q/T363R/N376Q/N409K,W
  5   D24E,L,Y/V181F,K,L/I292F,L,N,V/G294A,I,Q/E243A,M,N,R,Y/N409K,W
  6   I43R/E243A,M,N,R,Y/I292F,L,N,V/G294A/K297A,D,H,M,N,Q,S,R,W,Y
实施例4
具有改善的热稳定性的变体
在所述条件下的亲本TrGA分子具有在15和44%之间的残留活性(日常变动)。基于同一批次的TrGA热稳定性计算性能指数。性能指数是商值PI=(变体残留活性)/(TrGA残留活性)。性能指数>1表示改善的稳定性。具有热稳定性的性能指数大于1.0的变体显示在下表6中。
表6:热稳定性筛选
变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5 变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5
  D4P   1.05   S368Q   1.10
  I12E   1.09   S368R   1.14
  I12Y   1.40   S368T   1.15
  D24L   1.09   S368W   1.16
  D24W   1.13   S369A   1.22
  D24Y   1.03   S369D   1.05
  I43R   1.28   S369F   1.20
变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5 变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5
变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5 变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5
  D44N   1.06   S369G   1.05
  D44Q   1.10   S369K   1.12
  Q75N   1.09   S369L   1.49
  R76K   1.03   S369M   1.36
  N146D   1.20   S369N   1.25
  N146E   1.24   S369P   1.16
  N146L   1.10   S369R   1.12
  N146V   1.28   S369T   1.25
  N146W   1.17   N376F   1.12
  Q148D   1.02   N376G   1.26
  F175I   1.02   N376H   1.21
  F175Y   1.06   N376K   1.40
  E180A   1.41   N376L   1.34
  E180D   1.02   N376P   1.05
  E180G   1.13   N376Q   1.11
  E180I   1.41   N376S   1.09
  E180L   1.38   N376V   1.19
变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5 变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5
  E180M   1.10   N376W   1.12
  E180N   1.27   N376Y   1.05
  E180Q   1.72   Y395A   1.05
  E180R   1.59   Y395C   1.02
  E180V   1.08   Y395F   1.03
  E180W   1.30   Y395G   1.13
  E180Y   1.31   Y395H   1.10
  V181I   1.20   Y395L   1.50
  V181K   1.12   Y395N   1.20
  V181L   1.06   Y395Q   1.18
  V181Q   1.09   Y395R   1.14
  V181R   1.07   Y395S   1.13
变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5 变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5
  Q208F   1.06   Y395T   1.04
  Q208T   1.17   A398C   1.10
  Q208V   1.15   A398D   1.39
  S211D   1.10   A398F   1.05
  S211E   1.02   A398G   1.17
变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5 变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5
  S211I   1.31   A398H   1.33
  S211M   1.90   A398I   1.41
  E243A   1.19   A398K   1.47
  E243H   1.04   A398L   1.44
  E243M   1.53   A398N   1.23
  E243N   1.35   A398P   1.38
  E243P   1.06   A398Q   1.43
  E243R   1.21   A398R   1.59
  E243S   1.09   A398S   1.14
  E243T   1.48   A398T   1.25
  E243Y   1.43   A398V   1.29
  I292F   1.17   A398W   1.45
  I292L   1.10   A398Y   1.38
  I292N   1.31   S401A   1.12
  I292V   1.02   S401E   1.08
  G294A   1.30   S401I   1.05
  G294C   1.41   S401N   1.12
  G294D   1.31   S401P   1.15
  G294E   1.34   S401R   1.25
变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5 变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5
  G294H   1.17   S401T   1.26
  G294I   2.15   S401V   1.18
  G294L   2.01   R408A   1.14
  G294P   1.13   R408E   1.41
  G294Q   1.91   R408G   1.15
变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5 变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5
  G294R   1.34   R408H   1.12
  G294V   1.10   R408I   1.19
  K297A   1.47   R408K   1.80
  K297C   1.10   R408L   1.55
  K297D   1.50   R408N   1.09
  K297F   1.24   R408Q   1.23
  K297G   1.25   R408S   1.17
  K297H   1.63   N409A   1.25
  K297L   1.62   N409C   1.18
  K297M   1.62   N409D   1.21
  K297N   1.87   N409E   1.27
  K297Q   1.82   N409F   1.32
变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5 变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5
  K297R   1.29   N409G   1.14
  K297S   1.22   N409H   1.29
  K297T   1.33   N409I   1.56
  K297V   1.10   N409K   1.44
  K297W   1.85   N409L   1.57
  K297Y   1.71   N409M   1.17
  R309S   1.08   N409Q   1.03
  Y310C   1.06   N409R   1.29
  Y310F   1.35   N409V   1.11
  Y310L   1.11   N409W   1.58
  Y310Q   1.40   T412L   1.10
  Y310R   1.61   S451R   1.01
  Y315E   1.24
  Y315H   1.48
  Y315L   1.35
  Y315N   1.17
  Y315P   1.19
变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5 变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5
变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5 变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5
  Y315Q   1.43
  Y315T   1.34
  Y316D   1.06
  N317H   1.26
  N317Q   1.09
  K340H   1.02
  K340R   1.09
  K341I   1.10
  K341V   1.07
  T350G   1.08
  T350P   1.08
  T350S   1.33
  Q356L   1.20
  T363N   1.30
  S368C   1.12
  S368E   1.07
  S368F   1.16
变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5 变体   PI热稳定性,60℃,pH4.5
  S368H   1.26
  S368I   1.15
  S368L   1.33
  S368N   1.21
  S368P   1.05
实施例5
来自乙醇筛选测定的高性能变体
在乙醇筛选测定中利用上述测定来测试变体。表7显示了对与亲本TrGA PI相比,具有性能指数(PI)>1.0的变体进行筛选测定的结果。PI是比活性(活性/mg酶)的测量值。比活性的PI是“变体比活性/WT比活性”的商值。比活性的PI是1.0,并且具有PI>1.0的变体具有大于亲本TrGA的比活性。比活性是乙醇筛选测定测量的活性除以上述Bradford测定获得的结果。
表7:乙醇筛选
变体   P.I.32℃,pH 4 变体   P.I.32℃,pH 4
  D4A   1.07   K297W   1.70
  D4C   1.08   K297Y   1.80
  D4E   1.23   R309L   1.43
  D4L   1.34   Y310F   1.05
  D4R   1.18   Y310Q   1.16
变体   P.I.32℃,pH 4 变体   P.I.32℃,pH 4
  D4S   1.17   Y310R   1.24
  F5C   1.35   V314D   1.10
  I12L   1.19   V314F   1.04
  I12R   1.13   V314H   1.31
  D24E   1.60   V314K   1.08
  D24L   1.19   V314L   1.02
  D24W   1.03   V314N   1.05
  D24Y   1.14   V314R   1.06
  F29A   1.05   Y316R   1.42
  F29C   1.12   Y316W   1.05
  F29D   1.20   N317H   1.14
  F29E   1.05   N317K   1.02
  F29I   1.26   N317S   1.03
  F29L   1.42   N317T   1.23
  F29Q   1.01   K340D   1.33
  F29S   1.07   K340T   1.16
  F29V   1.06   K341D   1.04
  I43D   1.14   K341F   1.64
  I43F   1.33   K341G   1.64
变体   P.I.32℃,pH 4 变体   P.I.32℃,pH 4
  I43R   1.21   K341L   1.04
变体   P.I.32℃,pH 4 变体   P.I.32℃,pH 4
  I43Y   1.05   K341N   1.05
  D44E   1.37   K341S   1.06
  D44F   1.07   T350A   1.56
  D44G   1.03   T350D   1.04
  D44H   1.11   T350E   1.59
  D44K   1.09   T350H   1.03
  D44N   1.07   T350N   1.06
  D44S   1.08   T350Q   1.05
  D44Y   1.07   T350R   1.02
  Y70E   1.02   Q356D   1.69
  Y70G   1.06   Q356E   1.07
  Y70K   1.01   Q356H   1.03
  Y70M   1.36   Q356K   1.03
  Y70P   1.15   T363A   1.04
  Y70R   1.40   T363C   1.54
  Y70S   1.04   T363G   1.02
变体   P.I.32℃,pH 4 变体   P.I.32℃,pH 4
  Q75A   1.10   T363H   1.09
  Q75K   1.77   T363N   1.02
  R76K   1.06   T363R   1.61
  R76L   1.11   T363V   1.05
  R76M   1.13   T363W   1.08
  R76N   1.02   S368D   1.11
  R76T   1.04   S368F   1.08
  R76V   1.05   S368H   1.04
  R76W   1.02   S368L   1.07
  R76Y   1.05   S368M   1.03
  D100A   1.08   S368N   1.02
  D100I   1.14   S368W   1.24
  D100L   1.03   S369F   1.68
  D100M   1.12   S369M   1.04
变体   P.I.32℃,pH 4 变体   P.I.32℃,pH 4
  D100N   1.06   S369T   1.05
  D100P   1.09   N376G   1.05
变体   P.I.32℃,pH 4 变体   P.I.32℃,pH 4
  D100Q   1.14   N376H   1.10
  D100T   1.06   N376Q   1.16
  D100W   1.19   N376S   1.06
  D100Y   1.05   N376T   1.12
  N119E   1.02   N376V   1.64
  N119F   1.03   Y395A   1.02
  N119Y   1.28   Y395C   1.05
  N146C   1.11   Y395G   1.02
  N146E   1.02   Y395Q   1.63
  N146G   1.11   Y395R   1.20
  N146H   1.07   Y395S   1.09
  N146K   1.06   A398D   1.05
  Q148H   1.10   A398P   1.03
  Q148N   1.05   S401A   1.04
  Q148V   1.18   S401D   1.01
  Q148W   1.05   S401G   1.04
  Q148Y   1.16   S401N   1.02
  Y169D   1.18   S401V   1.06
  Y169F   1.10   N409K   1.30
变体   P.I.32℃,pH 4 变体   P.I.32℃,pH 4
  Y169H   1.05   N409L   1.04
  Y169R   1.02   N409W   1.31
  Q172E   1.08   T412A   1.04
  Q172G   1.05   T412G   1.06
  Q172R   1.22   T412K   1.05
  Q172S   1.03   R433Q   1.16
  F175C   1.18   I436A   1.32
  F175H   1.26   I436H   1.02
  F175T   1.28   I436T   1.03
变体   P.I.32℃,pH 4 变体   P.I.32℃,pH 4
  F175W   1.16   S451A   1.03
  F175Y   1.05   S451M   1.28
  V181F   1.28   S451T   1.09
  V181K   1.35   S451Y   1.03
  V181L   1.37
  V181R   1.01
  Q208A   1.22
变体   P.I.32℃,pH 4 变体   P.I.32℃,pH 4
  Q208C   1.17
  Q208F   1.12
  Q208H   1.02
  Q208I   1.02
  Q208L   1.32
  S211A   1.30
  S211E   1.30
  S211G   1.05
  S211L   1.04
  S211M   1.05
  S211R   1.34
  S211W   1.07
  S211Y   1.08
  E243A   1.23
  E243L   1.20
  E243M   1.26
  E243N   1.28
  E243R   1.31
变体   P.I.32℃,pH 4 变体   P.I.32℃,pH 4
  E243Y   1.25
  I292F   1.23
  I292H   1.04
  I292L   1.21
  I292N   1.27
变体   P.I.32℃,pH 4 变体   P.I.32℃,pH4
  I292R   1.02
  I292V   1.24
  G294A   1.91
  G294I   1.92
  G294Q   1.99
  K297A   1.82
  K297D   1.87
  K297H   1.79
  K297M   1.91
  K297N   1.87
  K297Q   1.85
  K297R   1.71
变体   P.I.32℃,pH 4 变体   P.I.32℃,pH 4
  K297S   1.72
实施例6
来自增甜剂筛选测定的高性能变体
在如上所述的增甜剂筛选测定中测试变体。表8显示了筛选测定的结果,其中显示了与亲本TrGA PI相比,具有性能指数(PI)>1.00的变体。PI是比活性(活性/mg酶)的测量值。比活性的PI是“变体比活性/WT比活性”的商值。比活性的PI是1.0,并且具有PI>1.0的变体具有大于亲本TrGA的比活性。
表8:增甜剂筛选
变体   P.I.60℃,pH 4.5 变体   P.I.60℃,pH 4.5
  D4E   1.09   G294Q   1.02
  D4L   1.03   K297A   1.04
  D4S   1.07   K297D   1.10
  D24E   1.45   K297Q   1.07
变体   P.I.60℃,pH 4.5 变体   P.I.60℃,pH 4.5
  D24L   1.31   V314D   1.22
  D24Y   1.01   V314H   1.85
  I43D   1.05   V314K   1.34
变体   P.I.60℃,pH 4.5 变体   P.I.60℃,pH 4.5
  I43F   1.31   V314L   1.13
  I43R   1.28   V314N   1.08
  D44E   1.09   V314R   1.20
  D44H   1.12   V314Y   1.05
  D44N   1.31   Y316R   1.20
  Y70F   1.26   N317H   1.25
  Y70L   1.22   N317K   1.03
  Q75K   1.12   K340D   1.21
  R76K   1.11   K340E   1.05
  R76M   1.03   K341D   1.08
  R76P   1.13   K341G   1.22
  R76T   1.11   K341L   1.08
  R76W   1.07   K341N   1.08
  D100Y   1.04   K341S   1.12
  N119E   1.12   T350H   1.03
  N119Y   1.01   T350L   1.04
  N146D   1.05   Q356D   1.31
  N146E   1.11   Q356E   1.04
  Q148D   1.02   Q356K   1.05
变体   P.I.60℃,pH 4.5 变体   P.I.60℃,pH 4.5
  Q148W   1.05   T363C   1.08
  Q172H   1.05   T363G   1.04
  Q172Y   1.03   T363N   1.02
  F175H   1.42   T363R   1.50
  F175Y   1.11   S368G   1.04
  V181A   1.10   S368M   1.03
  V181F   1.01   N376G   1.02
  V181K   1.43   N376Q   1.07
变体   P.I.60℃,pH 4.5 变体   P.I.60℃,pH 4.5
  V181L   1.42   Y395Q   1.01
  Q208C   1.08   A398H   1.03
  Q208F   1.20   A398S   1.03
  Q208H   1.11   S401A   1.01
  Q208L   1.03   N409K   1.19
  Q208N   1.03   N409T   1.02
  Q208S   1.06   N409W   1.01
  Q208T   1.12   T412G   1.06
  S211H   1.16   T412S   1.03
变体   P.I.60℃,pH 4.5 变体   P.I.60℃,pH 4.5
  S211M   1.16   I436D   1.02
  S211R   1.34   I436Q   1.06
  S211W   1.09   I436T   1.16
  E243A   1.06   S451D   1.01
  E243F   1.01   S451E   1.09
  E243N   1.05   S451F   1.02
  E243R   1.14   S451H   1.11
  E243S   1.09   S451T   1.11
  E243Y   1.07
  R245A   1.01
  I292N   1.04
  I292V   1.12
  G294A   1.06
实施例7
载体构建和转化里氏木霉宿主细胞
A.含有编码变体GA的多核苷酸的表达载体的构建
将包含SEQ ID NO:4的DNA序列的TrGA表达盒克隆到pDONRTM 201中,其是Gateway
Figure GPA00001139245100741
进入载体(Invitrogen,Carlsbad,CA)。通过Gateway
Figure GPA00001139245100742
LR重组反应,将TrGA表达盒克隆到Gateway相容性目标载体pTrex3g-DEST(图5)中,其公开于WO 06/060062中。pTrex3g-TrGA表达载体(图5)使得在里氏木霉宿主中能够表达TrGA蛋白质(SEQ IDNO:2)。构建载体,其包括编码至少下列变体的修饰的TrGA cDNA:(1)V314H;(2)S211R;(3)Q208N和(4)Q172F。
B.转化
使用粒子轰击,通过PDS-1000/Helium系统(BioRad目录号165-02257),将含有变体GA的表达载体转化到来自RL-P37(IA52)并且具有多种基因缺失(Δcbh1,Δcbh2,Δegl1,Δegl2)的里氏木霉宿主菌株中。方案概述如下,还参考WO 05/001036的实施例6和11。
制备来自里氏木霉菌株的孢子悬液(约5x108孢子/m1)。将100至200微升的孢子悬液涂布在基本培养基(MM)乙酰胺培养基的平板中央。MM乙酰胺培养基具有下列组成:0.6g/L乙酰胺;1.68g/L CsCl;20g/L葡萄糖;20g/L KH2PO4;0.6g/L CaCl2·2H2O;1ml/L 1000X痕量元素溶液;20g/L琼脂;和pH5.5;1ml/L 400X痕量元素盐溶液:柠檬酸175g/L,FeSO4·7H2O200g/L,ZnSO4·7H2O 16g/L,CuSO4·5H2O 3.2g/L,MnSO4·H2O 1.4g/L,H3BO3 0.8g/L。使孢子悬液在MM乙酰胺培养基的表面干燥。
按生产商的说明进行转化。简而言之,将60mg的M10钨颗粒置于微离心管中。加入1mL乙醇,静置15分钟。颗粒在15,000rpm离心15秒。去除乙醇,在加入1mL的50%(v/v)无菌甘油前,用无菌dH2O洗涤颗粒3次。将25μl钨微粒悬液置于微离心管中。当持续旋转时,加入下列成分:0.5-5μl(100-200ng/μl)质粒DNA,25μl的2.5M CaCl2和10μl的0.1M亚精胺。颗粒离心3秒。去除上清液,用200μl的70%(v/v)乙醇洗涤颗粒,离心3秒。去除上清液,加入24μl 100%乙醇,吸液混合,将管置于超声波浴中,移去8μl颗粒的等分试样,将其放在干燥器中的巨载体盘中央。一旦钨/DNA悬液干燥,就将微载体盘与具有孢子的MM乙酰胺平板一起放于轰击室中,根据生产商的指导实施轰击过程。在用钨/DNA颗粒轰击平板孢子后,在28℃孵育平板。在4天后,将转化的茵落挑取到MM乙酰胺的新鲜平板上(
Figure GPA00001139245100751
等人,(1987)Gene 61:155-164)。
C.证实在转化细胞中表达的变体TrGA的GA活性
在MM乙酰胺平板上生长5天后,将表现出稳定形态的转化体接种到含有30ml Proflo培养基的250ml摇瓶中。Proflo培养基含有:30g/L α-乳糖;6.5g/L (NH4)2SO4;2g/L KH2PO4;0.3g/L MgSO4·7H2O;0.2g/LCaCl2·2H2O;1ml/L 400X痕量元素盐溶液:柠檬酸175g/L,FeSO4·7H2O200g/L,ZnSO4·7H2O 16g/L,CuSO4·5H2O 3.2g/L,MnSO4·H2O 1.4g/L,H3BO3 0.8g/L;2ml/L 10% Tween 80;22.5g/L ProFlo棉籽粉(Traders蛋白质公司,Memphis,TN);0.72g/L CaCO3。在28℃和140rpm下生长2天后,将10%的Proflo培养物转移到含有30ml乳糖确定成分培养基(LactoseDefined Media)的250ml摇瓶中。乳糖确定成分培养基的组成如下:5g/L(NH4)2SO4;33g/L 1,4-哌嗪双(丙磺酸)缓冲液;9g/L酪蛋白氨基酸;4.5g/LKH2PO4;1.0g/L MgSO4·7H2O;5ml/L Mazu DF60-P消泡剂(MazurChemicals,IL);1000X痕量元素溶液;pH5.5;在灭菌后向培养基加入40ml/L的40%(w/v)乳糖溶液。乳糖确定成分培养基摇瓶在28℃,140rpm下孵育4-5天。
将培养上清液的样品与含有还原剂的合适体积的2x上样缓冲液混合。通过离心去除菌丝体,分析上清液的总蛋白(BCA蛋白质测定试剂盒,Pierce公司目录号23225)。
使用pNPG作为底物(Sigma N-1377),利用对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)测定测量GA活性。在该测定中,测量了葡糖淀粉酶催化对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)水解为葡萄糖和对硝基酚的能力。在碱性pH下,硝基酚形成黄色,这与葡糖淀粉酶活性成比例,在405nm下监测,并与测量为GAU的酶标比较(Elder,M.T.和Montgomery R.S.,Glucoamylase activity in industrial enzyme preparations usingcolorimetric enzymatic method,Journal 0f AOAC International,卷78(2),1995)。一个GAU被定义为产生1gm还原糖的酶量,其是按照pH4.2和60℃每小时从可溶性淀粉底物产生的葡萄糖(4% ds)而被计算的。
在NuPAGE
Figure GPA00001139245100761
Novex 10% Bis-Tris Gel上,使用MES SDS运行缓冲液(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA),通过PAGE电泳确定蛋白质谱。
实施例8
选定变体对可溶性淀粉的小规模应用测试
表达单个变体a)V314H、b)S211R、c)Q172F和d)Q208N的里氏木霉宿主菌株,在34℃、pH3.5下,在补料分批的14L发酵罐中的营养培养基中生长,所述营养培养基包括葡萄糖(Cerelose DE99),KH2PO4,MgSO4·7H2O,(NH4)2SO4,CaCl2·2H2O,痕量元素和Mazu消泡剂(DF6000K)。在耗尽葡萄糖后,将生长温度和pH分别调至28℃和4.0。通过过滤去除细胞材料,收集培养上清液,浓缩至含有大于90%的葡糖淀粉酶(作为总蛋白)。
确定在pH4.3,32℃和60℃下,在可溶性马铃薯淀粉上葡萄糖生产的多种动力学性质,并与野生型TrGA比较。与野生型(TrGA)相比,四个变体的每一个都表现出增加的Vmax(μM葡萄糖/秒)值,提示升高的催化速率(kcat(sec-1))。图6显示了每个测试温度下两个重复的Vmax
实施例9
确定变体EtOH生产性能的方法
利用新型小规模乙醇应用测试,对鉴定为比亲本TrGA具有更高性能指数的变体(参见表7/8)实施筛选的验证。选择自点评估(site evaluation)和组合文库(表9)的24个变体,将它们直接转化进里氏木霉中用于大规模表达和测试。利用差示扫描热量测定法(如下文描述的DSC分析)测试变体的热解折叠,利用新型的次级小规模乙醇应用测定来测试变体性能。方法包括两步:1)将变体注射至阴离子交换柱,精确的确定蛋白质浓度;和2)用三种不同的TrGA浓度(0.3-0.15-0.075g/28g ds)滴定变体,从而计算它们相对于野生型分子的乙醇生产性能。
表9:组合变体列表
Figure GPA00001139245100781
蛋白质纯化和确定
利用AKTA探索100 FPLC系统(Amersham Biosciences,Piscataway,NJ)纯化粗酶制品。将β-环糊精(Sigma-Aldrich,Zwijndrecht,TheNetherlands;85.608-8)偶联到环氧-活化的琼脂糖珠子(GE Healthcare,Diegem,Belgium;17-0480-01)上。用柱捕获酶制品中的葡糖淀粉酶。使用含有10mM α-环糊精(Sigma,28705)的25mM Tris缓冲液,pH7.5或50mM乙酸钠缓冲液,pH4.3,从珠子上洗脱酶。通过SDS-PAGE分析纯化的样品。为了精确确定变体的蛋白质浓度,开发了基于FPLC的蛋白质测定方法。首先利用标准的Bradford方案(Bio-Rad cat#500-0205)确定纯化的标记TrGA分子的蛋白质浓度。然后,将纯化的样品注射到ResourceQ 1ml柱(GE Healthcare)上,用含有500mM NaCl的25mM Tris pH缓冲液洗脱酶。确定峰面积,相对于具有已知浓度的TrGA标准的峰面积,计算蛋白质浓度。
小规模EtOH应用
表10总结了通过不同组合变体的乙醇和糖(DP1,DP2,DP>3)的产量。获得玉米醪液液化物的样品,并利用稀釜馏物稀释至26% DS。利用4N硫酸将浆液的pH调至pH4.3。将100g醪液等分试样置于32℃水浴中,使其平衡。在加入100μl 400ppm尿素后,向每个玉米醪液样品中加入1ml纯化的变体TrGA酶样品(150μg/ml)或纯化的TrGA(300、150、75μg/ml)。最后,向每个样品中加入333μl的在45ml DI水溶液中经过30分钟水合的15g RedStar Red酵母(Lesaffre酵母公司(Lesaffre yeast Corp)Milwaukee,WI)。在5、21、28、48和52小时取样,利用Aminex HPX-87H柱9(Bio-Rad)进行HPLC分析。
乙醇和碳水化合物测定
2ml Eppendorf离心管中装入发酵醪,在冰上冷却10分钟。样品在14,000×g离心3分钟,将500μl的上清液转移到含有50μl杀伤溶液(1.1N硫酸)的试管中,静置5分钟。向试管中加入5.0ml的水,然后过滤到0.22μm过滤平板(多屏,Millipore,Amsterdam,the Netherlands)中,运行HPLC。柱温:60℃;移动相:0.01N硫酸;流速0.6ml/分钟;检测器:RI;注射体积:20μl。柱基于电荷和分子量分离分子;DP1(单糖);DP2(二糖);DP3(三糖);DP>3(具有聚合度大于3的寡糖);琥珀酸;乳酸;甘油;甲醇;乙醇。
DSC分析
利用差示扫描热量测定法(DSC)测定纯化的酶样品(0.2-0.4mg/ml)的熔融温度。
表10.乙醇和糖类的生产
表11表示了0.15mg剂量的变体的终乙醇产量和性能。性能是通过变体的值对0.3mg和0.15mg TrGA值的插值进行计算的。
表11:乙醇产量
Figure GPA00001139245100811
除ET7-2外,所有的组合变体都比TrGA野生型表现的更好。表现最好的LR8具有1.56倍改善的性能。
表12给出了利用小规模乙醇应用测定测试的单位点和组合诱变体的概述。表12中阴影化的变体具有比TrGA更好的性能,还具有更高的热解折叠温度(dTm)。
表12:变体相对于TrGA的性能和热解折叠
Figure GPA00001139245100821
结果显示,色谱法(FPLC)是精确确定蛋白质浓度的有效工具。结果还显示,用三种浓度的TrGA滴定变体是小规模确定变体性能的有价值的方法。7个变体的表现好于TrGA野生型(参见表12),还具有更高的热解折叠温度,表现不如TrGA的变体则具有较低的Tm。
实施例10:选定的组合和单位点变体集合的比活性测定,和LR8的底物特异性
分析了一组组合变体和一些用于构建组合变体的单位点变体的比活性(表13)。进一步研究了LR8(用小规模应用测定确定PI 1.56)的底物特异性。这是通过建立MTP测定来确定GA变体的葡萄糖产率,和确定LR8变体的底物特异性实现的。发现变体之间的MTP测定不同,且除ET7-1外,所有变体都显示出比野生型(wt)里氏木霉葡糖淀粉酶更高的速率。另外,一些变体(LR8/ET8/Q172F)的实施效果比TrGA好20-30%。与野生型相比,LR8在可溶性玉米淀粉和两种不同的玉米醪液液化物样品上效果更好。
在下列实验中使用的底物是可溶性玉米淀粉储液,制备如下:将8g可溶性玉米淀粉(Sigma # S4180)溶解在100ml milliQ水中,微波炉加热1分钟。将分散体煮沸5分钟,冷却后,调整体积至100ml。用100mM NaAc缓冲液、pH4,1∶1稀释储液来制备4%可溶性玉米淀粉。在一个实验中,使用湿度分析仪测量%ds来制备玉米液化物底物(NE),然后用50mM NaAc7.5倍稀释底物,最终获得4%ds。底物在2000×g离心5分钟,用0.22μm滤器过滤上清液。在另一个实验中,除了在离心前将底物10倍稀释外,以相同方式制备玉米液化物底物(BSE)。
使用150μg酶/ml(3μg/180μl反应混合物)的储液稀释酶。用50mMNaAc pH4.0如下进一步稀释溶液:300ng(10x)、200ng、150ng、100ng、75ng、50ng、25ng、10ng/180μl反应混合物。
如下实施测定:每个孔加入40μl 50mM NaAc pH4.0,120μl 4%可溶性玉米淀粉,和20μl酶。样品在32℃,900rpm孵育2小时,并且加入90μl800mM甘氨酸-NaOH缓冲液pH105分钟后,在冰上终止。平板在15℃,2000rpm离心5分钟。向新鲜的平板中加入85μl milliQ水和100μl己糖激酶混合物(Il测试葡萄糖(HK)试剂盒,Instrumental Laboratory # 182507-40)和20μl上清液。对于葡萄糖(0-1mg/ml)校准线,则加入20μl葡萄糖储液替代。平板在室温黑暗中孵育10分钟,然后利用Spectramax进行340nm处吸光度测量。
表13:
相对于野生型的性能
Figure GPA00001139245100841
图7和8中显示了测定GA变体葡萄糖生产速率的测定结果。在这些附图中,计算了每一添加的酶量的对TrGA的相对性能。从图中150ng酶处的线性区域获得结论。图7、8和表13的结果显示,LR8、ET8、ET7-2、S211R、Q172F和P94N在整个线性范围都比野生型的实施效果好。
为了确定LR8的底物特异性,对筛选和应用中使用的底物(可溶性玉米淀粉,和实施例10中生产的两种玉米醪液底物)测试了LR8和TrGA野生型的性能。当通过HPLC分析时,底物在聚合度(DP)模式中表现出差异(参见图9-11)。在NE和BSE中出现DP1->=DP4,而可溶性玉米淀粉由至少4个或更多个葡萄糖分子组成。在所有的底物上,LR8都比野生型的实施效果更好(参见图9、10和11)。
实施例11:利用pTTT载体中的TrGA点评估文库(SEL)筛选和表征在里氏木霉中表达的变体
在里氏木霉中创造并直接筛选其它变体,特别是在SBD中具有取代的变体。与实施例1类似,使用pDONR-TrGA进入载体作为模板,和表14中列举的引物构建另十个TrGA位点饱和诱变(SSM)文库。位点包括:N61、G73、L417、T430、A431、E503、Q511、A535、A539和N563。在这些位点中,E503、Q511、A535、A539和N563位于TrGA的淀粉结合结构域中。然后,根据Invitrogen提供的方案,使用LR CLONASETM II酶混合物,并用pTTT-Dest载体(图14)实施重组。将重组产物转化到大肠杆菌Maxefficiency DH5α(Invitrogen)中,在补充了100μg/mL青霉素的2xTY培养基[Bacto胰蛋白胨(Difco)16g/L,Bacto酵母提取物(Difco)10g/L,NaCL5g/L]上涂板。在37℃孵育过夜后,从含100μg/mL青霉素的2xTY琼脂平板上,每个文库挑取96个单克隆,在含有200μL 2xTY培养基(含100μg/mL青霉素)的MTP中,37℃生长24小时。培养物用于序列分析(ABI3100序列分析仪,Applied Biosystems)。每个文库含有15-19个不同的在最终表达载体中的TrGA变体。将这些变体分别转化到里氏木霉中。
表14:用于产生其他TrGA SSM文库的引物
  AA-位置   F/R   DNA序列从5′至3′
  61   F   AGATAGCGCTCTTGTCTTCAAGNNSCTCATCGACCGC
  61   R   CTTGAAGACAAGAGCGCTATC
  73   F   CTTCACCGAAACGTACGATGCGNNSCTGCAGCGCCGC
  73   R   CGCATCGTACGTTTCGGTGAA
  417   F   CAGCGGCACTCCGCTGTCTGCGNNSCACCTGACGTGGT
  417   R   CGCAGACAGCGGAGTGCCGCT
  430   F   GTACGCCTCGTTCTTGACAGCCNNSGCCCGTCGGGCT
  430   R   GGCTGTCAAGAACGAGGCGTA
  431   F   CGCCTCGTTCTTGACAGCCACGNNSCGTCGGGCTGGC
  431   R   CGTGGCTGTCAAGAACGAGGC
  503   F   CTCCGTGGCCGTCACCTTCCACNNSCTCGTGTCGACACA
  503   R   GTGGAAGGTGACGGCCACGGA
  511   F   GCTCGTGTCGACACAGTTTGGCNN SACGGTCAAGGTG
  511   R   GCCAAACTGTGTCGACACGAG
  535   F   GAGCGCCGCCGTGGCTCTGGACNNSGTCAACTATGCCGATA
  535   R   GTCCAGAGCCACGGCGGCGCTCGTGCT
  539   F   GGCTCTGGACGCCGTCAACTATNNSGATAACCACCCCCTGT
  539   R   ATAGTTGACGGCGTCCAGAGCCACGGC
  563   F   CGTCGTGGAGTACAAGTACATCNNSGTGGGCCAAGATGGCTCC
  563   R   GATGTACTTGTACTCCACGACGTCTCC
利用PEG-原生质体方法(参见例如,等人,(1987)Gene 61:155-164)将SEL转化到里氏木霉中。里氏木霉宿主是源自RL-P37(IA52)的菌株,具有四个基因缺失(Δcbh1,Δcbh2,Δegl1,Δegl2;即,“四重缺失”;参见美国专利5,847,276、WO 92/06184和WO 05/001036)。在25μl总体积的转化混合物中,含有至多600ng的DNA和1-5×105原生质体,所述转化混合物用200ml的25% PEG溶液处理,用2倍体积的1.2M山梨糖醇溶液稀释,与含有乙酰胺的3%选择性顶层琼脂糖MM混合,并倒在含有乙酰胺的2%选择性琼脂糖上,或在24孔微滴度平板上。平板在28℃孵育5-8天。利用0.85% NaCl、0.015% Tween 80的溶液,从平板收获在各个单独的孔再生的转化体总群体的孢子。使用孢子悬浮液接种96孔MTP中的发酵。在24孔MTP的情况下,为了富集孢子数量,引入了对含选择性乙酰胺MM的新24孔MTP额外的涂板步骤。
在MTP中发酵转化体,使用含有表达蛋白质变体的培养上清液进行测定。简而言之,用表达TrGA变体的里氏木霉转化体的孢子悬浮液(超过104孢子/孔),一式四份地接种含有200μl的LD-GSM培养基的MTP。平板在28℃用230rpm和80%湿度孵育6天。通过真空过滤收获培养上清。在不同的测定中使用上清,筛选具有改进性质的变体。
表15-17中显示了在热稳定性、比活性以及同时在热稳定性和比活性中表现出性能指数大于1.0的变体。
表15:其它TrGA变体的热稳定性筛选
  变体   热稳定性的PI   变体   热稳定性的PI
  N061V   1.06   E503A   1.43
  G073F   1.44   E503C   1.39
  G073M   1.01   E503S   1.02
  G073N   1.10   E503T   1.04
  G073W   1.36   E503V   1.68
  L417I   1.04   Q511A   1.11
Figure GPA00001139245100871
表16:其它TrGA变体的比活性筛选
  变体   比活性的PI   变体   比活性的PI
  N061D   1.05   A431I   1.20
  N061I   1.21   A431L   1.21
  N061L   1.18   A431M   1.12
  N061Q   1.08   A431Q   1.22
  N061V   1.11   A431R   1.11
  N061W   1.02   A431S   1.09
  G073C   1.02   A431W   1.04
  变体   比活性的PI   变体   比活性的PI
  G073L   1.07   A431Y   1.13
  G073W   1.03   E503C   1.05
  L417A   1.12   E503D   1.06
  L417D   1.19   E503H   1.01
  L417E   1.10   E503S   1.10
  L417F   1.08   E503W   1.04
  L417G   1.19   Q511C   1.07
  变体   比活性的PI   变体   比活性的PI
  L417I   1.10   Q511G   1.06
  L417K   1.02   Q511H   1.05
  L417Q   1.04   Q511I   1.10
  L417R   1.30   Q511K   1.09
  L417S   1.05   Q511T   1.04
  L417T   1.10   Q511V   1.04
  L417V   1.21   A535E   1.19
  L417W   1.05   A535F   1.06
  L417Y   1.10   A535G   1.02
  T430A   1.19   A535K   1.07
  T430E   1.15   A535L   1.02
  T430F   1.09   A535N   1.04
  变体   比活性的PI   变体   比活性的PI
  T430G   1.16   A535P   1.14
  T430H   1.15   A535R   1.22
  T430I   1.06   A535S   1.06
  T430K   1.24   A535T   1.04
  T430M   1.16   A535V   1.04
  T430N   1.07   A535W   1.09
  T430Q   1.15   A535Y   1.13
  T430R   1.04   A539E   1.08
  T430V   1.09   A539M   1.03
  A431C   1.04   A539S   1.02
  A431E   1.08   A539W   1.06
  A431H   1.11   A539R   1.22
表17:同时表现出增加的热稳定性和比活性的其它TrGA变体
  变体   比活性的PI   热稳定性的PI   变体   比活性的PI   热稳定性的PI
  N061V   1.11   1.06   T430Q   1.15   1.05
  G073W   1.03   1.36   T430R   1.04   1.13
  L417I   1.10   1.04   T430V   1.09   1.05
  L417K   1.02   1.20   A431I   1.20   1.03
  L417Q   1.04   1.04   A431R   1.11   1.08
  L417R   1.30   1.20   E503C   1.05   1.39
  L417V   1.21   1.07   E503S   1.10   1.02
  变体   比活性的PI   热稳定性的PI   变体   比活性的PI   热稳定性的PI
  L417Y   1.10   1.01   Q511H   1.05   1.33
  T430A   1.19   1.05   A535K   1.07   1.24
  T430E   1.15   1.02   A535N   1.04   1.37
  变体   比活性的PI   热稳定性的PI   变体   比活性的PI   热稳定性的PI
  T430F   1.09   1.06   A535P   1.14   1.59
  T430H   1.15   1.10   A535R   1.22   1.26
  T430I   1.06   1.04   A539E   1.08   1.32
  T430K   1.24   1.08   A539M   1.03   1.05
  T430M   1.16   1.17   A539R   1.22   1.36
  T430N   1.07   1.13   A539S   1.02   1.30
实施例12:选定的单位点和组合变体的集合的表征
基于实施例4-6和11的结果,针对选定的组合变体和单位点变体的集合,进一步表征了它们的改变的性质。选定的集合包括具有以下位置取代的单位点和组合变体:I43、D44、N61、G73、G294、L417、T430、A431、E503、Q511、A535、A539和/或N563。从大规模发酵中纯化变体,并确定热稳定性和比活性的PI。特别的,利用不同的底物确定比活性,包括DP7、玉米淀粉和液化物。结果显示在表18和19中。
表18:选定的单位点变体集合的PI,每个变体来自500ml发酵物
变体 P.I.DP7-FPLC   P.I.玉米淀粉-FPLC   P.I.热稳定性 P.I.液化物-FPLC
  N61I   1.16   1.35   1.00   1.66
  A431L   1.15   1.38   1.18   1.51
  L417V   1.18   1.32   1.02   1.40
  A431Q   1.06   1.20   0.92   1.24
  G294C   1.01   0.84   0.94   1.23
变体 P.I.DP7-FPLC   P.I.玉米淀粉-FPLC   P.I.热稳定性 P.I.液化物-FPLC
  N563K   1.07   1.12   1.97   1.15
  Q511H   1.05   1.09   1.52   1.13
  T430M   1.05   1.15   0.89   1.09
  E503A   1.08   1.16   1.40   1.09
  I43Q   1.11   1.24   0.94   1.08
  A539R   1.15   1.37   1.43   1.08
  I43R   1.03   1.07   1.41   1.07
  L417R   1.23   1.27   1.51   1.04
变体 P.I.DP7-FPLC   P.I.玉米淀粉-FPLC   P.I.热稳定性   P.I.液化物-FPLC
  T430A   1.13   1.35   1.23   1.04
  G73F   1.06   1.06   1.45   1.03
  D44R   0.97   1.06   1.46   0.98
  N563I   1.09   1.22   2.06   0.92
  D44C   0.80   0.82   0.96   0.91
  E503V   1.17   1.07   1.66   0.88
  A535R   1.09   1.44   1.47   0.85
表19:选定的组合变体集合的PI
发酵 变体 取代 P.I.DP7-FPLC   P.I.玉米淀粉ch-FPLC P.I.热稳定性   P.I.液化物-FPLC
  100ml   C4   G73F/T430A/E503V/Q511H   1.05   1.06   2.57   1.01
  100ml   C9   D44C/G73F/L417R/N563K   0.95   1.00   2.57   1.22
  100ml   C11   D44C/G73F/N563K   0.83   1.04   2.42
  500ml   ALL5   I43R/L417V/E503A/Q511H/A539R   1.22   1.48   2.37   1.87
  100ml   C15   D44C/L417R/N563K   0.95   1.09   2.30   0.99
  100ml   C8   D44C/G73F/N563K   0.87   1.05   2.28
  500ml   C5   D44C/G73F/N563K   0.90   0.71   2.16   0.97
  500ml   TS1   I43R/T430A/E503V/A535R/N563K   2.13
  500ml   C7   D44C/G73F/E503V/Q511H   0.90   0.79   2.10   0.89
500ml ALL1   I43Q/D44C/L417V/E503A/Q511H/A539R 1.00 1.27 1.95 1.59
发酵 变体 取代 P.I.DP7-FPLC   P.I.玉米淀粉ch-FPLC P.I.热稳定性   P.I.液化物-FPLC
500ml CS4   L417V/T430A/Q511H/A539R/N563I 1.21 1.53 1.95 1.73
  100ml   C2   I43R/G73F/T430A   1.09   1.25   1.91   1.18
  500ml   RB7   I43Q/T430A/Q511H/L417V/A539R   1.11   1.36   1.85   2.17
  500ml   C1   G73F/T430A/Q511H   1.20   1.07   1.84   0.96
  500ml   ALL2   I43Q/L417V/E503A/Q511H/A539R   1.16   1.52   1.84   1.96
500ml ALL6   I43R/N61I/L417V/E503A/Q511H/A539R 1.06 1.53 1.84 2.24
500ml ALL8   I43R/N61I/L417R/E503A/Q511H/A539R 1.10 1.53 1.84 2.11
500ml RB20   I43Q/Q511H/A539R/T430M/N61I/L417V 1.01 1.55 1.79 1.95
发酵 变体 取代 P.I.DP7-FPLC   P.I.玉米淀粉ch-FPLC P.I.热稳定性   P.I.液化物-FPLC
500ml ALL4   I43Q/N61I/L417V/E503A/Q511H/A539R 1.08 1.52 1.79 1.73
500ml CS3   L417V/T430A/Q511H/A535R/N563I 0.98 1.40 1.69 1.78
  500ml   RB9   I43Q/T430A/Q511H/A431L/E503A   0.93   1.39   1.69   1.55
  500ml   RB17   I43Q/Q511H/A539R/E503A   1.12   1.38   1.68   1.40
  500ml   ALL7   I43R/L417R/E503A/A539R   1.04   1.54   1.67   1.62
  500ml   TS4   I43R/T430A/E503A/Q511H/N563K   0.98   1.33   1.66   1.33
  500ml   R818   I43Q/Q511H/A539R/T430M   1.06   1.44   1.64   1.40
  100ml   C12   I43R/T430A/   1.15   1.35   1.60   1.26
  500ml   RB16   I43Q/Q511H/A539R/N61I   1.11   1.43   1.60   1.34
发酵 变体 取代 P.I.DP7-FPLC   P.I.玉米淀粉ch-FPLC P.I.热稳定性   P.I.液化物-FPLC
  500ml   TS5   D44R/T430A/Q511H/A535R   0.89   1.22   1.59   1.21
  500ml   RB8   I43Q/T430A/Q511H/A431L/A539R   1.02   1.38   1.59   2.18
发酵 变体 取代 P.I.DP7-FPLC   P.I.玉米淀粉ch-FPLC P.I.热稳定性   P.I.液化物-FPLC
500ml RB11   I43Q/T430A/Q511H/L417V/A539R/A431L 1.05 1.36 1.58 2.03
500ml CS1   L417V/T430A/A431L/Q511H/A535R/A539R/N563I 1.08 1.71 1.56 2.35
  500ml   LQ5   L417R/A431L/Q511H   0.95   1.21   1.56   1.88
500ml CS2   L417V/T430A/A431Q/Q511H/A535R/A539R/N563I 1.07 1.71 1.56 2.32
发酵 变体 取代 P.I.DP7-FPLC   P.I.玉米淀粉ch-FPLC P.I.热稳定性   P.I.液化物-FPLC
  500ml   TS2   D44R/E503A/Q511H/N563I   0.90   1.14   1.53   1.23
  500ml   RB15   I43Q/Q511H/A539R   1.19   1.42   1.52   1.69
  500ml   RB13   I43Q/Q511H/L417V   1.06   1.38   1.50   1.50
  500ml   RB5   I43Q/T430A/Q511H/A539R   0.99   1.45   1.47   1.59
  500ml   RB4   I43Q/T430A/Q511H/E503A   1.07   1.29   1.47   1.50
  500ml   RB19   I43Q/Q511H/A539R/T430M/N61I   1.00   1.50   1.47   1.88
500ml ALL3   I43Q/D44C/N61I/L417V/E503A/Q511H/A539R 0.82 1.30 1.43 1.64
  500ml   LQ4   G294C/L417R/A431Q/Q511H   1.02   1.19   1.43   1.65
  500ml   RB2   I43Q/T430A/Q511H/L417V   1.09   1.38   1.42   1.87
  500ml   TS3   E503A/N563I/   0.94   1.17   1.39   1.04
发酵 变体 取代 P.I.DP7-FPLC   P.I.玉米淀粉ch-FPLC P.I.热稳定性   P.I.液化物-FPLC
  500ml   RB12   I43Q/Q511H/N61I   0.96   1.25   1.37   1.56
  500ml   RB14   I43Q/Q511H/A431L   1.01   1.31   1.37   1.55
  500ml   LQ6   L417V/A431Q/Q511H   0.94   1.33   1.35   2.05
  100ml   C14   I43Q/T430A/Q511H   1.09   1.34   1.33   1.46
  500ml   LQ3   G294C/L417V/A431L/Q511H   0.80   1.21   1.29   2.07
  500ml   RB3   I43Q/T430A/Q511H/A431L   1.20   1.25   1.29   1.70
500ml RB10   I43Q/T430A/Q511H/N61I/A539R/A431L 0.87 1.47 1.29 1.73
  500ml   RB1   I43Q/T430A/Q511H/N61I   1.19   1.15   1.27   1.47
  100ml   C13   I43Q/T430A/   1.07   1.29   1.10   1.45
  500ml   LQ1   G294C/L417R/A431L   0.90   1.08   1.04   1.77
发酵 变体 取代 P.I.DP7-FPLC   P.I.玉米淀粉ch-FPLC P.I.热稳定性   P.I.液化物-FPLC
  500ml   LQ2   G294C/L417V/A431Q   0.80   1.08   1.02   2.08
  500ml   RB6   I43Q/T430A/Q511H/N61I/A539R   0.94
实施例11:TrGA的晶体结构
测定了1.9分辨率下的里氏木霉(红褐肉座茵)葡糖淀粉酶(TrGA)的完整三维结构。表20显示了木霉葡糖淀粉酶晶体结构的坐标。TrGA以含有599个残基以及在天然宿主中将正常发生的所有的翻译后修饰的完整形式结晶。按如下产生和分析晶体结构:
对于蛋白质表达和纯化,将编码红褐肉座茵GA的基因,根据美国专利7,413,887中描述的方案,进行克隆和表达。
所有结晶实验使用的TrGA蛋白质材料都如下通过阴离子交换色谱进行一步初级纯化:包含180mg/ml总蛋白的、表达的TrGA的浓缩培养上清液通过在25mM Tris-HCI,pH8.0缓冲液中1∶10稀释样品来制备。使用HiPrep 16/10 Q Sepharose FF柱(GE Helthcare)进行阴离子交换纯化。用4倍柱体积(CV)的起始缓冲液(25mM Tris-HCl,pH8.0)平衡HiPrep柱,然后,再使用10ml的稀释的蛋白质样品。使用在运行缓冲液(25mMTris-HCl,pH8.0)中的0-140mM NaCl的8CV线性梯度洗脱结合的蛋白质。在约80mM NaCl盐浓度下从HiPrep Q琼脂糖柱上洗脱结合的TrGA。合并含有纯TrGA蛋白质的级分,并使用具有10 kD分子量截留(cutoff)(MWCO)的25ml Vivaspin离心浓缩管(Viva Science)将其浓缩至50mg/ml。使用DG-10脱盐柱(Bio-Rad)(用50mM乙酸钠缓冲液,pH4.3平衡),将纯化和浓缩的TrGA材料进行缓冲液交换。通过测量280nm处的吸光度确定蛋白质浓度。然后将初步纯化和浓缩的TrGA蛋白质储液储存在-20℃。
还引入了两步额外的纯化步骤,额外的阴离子交换纯化和大小排阻纯化,来增加TrGA蛋白质材料的结晶能力(crystability)。如下进行这两步额外的纯化步骤:首先,使用10ml MonoQ柱(GE Helthcare)的阴离子交换纯化步骤。将1ml初步纯化和冷冻的TrGA材料(50mg蛋白质)样品解冻,通过将样品在新鲜缓冲液中重复稀释至6ml,再利用6ml 5 kD MWCO浓缩管将样品再次浓缩至0.5ml,将缓冲液换为20mM Tris-HCl,pH8.0。在最后一次浓缩步骤后,在蒸馏水中稀释TrGA样品,直到蛋白质样品的电导率达到与阴离子纯化的起始缓冲液的电导率相对应,所述起始缓冲液即,25mM Tris-HCl,pH8.0。首先用4倍柱体积(CV)的起始缓冲液平衡MonoQ柱,然后向柱内加入稀释的蛋白质样品。通过两个不同的梯度从MonoQ柱上洗脱结合的蛋白质。首先,使用4CV线性pH梯度,其中起始缓冲液的pH从8.0降至6.0。在第二个梯度中,使用8CV长的盐梯度,其中,运行缓冲液(25mM Tris-HCl,pH6.0)中的盐浓度从0增加至350mM NaCl。在第二个盐梯度过程中,在约150mM NaCl浓度处,发现从柱上洗脱了结合的TrGA。合并含有TrGA的级分,并使用6ml 5 kD MWCO的Vivaspin浓缩管将其浓缩至2ml。然后,将浓缩的TrGA样品用于Superdex 200 16/60大小排阻柱(GE Helthcare)上,所述排阻柱用4CV的20mM Tris-Cl,pH8.0和50mMNaCl平衡,所述平衡液还用做运行缓冲液。在大小排阻纯化后,合并来自主洗脱峰的级分,并利用6ml 5 kD MWCO的Vivaspin离心浓缩管将其浓缩至约7.5mg/ml的蛋白质浓度。
对于蛋白质结晶,用来发现初步的TrGA结晶条件的蛋白质样品是这样的TrGA材料样品,其通过阴离子交换纯化一次,然后储存在-20C。在初步结晶实验前,将TrGA蛋白质样品解冻,并用50mM乙酸钠缓冲液,pH4.3稀释至约12mg/ml。正交晶的x-射线数据集通过分子替换(MR)用于解析TrGA的结构,而高分辨率正交晶的数据集,用于最终的正交晶的空间群TrGA结构模型。发现使用悬滴的蒸气扩散方法(McPherson 1982),在20℃下,正交晶的TrGA晶体生长在含有25% PEG 3350,0.20M乙酸铵,0.10M Bis-Tris pH5.5(池液)的溶液中。通过将等量的蛋白质溶液(12mg/m1)和池液混合至终体积10μl,来制备结晶化悬滴。发现TrGA晶体属于正交晶的空间群P212121,具有晶胞大小约:a=52.2
Figure GPA00001139245100931
,b=99.2
Figure GPA00001139245100932
,c=121.2,所述晶体具有计算的Vm为2.3(Matthews 1968),且一个分子在不对称单元中。
对于x-射线数据收集,在室温,从固定在密封毛细管内的单晶体收集两套正交晶的TrGA数据集。在home X-射线源——具有聚焦镜的MSC/Rigaku(Molecular Structures Corp.,The Woodlands,Texas)RaxisIV++成像板检测器上,利用来自Rigaku RU200旋转阳极发生器的CuKα射线,收集初步lo-分辨率正交晶的TrGA X-射线数据集,用于解析通过分子替换方法(MR)的结构。使用由MSC/Rigaku提供的d*trek软件来处理、衡量和平均该数据集。在100K从单个冷冻的TrGA晶体收集C中心的单斜数据集,所述单个冷冻的TrGA晶体在包含25% PEG 3350,15%甘油,50mM CaCl2和0.1M Bis-Tris pH5.5的冷冻保护剂(作为冷冻保护剂)中平衡,置于人造丝纤维环内,在转移到同步加速器前浸入液氮中冷冻。高分辨率正交晶的(1.9
Figure GPA00001139245100934
)数据集和C中心的单斜晶数据集(1.8
Figure GPA00001139245100935
)都在Lund,Sweden的MAX LAB同步加速器源,光束911∶5处收集。用MOSFLM处理自同步加速器源收集的两套数据集,并用包含在CCP4程序包(Collaborative Computational Project Number 4 1994)中的程序SCALA衡量。除非另外提及,所有的后继数据处理都使用CCP4程序包实施(Collaborative Computational Project Number 4 1994)。从每套数据集留出了一组5%的反射,用作为监控R-free(Brünger,A(1992)Nature,355:472-475)。
使用包括在CCP4程序包中的自动置换程序MOLREP(CollaborativeComputational Project Number 4 1994),通过MR,利用初步的lo-分辨率正交晶的数据集,以及利用泡盛曲霉GA(AaGA)变体X100(pdb进入1GLM(Aleshin等人,(1994)J.Mol.Biol.238:575-591)的坐标作为搜索模型,初步解析TrGA结构。编辑了泡盛曲霉GA搜索模型,以在进行MR实验前去除附着在蛋白质分子上的作为N-和O-糖基化的所有糖基化部分,以及所有的溶剂分子。来自初步lo-分辨率TrGA数据集的,所有分辨率在36.8和2.8之间的反射都用于MR解析。MR程序发现了单旋转功能解析,具有高于背景最大11.1σ,高于背景的次最大为3.8σ。翻译功能解析产生了48。7%的R-因子,并具有17.4的对照因子。利用程序Refmac 5.0(Murshudov等人,(1997)Acta Crystallogr.D53:240-255)对MR解析进行了10轮限制性最小二乘精修法的优化。这将结晶学R-因子降低至31.1%,同时R-自由值从42.2%降至41.1%。
精修的MR解析模型用于从lo-分辨率正交晶的TrGA数据集计算初始密度图。在该电子密度图中,可以方便的鉴别出在TrGA的19和26位残基之间的二硫桥的电子密度,所述二硫桥是泡盛曲霉变体X100结构模型中不存在的二硫桥。这提示所述电子密度图的质量足够用于从氨基酸序列构建TrGA的结构模型。精修基于lo-分辨率数据集的初始TrGA结构模型,所述精修利用了Coot(Emsley和Cowtan,(2004)Acta Crystallogr.D boilCrystallogr.60:2126-2132)构建的交替循环模型,和Refmac 5.0的最大可能性精修。
通过利用程序Refmac 5.0,针对高分辨率数据集精修了初始TrGA结构模型(进行10轮限制性精修),将初始TrGA结构模型的分辨率延伸到了高分辨率正交晶的数据集(1.9
Figure GPA00001139245100951
)的分辨率。利用精修程序中的水选取方案,将结构模型中的大部分水分子自动定位,然后通过肉眼检查人工选取或剔除。所有结构比较都使用Coot(Emsley和Cowtan(2004)如上)或O(Jones等人,(1991)Acta Crystallogr.A47:110-119),并用PyMOL(DelanoW.L.(2002)The PyMOL Molecular Graphics System.Palo Alto,CA,USA;Delano Scientific)制图。
根据这些结果,可见TrGA催化核心区段与Aleshin等人,1992对AaGA的(α/α)6-桶状拓扑结构的描述一致,由α螺旋的两个桶组成,其中外螺旋的C-末端通向内螺旋的N-末端。能够鉴别电子密度中的关键差异,例如在残基19和26之间的二硫桥,和相对于AaGA的插入(残基257-260)。包含80-100的片段也经历了延伸的模型重建。鉴别的一个主要的糖基化位点是在Asn 171,其上附着了至多四个糖苷部分。在AaGA中也鉴别出了相似的糖基化位点。此外,催化核心在残基22-23、44-45和122-123之间,含有三个顺式肽,所述催化核心在TrGA和AaGA之间是保守的。总而言之,当比较TrGA和AaGA的催化核心的坐标时,453个Cα原子中的409个之间有0.535
Figure GPA00001139245100952
的rms差异。
实施例14:TrGA和AaGA之间的同源性
实施例13中鉴别的TrGA的晶体结构,与以前已鉴别的泡盛曲霉GA(AaGA)的晶体结构重叠。AaGA晶体结构获得自蛋白质数据库(PDB),且结晶的AaGA的形式是仅含有催化结构域的形式。在本文中,将具有所有三个区域完整的里氏木霉葡糖淀粉酶的结构确定至1.8埃分辨率(参见表15和实施例12)。利用坐标(参见表20),将结构与已测定的泡盛曲霉菌株X100的催化结构域的坐标进行了比对(Aleshin,A.E.,Hoffman,C.,Firsov,L.M.和Honzatko,R.B.1994 Refined crystal structures ofglucoamylase from Aspergillus awamori var.X100.J Mol Biol 238:575-591和PDB)。如图12和13中可见,催化结构域的结构紧密重叠,并允许基于该结构重叠鉴别等价的残基。
基于该分析,鉴别了能够在TrGA中突变,并且导致增加的稳定性和/或比活性的位点。这些位点包括活性位点的108、124、175和316位。还鉴别了特定的成对变体Y47W/Y315F和Y47F/Y315W。鉴别的其它位点是I43、D44、P45、D46、R122、R125、V181、E242、Y310、D313、V314、N317、R408和N409。由于高的结构同源性,预期在TrGA中的位点上发现的有益变体,在泡盛曲霉和其它同源的葡糖淀粉酶中也将具有相似的效果。
在不脱离本发明的范围和精神的条件下,本发明所述方法和系统的不同修饰和变化对本领域技术人员是显而易见的。虽然描述本发明已经就特定的优选实施方案进行了描述,应该理解,要求保护的发明不应过分限于此类特定的实施方案。实际上,对本领域技术人员显而易见的、实施本发明的所述模式的不同修饰,也意在下列权利要求的范围内。
表20.
CRYST1     52.185  99.232   121.240  90.00  90.00  90.00
ORIGX1       1.000000   0.000000  0.000000       0.00000
ORIGX2       0.000000   1.000000  0.000000       0.00000
ORIGX3       0.000000   0.000000  1.000000       0.00000
分 值1       0.019163  -0.000001 -0.000001       0.00000
分 值2       0.000000   0.010077  0.000000       0.00000
分 值3       0.000000   0.000000  0.008248       0.00000
原子       1 N   SER A   1    -30.485   30.567  -21.185  1.00  37.11
原子       2 CA  SER A   1    -30.568   29.350  -20.326  1.00  37.00
原子       3 CB  SER A   1    -31.953   28.707  -20.424  1.00  37.27
原子       4 OG  SER A   1    -32.137   28.089  -21.695  1.00  40.11
原子       5 C   SER A   1    -29.519   28.345  -20.772  1.00  35.91
原子       6 O   SER A   1    -29.043   28.415  -21.911  1.00  35.46
原子       7 N   VAL A   2    -29.170   27.425  -19.867  1.00  34.51
原子       8 CA  VAL A   2    -28.302   26.293  -20.179  1.00  33.56
原子       9 CB  VAL A   2    -28.142   25.339  -18.955  1.00  33.84
原子      10 CG1 VAL A   2    -27.349   24.103  -19.316  1.00  34.20
原子      11 CG2 VAL A   2    -27.468   26.057  -17.827  1.00  34.79
原子      12 C   VAL A   2    -28.846   25.506  -21.363  1.00  32.48
原子      13 O   VAL A   2    -28.086   25.109  -22.245  1.00  31.10
原子      14 N   ASP A   3    -30.160   25.286  -21.381  1.00  31.43
原子      15 CA  ASP A   3    -30.791   24.530  -22.457  1.00  31.38
原子      16 CB  ASP A   3    -32.283   24.323  -22.190  1.00  32.17
原子      17 CG  ASP A   3    -32.522   23.492  -20.943  1.00  35.28
原子      18 OD1 ASP A   3    -32.413   22.251  -21.028  1.00  36.80
原子      19 OD2 ASP A   3    -32.786   24.092  -19.870  1.00  40.63
原子      20 C   ASP A   3    -30.556   25.153  -23.818  1.00  30.59
原子      21 O   ASP A   3    -30.282   24.446  -24.778  1.00  30.19
原子      22 N   ASP A   4    -30.644   26.477  -23.875  1.00  29.89
原子      23 CA  ASP A   4    -30.369   27.244  -25.083  1.00  29.99
原子      24 CB  ASP A   4    -30.601   28.731  -24.822  1.00  31.12
原子      25 CG  ASP A   4    -32.088   29.121  -24.785  1.00  34.16
原子      26 OD1 ASP A   4    -32.991   28.260  -24.925  1.00  36.06
原子      27 OD2 ASP A   4    -32.340   30.332  -24.608  1.00  39.96
原子      28 C   ASP A   4    -28.925   27.049  -25.579  1.00  28.65
原子      29 O   ASP A   4    -28.697   26.881  -26.770  1.00  28.51
原子      30 N   PHE A   5    -27.961   27.096  -24.660  1.00  26.74
原子      31 CA  PHE A   5    -26.553   26.860  -24.994  1.00  25.21
原子      32 CB  PHE A   5    -25.666   27.110  -23.764  1.00  25.59
原子      33 CG  PHE A   5    -24.244   26.646  -23.931  1.00  26.03
原子      34 CD1 PHE A   5    -23.395   27.259  -24.854  1.00  27.29
原子      35 CE1 PHE A   5    -22.063   26.823  -25.009  1.00  27.33
原子      36 CZ  PHE A   5    -21.593   25.783  -24.228  1.00  26.77
原子      37 CE2 PHE A   5    -22.425   25.181  -23.286  1.00  28.42
原子      38 CD2 PHE A   5    -23.749   25.617  -23.144  1.00  28.42
原子      39 C   PHE A   5    -26.352   25.438  -25.539  1.00  24.23
原子      40 O   PHE A   5    -25.659   25.244  -26.544  1.00  23.56
原子      41 N   ILE A   6    -26.974   24.458  -24.892  1.00  22.71
原子      42 CA  ILE A   6    -26.835   23.065  -25.312  1.00  22.36
原子      43 CB  ILE A   6    -27.491   22.106  -24.299  1.00  21.86
原子      44 CG1 ILE A   6    -26.744   22.181  -22.956  1.00  22.27
原子      45 CD1 ILE A   6    -27.384   21.347  -21.834  1.00  22.36
原子      46 CG2 ILE A   6    -27.571   20.669  -24.848  1.00  21.69
原子      47 C   ILE A   6    -27.388   22.855  -26.723  1.00  22.84
原子      48 O   ILE A   6    -26.753   22.216  -27.573  1.00  21.76
原子      49 N   SER A   7    -28.556   23.420  -26.996  1.00  23.10
原子      50 CA  SER A   7    -29.146   23.175  -28.309  1.00  23.90
原子      51 CB  SER A   7    -30.627   23.570  -28.320  1.00  25.04
原子      52 OG  SER A   7    -30.717   24.982  -28.282  1.00  30.08
原子      53 C   SER A   7    -28.340   23.874  -29.422  1.00  22.78
原子      54 O   SER A   7    -28.186   23.337  -30.508  1.00  22.94
原子      55 N   THR A   8    -27.800   25.053  -29.140  1.00  22.50
原子      56 CA  THR A   8    -26.984   25.780  -30.115  1.00  23.05
原子      57 CB  THR A   8    -26.834   27.247  -29.698  1.00  23.65
原子      58 OG1 THR A   8    -28.138   27.839  -29.700  1.00  27.60
原子      59 CG2 THR A   8    -25.939   28.018  -30.660  1.00  26.76
原子      60 C   THR A   8    -25.601   25.159  -30.307  1.00  21.46
原子      61 O   THR A   8    -25.109   25.051  -31.437  1.00  21.38
原子      62 N   GLU A   9    -24.978   24.768  -29.200  1.00  19.11
原子      63 CA  GLU A   9    -23.596   24.269  -29.243  1.00  18.01
原子      64 CB  GLU A   9    -22.959   24.334  -27.847  1.00  17.76
原子      65 CG  GLU A   9    -21.449   23.945  -27.794  1.00  17.71
原子      66 CD  GLU A   9    -20.536   24.892  -28.609  1.00  20.86
原子      67 OE1 GLU A   9    -20.949   26.010  -28.971  1.00  19.89
原子      68 OE2 GLU A   9    -19.389   24.500  -28.909  1.00  19.22
原子      69 C   GLU A   9    -23.462   22.846  -29.784  1.00  17.77
原子      70 O   GLU A   9    -22.423   22.505  -30.368  1.00  18.05
原子      71 N   THR A  10    -24.485   22.020  -29.593  1.00  15.87
原子      72 CA  THR A  10    -24.404   20.609  -29.958  1.00  17.31
原子      73 CB  THR A  10    -25.677   19.823  -29.525  1.00  17.46
原子      74 OG1 THR A  10    -25.768   19.860  -28.090  1.00  17.46
原子      75 CG2 THR A  10    -25.616   18.374  -30.037  1.00  18.42
原子      76 C   THR A  10    -24.026   20.346  -31.430  1.00  17.40
原子      77 O   THR A  10    -23.073   19.615  -31.682  1.00  17.22
原子      78 N   PRO A  11    -24.764   20.934  -32.412  1.00  18.30
原子      79 CA  PRO A  11    -24.346   20.649  -33.798  1.00  18.11
原子      80 CB  PRO A  11    -25.440   21.317  -34.662  1.00  18.57
原子      81 CG  PRO A  11    -26.094   22.310  -33.771  1.00  19.16
原子      82 CD  PRO A  11    -25.975   21.779  -32.361  1.00  18.54
原子      83 C   PRO A  11    -22.963   21.231  -34.142  1.00  17.81
原子      84 O   PRO A  11    -22.241   20.655  -34.964  1.00  17.74
原子      85 N   ILE A  12    -22.601   22.353  -33.520  1.00  16.85
原子      86 CA  ILE A  12    -21.279   22.936  -33.731  1.00  16.66
原子      87 CB  ILE A  12    -21.161   24.319  -33.112  1.00  17.25
原子      88 CG1 ILE A  12    -22.194   25.267  -33.751  1.00  19.25
原子      89 CD1 ILE A  12    -22.289   26.635  -33.101  1.00  21.45
原子      90 CG2 ILE A  12    -19.714   24.855  -33.270  1.00  18.75
原子      91 C   ILE A  12    -20.170   22.023  -33.178  1.00  16.30
原子      92 O   ILE A  12    -19.155   21.798  -33.848  1.00  14.64
原子      93 N   ALA A  13    -20.360   21.527  -31.951  1.00  15.28
原子      94 CA  ALA A  13    -19.375   20.627  -31.304  1.00  15.19
原子      95 CB  ALA A  13    -19.788   20.332  -29.883  1.00  15.31
原子      96 C   ALA A  13    -19.204   19.326  -32.092  1.00  15.37
原子      97 O   ALA A  13    -18.083   18.834  -32.297  1.00  13.56
原子      98 N   LEU A  14    -20.320   18.743  -32.531  1.00  15.13
原子      99 CA  LEU A  14    -20.225   17.503  -33.285  1.00  16.06
原子     100 CB  LEU A  14    -21.630   16.921  -33.510  1.00  17.33
原子     101 CG  LEU A  14    -21.689   15.563  -34.212  1.00  20.02
原子     102 CD1 LEU A  14    -20.946   14.460  -33.471  1.00  23.09
原子     103 CD2 LEU A  14    -23.150   15.225  -34.390  1.00  21.86
原子     104 C   LEU A  14    -19.506   17.749  -34.623  1.00  15.61
原子     105 O   LEU A  14    -18.651   16.947  -35.039  1.00  14.82
原子     106 N   ASN A  15    -19.853   18.852  -35.285  1.00  15.30
原子     107 CA  ASN A  15    -19.236   19.228  -36.567  1.00  16.34
原子     108 CB  ASN A  15    -19.848   20.545  -37.073  1.00  16.07
原子     109 CG  ASN A  15    -19.232   21.010  -38.388  1.00  18.31
原子     110 OD1 ASN A  15    -19.565   20.487  -39.431  1.00  17.60
原子     111 ND2 ASN A  15    -18.312   21.987  -38.325  1.00  21.40
原子     112 C   ASN A  15    -17.736   19.450  -36.405  1.00  15.35
原子     113 O   ASN A  15    -16.926   18.954  -37.198  1.00  15.29
原子     114 N   ASN A  16    -17.385   20.180  -35.355  1.00  14.82
原子     115 CA  ASN A  16    -15.992   20.555  -35.144  1.00  15.27
原子     116 CB  ASN A  16    -15.872   21.693  -34.148  1.00  15.41
原子     117 CG  ASN A  16    -16.276   23.023  -34.737  1.00  16.53
原子     118 OD1 ASN A  16    -16.517   23.136  -35.954  1.00  18.08
原子     119 ND2 ASN A  16    -16.326   24.050  -33.896  1.00  16.35
原子     120 C   ASN A  16    -15.159   19.362  -34.723  1.00  14.91
原子     121 O   ASN A  16    -13.975   19.261  -35.099  1.00  15.34
原子     122 N   LEU A  17    -15.771   18.460  -33.956  1.00  14.29
原子     123 CA  LEU A  17    -15.114   17.191  -33.610  1.00  13.90
原子     124 CB  LEU A  17    -16.003   16.346  -32.672  1.00  13.94
原子     125 CG  LEU A  17    -15.351   15.065  -32.133  1.00  16.81
原子     126 CD1 LEU A  17    -15.933   14.708  -30.779  1.00  20.06
原子     127 CD2 LEU A  17    -15.484   13.880  -33.097  1.00  19.31
原子     128 C   LEU A  17    -14.763   16.409  -34.880  1.00  14.06
原子     129 O   LEU A  17    -13.613   15.957  -35.073  1.00  12.69
原子     130 N   LEU A  18    -15.774   16.215  -35.730  1.00  13.19
原子     131 CA  LEU A  18    -15.589   15.441  -36.957  1.00  14.25
原子     132 CB  LEU A  18    -16.952   15.027  -37.545  1.00  13.56
原子     133 CG  LEU A  18    -17.717   14.013  -36.684  1.00  16.49
原子     134 CD1 LEU A  18    -19.171   13.874  -37.165  1.00  16.33
原子     135 CD2 LEU A  18    -17.020   12.647  -36.655  1.00  18.51
原子     136C    LEU A  18    -14.703   16.132  -38.007  1.00  13.49
原子     137 O   LEU A  18    -14.083   15.435  -38.820  1.00  14.69
原子     138 N   CYS A  19    -14.613   17.462  -37.964  1.00  13.01
原子     139 CA  CYS A  19    -13.629   18.223  -38.760  1.00  13.22
原子     140 CB  CYS A  19    -13.796   19.738  -38.556  1.00  14.20
原子     141 SG  CYS A  19    -15.125   20.407  -39.642  1.00  16.22
原子     142C    CYS A  19    -12.182   17.808  -38.450  1.00  13.86
原子     143 O   CYS A  19    -11.278   18.043  -39.259  1.00  13.42
原子     144 N   ASN A  20    -11.968   17.219  -37.272  1.00  13.21
原子     145 CA  ASN A  20    -10.594   16.850  -36.830  1.00  13.62
原子     146 CB  ASN A  20    -10.394   17.184  -35.324  1.00  13.52
原子     147 CG  ASN A  20    -10.242   18.687  -35.055  1.00  16.17
原子     148 OD1 ASN A  20    -10.035   19.119  -33.897  1.00  17.34
原子     149 ND2 ASN A  20    -10.343   19.486  -36.090  1.00  11.87
原子     150 C   ASN A  20    -10.262   15.381  -37.116  1.00  13.99
原子     151 O   ASN A  20    -9.238    14.857  -36.646  1.00  14.28
原子     152 N   VAL A  21    -11.123   14.705  -37.875  1.00  13.41
原子     153 CA  VAL A  21    -10.923   13.287  -38.167  1.00  14.20
原子     154 CB  VAL A  21    -12.177   12.448  -37.827  1.00  14.30
原子     155 CG1 VAL A  21    -11.953   10.971  -38.189  1.00  15.30
原子     156 CG2 VAL A  21    -12.517   12.553  -36.312  1.00  14.17
原子     157 C   VAL A  21    -10.551   13.136  -39.644  1.00  14.35
原子     158 O   VAL A  21    -11.255   13.642  -40.491  1.00  15.68
原子     159 N   GLY A  22    -9.461    12.449  -39.953  1.00  15.67
原子     160 CA  GLY A  22    -9.061    12.300  -41.377  1.00  15.70
原子     161 C   GLY A  22    -9.843    11.182  -42.060  1.00  17.34
原子     162 O   GLY A  22    -10.453   10.358  -41.397  1.00  17.15
原子     163 N   PRO A  23    -9.806    11.117  -43.404  1.00  18.42
原子     164 CA  PRO A  23    -9.009    11.946  -44.278  1.00  18.20
原子     165 CB  PRO A  23    -8.716    10.990  -45.446  1.00  18.64
原子     166 CG  PRO A  23    -9.983    10.171  -45.560  1.00  18.81
原子     167 CD  PRO A  23    -10.568   10.092  -44.153  1.00  18.59
原子     168 C   PRO A  23    -9.761    13.182  -44.753  1.00  19.05
原子     169 O   PRO A  23    -9.183    14.055  -45.426  1.00  19.36
原子     170 N   ASP A  24    -11.034   13.288  -44.385  1.00  18.76
原子     171 CA  ASP A  24    -11.878   14.305  -44.996  1.00  19.39
原子     172 CB  ASP A  24    -13.015   13.636  -45.781  1.00  20.87
原子     173 CG  ASP A  24    -13.920   12.784  -44.913  1.00  24.34
原子     174 OD1 ASP A  24    -13.502   12.291  -43.839  1.00  27.70
原子     175 OD2 ASP A  24    -15.079   12.580  -45.330  1.00  28.83
原子     176 C   ASP A  24    -12.452   15.372  -44.061  1.00  18.08
原子     177 O   ASP A  24    -13.208   16.245  -44.509  1.00  17.78
原子     178 N   GLY A  25    -12.100   15.331  -42.775  1.00  16.65
原子     179 CA  GLY A  25    -12.634   16.343  -41.852  1.00  16.02
原子     180 C   GLY A  25    -12.152   17.718  -42.292  1.00  15.70
原子     181 O   GLY A  25    -11.033   17.849  -42.811  1.00  16.22
原子     182 N   CYS A  26    -12.979   18.752  -42.086  1.00  15.10
原子     183 CA  CYS A  26    -12.698   20.078  -42.637  1.00  15.46
原子     184 CB  CYS A  26    -13.899   21.037  -42.475  1.00  15.47
原子     185 SG  CYS A  26    -14.147   21.739  -40.786  1.00  16.91
原子     186 C   CYS A  26    -11.407   20.731  -42.116  1.00  15.65
原子     187 O   CYS A  26    -10.896   21.643  -42.763  1.00  15.80
原子     188 N   ARG A  27    -10.879   20.259  -40.973  1.00  15.02
原子     189 CA  ARG A  27    -9.615    20.808  -40.443  1.00  14.56
原子     190 CB  ARG A  27    -9.819    21.480  -39.066  1.00  15.00
原子     191 CG  ARG A  27    -10.695   22.728  -39.164  1.00  15.15
原子     192 CD  ARG A  27    -10.826   23.551  -37.888  1.00  14.30
原子     193 NE  ARG A  27    -11.874   24.566  -38.080  1.00  15.05
原子     194 CZ  ARG A  27    -13.160   24.420  -37.761  1.00  17.96
原子     195 NH1 ARG A  27    -13.623   23.293  -37.211  1.00  17.37
原子     196 NH2 ARG A  27    -14.009   25.415  -38.025  1.00  19.55
原子     197 C   ARG A  27    -8.489    19.776  -40.394  1.00  15.49
原子     198 O   ARG A  27    -7.389    20.079  -39.888  1.00  15.40
原子     199 N   ALA A  28    -8.768    18.577  -40.910  1.00  15.17
原子     200 CA  ALA A  28    -7.805    17.484  -40.988  1.00  16.06
原子     201 CB  ALA A  28    -8.163    16.374  -39.975  1.00  15.52
原子     202 C   ALA A  28    -7.744    16.913  -42.394  1.00  16.96
原子     203 O   ALA A  28    -7.453    15.730  -42.581  1.00  17.60
原子     204 N   PHE A  29    -8.028    17.756  -43.380  1.00  17.45
原子     205 CA  PHE A  29    -8.188    17.272  -44.744  1.00  18.68
原子     206 CB  PHE A  29    -8.728    18.376  -45.636  1.00  19.45
原子     207 CG  PHE A  29    -9.299    17.864  -46.919  1.00  20.86
原子     208 CD1 PHE A  29    -8.515    17.827  -48.071  1.00  23.76
原子     209 CE1 PHE A  29    -9.042    17.343  -49.267  1.00  25.46
原子     210 CZ  PHE A  29    -10.357   16.889  -49.318  1.00  22.85
原子     211 CE2 PHE A  29    -11.151   16.924  -48.180  1.00  24.78
原子     212 CD2 PHE A  29    -10.611   17.408  -46.973  1.00  22.71
原子     213 C   PHE A  29    -6.853    16.783  -45.296  1.00  19.10
原子     214 O   PHE A  29    -5.862    17.501  -45.224  1.00  19.40
原子     215 N   GLY A  30    -6.830    15.558  -45.816  1.00  18.73
原子     216 CA  GLY A  30    -5.603    15.008  -46.398  1.00  19.00
原子     217 C   GLY A  30    -4.717    14.307  -45.399  1.00  19.69
原子     218 O   GLY A  30    -3.657    13.809  -45.768  1.00  19.61
原子     219 N   THR A  31    -5.133    14.255  -44.123  1.00  18.86
原子     220 CA  THR A  31    -4.450    13.384  -43.165  1.00  19.14
原子     221 CB  THR A  31    -4.846    13.689  -41.689  1.00  18.79
原子     222 OG1 THR A  31    -6.265    13.579  -41.559  1.00  18.61
原子     223 CG2 THR A  31    -4.410    15.106  -41.262  1.00  16.47
原子     224 C   THR A  31    -4.812    11.925  -43.498  1.00  19.11
原子     225 O   THR A  31    -5.713    11.661  -44.313  1.00  19.69
原子     226 N   SER A  32    -4.107    10.982  -42.881  1.00  19.74
原子     227 CA  SER A  32    -4.367    9.554   -43.094  1.00  20.00
原子     228 CB  SER A  32    -3.411    8.722   -42.248  1.00  20.73
原子     229 OG  SER A  32    -2.064    8.973   -42.612  1.00  21.56
原子     230 C   SER A  32    -5.806    9.217   -42.704  1.00  20.57
原子     231 O   SER A  32    -6.334    9.778   -41.732  1.00  20.70
原子     232 N   ALA A  33    -6.443    8.319   -43.452  1.00  19.94
原子     233 CA  ALA A  33    -7.768    7.823   -43.068  1.00  19.61
原子     234 CB  ALA A  33    -8.232    6.729   -44.035  1.00  19.31
原子     235 C   ALA A  33    -7.764    7.285   -41.637  1.00  19.10
原子     236 O   ALA A  33    -6.906    6.482   -41.264  1.00  19.49
原子     237 N   GLY A  34    -8.742    7.719   -40.856  1.00  17.74
原子     238 CA  GLY A  34    -8.878    7.282   -39.473  1.00  18.31
原子     239 C   GLY A  34    -7.988    8.020   -38.473  1.00  18.48
原子     240 O   GLY A  34    -8.050    7.739   -37.271  1.00  19.07
原子     241 N   ALA A  35    -7.173    8.959   -38.937  1.00  17.05
原子     242 CA  ALA A  35    -6.329    9.723   -38.000  1.00  17.17
原子     243 CB  ALA A  35    -5.167    10.376  -38.730  1.00  17.10
原子     244 C   ALA A  35    -7.173    10.784  -37.271  1.00  16.55
原子     245 O   ALA A  35    -8.174    11.271  -37.808  1.00  17.35
原子     246 N   VAL A  36    -6.793    11.130  -36.051  1.00  15.39
原子     247 CA  VAL A  36    -7.490    12.198  -35.328  1.00  14.41
原子     248 CB  VAL A  36    -8.142    11.687  -34.031  1.00  15.02
原子     249 CG1 VAL A  36    -8.903    12.828  -33.349  1.00  16.72
原子     250 CG2 VAL A  36    -9.081    10.520  -34.336  1.00  16.45
原子     251 C   VAL A  36    -6.407    13.201  -34.944  1.00  14.36
原子     252 O   VAL A  36    -5.421    12.816  -34.311  1.00  14.44
原子     253 N   ILE A  37    -6.566    14.454  -35.331  1.00  13.68
原子     254 CA  ILE A  37    -5.614    15.470  -34.893  1.00  13.67
原子     255 CB  ILE A  37    -5.528    16.687  -35.849  1.00  13.66
原子     256 CG1 ILE A  37    -6.847    17.486  -35.901  1.00  14.31
原子     257 CD1 ILE A  37    -6.773    18.712  -36.864  1.00  14.21
原子     258 CG2 ILE A  37    -5.158    16.214  -37.260  1.00  14.62
原子     259 C   ILE A  37    -6.041    15.908  -33.505  1.00  13.27
原子     260 O   ILE A  37    -7.235    16.011  -33.224  1.00  12.99
原子     261 N   ALA A  38    -5.081    16.159  -32.630  1.00  13.03
原子     262 CA  ALA A  38    -5.445    16.697  -31.333  1.00  12.81
原子     263 CB  ALA A  38    -4.235    16.680  -30.377  1.00  12.73
原子     264 C   ALA A  38    -6.046    18.122  -31.497  1.00  12.45
原子     265 O   ALA A  38    -6.939    18.503  -30.775  1.00  12.23
原子     266 N   SER A  39    -5.555    18.870  -32.482  1.00  12.90
原子     267 CA  SER A  39    -5.973    20.246  -32.769  1.00  12.85
原子     268 CB  SER A  39    -5.512    21.211  -31.657  1.00  12.63
原子     269 OG  SER A  39    -5.312    22.563  -32.108  1.00  12.57
原子     270 C   SER A  39    -5.281    20.593  -34.090  1.00  13.33
原子     271 O   SER A  39    -4.215    20.043  -34.376  1.00  13.48
原子     272 N   PRO A  40    -5.880    21.500  -34.885  1.00  13.12
原子     273 CA  PRO A  40    -5.248    21.999  -36.108  1.00  13.76
原子     274 CB  PRO A  40    -6.407    22.689  -36.860  1.00  14.41
原子     275 CG  PRO A  40    -7.386    23.045  -35.797  1.00  14.32
原子     276 CD  PRO A  40    -7.223    22.081  -34.665  1.00  13.18
原子     277 C   PRO A  40    -4.126    23.010  -35.860  1.00  14.27
原子     278 O   PRO A  40    -3.474    23.420  -36.824  1.00  14.43
原子     279 N   SER A  41    -3.864    23.381  -34.599  1.00  13.42
原子     280 CA  SER A  41    -2.799    24.336  -34.318  1.00  14.56
原子     281 CB  SER A  41    -2.788    24.817  -32.840  1.00  14.40
原子     282 OG  SER A  41    -3.962    25.574  -32.534  1.00  16.91
原子     283 C   SER A  41    -1.446    23.713  -34.676  1.00  14.51
原子     284 O   SER A  41    -1.123    22.626  -34.218  1.00  13.96
原子     285 N   THR A  42    -0.650    24.433  -35.470  1.00  15.63
原子     286 CA  THR A  42     0.652    23.924  -35.919  1.00  16.17
原子     287 CB  THR A  42     0.750    23.997  -37.458  1.00  17.02
原子     288 OG1 THR A  42     0.267    25.283  -37.890  1.00  17.03
原子     289 CG2 THR A  42    -0.110    22.906  -38.078  1.00  16.03
原子     290 C   THR A  42     1.814    24.732  -35.322  1.00  17.44
原子     291 O   THR A  42     2.967    24.297  -35.382  1.00  17.10
原子     292 N   ILE A  43     1.509    25.913  -34.787  1.00  18.37
原子     293 CA  ILE A  43     2.510    26.786  -34.171  1.00  20.62
原子     294 CB  ILE A  43     2.923    27.952  -35.114  1.00  20.73
原子     295 CG1 ILE A  43     3.550    27.428  -36.411  1.00  21.88
原子     296 CD1 ILE A  43     3.788    28.507  -37.508  1.00  22.99
原子     297 CG2 ILE A  43     3.895    28.910  -34.409  1.00  21.41
原子     298 C   ILE A  43     1.908    27.395  -32.935  1.00  21.00
原子     299 O   ILE A  43     0.796    27.921  -32.995  1.00  21.76
原子     300 N   ASP A  44     2.683    27.470  -31.874  1.00  21.61
原子     301 CA  ASP A  44     2.237    27.975  -30.572  1.00  23.04
原子     302 CB  ASP A  44     2.408    29.506  -30.492  1.00  24.75
原子     303 CG  ASP A  44     2.170    30.064  -29.098  1.00  31.28
原子     304 OD1 ASP A  44     2.362    29.340  -28.094  1.00  37.92
原子     305 OD2 ASP A  44     1.766    31.260  -28.997  1.00  40.00
原子     306 C   ASP A  44     0.782    27.608  -30.196  1.00  21.65
原子     307 O   ASP A  44    -0.046    28.502  -29.981  1.00  22.69
原子     308 N   PRO A  45     0.441    26.449  -29.805  1.00  19.86
原子     309 CA  PRO A  45     1.356    25.320  -29.775  1.00  18.66
原子     310 CB  PRO A  45     0.883    24.549  -28.549  1.00  18.40
原子     311 CG  PRO A  45    -0.653    24.763  -28.586  1.00  18.13
原子     312 CD  PRO A  45    -0.899    26.066  -29.318  1.00  20.04
原子     313 C   PRO A  45     1.253    24.454  -31.026  1.00  17.74
原子     314 O   PRO A  45     0.368    24.652  -31.858  1.00  17.36
原子     315 N   ASP A  46     2.178    23.512  -31.160  1.00  15.95
原子     316 CA  ASP A  46     2.124    22.573  -32.275  1.00  14.75
原子     317 CB  ASP A  46     3.551    22.255  -32.738  1.00  14.59
原子     318 CG  ASP A  46     3.601    21.161  -33.818  1.00  16.17
原子     319 OD1 ASP A  46     2.543    20.787  -34.389  1.00  15.61
原子     320 OD2 ASP A  46     4.712    20.641  -34.054  1.00  20.18
原子     321 C   ASP A  46     1.436    21.303  -31.748  1.00  13.83
原子     322 O   ASP A  46     2.081    20.489  -31.089  1.00  13.59
原子     323 N   TYR A  47     0.126    21.165  -31.992  1.00  11.86
原子     324 CA  TYR A  47    -0.621    19.975  -31.580  1.00  12.11
原子     325 CB  TYR A  47    -1.895    20.387  -30.854  1.00  11.69
原子     326 CG  TYR A  47    -1.773    20.722  -29.377  1.00  12.59
原子     327 CD1 TYR A  47    -0.589    21.236  -28.827  1.00  13.54
原子     328 CE1 TYR A  47    -0.524    21.586  -27.462  1.00  12.81
原子     329 CZ  TYR A  47    -1.652    21.407  -26.673  1.00  13.40
原子     330 OH  TYR A  47    -1.620    21.755  -25.354  1.00  13.08
原子     331 CE2 TYR A  47    -2.825    20.887  -27.208  1.00  12.02
原子     332 CD2 TYR A  47    -2.876    20.540  -28.532  1.00  12.76
原子     333 C   TYR A  47    -0.994    19.090  -32.772  1.00  11.46
原子     334 O   TYR A  47    -1.885    18.239  -32.692  1.00  11.66
原子     335 N   TYR A  48    -0.316    19.301  -33.893  1.00  12.26
原子     336 CA  TYR A  48    -0.697    18.639  -35.132  1.00  12.80
原子     337 CB  TYR A  48    -0.323    19.509  -36.348  1.00  12.75
原子     338 CG  TYR A  48    -1.134    19.146  -37.569  1.00  13.21
原子     339 CD1 TYR A  48    -2.492    19.482  -37.652  1.00  14.46
原子     340 CE1 TYR A  48    -3.254    19.124  -38.767  1.00  15.86
原子     341 CZ  TYR A  48    -2.643    18.453  -39.823  1.00  14.62
原子     342 OH  TYR A  48    -3.390    18.106  -40.936  1.00  16.20
原子     343 CE2 TYR A  48    -1.295    18.086  -39.756  1.00  15.86
原子     344 CD2 TYR A  48    -0.543    18.456  -38.638  1.00  13.44
原子     345 C   TYR A  48    -0.072    17.245  -35.187  1.00  13.47
原子     346 O   TYR A  48     0.877    16.986  -35.940  1.00  13.95
原子     347 N   TYR A  49    -0.592    16.360  -34.338  1.00  13.13
原子     348 CA  TYR A  49    -0.131    14.987  -34.171  1.00  13.51
原子     349 CB  TYR A  49     0.887    14.842  -33.009  1.00  13.11
原子     350 CG  TYR A  49     2.133    15.662  -33.216  1.00  13.90
原子     351 CD1 TYR A  49     3.193    15.174  -33.996  1.00  13.54
原子     352 CE1 TYR A  49     4.354    15.964  -34.216  1.00  13.41
原子     353 CZ  TYR A  49     4.419    17.225  -33.665  1.00  14.69
原子     354 OH  TYR A  49     5.511    18.016  -33.883  1.00  17.21
原子     355 CE2 TYR A  49     3.365    17.737  -32.906  1.00  13.49
原子     356 CD2 TYR A  49     2.227    16.952  -32.698  1.00  13.78
原子     357 C   TYR A  49    -1.349    14.181  -33.783  1.00  13.93
原子     358 O   TYR A  49    -2.390    14.759  -33.406  1.00  13.00
原子     359 N   MET A  50    -1.203    12.857  -33.839  1.00  13.66
原子     360 CA  MET A  50    -2.241    11.940  -33.365  1.00  14.56
原子     361 CB  MET A  50    -2.447    10.822  -34.381  1.00  15.21
原子     362 CG  MET A  50    -3.532    9.811   -33.947  1.00  15.64
原子     363 SD  MET A  50    -3.996    8.804   -35.361  1.00  19.52
原子     364 CE  MET A  50    -5.204    7.742   -34.566  1.00  17.12
原子     365 C   MET A  50    -1.797    11.323  -32.060  1.00  14.38
原子     366 O   MET A  50    -0.806    10.583  -32.024  1.00  13.80
原子     367 N   TRP A  51    -2.528    11.608  -30.984  1.00  13.47
原子     368 CA  TRP A  51    -2.265    10.965  -29.720  1.00  13.13
原子     369 CB  TRP A  51    -2.598    11.930  -28.585  1.00  12.85
原子     370 CG  TRP A  51    -1.478    12.809  -28.116  1.00  13.64
原子     371 CD1 TRP A  51    -0.671    12.604  -27.011  1.00  13.49
原子     372 NE1 TRP A  51     0.211    13.657  -26.864  1.00  12.36
原子     373 CE2 TRP A  51    -0.023    14.573  -27.858  1.00  11.83
原子     374 CD2 TRP A  51    -1.076    14.065  -28.674  1.00  13.12
原子     375 CE3 TRP A  51    -1.506    14.825  -29.772  1.00  11.07
原子     376 CZ3 TRP A  51    -0.859    16.061  -30.035  1.00  12.87
原子     377 CH2 TRP A  51     0.193    16.522  -29.218  1.00  13.24
原子     378 CZ2 TRP A  51     0.618    15.806  -28.127  1.00  12.61
原子     379 C   TRP A  51    -3.136    9.732   -29.575  1.00  13.35
原子     380 O   TRP A  51    -4.322    9.769   -29.907  1.00  12.89
原子     381 N   THR A  52    -2.576    8.652   -29.024  1.00  13.20
原子     382 CA  THR A  52    -3.386    7.462   -28.753  1.00  13.02
原子     383 CB  THR A  52    -2.520    6.300   -28.235  1.00  13.66
原子     384 OG1 THR A  52    -1.553    5.999   -29.246  1.00  15.07
原子     385 CG2 THR A  52    -3.341    5.026   -27.952  1.00  12.21
原子     386 C   THR A  52    -4.533    7.807   -27.800  1.00  12.48
原子     387 O   THR A  52    -5.670    7.402   -28.034  1.00  12.78
原子     388 N   ARG A  53    -4.224    8.556   -26.747  1.00  12.03
原子     389 CA  ARG A  53    -5.238    8.868   -25.737  1.00  11.89
原子     390 CB  ARG A  53    -4.607    9.570   -24.545  1.00  11.46
原子     391 CG  ARG A  53    -5.611    10.330  -23.618  1.00  13.19
原子     392 CD  ARG A  53    -4.896    10.881  -22.375  1.00  11.14
原子     393 NE  ARG A  53    -3.793    11.694  -22.819  1.00  12.52
原子     394 CZ  ARG A  53    -2.509    11.330  -22.769  1.00  13.67
原子     395 NH1 ARG A  53    -2.148    10.182  -22.180  1.00  13.97
原子     396 NH2 ARG A  53    -1.590    12.151  -23.270  1.00  13.05
原子     397 C   ARG A  53    -6.395    9.709   -26.319  1.00  12.45
原子     398 O   ARG A  53    -7.558    9.289   -26.244  1.00  11.74
原子     399 N   ASP A  54    -6.090    10.885  -26.874  1.00  11.73
原子     400 CA  ASP A  54    -7.169    11.747  -27.385  1.00  11.90
原子     401 CB  ASP A  54    -6.638    13.018  -28.053  1.00  12.25
原子     402 CG  ASP A  54    -5.794    13.879  -27.120  1.00  13.97
原子     403 OD1 ASP A  54    -4.983    13.332  -26.354  1.00  13.57
原子     404 OD2 ASP A  54    -5.910    15.110  -27.215  1.00  13.88
原子     405 C   ASP A  54    -8.002    11.005  -28.420  1.00  12.00
原子     406 O   ASP A  54    -9.236    11.138  -28.454  1.00  10.97
原子     407 N   SER A  55    -7.334    10.250  -29.297  1.00  11.19
原子     408 CA  SER A  55    -8.034    9.544   -30.388  1.00  12.36
原子     409 CB  SER A  55    -7.017    8.901   -31.340  1.00  13.05
原子     410 OG  SER A  55    -6.171    9.930   -31.882  1.00  14.23
原子     411 C   SER A  55    -8.996    8.489   -29.838  1.00  12.57
原子     412 O   SER A  55    -10.130   8.348   -30.327  1.00  12.76
原子     413 N   ALA A  56    -8.556    7.764   -28.819  1.00  12.60
原子     414 CA  ALA A  56    -9.373    6.718   -28.218  1.00  13.25
原子     415 CB  ALA A  56    -8.517    5.830   -27.329  1.00  12.73
原子     416 C   ALA A  56    -10.551   7.301   -27.415  1.00  13.85
原子     417 O   AIA A  56    -11.640   6.723   -27.409  1.00  14.51
原子     418 N   LEU A  57    -10.328   8.420   -26.723  1.00  14.23
原子     419 CA  LEU A  57    -11.417   9.059   -25.954  1.00  13.95
原子     420 CB  LEU A  57    -10.891   10.186  -25.060  1.00  14.45
原子     421 CG  LEU A  57    -10.088   9.751   -23.834  1.00  14.89
原子     422 CD1 LEU A  57    -9.507    11.013  -23.161  1.00  16.19
原子     423 CD2 LEU A  57    -10.919   8.911   -22.867  1.00  16.02
原子     424 C   LEU A  57    -12.483   9.609   -26.886  1.00  13.92
原子     425 O   LEU A  57    -13.685   9.488   -26.627  1.00  13.70
原子     426 N   VAL A  58    -12.027   10.199  -27.975  1.00  13.15
原子     427 CA  VAL A  58    -12.920   10.751  -28.989  1.00  15.20
原子     428 CB  VAL A  58    -12.133   11.605  -30.031  1.00  14.52
原子     429 CG1 VAL A  58    -12.970   11.861  -31.302  1.00  17.86
原子     430 CG2 VAL A  58    -11.704   12.954  -29.393  1.00  15.79
原子     431 C   VAL A  58    -13.704   9.624   -29.655  1.00  15.20
原子     432 O   VAL A  58    -14.930   9.718   -29.784  1.00  15.30
原子     433 N   PHE A  59    -13.026   8.553   -30.058  1.00  15.02
原子     434 CA  PHE A  59    -13.766   7.477   -30.713  1.00  15.23
原子     435 CB  PHE A  59    -12.882   6.601   -31.582  1.00  15.78
原子     436 CG  PHE A  59    -12.859   7.058   -33.003  1.00  15.10
原子     437 CD1 PHE A  59    -11.872   7.927   -33.444  1.00  16.45
原子     438 CE1 PHE A  59    -11.861   8.401   -34.768  1.00  19.37
原子     439 CZ  PHE A  59    -12.876   8.026   -35.644  1.00  16.44
原子     440 CE2 PHE A  59    -13.901   7.165   -35.186  1.00  16.90
原子     441 CD2 PHE A  59    -13.895   6.709   -33.882  1.00  16.17
原子     442 C   PHE A  59    -14.674   6.681   -29.785  1.00  15.69
原子     443 O   PHE A  59    -15.699   6.175   -30.220  1.00  15.46
原子     444 N   LYS A  60    -14.321   6.586   -28.510  1.00  15.65
原子     445 CA  LYS A  60    -15.257   5.994   -27.552  1.00  16.61
原子     446 CB  LYS A  60    -14.661   5.954   -26.144  1.00  16.44
原子     447 CG  LYS A  60    -15.626   5.363   -25.059  1.00  17.65
原子     448 CD  LYS A  60    -16.174   3.992   -25.433  1.00  18.35
原子     449 CE  LYS A  60    -16.738   3.234   -24.199  1.00  19.79
原子     450 NZ  LYS A  60    -17.819   3.976   -23.512  1.00  18.40
原子     451 C   LYS A  60    -16.577   6.779   -27.579  1.00  16.72
原子     452 O   LYS A  60    -17.663   6.182   -27.681  1.00  17.08
原子     453 N   ASN A  61    -16.487   8.101   -27.508  1.00  16.77
原子     454 CA  ASN A  61    -17.680   8.948   -27.628  1.00  18.06
原子     455 CB  ASN A  61    -17.278   10.424  -27.573  1.00  19.41
原子     456 CG  ASN A  61    -18.465   11.375  -27.643  1.00  22.93
原子     457 OD1 ASN A  61    -19.585   11.057  -27.231  1.00  30.05
原子     458 ND2 ASN A  61    -18.206   12.568  -28.130  1.00  29.54
原子     459 C   ASN A  61    -18.480   8.659   -28.907  1.00  17.28
原子     460 O   ASN A  61    -19.697   8.475   -28.852  1.00  18.11
原子     461 N   LEU A  62    -17.799   8.647   -30.056  1.00  16.54
原子     462 CA  LEU A  62    -18.460   8.379   -31.334  1.00  16.19
原子     463 CB  LEU A  62    -17.479   8.572   -32.499  1.00  16.85
原子     464 CG  LEU A  62    -17.047   10.027  -32.697  1.00  18.47
原子     465 CD1 LEU A  62    -16.118   10.153  -33.916  1.00  20.38
原子     466 CD2 LEU A  62    -18.263   10.925  -32.837  1.00  19.93
原子     467 C   LEU A  62    -19.089   6.991   -31.371  1.00  16.01
原子     468 O   LEU A  62    -20.225   6.833   -31.842  1.00  15.98
原子     469 N   ILE A  63    -18.387   5.998   -30.831  1.00  15.67
原子     470 CA  ILE A  63    -18.910   4.628   -30.810  1.00  15.86
原子     471 CB  ILE A  63    -17.803   3.610   -30.372  1.00  15.88
原子     472 CG1 ILE A  63    -16.756   3.466   -31.478  1.00  14.98
原子     473 CD1 ILE A  63    -15.375   2.976   -30.966  1.00  15.62
原子     474 CG2 ILE A  63    -18.398   2.251   -30.016  1.00  15.96
原子     475 C   ILE A  63    -20.156   4.538   -29.920  1.00  16.39
原子     476 O   ILE A  63    -21.137   3.854   -30.272  1.00  16.90
原子     477 N   ASP A  64    -20.129   5.242   -28.796  1.00  16.51
原子     478 CA  ASP A  64    -21.299   5.324   -27.922  1.00  17.76
原子     479 CB  ASP A  64    -20.953   6.022   -26.594  1.00  17.81
原子     480 CG  ASP A  64    -20.089   5.164   -25.682  1.00  17.84
原子     481 OD1 ASP A  64    -19.883   3.944   -25.963  1.00  18.57
原子     482 OD2 ASP A  64    -19.595   5.699   -24.659  1.00  20.95
原子     483 C   ASP A  64    -22.492   5.982   -28.617  1.00  18.64
原子     484 O   ASP A  64    -23.617   5.493   -28.507  1.00  20.85
原子     485 N   ARG A  65    -22.262   7.070   -29.348  1.00  19.57
原子     486 CA  ARG A  65    -23.341   7.750   -30.097  1.00  20.59
原子     487 CB  ARG A  65    -22.823   9.046   -30.733  1.00  20.62
原子     488 CG  ARG A  65    -22.465   10.083  -29.693  1.00  25.00
原子     489 CD  ARG A  65    -22.010   11.385  -30.324  1.00  28.44
原子     490 NE  ARG A  65    -23.106   12.071  -30.990  1.00  31.14
原子     491 CZ  ARG A  65    -23.968   12.878  -30.373  1.00  32.75
原子     492 NH1 ARG A  65    -23.873   13.095  -29.060  1.00  32.10
原子     493 NH2 ARG A  65    -24.928   13.459  -31.080  1.00  32.31
原子     494 C   ARG A  65    -23.907   6.841   -31.184  1.00  20.83
原子     495 O   ARG A  65    -25.129   6.711   -31.357  1.00  20.48
原子     496 N   PHE A  66    -22.998   6.213   -31.910  1.00  20.52
原子     497 CA  PHE A  66    -23.340   5.271   -32.966  1.00  21.42
原子     498 CB  PHE A  66    -22.046   4.778   -33.604  1.00  21.97
原子     499 CG  PHE A  66    -22.224   3.603   -34.520  1.00  21.97
原子     500 CD1 PHE A  66    -22.601   3.791   -35.844  1.00  23.23
原子     501 CE1 PHE A  66    -22.768   2.690   -36.699  1.00  22.87
原子     502 CZ  PHE A  66    -22.552   1.409   -36.221  1.00  22.60
原子     503 CE2 PHE A  66    -22.165   1.216   -34.895  1.00  23.74
原子     504 CD2 PHE A  66    -22.006   2.309   -34.054  1.00  23.07
原子     505 C   PHE A  66    -24.152   4.084   -32.415  1.00  21.98
原子     506 O   PHE A  66    -25.040   3.551   -33.099  1.00  21.80
原子     507 N   THR A  67    -23.831   3.654   -31.195  1.00  22.48
原子     508 CA  THR A  67    -24.546   2.537   -30.576  1.00  23.79
原子     509 CB  THR A  67    -23.809   1.999   -29.333  1.00  23.68
原子     510 OG1 THR A  67    -22.551   1.439   -29.745  1.00  23.93
原子     511 CG2 THR A  67    -24.613   0.881   -28.653  1.00  23.90
原子     512 C   THR A  67    -25.992   2.925   -30.258  1.00  24.77
原子     513 O   THR A  67    -26.893   2.090   -30.349  1.00  25.31
原子     514 N   GLU A  68    -26.207   4.189   -29.916  1.00  25.62
原子     515 CA  GLU A  68    -27.540   4.688   -29.616  1.00  27.41
原子     516 CB  GLU A  68    -27.466   6.038   -28.894  1.00  28.13
原子     517 CG  GLU A  68    -26.997   5.951   -27.446  1.00  32.86
原子     518 CD  GLU A  68    -28.095   5.487   -26.468  1.00  38.33
原子     519 OE1 GLU A  68    -29.241   5.982   -26.542  1.00  40.42
原子     520 OE2 GLU A  68    -27.799   4.633   -25.607  1.00  42.48
原子     521 C   GLU A  68    -28.418   4.784   -30.873  1.00  27.86
原子     522 O   GLU A  68    -29.602   4.429   -30.845  1.00  28.00
原子     523 N   THR A  69    -27.833   5.260   -31.968  1.00  27.32
原子     524 CA  THR A  69    -28.540   5.373   -33.241  1.00  27.32
原子     525 CB  THR A  69    -29.113   6.792   -33.451  1.00  27.49
原子     526 OG1 THR A  69    -29.922   7.153   -32.334  1.00  30.86
原子     527 CG2 THR A  69    -29.945   6.843   -34.719  1.00  29.06
原子     528 C   THR A  69    -27.563   5.133   -34.359  1.00  26.07
原子     529 O   THR A  69    -26.619   5.905   -34.523  1.00  25.25
原子     530 N   TYR A  70    -27.790   4.064   -35.123  1.00  25.65
原子     531 CA  TYR A  70    -26.948   3.738   -36.267  1.00  25.36
原子     532 CB  TYR A  70    -27.480   2.504   -37.013  1.00  25.26
原子     533 CG  TYR A  70    -26.638   2.104   -38.217  1.00  25.62
原子     534 CD1 TYR A  70    -26.949   2.567   -39.498  1.00  25.62
原子     535 CE1 TYR A  70    -26.190   2.201   -40.611  1.00  26.48
原子     536 CZ  TYR A  70    -25.099   1.360   -40.437  1.00  25.36
原子     537 OH  TYR A  70    -24.354   0.995   -41.520  1.00  24.80
原子     538 CE2 TYR A  70    -24.770   0.883   -39.175  1.00  25.59
原子     539 CD2 TYR A  70    -25.538   1.259   -38.071  1.00  25.36
原子     540 C   TYR A  70    -26.816   4.909   -37.230  1.00  25.38
原子     541 O   TYR A  70    -27.802   5.573   -37.583  1.00  24.87
原子     542 N   ASP A  71    -25.575   5.127   -37.666  1.00  25.16
原子     543 CA  ASP A  71    -25.188   6.210   -38.550  1.00  25.40
原子     544 CB  ASP A  71    -24.668   7.404   -37.724  1.00  25.60
原子     545 CG  ASP A  71    -24.361   8.642   -38.573  1.00  26.17
原子     546 OD1 ASP A  71    -23.801   8.526   -39.681  1.00  25.82
原子     547 OD2 ASP A  71    -24.675   9.755   -38.108  1.00  27.85
原子     548 C   ASP A  71    -24.061   5.619   -39.386  1.00  25.64
原子     549 O   ASP A  71    -22.956   5.377   -38.875  1.00  24.82
原子     550 N   ALA A  72    -24.347   5.379   -40.665  1.00  24.95
原子     551 CA  ALA A  72    -23.380   4.764   -41.586  1.00  24.24
原子     552 CB  ALA A  72    -24.047   4.434   -42.921  1.00  24.35
原子     553 C   ALA A  72    -22.152   5.657   -41.812  1.00  24.04
原子     554 O   ALA A  72    -21.054   5.159   -42.086  1.00  23.21
原子     555 N   GLY A  73    -22.356   6.970   -41.695  1.00  23.63
原子     556 CA  GLY A  73    -21.265   7.938   -41.761  1.00  24.20
原子     557 C   GLY A  73    -20.285   7.809   -40.596  1.00  23.85
原子     558 O   GLY A  73    -19.067   7.927   -40.806  1.00  24.81
原子     559 N   LEU A  74    -20.798   7.588   -39.376  1.00  22.78
原子     560 CA  LEU A  74    -19.927   7.347   -38.232  1.00  22.21
原子     561 CB  LEU A  74    -20.662   7.449   -36.879  1.00  22.58
原子     562 CG  LEU A  74    -21.132   8.846   -36.434  1.00  24.06
原子     563 CD1 LEU A  74    -21.732   8.793   -35.019  1.00  22.31
原子     564 CD2 LEU A  74    -20.002   9.869   -36.503  1.00  26.04
原子     565 C   LEU A  74    -19.256   5.999   -38.370  1.00  21.94
原子     566 O   LEU A  74    -18.060   5.872   -38.098  1.00  20.62
原子     567 N   GLN A  75    -20.019   4.988   -38.814  1.00  21.47
原子     568 CA  GLN A  75    -19.451   3.654   -38.989  1.00  21.07
原子     569 CB  GLN A  75    -20.469   2.709   -39.619  1.00  21.44
原子     570 CG  GLN A  75    -20.002   1.280   -39.594  1.00  23.11
原子     571 CD  GLN A  75    -21.101   0.312   -39.945  1.00  24.74
原子     572 OE1 GLN A  75    -21.273  -0.719   -39.290  1.00  26.57
原子     573 NE2 GLN A  75    -21.872   0.654   -40.950  1.00  23.71
原子     574 C   GLN A  75    -18.219   3.704   -39.889  1.00  21.05
原子     575 O   GLN A  75    -17.229   3.046   -39.611  1.00  21.10
原子     576 N   ARG A  76    -18.294   4.466   -40.975  1.00  20.73
原子     577 CA  ARG A  76    -17.184   4.551   -41.910  1.00  21.56
原子     578 CB  ARG A  76    -17.544   5.460   -43.101  1.00  22.06
原子     579 CG  ARG A  76    -16.452   5.627   -44.168  1.00  24.00
原子     580 CD  ARG A  76    -15.586   6.895   -43.934  1.00  27.60
原子     581 NE  ARG A  76    -16.275   8.150   -44.280  1.00  30.93
原子     582 CZ  ARG A  76    -15.778   9.378   -44.082  1.00  32.20
原子     583 NH1 ARG A  76    -14.572   9.556   -43.535  1.00  30.72
原子     584 NH2 ARG A  76    -16.491   10.443  -44.437  1.00  32.29
原子     585 C   ARG A  76    -15.942   5.063   -41.162  1.00  20.85
原子     586 O   ARG A  76    -14.858   4.514   -41.296  1.00  20.93
原子     587 N   ARG A  77    -16.116   6.119   -40.378  1.00  20.17
原子     588 CA  ARG A  77    -14.990   6.723   -39.631  1.00  19.61
原子     589 CB  ARG A  77    -15.419   8.058   -39.009  1.00  19.11
原子     590 CG  ARG A  77    -15.719   9.106   -40.075  1.00  20.18
原子     591 CD  ARG A  77    -16.379   10.299  -39.459  1.00  22.42
原子     592 NE  ARG A  77    -16.489   11.411  -40.396  1.00  24.06
原子     593 CZ  ARG A  77    -17.501   11.592  -41.243  1.00  27.81
原子     594 NH1 ARG A  77    -18.508   10.714  -41.303  1.00  28.01
原子     595 NH2 ARG A  77    -17.509   12.658  -42.033  1.00  27.19
原子     596 C   ARG A  77    -14.425   5.789   -38.570  1.00  18.77
原子     597 O   ARG A  77    -13.197   5.685   -38.411  1.00  18.64
原子     598 N   ILE A  78    -15.320   5.117   -37.852  1.00  17.79
原子     599 CA  ILE A  78    -14.931   4.125   -36.857  1.00  18.13
原子     600 CB  ILE A  78    -16.165   3.514   -36.151  1.00  17.88
原子     601 CG1 ILE A  78    -16.862   4.564   -35.282  1.00  18.78
原子     602 CD1 ILE A  78    -18.274   4.154   -34.879  1.00  19.16
原子     603 CG2 ILE A  78    -15.772   2.279   -35.308  1.00  18.15
原子     604 C   ILE A  78    -14.105   3.012   -37.491  1.00  18.09
原子     605 O   ILE A  78    -13.088   2.612   -36.949  1.00  17.42
原子     606 N   GLU A  79    -14.565   2.495   -38.631  1.00  18.82
原子     607 CA  GLU A  79    -13.826   1.446   -39.341  1.00  20.22
原子     608 CB  GLU A  79    -14.587   1.017   -40.609  1.00  20.36
原子     609 CG  GLU A  79    -15.811   0.136   -40.312  1.00  22.29
原子     610 CD  GLU A  79    -16.633  -0.206   -41.565  1.00  22.92
原子     611 OE1 GLU A  79    -16.345   0.328   -42.670  1.00  26.99
原子     612 OE2 GLU A  79    -17.579  -1.012   -41.425  1.00  25.69
原子     613 C   GLU A  79    -12.418   1.918   -39.704  1.00  18.80
原子     614 O   GLU A  79    -11.450   1.191   -39.507  1.00  19.44
原子     615 N   GLN A  80    -12.301   3.147   -40.211  1.00  18.84
原子     616 CA  GLN A  80    -10.998   3.661   -40.636  1.00  17.90
原子     617 CB  GLN A  80    -11.149   4.921   -41.482  1.00  18.92
原子     618 CG  GLN A  80    -11.794   4.593   -42.844  1.00  21.99
原子     619 CD  GLN A  80    -12.040   5.799   -43.707  1.00  27.48
原子     620 OE1 GLN A  80    -12.265   6.898   -43.223  1.00  30.45
原子     621 NE2 GLN A  80    -12.037   5.586   -45.013  1.00  32.63
原子     622 C   GLN A  80    -10.059   3.892   -39.456  1.00  17.64
原子     623 O   GLN A  80    -8.862    3.612   -39.535  1.00  17.21
原子     624 N   TYR A  81    -10.607   4.408   -38.365  1.00  17.29
原子     625 CA  TYR A  81    -9.839    4.552   -37.122  1.00  17.64
原子     626 CB  TYR A  81    -10.750   5.139   -36.023  1.00  17.24
原子     627 CG  TYR A  81    -10.188   4.973   -34.621  1.00  17.79
原子     628 CD1 TYR A  81    -9.085    5.728   -34.184  1.00  16.36
原子     629 CE1 TYR A  81    -8.561    5.568   -32.882  1.00  17.45
原子     630 CZ  TYR A  81    -9.146    4.646   -32.009  1.00  16.35
原子     631 OH  TYR A  81    -8.654    4.457   -30.724  1.00  17.06
原子     632 CE2 TYR A  81    -10.238   3.890   -32.423  1.00  17.51
原子     633 CD2 TYR A  81    -10.754   4.055   -33.729  1.00  17.00
原子     634 C   TYR A  81    -9.271    3.197   -36.686  1.00  18.04
原子     635 O   TYR A  81    -8.098    3.083   -36.321  1.00  17.85
原子     636 N   ILE A  82    -10.096   2.159   -36.746  1.00  17.99
原子     637 CA  ILE A  82    -9.661    0.839   -36.295  1.00  19.35
原子     638 CB  ILE A  82    -10.844  -0.166   -36.187  1.00  18.93
原子     639 CG1 ILE A  82    -11.753   0.233   -35.017  1.00  19.40
原子     640 CD1 ILE A  82    -13.093  -0.565   -34.896  1.00  20.46
原子     641 CG2 ILE A  82    -10.301  -1.587   -35.984  1.00  20.61
原子     642 C   ILE A  82    -8.547    0.292   -37.194  1.00  19.92
原子     643 O   ILE A  82    -7.543   -0.239   -36.708  1.00  20.26
原子     644 N   THR A  83    -8.713    0.432   -38.503  1.00  20.05
原子     645 CA  THR A  83    -7.709   -0.100   -39.406  1.00  21.11
原子     646 CB  THR A  83    -8.241   -0.297   -40.845  1.00  21.63
原子     647 OG1 THR A  83    -8.830    0.902   -41.306  1.00  25.88
原子     648 CG2 THR A  83    -9.330   -1.347   -40.851  1.00  21.56
原子     649 C   THR A  83    -6.410    0.690   -39.337  1.00  20.59
原子     650 O   THR A  83    -5.338    0.105   -39.511  1.00  20.72
原子     651 N   ALA A  84    -6.494    1.997   -39.050  1.00  19.51
原子     652 CA  ALA A  84    -5.292    2.809   -38.777  1.00  19.37
原子     653 CB  ALA A  84    -5.652    4.290   -38.507  1.00  19.42
原子     654 C   ALA A  84    -4.436    2.231   -37.643  1.00  19.32
原子     655 O   ALA A  84    -3.208    2.370   -37.649  1.00  19.47
原子     656 N   GLN A  85    -5.063    1.535   -36.695  1.00  19.34
原子     657 CA  GLN A  85    -4.325    0.998   -35.544  1.00  18.78
原子     658 CB  GLN A  85    -5.266    0.609   -34.396  1.00  19.29
原子     659 CG  GLN A  85    -6.260    1.735   -34.007  1.00  17.98
原子     660 CD  GLN A  85    -5.593    3.098   -33.830  1.00  17.20
原子     661 OE1 GLN A  85    -6.021    4.095   -34.418  1.00  20.82
原子     662 NE2 GLN A  85    -4.540    3.143   -33.034  1.00  13.47
原子     663 C   GLN A  85    -3.447   -0.178   -35.932  1.00  19.08
原子     664 O   GLN A  85    -2.478   -0.473   -35.251  1.00  17.94
原子     665 N   VAL A  86    -3.808   -0.838   -37.032  1.00  19.32
原子     666 CA  VAL A  86    -2.999   -1.928   -37.588  1.00  20.79
原子     667 CB  VAL A  86    -3.670   -2.581   -38.823  1.00  21.18
原子     668 CG1 VAL A  86    -2.712   -3.615   -39.454  1.00  22.66
原子     669 CG2 VAL A  86    -4.980   -3.250   -38.400  1.00  21.47
原子     670 C   VAL A  86    -1.617   -1.381   -37.940  1.00  20.63
原子     671 O   VAL A  86    -0.602   -1.930   -37.520  1.00  21.41
原子     672 N   THR A  87    -1.604   -0.251   -38.641  1.00  20.67
原子     673 CA  THR A  87    -0.361    0.419   -39.015  1.00  21.10
原子     674 CB  THR A  87    -0.659    1.583   -39.986  1.00  21.59
原子     675 OG1 THR A  87    -1.176    1.033   -41.202  1.00  23.63
原子     676 CG2 THR A  87     0.585    2.370   -40.305  1.00  22.02
原子     677 C   THR A  87     0.412    0.881   -37.795  1.00  20.28
原子     678 O   THR A  87     1.620    0.641   -37.679  1.00  20.22
原子     679 N   LEU A  88    -0.280    1.543   -36.874  1.00  19.11
原子     680 CA  LEU A  88     0.367    2.097   -35.697  1.00  18.71
原子     681 CB  LEU A  88    -0.585    3.015   -34.903  1.00  18.08
原子     682 CG  LEU A  88    -1.016    4.294   -35.596  1.00  18.50
原子     683 CD1 LEU A  88    -2.038    5.058   -34.706  1.00  19.12
原子     684 CD2 LEU A  88     0.206    5.193   -35.937  1.00  19.81
原子     685 C   LEU A  88     0.976    1.057   -34.780  1.00  18.33
原子     686 O   LEU A  88     2.101    1.244   -34.336  1.00  18.76
原子     687 N   GLN A  89     0.255   -0.029   -34.492  1.00  18.75
原子     688 CA  GLN A  89     0.809   -1.085   -33.623  1.00  19.67
原子     689 CB  GLN A  89    -0.199   -2.201   -33.373  1.00  19.69
原子     690 CG  GLN A  89    -1.397   -1.775   -32.564  1.00  19.25
原子     691 CD  GLN A  89    -2.140   -2.951   -32.004  1.00  20.83
原子     692 OE1 GLN A  89    -2.121   -4.037   -32.580  1.00  19.26
原子     693 NE2 GLN A  89    -2.802   -2.751   -30.861  1.00  19.61
原子     694 C   GLN A  89     2.097   -1.683   -34.203  1.00  20.68
原子     695 O   GLN A  89     3.013   -2.026   -33.461  1.00  21.21
原子     696 N   GLY A  90     2.164   -1.778   -35.524  1.00  21.75
原子     697 CA  GLY A  90     3.330   -2.374   -36.173  1.00  23.35
原子     698 C   GLY A  90     4.604   -1.552   -36.096  1.00  24.79
原子     699 O   GLY A  90     5.699   -2.104   -36.299  1.00  25.52
原子     700 N   ASN A  91     4.477   -0.252   -35.796  1.00  25.17
原子     701 CA  ASN A  91     5.596    0.714   -35.870  1.00  26.14
原子     702 CB  ASN A  91     5.108    2.161   -35.653  1.00  26.83
原子     703 CG  ASN A  91     4.615    2.849   -36.919  1.00  29.67
原子     704 OD1 ASN A  91     4.869    2.414   -38.051  1.00  34.53
原子     705 ND2 ASN A  91     3.927    3.981   -36.724  1.00  32.76
原子     706 C   ASN A  91     6.656    0.489   -34.820  1.00  25.67
原子     707 O   ASN A  91     6.346    0.385   -33.644  1.00  25.70
原子     708 N   SER A  92     7.918    0.472   -35.227  1.00  25.32
原子     709 CA  SER A  92     8.990    0.668   -34.257  1.00  25.27
原子     710 CB  SER A  92     10.314   0.107   -34.775  1.00  26.03
原子     711 OG  SER A  92     10.212  -1.305   -34.803  1.00  30.67
原子     712 C   SER A  92     9.103    2.171   -34.003  1.00  23.80
原子     713 O   SER A  92     9.055    2.979   -34.942  1.00  24.56
原子     714 N   ASN A  93     9.246    2.544   -32.743  1.00  22.30
原子     715 CA  ASN A  93     9.236    3.953   -32.383  1.00  21.23
原子     716 CB  ASN A  93     7.769    4.423   -32.201  1.00  21.41
原子     717 CG  ASN A  93     7.075    3.704   -31.051  1.00  19.23
原子     718 OD1 ASN A  93     7.564    3.736   -29.927  1.00  17.81
原子     719 ND2 ASN A  93     5.974    3.024   -31.335  1.00  19.43
原子     720 C   ASN A  93     10.103   4.149   -31.150  1.00  20.39
原子     721 O   ASN A  93     10.625   3.154   -30.607  1.00  19.46
原子     722 N   PRO A  94     10.337   5.410   -30.732  1.00  19.95
原子     723 CA  PRO A  94     11.228   5.604   -29.574  1.00  19.89
原子     724 CB  PRO A  94     11.235   7.131   -29.385  1.00  19.51
原子     725 CG  PRO A  94     10.988   7.653   -30.753  1.00  19.96
原子     726 CD  PRO A  94     9.952    6.717   -31.325  1.00  19.99
原子     727 C   PRO A  94     10.870   4.898   -28.263  1.00  20.64
原子     728 O   PRO A  94     11.756   4.727   -27.430  1.00  20.54
原子     729 N   SER A  95     9.610    4.485   -28.073  1.00  20.36
原子     730 CA  SER A  95     9.264    3.674   -26.902  1.00  21.00
原子     731 CB  SER A  95     7.770    3.736   -26.587  1.00  20.05
原子     732 OG  SER A  95     7.413    5.036   -26.147  1.00  19.97
原子     733 C   SER A  95     9.679    2.204   -27.066  1.00  21.73
原子     734 O   SER A  95     9.809    1.499   -26.072  1.00  22.10
原子     735 N   GLY A  96     9.853    1.748   -28.306  1.00  21.90
原子     736 CA  GLY A  96     10.229   0.350   -28.562  1.00  23.56
原子     737 C   GLY A  96     9.506   -0.196   -29.774  1.00  24.14
原子     738 O   GLY A  96     9.121    0.557   -30.664  1.00  24.24
原子     739 N   SER A  97     9.315   -1.510   -29.828  1.00  25.24
原子     740 CA  SER A  97     8.703   -2.116   -31.000  1.00  25.77
原子     741 CB  SER A  97     9.751   -2.874   -31.834  1.00  27.15
原子     742 OG  SER A  97     10.120  -4.086   -31.189  1.00  30.57
原子     743 C   SER A  97     7.590   -3.042   -30.571  1.00  25.27
原子     744 O   SER A  97     7.346   -3.199   -29.376  1.00  24.85
原子     745 N   LEU A  98     6.930   -3.655   -31.543  1.00  24.82
原子     746 CA  LEU A  98     5.826   -4.559   -31.252  1.00  25.88
原子     747 CB  LEU A  98     4.982   -4.813   -32.504  1.00  25.31
原子     748 CG  LEU A  98     3.714   -5.673   -32.420  1.00  25.89
原子     749 CD1 LEU A  98     2.745   -5.169   -31.337  1.00  25.58
原子     750 CD2 LEU A  98     3.006   -5.724   -33.778  1.00  26.27
原子     751 C   LEU A  98     6.310   -5.866   -30.604  1.00  26.75
原子     752 O   LEU A  98     5.607   -6.438   -29.762  1.00  27.41
原子     753 N   ALA A  99     7.528   -6.290   -30.950  1.00  27.23
原子     754 CA  ALA A  99     8.074   -7.590   -30.533  1.00  27.89
原子     755 CB  ALA A  99     9.566   -7.700   -30.935  1.00  27.68
原子     756 C   ALA A  99     7.893   -7.911   -29.053  1.00  27.86
原子     757 O   ALA A  99     7.450   -9.007   -28.711  1.00  28.77
原子     758 N   ASP A 100     8.241   -6.966   -28.181  1.00  27.75
原子     759 CA  ASP A 100     8.030   -7.137   -26.741  1.00  27.20
原子     760 CB  ASP A 100     9.328   -6.937   -25.966  1.00  27.10
原子     761 CG  ASP A 100     9.845   -5.525   -26.038  1.00  30.19
原子     762 OD1 ASP A 100     10.891  -5.281   -25.419  1.00  32.28
原子     763 OD2 ASP A 100     9.225   -4.654   -26.694  1.00  30.36
原子     764 C   ASP A 100     6.905   -6.256   -26.173  1.00  25.74
原子     765 O   ASP A 100     6.761   -6.108   -24.956  1.00  26.33
原子     766 N   GLY A 101     6.118   -5.683   -27.075  1.00  24.93
原子     767 CA  GLY A 101     4.982   -4.853   -26.707  1.00  23.22
原子     768 C   GLY A 101     5.326   -3.418   -26.342  1.00  22.68
原子     769 O   GLY A 101     4.419   -2.580   -26.287  1.00  21.48
原子     770 N   SER A 102     6.609   -3.117   -26.126  1.00  21.53
原子     771 CA  SER A 102     6.996   -1.815   -25.563  1.00  21.49
原子     772 CB  SER A 102     8.483   -1.739   -25.199  1.00  22.07
原子     773 OG  SER A 102     9.283   -1.958   -26.345  1.00  21.77
原子     774 C   SER A 102     6.604   -0.643   -26.449  1.00  20.66
原子     775 O   SER A 102     6.279    0.403   -25.925  1.00  20.67
原子     776 N   GLY A 103     6.636   -0.819   -27.771  1.00  19.97
原子     777 CA  GLY A 103     6.257    0.255   -28.707  1.00  19.46
原子     778 C   GLY A 103     4.824    0.777   -28.539  1.00  18.94
原子     779 O   GLY A 103     4.525    1.903   -28.945  1.00  18.13
原子     780 N   LEU A 104     3.939   -0.043   -27.956  1.00  18.13
原子     781 CA  LEU A 104     2.517    0.326   -27.818  1.00  16.92
原子     782 CB  LEU A 104     1.672   -0.924   -27.447  1.00  17.28
原子     783 CG  LEU A 104     1.715   -2.104   -28.430  1.00  16.76
原子     784 CD1 LEU A 104     1.072   -3.356   -27.836  1.00  21.62
原子     785 CD2 LEU A 104     1.069   -1.751   -29.761  1.00  19.06
原子     786 C   LEU A 104     2.283    1.464   -26.798  1.00  16.57
原子     787 O   LEU A 104     1.202    2.092   -26.807  1.00  16.79
原子     788 N   GLY A 105     3.279    1.713   -25.936  1.00  14.86
原子     789 CA  GLY A 105     3.255    2.802   -24.938  1.00  15.94
原子     790 C   GLY A 105     3.558    4.199   -25.482  1.00  15.05
原子     791 O   GLY A 105     3.481    5.179   -24.755  1.00  15.93
原子     792 N   GLU A 106     3.869    4.292   -26.780  1.00  14.63
原子     793 CA  GLU A 106     4.236    5.548   -27.416  1.00  14.49
原子     794 CB  GLU A 106     4.728    5.250   -28.847  1.00  13.83
原子     795 CG  GLU A 106     5.215    6.470   -29.678  1.00  16.14
原子     796 CD  GLU.A 106     6.479    7.155   -29.139  1.00  18.44
原子     797 OE1 GLU A 106     6.978    6.817   -28.044  1.00  21.44
原子     798 OE2 GLU A 106     6.972    8.083   -29.817  1.00  21.04
原子     799 C   GLU A 106     3.012    6.484   -27.413  1.00  14.32
原子     800 O   GLU A 106     1.928    6.074   -27.828  1.00  15.51
原子     801 N   PRO A 107     3.164    7.706   -26.890  1.00  15.21
原子     802 CA  PRO A 107     2.025    8.645   -26.772  1.00  14.90
原子     803 CB  PRO A 107     2.598    9.809   -25.951  1.00  15.27
原子     804 CG  PRO A 107     3.833    9.290   -25.310  1.00  17.25
原子     805 CD  PRO A 107     4.385    8.238   -26.243  1.00  14.35
原子     806 C   PRO A 107     1.468    9.219   -28.066  1.00  14.48
原子     807 O   PRO A 107     0.263    9.371   -28.172  1.00  13.94
原子     808 N   LYS A 108     2.320    9.567   -29.027  1.00  14.24
原子     809 CA  LYS A 108     1.837    10.309  -30.204  1.00  14.51
原子     810 CB  LYS A 108     1.853    11.828  -29.960  1.00  14.26
原子     811 CG  LYS A 108     3.225    12.524  -30.029  1.00  13.88
原子     812 CD  LYS A 108     3.102    14.033  -29.775  1.00  15.15
原子     813 CE  LYS A 108     4.299    14.820  -30.283  1.00  17.08
原子     814 NZ  LYS A 108     4.341    16.279  -29.836  1.00  15.57
原子     815 C   LYS A 108     2.608    9.953   -31.454  1.00  14.69
原子     816 O   LYS A 108     3.734    9.442   -31.377  1.00  14.67
原子     817 N   PHE A 109     1.976    10.203  -32.594  1.00  14.54
原子     818 CA  PHE A 109     2.530    9.860   -33.902  1.00  15.20
原子     819 CB  PHE A 109     1.839    8.594   -34.451  1.00  15.67
原子     820 CG  PHE A 109     1.973    7.407   -33.553  1.00  16.81
原子     821 CD1 PHE A 109     1.081    7.219   -32.490  1.00  17.93
原子     822 CE1 PHE A 109     1.205    6.117   -31.649  1.00  21.93
原子     823 CZ  PHE A 109     2.241    5.210   -31.834  1.00  19.06
原子     824 CE2 PHE A 109     3.141    5.384   -32.883  1.00  20.27
原子     825 CD2 PHE A 109     3.003    6.492   -33.737  1.00  19.44
原子     826 C   PHE A 109     2.301    10.992  -34.881  1.00  15.19
原子     827 O   PHE A 109     1.450    11.861  -34.655  1.00  14.41
原子     828 N   GLU A 110     3.039    10.971  -35.993  1.00  15.14
原子     829 CA  GLU A 110     2.756    11.905  -37.077  1.00  15.24
原子     830 CB  GLU A 110     3.905    11.933  -38.103  1.00  15.00
原子     831 CG  GLU A 110     5.302    12.204  -37.493  1.00  16.29
原子     832 CD  GLU A 110     5.554    13.673  -37.174  1.00  17.52
原子     833 OE1 GLU A 110     4.708    14.544  -37.504  1.00  17.65
原子     834 OE2 GLU A 110     6.619    13.963  -36.587  1.00  18.74
原子     835 C   GLU A 110     1.462    11.476  -37.762  1.00  15.32
原子     836 O   GLU A 110     1.093    10.278  -37.753  1.00  15.26
原子     837 N   LEU A 111     0.776    12.445  -38.360  1.00  15.59
原子     838 CA  LEU A 111    -0.522    12.186  -39.009  1.00  16.33
原子     839 CB  LEU A 111    -1.265    13.510  -39.163  1.00  16.57
原子     840 CG  LEU A 111    -1.770    13.908  -37.756  1.00  18.11
原子     841 CD1 LEU A 111    -1.819    15.405  -37.574  1.00  21.43
原子     842 CD2 LEU A 111    -3.151    13.204  -37.506  1.00  18.74
原子     843 C   LEU A 111    -0.409    11.436  -40.350  1.00  17.37
原子     844 O   LEU A 111    -1.426    11.023  -40.944  1.00  17.23
原子     845 N   THR A 112     0.833    11.258  -40.815  1.00  17.42
原子     846 CA  THR A 112     1.144    10.301  -41.887  1.00  17.92
原子     847 CB  THR A 112     2.512    10.619  -42.499  1.00  17.98
原子     848 OG1 THR A 112     3.476    10.702  -41.445  1.00  18.32
原子     849 CG2 THR A 112     2.486    11.945  -43.228  1.00  19.47
原子     850 C   THR A 112     1.215    8.846   -41.356  1.00  18.90
原子     851 O   THR A 112     1.535    7.917   -42.117  1.00  17.68
原子     852 N   LEU A 113     0.944    8.664   -40.055  1.00  18.48
原子     853 CA  LEU A 113     1.041    7.379   -39.348  1.00  19.78
原子     854 CB  LEU A 113     0.061    6.319   -39.904  1.00  19.45
原子     855 CG  LEU A 113    -1.411    6.699   -40.074  1.00  21.71
原子     856 CD1 LEU A 113    -2.194    5.470   -40.477  1.00  23.46
原子     857 CD2 LEU A 113    -2.005    7.323   -38.800  1.00  21.59
原子     858 C   LEU A 113     2.481    6.866   -39.338  1.00  20.43
原子     859 O   LEU A 113     2.737    5.704   -39.653  1.00  20.96
原子     860 N   LYS A 114     3.406    7.769   -39.024  1.00  20.07
原子     861 CA  LYS A 114     4.826    7.460   -38.863  1.00  20.25
原子     862 CB  LYS A 114     5.662    8.209   -39.899  1.00  20.95
原子     863 CG  LYS A 114     5.432    7.725   -41.314  1.00  25.23
原子     864 CD  LYS A 114     6.636    8.059   -42.184  1.00  33.76
原子     865 CE  LYS A 114     6.551    7.360   -43.537  1.00  38.31
原子     866 NZ  LYS A 114     5.285    7.711   -44.251  1.00  41.29
原子     867 C   LYS A 114     5.252    7.874   -37.471  1.00  19.64
原子     868 O   LYS A 114     4.576    8.708   -36.845  1.00  19.39
原子     869 N   PRO A 115     6.376    7.318   -36.973  1.00  19.06
原子     870 CA  PRO A 115     6.750    7.626   -35.601  1.00  18.72
原子     871 CB  PRO A 115     7.963    6.712   -35.326  1.00  19.82
原子     872 CG  PRO A 115     8.101    5.814   -36.500  1.00  20.93
原子     873 CD  PRO A 115     7.339    6.412   -37.639  1.00  19.08
原子     874 C   PRO A 115     7.156    9.093   -35.434  1.00  18.70
原子     875 O   PRO A 115     7.694    9.724   -36.375  1.00  17.25
原子     876 N   PHE A 116     6.844    9.628   -34.256  1.00  18.55
原子     877 CA  PHE A 116     7.342    10.918  -33.805  1.00  18.27
原子     878 CB  PHE A 116     6.359    11.566  -32.809  1.00  18.41
原子     879 CG  PHE A 116     6.908    12.804  -32.151  1.00  17.33
原子     880 CD1 PHE A 116     6.942    14.014  -32.847  1.00  16.98
原子     881 CE1 PHE A 116     7.457    15.173  -32.254  1.00  16.22
原子     882 CZ  PHE A 116     7.950    15.138  -30.935  1.00  15.88
原子     883 CE2 PHE A 116     7.902    13.917  -30.216  1.00  16.74
原子     884 CD2 PHE A 116     7.380    12.767  -30.825  1.00  16.05
原子     885 C   PHE A 116     8.701    10.695  -33.141  1.00  19.14
原子     886 O   PHE A 116     8.808    9.987   -32.134  1.00  19.66
原子     887 N   THR A 117     9.746    11.299  -33.713  1.00  19.53
原子     888 CA  THR A 117     11.116   11.020  -33.315  1.00  20.15
原子     889 CB  THR A 117     12.042   10.999  -34.567  1.00  20.83
原子     890 OG1 THR A 117     11.988   12.277  -35.222  1.00  22.59
原子     891 CG2 THR A 117     11.576   9.895   -35.557  1.00  21.40
原子     892 C   THR A 117     11.685   11.969  -32.263  1.00  20.34
原子     893 O   THR A 117     12.813   11.768  -31.774  1.00  21.13
原子     894 N   GLY A 118     10.943   13.017  -31.914  1.00  19.25
原子     895 CA  GLY A 118     11.451   14.018  -30.974  1.00  19.41
原子     896 C   GLY A 118     11.431   13.498  -29.541  1.00  19.75
原子     897 O   GLY A 118     10.913   12.397  -29.281  1.00  19.99
原子     898 N   ASN A 119     11.998   14.279  -28.622  1.00  19.56
原子     899 CA  ASN A 119     11.958   13.954  -27.198  1.00  20.41
原子     900 CB  ASN A 119     12.961   14.801  -26.419  1.00  21.50
原子     901 CG  ASN A 119     14.377   14.612  -26.930  1.00  25.14
原子     902 OD1 ASN A 119     14.779   13.500  -27.294  1.00  30.77
原子     903 ND2 ASN A 119     15.131   15.693  -26.987  1.00  31.23
原子     904 C   ASN A 119     10.550   14.194  -26.696  1.00  20.06
原子     905 O   ASN A 119     9.881    15.089  -27.167  1.00  19.00
原子     906 N   TRP A 120     10.084   13.348  -25.787  1.00  19.74
原子     907 CA  TRP A 120     8.707    13.466  -25.316  1.00  19.03
原子     908 CB  TRP A 120     7.717    12.917  -26.359  1.00  18.71
原子     909 CG  TRP A 120     6.351    13.522  -26.162  1.00  19.76
原子     910 CD1 TRP A 120     5.239    12.901  -25.673  1.00  19.81
原子     911 NE1 TRP A 120     4.186    13.799  -25.593  1.00  19.49
原子     912 CE2 TRP A 120     4.612    15.021  -26.042  1.00  19.44
原子     913 CD2 TRP A 120     5.975    14.886  -26.410  1.00  19.35
原子     914 CE3 TRP A 120     6.657    16.014  -26.895  1.00  18.94
原子     915 CZ3 TRP A 120     5.959    17.220  -27.010  1.00  20.22
原子     916 CH2 TRP A 120     4.602    17.315  -26.628  1.00  20.15
原子     917 CZ2 TRP A 120     3.918    16.233  -26.160  1.00  18.83
原子     918 C   TRP A 120     8.602    12.685  -24.001  1.00  18.80
原子     919 O   TRP A 120     9.454    11.833  -23.722  1.00  18.83
原子     920 N   GLY A 121     7.593    12.990  -23.189  1.00  17.91
原子     921 CA  GLY A 121     7.314    12.189  -21.988  1.00  17.64
原子     922 C   GLY A 121     6.721    10.834  -22.362  1.00  18.93
原子     923 O   GLY A 121     5.499    10.704  -22.487  1.00  18.99
原子     924 N   ARG A 122     7.589    9.828   -22.536  1.00  17.95
原子     925 CA  ARG A 122     7.195    8.483   -22.958  1.00  17.86
原子     926 CB  ARG A 122     7.686    8.193   -24.394  1.00  17.37
原子     927 CG  ARG A 122     9.181    8.529   -24.626  1.00  19.53
原子     928 CD  ARG A 122     9.689    7.987   -25.969  1.00  17.88
原子     929 NE  ARG A 122     9.012    8.549   -27.159  1.00  18.08
原子     930 CZ  ARG A 122     9.425    9.645   -27.807  1.00  18.06
原子     931 NH1 ARG A 122     10.477   10.326  -27.366  1.00  16.88
原子     932 NH2 ARG A 122     8.784    10.074  -28.892  1.00  17.35
原子     933 C   ARG A 122     7.799    7.450   -21.976  1.00  17.48
原子     934 O   ARG A 122     8.848    7.697   -21.396  1.00  17.69
原子     935 N   PRO A 123     7.142    6.298   -21.781  1.00  17.14
原子     936 CA  PRO A 123     5.886    5.916   -22.382  1.00  16.01
原子     937 CB  PRO A 123     5.908    4.385   -22.266  1.00  16.51
原子     938 CG  PRO A 123     6.585    4.144   -20.969  1.00  16.30
原子     939 CD  PRO A 123     7.658    5.238   -20.873  1.00  16.95
原子     940 C   PRO A 123     4.716    6.494   -21.581  1.00  15.29
原子     941 O   PRO A 123     4.926    7.057   -20.521  1.00  15.07
原子     942 N   GLN A 124     3.504    6.362   -22.120  1.00  14.60
原子     943 CA  GLN A 124     2.289    6.675   -21.386  1.00  14.40
原子     944 CB  GLN A 124     1.602    7.889   -22.001  1.00  14.71
原子     945 CG  GLN A 124     2.442    9.186   -21.711  1.00  11.93
原子     946 CD  GLN A 124     1.993    10.407  -22.472  1.00  15.67
原子     947 OE1 GLN A 124     2.807    11.310  -22.758  1.00  15.75
原子     948 NE2 GLN A 124     0.718    10.450  -22.822  1.00  9.85
原子     949 C   GLN A 124     1.441    5.421   -21.511  1.00  14.28
原子     950 O   GLN A 124     0.988    5.095   -22.604  1.00  14.63
原子     951 N   ARG A 125     1.241    4.731   -20.390  1.00  13.50
原子     952 CA  ARG A 125     0.700    3.382   -20.398  1.00  13.96
原子     953 CB  ARG A 125     1.331    2.567   -19.256  1.00  14.28
原子     954 CG  ARG A 125     2.864    2.703   -19.249  1.00  15.16
原子     955 CD  ARG A 125     3.503    1.577   -18.439  1.00  18.07
原子     956 NE  ARG A 125     4.924    1.827   -18.132  1.00  17.46
原子     957 CZ  ARG A 125     5.944    1.334   -18.833  1.00  19.43
原子     958 NH1 ARG A 125     5.728    0.601   -19.925  1.00  20.02
原子     959 NH2 ARG A 125     7.197    1.596   -18.453  1.00  18.94
原子     960 C   ARG A 125    -0.829    3.335   -20.359  1.00  14.48
原子     961 O   ARG A 125    -1.424    2.262   -20.343  1.00  14.40
原子     962 N   ASP A 126    -1.462    4.509   -20.374  1.00  14.03
原子     963 CA  ASP A 126    -2.919    4.568   -20.542  1.00  13.39
原子     964 CB  ASP A 126    -3.488    5.922   -20.067  1.00  13.17
原子     965 CG  ASP A 126    -2.926    7.092   -20.845  1.00  14.17
原子     966 OD1 ASP A 126    -1.713    7.108   -21.143  1.00  12.29
原子     967 OD2 ASP A 126    -3.705    8.003   -21.187  1.00  16.69
原子     968 C   ASP A 126    -3.350    4.306   -21.974  1.00  13.60
原子     969 O   ASP A 126    -4.452    3.806   -22.189  1.00  13.56
原子     970 N   GLY A 127    -2.491    4.634   -22.948  1.00  12.78
原子     971 CA  GLY A 127    -2.886    4.558   -24.358  1.00  13.20
原子     972 C   GLY A 127    -3.473    3.213   -24.794  1.00  12.77
原子     973 O   GLY A 127    -4.579    3.150   -25.327  1.00  12.56
原子     974 N   PRO A 128    -2.720    2.120   -24.613  1.00  13.94
原子     975 CA  PRO A 128    -3.262    0.810   -24.978  1.00  12.97
原子     976 CB  PRO A 128    -2.135   -0.162   -24.552  1.00  14.15
原子     977 CG  PRO A 128    -0.907    0.656   -24.721  1.00  14.39
原子     978 CD  PRO A 128    -1.323    2.010   -24.150  1.00  13.67
原子     979 C   PRO A 128    -4.571    0.455   -24.255  1.00  13.30
原子     980 O   PRO A 128    -5.433   -0.161   -24.869  1.00  13.72
原子     981 N   ALA A 129    -4.718    0.852   -22.985  1.00  12.95
原子     982 CA  ALA A 129    -5.963    0.611   -22.258  1.00  13.49
原子     983 CB  ALA A 129    -5.806    1.016   -20.808  1.00  13.00
原子     984 C   ALA A 129    -7.162    1.329   -22.923  1.00  13.43
原子     985 O   ALA A 129    -8.217    0.721   -23.159  1.00  13.26
原子     986 N   LEU A 130    -6.998    2.619   -23.221  1.00  12.51
原子     987 CA  LEU A 130    -8.068    3.409   -23.813  1.00  12.69
原子     988 CB  LEU A 130    -7.678    4.903   -23.806  1.00  12.56
原子     989 CG  LEU A 130    -7.458    5.555   -22.426  1.00  14.76
原子     990 CD1 LEU A 130    -6.959    6.991   -22.643  1.00  15.23
原子     991 CD2 LEU A 130    -8.776    5.544   -21.651  1.00  15.30
原子     992 C   LEU A 130    -8.410    2.934   -25.228  1.00  12.78
原子     993 O   LEU A 130    -9.571    2.863   -25.607  1.00  12.83
原子     994 N   ARG A 131    -7.386    2.601   -26.015  1.00  13.70
原子     995 CA  ARG A 131    -7.630    2.070   -27.351  1.00  14.52
原子     996 CB  ARG A 131    -6.316    1.925   -28.135  1.00  14.04
原子     997 CG  ARG A 131    -6.550    1.438   -29.566  1.00  15.60
原子     998 CD  ARG A 131    -5.278    1.522   -30.428  1.00  15.59
原子     999 NE  ARG A 131    -4.118    0.915   -29.779  1.00  16.77
原子    1000 CZ  ARG A 131    -2.860    1.205   -30.098  1.00  16.26
原子    1001 NH1 ARG A 131    -2.610    2.104   -31.054  1.00  16.37
原子    1002 NH2 ARG A 131    -1.856    0.618   -29.448  1.00  15.96
原子    1003 C   ARG A 131    -8.408    0.729   -27.283  1.00  14.44
原子    1004 O   ARG A 131    -9.350    0.533   -28.050  1.00  15.71
原子    1005 N   ALA A 132    -8.025   -0.164   -26.364  1.00  14.50
原子    1006 CA  ALA A 132    -8.738   -1.456   -26.195  1.00  15.06
原子    1007 CB  ALA A 132    -8.069   -2.348   -25.112  1.00  15.02
原子    1008 C   ALA A 132    -10.194  -1.197   -25.846  1.00  15.43
原子    1009 O   ALA A 132    -11.101  -1.808   -26.416  1.00  15.57
原子    1010 N   ILE A 133    -10.418  -0.270   -24.915  1.00  15.70
原子    1011 CA  ILE A 133    -11.777   0.049   -24.491  1.00  14.44
原子    1012 CB  ILE A 133    -11.775   1.056   -23.335  1.00  14.07
原子    1013 CG1 ILE A 133    -11.268   0.387   -22.046  1.00  15.40
原子    1014 CD1 ILE A 133    -10.751   1.388   -21.017  1.00  16.66
原子    1015 CG2 ILE A 133    -13.176   1.702   -23.101  1.00  13.98
原子    1016 C   ILE A 133    -12.633   0.517   -25.679  1.00  14.36
原子    1017 O   ILE A 133    -13.781   0.102   -25.807  1.00  14.69
原子    1018 N   ALA A 134    -12.079   1.362   -26.545  1.00  13.69
原子    1019 CA  ALA A 134    -12.819   1.832   -27.720  1.00  13.81
原子    1020 CB  ALA A 134    -12.019   2.949   -28.452  1.00  13.99
原子    1021 C   ALA A 134    -13.140   0.662   -28.657  1.00  14.62
原子    1022 O   ALA A 134    -14.279   0.473   -29.087  1.00  14.90
原子    1023 N   LEU A 135    -12.133  -0.155   -28.947  1.00  14.66
原子    1024 CA  LEU A 135    -12.328  -1.251   -29.901  1.00  15.75
原子    1025 CB  LEU A 135    -10.984  -1.875   -30.311  1.00  15.75
原子    1026 CG  LEU A 135    -10.348  -1.231   -31.557  1.00  16.40
原子    1027 CD1 LEU A 135    -10.257   0.308   -31.471  1.00  18.56
原子    1028 CD2 LEU A 135    -8.980   -1.852   -31.804  1.00  17.85
原子    1029 C   LEU A 135    -13.277  -2.306   -29.340  1.00  15.13
原子    1030 O   LEU A 135    -14.079  -2.845   -30.087  1.00  15.84
原子    1031 N   ILE A 136    -13.192  -2.573   -28.039  1.00  15.22
原子    1032 CA  ILE A 136    -14.153  -3.473   -27.377  1.00  15.71
原子    1033 CB  ILE A 136    -13.734  -3.829   -25.918  1.00  15.92
原子    1034 CG1 ILE A 136    -12.408  -4.598   -25.904  1.00  15.39
原子    1035 CD1 ILE A 136    -11.742  -4.679   -24.497  1.00  15.63
原子    1036 CG2 ILE A 136    -14.842  -4.611   -25.204  1.00  16.20
原子    1037 C   ILE A 136    -15.565  -2.902   -27.457  1.00  17.10
原子    1038 O   ILE A 136    -16.531  -3.631   -27.728  1.00  17.48
原子    1039 N   GLY A 137    -15.685  -1.581   -27.297  1.00  16.46
原子    1040 CA  GLY A 137    -16.979  -0.902   -27.484  1.00  16.59
原子    1041 C   GLY A 137    -17.600  -1.206   -28.833  1.00  17.13
原子    1042 O   GLY A 137    -18.778  -1.605   -28.920  1.00  16.92
原子    1043 N   TYR A 138    -16.817  -1.056   -29.898  1.00  16.61
原子    1044 CA  TYR A 138    -17.353  -1.349   -31.224  1.00  17.93
原子    1045 CB  TYR A 138    -16.446  -0.838   -32.341  1.00  17.46
原子    1046 CG  TYR A 138    -17.112  -0.897   -33.693  1.00  18.28
原子    1047 CD1 TYR A 138    -18.350  -0.268   -33.914  1.00  18.85
原子    1048 CE1 TYR A 138    -18.966  -0.314   -35.153  1.00  21.29
原子    1049 CZ  TYR A 138    -18.358  -1.001   -36.207  1.00  20.99
原子    1050 OH  TYR A 138    -18.994  -1.055   -37.433  1.00  20.06
原子    1051 CE2 TYR A 138    -17.133  -1.636   -36.026  1.00  19.88
原子    1052 CD2 TYR A 138    -16.512  -1.583   -34.766  1.00  18.25
原子    1053 C   TYR A 138    -17.643  -2.844   -31.406  1.00  18.67
原子    1054 O   TYR A 138    -18.654  -3.207   -32.037  1.00  20.06
原子    1055 N   SER A 139    -16.766  -3.686   -30.864  1.00  19.48
原子    1056 CA  SER A 139    -16.942  -5.146   -30.900  1.00  21.02
原子    1057 CB  SER A 139    -15.808  -5.829   -30.129  1.00  21.09
原子    1058 OG  SER A 139    -14.581  -5.598   -30.789  1.00  21.49
原子    1059 C   SER A 139    -18.298  -5.557   -30.325  1.00  22.24
原子    1060 O   SER A 139    -19.002  -6.392   -30.907  1.00  23.64
原子    1061 N   LYS A 140    -18.669  -4.976   -29.188  1.00  22.77
原子    1062 CA  LYS A 140    -19.987  -5.225   -28.595  1.00  24.29
原子    1063 CB  LYS A 140    -20.218  -4.343   -27.370  1.00  24.29
原子    1064 CG  LYS A 140    -19.384  -4.695   -26.170  1.00  26.62
原子    1065 CD  LYS A 140    -19.696  -3.693   -25.060  1.00  28.24
原子    1066 CE  LYS A 140    -18.589  -3.635   -24.056  1.00  28.19
原子    1067 NZ  LYS A 140    -18.940  -2.725   -22.954  1.00  26.78
原子    1068 C   LYS A 140    -21.126  -5.001   -29.584  1.00  24.17
原子    1069 O   LYS A 140    -22.053  -5.823   -29.670  1.00  24.94
原子    1070 N   TRP A 141    -21.062  -3.898   -30.321  1.00  23.60
原子    1071 CA  TRP A 141    -22.054  -3.613   -31.338  1.00  24.29
原子    1072 CB  TRP A 141    -21.847  -2.226   -31.953  1.00  24.36
原子    1073 CG  TRP A 141    -22.973  -1.833   -32.874  1.00  24.25
原子    1074 CD1 TRP A 141    -24.113  -1.170   -32.531  1.00  25.06
原子    1075 NE1 TRP A 141    -24.921  -1.016   -33.638  1.00  25.22
原子    1076 CE2 TRP A 141    -24.302  -1.575   -34.722  1.00  24.07
原子    1077 CD2 TRP A 141    -23.078  -2.115   -34.276  1.00  24.80
原子    1078 CE3 TRP A 141    -22.248  -2.766   -35.203  1.00  25.40
原子    1079 CZ3 TRP A 141    -22.669  -2.858   -36.532  1.00  25.72
原子    1080 CH2 TRP A 141    -23.891  -2.304   -36.940  1.00  24.95
原子    1081 CZ2 TRP A 141    -24.721  -1.666   -36.051  1.00  25.14
原子    1082 C   TRP A 141    -22.078  -4.666   -32.448  1.00  24.47
原子    1083 O   TRP A 141    -23.155  -5.152   -32.831  1.00  24.52
原子    1084 N   LEU A 142    -20.904  -4.991   -32.985  1.00  24.39
原子    1085 CA  LEU A 142    -20.806  -6.024   -34.010  1.00  25.05
原子    1086 CB  LEU A 142    -19.361  -6.199   -34.473  1.00  24.56
原子    1087 CG  LEU A 142    -18.754  -5.023   -35.252  1.00  24.44
原子    1088 CD1 LEU A 142    -17.274  -5.304   -35.441  1.00  23.72
原子    1089 CD2 LEU A 142    -19.424  -4.793   -36.624  1.00  25.76
原子    1090 C   LEU A 142    -21.406  -7.364   -33.556  1.00  25.97
原子    1091 O   LEU A 142    -22.195  -7.966   -34.283  1.00  26.49
原子    1092 N   ILE A 143    -21.045  -7.814   -32.359  1.00  27.04
原子    1093 CA  ILE A 143    -21.596  -9.040   -31.792  1.00  28.46
原子    1094 CB  ILE A 143    -20.959  -9.362   -30.425  1.00  28.30
原子    1095 CG1 ILE A 143    -19.474  -9.722   -30.609  1.00  27.97
原子    1096 CD1 ILE A 143    -18.707  -9.814   -29.301  1.00  29.85
原子    1097 CG2 ILE A 143    -21.720  -10.494  -29.717  1.00  29.57
原子    1098 C   ILE A 143    -23.124  -8.992   -31.682  1.00  29.52
原子    1099 O   ILE A 143    -23.813  -9.928   -32.118  1.00  30.10
原子    1100 N   ASN A 144    -23.655  -7.916   -31.111  1.00  30.37
原子    1101 CA  ASN A 144    -25.109  -7.768   -30.988  1.00  32.18
原子    1102 CB  ASN A 144    -25.479  -6.522   -30.186  1.00  32.73
原子    1103 CG  ASN A 144    -26.960  -6.489   -29.792  1.00  36.88
原子    1104 OD1 ASN A 144    -27.444  -7.350   -29.041  1.00  42.25
原子    1105 ND2 ASN A 144    -27.685  -5.488   -30.291  1.00  40.10
原子    1106 C   ASN A 144    -25.820  -7.760   -32.341  1.00  32.17
原子    1107 O   ASN A 144    -27.012  -8.029   -32.411  1.00  32.73
原子    1108 N   ASN A 145    -25.094  -7.460   -33.411  1.00  32.19
原子    1109 CA  ASN A 145    -25.705  -7.403   -34.726  1.00  32.78
原子    1110 CB  ASN A 145    -25.526  -6.014   -35.331  1.00  33.16
原子    1111 CG  ASN A 145    -26.397  -4.986   -34.639  1.00  34.32
原子    1112 OD1 ASN A 145    -27.576  -4.841   -34.969  1.00  37.42
原子    1113 ND2 ASN A 145    -25.834  -4.289   -33.647  1.00  34.31
原子    1114 C   ASN A 145    -25.285  -8.533   -35.671  1.00  33.13
原子    1115 O   ASN A 145    -25.412  -8.415   -36.902  1.00  33.03
原子    1116 N   ASN A 146    -24.789  -9.618   -35.065  1.00  33.43
原子    1117 CA  ASN A 146    -24.475  -10.885  -35.736  1.00  34.14
原子    1118 CB  ASN A 146    -25.710  -11.459  -36.461  1.00  34.85
原子    1119 CG  ASN A 146    -26.994  -11.280  -35.657  1.00  37.41
原子    1120 OD1 ASN A 146    -27.033  -11.543  -34.450  1.00  41.43
原子    1121 ND2 ASN A 146    -28.047  -10.814  -36.321  1.00  41.54
原子    1122 C   ASN A 146    -23.266  -10.795  -36.652  1.00  33.92
原子    1123 O   ASN A 146    -23.216  -11.419  -37.724  1.00  33.76
原子    1124 N   TYR A 147    -22.280  -10.013  -36.221  1.00  32.92
原子    1125 CA  TYR A 147    -21.049  -9.870   -36.974  1.00  32.90
原子    1126 CB  TYR A 147    -20.859  -8.423   -37.451  1.00  33.31
原子    1127 CG  TYR A 147    -21.966  -7.893   -38.339  1.00  33.29
原子    1128 CD1 TYR A 147    -22.168  -8.410   -39.621  1.00  34.11
原子    1129 CE1 TYR A 147    -23.177  -7.924   -40.438  1.00  34.19
原子    1130 CZ  TYR A 147    -23.986  -6.888   -39.983  1.00  34.10
原子    1131 OH  TYR A 147    -24.987  -6.399   -40.794  1.00  35.08
原子    1132 CE2 TYR A 147    -23.798  -6.345   -38.722  1.00  32.48
原子    1133 CD2 TYR A 147    -22.792  -6.852   -37.906  1.00  32.03
原子    1134 C   TYR A 147    -19.857  -10.297  -36.138  1.00  32.74
原子    1135 O   TYR A 147    -18.795  -9.710   -36.242  1.00  32.03
原子    1136 N   GLN A 148    -20.037  -11.325  -35.312  1.00  33.44
原子    1137 CA  GLN A 148    -18.977  -11.807  -34.427  1.00  34.39
原子    1138 CB  GLN A 148    -19.483  -12.971  -33.573  1.00  34.76
原子    1139 CG  GLN A 148    -18.523  -13.445  -32.481  1.00  35.56
原子    1140 CD  GLN A 148    -19.216  -14.273  -31.401  1.00  36.59
原子    1141 OE1 GLN A 148    -20.296  -13.913  -30.916  1.00  41.20
原子    1142 NE2 GLN A 148    -18.589  -15.380  -31.008  1.00  38.65
原子    1143 C   GLN A 148    -17.690  -12.196  -35.176  1.00  34.46
原子    1144 O   GLN A 148    -16.582  -12.002  -34.654  1.00  34.20
原子    1145 N   PHE A 149    -17.841  -12.735  -36.391  1.00  34.19
原子    1146 CA  PHE A 149    -16.696  -13.131  -37.217  1.00  34.10
原子    1147 CB  PHE A 149    -17.140  -13.804  -38.534  1.00  35.60
原子    1148 CG  PHE A 149    -18.346  -13.168  -39.193  1.00  38.70
原子    1149 CD1 PHE A 149    -19.388  -13.976  -39.676  1.00  42.72
原子    1150 CE1 PHE A 149    -20.518  -13.417  -40.295  1.00  43.69
原子    1151 CZ  PHE A 149    -20.615  -12.019  -40.437  1.00  43.12
原子    1152 CE2 PHE A 149    -19.567  -11.188  -39.953  1.00  43.20
原子    1153 CD2 PHE A 149    -18.451  -11.772  -39.341  1.00  42.33
原子    1154 C   PHE A 149    -15.746  -11.960  -37.517  1.00  32.49
原子    1155 O   PHE A 149    -14.528  -12.132  -37.548  1.00  32.23
原子    1156 N   THR A 150    -16.327  -10.789  -37.751  1.00  30.95
原子    1157 CA  THR A 150    -15.570  -9.568   -38.040  1.00  29.68
原子    1158 CB  THR A 150    -16.512  -8.424   -38.445  1.00  29.97
原子    1159 OG1 THR A 150    -17.162  -8.768   -39.673  1.00  30.58
原子    1160 CG2 THR A 150    -15.758  -7.096   -38.637  1.00  29.18
原子    1161 C   THR A 150    -14.727  -9.203   -36.822  1.00  28.54
原子    1162 O   THR A 150    -13.566  -8.827   -36.965  1.00  28.38
原子    1163 N   VAL A 151    -15.310  -9.354   -35.636  1.00  27.23
原子    1164 CA  VAL A 151    -14.597  -9.146   -34.374  1.00  26.78
原子    1165 CB  VAL A 151    -15.529  -9.352   -33.148  1.00  26.25
原子    1166 CG1 VAL A 151    -14.752  -9.213   -31.832  1.00  26.50
原子    1167 CG2 VAL A 151    -16.690  -8.361   -33.178  1.00  24.41
原子    1168 C   VAL A 151    -13.384  -10.080  -34.305  1.00  27.61
原子    1169 O   VAL A 151    -12.246  -9.638   -34.106  1.00  26.67
原子    1170 N   SER A 152    -13.625  -11.375  -34.505  1.00  28.53
原子    1171 CA  SER A 152    -12.551  -12.369  -34.470  1.00  30.01
原子    1172 CB  SER A 152    -13.102  -13.759  -34.773  1.00  30.18
原子    1173 OG  SER A 152    -13.612  -14.300  -33.586  1.00  32.28
原子    1174 C   SER A 152    -11.419  -12.091  -35.430  1.00  30.23
原子    1175 O   SER A 152    -10.250  -12.250  -35.090  1.00  30.95
原子    1176 N   ASN A 153    -11.762  -11.705  -36.641  1.00  31.46
原子    1177 CA  ASN A 153    -10.753  -11.624  -37.674  1.00  32.41
原子    1178 CB  ASN A 153    -11.333  -12.118  -38.997  1.00  33.62
原子    1179 CG  ASN A 153    -11.791  -13.584  -38.902  1.00  36.13
原子    1180 OD1 ASN A 153    -12.931  -13.918  -39.231  1.00  40.99
原子    1181 ND2 ASN A 153    -10.917  -14.444  -38.383  1.00  37.61
原子    1182 C   ASN A 153    -10.060  -10.272  -37.787  1.00  32.10
原子    1183 O   ASN A 153    -8.850   -10.213  -38.020  1.00  32.79
原子    1184 N   VAL A 154    -10.810  -9.193   -37.577  1.00  30.55
原子    1185 CA  VAL A 154    -10.251  -7.854   -37.750  1.00  28.93
原子    1186 CB  VAL A 154    -11.217  -6.925   -38.537  1.00  29.03
原子    1187 CG1 VAL A 154    -10.565  -5.577   -38.827  1.00  29.23
原子    1188 CG2 VAL A 154    -11.654  -7.585   -39.860  1.00  29.87
原子    1189 C   VAL A 154    -9.824   -7.211   -36.414  1.00  27.28
原子    1190 O   VAL A 154    -8.722   -6.678   -36.306  1.00  26.96
原子    1191 N   ILE A 155    -10.685  -7.288   -35.403  1.00  25.13
原子    1192 CA  ILE A 155    -10.525  -6.459   -34.197  1.00  23.05
原子    1193 CB  ILE A 155    -11.900  -5.972   -33.670  1.00  23.10
原子    1194 CG1 ILE A 155    -12.596  -5.128   -34.741  1.00  22.49
原子    1195 CD1 ILE A 155    -14.006  -4.680   -34.375  1.00  22.72
原子    1196 CG2 ILE A 155    -11.731  -5.144   -32.399  1.00  23.05
原子    1197 C   ILE A 155    -9.710   -7.136   -33.092  1.00  22.44
原子    1198 O   ILE A 155    -8.789   -6.537   -32.533  1.00  21.14
原子    1199 N   TRP A 156    -10.006  -8.409   -32.822  1.00  21.48
原子    1200 CA  TRP A 156    -9.392   -9.099   -31.696  1.00  21.75
原子    1201 CB  TRP A 156    -9.958   -10.520  -31.511  1.00  22.50
原子    1202 CG  TRP A 156    -9.298   -11.245  -30.371  1.00  23.43
原子    1203 CD1 TRP A 156    -8.420   -12.298  -30.461  1.00  24.92
原子    1204 NE1 TRP A 156    -8.011   -12.680  -29.198  1.00  24.85
原子    1205 CE2 TRP A 156    -8.600   -11.863  -28.269  1.00  26.38
原子    1206 CD2 TRP A 156    -9.416   -10.941  -28.970  1.00  25.03
原子    1207 CE3 TRP A 156    -10.139  -9.983   -28.236  1.00  25.01
原子    1208 CZ3 TRP A 156    -10.024  -9.982   -26.844  1.00  24.30
原子    1209 CH2 TRP A 156    -9.206   -10.910  -26.185  1.00  23.97
原子    1210 CZ2 TRP A 156    -8.495   -11.861  -26.875  1.00  24.60
原子    1211 C   TRP A 156    -7.845   -9.109   -31.699  1.00  21.52
原子    1212 O   TRP A 156    -7.235   -8.945   -30.648  1.00  21.78
原子    1213 N   PRO A 157    -7.209   -9.303   -32.870  1.00  21.66
原子    1214 CA  PRO A 157    -5.726   -9.258   -32.878  1.00  21.40
原子    1215 CB  PRO A 157    -5.378   -9.459   -34.360  1.00  21.26
原子    1216 CG  PRO A 157    -6.583   -10.172  -34.955  1.00  22.82
原子    1217 CD  PRO A 157    -7.762   -9.596   -34.207  1.00  21.45
原子    1218 C   PRO A 157    -5.162   -7.898   -32.410  1.00  21.30
原子    1219 O   PRO A 157    -4.092   -7.837   -31.795  1.00  21.11
原子    1220 N   ILE A 158    -5.881   -6.821   -32.724  1.00  20.52
原子    1221 CA  ILE A 158    -5.457   -5.467   -32.318  1.00  19.93
原子    1222 CB  ILE A 158    -6.273   -4.348   -33.034  1.00  19.73
原子    1223 CG1 ILE A 158    -6.261   -4.527   -34.559  1.00  21.25
原子    1224 CD1 ILE A 158    -7.229   -3.640   -35.351  1.00  20.03
原子    1225 CG2 ILE A 158    -5.686   -2.971   -32.670  1.00  20.16
原子    1226 C   ILE A 158    -5.632   -5.366   -30.816  1.00  19.58
原子    1227 O   ILE A 158    -4.701   -5.023   -30.081  1.00  19.04
原子    1228 N   VAL A 159    -6.840   -5.704   -30.359  1.00  19.39
原子    1229 CA  VAL A 159    -7.201   -5.624   -28.953  1.00  19.15
原子    1230 CB  VAL A 159    -8.687   -6.026   -28.744  1.00  19.06
原子    1231 CG1 VAL A 159    -9.046   -6.028   -27.253  1.00  20.39
原子    1232 CG2 VAL A 159    -9.604   -5.090   -29.511  1.00  20.08
原子    1233 C   VAL A 159    -6.280   -6.501   -28.105  1.00  19.39
原子    1234 O   VAL A 159    -5.794   -6.089   -27.036  1.00  18.63
原子    1235 N   ARG A 160    -6.022   -7.721   -28.585  1.00  18.93
原子    1236 CA  ARG A 160    -5.171   -8.633   -27.833  1.00  19.64
原子    1237 CB  ARG A 160    -5.078   -10.005  -28.513  1.00  19.17
原子    1238 CG  ARG A 160    -4.064   -10.942  -27.872  1.00  21.41
原子    1239 CD  ARG A 160    -3.978   -12.278  -28.637  1.00  23.47
原子    1240 NE  ARG A 160    -3.542   -12.066  -30.021  1.00  29.25
原子    1241 CZ  ARG A 160    -3.963   -12.771  -31.074  1.00  33.46
原子    1242 NH1 ARG A 160    -4.839   -13.764  -30.929  1.00  36.48
原子    1243 NH2 ARG A 160    -3.501   -12.489  -32.289  1.00  34.33
原子    1244 C   ARG A 160    -3.785   -8.058   -27.580  1.00  18.24
原子    1245 O   ARG A 160    -3.262   -8.233   -26.517  1.00  18.13
原子    1246 N   ASN A 161    -3.182   -7.371   -28.551  1.00  18.57
原子    1247 CA  ASN A 161    -1.875   -6.717   -28.289  1.00  18.40
原子    1248 CB  ASN A 161    -1.344   -6.052   -29.561  1.00  18.82
原子    1249 CG  ASN A 161    -0.772   -7.055   -30.549  1.00  20.68
原子    1250 OD1 ASN A 161    -0.240   -8.097   -30.149  1.00  22.60
原子    1251 ND2 ASN A 161    -0.883   -6.751   -31.837  1.00  19.81
原子    1252 C   ASN A 161    -1.946   -5.656   -27.182  1.00  18.36
原子    1253 O   ASN A 161    -1.078   -5.581   -26.313  1.00  17.42
原子    1254 N   ASP A 162    -2.982   -4.816   -27.233  1.00  17.86
原子    1255 CA  ASP A 162    -3.163   -3.782   -26.194  1.00  16.85
原子    1256 CB  ASP A 162    -4.293   -2.821   -26.586  1.00  16.71
原子    1257 CG  ASP A 162    -3.851   -1.791   -27.623  1.00  17.46
原子    1258 OD1 ASP A 162    -2.648   -1.440   -27.681  1.00  16.98
原子    1259 OD2 ASP A 162    -4.719   -1.333   -28.388  1.00  18.89
原子    1260 C   ASP A 162    -3.421   -4.354   -24.799  1.00  16.51
原子    1261 O   ASP A 162    -2.846   -3.897   -23.822  1.00  15.71
原子    1262 N   LEU A 163    -4.278   -5.371   -24.715  1.00  16.83
原子    1263 CA  LEU A 163    -4.532   -6.071   -23.459  1.00  16.55
原子    1264 CB  LEU A 163    -5.661   -7.088   -23.637  1.00  16.96
原子    1265 CG  LEU A 163    -7.030   -6.506   -23.975  1.00  19.29
原子    1266 CD1 LEU A 163    -8.007   -7.663   -24.227  1.00  19.71
原子    1267 CD2 LEU A 163    -7.484   -5.631   -22.818  1.00  21.19
原子    1268 C   LEU A 163    -3.279   -6.750   -22.883  1.00  16.19
原子    1269 O   LEU A 163    -3.035   -6.690   -21.688  1.00  15.47
原子    1270 N   ASN A 164    -2.495   -7.401   -23.748  1.00  16.85
原子    1271 CA  ASN A 164    -1.251   -8.040   -23.305  1.00  16.44
原子    1272 CB  ASN A 164    -0.602   -8.836   -24.450  1.00  17.06
原子    1273 CG  ASN A 164    -1.333   -10.153  -24.718  1.00  19.63
原子    1274 OD1 ASN A 164    -2.274   -10.513  -23.982  1.00  20.97
原子    1275 ND2 ASN A 164    -0.903   -10.881  -25.756  1.00  19.79
原子    1276 C   ASN A 164    -0.301   -7.022   -22.761  1.00  16.80
原子    1277 O   ASN A 164     0.349   -7.261   -21.751  1.00  15.97
原子    1278 N   TYR A 165    -0.250   -5.860   -23.415  1.00  16.45
原子    1279 CA  TYR A 165     0.573   -4.744   -22.930  1.00  16.15
原子    1280 CB  TYR A 165     0.420   -3.508   -23.844  1.00  16.63
原子    1281 CG  TYR A 165     1.286   -2.356   -23.391  1.00  16.41
原子    1282 CD1 TYR A 165     0.838   -1.459   -22.404  1.00  17.94
原子    1283 CE1 TYR A 165     1.651   -0.402   -21.958  1.00  17.84
原子    1284 CZ  TYR A 165     2.916   -0.223   -22.517  1.00  18.36
原子    1285 OH  TYR A 165     3.699    0.841   -22.091  1.00  16.54
原子    1286 CE2 TYR A 165     3.383   -1.105   -23.502  1.00  16.73
原子    1287 CD2 TYR A 165     2.552   -2.157   -23.942  1.00  16.01
原子    1288 C   TYR A 165     0.198   -4.366   -21.503  1.00  16.26
原子    1289 O   TYR A 165     1.073   -4.218   -20.650  1.00  15.43
原子    1290 N   VAL A 166    -1.104   -4.177   -21.258  1.00  16.75
原子    1291 CA  VAL A 166    -1.600   -3.786   -19.933  1.00  17.39
原子    1292 CB  VAL A 166    -3.124   -3.479   -19.986  1.00  17.57
原子    1293 CG1 VAL A 166    -3.712   -3.197   -18.582  1.00  19.25
原子    1294 CG2 VAL A 166    -3.363   -2.272   -20.909  1.00  16.49
原子    1295 C   VAL A 166    -1.258   -4.829   -18.865  1.00  17.83
原子    1296 O   VAL A 166    -0.741   -4.483   -17.792  1.00  18.00
原子    1297 N   ALA A 167    -1.520   -6.099   -19.188  1.00  18.26
原子    1298 CA  ALA A 167    -1.233   -7.218   -18.285  1.00  18.92
原子    1299 CB  ALA A 167    -1.716   -8.532   -18.899  1.00  18.25
原子    1300 C   ALA A 167     0.251   -7.325   -17.956  1.00  19.08
原子    1301 O   ALA A 167     0.611   -7.757   -16.854  1.00  20.02
原子    1302 N   GLN A 168     1.097   -6.955   -18.920  1.00  19.13
原子    1303 CA  GLN A 168     2.558   -7.022   -18.749  1.00  19.21
原子    1304 CB  GLN A 168     3.218   -7.201   -20.115  1.00  19.08
原子    1305 CG  GLN A 168     4.739   -7.373   -20.053  1.00  20.55
原子    1306 CD  GLN A 168     5.337   -7.891   -21.355  1.00  20.26
原子    1307 OE1 GLN A 168     4.634   -8.378   -22.238  1.00  22.69
原子    1308 NE2 GLN A 168     6.643   -7.772   -21.476  1.00  23.10
原子    1309 C   GLN A 168     3.182   -5.807   -18.048  1.00  19.60
原子    1310 O   GLN A 168     4.104   -5.942   -17.205  1.00  18.87
原子    1311 N   TYR A 169     2.709   -4.609   -18.404  1.00  19.23
原子    1312 CA  TYR A 169     3.399   -3.377   -18.011  1.00  19.45
原子    1313 CB  TYR A 169     3.760   -2.560   -19.266  1.00  20.43
原子    1314 CG  TYR A 169     4.773   -3.203   -20.203  1.00  21.30
原子    1315 CD1 TYR A 169     6.125   -3.243   -19.872  1.00  23.63
原子    1316 CE1 TYR A 169     7.065   -3.822   -20.723  1.00  24.59
原子    1317 CZ  TYR A 169     6.651   -4.359   -21.926  1.00  23.11
原子    1318 OH  TYR A 169     7.580   -4.924   -22.779  1.00  25.26
原子    1319 CE2 TYR A 169     5.309   -4.330   -22.288  1.00  22.49
原子    1320 CD2 TYR A 169     4.375   -3.754   -21.422  1.00  20.87
原子    1321 C   TYR A 169     2.675   -2.449   -17.015  1.00  19.49
原子    1322 O   TYR A 169     3.205   -1.386   -16.691  1.00  19.69
原子    1323 N   TRP A 170     1.508   -2.850   -16.498  1.00  18.91
原子    1324 CA  TRP A 170     0.735   -1.981   -15.588  1.00  19.29
原子    1325 CB  TRP A 170    -0.610   -2.626   -15.208  1.00  18.85
原子    1326 CG  TRP A 170    -0.489   -3.743   -14.215  1.00  21.04
原子    1327 CD1 TRP A 170    -0.342   -5.083   -14.489  1.00  20.67
原子    1328 NE1 TRP A 170    -0.259   -5.793   -13.317  1.00  22.09
原子    1329 CE2 TRP A 170    -0.336   -4.928   -12.258  1.00  19.19
原子    1330 CD2 TRP A 170    -0.481   -3.621   -12.789  1.00  20.35
原子    1331 CE3 TRP A 170    -0.582   -2.530   -11.905  1.00  19.61
原子    1332 CZ3 TRP A 170    -0.546   -2.769   -10.542  1.00  22.33
原子    1333 CH2 TRP A 170    -0.404   -4.090   -10.038  1.00  21.08
原子    1334 CZ2 TRP A 170    -0.297   -5.179   -10.884  1.00  20.76
原子    1335 C   TRP A 170     1.526   -1.592   -14.336  1.00  19.20
原子    1336 O   TRP A 170     1.395   -0.475   -13.808  1.00  19.24
原子    1337 N   ASN A 171     2.371   -2.504   -13.858  1.00  19.13
原子    1338 CA  ASN A 171     3.054   -2.280   -12.596  1.00  20.12
原子    1339 CB  ASN A 171     3.178   -3.603   -11.820  1.00  20.59
原子    1340 CG  ASN A 171     3.646   -3.419   -10.392  1.00  22.31
原子    1341 OD1 ASN A 171     4.531   -4.155   -9.938   1.00  23.68
原子    1342 ND2 ASN A 171     3.081   -2.435   -9.684   1.00  18.77
原子    1343 C   ASN A 171     4.392   -1.557   -12.797  1.00  20.93
原子    1344 O   ASN A 171     5.333   -1.724   -12.022  1.00  20.35
原子    1345 N   GLN A 172     4.449   -0.712   -13.826  1.00  20.64
原子    1346 CA  GLN A 172     5.644    0.061   -14.156  1.00  22.31
原子    1347 CB  GLN A 172     6.262   -0.452   -15.469  1.00  22.04
原子    1348 CG  GLN A 172     6.784   -1.895   -15.312  1.00  25.79
原子    1349 CD  GLN A 172     7.536   -2.450   -16.515  1.00  27.61
原子    1350 OE1 GLN A 172     8.276   -1.735   -17.214  1.00  35.65
原子    1351 NE2 GLN A 172     7.367   -3.755   -16.752  1.00  33.80
原子    1352 C   GLN A 172     5.287    1.539   -14.268  1.00  21.36
原子    1353 O   GLN A 172     4.175    1.867   -14.704  1.00  21.04
原子    1354 N   THR A 173     6.209    2.417   -13.871  1.00  19.73
原子    1355 CA  THR A 173     5.948    3.871   -13.928  1.00  20.07
原子    1356 CB  THR A 173     7.001    4.703   -13.168  1.00  19.48
原子    1357 OG1 THR A 173     8.300    4.427   -13.707  1.00  21.56
原子    1358 CG2 THR A 173     6.988    4.375   -11.690  1.00  20.86
原子    1359 C   THR A 173     5.913    4.347   -15.375  1.00  18.53
原子    1360 O   THR A 173     6.395    3.665   -16.292  1.00  18.48
原子    1361 N   GLY A 174     5.345    5.528   -15.582  1.00  18.38
原子    1362 CA  GLY A 174     5.363    6.149   -16.903  1.00  17.13
原子    1363 C   GLY A 174     4.760    7.522   -16.736  1.00  16.77
原子    1364 O   GLY A 174     4.462    7.939   -15.605  1.00  16.87
原子    1365 N   PHE A 175     4.571    8.223   -17.849  1.00  14.68
原子    1366 CA  PHE A 175     4.004    9.577   -17.776  1.00  14.68
原子    1367 CB  PHE A 175     4.522    10.432  -18.948  1.00  15.16
原子    1368 CG  PHE A 175     5.943    10.847  -18.756  1.00  15.28
原子    1369 CD1 PHE A 175     6.981    10.000  -19.144  1.00  18.04
原子    1370 CE1 PHE A 175     8.313    10.359  -18.915  1.00  19.53
原子    1371 CZ  PHE A 175     8.609    11.582  -18.278  1.00  19.12
原子    1372 CE2 PHE A 175     7.571    12.429  -17.876  1.00  18.63
原子    1373 CD2 PHE A 175     6.247    12.054  -18.113  1.00  17.67
原子    1374 C   PHE A 175     2.483    9.584   -17.655  1.00  14.11
原子    1375 O   PHE A 175     1.799    8.683   -18.175  1.00  14.32
原子    1376 N   ASP A 176     1.972    10.591  -16.938  1.00  14.79
原子    1377 CA  ASP A 176     0.541    10.764  -16.713  1.00  14.45
原子    1378 CB  ASP A 176     0.297    11.661  -15.506  1.00  13.51
原子    1379 CG  ASP A 176     0.685    13.126  -15.760  1.00  14.99
原子    1380 OD1 ASP A 176     1.774    13.399  -16.329  1.00  14.32
原子    1381 OD2 ASP A 176    -0.112    14.012  -15.376  1.00  15.08
原子    1382 C   ASP A 176    -0.143    11.343  -17.962  1.00  14.21
原子    1383 O   ASP A 176     0.525    11.641  -18.963  1.00  14.31
原子    1384 N   LEU A 177    -1.467    11.511  -17.891  1.00  13.30
原子    1385 CA  LEU A 177    -2.235    11.981  -19.048  1.00  13.44
原子    1386 CB  LEU A 177    -3.752    11.839  -18.832  1.00  13.71
原子    1387 CG  LEU A 177    -4.483    12.896  -18.012  1.00  14.11
原子    1388 CD1 LEU A 177    -5.996    12.647  -18.061  1.00  13.65
原子    1389 CD2 LEU A 177    -4.007    12.922  -16.553  1.00  14.74
原子    1390 C   LEU A 177    -1.884    13.424  -19.452  1.00  13.51
原子    1391 O   LEU A 177    -2.131    13.813  -20.600  1.00  13.74
原子    1392 N   TRP A 178    -1.319    14.206  -18.521  1.00  12.53
原子    1393 CA  TRP A 178    -0.804    15.553  -18.855  1.00  12.95
原子    1394 CB  TRP A 178    -0.890    16.507  -17.660  1.00  12.67
原子    1395 CG  TRP A 178    -2.247    16.549  -17.005  1.00  13.10
原子    1396 CD1 TRP A 178    -2.504    16.508  -15.662  1.00  13.10
原子    1397 NE1 TRP A 178    -3.856    16.568  -15.440  1.00  12.14
原子    1398 CE2 TRP A 178    -4.501    16.646  -16.646  1.00  13.00
原子    1399 CD2 TRP A 178    -3.516    16.641  -17.657  1.00  12.53
原子    1400 CE3 TRP A 178    -3.919    16.715  -19.002  1.00  12.38
原子    1401 CZ3 TRP A 178    -5.309    16.813  -19.290  1.00  13.91
原子    1402 CH2 TRP A 178    -6.262    16.804  -18.257  1.00  13.52
原子    1403 CZ2 TRP A 178    -5.883    16.718  -16.930  1.00  13.97
原子    1404 C   TRP A 178     0.632    15.565  -19.400  1.00  13.35
原子    1405 O   TRP A 178     1.147    16.641  -19.756  1.00  13.76
原子    1406 N   GLU A 179     1.255    14.387  -19.447  1.00  13.33
原子    1407 CA  GLU A 179     2.532    14.151  -20.117  1.00  13.32
原子    1408 CB  GLU A 179     2.503    14.632  -21.582  1.00  12.64
原子    1409 CG  GLU A 179     1.165    14.344  -22.280  1.00  13.03
原子    1410 CD  GLU A 179     1.274    14.434  -23.785  1.00  14.68
原子    1411 OE1 GLU A 179     0.895    15.478  -24.340  1.00  15.98
原子    1412 OE2 GLU A 179     1.730    13.457  -24.405  1.00  15.44
原子    1413 C   GLU A 179     3.667    14.853  -19.374  1.00  15.00
原子    1414 O   GLU A 179     4.626    15.292  -20.004  1.00  14.90
原子    1415 N   GLU A 180     3.561    14.932  -18.048  1.00  14.78
原子    1416 CA  GLU A 180     4.476    15.745  -17.246  1.00  16.76
原子    1417 CB  GLU A 180     3.719    16.928  -16.630  1.00  16.95
原子    1418 CG  GLU A 180     3.282    17.972  -17.654  1.00  18.69
原子    1419 CD  GLU A 180     2.240    18.969  -17.122  1.00  19.72
原子    1420 OE1 GLU A 180     1.587    18.715  -16.077  1.00  19.00
原子    1421 OE2 GLU A 180     2.076    20.020  -17.793  1.00  24.62
原子    1422 C   GLU A 180     5.124    14.954  -16.104  1.00  16.50
原子    1423 O   GLU A 180     6.265    15.202  -15.750  1.00  17.36
原子    1424 N   VAL A 181     4.364    14.056  -15.488  1.00  16.77
原子    1425 CA  VAL A 181     4.775    13.426  -14.218  1.00  16.87
原子    1426 CB  VAL A 181     3.672    13.555  -13.130  1.00  16.78
原子    1427 CG1 VAL A 181     4.030    12.732  -11.893  1.00  18.56
原子    1428 CG2 VAL A 181     3.490    15.008  -12.726  1.00  17.21
原子    1429 C   VAL A 181     5.057    11.953  -14.451  1.00  17.22
原子    1430 O   VAL A 181     4.177    11.205  -14.825  1.00  16.93
原子    1431 N   ASN A 182     6.290    11.532  -14.201  1.00  18.39
原子    1432 CA  ASN A 182     6.674    10.123  -14.394  1.00  18.57
原子    1433 CB  ASN A 182     8.136    10.079  -14.845  1.00  19.77
原子    1434 CG  ASN A 182     8.665    8.669   -15.056  1.00  23.96
原子    1435 OD1 ASN A 182     9.881    8.470   -15.058  1.00  33.20
原子    1436 ND2 ASN A 182     7.794    7.706   -15.258  1.00  23.63
原子    1437 C   ASN A 182     6.440    9.375   -13.073  1.00  18.31
原子    1438 O   ASN A 182     7.132    9.621   -12.087  1.00  18.80
原子    1439 N   GLY A 183     5.436    8.508   -13.034  1.00  16.83
原子    1440 CA  GLY A 183     5.091    7.828   -11.790  1.00  15.98
原子    1441 C   GLY A 183     3.989    6.837   -12.033  1.00  15.59
原子    1442 O   GLY A 183     3.937    6.228   -13.117  1.00  15.30
原子    1443 N   SER A 184     3.119    6.670   -11.035  1.00  14.95
原子    1444 CA  SER A 184     1.927    5.823   -11.151  1.00  15.45
原子    1445 CB  SER A 184     1.844    4.792   -10.017  1.00  15.76
原子    1446 OG  SER A 184     2.998    3.935   -10.027  1.00  17.33
原子    1447 C   SER A 184     0.731    6.758   -11.073  1.00  15.14
原子    1448 O   SER A 184     0.646    7.546   -10.148  1.00  15.83
原子    1449 N   SER A 185    -0.151    6.706   -12.066  1.00  14.73
原子    1450 CA  SER A 185    -1.169    7.755   -12.190  1.00  13.87
原子    1451 CB  SER A 185    -0.991    8.535   -13.515  1.00  14.73
原子    1452 OG  SER A 185    -1.793    9.721   -13.544  1.00  14.93
原子    1453 C   SER A 185    -2.551    7.140   -12.127  1.00  13.49
原子    1454 O   SER A 185    -2.834    6.134   -12.792  1.00  13.35
原子    1455 N   PHE A 186    -3.427    7.782   -11.354  1.00  13.72
原子    1456 CA  PHE A 186    -4.764    7.275   -11.092  1.00  13.43
原子    1457 CB  PHE A 186    -5.511    8.319   -10.260  1.00  13.58
原子    1458 CG  PHE A 186    -6.807    7.839   -9.662   1.00  13.52
原子    1459 CD1 PHE A 186    -6.819    6.873   -8.655   1.00  16.11
原子    1460 CE1 PHE A 186    -8.004    6.489   -8.036   1.00  17.80
原子    1461 CZ  PHE A 186    -9.214    7.062   -8.442   1.00  16.18
原子    1462 CE2 PHE A 186    -9.211    8.051   -9.432   1.00  15.77
原子    1463 CD2 PHE A 186    -8.003    8.435   -10.030  1.00  14.62
原子    1464 C   PHE A 186    -5.552    6.946   -12.372  1.00  13.57
原子    1465 O   PHE A 186    -6.053    5.839   -12.524  1.00  13.36
原子    1466 N   PHE A 187    -5.693    7.927   -13.267  1.00  12.53
原子    1467 CA  PHE A 187    -6.416    7.762   -14.527  1.00  12.84
原子    1468 CB  PHE A 187    -6.284    9.056   -15.356  1.00  11.69
原子    1469 CG  PHE A 187    -6.949    9.016   -16.711  1.00  13.25
原子    1470 CD1 PHE A 187    -8.284    9.338   -16.855  1.00  12.86
原子    1471 CE1 PHE A 187    -8.893    9.342   -18.102  1.00  14.12
原子    1472 CZ  PHE A 187    -8.139    9.041   -19.236  1.00  14.05
原子    1473 CE2 PHE A 187    -6.806    8.721   -19.111  1.00  14.30
原子    1474 CD2 PHE A 187    -6.206    8.711   -17.857  1.00  15.10
原子    1475 C   PHE A 187    -5.887    6.563   -15.318  1.00  12.69
原子    1476 O   PHE A 187    -6.666    5.837   -15.932  1.00  14.00
原子    1477 N   THR A 188    -4.571    6.357   -15.294  1.00  12.97
原子    1478 CA  THR A 188    -3.938    5.302   -16.084  1.00  13.65
原子    1479 CB  THR A 188    -2.411    5.541   -16.104  1.00  13.69
原子    1480 OG1 THR A 188    -2.158    6.789   -16.753  1.00  15.37
原子    1481 CG2 THR A 188    -1.648    4.432   -16.833  1.00  13.24
原子    1482 C   THR A 188    -4.284    3.929   -15.478  1.00  14.12
原子    1483 O   THR A 188    -4.766    3.039   -16.173  1.00  14.40
原子    1484 N   VAL A 189    -4.066    3.798   -14.173  1.00  13.34
原子    1485 CA  VAL A 189    -4.348    2.543   -13.446  1.00  14.76
原子    1486 CB  VAL A 189    -3.893    2.612   -11.958  1.00  14.90
原子    1487 CG1 VAL A 189    -4.331    1.334   -11.186  1.00  16.95
原子    1488 CG2 VAL A 189    -2.374    2.799   -11.865  1.00  15.31
原子    1489 C   VAL A 189    -5.836    2.167   -13.560  1.00  14.48
原子    1490 O   VAL A 189    -6.159    1.024   -13.853  1.00  14.65
原子    1491 N   ALA A 190    -6.732    3.146   -13.372  1.00  13.77
原子    1492 CA  ALA A 190    -8.171    2.858   -13.351  1.00  13.46
原子    1493 CB  ALA A 190    -8.996    4.128   -12.922  1.00  12.74
原子    1494 C   ALA A 190    -8.614    2.388   -14.706  1.00  13.27
原子    1495 O   ALA A 190    -9.432    1.479   -14.815  1.00  13.24
原子    1496 N   ASN A 191    -8.093    3.017   -15.760  1.00  12.50
原子    1497 CA  ASN A 191    -8.438    2.598   -17.127  1.00  13.01
原子    1498 CB  ASN A 191    -8.122    3.707   -18.137  1.00  12.65
原子    1499 CG  ASN A 191    -9.191    4.781   -18.118  1.00  14.08
原子    1500 OD1 ASN A 191    -10.319   4.541   -18.554  1.00  16.39
原子    1501 ND2 ASN A 191    -8.857    5.955   -17.583  1.00  17.21
原子    1502 C   ASN A 191    -7.815    1.259   -17.521  1.00  13.93
原子    1503 O   ASN A 191    -8.412    0.490   -18.270  1.00  13.87
原子    1504 N   GLN A 192    -6.636    0.995   -16.980  1.00  14.06
原子    1505 CA  GLN A 192    -5.988   -0.311   -17.139  1.00  14.96
原子    1506 CB  GLN A 192    -4.575   -0.274   -16.552  1.00  14.33
原子    1507 CG  GLN A 192    -3.555    0.435   -17.500  1.00  13.64
原子    1508 CD  GLN A 192    -2.206    0.635   -16.857  1.00  15.33
原子    1509 OE1 GLN A 192    -2.074    0.568   -15.646  1.00  15.48
原子    1510 NE2 GLN A 192    -1.182    0.925   -17.682  1.00  16.10
原子    1511 C   GLN A 192    -6.855   -1.411   -16.519  1.00  15.11
原子    1512 O   GLN A 192    -7.076   -2.457   -17.141  1.00  16.04
原子    1513 N   HIS A 193    -7.398   -1.140   -15.329  1.00  15.81
原子    1514 CA  HIS A 193    -8.314   -2.069   -14.668  1.00  16.01
原子    1515 CB  HIS A 193    -8.746   -1.586   -13.281  1.00  16.72
原子    1516 CG  HIS A 193    -9.806   -2.454   -12.669  1.00  17.39
原子    1517 ND1 HIS A 193    -11.113  -2.039   -12.505  1.00  18.05
原子    1518 CE1 HIS A 193    -11.821  -3.028   -11.983  1.00  18.70
原子    1519 NE2 HIS A 193    -11.023  -4.071   -11.814  1.00  17.20
原子    1520 CD2 HIS A 193    -9.758   -3.739   -12.242  1.00  18.04
原子    1521 C   HIS A 193    -9.536   -2.343   -15.521  1.00  15.85
原子    1522 O   HIS A 193    -9.898   -3.501   -15.732  1.00  15.70
原子    1523 N   ARG A 194    -10.185  -1.285   -15.995  1.00  15.27
原子    1524 CA  ARG A 194    -11.349  -1.437   -16.852  1.00  15.29
原子    1525 CB  ARG A 194    -11.922  -0.073   -17.234  1.00  14.30
原子    1526 CG  ARG A 194    -13.029  -0.212   -18.239  1.00  14.46
原子    1527 CD  ARG A 194    -13.614   1.102   -18.723  1.00  15.43
原子    1528 NE  ARG A 194    -14.589   0.780   -19.767  1.00  15.58
原子    1529 CZ  ARG A 194    -15.624   1.539   -20.125  1.00  17.92
原子    1530 NH1 ARG A 194    -15.815   2.744   -19.576  1.00  14.60
原子    1531 NH2 ARG A 194    -16.451   1.095   -21.060  1.00  16.15
原子    1532 C   ARG A 194    -11.047  -2.258   -18.111  1.00  15.74
原子    1533 O   ARG A 194    -11.842  -3.120   -18.504  1.00  15.56
原子    1534 N   ALA A 195    -9.918   -1.967   -18.758  1.00  15.60
原子    1535 CA  ALA A 195    -9.562   -2.638   -20.004  1.00  15.90
原子    1536 CB  ALA A 195    -8.254   -2.042   -20.591  1.00  15.40
原子    1537 C   ALA A 195    -9.436   -4.150   -19.798  1.00  15.65
原子    1538 O   ALA A 195    -9.959   -4.929   -20.610  1.00  16.79
原子    1539 N   LEU A 196    -8.763   -4.550   -18.721  1.00  16.36
原子    1540 CA  LEU A 196    -8.552   -5.976   -18.423  1.00  17.02
原子    1541 CB  LEU A 196    -7.625   -6.126   -17.235  1.00  16.96
原子    1542 CG  LEU A 196    -6.167   -5.744   -17.532  1.00  16.96
原子    1543 CD1 LEU A 196    -5.375   -5.857   -16.252  1.00  18.93
原子    1544 CD2 LEU A 196    -5.590   -6.636   -18.630  1.00  20.38
原子    1545 C   LEU A 196    -9.877   -6.685   -18.167  1.00  17.92
原子    1546 O   LEU A 196    -10.102  -7.795   -18.643  1.00  18.98
原子    1547 N   VAL A 197    -10.779  -6.014   -17.454  1.00  18.51
原子    1548 CA  VAL A 197    -12.112  -6.560   -17.181  1.00  18.81
原子    1549 CB  VAL A 197    -12.875  -5.702   -16.130  1.00  18.26
原子    1550 CG1 VAL A 197    -14.340  -6.173   -15.994  1.00  21.18
原子    1551 CG2 VAL A 197    -12.149  -5.784   -14.778  1.00  19.79
原子    1552 C   VAL A 197    -12.924  -6.779   -18.462  1.00  19.05
原子    1553 O   VAL A 197    -13.456  -7.884   -18.693  1.00  18.62
原子    1554 N   GLU A 198    -13.010  -5.752   -19.308  1.00  18.43
原子    1555 CA  GLU A 198    -13.747  -5.873   -20.556  1.00  19.38
原子    1556 CB  GLU A 198    -13.849  -4.517   -21.241  1.00  19.38
原子    1557 CG  GLU A 198    -14.609  -3.530   -20.417  1.00  20.22
原子    1558 CD  GLU A 198    -15.334  -2.537   -21.298  1.00  22.66
原子    1559 OE1 GLU A 198    -16.313  -2.940   -21.940  1.00  22.16
原子    1560 OE2 GLU A 198    -14.924  -1.369   -21.342  1.00  22.92
原子    1561 C   GLU A 198    -13.094  -6.861   -21.509  1.00  19.78
原子    1562 O   GLU A 198    -13.780  -7.506   -22.303  1.00  20.29
原子    1563 N   GLY A 199    -11.770  -6.944   -21.435  1.00  19.78
原子    1564 CA  GLY A 199    -10.998  -7.823   -22.314  1.00  20.88
原子    1565 C   GLY A 199    -11.288  -9.285   -21.986  1.00  21.53
原子    1566 O   GLY A 199    -11.546  -10.083  -22.879  1.00  22.36
原子    1567 N   ALA A 200    -11.256  -9.615   -20.702  1.00  21.79
原子    1568 CA  ALA A 200    -11.605  -10.956  -20.234  1.00  22.44
原子    1569 CB  ALA A 200    -11.463  -11.038  -18.728  1.00  22.21
原子    1570 C   ALA A 200    -13.016  -11.329  -20.696  1.00  22.54
原子    1571 O   ALA A 200    -13.237  -12.419  -21.214  1.00  22.25
原子    1572 N   THR A 201    -13.965  -10.403  -20.573  1.00  22.56
原子    1573 CA  THR A 201    -15.345  -10.671  -20.989  1.00  22.77
原子    1574 CB  THR A 201    -16.302  -9.527   -20.551  1.00  22.83
原子    1575 OG1 THR A 201    -16.219  -9.387   -19.134  1.00  24.92
原子    1576 CG2 THR A 201    -17.756  -9.819   -20.929  1.00  23.76
原子    1577 C   THR A 201    -15.435  -10.905  -22.485  1.00  22.78
原子    1578 O   THR A 201    -16.099  -11.851  -22.925  1.00  22.95
原子    1579 N   LEU A 202    -14.760  -10.069  -23.275  1.00  21.78
原子    1580 CA  LEU A 202    -14.805  -10.236  -24.717  1.00  22.62
原子    1581 CB  LEU A 202    -14.149  -9.055   -25.434  1.00  22.14
原子    1582 CG  LEU A 202    -14.142  -9.107   -26.964  1.00  23.10
原子    1583 CD1 LEU A 202    -15.544  -9.198   -27.564  1.00  24.20
原子    1584 CD2 LEU A 202    -13.346  -7.938   -27.570  1.00  22.53
原子    1585 C   LEU A 202    -14.139  -11.552  -25.151  1.00  23.15
原子    1586 O   LEU A 202    -14.649  -12.245  -26.036  1.00  22.90
原子    1587 N   ALA A 203    -13.019  -11.883  -24.510  1.00  23.38
原子    1588 CA  ALA A 203    -12.300  -13.129  -24.787  1.00  24.07
原子    1589 CB  ALA A 203    -11.076  -13.229  -23.913  1.00  23.57
原子    1590 C   ALA A 203    -13.211  -14.354  -24.569  1.00  24.38
原子    1591 O   ALA A 203    -13.264  -15.244  -25.411  1.00  25.21
原子    1592 N   ALA A 204    -13.920  -14.363  -23.447  1.00  25.20
原子    1593 CA  ALA A 204    -14.849  -15.442  -23.093  1.00  26.63
原子    1594 CB  ALA A 204    -15.450  -15.186  -21.727  1.00  26.12
原子    1595 C   ALA A 204    -15.939  -15.583  -24.150  1.00  27.48
原子    1596 O   ALA A 204    -16.267  -16.687  -24.564  1.00  28.39
原子    1597 N   THR A 205    -16.494  -14.461  -24.593  1.00  27.71
原子    1598 CA  THR A 205    -17.497  -14.470  -25.652  1.00  28.39
原子    1599 CB  THR A 205    -18.088  -13.051  -25.855  1.00  28.42
原子    1600 OG1 THR A 205    -18.669  -12.631  -24.622  1.00  29.32
原子    1601 CG2 THR A 205    -19.150  -13.051  -26.932  1.00  27.32
原子    1602 C   THR A 205    -16.968  -15.004  -26.981  1.00  28.72
原子    1603 O   THR A 205    -17.697  -15.690  -27.719  1.00  29.06
原子    1604 N   LEU A 206    -15.712  -14.698  -27.288  1.00  28.58
原子    1605 CA  LEU A 206    -15.122  -15.122  -28.539  1.00  29.40
原子    1606 CB  LEU A 206    -14.034  -14.144  -29.001  1.00  29.40
原子    1607 CG  LEU A 206    -14.438  -12.694  -29.322  1.00  29.97
原子    1608 CD1 LEU A 206    -13.212  -11.899  -29.755  1.00  30.30
原子    1609 CD2 LEU A 206    -15.561  -12.629  -30.375  1.00  29.58
原子    1610 C   LEU A 206    -14.540  -16.538  -28.489  1.00  29.55
原子    1611 O   LEU A 206    -14.118  -17.054  -29.521  1.00  30.16
原子    1612 N   GLY A 207    -14.500  -17.145  -27.307  1.00  30.30
原子    1613 CA  GLY A 207    -13.786  -18.419  -27.122  1.00  30.91
原子    1614 C   GLY A 207    -12.294  -18.274  -27.375  1.00  31.55
原子    1615 O   GLY A 207    -11.654  -19.173  -27.935  1.00  31.31
原子    1616 N   GLN A 208    -11.746  -17.115  -26.989  1.00  31.08
原子    1617 CA  GLN A 208    -10.311  -16.877  -27.031  1.00  31.10
原子    1618 CB  GLN A 208    -9.999   -15.540  -27.703  1.00  31.08
原子    1619 CG  GLN A 208    -10.451  -15.455  -29.142  1.00  33.86
原子    1620 CD  GLN A 208    -9.469   -16.059  -30.126  1.00  38.19
原子    1621 OE1 GLN A 208    -9.686   -15.999  -31.335  1.00  41.96
原子    1622 NE2 GLN A 208    -8.386   -16.633  -29.626  1.00  38.96
原子    1623 C   GLN A 208    -9.765   -16.909  -25.611  1.00  30.45
原子    1624 O   GLN A 208    -10.516  -17.048  -24.658  1.00  30.63
原子    1625 N   SER A 209    -8.451   -16.816  -25.469  1.00  29.96
原子    1626 CA  SER A 209    -7.841   -16.898  -24.160  1.00  30.04
原子    1627 CB  SER A 209    -6.382   -17.343  -24.297  1.00  30.04
原子    1628 OG  SER A 209    -5.763   -17.371  -23.030  1.00  32.75
原子    1629 C   SER A 209    -7.948   -15.564  -23.409  1.00  29.53
原子    1630 O   SER A 209    -7.493   -14.532  -23.908  1.00  29.85
原子    1631 N   GLY A 210    -8.545   -15.594  -22.216  1.00  28.41
原子    1632 CA  GLY A 210    -8.745   -14.388  -21.401  1.00  27.16
原子    1633 C   GLY A 210    -8.344   -14.480  -19.938  1.00  26.83
原子    1634 O   GLY A 210    -8.425   -13.498  -19.203  1.00  26.61
原子    1635 N   SER A 211    -7.888   -15.648  -19.497  1.00  25.85
原子    1636 CA  SER A 211    -7.651   -15.867  -18.067  1.00  25.26
原子    1637 CB  SER A 211    -7.401   -17.353  -17.783  1.00  25.87
原子    1638 OG  SER A 211    -6.315   -17.789  -18.573  1.00  26.62
原子    1639 C   SER A 211    -6.509   -15.026  -17.498  1.00  24.55
原子    1640 O   SER A 211    -6.542   -14.676  -16.311  1.00  24.46
原子    1641 N   ALA A 212    -5.505   -14.712  -18.323  1.00  23.56
原子    1642 CA  ALA A 212    -4.423   -13.816  -17.906  1.00  23.42
原子    1643 CB  ALA A 212    -3.417   -13.622  -19.031  1.00  23.66
原子    1644 C   ALA A 212    -4.999   -12.450  -17.496  1.00  23.54
原子    1645 O   ALA A 212    -4.566   -11.848  -16.513  1.00  24.00
原子    1646 N   TYR A 213    -5.970   -11.979  -18.271  1.00  22.79
原子    1647 CA  TYR A 213    -6.594   -10.676  -18.017  1.00  22.18
原子    1648 CB  TYR A 213    -7.453   -10.241  -19.193  1.00  21.74
原子    1649 CG  TYR A 213    -6.761   -10.345  -20.515  1.00  20.05
原子    1650 CD1 TYR A 213    -7.461   -10.761  -21.637  1.00  20.58
原子    1651 CE1 TYR A 213    -6.854   -10.854  -22.868  1.00  21.95
原子    1652 CZ  TYR A 213    -5.503   -10.545  -22.988  1.00  20.62
原子    1653 OH  TYR A 213    -4.930   -10.668  -24.220  1.00  21.72
原子    1654 CE2 TYR A 213    -4.758   -10.149  -21.888  1.00  19.76
原子    1655 CD2 TYR A 213    -5.400   -10.038  -20.647  1.00  20.61
原子    1656 C   TYR A 213    -7.423   -10.710  -16.758  1.00  23.06
原子    1657 O   TYR A 213    -7.320   -9.804   -15.939  1.00  22.56
原子    1658 N   SER A 214    -8.226   -11.767  -16.578  1.00  23.15
原子    1659 CA  SER A 214    -9.064   -11.832  -15.392  1.00  23.90
原子    1660 CB  SER A 214    -10.244  -12.798  -15.580  1.00  24.54
原子    1661 OG  SER A 214    -9.776   -14.085  -15.939  1.00  27.95
原子    1662 C   SER A 214    -8.259   -12.122  -14.122  1.00  23.64
原子    1663 O   SER A 214    -8.676   -11.762  -13.026  1.00  23.43
原子    1664 N   SER A 215    -7.095   -12.743  -14.248  1.00  23.82
原子    1665 CA  SER A 215    -6.295   -12.970  -13.050  1.00  24.66
原子    1666 CB  SER A 215    -5.390   -14.205  -13.200  1.00  25.70
原子    1667 OG  SER A 215    -4.267   -13.914  -14.004  1.00  29.15
原子    1668 C   SER A 215    -5.491   -11.739  -12.610  1.00  23.98
原子    1669 O   SER A 215    -5.217   -11.561  -11.421  1.00  24.09
原子    1670 N   VAL A 216    -5.115   -10.894  -13.566  1.00  22.89
原子    1671 CA  VAL A 216    -4.347   -9.679   -13.272  1.00  22.50
原子    1672 CB  VAL A 216    -3.442   -9.296   -14.493  1.00  22.52
原子    1673 CG1 VAL A 216    -2.855   -7.888   -14.369  1.00  24.11
原子    1674 CG2 VAL A 216    -2.296   -10.317  -14.652  1.00  22.49
原子    1675 C   VAL A 216    -5.256   -8.520   -12.801  1.00  21.88
原子    1676 O   VAL A 216    -4.869   -7.745   -11.936  1.00  21.84
原子    1677 N   ALA A 217    -6.475   -8.440   -13.332  1.00  21.86
原子    1678 CA  ALA A 217    -7.374   -7.303   -13.050  1.00  21.59
原子    1679 CB  ALA A 217    -8.721   -7.479   -13.760  1.00  21.26
原子    1680 C   ALA A 217    -7.571   -6.968   -11.558  1.00  21.55
原子    1681 O   ALA A 217    -7.447   -5.804   -11.165  1.00  21.20
原子    1682 N   PRO A 218    -7.842   -7.988   -10.701  1.00  21.95
原子    1683 CA  PRO A 218    -8.030   -7.700   -9.282   1.00  21.59
原子    1684 CB  PRO A 218    -8.283   -9.104   -8.670   1.00  22.29
原子    1685 CG  PRO A 218    -8.789    9.905   -9.789   1.00  22.61
原子    1686 CD  PRO A 218    -7.966   -9.435   -10.963  1.00  22.11
原子    1687 C   PRO A 218    -6.798   -7.065   -8.634   1.00  21.27
原子    1688 O   PRO A 218    -6.928   -6.299   -7.680   1.00  20.92
原子    1689 N   GLN A 219    -5.608   -7.386   -9.141   1.00  21.17
原子    1690 CA  GLN A 219    -4.378   -6.786   -8.609   1.00  21.51
原子    1691 CB  GLN A 219    -3.149   -7.569   -9.084   1.00  22.72
原子    1692 CG  GLN A 219    -3.113   -8.985   -8.516   1.00  24.90
原子    1693 CD  GLN A 219    -3.323   -8.982   -7.015   1.00  29.57
原子    1694 OE1 GLN A 219    -2.715   -8.188   -6.288   1.00  31.58
原子    1695 NE2 GLN A 219    -4.207   -9.843   -6.545   1.00  33.22
原子    1696 C   GLN A 219    -4.240   -5.301   -8.996   1.00  21.04
原子    1697 O   GLN A 219    -3.687   -4.490   -8.229   1.00  21.07
原子    1698 N   VAL A 220    -4.728   -4.973   -10.187  1.00  20.00
原子    1699 CA  VAL A 220    -4.746   -3.577   -10.630  1.00  19.34
原子    1700 CB  VAL A 220    -5.098   -3.456   -12.128  1.00  19.63
原子    1701 CG1 VAL A 220    -4.991   -2.000   -12.581  1.00  19.15
原子    1702 CG2 VAL A 220    -4.162   -4.342   -12.974  1.00  17.97
原子    1703 C   VAL A 220    -5.730   -2.809   -9.737   1.00  19.65
原子    1704 O   VAL A 220    -5.419   -1.728   -9.257   1.00  18.97
原子    1705 N   LEU A 221    -6.903   -3.391   -9.490   1.00  20.12
原子    1706 CA  LEU A 221    -7.895   -2.776   -8.620   1.00  20.83
原子    1707 CB  LEU A 221    -9.180   -3.602   -8.599   1.00  20.48
原子    1708 CG  LEU A 221    -10.336  -2.991   -7.790   1.00  22.48
原子    1709 CD1 LEU A 221    -10.857  -1.726   -8.458   1.00  22.33
原子    1710 CD2 LEU A 221    -11.430  -4.011   -7.637   1.00  22.51
原子    1711 C   LEU A 221    -7.360   -2.591   -7.192   1.00  21.44
原子    1712 O   LEU A 221    -7.617   -1.578   -6.539   1.00  20.45
原子    1713 N   CYS A 222    -6.600   -3.572   -6.718   1.00  22.60
原子    1714 CA  CYS A 222    -5.957   -3.477   -5.415   1.00  22.10
原子    1715 CB  CYS A 222    -5.159   -4.749   -5.125   1.00  23.41
原子    1716 SG  CYS A 222    -4.975   -5.000   -3.356   1.00  28.49
原子    1717 C   CYS A 222    -5.035   -2.270   -5.317   1.00  21.22
原子    1718 O   CYS A 222    -5.060   -1.531   -4.331   1.00  21.24
原子    1719 N   PHE A 223    -4.210   -2.070   -6.347   1.00  20.11
原子    1720 CA  PHE A 223    -3.287   -0.955   -6.368   1.00  19.03
原子    1721 CB  PHE A 223    -2.334   -1.108   -7.558   1.00  19.15
原子    1722 CG  PHE A 223    -1.297   -0.011   -7.669   1.00  19.23
原子    1723 CD1 PHE A 223    -0.576    0.410   -6.558   1.00  19.90
原子    1724 CE1 PHE A 223     0.380    1.417   -6.661   1.00  20.91
原子    1725 CZ  PHE A 223     0.645    2.017   -7.902   1.00  21.07
原子    1726 CE2 PHE A 223    -0.061    1.598   -9.024   1.00  18.81
原子    1727 CD2 PHE A 223    -1.022    0.581   -8.909   1.00  18.23
原子    1728 C   PHE A 223    -4.032    0.397   -6.423   1.00  18.38
原子    1729 O   PHE A 223    -3.597    1.376   -5.818   1.00  18.27
原子    1730 N   LEU A 224    -5.148    0.428   -7.142   1.00  18.45
原子    1731 CA  LEU A 224    -5.957    1.665   -7.277   1.00  18.42
原子    1732 CB  LEU A 224    -7.208    1.403   -8.127   1.00  17.70
原子    1733 CG  LEU A 224    -7.990    2.645   -8.610   1.00  19.73
原子    1734 CD1 LEU A 224    -7.133    3.427   -9.584   1.00  20.37
原子    1735 CD2 LEU A 224    -9.302    2.228   -9.264   1.00  18.64
原子    1736 C   LEU A 224    -6.385    2.226   -5.917   1.00  18.87
原子    1737 O   LEU A 224    -6.553    3.438   -5.757   1.00  18.45
原子    1738 N   GLN A 225    -6.578    1.336   -4.944   1.00  19.17
原子    1739 CA  GLN A 225    -6.984    1.743   -3.585   1.00  20.00
原子    1740 CB  GLN A 225    -7.340    0.511   -2.725   1.00  20.26
原子    1741 CG  GLN A 225    -8.295   -0.463   -3.409   1.00  21.22
原子    1742 CD  GLN A 225    -9.519    0.225   -3.993   1.00  22.53
原子    1743 OE1 GLN A 225    -10.280   0.870   -3.262   1.00  23.09
原子    1744 NE2 GLN A 225    -9.718    0.092   -5.302   1.00  19.33
原子    1745 C   GLN A 225    -5.944    2.599   -2.871   1.00  20.19
原子    1746 O   GLN A 225    -6.299    3.399   -2.009   1.00  20.64
原子    1747 N   ARG A 226    -4.678    2.450   -3.253   1.00  20.51
原子    1748 CA  ARG A 226    -3.564    3.144   -2.608   1.00  21.40
原子    1749 CB  ARG A 226    -2.219    2.505   -2.990   1.00  22.72
原子    1750 CG  ARG A 226    -2.081    1.010   -2.683   1.00  26.14
原子    1751 CD  ARG A 226    -1.806    0.741   -1.204   1.00  32.16
原子    1752 NE  ARG A 226    -3.035    0.843   -0.432   1.00  37.77
原子    1753 CZ  ARG A 226    -3.997   -0.079   -0.413   1.00  41.09
原子    1754 NH1 ARG A 226    -5.093    0.120    0.322   1.00  42.17
原子    1755 NH2 ARG A 226    -3.874   -1.196   -1.127   1.00  42.78
原子    1756 C   ARG A 226    -3.499    4.645   -2.915   1.00  21.23
原子    1757 O   ARG A 226    -2.723    5.358   -2.288   1.00  20.95
原子    1758 N   PHE A 227    -4.298    5.123   -3.869   1.00  20.28
原子    1759 CA  PHE A 227    -4.280    6.545   -4.250   1.00  19.67
原子    1760 CB  PHE A 227    -4.777    6.704   -5.693   1.00  19.40
原子    1761 CG  PHE A 227    -3.814    6.195   -6.744   1.00  18.28
原子    1762 CD1 PHE A 227    -3.733    4.831   -7.040   1.00  18.14
原子    1763 CE1 PHE A 227    -2.855    4.355   -8.046   1.00  18.24
原子    1764 CZ  PHE A 227    -2.034    5.264   -8.748   1.00  16.75
原子    1765 CE2 PHE A 227    -2.113    6.641   -8.456   1.00  18.79
原子    1766 CD2 PHE A 227    -3.005    7.091   -7.452   1.00  17.51
原子    1767 C   PHE A 227    -5.126    7.435   -3.343   1.00  20.55
原子    1768 O   PHE A 227    -4.967    8.659   -3.334   1.00  20.38
原子    1769 N   TRP A 228    -6.032    6.820   -2.583   1.00  20.72
原子    1770 CA  TRP A 228    -6.924    7.545   -1.671   1.00  20.71
原子    1771 CB  TRP A 228    -8.036    6.596   -1.211   1.00  20.41
原子    1772 CG  TRP A 228    -9.030    7.228   -0.283   1.00  20.59
原子    1773 CD1 TRP A 228    -9.243    6.915    1.040   1.00  21.81
原子    1774 NE1 TRP A 228    -10.255   7.722    1.557   1.00  22.69
原子    1775 CE2 TRP A 228    -10.712   8.553    0.565   1.00  20.71
原子    1776 CD2 TRP A 228    -9.958    8.280   -0.607   1.00  18.88
原子    1777 CE3 TRP A 228    -10.225   9.014   -1.772   1.00  18.79
原子    1778 CZ3 TRP A 228    -11.209   9.986   -1.734   1.00  20.13
原子    1779 CH2 TRP A 228    -11.937   10.242  -0.552   1.00  21.18
原子    1780 CZ2 TRP A 228    -11.710   9.537    0.601   1.00  21.65
原子    1781 C   TRP A 228    -6.193    8.120   -0.463   1.00  21.38
原子    1782 O   TRP A 228    -5.479    7.394    0.236   1.00  21.50
原子    1783 N   VAL A 229    -6.379    9.416   -0.209   1.00  21.95
原子    1784 CA  VAL A 229    -5.844    10.065   0.983   1.00  22.99
原子    1785 CB  VAL A 229    -5.205    11.436   0.654   1.00  22.81
原子    1786 CG1 VAL A 229    -4.490    12.026   1.871   1.00  23.48
原子    1787 CG2 VAL A 229    -4.226    11.292  -0.493   1.00  23.28
原子    1788 C   VAL A 229    -6.984    10.206   2.000   1.00  24.08
原子    1789 O   VAL A 229    -7.803    11.119   1.899   1.00  23.70
原子    1790 N   SER A 230    -7.044    9.298    2.974   1.00  25.37
原子    1791 CA  SER A 230    -8.193    9.290    3.905   1.00  27.59
原子    1792 CB  SER A 230    -8.254    8.000    4.728   1.00  27.67
原子    1793 OG  SER A 230    -7.029    7.805    5.402   1.00  31.30
原子    1794 C   SER A 230    -8.241    10.513   4.820   1.00  27.93
原子    1795 O   SER A 230    -9.321    10.983   5.174   1.00  28.91
原子    1796 N   SER A 231    -7.088    11.059   5.165   1.00  28.76
原子    1797 CA  SER A 231    -7.059    12.237   6.030   1.00  29.72
原子    1798 CB  SER A 231    -5.671    12.461   6.639   1.00  30.39
原子    1799 OG  SER A 231    -4.703    12.713   5.635   1.00  34.43
原子    1800 C   SER A 231    -7.566    13.491   5.323   1.00  29.39
原子    1801 O   SER A 231    -8.154    14.364   5.966   1.00  30.97
原子    1802 N   GLY A 232    -7.373    13.579   4.005   1.00  27.59
原子    1803 CA  GLY A 232    -7.867    14.728   3.247   1.00  25.22
原子    1804 C   GLY A 232    -9.181    14.518   2.493   1.00  23.25
原子    1805 O   GLY A 232    -9.810    15.487   2.077   1.00  23.19
原子    1806 N   GLY A 233    -9.589    13.265   2.320   1.00  20.97
原子    1807 CA  GLY A 233    -10.809   12.937   1.578   1.00  19.35
原子    1808 C   GLY A 233    -10.673   13.226   0.094   1.00  18.83
原子    1809 O   GLY A 233    -11.636   13.655  -0.561   1.00  19.20
原子    1810 N   TYR A 234    -9.487    12.977  -0.463   1.00  17.56
原子    1811 CA  TYR A 234    -9.309    13.155  -1.915   1.00  17.17
原子    1812 CB  TYR A 234    -8.851    14.584  -2.232   1.00  18.33
原子    1813 CG  TYR A 234    -7.441    14.876  -1.758   1.00  20.39
原子    1814 CD1 TYR A 234    -7.203    15.340  -0.454   1.00  20.72
原子    1815 CE1 TYR A 234    -5.905    15.594  -0.018   1.00  24.11
原子    1816 CZ  TYR A 234    -4.840    15.399  -0.897   1.00  23.78
原子    1817 OH  TYR A 234    -3.556    15.663  -0.483   1.00  26.50
原子    1818 CE2 TYR A 234    -5.055    14.956  -2.187   1.00  24.07
原子    1819 CD2 TYR A 234    -6.353    14.699  -2.611   1.00  20.58
原子    1820 C   TYR A 234    -8.318    12.141  -2.482   1.00  16.60
原子    1821 O   TYR A 234    -7.615    11.465  -1.735   1.00  16.29
原子    1822 N   VAL A 235    -8.260    12.059  -3.805   1.00  15.36
原子    1823 CA  VAL A 235    -7.325    11.164  -4.472   1.00  15.62
原子    1824 CB  VAL A 235    -7.948    10.638  -5.798   1.00  15.96
原子    1825 CG1 VAL A 235    -6.889    9.893   -6.645   1.00  17.31
原子    1826 CG2 VAL A 235    -9.134    9.723   -5.506   1.00  15.87
原子    1827 C   VAL A 235    -6.011    11.904  -4.742   1.00  15.54
原子    1828 O   VAL A 235    -6.006    12.998  -5.320   1.00  15.39
原子    1829 N   ASP A 236    -4.886    11.316  -4.325   1.00  15.24
原子    1830 CA  ASP A 236    -3.580    11.837  -4.705   1.00  15.22
原子    1831 CB  ASP A 236    -2.533    11.431  -3.652   1.00  16.45
原子    1832 CG  ASP A 236    -1.145    11.922  -3.970   1.00  18.62
原子    1833 OD1 ASP A 236    -0.937    12.617  -4.992   1.00  17.17
原子    1834 OD2 ASP A 236    -0.223    11.568  -3.182   1.00  22.79
原子    1835 C   ASP A 236    -3.303    11.256  -6.098   1.00  15.06
原子    1836 O   ASP A 236    -3.088    10.040  -6.261   1.00  15.39
原子    1837 N   SER A 237    -3.384    12.104  -7.125   1.00  14.24
原子    1838 CA  SER A 237    -3.518    11.587  -8.503   1.00  14.09
原子    1839 CB  SER A 237    -4.000    12.697  -9.446   1.00  13.76
原子    1840 OG  SER A 237    -5.312    13.094  -9.070   1.00  14.52
原子    1841 C   SER A 237    -2.277    10.883  -9.053   1.00  14.22
原子    1842 O   SER A 237    -2.376    10.067  -9.965   1.00  13.80
原子    1843 N   ASN A 238    -1.099    11.219  -8.521   1.00  14.70
原子    1844 CA  ASN A 238     0.116    10.547  -8.952   1.00  15.28
原子    1845 CB  ASN A 238     0.968    11.439  -9.856   1.00  14.84
原子    1846 CG  ASN A 238     0.277    11.742  -11.176  1.00  17.08
原子    1847 OD1 ASN A 238     0.244    10.901  -12.072  1.00  16.61
原子    1848 ND2 ASN A 238    -0.308    12.932  -11.278  1.00  16.63
原子    1849 C   ASN A 238     0.912    10.150  -7.736   1.00  16.07
原子    1850 O   ASN A 238     1.169    10.988  -6.890   1.00  15.88
原子    1851 N   ILE A 239     1.280    8.875   -7.659   1.00  16.09
原子    1852 CA  ILE A 239     2.125    8.410   -6.567   1.00  18.07
原子    1853 CB  ILE A 239     1.340    7.452   -5.600   1.00  17.66
原子    1854 CG1 ILE A 239     0.893    6.180   -6.336   1.00  18.85
原子    1855 CD1 ILE A 239     0.184    5.109   -5.437   1.00  19.02
原子    1856 CG2 ILE A 239     0.116    8.194   -4.974   1.00  16.96
原子    1857 C   ILE A 239     3.381    7.760   -7.169   1.00  19.32
原子    1858 O   ILE A 239     3.571    7.797   -8.392   1.00  19.19
原子    1859 N   ASN A 240     4.242    7.170   -6.329   1.00  20.56
原子    1860 CA  ASN A 240     5.517    6.617   -6.823   1.00  22.24
原子    1861 CB  ASN A 240     5.275    5.385   -7.717   1.00  21.93
原子    1862 CG  ASN A 240     4.874    4.153   -6.926   1.00  24.19
原子    1863 OD1 ASN A 240     5.269    3.995   -5.772   1.00  25.98
原子    1864 ND2 ASN A 240     4.083    3.278   -7.538   1.00  22.26
原子    1865 C   ASN A 240     6.334    7.677   -7.571   1.00  23.27
原子    1866 O   ASN A 240     7.000    7.381   -8.562   1.00  23.15
原子    1867 N   THR A 241     6.261    8.919   -7.096   1.00  25.02
原子    1868 CA  THR A 241     6.939    10.038  -7.729   1.00  28.12
原子    1869 CB  THR A 241     6.044    10.720  -8.817   1.00  28.09
原子    1870 OG1 THR A 241     6.741    11.836  -9.369   1.00  28.75
原子    1871 CG2 THR A 241     4.727    11.208  -8.231   1.00  28.30
原子    1872 C   THR A 241     7.302    11.065  -6.674   1.00  29.96
原子    1873 O   THR A 241     6.749    11.037  -5.589   1.00  30.58
原子    1874 N   ASN A 242     8.209    11.984  -6.991   1.00  33.17
原子    1875 CA  ASN A 242     8.585    13.019  -6.024   1.00  36.07
原子    1876 CB  ASN A 242     10.059   12.880  -5.616   1.00  37.13
原子    1877 CG  ASN A 242     10.324   11.631  -4.771   1.00  40.96
原子    1878 OD1 ASN A 242     9.509    11.235  -3.921   1.00  45.33
原子    1879 ND2 ASN A 242     11.477   11.007  -4.998   1.00  44.43
原子    1880 C   ASN A 242     8.321    14.427  -6.528   1.00  37.00
原子    1881 O   ASN A 242     9.091    15.346  -6.245   1.00  37.94
原子    1882 N   GLU A 243     7.210    14.602  -7.233   1.00  37.54
原子    1883 CA  GLU A 243     6.895    15.869  -7.907   1.00  38.05
原子    1884 CB  GLU A 243     5.775    15.638  -8.925   1.00  38.77
原子    1885 CG  GLU A 243     5.650    16.732  -9.977   1.00  42.65
原子    1886 CD  GLU A 243     6.959    16.985  -10.709  1.00  47.49
原子    1887 OE1 GLU A 243     7.424    16.084  -11.453  1.00  49.14
原子    1888 OE2 GLU A 243     7.520    18.090  -10.532  1.00  50.15
原子    1889 C   GLU A 243     6.559    17.088  -7.015   1.00  37.15
原子    1890 O   GLU A 243     6.645    18.240  -7.469   1.00  38.39
原子    1891 N   GLY A 244     6.174    16.873  -5.766   1.00  35.69
原子    1892 CA  GLY A 244     5.858    18.019  -4.911   1.00  33.51
原子    1893 C   GLY A 244     4.609    18.775  -5.369   1.00  31.80
原子    1894 O   GLY A 244     4.634    19.999  -5.535   1.00  33.32
原子    1895 N   ARG A 245     3.529    18.036  -5.612   1.00  27.92
原子    1896 CA  ARG A 245     2.200    18.618  -5.781   1.00  24.21
原子    1897 CB  ARG A 245     1.638    18.224  -7.130   1.00  24.30
原子    1898 CG  ARG A 245     2.410    18.842  -8.275   1.00  24.62
原子    1899 CD  ARG A 245     1.625    18.681  -9.532   1.00  22.11
原子    1900 NE  ARG A 245     2.462    18.829  -10.713  1.00  21.13
原子    1901 CZ  ARG A 245     2.114    18.302  -11.878  1.00  21.50
原子    1902 NH1 ARG A 245     0.982    17.621  -11.945  1.00  18.57
原子    1903 NH2 ARG A 245     2.883    18.443  -12.951  1.00  20.83
原子    1904 C   ARG A 245     1.295    18.040  -4.718   1.00  21.84
原子    1905 O   ARG A 245     1.624    17.021  -4.128   1.00  20.65
原子    1906 N   THR A 246     0.140    18.652  -4.483   1.00  19.15
原子    1907 CA  THR A 246    -0.824    18.058  -3.540   1.00  17.46
原子    1908 CB  THR A 246    -1.989    18.997  -3.238   1.00  17.87
原子    1909 OG1 THR A 246    -2.752    19.155  -4.440   1.00  15.85
原子    1910 CG2 THR A 246    -1.495    20.370  -2.730   1.00  17.50
原子    1911 C   THR A 246    -1.426    16.769  -4.103   1.00  17.25
原子    1912 O   THR A 246    -1.884    15.914  -3.351   1.00  17.57
原子    1913 N   GLY A 247    -1.482    16.646  -5.430   1.00  15.60
原子    1914 CA  GLY A 247    -2.148    15.492  -6.054   1.00  15.02
原子    1915 C   GLY A 247    -3.609    15.761  -6.396   1.00  14.69
原子    1916 O   GLY A 247    -4.260    14.939  -7.059   1.00  14.45
原子    1917 N   LYS A 248    -4.137    16.890  -5.928   1.00  13.43
原子    1918 CA  LYS A 248    -5.508    17.286  -6.259   1.00  13.00
原子    1919 CB  LYS A 248    -5.969    18.453  -5.396   1.00  12.32
原子    1920 CG  LYS A 248    -5.965    18.179  -3.881   1.00  13.12
原子    1921 CD  LYS A 248    -6.133    19.493  -3.102   1.00  14.08
原子    1922 CE  LYS A 248    -5.985    19.253  -1.584   1.00  17.84
原子    1923 NZ  LYS A 248    -6.335    20.492  -0.835   1.00  16.74
原子    1924 C   LYS A 248    -5.490    17.713  -7.736   1.00  12.73
原子    1925 O   LYS A 248    -4.866    18.707  -8.104   1.00  12.75
原子    1926 N   ASP A 249    -6.185    16.964  -8.580   1.00  11.92
原子    1927 CA  ASP A 249    -5.958    17.098  -10.024  1.00  11.16
原子    1928 CB  ASP A 249    -4.761    16.199  -10.385  1.00  10.83
原子    1929 CG  ASP A 249    -4.268    16.349  -11.831  1.00  12.54
原子    1930 OD1 ASP A 249    -5.078    16.422  -12.785  1.00  11.42
原子    1931 OD2 ASP A 249    -3.025    16.342  -12.001  1.00  13.30
原子    1932 C   ASP A 249    -7.232    16.577  -10.662  1.00  11.38
原子    1933 O   ASP A 249    -7.774    15.542  -10.236  1.00  10.86
原子    1934 N   VAL A 250    -7.700    17.265  -11.703  1.00  11.28
原子    1935 CA  VAL A 250    -8.885    16.793  -12.438  1.00  11.59
原子    1936 CB  VAL A 250    -9.366    17.859  -13.493  1.00  12.49
原子    1937 CG1 VAL A 250    -8.480    17.815  -14.728  1.00  13.03
原子    1938 CG2 VAL A 250    -10.859   17.654  -13.852  1.00  13.75
原子    1939 C   VAL A 250    -8.711    15.386  -13.064  1.00  11.77
原子    1940 O   VAL A 250    -9.698    14.750  -13.467  1.00  11.71
原子    1941 N   ASN A 251    -7.461    14.925  -13.168  1.00  10.73
原子    1942 CA  ASN A 251    -7.131    13.491  -13.378  1.00  11.20
原子    1943 CB  ASN A 251    -5.699    13.265  -12.813  1.00  10.94
原子    1944 CG  ASN A 251    -5.221    11.810  -12.892  1.00  11.58
原子    1945 OD1 ASN A 251    -5.986    10.864  -12.672  1.00  12.47
原子    1946 ND2 ASN A 251    -3.898    11.639  -13.164  1.00  14.40
原子    1947 C   ASN A 251    -8.151    12.560  -12.706  1.00  10.99
原子    1948 O   ASN A 251    -8.755    11.706  -13.355  1.00  11.49
原子    1949 N   SER A 252    -8.407    12.774  -11.417  1.00  11.45
原子    1950 CA  SER A 252    -9.293    11.876  -10.634  1.00  11.79
原子    1951 CB  SER A 252    -9.062    12.155  -9.149   1.00  13.31
原子    1952 OG  SER A 252    -9.338    13.524  -8.882   1.00  13.41
原子    1953 C   SER A 252    -10.784   12.002  -10.996  1.00  11.39
原子    1954 O   SER A 252    -11.532   11.023  -10.964  1.00  12.69
原子    1955 N   VAL A 253    -11.199   13.203  -11.383  1.00  10.56
原子    1956 CA  VAL A 253    -12.582   13.459  -11.821  1.00  10.70
原子    1957 CB  VAL A 253    -12.884   15.004  -11.856  1.00  11.02
原子    1958 CG1 VAL A 253    -14.335   15.262  -12.345  1.00  11.24
原子    1959 CG2 VAL A 253    -12.711   15.585  -10.449  1.00  10.91
原子    1960 C   VAL A 253    -12.810   12.827  -13.187  1.00  11.38
原子    1961 O   VAL A 253    -13.824   12.143  -13.407  1.00  11.69
原子    1962 N   LEU A 254    -11.866   13.059  -14.108  1.00  11.32
原子    1963 CA  LEU A 254    -11.891   12.393  -15.417  1.00  12.12
原子    1964 CB  LEU A 254    -10.635   12.759  -16.238  1.00  11.95
原子    1965 CG  LEU A 254    -10.634   14.202  -16.763  1.00  12.23
原子    1966 CD1 LEU A 254    -9.2661   4.564   -17.330  1.00  12.77
原子    1967 CD2 LEU A 254    -11.714   14.371  -17.845  1.00  15.26
原子    1968 C   LEU A 254    -11.963   10.872  -15.271  1.00  12.22
原子    1969 O   LEU A 254    -12.675   10.201  -16.024  1.00  12.01
原子    1970 N   THR A 255    -11.208   10.338  -14.315  1.00  11.58
原子    1971 CA  THR A 255    -11.219   8.913   -14.042  1.00  12.53
原子    1972 CB  THR A 255    -10.267   8.552   -12.890  1.00  12.83
原子    1973 OG1 THR A 255    -8.935    8.933   -13.240  1.00  13.00
原子    1974 CG2 THR A 255    -10.300   7.035   -12.634  1.00  15.06
原子    1975 C   THR A 255    -12.632   8.448   -13.705  1.00  13.12
原子    1976 O   THR A 255    -13.131   7.467   -14.285  1.00  13.49
原子    1977 N   SER A 256    -13.289   9.158   -12.790  1.00  13.46
原子    1978 CA  SER A 256    -14.641   8.781   -12.343  1.00  12.85
原子    1979 CB  SER A 256    -15.152   9.760   -11.282  1.00  13.40
原子    1980 OG  SER A 256    -16.332   9.252   -10.674  1.00  16.69
原子    1981 C   SER A 256    -15.610   8.705   -13.518  1.00  13.13
原子    1982 O   SER A 256    -16.360   7.711   -13.654  1.00  13.10
原子    1983 N   ILE A 257    -15.594   9.728   -14.377  1.00  12.32
原子    1984 CA  ILE A 257    -16.523   9.784   -15.513  1.00  12.32
原子    1985 CB  ILE A 257    -16.747   11.215  -16.072  1.00  11.55
原子    1986 CG1 ILE A 257    -15.482   11.773  -16.764  1.00  11.38
原子    1987 CD1 ILE A 257    -15.699   13.143  -17.441  1.00  13.23
原子    1988 CG2 ILE A 257    -17.257   12.166  -14.942  1.00  13.70
原子    1989 C   ILE A 257    -16.220   8.795   -16.653  1.00  12.79
原子    1990 O   ILE A 257    -17.150   8.319   -17.338  1.00  13.25
原子    1991 N   HIS A 258    -14.941   8.487   -16.855  1.00  12.71
原子    1992 CA  HIS A 258    -14.565   7.566   -17.931  1.00  13.41
原子    1993 CB  HIS A 258    -13.194   7.947   -18.498  1.00  12.06
原子    1994 CG  HIS A 258    -13.268   9.175   -19.341  1.00  13.92
原子    1995 ND1 HIS A 258    -13.942   9.196   -20.547  1.00  16.01
原子    1996 CE1 HIS A 258    -13.891   10.421  -21.047  1.00  18.57
原子    1997 NE2 HIS A 258    -13.256   11.199  -20.189  1.00  14.08
原子    1998 CD2 HIS A 258    -12.861   10.449  -19.108  1.00  13.51
原子    1999 C   HIS A 258    -14.649   6.091   -17.565  1.00  14.12
原子    2000 O   HIS A 258    -14.645   5.239   -18.454  1.00  14.90
原子    2001 N   THR A 259    -14.752   5.801   -16.274  1.00  13.93
原子    2002 CA  THR A 259    -15.034   4.420   -15.807  1.00  14.91
原子    2003 CB  THR A 259    -13.933   3.856   -14.899  1.00  14.46
原子    2004 OG1 THR A 259    -13.788   4.647   -13.705  1.00  15.66
原子    2005 CG2 THR A 259    -12.589   3.802   -15.677  1.00  15.81
原子    2006 C   THR A 259    -16.433   4.248   -15.173  1.00  14.21
原子    2007 O   THR A 259    -16.709   3.235   -14.546  1.00  14.95
原子    2008 N   PHE A 260    -17.290   5.238   -15.367  1.00  14.76
原子    2009 CA  PHE A 260    -18.691   5.194   -14.926  1.00  15.13
原子    2010 CB  PHE A 260    -19.377   6.492   -15.379  1.00  15.81
原子    2011 CG  PHE A 260    -20.886   6.508   -15.228  1.00  15.47
原子    2012 CD1 PHE A 260    -21.505   6.188   -14.015  1.00  17.59
原子    2013 CE1 PHE A 260    -22.903   6.259   -13.898  1.00  19.11
原子    2014 CZ  PHE A 260    -23.682   6.653   -14.991  1.00  17.18
原子    2015 CE2 PHE A 260    -23.082   6.994   -16.178  1.00  18.04
原子    2016 CD2 PHE A 260    -21.679   6.917   -16.296  1.00  17.22
原子    2017 C   PHE A 260    -19.436   3.977   -15.475  1.00  15.55
原子    2018 O   PHE A 260    -19.426   3.725   -16.684  1.00  15.81
原子    2019 N   ASP A 261    -20.093   3.235   -14.586  1.00  15.51
原子    2020 CA  ASP A 261    -21.008   2.176   -15.006  1.00  16.05
原子    2021 CB  ASP A 261    -20.303   0.813   -15.015  1.00  16.46
原子    2022 CG  ASP A 261    -21.205  -0.321   -15.490  1.00  17.60
原子    2023 OD1 ASP A 261    -22.440  -0.122   -15.579  1.00  18.97
原子    2024 OD2 ASP A 261    -20.656  -1.404   -15.810  1.00  18.29
原子    2025 C   ASP A 261    -22.117   2.185   -13.972  1.00  16.30
原子    2026 O   ASP A 261    -21.882   1.809   -12.840  1.00  15.53
原子    2027 N   PRO A 262    -23.320   2.610   -14.374  1.00  18.21
原子    2028 CA  PRO A 262    -24.438   2.716   -13.412  1.00  20.39
原子    2029 CB  PRO A 262    -25.589   3.308   -14.247  1.00  20.43
原子    2030 CG  PRO A 262    -25.235   3.044   -15.669  1.00  20.06
原子    2031 CD  PRO A 262    -23.709   2.994   -15.734  1.00  17.40
原子    2032 C   PRO A 262    -24.815   1.382   -12.753  1.00  22.31
原子    2033 O   PRO A 262    -25.356   1.374   -11.622  1.00  22.24
原子    2034 N   ASN A 263    -24.508   0.267   -13.421  1.00  22.99
原子    2035 CA  ASN A 263    -24.750  -1.048   -12.838  1.00  25.42
原子    2036 CB  ASN A 263    -24.574  -2.149   -13.890  1.00  26.62
原子    2037 CG  ASN A 263    -25.680  -2.128   -14.948  1.00  30.74
原子    2038 OD1 ASN A 263    -26.688  -1.419   -14.814  1.00  35.92
原子    2039 ND2 ASN A 263    -25.490  -2.906   -16.007  1.00  35.87
原子    2040 C   ASN A 263    -23.894  -1.316   -11.598  1.00  25.45
原子    2041 O   ASN A 263    -24.210  -2.190   -10.795  1.00  26.56
原子    2042 N   LEU A 264    -22.835  -0.529   -11.413  1.00  24.54
原子    2043 CA  LEU A 264    -22.022  -0.616   -10.213  1.00  24.27
原子    2044 CB  LEU A 264    -20.549  -0.287   -10.520  1.00  24.43
原子    2045 CG  LEU A 264    -19.752  -1.346   -11.288  1.00  25.38
原子    2046 CD1 LEU A 264    -18.375  -0.809   -11.659  1.00  26.05
原子    2047 CD2 LEU A 264    -19.619  -2.672   -10.523  1.00  26.24
原子    2048 C   LEU A 264    -22.542   0.273   -9.066   1.00  23.47
原子    2049 O   LEU A 264    -21.956   0.292   -7.988   1.00  23.97
原子    2050 N   GLY A 265    -23.631   1.000   -9.292   1.00  23.32
原子    2051 CA  GLY A 265    -24.218   1.840   -8.237   1.00  22.74
原子    2052 C   GLY A 265    -23.204   2.843   -7.729   1.00  21.84
原子    2053 O   GLY A 265    -22.416   3.373   -8.510   1.00  22.83
原子    2054 N   CYS A 266    -23.175   3.086   -6.424   1.00  21.37
原子    2055 CA  CYS A 266    -22.233   4.073   -5.883   1.00  21.00
原子    2056 CB  CYS A 266    -22.947   5.049   -4.936   1.00  20.86
原子    2057 SG  CYS A 266    -24.347   5.912   -5.711   1.00  20.96
原子    2058 C   CYS A 266    -20.992   3.427   -5.275   1.00  20.98
原子    2059 O   CYS A 266    -20.513   3.814   -4.203   1.00  21.01
原子    2060 N   ASP A 267    -20.462   2.443   -6.002   1.00  20.39
原子    2061 CA  ASP A 267    -19.303   1.686   -5.577   1.00  20.67
原子    2062 CB  ASP A 267    -18.961   0.621   -6.618   1.00  20.84
原子    2063 CG  ASP A 267    -17.666  -0.101   -6.288   1.00  24.28
原子    2064 OD1 ASP A 267    -16.852  -0.322   -7.200   1.00  25.84
原子    2065 OD2 ASP A 267    -17.455  -0.407   -5.098   1.00  27.46
原子    2066 C   ASP A 267    -18.072   2.567   -5.391   1.00  19.78
原子    2067 O   ASP A 267    -17.593   3.161   -6.353   1.00  18.61
原子    2068 N   ALA A 268    -17.544   2.621   -4.174   1.00  18.35
原子    2069 CA  ALA A 268    -16.315   3.395   -3.944   1.00  19.35
原子    2070 CB  ALA A 268    -16.207   3.868   -2.472   1.00  19.46
原子    2071 C   ALA A 268    -15.017   2.701   -4.415   1.00  19.46
原子    2072 O   ALA A 268    -14.009   3.371   -4.665   1.00  19.42
原子    2073 N   GLY A 269    -15.029   1.370   -4.534   1.00  19.01
原子    2074 CA  GLY A 269    -13.826   0.644   -4.936   1.00  19.17
原子    2075 C   GLY A 269    -13.370   1.032   -6.343   1.00  18.75
原子    2076 O   GLY A 269    -12.175   1.134   -6.624   1.00  19.54
原子    2077 N   THR A 270    -14.330   1.257   -7.230   1.00  17.92
原子    2078 CA  THR A 270    -14.016   1.662   -8.594   1.00  18.35
原子    2079 CB  THR A 270    -14.852   0.882   -9.616   1.00  18.43
原子    2080 OG1 THR A 270    -16.246   1.085   -9.350   1.00  18.51
原子    2081 CG2 THR A 270    -14.529  -0.626   -9.555   1.00  19.75
原子    2082 C   THR A 270    -14.261   3.172   -8.771   1.00  18.25
原子    2083 O   THR A 270    -14.326   3.674   -9.904   1.00  17.88
原子    2084 N   PHE A 271    -14.434   3.880   -7.650   1.00  17.17
原子    2085 CA  PHE A 271    -14.531   5.359   -7.656   1.00  17.38
原子    2086 CB  PHE A 271    -13.183   5.965   -8.121   1.00  17.67
原子    2087 CG  PHE A 271    -12.946   7.376   -7.673   1.00  21.97
原子    2088 CD1 PHE A 271    -12.656   7.653   -6.337   1.00  24.90
原子    2089 CE1 PHE A 271    -12.447   8.981   -5.923   1.00  24.46
原子    2090 CZ  PHE A 271    -12.474   10.043  -6.863   1.00  23.20
原子    2091 CE2 PHE A 271    -12.733   9.783   -8.196   1.00  21.92
原子    2092 CD2 PHE A 271    -12.956   8.436   -8.599   1.00  24.30
原子    2093 C   PHE A 271    -15.677   5.856   -8.551   1.00  16.63
原子    2094 O   PHE A 271    -15.479   6.764   -9.358   1.00  15.93
原子    2095 N   GLN A 272    -16.861   5.249   -8.439   1.00  15.21
原子    2096 CA  GLN A 272    -18.011   5.673   -9.251   1.00  14.97
原子    2097 CB  GLN A 272    -19.227   4.755   -9.013   1.00  14.93
原子    2098 CG  GLN A 272    -19.021   3.355   -9.615   1.00  16.30
原子    2099 CD  GLN A 272    -18.755   3.413   -11.102  1.00  15.81
原子    2100 OE1 GLN A 272    -19.575   3.909   -11.883  1.00  16.97
原子    2101 NE2 GLN A 272    -17.617   2.861   -11.512  1.00  18.50
原子    2102 C   GLN A 272    -18.402   7.118   -8.929   1.00  14.73
原子    2103 O   GLN A 272    -18.194   7.555   -7.800   1.00  15.60
原子    2104 N   PRO A 273    -18.955   7.859   -9.914   1.00  14.45
原子    2105 CA  PRO A 273    -19.342   9.255   -9.682   1.00  14.57
原子    2106 CB  PRO A 273    -20.157   9.597   -10.927  1.00  14.64
原子    2107 CG  PRO A 273    -19.443   8.767   -12.031  1.00  14.70
原子    2108 CD  PRO A 273    -19.156   7.458   -11.326  1.00  14.10
原子    2109 C   PRO A 273    -20.162   9.542   -8.407   1.00  15.22
原子    2110 O   PRO A 273    -19.910   10.562  -7.752   1.00  15.03
原子    2111 N   CYS A 274    -21.130   8.682   -8.075   1.00  15.76
原子    2112 CA  CYS A 274    -21.926   8.913   -6.853   1.00  16.22
原子    2113 CB  CYS A 274    -23.389   8.489   -7.039   1.00  16.57
原子    2114 SG  CYS A 274    -23.611   6.769   -7.423   1.00  17.39
原子    2115 C   CYS A 274    -21.331   8.281   -5.605   1.00  16.64
原子    2116 O   CYS A 274    -21.958   8.329   -4.529   1.00  16.55
原子    2117 N   SER A 275    -20.137   7.681   -5.715   1.00  15.61
原子    2118 CA  SER A 275    -19.476   7.117   -4.528   1.00  15.81
原子    2119 CB  SER A 275    -18.244   6.253   -4.877   1.00  15.06
原子    2120 OG  SER A 275    -17.144   7.041   -5.315   1.00  14.92
原子    2121 C   SER A 275    -19.097   8.232   -3.545   1.00  16.06
原子    2122 O   SER A 275    -18.818   9.366   -3.949   1.00  14.39
原子    2123 N   ASP A 276    -19.103   7.919   -2.248   1.00  16.42
原子    2124 CA  ASP A 276    -18.731   8.935   -1.271   1.00  16.52
原子    2125 CB  ASP A 276    -19.020   8.511    0.189   1.00  16.27
原子    2126 CG  ASP A 276    -18.244   7.281    0.656   1.00  19.14
原子    2127 OD1 ASP A 276    -18.371   7.001    1.873   1.00  19.62
原子    2128 OD2 ASP A 276    -17.544   6.593   -0.120   1.00  17.10
原子    2129 C   ASP A 276    -17.312   9.469   -1.492   1.00  16.17
原子    2130 O   ASP A 276    -17.084   10.683  -1.415   1.00  15.20
原子    2131 N   LYS A 277    -16.381   8.577   -1.823   1.00  15.43
原子    2132 CA  LYS A 277    -14.994   8.982   -2.115   1.00  15.34
原子    2133 CB  LYS A 277    -14.089   7.763   -2.326   1.00  15.23
原子    2134 CG  LYS A 277    -13.924   6.905   -1.059   1.00  17.01
原子    2135 CD  LYS A 277    -12.752   5.929   -1.204   1.00  21.20
原子    2136 CE  LYS A 277    -12.662   5.017    0.015   1.00  22.94
原子    2137 NZ  LYS A 277    -11.533   4.067   -0.165   1.00  29.19
原子    2138 C   LYS A 277    -14.900   9.915   -3.324   1.00  14.30
原子    2139 O   LYS A 277    -14.152   10.887  -3.288   1.00  14.70
原子    2140 N   ALA A 278    -15.644   9.620   -4.393   1.00  14.45
原子    2141 CA  ALA A 278    -15.588   10.464  -5.605   1.00  13.61
原子    2142 CB  ALA A 278    -16.250   9.775   -6.783   1.00  13.30
原子    2143 C   ALA A 278    -16.210   11.827  -5.357   1.00  13.50
原子    2144 O   ALA A 278    -15.730   12.840  -5.864   1.00  13.02
原子    2145 N   LEU A 279    -17.283   11.855  -4.565   1.00  13.22
原子    2146 CA  LEU A 279    -17.936   13.132  -4.239   1.00  12.92
原子    2147 CB  LEU A 279    -19.323   12.893  -3.625   1.00  13.21
原子    2148 CG  LEU A 279    -20.384   12.358  -4.601   1.00  13.94
原子    2149 CD1 LEU A 279    -21.707   11.969  -3.887   1.00  17.68
原子    2150 CD2 LEU A 279    -20.653   13.319  -5.781   1.00  17.52
原子    2151 C   LEU A 279    -17.065   13.995  -3.348   1.00  12.84
原子    2152 O   LEU A 279    -16.941   15.203  -3.577   1.00  13.54
原子    2153 N   SER A 280    -16.463   13.390  -2.315   1.00  12.45
原子    2154 CA  SER A 280    -15.502   14.106  -1.459   1.00  13.53
原子    2155 CB  SER A 280    -14.951   13.168  -0.364   1.00  13.65
原子    2156 OG  SER A 280    -14.008   13.863   0.468   1.00  15.07
原子    2157 C   SER A 280    -14.332   14.672  -2.285   1.00  14.09
原子    2158 O   SER A 280    -13.925   15.856  -2.130   1.00  13.43
原子    2159 N   ASN A 281    -13.795   13.830  -3.166   1.00  13.27
原子    2160 CA  ASN A 281    -12.690   14.257  -4.027   1.00  13.19
原子    2161 CB  ASN A 281    -12.239   13.078  -4.888   1.00  12.05
原子    2162 CG  ASN A 281    -11.116   13.455  -5.849   1.00  13.13
原子    2163 OD1 ASN A 281    -9.989    13.637  -5.446   1.00  13.26
原子    2164 ND2 ASN A 281    -11.442   13.573  -7.124   1.00  11.63
原子    2165 C   ASN A 281    -13.096   15.432  -4.933   1.00  12.33
原子    2166 O   ASN A 281    -12.330   16.380  -5.109   1.00  13.49
原子    2167 N   LEU A 282    -14.287   15.355  -5.506   1.00  12.05
原子    2168 CA  LEU A 282    -14.760   16.422  -6.376   1.00  13.21
原子    2169 CB  LEU A 282    -16.147   16.109  -6.949   1.00  12.17
原子    2170 CG  LEU A 282    -16.791   17.216  -7.820   1.00  14.57
原子    2171 CD1 LEU A 282    -16.011   17.378  -9.126   1.00  16.58
原子    2172 CD2 LEU A 282    -18.241   16.863  -8.170   1.00  15.68
原子    2173 C   LEU A 282    -14.739   17.754  -5.638   1.00  12.69
原子    2174 O   LEU A 282    -14.201   18.735  -6.153   1.00  13.45
原子    2175 N   LYS A 283    -15.283   17.791  -4.415   1.00  12.75
原子    2176 CA  LYS A 283    -15.306   19.026  -3.656   1.00  12.89
原子    2177 CB  LYS A 283    -16.079   18.860  -2.334   1.00  12.90
原子    2178 CG  LYS A 283    -15.912   20.089  -1.432   1.00  13.94
原子    2179 CD  LYS A 283    -16.909   20.076  -0.252   1.00  14.67
原子    2180 CE  LYS A 283    -16.530   21.136   0.797   1.00  13.67
原子    2181 NZ  LYS A 283    -16.315   22.489   0.212   1.00  19.03
原子    2182 C   LYS A 283    -13.889   19.537  -3.385   1.00  12.43
原子    2183 O   LYS A 283    -13.612   20.710  -3.556   1.00  12.14
原子    2184 N   VAL A 284    -12.988   18.652  -2.966   1.00  12.02
原子    2185 CA  VAL A 284    -11.624   19.055  -2.633   1.00  12.77
原子    2186 CB  VAL A 284    -10.845   17.875  -2.014   1.00  13.17
原子    2187 CG1 VAL A 284    -9.320    18.169  -1.936   1.00  13.21
原子    2188 CG2 VAL A 284    -11.391   17.557  -0.630   1.00  15.81
原子    2189 C   VAL A 284    -10.927   19.599  -3.881   1.00  12.74
原子    2190 O   VAL A 284    -10.228   20.636  -3.827   1.00  12.21
原子    2191 N   VAL A 285    -11.153   18.927  -5.012   1.00  11.54
原子    2192 CA  VAL A 285    -10.560   19.389  -6.287   1.00  12.35
原子    2193 CB  VAL A 285    -10.694   18.330  -7.425   1.00  12.36
原子    2194 CG1 VAL A 285    -10.316   18.944  -8.813   1.00  12.25
原子    2195 CG2 VAL A 285    -9.795    17.104  -7.140   1.00  13.25
原子    2196 C   VAL A 285    -11.130   20.770  -6.712   1.00  12.08
原子    2197 O   VAL A 285    -10.367   21.696  -6.989   1.00  12.60
原子    2198 N   VAL A 286    -12.452   20.913  -6.728   1.00  11.87
原子    2199 CA  VAL A 286    -13.089   22.196  -7.074   1.00  12.87
原子    2200 CB  VAL A 286    -14.631   22.080  -7.038   1.00  13.01
原子    2201 CG1 VAL A 286    -15.300   23.468  -7.140   1.00  14.31
原子    2202 CG2 VAL A 286    -15.103   21.157  -8.200   1.00  14.42
原子    2203 C   VAL A 286    -12.586   23.324  -6.164   1.00  12.84
原子    2204 O   VAL A 286    -12.206   24.402  -6.635   1.00  13.75
原子    2205 N   ASP A 287    -12.552   23.064  -4.853   1.00  12.85
原子    2206 CA  ASP A 287    -12.116   24.059  -3.870   1.00  13.90
原子    2207 CB  ASP A 287    -12.199   23.506  -2.440   1.00  13.12
原子    2208 CG  ASP A 287    -13.637   23.441  -1.924   1.00  16.00
原子    2209 OD1 ASP A 287    -14.541   24.002  -2.583   1.00  16.20
原子    2210 OD2 ASP A 287    -13.857   22.835  -0.858   1.00  16.76
原子    2211 C   ASP A 287    -10.727   24.564  -4.136   1.00  14.28
原子    2212 O   ASP A 287    -10.425   25.722  -3.841   1.00  15.53
原子    2213 N   SER A 288    -9.862    23.709  -4.677   1.00  14.50
原子    2214 CA  SER A 288    -8.478    24.093  -4.949   1.00  14.58
原子    2215 CB  SER A 288    -7.625    22.843  -5.229   1.00  14.15
原子    2216 OG  SER A 288    -7.758    22.417  -6.565   1.00  13.73
原子    2217 C   SER A 288    -8.326    25.186  -6.038   1.00  14.61
原子    2218 O   SER A 288    -7.274    25.847  -6.143   1.00  14.59
原子    2219 N   PHE A 289    -9.392    25.416  -6.809   1.00  13.99
原子    2220 CA  PHE A 289    -9.419    26.447  -7.831   1.00  14.09
原子    2221 CB  PHE A 289    -9.994    25.882  -9.135   1.00  13.52
原子    2222 CG  PHE A 289    -9.169    24.807  -9.704   1.00  11.38
原子    2223 CD1 PHE A 289    -7.976    25.114  -10.367  1.00  12.17
原子    2224 CE1 PHE A 289    -7.184    24.095  -10.905  1.00  13.93
原子    2225 CZ  PHE A 289    -7.572    22.783  -10.771  1.00  13.96
原子    2226 CE2 PHE A 289    -8.756    22.452  -10.097  1.00  11.77
原子    2227 CD2 PHE A 289    -9.555    23.472  -9.571   1.00  11.08
原子    2228 C   PHE A 289    -10.219   27.698  -7.491   1.00  14.73
原子    2229 O   PHE A 289    -10.092   28.713  -8.189   1.00  14.71
原子    2230 N   ARG A 290    -11.054   27.621  -6.464   1.00  15.09
原子    2231 CA  ARG A 290    -11.953   28.740  -6.140   1.00  16.64
原子    2232 CB  ARG A 290    -12.842   28.401  -4.936   1.00  15.99
原子    2233 CG  ARG A 290    -13.913   27.375  -5.230   1.00  15.65
原子    2234 CD  ARG A 290    -14.821   27.163  -4.012   1.00  16.79
原子    2235 NE  ARG A 290    -15.843   26.172  -4.330   1.00  15.04
原子    2236 CZ  ARG A 290    -16.986   26.470  -4.933   1.00  17.22
原子    2237 NH1 ARG A 290    -17.248   27.734  -5.243   1.00  15.41
原子    2238 NH2 ARG A 290    -17.855   25.511  -5.239   1.00  15.94
原子    2239 C   ARG A 290    -11.240   30.046  -5.864   1.00  18.04
原子    2240 O   ARG A 290    -11.690   31.125  -6.279   1.00  19.61
原子    2241 N   SER A 291    -10.150   29.984  -5.128   1.00  19.44
原子    2242 CA  SER A 291    -9.571    31.246  -4.667   1.00  21.57
原子    2243 CB  SER A 291    -9.146    31.101  -3.212   1.00  22.18
原子    2244 OG  SER A 291    -7.998    30.284  -3.144   1.00  28.35
原子    2245 C   SER A 291    -8.423    31.762  -5.534   1.00  20.65
原子    2246 O   SER A 291    -7.865    32.851  -5.272   1.00  22.43
原子    2247 N   ILE A 292    -8.066    31.019  -6.576   1.00  19.16
原子    2248 CA  ILE A 292    -6.855    31.367  -7.330   1.00  17.65
原子    2249 CB  ILE A 292    -5.805    30.185  -7.408   1.00  18.07
原子    2250 CG1 ILE A 292    -6.379    28.972  -8.194   1.00  17.67
原子    2251 CD1 ILE A 292    -5.315    27.924  -8.649   1.00  17.27
原子    2252 CG2 ILE A 292    -5.341    29.795  -5.994   1.00  18.29
原子    2253 C   ILE A 292    -7.065    31.973  -8.708   1.00  17.20
原子    2254 O   ILE A 292    -6.136    32.563  -9.251   1.00  16.35
原子    2255 N   TYR A 293    -8.252    31.797  -9.290   1.00  15.85
原子    2256 CA  TYR A 293    -8.509    32.304  -10.648  1.00  15.83
原子    2257 CB  TYR A 293    -9.301    31.270  -11.474  1.00  15.43
原子    2258 CG  TYR A 293    -8.571    30.014  -11.886  1.00  15.10
原子    2259 CD1 TYR A 293    -7.183    29.960  -11.965  1.00  14.38
原子    2260 CE1 TYR A 293    -6.540    28.795  -12.395  1.00  14.38
原子    2261 CZ  TYR A 293    -7.306    27.685  -12.743  1.00  14.90
原子    2262 OH  TYR A 293    -6.700    26.522  -13.158  1.00  15.55
原子    2263 CE2 TYR A 293    -8.670    27.722  -12.671  1.00  15.47
原子    2264 CD2 TYR A 293    -9.298    28.875  -12.255  1.00  13.91
原子    2265 C   TYR A 293    -9.351    33.581  -10.591  1.00  15.69
原子    2266 O   TYR A 293    -10.404   33.594  -9.942   1.00  15.47
原子    2267 N   GLY A 294    -8.892    34.629  -11.276  1.00  14.83
原子    2268 CA  GLY A 294    -9.641    35.899  -11.353  1.00  15.57
原子    2269 C   GLY A 294    -11.078   35.702  -11.858  1.00  15.93
原子    2270 O   GLY A 294    -12.010   36.359  -11.376  1.00  15.66
原子    2271 N   VAL A 295    -11.288   34.773  -12.799  1.00  15.60
原子    2272 CA  VAL A 295    -12.651   34.520  -13.270  1.00  16.24
原子    2273 CB  VAL A 295    -12.753   33.561  -14.501  1.00  16.31
原子    2274 CG1 VAL A 295    -12.170   34.195  -15.740  1.00  16.26
原子    2275 CG2 VAL A 295    -12.128   32.184  -14.199  1.00  16.19
原子    2276 C   VAL A 295    -13.596   34.013  -12.172  1.00  16.97
原子    2277 O   VAL A 295    -14.813   34.108  -12.320  1.00  18.03
原子    2278 N   ASN A 296    -13.047   33.463  -11.092  1.00  16.93
原子    2279 CA  ASN A 296    -13.878   32.920  -10.020  1.00  17.69
原子    2280 CB  ASN A 296    -13.250   31.633  -9.472   1.00  17.57
原子    2281 CG  ASN A 296    -13.296   30.493  -10.482  1.00  16.44
原子    2282 OD1 ASN A 296    -14.158   30.481  -11.356  1.00  17.29
原子    2283 ND2 ASN A 296    -12.401   29.513  -10.336  1.00  15.99
原子    2284C    ASN A 296    -14.187   33.915  -8.896   1.00  19.30
原子    2285 O   ASN A 296    -14.945   33.601  -7.979   1.00  19.07
原子    2286 N   LYS A 297    -13.617   35.116  -9.007   1.00  20.37
原子    2287 CA  LYS A 297    -13.811   36.203  -8.038   1.00  22.43
原子    2288 CB  LYS A 297    -13.209   37.502  -8.584   1.00  22.90
原子    2289 CG  LYS A 297    -11.741   37.680  -8.316   1.00  30.03
原子    2290 CD  LYS A 297    -11.401   39.189  -8.309   1.00  35.34
原子    2291 CE  LYS A 297    -12.247   39.913  -7.255   1.00  39.86
原子    2292 NZ  LYS A 297    -11.995   41.386  -7.178   1.00  42.72
原子    2293 C   LYS A 297    -15.275   36.453  -7.782   1.00  21.89
原子    2294 O   LYS A 297    -16.061   36.585  -8.712   1.00  21.96
原子    2295 N   GLY A 298    -15.659   36.537  -6.517   1.00  22.72
原子    2296 CA  GLY A 298    -17.050   36.869  -6.219   1.00  22.99
原子    2297 C   GLY A 298    -18.043   35.720  -6.278   1.00  23.54
原子    2298 O   GLY A 298    -19.180   35.885  -5.855   1.00  25.04
原子    2299 N   ILE A 299    -17.647   34.546  -6.784   1.00  22.16
原子    2300 CA  ILE A 299    -18.574   33.393  -6.763   1.00  21.47
原子    2301 CB  ILE A 299    -18.251   32.350  -7.884   1.00  21.22
原子    2302 CG1 ILE A 299    -18.356   32.985  -9.274   1.00  19.64
原子    2303 CD1 ILE A 299    -17.740   32.095  -10.415  1.00  19.76
原子    2304 CG2 ILE A 299    -19.163   31.091  -7.762   1.00  20.54
原子    2305 C   ILE A 299    -18.562   32.740  -5.375   1.00  22.34
原子    2306 O   ILE A 299    -17.486   32.395  -4.861   1.00  22.29
原子    2307 N   PRO A 300    -19.743   32.580  -4.751   1.00  23.04
原子    2308 CA  PRO A 300    -19.791   32.018  -3.392   1.00  23.60
原子    2309 CB  PRO A 300    -21.217   32.364  -2.922   1.00  24.19
原子    2310 CG  PRO A 300    -22.015   32.437  -4.178   1.00  23.80
原子    2311 CD  PRO A 300    -21.085   32.934  -5.253   1.00  23.06
原子    2312 C   PRO A 300    -19.584   30.500  -3.322   1.00  23.50
原子    2313 O   PRO A 300    -19.664   29.810  -4.347   1.00  22.46
原子    2314 N   ALA A 301    -19.325   29.985  -2.116   1.00  22.68
原子    2315 CA  ALA A 301    -19.380   28.549  -1.905   1.00  22.89
原子    2316 CB  ALA A 301    -18.988   28.185  -0.465   1.00  23.54
原子    2317 C   ALA A 301    -20.788   28.074  -2.236   1.00  21.91
原子    2318 O   ALA A 301    -21.759   28.834  -2.108   1.00  23.09
原子    2319 N   GLY A 302    -20.898   26.838  -2.698   1.00  20.96
原子    2320 CA  GLY A 302    -22.173   26.272  -3.115   1.00  19.69
原子    2321 C   GLY A 302    -22.565   26.637  -4.537   1.00  19.78
原子    2322 O   GLY A 302    -23.661   26.283  -4.991   1.00  19.32
原子    2323 N   ALA A 303    -21.686   27.355  -5.235   1.00  17.97
原子    2324 CA  ALA A 303    -21.948   27.708  -6.635   1.00  17.13
原子    2325 CB  ALA A 303    -22.168   29.212  -6.812   1.00  16.73
原子    2326 C   ALA A 303    -20.784   27.245  -7.481   1.00  16.19
原子    2327 O   ALA A 303    -19.647   27.171  -7.004   1.00  16.23
原子    2328 N   ALA A 304    -21.067   26.956  -8.746   1.00  15.66
原子    2329 CA  ALA A 304    -20.069   26.378  -9.640   1.00  15.10
原子    2330 CB  ALA A 304    -20.750   25.795  -10.860  1.00  15.80
原子    2331 C   ALA A 304    -19.002   27.394  -10.044  1.00  14.74
原子    2332 O   ALA A 304    -19.270   28.587  -10.121  1.00  14.27
原子    2333 N   VAL A 305    -17.783   26.914  -10.300  1.00  14.18
原子    2334 CA  VAL A 305    -16.680   27.783  -10.698  1.00  13.54
原子    2335 CB  VAL A 305    -15.656   27.971  -9.543   1.00  13.42
原子    2336 CG1 VAL A 305    -16.224   28.881  -8.418   1.00  14.25
原子    2337 CG2 VAL A 305    -15.218   26.597  -8.966   1.00  14.99
原子    2338 C   VAL A 305    -15.952   27.141  -11.873  1.00  13.34
原子    2339 O   VAL A 305    -16.121   25.944  -12.126  1.00  12.46
原子    2340 N   ALA A 306    -15.130   27.921  -12.562  1.00  13.38
原子    2341 CA  ALA A 306    -14.233   27.376  -13.573  1.00  14.37
原子    2342 CB  ALA A 306    -13.709   28.504  -14.470  1.00  15.32
原子    2343 C   ALA A 306    -13.082   26.626  -12.938  1.00  14.68
原子    2344 O   ALA A 306    -12.457   27.116  -11.974  1.00  15.21
原子    2345 N   ILE A 307    -12.781   25.452  -13.484  1.00  13.50
原子    2346 CA  ILE A 307    -11.667   24.668  -12.975  1.00  13.67
原子    2347 CB  ILE A 307    -12.134   23.438  -12.163  1.00  14.45
原子    2348 CG1 ILE A 307    -12.756   22.386  -13.072  1.00  15.37
原子    2349 CD1 ILE A 307    -12.921   21.033  -12.368  1.00  19.15
原子    2350 CG2 ILE A 307    -13.119   23.848  -11.005  1.00  15.52
原子    2351 C   ILE A 307    -10.646   24.290  -14.059  1.00  12.52
原子    2352 O   ILE A 307    -10.974   24.232  -15.264  1.00  12.22
原子    2353 N   GLY A 308    -9.405    24.095  -13.604  1.00  11.71
原子    2354 CA  GLY A 308    -8.276    23.737  -14.452  1.00  11.64
原子    2355 C   GLY A 308    -7.853    22.306  -14.199  1.00  11.62
原子    2356 O   GLY A 308    -8.667    21.444  -13.806  1.00  12.05
原子    2357 N   ARG A 309    -6.583    22.026  -14.454  1.00  11.39
原子    2358 CA  ARG A 309    -6.091    20.661  -14.337  1.00  11.23
原子    2359 CB  ARG A 309    -4.896    20.467  -15.275  1.00  11.37
原子    2360 CG  ARG A 309    -5.220    20.697  -16.791  1.00  11.29
原子    2361 CD  ARG A 309    -4.066    20.130  -17.625  1.00  12.62
原子    2362 NE  ARG A 309    -2.845    20.919  -17.425  1.00  12.15
原子    2363 CZ  ARG A 309    -1.701    20.665  -18.047  1.00  15.00
原子    2364 NH1 ARG A 309    -1.630    19.633  -18.910  1.00  12.05
原子    2365 NH2 ARG A 309    -0.624    21.395  -17.778  1.00  13.85
原子    2366 C   ARG A 309    -5.654    20.425  -12.888  1.00  11.83
原子    2367 O   ARG A 309    -6.093    19.481  -12.221  1.00  11.38
原子    2368 N   TYR A 310    -4.806    21.322  -12.399  1.00  11.88
原子    2369 CA  TYR A 310    -4.293    21.215  -11.022  1.00  11.17
原子    2370 CB  TYR A 310    -3.225    20.082  -10.878  1.00  12.49
原子    2371 CG  TYR A 310    -2.065    20.201  -11.844  1.00  13.10
原子    2372 CD1 TYR A 310    -2.128    19.622  -13.138  1.00  12.57
原子    2373 CE1 TYR A 310    -1.069    19.772  -14.039  1.00  15.63
原子    2374 CZ  TYR A 310     0.065    20.475  -13.649  1.00  14.31
原子    2375 OH  TYR A 310     1.119    20.611  -14.529  1.00  14.42
原子    2376 CE2 TYR A 310     0.159    21.030  -12.379  1.00  12.68
原子    2377 CD2 TYR A 310    -0.909    20.906  -11.485  1.00  14.04
原子    2378 C   TYR A 310    -3.779    22.596  -10.644  1.00  12.74
原子    2379 O   TYR A 310    -3.333    23.356  -11.505  1.00  12.44
原子    2380 N   ALA A 311    -3.872    22.945  -9.362   1.00  11.99
原子    2381 CA  ALA A 311    -3.618    24.337  -8.975   1.00  13.33
原子    2382 CB  ALA A 311    -4.084    24.589  -7.508   1.00  12.88
原子    2383 C   ALA A 311    -2.157    24.768  -9.197   1.00  13.50
原子    2384 O   ALA A 311    -1.906    25.951  -9.468   1.00  14.52
原子    2385 N   GLU A 312    -1.216    23.823  -9.140   1.00  13.52
原子    2386 CA  GLU A 312     0.219    24.134  -9.332   1.00  14.23
原子    2387 CB  GLU A 312     1.111    23.020  -8.790   1.00  15.44
原子    2388 CG  GLU A 312     0.933    22.802  -7.303   1.00  16.54
原子    2389 CD  GLU A 312    -0.130    21.762  -6.950   1.00  18.91
原子    2390 OE1 GLU A 312    -0.941    21.338  -7.808   1.00  16.89
原子    2391 OE2 GLU A 312    -0.150    21.345  -5.778   1.00  18.72
原子    2392 C   GLU A 312     0.591    24.380  -10.796  1.00  14.80
原子    2393 O   GLU A 312     1.741    24.736  -11.100  1.00  14.98
原子    2394 N   ASP A 313    -0.374    24.197  -11.697  1.00  13.37
原子    2395 CA  ASP A 313    -0.112    24.258  -13.155  1.00  13.71
原子    2396 CB  ASP A 313    -1.457    24.079  -13.888  1.00  12.88
原子    2397 CG  ASP A 313    -1.320    23.671  -15.343  1.00  14.44
原子    2398 OD1 ASP A 313    -0.197    23.597  -15.900  1.00  13.19
原子    2399 OD2 ASP A 313    -2.400    23.406  -15.923  1.00  13.61
原子    2400 C   ASP A 313     0.512    25.589  -13.587  1.00  14.00
原子    2401 O   ASP A 313     0.007    26.662  -13.219  1.00  14.35
原子    2402 N   VAL A 314     1.577    25.530  -14.399  1.00  13.84
原子    2403 CA  VAL A 314     2.145    26.747  -14.988  1.00  15.19
原子    2404 CB  VAL A 314     3.602    27.016  -14.520  1.00  16.70
原子    2405 CG1 VAL A 314     3.638    27.295  -13.009  1.00  17.94
原子    2406 CG2 VAL A 314     4.551    25.857  -14.915  1.00  16.69
原子    2407 C   VAL A 314     2.123    26.729  -16.528  1.00  15.30
原子    2408 O   VAL A 314     2.712    27.598  -17.165  1.00  15.13
原子    2409 N   TYR A 315     1.441    25.743  -17.111  1.00  14.51
原子    2410 CA  TYR A 315     1.351    25.634  -18.580  1.00  15.65
原子    2411 CB  TYR A 315     0.768    24.264  -18.957  1.00  15.82
原子    2412 CG  TYR A 315     0.694    23.988  -20.457  1.00  16.29
原子    2413 CD1 TYR A 315     1.824    24.124  -21.265  1.00  17.01
原子    2414 CE1 TYR A 315     1.778    23.859  -22.634  1.00  18.92
原子    2415 CZ  TYR A 315     0.588    23.421  -23.208  1.00  16.14
原子    2416 OH  TYR A 315     0.557    23.164  -24.577  1.00  16.95
原子    2417 CE2 TYR A 315    -0.552    23.261  -22.423  1.00  15.41
原子    2418 CD2 TYR A 315    -0.492    23.539  -21.044  1.00  14.48
原子    2419 C   TYR A 315     0.489    26.777  -19.107  1.00  15.56
原子    2420 O   TYR A 315    -0.688    26.888  -18.748  1.00  16.36
原子    2421 N   TYR A 316     1.072    27.645  -19.944  1.00  16.61
原子    2422 CA  TYR A 316     0.404    28.890  -20.380  1.00  17.53
原子    2423 CB  TYR A 316    -0.778    28.603  -21.337  1.00  18.31
原子    2424 CG  TYR A 316    -0.329    28.321  -22.742  1.00  19.74
原子    2425 CD1 TYR A 316    -0.071    27.026  -23.169  1.00  18.95
原子    2426 CE1 TYR A 316     0.353    26.757  -24.466  1.00  18.69
原子    2427 CZ  TYR A 316     0.551    27.812  -25.342  1.00  21.77
原子    2428 OH  TYR A 316     1.002    27.557  -26.617  1.00  23.75
原子    2429 CE2 TYR A 316     0.329    29.125  -24.932  1.00  22.39
原子    2430 CD2 TYR A 316    -0.111    29.369  -23.639  1.00  21.90
原子    2431 C   TYR A 316    -0.037    29.730  -19.173  1.00  17.87
原子    2432 O   TYR A 316    -0.968    30.517  -19.266  1.00  17.06
原子    2433 N   ASN A 317     0.689    29.555  -18.066  1.00  18.34
原子    2434 CA  ASN A 317     0.483    30.231  -16.766  1.00  19.27
原子    2435 CB  ASN A 317     0.106    31.699  -16.921  1.00  20.01
原子    2436 CG  ASN A 317     1.171    32.489  -17.624  1.00  24.51
原子    2437 OD1 ASN A 317     2.363    32.384  -17.305  1.00  29.46
原子    2438 ND2 ASN A 317     0.756    33.269  -18.603  1.00  29.08
原子    2439 C   ASN A 317    -0.506    29.551  -15.842  1.00  18.28
原子    2440 O   ASN A 317    -0.706    30.001  -14.719  1.00  19.05
原子    2441 N   GLY A 318    -1.114    28.459  -16.300  1.00  17.74
原子    2442 CA  GLY A 318    -2.086    27.721  -15.475  1.00  15.34
原子    2443 C   GLY A 318    -3.458    28.356  -15.550  1.00  15.47
原子    2444 O   GLY A 318    -3.700    29.390  -14.932  1.00  15.75
原子    2445 N   ASN A 319    -4.369    27.733  -16.306  1.00  13.16
原子    2446 CA  ASN A 319    -5.672    28.305  -16.557  1.00  12.74
原子    2447 CB  ASN A 319    -5.693    28.883  -17.980  1.00  12.31
原子    2448 CG  ASN A 319    -4.676    29.979  -18.187  1.00  13.01
原子    2449 OD1 ASN A 319    -4.832    31.117  -17.699  1.00  14.18
原子    2450 ND2 ASN A 319    -3.640    29.665  -18.942  1.00  11.49
原子    2451 C   ASN A 319    -6.799    27.271  -16.442  1.00  12.27
原子    2452 O   ASN A 319    -6.545    26.071  -16.456  1.00  12.28
原子    2453 N   PRO A 320    -8.054    27.732  -16.334  1.00  12.96
原子    2454 CA  PRO A 320    -9.113    26.759  -16.472  1.00  12.58
原子    2455 CB  PRO A 320    -10.395   27.579  -16.324  1.00  13.28
原子    2456 CG  PRO A 320    -10.007   29.011  -16.183  1.00  14.34
原子    2457 CD  PRO A 320    -8.537    29.090  -15.991  1.00  12.66
原子    2458 C   PRO A 320    -9.101    26.090  -17.851  1.00  12.18
原子    2459 O   PRO A 320    -8.643    26.698  -18.820  1.00  11.99
原子    2460 N   TRP A 321    -9.589    24.852  -17.912  1.00  11.79
原子    2461 CA  TRP A 321    -9.739    24.116  -19.154  1.00  11.97
原子    2462 CB  TRP A 321    -8.988    22.775  -19.063  1.00  11.15
原子    2463 CG  TRP A 321    -7.469    22.900  -19.200  1.00  12.16
原子    2464 CD1 TRP A 321    -6.658    23.837  -18.627  1.00  13.28
原子    2465 NE1 TRP A 321    -5.347    23.636  -19.016  1.00  13.24
原子    2466 CE2 TRP A 321    -5.290    22.538  -19.831  1.00  13.51
原子    2467 CD2 TRP A 321    -6.617    22.054  -19.978  1.00  12.68
原子    2468 CE3 TRP A 321    -6.846    20.938  -20.787  1.00  14.41
原子    2469 CZ3 TRP A 321    -5.741    20.323  -21.428  1.00  13.49
原子    2470 CH2 TRP A 321    -4.436    20.819  -21.250  1.00  13.43
原子    2471 CZ2 TRP A 321    -4.193    21.948  -20.479  1.00  14.69
原子    2472 C   TRP A 321    -11.202   23.797  -19.342  1.00  11.99
原子    2473 O   TRP A 321    -11.875   23.448  -18.388  1.00  11.51
原子    2474 N   TYR A 322    -11.696   23.896  -20.579  1.00  11.47
原子    2475 CA  TYR A 322    -13.088   23.511  -20.841  1.00  11.31
原子    2476 CB  TYR A 322    -13.433   23.691  -22.322  1.00  12.14
原子    2477 CG  TYR A 322    -13.352   25.130  -22.793  1.00  12.81
原子    2478 CD1 TYR A 322    -12.260   25.574  -23.509  1.00  11.43
原子    2479 CE1 TYR A 322    -12.173   26.914  -23.965  1.00  12.91
原子    2480 CZ  TYR A 322    -13.216   27.802  -23.697  1.00  14.27
原子    2481 OH  TYR A 322    -13.127   29.104  -24.146  1.00  15.10
原子    2482 CE2 TYR A 322    -14.324   27.373  -22.982  1.00  13.40
原子    2483 CD2 TYR A 322    -14.378   26.031  -22.522  1.00  11.58
原子    2484 C   TYR A 322    -13.367   22.082  -20.433  1.00  11.31
原子    2485 O   TYR A 322    -14.380   21.795  -19.771  1.00  11.08
原子    2486 N   LEU A 323    -12.480   21.169  -20.814  1.00  10.96
原子    2487 CA  LEU A 323    -12.770   19.750  -20.561  1.00  11.04
原子    2488 CB  LEU A 323    -11.787   18.844  -21.315  1.00  11.26
原子    2489 CG  LEU A 323    -10.314   18.876  -20.903  1.00  10.53
原子    2490 CD1 LEU A 323    -10.074   17.902  -19.745  1.00  14.57
原子    2491 CD2 LEU A 323    -9.474    18.437  -22.112  1.00  13.19
原子    2492 C   LEU A 323    -12.778   19.449  -19.048  1.00  11.68
原子    2493 O   LEU A 323    -13.444   18.510  -18.602  1.00  12.06
原子    2494 N   ALA A 324    -12.036   20.239  -18.268  1.00  9.86
原子    2495 CA  ALA A 324    -11.969   20.017  -16.812  1.00  10.09
原子    2496 CB  ALA A 324    -10.746   20.767  -16.234  1.00  9.76
原子    2497 C   ALA A 324    -13.272   20.518  -16.178  1.00  10.17
原子    2498 O   ALA A 324    -13.866   19.840  -15.325  1.00  10.29
原子    2499 N   THR A 325    -13.758   21.662  -16.665  1.00  9.84
原子    2500 CA  THR A 325    -15.000   22.267  -16.172  1.00  11.14
原子    2501 CB  THR A 325    -15.102   23.765  -16.623  1.00  12.15
原子    2502 OG1 THR A 325    -14.002   24.498  -16.063  1.00  13.16
原子    2503 CG2 THR A 325    -16.402   24.411  -16.152  1.00  11.83
原子    2504 C   THR A 325    -16.218   21.413  -16.570  1.00  11.50
原子    2505 O   THR A 325    -17.086   21.126  -15.727  1.00  10.79
原子    2506 N   PHE A 326    -16.234   20.925  -17.816  1.00  10.79
原子    2507 CA  PHE A 326    -17.272   19.959  -18.240  1.00  12.12
原子    2508 CB  PHE A 326    -17.194   19.652  -19.746  1.00  12.14
原子    2509 CG  PHE A 326    -17.518   20.851  -20.640  1.00  13.71
原子    2510 CD1 PHE A 326    -16.777   21.077  -21.804  1.00  15.21
原子    2511 CE1 PHE A 326    -17.043   22.188  -22.635  1.00  14.99
原子    2512 CZ  PHE A 326    -18.072   23.066  -22.311  1.00  16.33
原子    2513 CE2 PHE A 326    -18.851   22.832  -21.160  1.00  20.12
原子    2514 CD2 PHE A 326    -18.561   21.717  -20.331  1.00  16.63
原子    2515 C   PHE A 326    -17.216   18.643  -17.464  1.00  11.56
原子    2516 O   PHE A 326    -18.263   18.069  -17.180  1.00  11.74
原子    2517 N   ALA A 327    -16.014   18.174  -17.103  1.00  11.35
原子    2518 CA  ALA A 327    -15.889   16.909  -16.346  1.00  11.41
原子    2519 CB  ALA A 327    -14.397   16.538  -16.158  1.00  11.95
原子    2520 C   ALA A 327    -16.612   16.964  -14.965  1.00  12.04
原子    2521 O   ALA A 327    -17.260   15.985  -14.561  1.00  12.69
原子    2522 N   ALA A 328    -16.505   18.097  -14.266  1.00  12.13
原子    2523 CA  ALA A 328    -17.207   18.293  -12.985  1.00  12.24
原子    2524 CB  ALA A 328    -16.871   19.662  -12.369  1.00  12.48
原子    2525 C   ALA A 328    -18.707   18.157  -13.177  1.00  12.90
原子    2526 O   ALA A 328    -19.378   17.454  -12.411  1.00  13.60
原子    2527 N   ALA A 329    -19.239   18.814  -14.202  1.00  12.55
原子    2528 CA  ALA A 329    -20.669   18.682  -14.504  1.00  12.31
原子    2529 CB  ALA A 329    -21.027   19.551  -15.692  1.00  12.87
原子    2530 C   ALA A 329    -21.035   17.226  -14.788  1.00  12.71
原子    2531 O   ALA A 329    -22.016   16.700  -14.266  1.00  12.32
原子    2532 N   GLU A 330    -20.231   16.572  -15.629  1.00  12.54
原子    2533 CA  GLU A 330    -20.500   15.187  -16.003  1.00  12.84
原子    2534 CB  GLU A 330    -19.519   14.718  -17.100  1.00  12.55
原子    2535 CG  GLU A 330    -19.850   13.303  -17.626  1.00  13.80
原子    2536 CD  GLU A 330    -19.108   12.953  -18.917  1.00  13.54
原子    2537 OE1 GLU A 330    -18.650   13.889  -19.604  1.00  12.29
原子    2538 OE2 GLU A 330    -18.998   11.739  -19.209  1.00  14.52
原子    2539 C   GLU A 330    -20.523   14.231  -14.809  1.00  12.94
原子    2540 O   GLU A 330    -21.400   13.346  -14.726  1.00  12.90
原子    2541 N   GLN A 331    -19.598   14.402  -13.866  1.00  12.03
原子    2542 CA  GLN A 331    -19.589   13.502  -12.726  1.00  12.38
原子    2543 CB  GLN A 331    -18.415   13.795  -11.797  1.00  12.24
原子    2544 CG  GLN A 331    -18.357   12.759  -10.670  1.00  13.61
原子    2545 CD  GLN A 331    -17.327   13.072  -9.608   1.00  15.82
原子    2546 OE1 GLN A 331    -16.263   13.617  -9.895   1.00  15.39
原子    2547 NE2 GLN A 331    -17.628   12.702  -8.372   1.00  13.76
原子    2548 C   GLN A 331    -20.912   13.643  -11.969  1.00  12.33
原子    2549 O   GLN A 331    -21.512   12.659  -11.556  1.00  12.45
原子    2550 N   LEU A 332    -21.377   14.873  -11.844  1.00  12.57
原子    2551 CA  LEU A 332    -22.628   15.138  -11.134  1.00  13.59
原子    2552 CB  LEU A 332    -22.747   16.631  -10.868  1.00  13.17
原子    2553 CG  LEU A 332    -21.681   17.142  -9.867   1.00  16.56
原子    2554 CD1 LEU A 332    -21.718   18.678  -9.801   1.00  18.10
原子    2555 CD2 LEU A 332    -21.851   16.476  -8.492   1.00  19.47
原子    2556 C   LEU A 332    -23.861   14.600  -11.864  1.00  13.57
原子    2557 O   LEU A 332    -24.770   14.053  -11.239  1.00  13.24
原子    2558 N   TYR A 333    -23.909   14.766  -13.179  1.00  13.90
原子    2559 CA  TYR A 333    -24.988   14.131  -13.972  1.00  14.37
原子    2560 CB  TYR A 333    -24.901   14.523  -15.468  1.00  14.48
原子    2561 CG  TYR A 333    -25.056   16.001  -15.721  1.00  13.91
原子    2562 CD1 TYR A 333    -26.086   16.738  -15.118  1.00  14.64
原子    2563 CE1 TYR A 333    -26.208   18.117  -15.350  1.00  15.65
原子    2564 CZ  TYR A 333    -25.315   18.758  -16.196  1.00  16.47
原子    2565 OH  TYR A 333    -25.431   20.101  -16.442  1.00  17.22
原子    2566 CE2 TYR A 333    -24.310   18.050  -16.836  1.00  16.59
原子    2567 CD2 TYR A 333    -24.192   16.669  -16.601  1.00  11.27
原子    2568 C   TYR A 333    -25.022   12.613  -13.843  1.00  15.03
原子    2569 O   TYR A 333    -26.108   12.012  -13.824  1.00  14.78
原子    2570 N   ASP A 334    -23.836   11.998  -13.807  1.00  14.06
原子    2571 CA  ASP A 334    -23.714   10.555  -13.602  1.00  14.83
原子    2572 CB  ASP A 334    -22.239   10.114  -13.714  1.00  13.83
原子    2573 CG  ASP A 334    -21.708   10.149  -15.136  1.00  15.84
原子    2574 OD1 ASP A 334    -22.495   10.373  -16.081  1.00  13.95
原子    2575 OD2 ASP A 334    -20.470   9.943   -15.313  1.00  15.50
原子    2576 C   ASP A 334    -24.254   10.163  -12.224  1.00  15.21
原子    2577 O   ASP A 334    -24.941   9.132   -12.080  1.00  15.93
原子    2578 N   ALA A 335    -23.933   10.969  -11.213  1.00  15.09
原子    2579 CA  ALA A 335    -24.454   10.735  -9.855   1.00  16.00
原子    2580 CB  ALA A 335    -23.809   11.719  -8.864   1.00  15.13
原子    2581 C   ALA A 335    -25.980   10.823  -9.803   1.00  16.10
原子    2582 O   ALA A 335    -26.643   9.916   -9.245   1.00  16.77
原子    2583 N   ILE A 336    -26.530   11.879  -10.398  1.00  16.35
原子    2584 CA  ILE A 336    -27.987   12.087  -10.470  1.00  18.39
原子    2585 CB  ILE A 336    -28.332   13.422  -11.162  1.00  18.85
原子    2586 CG1 ILE A 336    -27.891   14.596  -10.279  1.00  19.14
原子    2587 CD1 ILE A 336    -27.879   15.904  -10.986  1.00  22.50
原子    2588 CG2 ILE A 336    -29.839   13.539  -11.506  1.00  20.14
原子    2589 C   ILE A 336    -28.681   10.902  -11.156  1.00  18.83
原子    2590 O   ILE A 336    -29.707   10.404  -10.675  1.00  18.06
原子    2591 N   TYR A 337    -28.102   10.443  -12.267  1.00  18.50
原子    2592 CA  TYR A 337    -28.642   9.287   -12.970  1.00  18.99
原子    2593 CB  TYR A 337    -27.753   8.908   -14.169  1.00  19.80
原子    2594 CG  TYR A 337    -28.328   7.737   -14.954  1.00  20.76
原子    2595 CD1 TYR A 337    -27.988   6.429   -14.620  1.00  20.95
原子    2596 CE1 TYR A 337    -28.511   5.345   -15.322  1.00  22.94
原子    2597 CZ  TYR A 337    -29.382   5.559   -16.356  1.00  22.19
原子    2598 OH  TYR A 337    -29.877   4.447   -17.018  1.00  24.87
原子    2599 CE2 TYR A 337    -29.752   6.845   -16.721  1.00  22.31
原子    2600 CD2 TYR A 337    -29.220   7.942   -16.009  1.00  21.58
原子    2601 C   TYR A 337    -28.839   8.083   -12.057  1.00  18.60
原子    2602 O   TYR A 337    -29.918   7.476   -12.041  1.00  18.61
原子    2603 N   VAL A 338    -27.802   7.737   -11.297  1.00  18.67
原子    2604 CA  VAL A 338    -27.837   6.573   -10.406  1.00  18.90
原子    2605 CB  VAL A 338    -26.424   6.195   -9.919   1.00  18.99
原子    2606 CG1 VAL A 338    -26.462   5.121   -8.820   1.00  19.71
原子    2607 CG2 VAL A 338    -25.600   5.698   -11.111  1.00  18.75
原子    2608 C   VAL A 338    -28.810   6.788   -9.234   1.00  19.41
原子    2609 O   VAL A 338    -29.565   5.871   -8.869   1.00  19.45
原子    2610 N   TRP A 339    -28.797   7.987   -8.654   1.00  19.81
原子    2611 CA  TRP A 339    -29.743   8.290   -7.559   1.00  20.46
原子    2612 CB  TRP A 339    -29.514   9.705   -7.029   1.00  20.35
原子    2613 CG  TRP A 339    -28.222   9.830   -6.329   1.00  18.64
原子    2614 CD1 TRP A 339    -27.540   8.846   -5.676   1.00  16.51
原子    2615 NE1 TRP A 339    -26.391   9.359   -5.126   1.00  17.81
原子    2616 CE2 TRP A 339    -26.312   10.693  -5.423   1.00  17.12
原子    2617 CD2 TRP A 339    -27.452   11.025  -6.183   1.00  17.64
原子    2618 CE3 TRP A 339    -27.624   12.343  -6.614   1.00  17.59
原子    2619 CZ3 TRP A 339    -26.637   13.283  -6.284   1.00  19.24
原子    2620 CH2 TRP A 339    -25.510   12.912  -5.520   1.00  18.24
原子    2621 CZ2 TRP A 339    -25.320   11.626  -5.103   1.00  18.45
原子    2622 C   TRP A 339    -31.201   8.108   -7.997   1.00  21.83
原子    2623 O   TRP A 339    -31.981   7.478   -7.274   1.00  22.01
原子    2624 N   LYS A 340    -31.549   8.646   -9.168   1.00  22.85
原子    2625 CA  LYS A 340    -32.904   8.541   -9.721   1.00  25.61
原子    2626 CB  LYS A 340    -33.066   9.411   -10.967  1.00  25.52
原子    2627 CG  LYS A 340    -33.174   10.905  -10.689  1.00  28.19
原子    2628 CD  LYS A 340    -33.227   11.692  -11.991  1.00  34.04
原子    2629 CE  LYS A 340    -33.966   13.011  -11.805  1.00  38.04
原子    2630 NZ  LYS A 340    -33.868   13.876  -13.017  1.00  41.83
原子    2631 C   LYS A 340    -33.276   7.108   -10.062  1.00  27.14
原子    2632 O   LYS A 340    -34.413   6.686   -9.830   1.00  27.56
原子    2633 N   LYS A 341    -32.317   6.358   -10.604  1.00  28.13
原子    2634 CA  LYS A 341    -32.552   4.975   -11.018  1.00  30.18
原子    2635 CB  LYS A 341    -31.358   4.428   -11.800  1.00  29.83
原子    2636 CG  LYS A 341    -31.688   3.173   -12.624  1.00  33.04
原子    2637 CD  LYS A 341    -30.472   2.624   -13.395  1.00  33.62
原子    2638 CE  LYS A 341    -29.652   1.592   -12.588  1.00  38.22
原子    2639 NZ  LYS A 341    -28.691   2.188   -11.573  1.00  40.88
原子    2640 C   LYS A 341    -32.816   4.081   -9.817   1.00  30.19
原子    2641 O   LYS A 341    -33.744   3.260   -9.837   1.00  30.15
原子    2642 N   THR A 342    -31.999   4.246   -8.777   1.00  29.52
原子    2643 CA  THR A 342    -32.074   3.400   -7.595   1.00  29.75
原子    2644 CB  THR A 342    -30.687   3.221   -6.916   1.00  29.68
原子    2645 OG1 THR A 342    -30.254   4.458   -6.333   1.00  32.01
原子    2646 CG2 THR A 342    -29.628   2.735   -7.929   1.00  31.40
原子    2647 C   THR A 342    -33.129   3.901   -6.596   1.00  29.01
原子    2648 O   THR A 342    -33.572   3.148   -5.734   1.00  29.92
原子    2649 N   GLY A 343    -33.534   5.158   -6.732   1.00  28.20
原子    2650 CA  GLY A 343    -34.537   5.782   -5.862   1.00  28.30
原子    2651 C   GLY A 343    -34.068   6.045   -4.438   1.00  27.91
原子    2652 O   GLY A 343    -34.887   6.133   -3.519   1.00  28.16
原子    2653 N   SER A 344    -32.760   6.226   -4.260   1.00  27.22
原子    2654 CA  SER A 344    -32.142   6.306   -2.939   1.00  26.60
原子    2655 CB  SER A 344    -31.870   4.880   -2.462   1.00  27.28
原子    2656 OG  SER A 344    -31.354   4.855   -1.161   1.00  29.50
原子    2657 C   SER A 344    -30.823   7.107   -2.979   1.00  26.02
原子    2658 O   SER A 344    -30.068   6.992   -3.944   1.00  25.80
原子    2659 N   ILE A 345    -30.557   7.900   -1.936   1.00  24.20
原子    2660 CA  ILE A 345    -29.295   8.641   -1.770   1.00  23.04
原子    2661 CB  ILE A 345    -29.477   10.171  -1.954   1.00  23.03
原子    2662 CG1 ILE A 345    -30.021   10.474  -3.340   1.00  22.44
原子    2663 CD1 ILE A 345    -30.399   11.918  -3.599   1.00  23.24
原子    2664 CG2 ILE A 345    -28.138   10.918  -1.670   1.00  22.00
原子    2665 C   ILE A 345    -28.726   8.415   -0.378   1.00  23.13
原子    2666 O   ILE A 345    -29.392   8.684    0.623   1.00  23.57
原子    2667 N   THR A 346    -27.490   7.943   -0.307   1.00  22.23
原子    2668 CA  THR A 346    -26.820   7.765    0.963   1.00  23.25
原子    2669 CB  THR A 346    -26.246   6.338    1.101   1.00  23.78
原子    2670 OG1 THR A 346    -27.327   5.396    1.020   1.00  27.42
原子    2671 CG2 THR A 346    -25.507   6.129    2.443   1.00  24.74
原子    2672 C   THR A 346    -25.753   8.849    1.138   1.00  23.03
原子    2673 O   THR A 346    -24.916   9.067    0.260   1.00  23.47
原子    2674 N   VAL A 347    -25.848   9.561    2.255   1.00  21.33
原子    2675 CA  VAL A 347    -24.845   10.537   2.674   1.00  20.11
原子    2676 CB  VAL A 347    -25.522   11.844   3.212   1.00  19.06
原子    2677 CG1 VAL A 347    -24.489   12.834   3.700   1.00  19.66
原子    2678 CG2 VAL A 347    -26.418   12.465   2.137   1.00  20.32
原子    2679 C   VAL A 347    -24.066   9.865    3.785   1.00  20.14
原子    2680 O   VAL A 347    -24.667   9.340    4.728   1.00  19.79
原子    2681 N   THR A 348    -22.734   9.878    3.671   1.00  19.85
原子    2682 CA  THR A 348    -21.851   9.274    4.660   1.00  19.92
原子    2683 CB  THR A 348    -20.965   8.185    4.018   1.00  19.82
原子    2684 OG1 THR A 348    -19.921   8.815    3.277   1.00  20.35
原子    2685 CG2 THR A 348    -21.785   7.278    3.092   1.00  21.67
原子    2686 C   THR A 348    -20.964   10.354   5.256   1.00  19.60
原子    2687 O   THR A 348    -20.961   11.484   4.760   1.00  19.51
原子    2688 N   ALA A 349    -20.191   10.006   6.292   1.00  19.18
原子    2689 CA  ALA A 349    -19.243   10.932   6.885   1.00  20.02
原子    2690 CB  ALA A 349    -18.494   10.275   8.044   1.00  20.61
原子    2691 C   ALA A 349    -18.240   11.466   5.842   1.00  19.79
原子    2692 O   ALA A 349    -17.756   12.601   5.947   1.00  20.15
原子    2693 N   THR A 350    -17.906   10.619   4.873   1.00  18.87
原子    2694 CA  THR A 350    -16.911   10.971   3.850   1.00  18.30
原子    2695 CB  THR A 350    -16.435   9.717    3.093   1.00  18.67
原子    2696 OG1 THR A 350    -15.780   8.850    4.027   1.00  19.82
原子    2697 CG2 THR A 350    -15.426   10.097   1.974   1.00  17.73
原子    2698 C   THR A 350    -17.463   12.003   2.871   1.00  17.30
原子    2699 O   THR A 350    -16.747   12.930   2.487   1.00  17.99
原子    2700 N   SER A 351    -18.716   11.847   2.467   1.00  16.16
原子    2701 CA  SER A 351    -19.316   12.803   1.517   1.00  15.78
原子    2702 CB  SER A 351    -20.214   12.076   0.512   1.00  15.85
原子    2703 OG  SER A 351    -21.280   11.412   1.156   1.00  17.14
原子    2704 C   SER A 351    -20.087   13.941   2.193   1.00  15.63
原子    2705 O   SER A 351    -20.736   14.743   1.524   1.00  13.62
原子    2706 N   LEU A 352    -20.048   14.006   3.527   1.00  15.09
原子    2707 CA  LEU A 352    -20.901   14.985   4.212   1.00  16.29
原子    2708 CB  LEU A 352    -20.759   14.851   5.736   1.00  16.64
原子    2709 CG  LEU A 352    -21.713   15.734   6.570   1.00  17.22
原子    2710 CD1 LEU A 352    -23.138   15.281   6.418   1.00  19.06
原子    2711 CD2 LEU A 352    -21.263   15.636   8.032   1.00  20.02
原子    2712 C   LEU A 352    -20.592   16.427   3.787   1.00  16.09
原子    2713 O   LEU A 352    -21.499   17.219   3.601   1.00  16.35
原子    2714 N   ALA A 353    -19.311   16.763   3.643   1.00  16.19
原子    2715 CA  ALA A 353    -18.933   18.148   3.354   1.00  15.74
原子    2716 CB  ALA A 353    -17.460   18.314   3.424   1.00  16.30
原子    2717 C   ALA A 353    -19.459   18.544   1.972   1.00  16.11
原子    2718 O   ALA A 353    -19.957   19.668   1.781   1.00  15.44
原子    2719 N   PHE A 354    -19.367   17.607   1.021   1.00  16.10
原子    2720 CA  PHE A 354    -19.885   17.849  -0.325   1.00  15.25
原子    2721 CB  PHE A 354    -19.718   16.618  -1.220   1.00  16.59
原子    2722 CG  PHE A 354    -20.497   16.707  -2.500   1.00  15.45
原子    2723 CD1 PHE A 354    -19.959   17.375  -3.603   1.00  16.95
原子    2724 CE1 PHE A 354    -20.664   17.489  -4.793   1.00  17.06
原子    2725 CZ  PHE A 354    -21.956   16.953  -4.888   1.00  16.75
原子    2726 CE2 PHE A 354    -22.517   16.276  -3.791   1.00  16.91
原子    2727 CD2 PHE A 354    -21.778   16.160  -2.594   1.00  17.48
原子    2728 C   PHE A 354    -21.374   18.188  -0.226   1.00  15.56
原子    2729 O   PHE A 354    -21.815   19.183  -0.797   1.00  15.08
原子    2730 N   PHE A 355    -22.140   17.347   0.474   1.00  14.54
原子    2731 CA  PHE A 355    -23.588   17.544   0.517   1.00  15.29
原子    2732 CB  PHE A 355    -24.295   16.319   1.078   1.00  15.61
原子    2733 CG  PHE A 355    -24.386   15.176   0.112   1.00  15.51
原子    2734 CD1 PHE A 355    -25.306   15.205  -0.945   1.00  14.91
原子    2735 CE1 PHE A 355    -25.404   14.131  -1.832   1.00  16.52
原子    2736 CZ  PHE A 355    -24.567   13.033  -1.676   1.00  16.12
原子    2737 CE2 PHE A 355    -23.648   12.994  -0.628   1.00  15.62
原子    2738 CD2 PHE A 355    -23.562   14.071   0.255   1.00  13.62
原子    2739 C   PHE A 355    -23.988   18.789   1.303   1.00  15.19
原子    2740 O   PHE A 355    -24.920   19.477   0.902   1.00  15.69
原子    2741 N   GLN A 356    -23.283   19.084   2.398   1.00  15.78
原子    2742 CA  GLN A 356    -23.679   20.216   3.257   1.00  16.16
原子    2743 CB  GLN A 356    -22.987   20.165   4.627   1.00  16.84
原子    2744 CG  GLN A 356    -23.564   19.115   5.579   1.00  17.13
原子    2745 CD  GLN A 356    -22.907   19.170   6.973   1.00  18.06
原子    2746 OE1 GLN A 356    -21.808   19.707   7.138   1.00  20.29
原子    2747 NE2 GLN A 356    -23.569   18.589   7.965   1.00  20.95
原子    2748 C   GLN A 356    -23.444   21.546   2.584   1.00  16.08
原子    2749 O   GLN A 356    -24.142   22.507   2.868   1.00  15.59
原子    2750 N   GLU A 357    -22.482   21.599   1.661   1.00  16.07
原子    2751 CA  GLU A 357    -22.261   22.808   0.884   1.00  16.41
原子    2752 CB  GLU A 357    -20.994   22.683   0.005   1.00  16.33
原子    2753 CG  GLU A 357    -20.671   23.942  -0.770   1.00  15.64
原子    2754 CD  GLU A 357    -19.326   23.894  -1.516   1.00  17.67
原子    2755 OE1 GLU A 357    -18.931   24.947  -2.066   1.00  19.03
原子    2756 OE2 GLU A 357    -18.685   22.822  -1.575   1.00  14.75
原子    2757 C   GLU A 357    -23.492   23.105   0.019   1.00  15.84
原子    2758 O   GLU A 357    -23.786   24.237  -0.224   1.00  18.07
原子    2759 N   LEU A 358    -24.213   22.084  -0.420   1.00  14.72
原子    2760 CA  LEU A 358    -25.364   22.251  -1.310   1.00  15.75
原子    2761 CB  LEU A 358    -25.368   21.147  -2.369   1.00  16.49
原子    2762 CG  LEU A 358    -24.057   21.100  -3.168   1.00  16.81
原子    2763 CD1 LEU A 358    -24.087   19.977  -4.182   1.00  19.73
原子    2764 CD2 LEU A 358    -23.775   22.465  -3.846   1.00  19.34
原子    2765 C   LEU A 358    -26.708   22.251  -0.582   1.00  15.36
原子    2766 O   LEU A 358    -27.656   22.911  -1.028   1.00  14.78
原子    2767 N   VAL A 359    -26.786   21.511   0.520   1.00  15.34
原子    2768 CA  VAL A 359    -28.001   21.404   1.321   1.00  15.00
原子    2769 CB  VAL A 359    -28.691   20.006   1.154   1.00  15.90
原子    2770 CG1 VAL A 359    -29.999   19.917   1.962   1.00  15.16
原子    2771 CG2 VAL A 359    -28.967   19.685  -0.348   1.00  16.26
原子    2772 C   VAL A 359    -27.531   21.624   2.775   1.00  14.72
原子    2773 O   VAL A 359    -27.192   20.653   3.500   1.00  14.22
原子    2774 N   PRO A 360    -27.467   22.893   3.193   1.00  14.98
原子    2775 CA  PRO A 360    -26.937   23.179   4.539   1.00  15.45
原子    2776 CB  PRO A 360    -27.150   24.700   4.700   1.00  15.45
原子    2777 CG  PRO A 360    -27.188   25.219   3.274   1.00  16.15
原子    2778 CD  PRO A 360    -27.854   24.127   2.471   1.00  14.54
原子    2779 C   PRO A 360    -27.692   22.385   5.611   1.00  15.31
原子    2780 O   PRO A 360    -28.918   22.262   5.555   1.00  15.07
原子    2781 N   GLY A 361    -26.936   21.842   6.560   1.00  15.94
原子    2782 CA  GLY A 361    -27.512   21.143   7.709   1.00  16.53
原子    2783 C   GLY A 361    -27.870   19.680   7.488   1.00  17.03
原子    2784 O   GLY A 361    -28.268   18.997   8.429   1.00  17.68
原子    2785 N   VAL A 362    -27.762   19.176   6.261   1.00  16.13
原子    2786 CA  VAL A 362    -28.163   17.769   6.037   1.00  16.72
原子    2787 CB  VAL A 362    -28.217   17.416   4.525   1.00  16.47
原子    2788 CG1 VAL A 362    -26.808   17.311   3.947   1.00  16.75
原子    2789 CG2 VAL A 362    -29.054   16.142   4.280   1.00  17.21
原子    2790 C   VAL A 362    -27.208   16.849   6.811   1.00  17.24
原子    2791 O   VAL A 362    -26.044   17.187   7.006   1.00  17.07
原子    2792 N   THR A 363    -27.695   15.703   7.274   1.00  18.15
原子    2793 CA  THR A 363    -26.821   14.789   8.025   1.00  19.86
原子    2794 CB  THR A 363    -27.388   14.459   9.405   1.00  20.59
原子    2795 OG1 THR A 363    -28.634   13.776   9.217   1.00  22.85
原子    2796 CG2 THR A 363    -27.610   15.742   10.182  1.00  22.71
原子    2797 C   THR A 363    -26.660   13.476   7.310   1.00  19.18
原子    2798 O   THR A 363    -27.398   13.184   6.371   1.00  18.87
原子    2799 N   ALA A 364    -25.697   12.679   7.769   1.00  19.67
原子    2800 CA  ALA A 364    -25.495   11.342   7.222   1.00  20.19
原子    2801 CB  ALA A 364    -24.361   10.637   7.930   1.00  20.38
原子    2802 C   ALA A 364    -26.783   10.541   7.343   1.00  21.17
原子    2803 O   ALA A 364    -27.551   10.720   8.293   1.00  21.92
原子    2804 N   GLY A 365    -27.041   9.687    6.360   1.00  21.67
原子    2805 CA  GLY A 365    -28.207   8.823    6.371   1.00  22.35
原子    2806 C   GLY A 365    -28.584   8.415    4.968   1.00  23.66
原子    2807 O   GLY A 365    -27.924   8.804    3.991   1.00  23.66
原子    2808 N   THR A 366    -29.639   7.615    4.862   1.00  23.70
原子    2809 CA  THR A 366    -30.148   7.183    3.582   1.00  24.56
原子    2810 CB  THR A 366    -30.188   5.644    3.491   1.00  25.67
原子    2811 OG1 THR A 366    -28.849   5.143    3.649   1.00  27.09
原子    2812 CG2 THR A 366    -30.715   5.216    2.159   1.00  25.47
原子    2813 C   THR A 366    -31.520   7.769    3.344   1.00  25.15
原子    2814 O   THR A 366    -32.427   7.612    4.177   1.00  25.01
原子    2815 N   TYR A 367    -31.668   8.447    2.210   1.00  24.20
原子    2816 CA  TYR A 367    -32.900   9.146    1.883   1.00  24.30
原子    2817 CB  TYR A 367    -32.616   10.648   1.701   1.00  23.51
原子    2818 CG  TYR A 367    -31.924   11.238   2.907   1.00  22.68
原子    2819 CD1 TYR A 367    -32.639   11.506   4.078   1.00  21.99
原子    2820 CE1 TYR A 367    -32.012   12.019   5.199   1.00  20.27
原子    2821 CZ  TYR A 367    -30.650   12.263   5.176   1.00  22.67
原子    2822 OH  TYR A 367    -30.036   12.789   6.287   1.00  21.24
原子    2823 CE2 TYR A 367    -29.897   11.994   4.023   1.00  20.71
原子    2824 CD2 TYR A 367    -30.541   11.479   2.904   1.00  20.37
原子    2825 C   TYR A 367    -33.531   8.542    0.641   1.00  25.39
原子    2826 O   TYR A 367    -32.900   8.456   -0.415   1.00  24.86
原子    2827 N   SER A 368    -34.782   8.109    0.758   1.00  25.82
原子    2828 CA  SER A 368    -35.416   7.454   -0.374   1.00  27.29
原子    2829 CB  SER A 368    -36.339   6.332    0.107   1.00  27.90
原子    2830 OG  SER A 368    -37.519   6.895    0.634   1.00  30.69
原子    2831 C   SER A 368    -36.171   8.466   -1.218   1.00  27.68
原子    2832 O   SER A 368    -36.361   9.612   -0.805   1.00  26.96
原子    2833 N   SER A 369    -36.629   8.025   -2.388   1.00  28.98
原子    2834 CA  SER A 369    -37.260   8.908   -3.367   1.00  30.52
原子    2835 CB  SER A 369    -37.520   8.167   -4.681   1.00  30.90
原子    2836 OG  SER A 369    -38.269   6.983   -4.452   1.00  32.57
原子    2837 C   SER A 369    -38.536   9.583   -2.871   1.00  31.50
原子    2838 O   SER A 369    -38.954   10.572  -3.442   1.00  32.33
原子    2839 N   SER A 370    -39.150   9.067   -1.809   1.00  32.18
原子    2840 CA  SER A 370    -40.365   9.712   -1.279   1.00  32.96
原子    2841 CB  SER A 370    -41.313   8.692   -0.624   1.00  33.18
原子    2842 OG  SER A 370    -40.610   7.847    0.273   1.00  34.18
原子    2843 C   SER A 370    -40.049   10.864  -0.323   1.00  32.37
原子    2844 O   SER A 370    -40.901   11.729  -0.078   1.00  33.26
原子    2845 N   SER A 371    -38.825   10.893   0.197   1.00  31.13
原子    2846 CA  SER A 371    -38.443   11.911   1.174   1.00  30.04
原子    2847 CB  SER A 371    -37.180   11.487   1.912   1.00  29.83
原子    2848 OG  SER A 371    -36.046   11.714   1.100   1.00  30.43
原子    2849 C   SER A 371    -38.247   13.295   0.553   1.00  29.13
原子    2850 O   SER A 371    -37.795   13.424  -0.589   1.00  28.84
原子    2851 N   SER A 372    -38.571   14.340   1.312   1.00  27.84
原子    2852 CA  SER A 372    -38.300   15.689   0.845   1.00  27.18
原子    2853 CB  SER A 372    -38.896   16.737   1.789   1.00  27.36
原子    2854 OG  SER A 372    -38.331   16.609   3.080   1.00  28.50
原子    2855 C   SER A 372    -36.783   15.902   0.680   1.00  25.79
原子    2856 O   SER A 372    -36.358   16.690  -0.173   1.00  26.29
原子    2857 N   THR A 373    -35.979   15.193   1.479   1.00  24.06
原子    2858 CA  THR A 373    -34.517   15.337   1.448   1.00  22.51
原子    2859 CB  THR A 373    -33.833   14.501   2.545   1.00  22.26
原子    2860 OG1 THR A 373    -34.543   14.636   3.788   1.00  23.04
原子    2861 CG2 THR A 373    -32.370   14.926   2.734   1.00  21.06
原子    2862 C   THR A 373    -33.984   14.906   0.076   1.00  21.61
原子    2863 O   THR A 373    -33.134   15.578  -0.513   1.00  19.74
原子    2864 N   PHE A 374    -34.493   13.777  -0.413   1.00  21.13
原子    2865 CA  PHE A 374    -34.137   13.280  -1.749   1.00  22.10
原子    2866 CB  PHE A 374    -34.950   12.023  -2.051   1.00  22.12
原子    2867 CG  PHE A 374    -34.624   11.380  -3.366   1.00  22.90
原子    2868 CD1 PHE A 374    -33.677   10.368  -3.432   1.00  23.83
原子    2869 CE1 PHE A 374    -33.381   9.749   -4.649   1.00  22.56
原子    2870 CZ  PHE A 374    -34.041   10.162  -5.802   1.00  23.24
原子    2871 CE2 PHE A 374    -34.985   11.161  -5.752   1.00  23.36
原子    2872 CD2 PHE A 374    -35.280   11.769  -4.523   1.00  23.73
原子    2873 C   PHE A 374    -34.343   14.349  -2.818   1.00  22.24
原子    2874 O   PHE A 374    -33.413   14.681  -3.548   1.00  22.63
原子    2875 N   THR A 375    -35.549   14.923  -2.880   1.00  22.72
原子    2876 CA  THR A 375    -35.890   15.963  -3.852   1.00  23.34
原子    2877 CB  THR A 375    -37.364   16.398  -3.683   1.00  23.63
原子    2878 OG1 THR A 375    -38.193   15.244  -3.809   1.00  27.83
原子    2879 CG2 THR A 375    -37.768   17.413  -4.749   1.00  27.05
原子    2880 C   THR A 375    -35.003   17.203  -3.746   1.00  22.66
原子    2881 O   THR A 375    -34.603   17.766  -4.756   1.00  21.43
原子    2882 N   ASN A 376    -34.744   17.632  -2.508   1.00  20.80
原子    2883 CA  ASN A 376    -33.880   18.766  -2.207   1.00  21.33
原子    2884 CB  ASN A 376    -33.856   18.975  -0.688   1.00  21.98
原子    2885 CG  ASN A 376    -33.343   20.354  -0.278   1.00  27.01
原子    2886 OD1 ASN A 376    -32.582   21.011  -1.004   1.00  31.72
原子    2887 ND2 ASN A 376    -33.748   20.793   0.913   1.00  30.14
原子    2888 C   ASN A 376    -32.465   18.527  -2.733   1.00  19.80
原子    2889 O   ASN A 376    -31.898   19.389  -3.415   1.00  19.75
原子    2890 N   ILE A 377    -31.915   17.354  -2.431   1.00  19.00
原子    2891 CA  ILE A 377    -30.586   16.983  -2.916   1.00  18.66
原子    2892 CB  ILE A 377    -30.081   15.651  -2.319   1.00  18.56
原子    2893 CG1 ILE A 377    -29.834   15.813  -0.800   1.00  18.42
原子    2894 CD1 ILE A 377    -29.634   14.481  -0.028   1.00  19.35
原子    2895 CG2 ILE A 377    -28.787   15.233  -3.025   1.00  18.07
原子    2896 C   ILE A 377    -30.546   16.964  -4.451   1.00  18.87
原子    2897 O   ILE A 377    -29.655   17.575  -5.058   1.00  18.47
原子    2898 N   ILE A 378    -31.513   16.293  -5.068   1.00  18.45
原子    2899 CA  ILE A 378    -31.556   16.216  -6.539   1.00  19.78
原子    2900 CB  ILE A 378    -32.738   15.359  -7.085   1.00  20.45
原子    2901 CG1 ILE A 378    -32.593   13.891  -6.650   1.00  22.32
原子    2902 CD1 ILE A 378    -31.414   13.145  -7.270   1.00  24.68
原子    2903 CG2 ILE A 378    -32.829   15.472  -8.646   1.00  21.27
原子    2904 C   ILE A 378    -31.561   17.588  -7.177   1.00  19.82
原子    2905 O   ILE A 378    -30.760   17.849  -8.101   1.00  19.62
原子    2906 N   ASN A 379    -32.441   18.470  -6.689   1.00  18.68
原子    2907 CA  ASN A 379    -32.531   19.820  -7.224   1.00  19.13
原子    2908 CB  ASN A 379    -33.738   20.578  -6.658   1.00  20.08
原子    2909 CG  ASN A 379    -35.066   19.956  -7.087   1.00  25.11
原子    2910 OD1 ASN A 379    -35.121   19.173  -8.044   1.00  29.37
原子    2911 ND2 ASN A 379    -36.144   20.289  -6.369   1.00  29.08
原子    2912 C   ASN A 379    -31.241   20.604  -7.040   1.00  17.96
原子    2913 O   ASN A 379    -30.774   21.273  -7.981   1.00  17.85
原子    2914 N   ALA A 380    -30.662   20.497  -5.841   1.00  15.93
原子    2915 CA  ALA A 380    -29.458   21.241  -5.509   1.00  16.08
原子    2916 CB  ALA A 380    -29.120   21.061  -4.033   1.00  16.14
原子    2917 C   ALA A 380    -28.299   20.783  -6.389   1.00  15.64
原子    2918 O   ALA A 380    -27.566   21.607  -6.938   1.00  16.56
原子    2919 N   VAL A 381    -28.153   19.471  -6.519   1.00  15.22
原子    2920 CA  VAL A 381    -27.039   18.912  -7.302   1.00  15.77
原子    2921 CB  VAL A 381    -26.823   17.403  -6.999   1.00  15.61
原子    2922 CG1 VAL A 381    -25.747   16.777  -7.940   1.00  14.83
原子    2923 CG2 VAL A 381    -26.386   17.234  -5.551   1.00  14.84
原子    2924 C   VAL A 381    -27.243   19.211  -8.794   1.00  16.08
原子    2925 O   VAL A 381    -26.281   19.508  -9.505   1.00  16.62
原子    2926 N   SER A 382    -28.482   19.112  -9.278   1.00  16.66
原子    2927 CA  SER A 382    -28.772   19.453  -10.690  1.00  18.67
原子    2928 CB  SER A 382    -30.246   19.212  -11.043  1.00  18.26
原子    2929 OG  SER A 382    -30.538   17.855  -10.893  1.00  24.56
原子    2930 C   SER A 382    -28.434   20.894  -11.005  1.00  18.10
原子    2931 O   SER A 382    -27.815   21.183  -12.027  1.00  18.05
原子    2932 N   THR A 383    -28.853   21.810  -10.132  1.00  17.66
原子    2933 CA  THR A 383    -28.521   23.216  -10.298  1.00  17.72
原子    2934 CB  THR A 383    -29.199   24.063  -9.180   1.00  18.48
原子    2935 OG1 THR A 383    -30.606   23.985  -9.373   1.00  19.72
原子    2936 CG2 THR A 383    -28.771   25.550  -9.227   1.00  19.59
原子    2937 C   THR A 383    -27.017   23.470  -10.314  1.00  17.09
原子    2938 O   THR A 383    -26.524   24.286  -11.109  1.00  17.00
原子    2939 N   TYR A 384    -26.299   22.774  -9.435   1.00  15.62
原子    2940 CA  TYR A 384    -24.858   22.925  -9.312   1.00  15.37
原子    2941 CB  TYR A 384    -24.397   22.164  -8.068   1.00  15.00
原子    2942 CG  TYR A 384    -22.958   22.345  -7.630   1.00  15.08
原子    2943 CD1 TYR A 384    -22.361   23.601  -7.578   1.00  15.83
原子    2944 CE1 TYR A 384    -21.049   23.752  -7.131   1.00  16.33
原子    2945 CZ  TYR A 384    -20.321   22.623  -6.737   1.00  16.13
原子    2946 OH  TYR A 384    -19.018   22.738  -6.302   1.00  16.22
原子    2947 CE2 TYR A 384    -20.890   21.386  -6.778   1.00  13.72
原子    2948 CD2 TYR A 384    -22.203   21.242  -7.232   1.00  14.72
原子    2949 C   TYR A 384    -24.186   22.396  -10.590  1.00  15.13
原子    2950 O   TYR A 384    -23.319   23.065  -11.173  1.00  14.43
原子    2951 N   ALA A 385    -24.605   21.213  -11.033  1.00  15.02
原子    2952 CA  ALA A 385    -24.045   20.639  -12.263  1.00  15.60
原子    2953 CB  ALA A 385    -24.634   19.295  -12.503  1.00  15.85
原子    2954 C   ALA A 385    -24.249   21.564  -13.477  1.00  16.15
原子    2955 O   ALA A 385    -23.292   21.857  -14.211  1.00  15.49
原子    2956 N   ASP A 386    -25.483   22.055  -13.660  1.00  15.57
原子    2957 CA  ASP A 386    -25.782   23.058  -14.694  1.00  16.09
原子    2958 CB  ASP A 386    -27.279   23.433  -14.687  1.00  15.88
原子    2959 CG  ASP A 386    -28.158   22.379  -15.349  1.00  18.85
原子    2960 OD1 ASP A 386    -27.672   21.307  -15.766  1.00  18.94
原子    2961 OD2 ASP A 386    -29.365   22.624  -15.461  1.00  23.88
原子    2962 C   ASP A 386    -24.938   24.322  -14.526  1.00  15.81
原子    2963 O   ASP A 386    -24.594   24.998  -15.501  1.00  16.29
原子    2964 N   GLY A 387    -24.591   24.640  -13.290  1.00  15.76
原子    2965 CA  GLY A 387    -23.735   25.787  -13.038  1.00  14.35
原子    2966 C   GLY A 387    -22.354   25.654  -13.663  1.00  14.35
原子    2967 O   GLY A 387    -21.791   26.644  -14.129  1.00  13.79
原子    2968 N   PHE A 388    -21.771   24.453  -13.624  1.00  14.30
原子    2969 CA  PHE A 388    -20.479   24.217  -14.312  1.00  14.69
原子    2970 CB  PHE A 388    -19.912   22.824  -13.987  1.00  14.42
原子    2971 CG  PHE A 388    -19.359   22.730  -12.584  1.00  13.79
原子    2972 CD1 PHE A 388    -18.139   23.335  -12.269  1.00  14.50
原子    2973 CE1 PHE A 388    -17.621   23.261  -10.947  1.00  16.38
原子    2974 CZ  PHE A 388    -18.377   22.627  -9.951   1.00  14.77
原子    2975 CE2 PHE A 388    -19.604   22.045  -10.265  1.00  16.35
原子    2976 CD2 PHE A 388    -20.088   22.100  -11.578  1.00  14.00
原子    2977 C   PHE A 388    -20.601   24.428  -15.821  1.00  15.31
原子    2978 O   PHE A 388    -19.740   25.078  -16.440  1.00  15.55
原子    2979 N   LEU A 389    -21.669   23.913  -16.415  1.00  16.52
原子    2980 CA  LEU A 389    -21.889   24.159  -17.856  1.00  17.84
原子    2981 CB  LEU A 389    -23.137   23.431  -18.382  1.00  17.83
原子    2982 CG  LEU A 389    -23.172   21.911  -18.427  1.00  22.75
原子    2983 CD1 LEU A 389    -24.247   21.418  -19.401  1.00  22.55
原子    2984 CD2 LEU A 389    -21.805   21.333  -18.806  1.00  24.63
原子    2985 C   LEU A 389    -22.013   25.634  -18.136  1.00  18.32
原子    2986 O   LEU A 389    -21.409   26.138  -19.091  1.00  19.50
原子    2987 N   SER A 390    -22.775   26.341  -17.295  1.00  18.55
原子    2988 CA  SER A 390    -23.021   27.767  -17.469  1.00  19.33
原子    2989 CB  SER A 390    -24.090   28.246  -16.491  1.00  19.89
原子    2990 OG  SER A 390    -25.325   27.693  -16.891  1.00  24.07
原子    2991 C   SER A 390    -21.763   28.603  -17.323  1.00  19.51
原子    2992 O   SER A 390    -21.575   29.585  -18.055  1.00  19.69
原子    2993 N   GLU A 391    -20.893   28.200  -16.399  1.00  18.87
原子    2994 CA  GLU A 391    -19.633   28.879  -16.220  1.00  19.59
原子    2995 CB  GLU A 391    -18.901   28.393  -14.952  1.00  20.02
原子    2996 CG  GLU A 391    -19.528   28.924  -13.668  1.00  23.54
原子    2997 CD  GLU A 391    -19.590   30.448  -13.634  1.00  26.61
原子    2998 OE1 GLU A 391    -18.609   31.102  -14.023  1.00  28.42
原子    2999 OE2 GLU A 391    -20.637   30.994  -13.227  1.00  29.52
原子    3000 C   GLU A 391    -18.738   28.729  -17.457  1.00  19.12
原子    3001 O   GLU A 391    -18.123   29.709  -17.906  1.00  19.40
原子    3002 N   ALA A 392    -18.654   27.516  -17.991  1.00  18.81
原子    3003 CA  ALA A 392    -17.861   27.304  -19.201  1.00  19.72
原子    3004 CB  ALA A 392    -17.758   25.815  -19.526  1.00  19.45
原子    3005 C   ALA A 392    -18.478   28.098  -20.363  1.00  19.59
原子    3006 O   ALA A 392    -17.764   28.724  -21.157  1.00  18.65
原子    3007 N   ALA A 393    -19.808   28.117  -20.425  1.00  20.40
原子    3008 CA  ALA A 393    -20.526   28.820  -21.507  1.00  21.27
原子    3009 CB  ALA A 393    -22.035   28.524  -21.421  1.00  21.83
原子    3010 C   ALA A 393    -20.266   30.334  -21.574  1.00  21.79
原子    3011 O   ALA A 393    -20.283   30.920  -22.664  1.00  21.96
原子    3012 N   LYS A 394    -19.976   30.971  -20.435  1.00  21.37
原子    3013 CA  LYS A 394    -19.626   32.383  -20.447  1.00  22.02
原子    3014 CB  LYS A 394    -19.289   32.916  -19.043  1.00  23.11
原子    3015 CG  LYS A 394    -20.411   32.980  -18.044  1.00  25.98
原子    3016 CD  LYS A 394    -19.782   33.341  -16.700  1.00  28.89
原子    3017 CE  LYS A 394    -20.793   33.314  -15.576  1.00  34.05
原子    3018 NZ  LYS A 394    -20.097   33.674  -14.290  1.00  33.96
原子    3019 C   LYS A 394    -18.403   32.626  -21.310  1.00  21.55
原子    3020 O   LYS A 394    -18.188   33.742  -21.771  1.00  22.41
原子    3021 N   TYR A 395    -17.570   31.604  -21.488  1.00  19.98
原子    3022 CA  TYR A 395    -16.287   31.824  -22.132  1.00  19.46
原子    3023 CB  TYR A 395    -15.137   31.464  -21.185  1.00  20.82
原子    3024 CG  TYR A 395    -15.291   32.165  -19.872  1.00  22.04
原子    3025 CD1 TYR A 395    -15.644   31.450  -18.716  1.00  23.21
原子    3026 CE1 TYR A 395    -15.806   32.097  -17.508  1.00  23.70
原子    3027 CZ  TYR A 395    -15.661   33.473  -17.460  1.00  23.93
原子    3028 OH  TYR A 395    -15.828   34.143  -16.272  1.00  26.14
原子    3029 CE2 TYR A 395    -15.327   34.202  -18.593  1.00  24.38
原子    3030 CD2 TYR A 395    -15.157   33.548  -19.791  1.00  22.37
原子    3031 C   TYR A 395    -16.157   31.119  -23.451  1.00  19.22
原子    3032 O   TYR A 395    -15.045   30.940  -23.941  1.00  18.70
原子    3033 N   VAL A 396    -17.299   30.718  -24.018  1.00  18.16
原子    3034 CA  VAL A 396    -17.331   30.135  -25.352  1.00  19.03
原子    3035 CB  VAL A 396    -18.396   29.025  -25.458  1.00  18.18
原子    3036 CG1 VAL A 396    -18.469   28.465  -26.898  1.00  18.63
原子    3037 CG2 VAL A 396    -18.094   27.915  -24.452  1.00  18.97
原子    3038 C   VAL A 396    -17.654   31.288  -26.308  1.00  19.65
原子    3039 O   VAL A 396    -18.644   31.986  -26.098  1.00  19.66
原子    3040 N   PRO A 397    -16.810   31.507  -27.328  1.00  20.41
原子    3041 CA  PRO A 397    -17.016   32.626  -28.256  1.00  20.82
原子    3042 CB  PRO A 397    -15.794   32.561  -29.175  1.00  21.47
原子    3043 CG  PRO A 397    -14.819   31.725  -28.475  1.00  21.69
原子    3044 CD  PRO A 397    -15.598   30.741  -27.661  1.00  19.70
原子    3045 C   PRO A 397    -18.280   32.434  -29.073  1.00  21.11
原子    3046 O   PRO A 397    -18.844   31.339  -29.088  1.00  19.88
原子    3047 N   ALA A 398    -18.713   33.492  -29.765  1.00  21.26
原子    3048 CA  ALA A 398    -19.951   33.424  -30.559  1.00  21.44
原子    3049 CB  ALA A 398    -20.227   34.766  -31.230  1.00  22.38
原子    3050 C   ALA A 398    -19.971   32.297  -31.587  1.00  21.30
原子    3051 O   ALA A 398    -21.038   31.769  -31.901  1.00  22.15
原子    3052 N   ASP A 399    -18.804   31.896  -32.102  1.00  20.30
原子    3053 CA  ASP A 399    -18.780   30.858  -33.133  1.00  19.40
原子    3054 CB  ASP A 399    -17.587   31.032  -34.071  1.00  19.42
原子    3055 CG  ASP A 399    -16.233   30.835  -33.381  1.00  21.84
原子    3056 OD1 ASP A 399    -16.146   30.569  -32.159  1.00  20.91
原子    3057 OD2 ASP A 399    -15.229   30.950  -34.104  1.00  24.62
原子    3058 C   ASP A 399    -18.834   29.435  -32.579  1.00  18.14
原子    3059 O   ASP A 399    -18.802   28.465  -33.350  1.00  16.78
原子    3060 N   GLY A 400    -18.891   29.322  -31.245  1.00  16.82
原子    3061 CA  GLY A 400    -18.996   28.015  -30.607  1.00  15.41
原子    3062 C   GLY A 400    -17.693   27.229  -30.556  1.00  15.07
原子    3063 O   GLY A 400    -17.704   26.041  -30.203  1.00  15.23
原子    3064 N   SER A 401    -16.572   27.861  -30.882  1.00  14.21
原子    3065 CA  SER A 401    -15.312   27.119  -30.893  1.00  14.76
原子    3066 CB  SER A 401    -14.241   27.840  -31.718  1.00  14.71
原子    3067 OG  SER A 401    -14.059   29.160  -31.257  1.00  16.86
原子    3068 C   SER A 401    -14.815   26.866  -29.448  1.00  14.38
原子    3069 O   SER A 401    -14.992   27.717  -28.562  1.00  14.58
原子    3070 N   LEU A 402    -14.169   25.720  -29.249  1.00  13.54
原子    3071 CA  LEU A 402    -13.603   25.364  -27.968  1.00  13.21
原子    3072 CB  LEU A 402    -14.271   24.080  -27.450  1.00  13.42
原子    3073 CG  LEU A 402    -15.776   24.192  -27.162  1.00  14.06
原子    3074 CD1 LEU A 402    -16.289   22.834  -26.668  1.00  13.87
原子    3075 CD2 LEU A 402    -15.997   25.264  -26.109  1.00  17.00
原子    3076 C   LEU A 402    -12.111   25.143  -28.109  1.00  12.99
原子    3077 O   LEU A 402    -11.695   24.166  -28.707  1.00  13.19
原子    3078 N   ALA A 403    -11.320   26.070  -27.578  1.00  13.02
原子    3079 CA  ALA A 403    -9.884    25.870  -27.454  1.00  12.06
原子    3080 CB  ALA A 403    -9.194    27.226  -27.220  1.00  11.77
原子    3081 C   ALA A 403    -9.591    24.907  -26.300  1.00  12.81
原子    3082 O   ALA A 403    -10.508   24.315  -25.714  1.00  12.36
原子    3083 N   GLU A 404    -8.308    24.772  -25.959  1.00  11.39
原子    3084 CA  GLU A 404    -7.918    23.922  -24.855  1.00  11.47
原子    3085 CB  GLU A 404    -6.412    23.689  -24.931  1.00  11.02
原子    3086 CG  GLU A 404    -5.865    22.723  -23.873  1.00  11.30
原子    3087 CD  GLU A 404    -4.363    22.669  -23.954  1.00  12.25
原子    3088 OE1 GLU A 404    -3.729    23.692  -23.622  1.00  12.06
原子    3089 OE2 GLU A 404    -3.818    21.624  -24.390  1.00  12.60
原子    3090 C   GLU A 404    -8.246    24.635  -23.538  1.00  11.77
原子    3091 O   GLU A 404    -8.755    24.006  -22.590  1.00  11.08
原子    3092 N   GLN A 405    -7.890    25.924  -23.453  1.00  12.07
原子    3093 CA  GLN A 405    -7.952    26.655  -22.196  1.00  13.33
原子    3094 CB  GLN A 405    -6.539    26.986  -21.678  1.00  13.24
原子    3095 CG  GLN A 405    -5.625    25.821  -21.553  1.00  15.96
原子    3096 CD  GLN A 405    -4.229    26.213  -21.051  1.00  14.97
原子    3097 OE1 GLN A 405    -4.068    27.130  -20.236  1.00  15.09
原子    3098 NE2 GLN A 405    -3.236    25.475  -21.496  1.00  15.87
原子    3099 C   GLN A 405    -8.687    27.985  -22.356  1.00  13.51
原子    3100 O   GLN A 405    -8.870    28.475  -23.489  1.00  13.74
原子    3101 N   PHE A 406    -9.041    28.587  -21.226  1.00  12.60
原子    3102 CA  PHE A 406    -9.516    29.990  -21.207  1.00  13.82
原子    3103 CB  PHE A 406    -11.058   30.104  -21.232  1.00  13.56
原子    3104 CG  PHE A 406    -11.800   29.385  -20.123  1.00  15.20
原子    3105 CD1 PHE A 406    -12.155   28.026  -20.242  1.00  16.33
原子    3106 CE1 PHE A 406    -12.879   27.370  -19.239  1.00  16.80
原子    3107 CZ  PHE A 406    -13.340   28.094  -18.114  1.00  16.74
原子    3108 CE2 PHE A 406    -13.020   29.453  -17.993  1.00  15.37
原子    3109 CD2 PHE A 406    -12.260   30.101  -19.000  1.00  17.56
原子    3110 C   PHE A 406    -8.836    30.737  -20.078  1.00  13.80
原子    3111 O   PHE A 406    -8.587    30.151  -19.018  1.00  14.02
原子    3112 N   ASP A 407    -8.481    31.997  -20.321  1.00  14.98
原子    3113 CA  ASP A 407    -7.547    32.726  -19.438  1.00  15.04
原子    3114 CB  ASP A 407    -7.237    34.115  -20.032  1.00  15.99
原子    3115 CG  ASP A 407    -6.159    34.829  -19.293  1.00  18.17
原子    3116 OD1 ASP A 407    -6.474    35.508  -18.293  1.00  20.41
原子    3117 OD2 ASP A 407    -4.993    34.683  -19.685  1.00  20.75
原子    3118 C   ASP A 407    -8.100    32.829  -18.005  1.00  14.54
原子    3119 O   ASP A 407    -9.257    33.185  -17.800  1.00  15.12
原子    3120 N   ARG A 408    -7.248    32.548  -17.018  1.00  14.63
原子    3121 CA  ARG A 408    -7.644    32.530  -15.609  1.00  15.33
原子    3122 CB  ARG A 408    -6.453    32.095  -14.753  1.00  15.32
原子    3123 CG  ARG A 408    -5.236    33.062  -14.828  1.00  14.48
原子    3124 CD  ARG A 408    -4.009    32.479  -14.122  1.00  16.22
原子    3125 NE  ARG A 408    -4.237    32.248  -12.695  1.00  15.55
原子    3126 CZ  ARG A 408    -3.613    31.323  -11.961  1.00  18.66
原子    3127 NH1 ARG A 408    -3.878    31.231  -10.658  1.00  17.51
原子    3128 NH2 ARG A 408    -2.717    30.499  -12.511  1.00  17.12
原子    3129 C   ARG A 408    -8.167    33.886  -15.108  1.00  16.66
原子    3130 O   ARG A 408    -8.898    33.943  -14.110  1.00  16.82
原子    3131 N   ASN A 409    -7.781    34.964  -15.790  1.00  18.00
原子    3132 CA  ASN A 409    -8.252    36.316  -15.421  1.00  20.06
原子    3133 CB  ASN A 409    -7.069    37.275  -15.355  1.00  20.32
原子    3134 CG  ASN A 409    -6.119    36.937  -14.224  1.00  21.65
原子    3135 OD1 ASN A 409    -6.549    36.678  -13.111  1.00  24.42
原子    3136 ND2 ASN A 409    -4.830    36.914  -14.516  1.00  23.96
原子    3137 C   ASN A 409    -9.320    36.903  -16.336  1.00  21.43
原子    3138 O   ASN A 409    -10.272   37.524  -15.857  1.00  22.03
原子    3139 N   SER A 410    -9.152    36.724  -17.646  1.00  22.25
原子    3140 CA  SER A 410    -10.007   37.410  -18.624  1.00  22.76
原子    3141 CB  SER A 410    -9.146    38.159  -19.636  1.00  23.45
原子    3142 OG  SER A 410    -8.470    37.260  -20.495  1.00  23.38
原子    3143 C   SER A 410    -10.971   36.472  -19.343  1.00  22.82
原子    3144 O   SER A 410    -11.898   36.925  -20.010  1.00  23.59
原子    3145 N   GLY A 411    -10.758   35.161  -19.238  1.00  21.64
原子    3146 CA  GLY A 411    -11.668   34.221  -19.877  1.00  20.39
原子    3147 C   GLY A 411    -11.476   34.087  -21.379  1.00  19.99
原子    3148 O   GLY A 411    -12.223   33.368  -22.029  1.00  20.85
原子    3149 N   THR A 412    -10.478   34.750  -21.941  1.00  19.04
原子    3150 CA  THR A 412    -10.268   34.658  -23.383  1.00  20.25
原子    3151 CB  THR A 412    -9.447    35.853  -23.922  1.00  21.81
原子    3152 OG1 THR A 412    -8.187    35.900  -23.257  1.00  26.24
原子    3153 CG2 THR A 412    -10.160   37.163  -23.631  1.00  23.82
原子    3154 C   THR A 412    -9.615    33.294  -23.732  1.00  19.17
原子    3155 O   THR A 412    -8.786    32.796  -22.970  1.00  17.70
原子    3156 N   PRO A 413    -9.996    32.688  -24.874  1.00  18.84
原子    3157 CA  PRO A 413    -9.466    31.348  -25.234  1.00  18.32
原子    3158 CB  PRO A 413    -10.220   31.002  -26.525  1.00  18.75
原子    3159 CG  PRO A 413    -11.513   31.928  -26.451  1.00  19.42
原子    3160 CD  PRO A 413    -10.943   33.195  -25.891  1.00  19.40
原子    3161 C   PRO A 413    -7.959    31.399  -25.464  1.00  18.87
原子    3162 O   PRO A 413    -7.436    32.406  -25.955  1.00  18.20
原子    3163 N   LEU A 414    -7.253    30.353  -25.051  1.00  18.44
原子    3164 CA  LEU A 414    -5.822    30.275  -25.305  1.00  18.90
原子    3165 CB  LEU A 414    -4.992    30.974  -24.208  1.00  21.66
原子    3166 CG  LEU A 414    -5.019    30.574  -22.754  1.00  24.35
原子    3167 CD1 LEU A 414    -4.134    31.484  -21.892  1.00  27.42
原子    3168 CD2 LEU A 414    -6.406    30.669  -22.224  1.00  30.77
原子    3169 C   LEU A 414    -5.362    28.854  -25.518  1.00  17.24
原子    3170 O   LEU A 414    -6.138    27.913  -25.406  1.00  15.97
原子    3171 N   SER A 415    -4.091    28.733  -25.865  1.00  15.34
原子    3172 CA  SER A 415    -3.473    27.481  -26.257  1.00  15.28
原子    3173 CB  SER A 415    -3.434    26.468  -25.101  1.00  14.94
原子    3174 OG  SER A 415    -2.632    25.355  -25.445  1.00  14.00
原子    3175 C   SER A 415    -4.141    26.932  -27.528  1.00  15.13
原子    3176 O   SER A 415    -4.665    27.718  -28.334  1.00  14.92
原子    3177 N   ALA A 416    -4.097    25.618  -27.714  1.00  14.27
原子    3178 CA  ALA A 416    -4.540    24.977  -28.976  1.00  14.25
原子    3179 CB  ALA A 416    -4.380    23.486  -28.889  1.00  13.68
原子    3180 C   ALA A 416    -5.981    25.314  -29.315  1.00  14.33
原子    3181 O   ALA A 416    -6.854    25.216  -28.459  1.00  14.09
原子    3182 N   LEU A 417    -6.223    25.680  -30.567  1.00  13.34
原子    3183CA   LEU A 417    -7.584    25.985  -31.006  1.00  14.22
原子    3184 CB  LEU A 417    -7.536    26.931  -32.194  1.00  16.32
原子    3185 CG  LEU A 417    -6.841    28.283  -31.942  1.00  18.75
原子    3186 CD1 LEU A 417    -7.005    29.127  -33.163  1.00  23.81
原子    3187 CD2 LEU A 417    -7.419    28.991  -30.712  1.00  21.76
原子    3188C    LEU A 417    -8.279    24.687  -31.413  1.00  13.18
原子    3189 O   LEU A 417    -7.610    23.712  -31.775  1.00  13.19
原子    3190 N   HIS A 418    -9.609    24.658  -31.311  1.00  12.26
原子    3191 CA  HIS A 418    -10.399   23.496  -31.764  1.00  11.77
原子    3192 CB  HIS A 418    -10.487   23.454  -33.303  1.00  13.41
原子    3193 CG  HIS A 418    -11.294   24.566  -33.898  1.00  14.68
原子    3194 ND1 HIS A 418    -12.646   24.717  -33.660  1.00  16.00
原子    3195 CE1 HIS A 418    -13.095   25.762  -34.341  1.00  17.83
原子    3196 NE2 HIS A 418    -12.085   26.290  -35.015  1.00  17.38
原子    3197 CD2 HIS A 418    -10.948   25.557  -34.763  1.00  17.65
原子    3198 C   HIS A 418    -9.826    22.187  -31.206  1.00  12.24
原子    3199 O   HIS A 418    -9.540    21.250  -31.947  1.00  12.10
原子    3200 N   LEU A 419    -9.656    22.116  -29.880  1.00  10.99
原子    3201 CA  LEU A 419    -9.152    20.881  -29.301  1.00  10.46
原子    3202 CB  LEU A 419    -8.742    21.069  -27.826  1.00  10.91
原子    3203 CG  LEU A 419    -7.983    19.883  -27.220  1.00  10.16
原子    3204 CD1 LEU A 419    -6.524    19.944  -27.669  1.00  11.45
原子    3205 CD2 LEU A 419    -8.080    19.960  -25.657  1.00  10.73
原子    3206 C   LEU A 419    -10.215   19.812  -29.398  1.00  10.49
原子    3207 O   LEU A 419    -11.312   19.973  -28.863  1.00  10.67
原子    3208 N   THR A 420    -9.860    18.686  -30.021  1.00  10.22
原子    3209 CA  THR A 420    -10.833   17.629  -30.296  1.00  10.90
原子    3210 CB  THR A 420    -10.201   16.460  -31.096  1.00  11.55
原子    3211 OG1 THR A 420    -9.357    16.999  -32.115  1.00  12.00
原子    3212 CG2 THR A 420    -11.310   15.625  -31.786  1.00  12.52
原子    3213 C   THR A 420    -11.426   17.135  -28.995  1.00  11.43
原子    3214 O   THR A 420    -12.648   16.903  -28.891  1.00  11.83
原子    3215 N   TRP A 421    -10.569   16.987  -27.980  1.00  9.79
原子    3216 CA  TRP A 421    -11.052   16.511  -26.688  1.00  11.67
原子    3217 CB  TRP A 421    -9.839    16.184  -25.803  1.00  12.06
原子    3218 CG  TRP A 421    -10.075   15.476  -24.508  1.00  11.94
原子    3219 CD1 TRP A 421    -11.274   15.202  -23.881  1.00  14.46
原子    3220 NE1 TRP A 421    -11.044   14.590  -22.663  1.00  14.38
原子    3221 CE2 TRP A 421    -9.691    14.497  -22.468  1.00  13.52
原子    3222 CD2 TRP A 421    -9.053    15.039  -23.616  1.00  13.01
原子    3223 CE3 TRP A 421    -7.652    15.045  -23.680  1.00  15.38
原子    3224 CZ3 TRP A 421    -6.932    14.503  -22.605  1.00  16.10
原子    3225 CH2 TRP A 421    -7.603    13.973  -21.475  1.00  14.87
原子    3226 CZ2 TRP A 421    -8.973    13.945  -21.398  1.00  14.27
原子    3227 C   TRP A 421    -12.035   17.514  -26.032  1.00  10.89
原子    3228 O   TRP A 421    -12.966   17.092  -25.357  1.00  10.96
原子    3229 N   SER A 422    -11.844   18.822  -26.211  1.00  10.49
原子    3230 CA  SER A 422    -12.833   19.794  -25.696  1.00  11.13
原子    3231 CB  SER A 422    -12.459   21.243  -26.049  1.00  10.97
原子    3232 OG  SER A 422    -11.302   21.682  -25.338  1.00  13.73
原子    3233 C   SER A 422    -14.229   19.496  -26.257  1.00  11.40
原子    3234 O   SER A 422    -15.204   19.468  -25.530  1.00  12.11
原子    3235 N   TYR A 423    -14.320   19.281  -27.563  1.00  11.29
原子    3236 CA  TYR A 423    -15.617   18.990  -28.170  1.00  11.29
原子    3237 CB  TYR A 423    -15.502   19.020  -29.717  1.00  11.85
原子    3238 CG  TYR A 423    -15.132   20.389  -30.274  1.00  12.18
原子    3239 CD1 TYR A 423    -16.002   21.485  -30.145  1.00  10.35
原子    3240 CE1 TYR A 423    -15.668   22.741  -30.643  1.00  11.83
原子    3241 CZ  TYR A 423    -14.468   22.912  -31.316  1.00  12.29
原子    3242 OH  TYR A 423    -14.157   24.145  -31.783  1.00  13.08
原子    3243 CE2 TYR A 423    -13.588   21.845  -31.496  1.00  13.57
原子    3244 CD2 TYR A 423    -13.942   20.572  -30.991  1.00  12.74
原子    3245 C   TYR A 423    -16.217   17.673  -27.658  1.00  12.12
原子    3246 O   TYR A 423    -17.430   17.622  -27.323  1.00  12.13
原子    3247 N   ALA A 424    -15.385   16.623  -27.539  1.00  10.99
原子    3248 CA  ALA A 424    -15.853   15.337  -26.986  1.00  11.26
原子    3249 CB  ALA A 424    -14.717   14.294  -26.952  1.00  11.73
原子    3250 C   ALA A 424    -16.411   15.535  -25.588  1.00  10.93
原子    3251 O   ALA A 424    -17.465   14.974  -25.246  1.00  11.68
原子    3252 N   SER A 425    -15.696   16.308  -24.770  1.00  9.74
原子    3253 CA  SER A 425    -16.077   16.519  -23.379  1.00  10.92
原子    3254 CB  SER A 425    -14.948   17.228  -22.602  1.00  11.59
原子    3255 OG  SER A 425    -14.817   18.604  -22.957  1.00  13.86
原子    3256 C   SER A 425    -17.402   17.291  -23.219  1.00  11.65
原子    3257 O   SER A 425    -18.132   17.043  -22.276  1.00  11.86
原子    3258 N   PHE A 426    -17.683   18.220  -24.133  1.00  12.13
原子    3259 CA  PHE A 426    -18.983   18.891  -24.154  1.00  12.95
原子    3260 CB  PHE A 426    -19.018   20.053  -25.173  1.00  13.14
原子    3261 CG  PHE A 426    -20.410   20.575  -25.391  1.00  15.93
原子    3262 CD1 PHE A 426    -20.951   21.522  -24.516  1.00  17.76
原子    3263 CE1 PHE A 426    -22.279   21.980  -24.688  1.00  17.49
原子    3264 CZ  PHE A 426    -23.064   21.455  -25.716  1.00  17.22
原子    3265 CE2 PHE A 426    -22.561   20.496  -26.558  1.00  17.04
原子    3266 CD2 PHE A 426    -21.225   20.045  -26.396  1.00  17.29
原子    3267 C   PHE A 426    -20.079   17.878  -24.502  1.00  13.31
原子    3268 O   PHE A 426    -21.120   17.827  -23.850  1.00  13.38
原子    3269 N   LEU A 427    -19.834   17.077  -25.539  1.00  13.23
原子    3270 CA  LEU A 427    -20.811   16.090  -25.996  1.00  14.41
原子    3271 CB  LEU A 427    -20.339   15.410  -27.291  1.00  14.32
原子    3272 CG  LEU A 427    -20.363   16.336  -28.506  1.00  15.96
原子    3273 CD1 LEU A 427    -19.661   15.639  -29.689  1.00  18.66
原子    3274 CD2 LEU A 427    -21.773   16.800  -28.876  1.00  16.20
原子    3275 C   LEU A 427    -21.137   15.045  -24.959  1.00  14.86
原子    3276 O   LEU A 427    -22.307   14.667  -24.833  1.00  16.01
原子    3277 N   THR A 428    -20.130   14.551  -24.235  1.00  13.81
原子    3278 CA  THR A 428    -20.397   13.544  -23.196  1.00  13.67
原子    3279 CB  THR A 428    -19.134   12.732  -22.745  1.00  12.87
原子    3280 OG1 THR A 428    -18.127   13.597  -22.185  1.00  12.33
原子    3281 CG2 THR A 428    -18.533   11.902  -23.923  1.00  13.77
原子    3282 C   THR A 428    -21.146   14.133  -21.980  1.00  13.66
原子    3283 O   THR A 428    -22.102   13.517  -21.478  1.00  15.09
原子    3284 N   ALA A 429    -20.738   15.312  -21.524  1.00  13.72
原子    3285 CA  ALA A 429    -21.367   15.942  -20.355  1.00  14.65
原子    3286 CB  ALA A 429    -20.704   17.295  -20.036  1.00  14.11
原子    3287 C   ALA A 429    -22.852   16.158  -20.643  1.00  15.47
原子    3288 O   ALA A 429    -23.704   15.908  -19.783  1.00  15.97
原子    3289 N   THR A 430    -23.151   16.622  -21.854  1.00  15.48
原子    3290 CA  THR A 430    -24.554   16.940  -22.208  1.00  15.64
原子    3291 CB  THR A 430    -24.675   17.968  -23.353  1.00  16.50
原子    3292 OG1 THR A 430    -23.980   17.494  -24.514  1.00  16.24
原子    3293 CG2 THR A 430    -24.101   19.317  -22.916  1.00  16.43
原子    3294 C   THR A 430    -25.401   15.690  -22.463  1.00  15.41
原子    3295 O   THR A 430    -26.611   15.674  -22.158  1.00  15.67
原子    3296 N   ALA A 431    -24.772   14.632  -22.968  1.00  15.22
原子    3297 CA  ALA A 431    -25.437   13.311  -23.049  1.00  16.26
原子    3298 CB  ALA A 431    -24.560   12.300  -23.762  1.00  16.39
原子    3299 C   ALA A 431    -25.842   12.797  -21.673  1.00  16.53
原子    3300 O   ALA A 431    -26.985   12.319  -21.485  1.00  16.61
原子    3301 N   ARG A 432    -24.937   12.895  -20.689  1.00  15.66
原子    3302 CA  ARG A 432    -25.256   12.410  -19.342  1.00  15.64
原子    3303 CB  ARG A 432    -24.022   12.413  -18.432  1.00  15.83
原子    3304 CG  ARG A 432    -22.862   11.574  -18.994  1.00  14.85
原子    3305 CD  ARG A 432    -23.174   10.051  -19.154  1.00  17.10
原子    3306 NE  ARG A 432    -21.958   9.472   -19.708  1.00  18.67
原子    3307 CZ  ARG A 432    -21.766   9.225   -21.003  1.00  20.81
原子    3308 NH1 ARG A 432    -22.769   9.372   -21.868  1.00  17.45
原子    3309 NH2 ARG A 432    -20.576   8.781   -21.427  1.00  19.90
原子    3310 C   ARG A 432    -26.375   13.235  -18.719  1.00  16.42
原子    3311 O   ARG A 432    -27.256   12.685  -18.030  1.00  17.47
原子    3312 N   ARG A 433    -26.371   14.535  -18.996  1.00  16.54
原子    3313 CA  ARG A 433    -27.425   15.418  -18.493  1.00  17.60
原子    3314 CB  ARG A 433    -27.204   16.852  -18.960  1.00  16.74
原子    3315 CG  ARG A 433    -28.287   17.833  -18.461  1.00  18.39
原子    3316 CD  ARG A 433    -27.931   19.239  -18.866  1.00  20.79
原子    3317 NE  ARG A 433    -28.739   20.260  -18.166  1.00  23.05
原子    3318 CZ  ARG A 433    -29.859   20.799  -18.654  1.00  26.97
原子    3319 NH1 ARG A 433    -30.333   20.404  -19.837  1.00  24.94
原子    3320 NH2 ARG A 433    -30.506   21.738  -17.954  1.00  25.73
原子    3321 C   ARG A 433    -28.793   14.943  -18.956  1.00  17.90
原子    3322 O   ARG A 433    -29.761   14.984  -18.184  1.00  18.50
原子    3323 N   ALA A 434    -28.861   14.502  -20.210  1.00  18.06
原子    3324 CA  ALA A 434    -30.103   13.993  -20.806  1.00  19.10
原子    3325 CB  ALA A 434    -30.067   14.202  -22.318  1.00  19.95
原子    3326 C   ALA A 434    -30.399   12.532  -20.475  1.00  20.48
原子    3327 O   ALA A 434    -31.371   11.975  -20.980  1.00  21.63
原子    3328 N   GLY A 435    -29.594   11.904  -19.620  1.00  19.94
原子    3329 CA  GLY A 435    -29.865   10.531  -19.182  1.00  21.09
原子    3330 C   GLY A 435    -29.415   9.475   -20.188  1.00  21.57
原子    3331 O   GLY A 435    -29.847   8.304   -20.130  1.00  21.64
原子    3332 N   ILE A 436    -28.529   9.873   -21.100  1.00  20.44
原子    3333 CA  ILE A 436    -27.951   8.937   -22.060  1.00  20.81
原子    3334 CB  ILE A 436    -27.753   9.601   -23.447  1.00  20.75
原子    3335 CG1 ILE A 436    -29.132   9.977   -24.027  1.00  23.03
原子    3336 CD1 ILE A 436    -29.103   11.031  -25.128  1.00  26.34
原子    3337 CG2 ILE A 436    -27.031   8.643   -24.395  1.00  21.35
原子    3338 C   ILE A 436    -26.634   8.412   -21.485  1.00  20.99
原子    3339 O   ILE A 436    -25.666   9.171   -21.339  1.00  20.46
原子    3340 N   VAL A 437    -26.616   7.120   -21.162  1.00  20.70
原子    3341 CA  VAL A 437    -25.465   6.479   -20.517  1.00  21.39
原子    3342 CB  VAL A 437    -25.848   5.826   -19.160  1.00  21.74
原子    3343 CG1 VAL A 437    -26.340   6.911   -18.205  1.00  22.12
原子    3344 CG2 VAL A 437    -26.909   4.703   -19.334  1.00  21.83
原子    3345 C   VAL A 437    -24.802   5.459   -21.444  1.00  21.79
原子    3346 O   VAL A 437    -25.459   4.901   -22.312  1.00  22.18
原子    3347 N   PRO A 438    -23.497   5.208   -21.255  1.00  22.28
原子    3348 CA  PRO A 438    -22.837   4.291   -22.181  1.00  22.83
原子    3349 CB  PRO A 438    -21.365   4.642   -22.009  1.00  22.45
原子    3350 CG  PRO A 438    -21.248   5.054   -20.578  1.00  23.88
原子    3351 CD  PRO A 438    -22.575   5.707   -20.214  1.00  22.50
原子    3352 C   PRO A 438    -23.093   2.840   -21.753  1.00  22.80
原子    3353 O   PRO A 438    -23.580   2.604   -20.626  1.00  23.06
原子    3354 N   PRO A 439    -22.796   1.878   -22.639  1.00  22.65
原子    3355 CA  PRO A 439    -22.911   0.452   -22.283  1.00  22.08
原子    3356 CB  PRO A 439    -22.300  -0.269   -23.499  1.00  21.30
原子    3357 CG  PRO A 439    -22.526   0.664   -24.618  1.00  22.81
原子    3358 CD  PRO A 439    -22.391   2.062   -24.050  1.00  22.29
原子    3359 C   PRO A 439    -22.122   0.129   -21.037  1.00  21.88
原子    3360 O   PRO A 439    -21.075   0.750   -20.776  1.00  20.95
原子    3361 N   SER A 440    -22.628  -0.818   -20.253  1.00  22.34
原子    3362 CA  SER A 440    -21.932  -1.273   -19.060  1.00  23.42
原子    3363 CB  SER A 440    -22.818  -2.195   -18.224  1.00  24.01
原子    3364 OG  SER A 440    -23.805  -1.412   -17.566  1.00  26.78
原子    3365 C   SER A 440    -20.654  -1.992   -19.430  1.00  23.78
原子    3366 O   SER A 440    -20.540  -2.554   -20.522  1.00  23.97
原子    3367 N   TRP A 441    -19.681  -1.929   -18.536  1.00  24.15
原子    3368 CA  TRP A 441    -18.431  -2.646   -18.718  1.00  24.63
原子    3369 CB  TRP A 441    -17.255  -1.679   -18.819  1.00  22.62
原子    3370 CG  TRP A 441    -16.963  -0.837   -17.583  1.00  19.24
原子    3371 CD1 TRP A 441    -17.409   0.432   -17.339  1.00  16.95
原子    3372 NE1 TRP A 441    -16.909   0.878   -16.138  1.00  17.89
原子    3373 CE2 TRP A 441    -16.111  -0.098   -15.595  1.00  17.88
原子    3374 CD2 TRP A 441    -16.130  -1.194   -16.476  1.00  18.22
原子    3375 CE3 TRP A 441    -15.377  -2.338   -16.149  1.00  19.64
原子    3376 CZ3 TRP A 441    -14.658  -2.355   -14.961  1.00  18.61
原子    3377 CH2 TRP A 441    -14.670  -1.246   -14.094  1.00  20.62
原子    3378 CZ2 TRP A 441    -15.400  -0.114   -14.391  1.00  19.39
原子    3379 C   TRP A 441    -18.179  -3.661   -17.625  1.00  26.71
原子    3380 O   TRP A 441    -17.410  -4.592   -17.813  1.00  25.60
原子    3381N    ALA A 442    -18.798  -3.471   -16.468  1.00  29.78
原子    3382 CA  ALA A 442    -18.442  -4.292   -15.330  1.00  33.94
原子    3383 CB  ALA A 442    -18.347  -3.447   -14.082  1.00  33.18
原子    3384 C   ALA A 442    -19.447  -5.412   -15.136  1.00  37.28
原子    3385 O   ALA A 442    -20.383  -5.561   -15.915  1.00  38.51
原子    3386 N   ASN A 443    -19.201  -6.222   -14.116  1.00  41.45
原子    3387 CA  ASN A 443    -20.226  -7.030   -13.467  1.00  45.10
原子    3388 CB  ASN A 443    -20.135  -8.490   -13.914  1.00  45.75
原子    3389 CG  ASN A 443    -18.815  -9.129   -13.531  1.00  48.14
原子    3390 OD1 ASN A 443    -18.620  -9.524   -12.380  1.00  50.51
原子    3391 ND2 ASN A 443    -17.888  -9.212   -14.492  1.00  50.01
原子    3392 C   ASN A 443    -19.946  -6.892   -11.972  1.00  46.93
原子    3393 O   ASN A 443    -18.878  -6.396   -11.580  1.00  47.13
原子    3394 N   SER A 444    -20.873  -7.343   -11.135  1.00  49.21
原子    3395 CA  SER A 444    -20.719  -7.201   -9.684   1.00  51.08
原子    3396 CB  SER A 444    -21.713  -8.096   -8.936   1.00  51.21
原子    3397 OG  SER A 444    -21.738  -7.735   -7.563   1.00  52.90
原子    3398 C   SER A 444    -19.291  -7.452   -9.165   1.00  51.89
原子    3399 O   SER A 444    -18.743  -6.610   -8.433   1.00  52.46
原子    3400 N   SER A 445    -18.700  -8.588   -9.558   1.00  52.45
原子    3401 CA  SER A 445    -17.400  -9.030   -9.029   1.00  52.98
原子    3402 CB  SER A 445    -17.138  -10.497  -9.385   1.00  53.12
原子    3403 OG  SER A 445    -16.901  -10.650  -10.775  1.00  54.45
原子    3404 C   SER A 445    -16.202  -8.159   -9.449   1.00  52.99
原子    3405 O   SER A 445    -15.184  -8.112   -8.738   1.00  53.28
原子    3406 N   ALA A 446    -16.328  -7.472   -10.588  1.00  52.67
原子    3407 CA  ALA A 446    -15.301  -6.536   -11.063  1.00  52.20
原子    3408 CB  ALA A 446    -15.695  -5.960   -12.425  1.00  52.45
原子    3409 C   ALA A 446    -14.996  -5.406   -10.059  1.00  51.92
原子    3410 O   ALA A 446    -14.144  -4.553   -10.322  1.00  51.77
原子    3411 N   SER A 447    -15.696  -5.413   -8.919   1.00  51.23
原子    3412 CA  SER A 447    -15.471  -4.453   -7.827   1.00  50.73
原子    3413 CB  SER A 447    -16.769  -3.706   -7.495   1.00  50.70
原子    3414 OG  SER A 447    -17.765  -4.605   -7.021   1.00  50.91
原子    3415 C   SER A 447    -14.886  -5.072   -6.537   1.00  50.31
原子    3416 O   SER A 447    -14.604  -4.345   -5.580   1.00  50.16
原子    3417 N   THR A 448    -14.704  -6.394   -6.508   1.00  49.55
原子    3418 CA  THR A 448    -14.165  -7.070   -5.314   1.00  49.05
原子    3419 CB  THR A 448    -14.579  -8.561   -5.233   1.00  49.15
原子    3420 OG1 THR A 448    -14.076  -9.255   -6.378   1.00  49.97
原子    3421 CG2 THR A 448    -16.096  -8.705   -5.180   1.00  49.11
原子    3422 C   THR A 448    -12.641  -6.958   -5.215   1.00  48.34
原子    3423 O   THR A 448    -11.911  -7.325   -6.135   1.00  47.84
原子    3424 N   ILE A 449    -12.174  -6.444   -4.084   1.00  47.93
原子    3425 CA  ILE A 449    -10.760  -6.150   -3.891   1.00  47.42
原子    3426 CB  ILE A 449    -10.577  -4.798   -3.142   1.00  47.53
原子    3427 CG1 ILE A 449    -11.346  -3.680   -3.863   1.00  46.60
原子    3428 CD1 ILE A 449    -11.727  -2.523   -2.981   1.00  45.49
原子    3429 CG2 ILE A 449    -9.097   -4.438   -2.999   1.00  46.84
原子    3430 C   ILE A 449    -10.104  -7.299   -3.124   1.00  47.45
原子    3431 O   ILE A 449    -10.606  -7.688   -2.067   1.00  47.66
原子    3432 N   PRO A 450    -8.993   -7.857   -3.663   1.00  47.28
原子    3433 CA  PRO A 450    -8.202   -8.926   -3.036   1.00  47.25
原子    3434 CB  PRO A 450    -6.982   -9.040   -3.946   1.00  47.03
原子    3435 CG  PRO A 450    -7.430   -8.535   -5.237   1.00  47.02
原子    3436 CD  PRO A 450    -8.431   -7.470   -4.969   1.00  47.07
原子    3437 C   PRO A 450    -7.731   -8.562   -1.639   1.00  47.48
原子    3438 O   PRO A 450    -7.608   -7.377   -1.322   1.00  47.43
原子    3439 N   SER A 451    -7.452   -9.587   -0.832   1.00  47.94
原子    3440 CA  SER A 451    -7.020   -9.436    0.568   1.00  48.19
原子    3441 CB  SER A 451    -7.017   -10.801   1.277   1.00  48.52
原子    3442 OG  SER A 451    -8.297   -11.414   1.235   1.00  49.64
原子    3443 C   SER A 451    -5.641   -8.799    0.701   1.00  47.83
原子    3444 O   SER A 451    -5.415   -7.963    1.575   1.00  48.39
原子    3445 N   THR A 452    -4.715   -9.212   -0.158   1.00  47.14
原子    3446 CA  THR A 452    -3.379   -8.613   -0.211   1.00  46.42
原子    3447 CB  THR A 452    -2.323   -9.540    0.434   1.00  46.66
原子    3448 OG1 THR A 452    -2.518   -10.887  -0.032   1.00  48.38
原子    3449 CG2 THR A 452    -2.446   -9.514    1.962   1.00  47.77
原子    3450 C   THR A 452    -3.011   -8.323   -1.673   1.00  44.81
原子    3451 O   THR A 452    -3.348   -9.107   -2.558   1.00  44.97
原子    3452 N   CYS A 453    -2.363   -7.187   -1.931   1.00  43.37
原子    3453 CA  CYS A 453    -1.971   -6.854   -3.306   1.00  41.40
原子    3454 CB  CYS A 453    -1.918   -5.339   -3.574   1.00  41.01
原子    3455 SG  CYS A 453    -3.187   -4.199   -2.908   1.00  40.58
原子    3456 C   CYS A 453    -0.591   -7.408   -3.602   1.00  40.33
原子    3457 O   CYS A 453     0.293   -7.370   -2.753   1.00  39.88
原子    3458 N   SER A 454    -0.405   -7.911   -4.812   1.00  39.25
原子    3459 CA  SER A 454     0.937   -8.142   -5.336   1.00  38.68
原子    3460 CB  SER A 454     1.222   -9.638   -5.484   1.00  38.56
原子    3461 OG  SER A 454     0.276   -10.251  -6.349   1.00  40.44
原子    3462 C   SER A 454     1.047   -7.450   -6.690   1.00  37.78
原子    3463 O   SER A 454     0.030   -7.187   -7.347   1.00  36.71
原子    3464 N   GLY A 455     2.275   -7.175   -7.111   1.00  37.06
原子    3465 CA  GLY A 455     2.514   -6.613   -8.431   1.00  36.79
原子    3466 C   GLY A 455     2.493   -7.658   -9.539   1.00  36.18
原子    3467 O   GLY A 455     3.410   -7.708   -10.367  1.00  36.73
原子    3468 N   ALA A 456     1.445   -8.480   -9.562   1.00  35.26
原子    3469 CA  ALA A 456     1.321   -9.584   -10.512  1.00  34.46
原子    3470 CB  ALA A 456     0.125   -10.454  -10.158  1.00  34.50
原子    3471 C   ALA A 456     1.195   -9.111   -11.963  1.00  34.16
原子    3472 O   ALA A 456     0.283   -8.353   -12.301  1.00  33.56
原子    3473 N   SER A 457     2.097   -9.588   -12.817  1.00  33.11
原子    3474 CA  SER A 457     2.013   -9.302   -14.241  1.00  32.60
原子    3475 CB  SER A 457     3.022   -8.219   -14.635  1.00  32.50
原子    3476 OG  SER A 457     4.352   -8.691   -14.519  1.00  33.28
原子    3477 C   SER A 457     2.228   -10.575  -15.044  1.00  32.31
原子    3478 O   SER A 457     2.641   -11.605  -14.494  1.00  32.32
原子    3479 N   VAL A 458     1.908   -10.511  -16.330  1.00  31.12
原子    3480 CA  VAL A 458     2.063   -11.629  -17.246  1.00  31.09
原子    3481 CB  VAL A 458     0.682   -12.199  -17.659  1.00  31.00
原子    3482 CG1 VAL A 458     0.806   -13.173  -18.830  1.00  30.72
原子    3483 CG2 VAL A 458    -0.014   -12.847  -16.459  1.00  31.08
原子    3484 C   VAL A 458     2.817   -11.144  -18.480  1.00  30.88
原子    3485 O   VAL A 458     2.401   -10.177  -19.126  1.00  29.70
原子    3486 N   VAL A 459     3.924   -11.811  -18.805  1.00  30.81
原子    3487 CA  VAL A 459     4.643   -11.525  -20.051  1.00  30.95
原子    3488 CB  VAL A 459     6.046   -12.172  -20.071  1.00  31.34
原子    3489 CG1 VAL A 459     6.664   -12.102  -21.492  1.00  30.45
原子    3490 CG2 VAL A 459     6.947   -11.522  -19.030  1.00  32.03
原子    3491 C   VAL A 459     3.805   -12.032  -21.227  1.00  31.37
原子    3492 O   VAL A 459     3.443   -13.214  -21.288  1.00  31.84
原子    3493 N   GLY A 460     3.480   -11.137  -22.154  1.00  30.71
原子    3494 CA  GLY A 460     2.596   -11.495  -23.258  1.00  30.77
原子    3495 C   GLY A 460     3.349   -11.799  -24.536  1.00  30.66
原子    3496 O   GLY A 460     4.585   -11.773  -24.582  1.00  30.90
原子    3497 N   SER A 461     2.606   -12.094  -25.584  1.00  30.44
原子    3498 CA  SER A 461     3.219   -12.227  -26.877  1.00  31.06
原子    3499 CB  SER A 461     3.301   -13.695  -27.308  1.00  31.44
原子    3500 OG  SER A 461     2.018   -14.278  -27.419  1.00  34.77
原子    3501 C   SER A 461     2.463   -11.357  -27.864  1.00  30.21
原子    3502 O   SER A 461     1.246   -11.156  -27.736  1.00  30.87
原子    3503 N   TYR A 462     3.192   -10.822  -28.836  1.00  28.84
原子    3504 CA  TYR A 462     2.651   -9.797   -29.712  1.00  28.13
原子    3505 CB  TYR A 462     3.365   -8.471   -29.426  1.00  26.74
原子    3506 CG  TYR A 462     3.264   -8.098   -27.976  1.00  25.28
原子    3507 CD1 TYR A 462     2.184   -7.335   -27.508  1.00  23.75
原子    3508 CE1 TYR A 462     2.066   -7.022   -26.162  1.00  23.41
原子    3509 CZ  TYR A 462     3.030   -7.458   -25.268  1.00  23.32
原子    3510 OH  TYR A 462     2.907   -7.155   -23.941  1.00  23.50
原子    3511 CE2 TYR A 462     4.113   -8.226   -25.698  1.00  22.57
原子    3512 CD2 TYR A 462     4.223   -8.537   -27.050  1.00  24.71
原子    3513 C   TYR A 462     2.844   -10.191  -31.152  1.00  28.83
原子    3514 O   TYR A 462     3.898   -10.697  -31.529  1.00  29.33
原子    3515 N   SER A 463     1.828   -9.973   -31.961  1.00  29.66
原子    3516 CA  SER A 463     1.970   -10.202  -33.388  1.00  30.77
原子    3517 CB  SER A 463     1.424   -11.574  -33.784  1.00  30.99
原子    3518 OG  SER A 463     0.168   -11.815  -33.192  1.00  33.22
原子    3519 C   SER A 463     1.311   -9.082   -34.170  1.00  31.28
原子    3520 O   SER A 463     0.329   -8.481   -33.723  1.00  30.40
原子    3521 N   ARG A 464     1.886   -8.789   -35.330  1.00  31.94
原子    3522 CA  ARG A 464     1.377   -7.775   -36.225  1.00  32.97
原子    3523 CB  ARG A 464     2.362   -7.620   -37.385  1.00  33.68
原子    3524 CG  ARG A 464     2.353   -6.274   -38.061  1.00  36.94
原子    3525 CD  ARG A 464     3.502   -6.206   -39.088  1.00  42.45
原子    3526 NE  ARG A 464     4.794   -6.065   -38.415  1.00  45.53
原子    3527 CZ  ARG A 464     5.416   -4.903   -38.227  1.00  47.50
原子    3528 NH1 ARG A 464     4.882   -3.775   -38.688  1.00  49.50
原子    3529 NH2 ARG A 464     6.580   -4.863   -37.592  1.00  48.59
原子    3530 C   ARG A 464    -0.017   -8.171   -36.741  1.00  33.03
原子    3531 O   ARG A 464    -0.166   -9.228   -37.358  1.00  33.00
原子    3532  N  PRO A 465    -1.053   -7.333   -36.479  1.00  32.72
原子    3533 CA  PRO A 465    -2.344   -7.593   -37.131  1.00  32.69
原子    3534 CB  PRO A 465    -3.274   -6.504   -36.558  1.00  32.50
原子    3535 CG  PRO A 465    -2.581   -5.981   -35.345  1.00  32.47
原子    3536 CD  PRO A 465    -1.102   -6.134   -35.618  1.00  32.83
原子    3537 C   PRO A 465    -2.189   -7.421   -38.642  1.00  33.30
原子    3538 O   PRO A 465    -1.332   -6.661   -39.097  1.00  33.20
原子    3539 N   THR A 466    -2.990   -8.136   -39.412  1.00  34.26
原子    3540 CA  THR A 466    -2.810   -8.131   -40.855  1.00  35.62
原子    3541 CB  THR A 466    -2.264   -9.486   -41.370  1.00  35.33
原子    3542 OG1 THR A 466    -3.225   -10.512  -41.136  1.00  36.81
原子    3543 CG2 THR A 466    -0.965   -9.848   -40.656  1.00  35.91
原子    3544 C   THR A 466    -4.076   -7.711   -41.600  1.00  36.15
原子    3545 O   THR A 466    -3.983   -7.077   -42.648  1.00  36.93
原子    3546N    ALA A 467    -5.242   -8.051   -41.048  1.00  36.82
原子    3547 CA  ALA A 467    -6.540   -7.648   -41.609  1.00  37.30
原子    3548 CB  ALA A 467    -7.663   -8.403   -40.930  1.00  37.04
原子    3549 C   ALA A 467    -6.767   -6.136   -41.509  1.00  38.13
原子    3550 O   ALA A 467    -6.715   -5.556   -40.417  1.00  37.96
原子    3551 N   THR A 468    -7.011   -5.502   -42.653  1.00  38.66
原子    3552 CA  THR A 468    -7.146   -4.050   -42.702  1.00  39.18
原子    3553 CB  THR A 468    -5.970   -3.406   -43.428  1.00  39.43
原子    3554 OG1 THR A 468    -5.955   -3.879   -44.778  1.00  40.06
原子    3555 CG2 THR A 468    -4.637   -3.717   -42.734  1.00  39.67
原子    3556 C   THR A 468    -8.405   -3.591   -43.427  1.00  39.33
原子    3557 O   THR A 468    -8.468   -2.451   -43.890  1.00  39.79
原子    3558 N   SER A 469    -9.403   -4.457   -43.529  1.00  39.12
原子    3559 CA  SER A 469    -10.651  -4.065   -44.176  1.00  39.41
原子    3560 CB  SER A 469    -10.624  -4.369   -45.684  1.00  39.77
原子    3561 OG  SER A 469    -10.476  -5.763   -45.916  1.00  41.02
原子    3562 C   SER A 469    -11.850  -4.732   -43.537  1.00  38.54
原子    3563 O   SER A 469    -11.771  -5.856   -43.046  1.00  38.85
原子    3564 N   PHE A 470    -12.962  -4.014   -43.558  1.00  38.00
原子    3565 CA  PHE A 470    -14.216  -4.507   -43.031  1.00  37.29
原子    3566 CB  PHE A 470    -14.880  -3.406   -42.220  1.00  36.87
原子    3567 CG  PHE A 470    -14.277  -3.212   -40.865  1.00  35.43
原子    3568 CD1 PHE A 470    -13.146  -2.428   -40.696  1.00  35.15
原子    3569 CE1 PHE A 470    -12.589  -2.252   -39.437  1.00  33.73
原子    3570 CZ  PHE A 470    -13.159  -2.852   -38.332  1.00  35.04
原子    3571 CE2 PHE A 470    -14.292  -3.638   -38.479  1.00  36.26
原子    3572 CD2 PHE A 470    -14.844  -3.816   -39.751  1.00  35.71
原子    3573 C   PHE A 470    -15.128  -4.923   -44.181  1.00  37.34
原子    3574 O   PHE A 470    -15.059  -4.337   -45.258  1.00  37.21
原子    3575 N   PRO A 471    -15.987  -5.931   -43.959  1.00  37.46
原子    3576 CA  PRO A 471    -16.983  -6.243   -44.985  1.00  38.04
原子    3577 CB  PRO A 471    -17.790  -7.383   -44.361  1.00  37.60
原子    3578 CG  PRO A 471    -16.877  -7.986   -43.337  1.00  38.09
原子    3579 CD  PRO A 471    -16.093  -6.828   -42.795  1.00  37.31
原子    3580 C   PRO A 471    -17.879  -5.033   -45.231  1.00  38.96
原子    3581 O   PRO A 471    -18.108  -4.245   -44.306  1.00  38.78
原子    3582 N   PRO A 472    -18.378  -4.869   -46.471  1.00  39.78
原子    3583 CA  PRO A 472    -19.238  -3.723   -46.771  1.00  39.87
原子    3584 CB  PRO A 472    -19.378  -3.780   -48.293  1.00  40.09
原子    3585 CG  PRO A 472    -19.171  -5.225   -48.635  1.00  40.28
原子    3586 CD  PRO A 472    -18.171  -5.740   -47.649  1.00  40.02
原子    3587 C   PRO A 472    -20.604  -3.864   -46.114  1.00  39.75
原子    3588 O   PRO A 472    -21.017  -4.980   -45.798  1.00  40.10
原子    3589 N   SER A 473    -21.268  -2.734   -45.881  1.00  39.71
原子    3590 CA  SER A 473    -22.675  -2.696   -45.467  1.00  39.61
原子    3591 CB  SER A 473    -23.571  -3.070   -46.651  1.00  40.16
原子    3592 OG  SER A 473    -23.468  -2.074   -47.658  1.00  42.55
原子    3593 C   SER A 473    -23.043  -3.509   -44.221  1.00  38.94
原子    3594 O   SER A 473    -24.041  -4.258   -44.210  1.00  39.07
原子    3595 N   GLN A 474    -22.257  -3.340   -43.159  1.00  37.75
原子    3596 CA  GLN A 474    -22.558  -3.993   -41.888  1.00  36.60
原子    3597 CB  GLN A 474    -21.291  -4.205   -41.057  1.00  36.41
原子    3598 CG  GLN A 474    -20.331  -5.169   -41.732  1.00  36.24
原子    3599 CD  GLN A 474    -19.295  -5.757   -40.795  1.00  36.45
原子    3600 OE1 GLN A 474    -18.478  -5.040   -40.211  1.00  35.30
原子    3601 NE2 GLN A 474    -19.304  -7.077   -40.671  1.00  36.85
原子    3602 C   GLN A 474    -23.620  -3.191   -41.149  1.00  36.40
原子    3603 O   GLN A 474    -23.329  -2.444   -40.208  1.00  35.99
原子    3604 N   THR A 475    -24.859  -3.350   -41.616  1.00  35.59
原子    3605 CA  THR A 475    -26.012  -2.595   -41.148  1.00  35.20
原子    3606 CB  THR A 475    -27.051  -2.478   -42.287  1.00  35.73
原子    3607 OG1 THR A 475    -27.120  -3.737   -42.959  1.00  36.85
原子    3608 CG2 THR A 475    -26.642  -1.418   -43.310  1.00  34.51
原子    3609 C   THR A 475    -26.635  -3.256   -39.910  1.00  35.16
原子    3610 O   THR A 475    -26.363  -4.420   -39.622  1.00  34.47
原子    3611 N   PRO A 476    -27.453  -2.510   -39.148  1.00  35.36
原子    3612 CA  PRO A 476    -27.990  -3.111   -37.923  1.00  36.40
原子    3613 CB  PRO A 476    -28.567  -1.910   -37.167  1.00  36.04
原子    3614 CG  PRO A 476    -28.890  -0.912   -38.230  1.00  35.98
原子    3615 CD  PRO A 476    -27.907  -1.119   -39.339  1.00  35.70
原子    3616 C   PRO A 476    -29.085  -4.171   -38.158  1.00  37.45
原子    3617 O   PRO A 476    -29.654  -4.244   -39.254  1.00  36.95
原子    3618 N   LYS A 477    -29.342  -4.984   -37.133  1.00  39.01
原子    3619 CA  LYS A 477    -30.472  -5.911   -37.111  1.00  41.20
原子    3620 CB  LYS A 477    -30.541  -6.641   -35.774  1.00  41.46
原子    3621 CG  LYS A 477    -29.665  -7.850   -35.604  1.00  41.87
原子    3622 CD  LYS A 477    -29.939  -8.517   -34.237  1.00  42.36
原子    3623 CE  LYS A 477    -29.996  -7.497   -33.076  1.00  44.55
原子    3624 NZ  LYS A 477    -29.705  -8.110   -31.718  1.00  44.56
原子    3625 C   LYS A 477    -31.766  -5.118   -37.230  1.00  42.27
原子    3626 O   LYS A 477    -31.818  -3.960   -36.798  1.00  42.18
原子    3627 N   PRO A 478    -32.831  -5.743   -37.780  1.00  43.46
原子    3628 CA  PRO A 478    -34.150  -5.106   -37.669  1.00  44.02
原子    3629 CB  PRO A 478    -35.106  -6.144   -38.267  1.00  43.89
原子    3630 CG  PRO A 478    -34.255  -7.033   -39.105  1.00  44.08
原子    3631 CD  PRO A 478    -32.885  -7.034   -38.493  1.00  43.41
原子    3632 C   PRO A 478    -34.480  -4.892   -36.194  1.00  44.52
原子    3633 O   PRO A 478    -34.197  -5.769   -35.364  1.00  44.73
原子    3634 N   GLY A 479    -35.043  -3.728   -35.874  1.00  45.20
原子    3635 CA  GLY A 479    -35.421  -3.395   -34.494  1.00  45.90
原子    3636 C   GLY A 479    -34.386  -2.601   -33.711  1.00  46.37
原子    3637 O   GLY A 479    -34.576  -2.331   -32.520  1.00  46.98
原子    3638 N   VAL A 480    -33.282  -2.244   -34.367  1.00  46.28
原子    3639 CA  VAL A 480    -32.261  -1.383   -33.760  1.00  46.15
原子    3640 CB  VAL A 480    -30.820  -1.863   -34.121  1.00  46.20
原子    3641 CG1 VAL A 480    -29.755  -0.899   -33.584  1.00  45.85
原子    3642 CG2 VAL A 480    -30.569  -3.281   -33.603  1.00  46.25
原子    3643 C   VAL A 480    -32.498   0.046   -34.260  1.00  45.93
原子    3644 O   VAL A 480    -32.673   0.240   -35.465  1.00  46.15
原子    3645 N   PRO A 481    -32.534   1.049   -33.344  1.00  45.70
原子    3646 CA  PRO A 481    -32.648   2.443   -33.804  1.00  45.36
原子    3647 CB  PRO A 481    -32.388   3.266   -32.542  1.00  45.39
原子    3648 CG  PRO A 481    -32.778   2.375   -31.427  1.00  45.52
原子    3649 CD  PRO A 481    -32.481   0.962   -31.873  1.00  45.83
原子    3650 C   PRO A 481    -31.609   2.762   -34.877  1.00  45.08
原子    3651 O   PRO A 481    -30.405   2.555   -34.681  1.00  44.45
原子    3652 N   SER A 482    -32.100   3.241   -36.011  1.00  44.83
原子    3653 CA  SER A 482    -31.281   3.485   -37.180  1.00  44.52
原子    3654 CB  SER A 482    -31.502   2.375   -38.211  1.00  44.74
原子    3655 OG  SER A 482    -30.769   2.622   -39.399  1.00  45.89
原子    3656 C   SER A 482    -31.661   4.836   -37.765  1.00  43.84
原子    3657 O   SER A 482    -32.836   5.219   -37.741  1.00  44.07
原子    3658 N   GLY A 483    -30.667   5.550   -38.282  1.00  42.68
原子    3659 CA  GLY A 483    -30.872   6.872   -38.853  1.00  41.64
原子    3660 C   GLY A 483    -30.085   7.095   -40.130  1.00  41.05
原子    3661 O   GLY A 483    -29.430   6.179   -40.647  1.00  41.09
原子    3662 N   THR A 484    -30.155   8.317   -40.647  1.00  40.22
原子    3663 CA  THR A 484    -29.461   8.677   -41.888  1.00  39.91
原子    3664 CB  THR A 484    -30.148   9.876   -42.619  1.00  40.21
原子    3665 OG1 THR A 484    -30.115   11.040  -41.780  1.00  41.48
原子    3666 CG2 THR A 484    -31.604   9.541   -43.000  1.00  40.86
原子    3667 C   THR A 484    -27.995   9.033   -41.603  1.00  38.43
原子    3668 O   THR A 484    -27.669   9.421   -40.483  1.00  38.52
原子    3669 N   PRO A 485    -27.109   8.893   -42.612  1.00  37.36
原子    3670 CA  PRO A 485    -25.695   9.226   -42.413  1.00  36.29
原子    3671 CB  PRO A 485    -25.077   8.974   -43.795  1.00  36.75
原子    3672 CG  PRO A 485    -25.997   7.985   -44.442  1.00  37.04
原子    3673 CD  PRO A 485    -27.359   8.393   -43.976  1.00  37.30
原子    3674 C   PRO A 485    -25.460   10.684  -41.988  1.00  35.20
原子    3675 O   PRO A 485    -26.201   11.599  -42.396  1.00  34.39
原子    3676 N   TYR A 486    -24.428   10.887  -41.174  1.00  33.60
原子    3677 CA  TYR A 486    -24.025   12.233  -40.782  1.00  32.74
原子    3678 CB  TYR A 486    -22.821   12.180  -39.826  1.00  32.31
原子    3679 CG  TYR A 486    -22.348   13.564  -39.452  1.00  32.79
原子    3680 CD1 TYR A 486    -21.243   14.146  -40.083  1.00  31.74
原子    3681 CE1 TYR A 486    -20.827   15.430  -39.742  1.00  30.85
原子    3682 CZ  TYR A 486    -21.527   16.141  -38.778  1.00  31.99
原子    3683 OH  TYR A 486    -21.143   17.423  -38.427  1.00  32.20
原子    3684 CE2 TYR A 486    -22.629   15.588  -38.160  1.00  31.88
原子    3685 CD2 TYR A 486    -23.036   14.311  -38.500  1.00  32.49
原子    3686 C   TYR A 486    -23.652   13.082  -41.999  1.00  31.99
原子    3687 O   TYR A 486    -22.949   12.602  -42.900  1.00  31.62
原子    3688 N   THR A 487    -24.106   14.336  -42.004  1.00  31.14
原子    3689 CA  THR A 487    -23.676   15.336  -42.986  1.00  31.43
原子    3690 CB  THR A 487    -24.879   15.785  -43.869  1.00  31.94
原子    3691 OG1 THR A 487    -25.321   14.665  -44.644  1.00  35.19
原子    3692 CG2 THR A 487    -24.489   16.904  -44.810  1.00  32.95
原子    3693 C   THR A 487    -23.110   16.561  -42.261  1.00  29.79
原子    3694 O   THR A 487    -23.761   17.078  -41.363  1.00  29.20
原子    3695 N   PRO A 488    -21.901   17.027  -42.644  1.00  29.20
原子    3696 CA  PRO A 488    -21.309   18.228  -42.005  1.00  28.77
原子    3697 CB  PRO A 488    -19.988   18.435  -42.763  1.00  28.75
原子    3698 CG  PRO A 488    -19.684   17.126  -43.408  1.00  29.52
原子    3699 CD  PRO A 488    -21.010   16.448  -43.667  1.00  29.41
原子    3700 C   PRO A 488    -22.175   19.463  -42.194  1.00  28.44
原子    3701 O   PRO A 488    -23.003   19.499  -43.116  1.00  28.51
原子    3702 N   LEU A 489    -21.971   20.469  -41.345  1.00  27.28
原子    3703 CA  LEU A 489    -22.606   21.775  -41.522  1.00  26.52
原子    3704 CB  LEU A 489    -22.269   22.708  -40.365  1.00  27.19
原子    3705 CG  LEU A 489    -22.805   22.303  -38.987  1.00  27.53
原子    3706 CD1 LEU A 489    -22.233   23.242  -37.929  1.00  26.81
原子    3707 CD2 LEU A 489    -24.332   22.323  -38.970  1.00  28.98
原子    3708 C   LEU A 489    -22.137   22.402  -42.833  1.00  26.65
原子    3709 O   LEU A 489    -20.983   22.210  -43.245  1.00  25.40
原子    3710 N   PRO A 490    -23.030   23.153  -43.503  1.00  26.84
原子    3711 CA  PRO A 490    -22.636   23.745  -44.786  1.00  26.44
原子    3712 CB  PRO A 490    -23.983   24.107  -45.432  1.00  27.00
原子    3713 CG  PRO A 490    -24.900   24.341  -44.289  1.00  27.68
原子    3714 CD  PRO A 490    -24.425   23.475  -43.137  1.00  26.91
原子    3715 C   PRO A 490    -21.737   24.982  -44.668  1.00  26.22
原子    3716 O   PRO A 490    -21.826   25.729  -43.698  1.00  25.74
原子    3717 N   CYS A 491    -20.858   25.182  -45.650  1.00  26.06
原子    3718 CA  CYS A 491    -20.079   26.412  -45.754  1.00  26.88
原子    3719 CB  CYS A 491    -18.630   26.194  -45.302  1.00  27.00
原子    3720 SG  CYS A 491    -18.450   25.196  -43.819  1.00  27.23
原子    3721 C   CYS A 491    -20.032   26.822  -47.217  1.00  27.27
原子    3722 O   CYS A 491    -20.369   26.026  -48.083  1.00  27.34
原子    3723 N   ALA A 492    -19.577   28.045  -47.484  1.00  28.05
原子    3724 CA  ALA A 492    -19.205   28.449  -48.845  1.00  29.40
原子    3725 CB  ALA A 492    -18.837   29.928  -48.866  1.00  29.49
原子    3726 C   ALA A 492    -18.023   27.599  -49.320  1.00  30.37
原子    3727 O   ALA A 492    -17.310   26.998  -48.497  1.00  30.36
原子    3728 N   THR A 493    -17.828   27.508  -50.633  1.00  31.27
原子    3729 CA  THR A 493    -16.612   26.883  -51.163  1.00  32.43
原子    3730 CB  THR A 493    -16.845   26.234  -52.533  1.00  33.22
原子    3731 OG1 THR A 493    -17.944   25.324  -52.431  1.00  38.55
原子    3732 CG2 THR A 493    -15.590   25.464  -52.996  1.00  33.71
原子    3733 C   THR A 493    -15.596   28.006  -51.254  1.00  31.35
原子    3734 O   THR A 493    -15.916   29.068  -51.795  1.00  31.58
原子    3735 N   PRO A 494    -14.390   27.815  -50.682  1.00  30.44
原子    3736 CA  PRO A 494    -13.464   28.947  -50.696  1.00  30.01
原子    3737 CB  PRO A 494    -12.414   28.555  -49.645  1.00  30.26
原子    3738 CG  PRO A 494    -12.416   27.077  -49.658  1.00  30.56
原子    3739 CD  PRO A 494    -13.815   26.635  -49.997  1.00  30.85
原子    3740 C   PRO A 494    -12.809   29.089  -52.060  1.00  28.81
原子    3741 O   PRO A 494    -12.801   28.137  -52.834  1.00  28.82
原子    3742 N   THR A 495    -12.260   30.258  -52.352  1.00  28.43
原子    3743 CA  THR A 495    -11.551   30.419  -53.623  1.00  28.44
原子    3744 CB  THR A 495    -11.885   31.748  -54.319  1.00  28.68
原子    3745 OG1 THR A 495    -11.449   32.839  -53.500  1.00  30.39
原子    3746 CG2 THR A 495    -13.383   31.858  -54.564  1.00  29.85
原子    3747 C   THR A 495    -10.057   30.335  -53.404  1.00  27.94
原子    3748 O   THR A 495    -9.289    30.159  -54.352  1.00  27.63
原子    3749 N   SER A 496    -9.671    30.463  -52.139  1.00  27.51
原子    3750 CA  SER A 496    -8.279    30.492  -51.722  1.00  27.18
原子    3751 CB  SER A 496    -7.928    31.916  -51.329  1.00  27.72
原子    3752 OG  SER A 496    -6.531    32.076  -51.240  1.00  32.60
原子    3753 C   SER A 496    -8.134    29.583  -50.501  1.00  25.85
原子    3754 O   SER A 496    -9.024    29.548  -49.634  1.00  25.10
原子    3755 N   VAL A 497    -7.039    28.824  -50.430  1.00  24.43
原子    3756 CA  VAL A 497    -6.801    28.032  -49.209  1.00  22.17
原子    3757 CB  VAL A 497    -7.281    26.511  -49.290  1.00  23.00
原子    3758 CG1 VAL A 497    -6.224    25.445  -48.881  1.00  22.48
原子    3759 CG2 VAL A 497    -8.049    26.161  -50.578  1.00  22.62
原子    3760 C   VAL A 497    -5.388    28.251  -48.672  1.00  21.13
原子    3761 O   VAL A 497    -4.419    28.359  -49.439  1.00  20.38
原子    3762 N   ALA A 498    -5.302    28.395  -47.355  1.00  19.70
原子    3763 CA  ALA A 498    -4.020    28.576  -46.702  1.00  18.92
原子    3764 CB  ALA A 498    -4.226    29.126  -45.290  1.00  19.31
原子    3765 C   ALA A 498    -3.396    27.185  -46.655  1.00  18.67
原子    3766 O   ALA A 498    -3.966    26.266  -46.047  1.00  19.29
原子    3767 N   VAL A 499    -2.252    27.021  -47.319  1.00  17.23
原子    3768 CA  VAL A 499    -1.551    25.735  -47.361  1.00  16.09
原子    3769 CB  VAL A 499    -1.165    25.347  -48.814  1.00  16.97
原子    3770 CG1 VAL A 499    -0.403    23.984  -48.863  1.00  16.08
原子    3771 CG2 VAL A 499    -2.413    25.291  -49.696  1.00  17.03
原子    3772 C   VAL A 499    -0.306    25.841  -46.491  1.00  15.95
原子    3773 O   VAL A 499     0.604    26.607  -46.791  1.00  16.15
原子    3774 N   THR A 500    -0.279    25.085  -45.404  1.00  15.16
原子    3775 CA  THR A 500     0.863    25.116  -44.505  1.00  14.85
原子    3776 CB  THR A 500     0.415    24.916  -43.035  1.00  14.76
原子    3777 OG1 THR A 500    -0.403    26.022  -42.635  1.00  16.00
原子    3778 CG2 THR A 500     1.639    24.856  -42.136  1.00  15.39
原子    3779 C   THR A 500     1.796    23.993  -44.932  1.00  14.99
原子    3780 O   THR A 500     1.480    22.804  -44.792  1.00  14.81
原子    3781 N   PHE A 501     2.941    24.370  -45.481  1.00  14.71
原子    3782 CA  PHE A 501     3.981    23.411  -45.793  1.00  15.64
原子    3783 CB  PHE A 501     4.943    23.964  -46.832  1.00  15.86
原子    3784 CG  PHE A 501     4.289    24.172  -48.168  1.00  18.38
原子    3785 CD1 PHE A 501     3.676    25.388  -48.469  1.00  19.85
原子    3786 CE1 PHE A 501     3.052    25.581  -49.709  1.00  21.58
原子    3787 CZ  PHE A 501     3.015    24.547  -50.642  1.00  19.80
原子    3788 CE2 PHE A 501     3.607    23.324  -50.356  1.00  21.69
原子    3789 CD2 PHE A 501     4.231    23.134  -49.095  1.00  21.96
原子    3790 C   PHE A 501     4.711    23.009  -44.536  1.00  15.81
原子    3791 O   PHE A 501     5.207    23.852  -43.804  1.00  16.78
原子    3792 N   HIS A 502     4.789    21.698  -44.317  1.00  14.85
原子    3793 CA  HIS A 502     5.239    21.175  -43.027  1.00  14.17
原子    3794 CB  HIS A 502     3.987    20.565  -42.356  1.00  14.85
原子    3795 CG  HIS A 502     4.221    19.875  -41.054  1.00  13.69
原子    3796 ND1 HIS A 502     4.819    18.637  -40.966  1.00  12.55
原子    3797 CE1 HIS A 502     4.816    18.241  -39.702  1.00  15.76
原子    3798 NE2 HIS A 502     4.191    19.155  -38.980  1.00  14.42
原子    3799 CD2 HIS A 502     3.797    20.183  -39.804  1.00  14.92
原子    3800 C   HIS A 502     6.317    20.161  -43.412  1.00  14.16
原子    3801 O   HIS A 502     6.013    19.043  -43.824  1.00  13.85
原子    3802 N   GLU A 503     7.577    20.590  -43.352  1.00  13.63
原子    3803 CA  GLU A 503     8.678    19.821  -43.968  1.00  14.46
原子    3804 CB  GLU A 503     9.434    20.712  -44.996  1.00  14.22
原子    3805 CG  GLU A 503     10.782   20.121  -45.524  1.00  16.31
原子    3806 CD  GLU A 503     10.620   18.973  -46.539  1.00  21.32
原子    3807 OE1 GLU A 503     11.523   18.819  -47.393  1.00  21.21
原子    3808 OE2 GLU A 503     9.609    18.230  -46.510  1.00  20.10
原子    3809 C   GLU A 503     9.657    19.322  -42.917  1.00  14.22
原子    3810 O   GLU A 503     10.175   20.121  -42.131  1.00  15.31
原子    3811 N   LEU A 504     9.960    18.027  -42.927  1.00  14.92
原子    3812 CA  LEU A 504     11.026   17.518  -42.052  1.00  15.49
原子    3813 CB  LEU A 504     10.658   16.147  -41.489  1.00  16.33
原子    3814 CG  LEU A 504     9.479    16.178  -40.498  1.00  17.19
原子    3815 CD1 LEU A 504     8.922    14.753  -40.320  1.00  19.08
原子    3816 CD2 LEU A 504     9.953    16.723  -39.198  1.00  17.28
原子    3817 C   LEU A 504     12.318   17.428  -42.846  1.00  16.59
原子    3818 O   LEU A 504     12.403   16.656  -43.785  1.00  16.72
原子    3819 N   VAL A 505     13.317   18.201  -42.444  1.00  17.20
原子    3820 CA  VAL A 505     14.592   18.235  -43.154  1.00  19.16
原子    3821 CB  VAL A 505     14.548   19.141  -44.418  1.00  18.88
原子    3822 CG1 VAL A 505     14.028   20.539  -44.090  1.00  19.28
原子    3823 CG2 VAL A 505     15.948   19.219  -45.095  1.00  21.65
原子    3824 C   VAL A 505     15.674   18.705  -42.188  1.00  20.00
原子    3825 O   VAL A 505     15.595   19.785  -41.595  1.00  19.92
原子    3826 N   SER A 506     16.685   17.868  -42.011  1.00  21.73
原子    3827 CA  SER A 506     17.761   18.216  -41.104  1.00  23.33
原子    3828 CB  SER A 506     18.570   16.974  -40.771  1.00  23.74
原子    3829 OG  SER A 506     19.583   17.320  -39.847  1.00  28.30
原子    3830 C   SER A 506     18.646   19.284  -41.759  1.00  23.03
原子    3831 O   SER A 506     19.070   19.139  -42.908  1.00  23.20
原子    3832 N   THR A 507     18.888   20.371  -41.049  1.00  24.01
原子    3833 CA  THR A 507     19.685   21.464  -41.600  1.00  25.15
原子    3834 CB  THR A 507     18.845   22.725  -41.833  1.00  25.01
原子    3835 OG1 THR A 507     18.104   23.015  -40.650  1.00  24.43
原子    3836 CG2 THR A 507     17.891   22.536  -43.000  1.00  24.71
原子    3837 C   THR A 507     20.795   21.812  -40.623  1.00  27.09
原子    3838 O   THR A 507     20.729   21.448  -39.451  1.00  26.15
原子    3839 N   GLN A 508     21.798   22.536  -41.113  1.00  29.34
原子    3840 CA  GLN A 508     22.912   22.986  -40.272  1.00  32.54
原子    3841 CB  GLN A 508     24.239   22.542  -40.897  1.00  32.54
原子    3842 CG  GLN A 508     24.369   21.010  -40.972  1.00  34.32
原子    3843 CD  GLN A 508     25.400   20.515  -41.991  1.00  36.23
原子    3844 OE1 GLN A 508     26.283   19.700  -41.660  1.00  41.79
原子    3845 NE2 GLN A 508     25.279   20.977  -43.242  1.00  40.42
原子    3846 C   GLN A 508     22.827   24.502  -40.100  1.00  33.06
原子    3847 O   GLN A 508     22.136   25.178  -40.873  1.00  32.49
原子    3848 N   PHE A 509     23.494   25.037  -39.075  1.00  33.80
原子    3849 CA  PHE A 509     23.432   26.476  -38.782  1.00  35.03
原子    3850 CB  PHE A 509     24.413   26.837  -37.651  1.00  36.75
原子    3851 CG  PHE A 509     24.481   28.315  -37.340  1.00  39.07
原子    3852 CD1 PHE A 509     23.592   28.893  -36.428  1.00  41.58
原子    3853 CE1 PHE A 509     23.642   30.265  -36.140  1.00  42.61
原子    3854 CZ  PHE A 509     24.603   31.073  -36.766  1.00  41.78
原子    3855 CE2 PHE A 509     25.507   30.503  -37.678  1.00  42.48
原子    3856 CD2 PHE A 509     25.441   29.127  -37.955  1.00  41.46
原子    3857 C   PHE A 509     23.712   27.311  -40.040  1.00  34.58
原子    3858 O   PHE A 509     24.614   26.990  -40.815  1.00  34.58
原子    3859 N   GLY A 510     22.912   28.355  -40.256  1.00  33.85
原子    3860 CA  GLY A 510     23.101   29.241  -41.407  1.00  33.22
原子    3861 C   GLY A 510     22.352   28.826  -42.671  1.00  32.36
原子    3862 O   GLY A 510     22.369   29.545  -43.679  1.00  32.97
原子    3863 N   GLN A 511     21.705   27.663  -42.628  1.00  30.50
原子    3864 CA  GLN A 511     20.885   27.217  -43.745  1.00  29.02
原子    3865 CB  GLN A 511     21.026   25.712  -43.931  1.00  28.92
原子    3866 CG  GLN A 511     22.436   25.276  -44.349  1.00  29.91
原子    3867 CD  GLN A 511     22.571   23.776  -44.439  1.00  31.36
原子    3868 OE1 GLN A 511     21.760   23.036  -43.879  1.00  31.69
原子    3869 NE2 GLN A 511     23.590   23.309  -45.160  1.00  30.72
原子    3870 C   GLN A 511     19.418   27.619  -43.543  1.00  27.82
原子    3871 O   GLN A 511     18.928   27.695  -42.399  1.00  27.36
原子    3872 N   THR A 512     18.727   27.895  -44.650  1.00  25.92
原子    3873 CA  THR A 512     17.305   28.271  -44.613  1.00  24.51
原子    3874 CB  THR A 512     17.126   29.763  -44.994  1.00  24.95
原子    3875 OG1 THR A 512     17.769   30.580  -44.004  1.00  27.43
原子    3876 CG2 THR A 512     15.653   30.151  -45.069  1.00  25.94
原子    3877 C   THR A 512     16.536   27.384  -45.600  1.00  23.09
原子    3878 O   THR A 512     16.994   27.152  -46.717  1.00  22.75
原子    3879 N   VAL A 513     15.376   26.877  -45.200  1.00  20.62
原子    3880 CA  VAL A 513     14.593   26.074  -46.136  1.00  19.05
原子    3881 CB  VAL A 513     13.946   24.855  -45.428  1.00  19.18
原子    3882 CG1 VAL A 513     13.041   24.064  -46.397  1.00  18.87
原子    3883 CG2 VAL A 513     15.042   23.938  -44.895  1.00  20.56
原子    3884 C   VAL A 513     13.536   26.979  -46.748  1.00  17.98
原子    3885 O   VAL A 513     12.910   27.768  -46.029  1.00  16.65
原子    3886 N   LYS A 514     13.346   26.857  -48.063  1.00  17.91
原子    3887 CA  LYS A 514     12.279   27.583  -48.757  1.00  18.14
原子    3888 CB  LYS A 514     12.845   28.712  -49.638  1.00  17.66
原子    3889 CG  LYS A 514     13.867   29.576  -48.945  1.00  19.26
原子    3890 CD  LYS A 514     14.197   30.839  -49.765  1.00  21.27
原子    3891 CE  LYS A 514     15.224   31.675  -49.001  1.00  26.06
原子    3892 NZ  LYS A 514     15.461   33.022  -49.626  1.00  28.70
原子    3893 C   LYS A 514     11.494   26.621  -49.625  1.00  18.22
原子    3894 O   LYS A 514     11.949   25.502  -49.912  1.00  18.39
原子    3895 N   VAL A 515     10.304   27.037  -50.045  1.00  18.20
原子    3896 CA  VAL A 515     9.546    26.212  -50.980  1.00  19.00
原子    3897 CB  VAL A 515     8.198    25.731  -50.404  1.00  20.00
原子    3898 CG1 VAL A 515     7.403    26.904  -49.879  1.00  21.01
原子    3899 CG2 VAL A 515     7.417    24.903  -51.447  1.00  20.10
原子    3900 C   VAL A 515     9.421    26.973  -52.302  1.00  18.89
原子    3901 O   VAL A 515     9.079    28.159  -52.317  1.00  18.67
原子    3902 N   ALA A 516     9.781    26.295  -53.390  1.00  19.87
原子    3903 CA  ALA A 516     9.796    26.898  -54.732  1.00  20.38
原子    3904 CB  ALA A 516     11.177   26.768  -55.356  1.00  20.58
原子    3905 C   ALA A 516     8.789    26.110  -55.525  1.00  20.65
原子    3906 O   ALA A 516     8.638    24.910  -55.303  1.00  20.40
原子    3907 N   GLY A 517     8.075    26.765  -56.430  1.00  20.80
原子    3908 CA  GLY A 517     7.092    26.039  -57.214  1.00  22.32
原子    3909 C   GLY A 517     6.536    26.853  -58.352  1.00  22.86
原子    3910 O   GLY A 517     6.902    28.024  -58.527  1.00  22.58
原子    3911 N   ASN A 518     5.642    26.233  -59.116  1.00  24.66
原子    3912 CA  ASN A 518     5.201    26.817  -60.390  1.00  26.74
原子    3913 CB  ASN A 518     4.670    25.754  -61.354  1.00  26.97
原子    3914 CG  ASN A 518     3.386    25.117  -60.872  1.00  31.69
原子    3915 OD1 ASN A 518     3.004    25.226  -59.677  1.00  28.89
原子    3916 ND2 ASN A 518     2.707    24.419  -61.786  1.00  31.65
原子    3917 C   ASN A 518     4.199    27.937  -60.232  1.00  27.20
原子    3918 O   ASN A 518     4.154    28.822  -61.079  1.00  28.68
原子    3919 N   ALA A 519     3.399    27.907  -59.163  1.00  27.04
原子    3920 CA  ALA A 519     2.424    28.978  -58.898  1.00  26.47
原子    3921 CB  ALA A 519     1.473    28.598  -57.747  1.00  27.02
原子    3922 C   ALA A 519     3.090    30.322  -58.629  1.00  26.35
原子    3923 O   ALA A 519     4.226    30.394  -58.135  1.00  25.27
原子    3924 N   ALA A 520     2.369    31.394  -58.954  1.00  26.25
原子    3925 CA  ALA A 520     2.887    32.741  -58.784  1.00  26.77
原子    3926 CB  ALA A 520     1.872    33.775  -59.298  1.00  27.50
原子    3927 C   ALA A 520     3.250    33.004  -57.317  1.00  26.68
原子    3928 O   ALA A 520     4.301    33.560  -57.030  1.00  26.01
原子    3929 N   ALA A 521     2.395    32.548  -56.399  1.00  26.75
原子    3930 CA  ALA A 521     2.628    32.712  -54.963  1.00  26.82
原子    3931 CB  ALA A 521     1.395    32.251  -54.167  1.00  26.85
原子    3932 C   ALA A 521     3.876    31.950  -54.504  1.00  26.51
原子    3933 O   ALA A 521     4.485    32.305  -53.494  1.00  26.63
原子    3934 N   LEU A 522     4.261    30.919  -55.259  1.00  26.79
原子    3935 CA  LEU A 522     5.452    30.113  -54.932  1.00  26.50
原子    3936 CB  LEU A 522     5.185    28.626  -55.155  1.00  26.64
原子    3937 CG  LEU A 522     4.224    27.946  -54.169  1.00  26.58
原子    3938 CD1 LEU A 522     4.049    26.489  -54.533  1.00  27.59
原子    3939 CD2 LEU A 522     4.718    28.092  -52.730  1.00  28.08
原子    3940 C   LEU A 522     6.696    30.559  -55.709  1.00  26.54
原子    3941 O   LEU A 522     7.779    29.987  -55.547  1.00  25.56
原子    3942 N   GLY A 523     6.518    31.575  -56.552  1.00  26.25
原子    3943 CA  GLY A 523     7.637    32.267  -57.199  1.00  26.16
原子    3944 C   GLY A 523     7.996    31.809  -58.607  1.00  26.84
原子    3945 O   GLY A 523     9.029    32.227  -59.152  1.00  25.81
原子    3946 N   ASN A 524     7.162    30.946  -59.193  1.00  27.13
原子    3947 CA  ASN A 524     7.413    30.419  -60.539  1.00  27.74
原子    3948 CB  ASN A 524     7.046    31.484  -61.591  1.00  28.43
原子    3949 CG  ASN A 524     7.123    30.960  -63.015  1.00  30.79
原子    3950 OD1 ASN A 524     6.856    29.780  -63.285  1.00  30.80
原子    3951 ND2 ASN A 524     7.515    31.838  -63.936  1.00  33.61
原子    3952 C   ASN A 524     8.845    29.857  -60.710  1.00  28.44
原子    3953 O   ASN A 524     9.531    30.104  -61.720  1.00  27.82
原子    3954 N   TRP A 525     9.280    29.111  -59.693  1.00  27.99
原子    3955 CA  TRP A 525     10.573   28.398  -59.659  1.00  28.92
原子    3956 CB  TRP A 525     10.787   27.507  -60.896  1.00  28.31
原子    3957 CG  TRP A 525     9.803    26.394  -61.060  1.00  27.68
原子    3958 CD1 TRP A 525     8.902    26.247  -62.078  1.00  27.96
原子    3959 NE1 TRP A 525     8.166    25.106  -61.907  1.00  27.55
原子    3960 CE2 TRP A 525     8.589    24.471  -60.762  1.00  30.58
原子    3961 CD2 TRP A 525     9.609    25.277  -60.184  1.00  27.84
原子    3962 CE3 TRP A 525     10.230   24.842  -59.001  1.00  26.50
原子    3963 CZ3 TRP A 525     9.787    23.655  -58.411  1.00  27.55
原子    3964 CH2 TRP A 525     8.752    22.889  -58.998  1.00  27.90
原子    3965 CZ2 TRP A 525     8.144    23.279  -60.168  1.00  26.22
原子    3966 C   TRP A 525     11.790   29.301  -59.452  1.00  29.66
原子    3967 O   TRP A 525     12.921   28.804  -59.346  1.00  30.61
原子    3968 N   SER A 526     11.570   30.613  -59.380  1.00  30.33
原子    3969 CA  SER A 526     12.645   31.536  -59.004  1.00  31.13
原子    3970 CB  SER A 526     12.213   32.993  -59.187  1.00  31.02
原子    3971 OG  SER A 526     13.166   33.838  -58.562  1.00  33.69
原子    3972 C   SER A 526     13.086   31.312  -57.560  1.00  31.29
原子    3973 O   SER A 526     12.271   31.381  -56.627  1.00  31.21
原子    3974 N   THR A 527     14.373   31.049  -57.367  1.00  31.34
原子    3975 CA  THR A 527     14.880   30.794  -56.021  1.00  31.64
原子    3976 CB  THR A 527     16.259   30.098  -56.024  1.00  31.79
原子    3977 OG1 THR A 527     17.217   30.931  -56.682  1.00  31.43
原子    3978 CG2 THR A 527     16.169   28.739  -56.724  1.00  32.27
原子    3979 C   THR A 527     14.911   32.045  -55.152  1.00  31.99
原子    3980 O   THR A 527     14.847   31.959  -53.922  1.00  32.36
原子    3981 N   SER A 528     14.986   33.209  -55.787  1.00  31.79
原子    3982 CA  SER A 528     14.928   34.463  -55.054  1.00  32.02
原子    3983 CB  SER A 528     15.517   35.615  -55.885  1.00  32.70
原子    3984 OG  SER A 528     14.712   35.882  -57.031  1.00  34.94
原子    3985 C   SER A 528     13.497   34.784  -54.579  1.00  31.23
原子    3986 O   SER A 528     13.330   35.435  -53.550  1.00  32.02
原子    3987 N   ALA A 529     12.479   34.314  -55.306  1.00  29.33
原子    3988 CA  ALA A 529     11.093   34.506  -54.893  1.00  27.60
原子    3989 CB  ALA A 529     10.211   34.864  -56.086  1.00  27.34
原子    3990 C   ALA A 529     10.482   33.328  -54.112  1.00  26.40
原子    3991 .O  ALA A 529     9.3113   3.382   -53.754  1.00  26.54
原子    3992 N   ALA A 530     11.268   32.286  -53.842  1.00  25.12
原子    3993 CA  ALA A 530     10.777   31.114  -53.096  1.00  24.19
原子    3994 CB  ALA A 530     11.855   30.063  -52.991  1.00  23.88
原子    3995 C   ALA A 530     10.336   31.555  -51.706  1.00  23.55
原子    3996 O   ALA A 530     10.848   32.540  -51.182  1.00  23.61
原子    3997 N   VAL A 531     9.396    30.833  -51.110  1.00  22.18
原子    3998 CA  VAL A 531     8.851    31.248  -49.821  1.00  22.62
原子    3999 CB  VAL A 531     7.380    30.821  -49.677  1.00  22.81
原子    4000 CG1 VAL A 531     6.815    31.335  -48.346  1.00  25.06
原子    4001 CG2 VAL A 531     6.551    31.353  -50.886  1.00  25.38
原子    4002 C   VAL A 531     9.659    30.646  -48.674  1.00  21.29
原子    4003 O   VAL A 531     9.768    29.425  -48.564  1.00  20.72
原子    4004 N   ALA A 532     10.215   31.493  -47.819  1.00  20.86
原子    4005 CA  ALA A 532     11.008   30.999  -46.698  1.00  20.26
原子    4006 CB  ALA A 532     11.850   32.128  -46.084  1.00  21.02
原子    4007 C   ALA A 532     10.093   30.356  -45.646  1.00  20.51
原子    4008 O   ALA A 532     9.019    30.884  -45.337  1.00  20.05
原子    4009 N   LEU A 533     10.514   29.200  -45.129  1.00  19.00
原子    4010 CA  LEU A 533     9.855    28.565  -43.999  1.00  18.65
原子    4011 CB  LEU A 533     9.901    27.029  -44.148  1.00  18.14
原子    4012 CG  LEU A 533     9.395    26.450  -45.483  1.00  19.25
原子    4013 CD1 LEU A 533     9.385    24.923  -45.427  1.00  21.28
原子    4014 CD2 LEU A 533     8.030    26.980  -45.894  1.00  18.58
原子    4015 C   LEU A 533     10.541   29.014  -42.702  1.00  18.95
原子    4016 O   LEU A 533     11.622   29.648  -42.744  1.00  18.94
原子    4017 N   ASP A 534     9.905    28.715  -41.570  1.00  18.56
原子    4018 CA  ASP A 534     10.381   29.096  -40.238  1.00  18.36
原子    4019 CB  ASP A 534     9.220    29.634  -39.374  1.00  19.76
原子    4020 CG  ASP A 534     8.757    30.992  -39.798  1.00  23.55
原子    4021 OD1 ASP A 534     7.548    31.264  -39.659  1.00  26.14
原子    4022 OD2 ASP A 534     9.600    31.774  -40.283  1.00  27.39
原子    4023 C   ASP A 534     10.877   27.867  -39.504  1.00  17.68
原子    4024 O   ASP A 534     10.310   26.780  -39.667  1.00  16.10
原子    4025 N   ALA A 535     11.883   28.057  -38.654  1.00  17.05
原子    4026 CA  ALA A 535     12.405   26.950  -37.835  1.00  17.76
原子    4027 CB  ALA A 535     13.926   26.952  -37.832  1.00  17.96
原子    4028 C   ALA A 535     11.872   27.027  -36.403  1.00  17.82
原子    4029 O   ALA A 535     12.482   26.490  -35.474  1.00  18.36
原子    4030 N   VAL A 536     10.745   27.706  -36.225  1.00  17.68
原子    4031 CA  VAL A 536     10.138   27.861  -34.898  1.00  18.65
原子    4032 CB  VAL A 536     8.824    28.719  -34.975  1.00  18.66
原子    4033 CG1 VAL A 536     7.805    28.123  -35.971  1.00  19.98
原子    4034 CG2 VAL A 536     8.208    28.962  -33.570  1.00  20.19
原子    4035 C   VAL A 536     9.938    26.514  -34.155  1.00  18.51
原子    4036 O   VAL A 536     10.124   26.437  -32.923  1.00  19.61
原子    4037 N   ASN A 537     9.570    25.468  -34.883  1.00  18.59
原子    4038 CA  ASN A 537     9.344    24.154  -34.261  1.00  19.07
原子    4039 CB  ASN A 537     8.074    23.498  -34.816  1.00  19.28
原子    4040 CG  ASN A 537     6.800    24.252  -34.448  1.00  21.02
原子    4041 OD1 ASN A 537     6.742    24.940  -33.435  1.00  24.12
原子    4042 ND2 ASN A 537     5.762    24.089  -35.265  1.00  20.99
原子    4043 C   ASN A 537     10.518   23.182  -34.445  1.00  19.15
原子    4044 O   ASN A 537     10.394   21.971  -34.196  1.00  18.60
原子    4045 N   TYR A 538     11.653   23.699  -34.897  1.00  19.05
原子    4046 CA  TYR A 538     12.767   22.830  -35.234  1.00  20.32
原子    4047 CB  TYR A 538     13.816   23.618  -36.026  1.00  20.37
原子    4048CG   TYR A 538     14.916   22.747  -36.588  1.00  20.37
原子    4049 CD1 TYR A 538     14.822   22.238  -37.886  1.00  20.39
原子    4050 CE1 TYR A 538     15.853   21.436  -38.437  1.00  20.49
原子    4051 CZ  TYR A 538     16.961   21.137  -37.670  1.00  20.65
原子    4052 OH  TYR A 538     17.946   20.341  -38.218  1.00  21.53
原子    4053 CE2 TYR A 538     17.066   21.602  -36.361  1.00  22.05
原子    4054 CD2 TYR A 538     16.043   22.418  -35.825  1.00  21.95
原子    4055 C   TYR A 538     13.436   22.209  -33.981  1.00  21.29
原子    4056 O   TYR A 538     13.733   22.919  -33.036  1.00  21.89
原子    4057 N   ALA A 539     13.695   20.902  -34.014  1.00  22.15
原子    4058 CA  ALA A 539     14.646   20.258  -33.083  1.00  23.67
原子    4059 CB  ALA A 539     13.909   19.536  -31.976  1.00  23.94
原子    4060 C   ALA A 539     15.545   19.289  -33.849  1.00  24.35
原子    4061 O   ALA A 539     15.117   18.698  -34.833  1.00  23.63
原子    4062 N   ASP A 540     16.793   19.118  -33.405  1.00  25.69
原子    4063 CA  ASP A 540     17.722   18.196  -34.099  1.00  27.42
原子    4064 CB  ASP A 540     19.044   18.051  -33.339  1.00  28.62
原子    4065 CG  ASP A 540     19.724   19.368  -33.140  1.00  33.80
原子    4066 OD1 ASP A 540     19.875   20.115  -34.147  1.00  36.83
原子    4067 OD2 ASP A 540     20.080   19.663  -31.970  1.00  40.32
原子    4068 C   ASP A 540     17.150   16.818  -34.400  1.00  26.63
原子    4069 O   ASP A 540     17.386   16.277  -35.485  1.00  27.28
原子    4070 N   ASN A 541     16.403   16.247  -33.458  1.00  25.08
原子    4071 CA  ASN A 541     15.827   14.922  -33.687  1.00  24.03
原子    4072 CB  ASN A 541     15.988   14.032  -32.441  1.00  25.14
原子    4073 CG  ASN A 541     15.337   14.623  -31.191  1.00  27.81
原子    4074 OD1 ASN A 541     15.366   14.001  -30.118  1.00  31.57
原子    4075 ND2 ASN A 541     14.771   15.824  -31.306  1.00  28.81
原子    4076 C   ASN A 541     14.349   14.991  -34.118  1.00  22.46
原子    4077 O   ASN A 541     13.660   13.979  -34.172  1.00  22.35
原子    4078 N   HIS A 542     13.871   16.197  -34.403  1.00  19.85
原子    4079 CA  HIS A 542     12.580   16.354  -35.083  1.00  18.22
原子    4080 CB  HIS A 542     11.426   16.392  -34.062  1.00  16.89
原子    4081 CG  HIS A 542     10.071   16.341  -34.699  1.00  17.32
原子    4082 ND1 HIS A 542     9.211    17.417  -34.711  1.00  16.28
原子    4083 CE1 HIS A 542     8.111    17.088  -35.371  1.00  14.64
原子    4084 NE2 HIS A 542     8.217    15.834  -35.765  1.00  15.41
原子    4085 CD2 HIS A 542     9.435    15.340  -35.358  1.00  15.14
原子    4086 C   HIS A 542     12.662   17.650  -35.902  1.00  17.48
原子    4087 O   HIS A 542     12.198   18.698  -35.446  1.00  17.79
原子    4088 N   PRO A 543     13.324   17.584  -37.083  1.00  17.00
原子    4089 CA  PRO A 543     13.797   18.752  -37.832  1.00  17.09
原子    4090 CB  PRO A 543     14.948   18.164  -38.677  1.00  16.57
原子    4091 CG  PRO A 543     14.472   16.759  -38.994  1.00  18.22
原子    4092 CD  PRO A 543     13.676   16.321  -37.764  1.00  17.39
原子    4093 C   PRO A 543     12.718   19.435  -38.691  1.00  16.46
原子    4094 O   PRO A 543     12.811   19.497  -39.922  1.00  17.09
原子    4095 N   LEU A 544     11.726   19.987  -38.009  1.00  15.36
原子    4096 CA  LEU A 544     10.534   20.535  -38.636  1.00  15.10
原子    4097 CB  LEU A 544     9.341    20.376  -37.672  1.00  15.29
原子    4098 CG  LEU A 544     7.968    20.927  -38.134  1.00  16.53
原子    4099 CD1 LEU A 544     7.524    20.364  -39.494  1.00  15.92
原子    4100 CD2 LEU A 544     6.900    20.700  -37.062  1.00  14.59
原子    4101 C   LEU A 544     10.694   22.018  -39.025  1.00  15.09
原子    4102 O   LEU A 544     11.037   22.851  -38.197  1.00  15.34
原子    4103 N   TRP A 545     10.456   22.298  -40.303  1.00  15.03
原子    4104 CA  TRP A 545     10.327   23.637  -40.843  1.00  15.36
原子    4105 CB  TRP A 545     11.288   23.790  -42.023  1.00  15.40
原子    4106 CG  TRP A 545     12.758   23.921  -41.663  1.00  15.62
原子    4107 CD1 TRP A 545     13.653   22.903  -41.384  1.00  16.85
原子    4108 NE1 TRP A 545     14.906   23.437  -41.129  1.00  18.69
原子    4109 CE2 TRP A 545     14.837   24.803  -41.246  1.00  17.78
原子    4110 CD2 TRP A 545     13.498   25.140  -41.584  1.00  17.01
原子    4111 CE3 TRP A 545     13.163   26.488  -41.777  1.00  17.17
原子    4112 CZ3 TRP A 545     14.165   27.456  -41.637  1.00  18.29
原子    4113 CH2 TRP A 545     15.483   27.085  -41.295  1.00  17.22
原子    4114 CZ2 TRP A 545     15.835   25.767  -41.111  1.00  19.09
原子    4115 C   TRP A 545     8.907    23.832  -41.359  1.00  15.14
原子    4116 O   TRP A 545     8.327    22.933  -41.986  1.00  14.45
原子    4117 N   ILE A 546     8.362    25.025  -41.149  1.00  15.19
原子    4118 CA  ILE A 546     6.938    25.244  -41.428  1.00  16.51
原子    4119 CB  ILE A 546     6.107    24.988  -40.130  1.00  17.39
原子    4120 CG1 ILE A 546     4.615    24.852  -40.420  1.00  20.44
原子    4121 CD1 ILE A 546     3.882    23.992  -39.392  1.00  23.59
原子    4122 CG2 ILE A 546     6.391    26.064  -39.050  1.00  17.70
原子    4123 C   ILE A 546     6.674    26.635  -42.006  1.00  16.75
原子    4124 O   ILE A 546     7.352    27.593  -41.647  1.00  15.81
原子    4125 N   ALA A 547     5.716    26.743  -42.925  1.00  16.88
原子    4126 CA  ALA A 547     5.197    28.057  -43.279  1.00  17.94
原子    4127 CB  ALA A 547     6.222    28.893  -43.931  1.00  21.49
原子    4128 C   ALA A 547     4.009    27.919  -44.167  1.00  18.29
原子    4129 O   ALA A 547     3.727    26.828  -44.655  1.00  18.52
原子    4130 N   THR A 548     3.316    29.031  -44.362  1.00  17.99
原子    4131 CA  THR A 548     1.970    29.017  -44.919  1.00  18.72
原子    4132 CB  THR A 548     0.929    29.419  -43.855  1.00  18.65
原子    4133 OG1 THR A 548     1.000    28.500  -42.751  1.00  19.46
原子    4134 CG2 THR A 548    -0.491    29.379  -44.438  1.00  18.79
原子    4135 C   THR A 548     1.865    29.960  -46.104  1.00  19.60
原子    4136 O   THR A 548     2.347    31.090  -46.040  1.00  19.83
原子    4137 N   VAL A 549     1.227    29.485  -47.164  1.00  20.41
原子    4138 CA  VAL A 549     1.048    30.280  -48.389  1.00  22.36
原子    4139 CB  VAL A 549     1.944    29.722  -49.537  1.00  22.77
原子    4140 CG1 VAL A 549     1.717    30.491  -50.845  1.00  25.80
原子    4141 CG2 VAL A 549     3.429    29.781  -49.148  1.00  24.78
原子    4142 C   VAL A 549    -0.399    30.119  -48.800  1.00  22.21
原子    4143 O   VAL A 549    -0.943    29.018  -48.719  1.00  21.56
原子    4144 N   ASN A 550    -1.028    31.211  -49.240  1.00  22.80
原子    4145 CA  ASN A 550    -2.356    31.107  -49.831  1.00  23.95
原子    4146 CB  ASN A 550    -3.114    32.411  -49.649  1.00  24.39
原子    4147 CG  ASN A 550    -3.367    32.706  -48.201  1.00  27.42
原子    4148 OD1 ASN A 550    -3.811    31.838  -47.462  1.00  28.69
原子    4149 ND2 ASN A 550    -3.041    33.911  -47.771  1.00  31.89
原子    4150 C   ASN A 550    -2.278    30.733  -51.294  1.00  23.98
原子    4151 O   ASN A 550    -1.598    31.400  -52.065  1.00  24.73
原子    4152 N   LEU A 551    -2.973    29.667  -51.662  1.00  24.24
原子    4153 CA  LEU A 551    -3.016    29.180  -53.020  1.00  24.78
原子    4154 CB  LEU A 551    -2.348    27.797  -53.135  1.00  25.00
原子    4155 CG  LEU A 551    -0.858    27.721  -52.787  1.00  25.19
原子    4156 CD1 LEU A 551    -0.356    26.284  -52.803  1.00  27.45
原子    4157 CD2 LEU A 551    -0.018    28.613  -53.718  1.00  26.73
原子    4158 C   LEU A 551    -4.471    29.104  -53.488  1.00  25.46
原子    4159 O   LEU A 551    -5.393    29.018  -52.675  1.00  24.27
原子    4160 N   GLU A 552    -4.661    29.148  -54.804  1.00  26.15
原子    4161 CA  GLU A 552    -6.004    29.165  -55.366  1.00  28.20
原子    4162 CB  GLU A 552    -5.955    29.639  -56.823  1.00  28.30
原子    4163 CG  GLU A 552    -7.326    29.739  -57.494  1.00  32.28
原子    4164 CD  GLU A 552    -7.250    30.281  -58.926  1.00  33.44
原子    4165 OE1 GLU A 552    -8.110    31.126  -59.274  1.00  41.80
原子    4166 OE2 GLU A 552    -6.340    29.873  -59.695  1.00  39.14
原子    4167 C   GLU A 552    -6.610    27.768  -55.253  1.00  26.97
原子    4168 O   GLU A 552    -5.979    26.783  -55.622  1.00  26.49
原子    4169 N   ALA A 553    -7.822    27.684  -54.723  1.00  27.21
原子    4170 CA  ALA A 553    -8.502    26.399  -54.603  1.00  27.89
原子    4171 CB  ALA A 553    -9.876    26.574  -53.953  1.00  28.37
原子    4172 C   ALA A 553    -8.637    25.773  -55.979  1.00  28.57
原子    4173 O   ALA A 553    -8.900    26.477  -56.952  1.00  28.83
原子    4174 N   GLY A 554    -8.438    24.465  -56.064  1.00  28.44
原子    4175 CA  GLY A 554    -8.556    23.753  -57.330  1.00  29.66
原子    4176 C   GLY A 554    -7.274    23.693  -58.145  1.00  30.04
原子    4177 O   GLY A 554    -7.122    22.814  -59.000  1.00  30.33
原子    4178 N   ASP A 555    -6.347    24.606  -57.869  1.00  30.23
原子    4179 CA  ASP A 555    -5.098    24.716  -58.630  1.00  30.61
原子    4180 CB  ASP A 555    -4.313    25.939  -58.161  1.00  30.85
原子    4181 CG  ASP A 555    -3.382    26.503  -59.236  1.00  34.49
原子    4182 OD1 ASP A 555    -3.441    26.053  -60.407  1.00  37.19
原子    4183 OD2 ASP A 555    -2.572    27.408  -58.901  1.00  36.59
原子    4184 C   ASP A 555    -4.238    23.467  -58.486  1.00  30.14
原子    4185 O   ASP A 555    -4.156    22.882  -57.419  1.00  30.07
原子    4186 N   VAL A 556    -3.602    23.046  -59.572  1.00  29.55
原子    4187 CA  VAL A 556    -2.628    21.963  -59.492  1.00  28.74
原子    4188 CB  VAL A 556    -2.732    20.987  -60.680  1.00  29.35
原子    4189 CG1 VAL A 556    -1.666    19.877  -60.569  1.00  28.99
原子    4190 CG2 VAL A 556    -4.125    20.365  -60.720  1.00  30.44
原子    4191 C   VAL A 556    -1.261    22.623  -59.448  1.00  28.04
原子    4192 O   VAL A 556    -0.869    23.336  -60.384  1.00  27.25
原子    4193 N   VAL A 557    -0.544    22.389  -58.352  1.00  26.81
原子    4194 CA  VAL A 557     0.739    23.040  -58.100  1.00  26.14
原子    4195 CB  VAL A 557     0.690    23.859  -56.759  1.00  26.71
原子    4196 CG1 VAL A 557     2.073    24.140  -56.219  1.00  27.82
原子    4197 CG2 VAL A 557    -0.088    25.175  -56.952  1.00  27.34
原子    4198 C   VAL A 557     1.856    21.999  -58.092  1.00  25.64
原子    4199 O   VAL A 557     1.646    20.845  -57.693  1.00  25.24
原子    4200 N   GLU A 558     3.035    22.409  -58.553  1.00  24.16
原子    4201 CA  GLU A 558     4.223    21.579  -58.516  1.00  24.38
原子    4202 CB  GLU A 558     4.737    21.296  -59.933  1.00  24.86
原子    4203 CG  GLU A 558     4.064    20.108  -60.606  1.00  26.34
原子    4204 CD  GLU A 558     4.670    19.790  -61.962  1.00  27.68
原子    4205 OE1 GLU A 558     5.917    19.684  -62.065  1.00  30.56
原子    4206 OE2 GLU A 558     3.883    19.638  -62.915  1.00  32.45
原子    4207 C   GLU A 558     5.262    22.337  -57.730  1.00  22.54
原子    4208 O   GLU A 558     5.389    23.550  -57.883  1.00  22.93
原子    4209 N   TYR A 559     5.992    21.640  -56.867  1.00  21.45
原子    4210 CA  TYR A 559     6.927    22.346  -55.995  1.00  19.96
原子    4211 CB  TYR A 559     6.188    22.972  -54.784  1.00  19.42
原子    4212 CG  TYR A 559     5.624    21.952  -53.796  1.00  18.65
原子    4213 CD1 TYR A 559     6.383    21.524  -52.703  1.00  18.64
原子    4214 CE1 TYR A 559     5.887    20.595  -51.794  1.00  19.09
原子    4215 CZ  TYR A 559     4.614    20.090  -51.955  1.00  18.58
原子    4216 OH  TYR A 559     4.135    19.160  -51.056  1.00  20.55
原子    4217 CE2 TYR A 559     3.819    20.493  -53.024  1.00  18.22
原子    4218 CD2 TYR A 559     4.335    21.438  -53.946  1.00  18.82
原子    4219 C   TYR A 559     8.066    21.445  -55.541  1.00  20.13
原子    4220 O   TYR A 559     8.008    20.215  -55.679  1.00  20.26
原子    4221 N   LYS A 560     9.098    22.079  -54.995  1.00  19.51
原子    4222 CA  LYS A 560     10.208   21.379  -54.349  1.00  19.72
原子    4223 CB  LYS A 560     11.410   21.175  -55.282  1.00  19.66
原子    4224 CG  LYS A 560     11.390   19.870  -56.058  1.00  22.20
原子    4225 CD  LYS A 560     12.767   19.633  -56.714  1.00  24.46
原子    4226 CE  LYS A 560     12.781   18.341  -57.531  1.00  26.96
原子    4227 NZ  LYS A 560     14.189   18.050  -57.980  1.00  26.97
原子    4228 C   LYS A 560     10.680   22.257  -53.234  1.00  18.68
原子    4229 O   LYS A 560     10.583   23.484  -53.318  1.00  19.68
原子    4230 N   TYR A 561     11.240   21.640  -52.206  1.00  17.87
原子    4231 CA  TYR A 561     11.927   22.420  -51.187  1.00  17.82
原子    4232 CB  TYR A 561     11.921   21.690  -49.840  1.00  17.42
原子    4233 CG  TYR A 561     10.518   21.449  -49.346  1.00  16.12
原子    4234 CD1 TYR A 561     9.831    20.276  -49.661  1.00  15.94
原子    4235 CE1 TYR A 561     8.511    20.062  -49.199  1.00  15.79
原子    4236 CZ  TYR A 561     7.897    21.050  -48.456  1.00  15.89
原子    4237 OH  TYR A 561     6.614    20.889  -47.981  1.00  17.17
原子    4238 CE2 TYR A 561     8.557    22.224  -48.164  1.00  16.19
原子    4239 CD2 TYR A 561     9.856    22.430  -48.625  1.00  17.57
原子    4240 C   TYR A 561     13.360   22.650  -51.607  1.00  18.63
原子    4241 O   TYR A 561     13.963   21.786  -52.265  1.00  18.40
原子    4242 N   ILE A 562     13.904   23.792  -51.201  1.00  18.56
原子    4243 CA  ILE A 562     15.322   24.085  -51.434  1.00  20.18
原子    4244 CB  ILE A 562     15.524   25.247  -52.419  1.00  19.65
原子    4245 CG1 ILE A 562     14.837   26.520  -51.896  1.00  21.64
原子    4246 CD1 ILE A 562     15.074   27.789  -52.741  1.00  21.24
原子    4247 CG2 ILE A 562     15.017   24.829  -53.797  1.00  20.44
原子    4248 C   ILE A 562     15.971   24.446  -50.128  1.00  20.56
原子    4249 O   ILE A 562     15.316   24.956  -49.229  1.00  19.84
原子    4250 N   ASN A 563     17.254   24.134  -50.029  1.00  21.41
原子    4251 CA  ASN A 563     18.076   24.467  -48.886  1.00  22.99
原子    4252 CB  ASN A 563     18.833   23.209  -48.435  1.00  22.69
原子    4253 CG  ASN A 563     19.629   23.433  -47.156  1.00  25.48
原子    4254 OD1 ASN A 563     20.203   24.492  -46.965  1.00  28.81
原子    4255 ND2 ASN A 563     19.669   22.436  -46.285  1.00  25.82
原子    4256 C   ASN A 563     19.039   25.561  -49.372  1.00  24.66
原子    4257 O   ASN A 563     19.794   25.326  -50.323  1.00  24.16
原子    4258 N   VAL A 564     18.977   26.749  -48.780  1.00  26.20
原子    4259 CA  VAL A 564     19.877   27.837  -49.206  1.00  28.74
原子    4260 CB  VAL A 564     19.156   29.091  -49.832  1.00  28.91
原子    4261 CG1 VAL A 564     19.461   30.408  -49.087  1.00  31.10
原子    4262 CG2 VAL A 564     17.655   28.836  -50.079  1.00  28.92
原子    4263 C   VAL A 564     20.886   28.181  -48.122  1.00  29.56
原子    4264 O   VAL A 564     20.538   28.320  -46.954  1.00  29.10
原子    4265 N   GLY A 565     22.150   28.266  -48.527  1.00  32.02
原子    4266 CA  GLY A 565     23.252   28.423  -47.577  1.00  34.92
原子    4267 C   GLY A 565     23.539   29.876  -47.248  1.00  37.47
原子    4268 O   GLY A 565     22.969   30.788  -47.871  1.00  37.66
原子    4269 N   GLN A 566     24.419   30.098  -46.267  1.00  39.85
原子    4270 CA  GLN A 566     24.897   31.456  -45.926  1.00  42.75
原子    4271 CB  GLN A 566     26.054   31.398  -44.918  1.00  42.83
原子    4272 CG  GLN A 566     25.727   30.761  -43.565  1.00  44.99
原子    4273 CD  GLN A 566     26.940   30.689  -42.626  1.00  44.88
原子    4274 OE1 GLN A 566     27.972   30.089  -42.958  1.00  47.67
原子    4275 NE2 GLN A 566     26.810   31.293  -41.441  1.00  47.62
原子    4276 C   GLN A 566     25.373   32.195  -47.181  1.00  43.30
原子    4277 O   GLN A 566     25.052   33.365  -47.389  1.00  44.01
原子    4278 N   ASP A 567     26.118   31.479  -48.023  1.00  44.30
原子    4279 CA  ASP A 567     26.739   32.029  -49.236  1.00  44.62
原子    4280 CB  ASP A 567     27.916   31.139  -49.650  1.00  45.13
原子    4281 CG  ASP A 567     27.492   29.702  -49.966  1.00  47.62
原子    4282 OD1 ASP A 567     26.421   29.255  -49.485  1.00  48.73
原子    4283 OD2 ASP A 567     28.245   29.010  -50.693  1.00  50.47
原子    4284 C   ASP A 567     25.776   32.197  -50.421  1.00  44.04
原子    4285 O   ASP A 567     26.196   32.575  -51.522  1.00  44.36
原子    4286 N   GLY A 568     24.497   31.899  -50.205  1.00  42.85
原子    4287 CA  GLY A 568     23.488   32.045  -51.247  1.00  41.38
原子    4288 C   GLY A 568     23.359   30.851  -52.177  1.00  40.41
原子    4289 O   GLY A 568     22.496   30.854  -53.054  1.00  40.62
原子    4290 N   SER A 569     24.195   29.827  -51.990  1.00  39.02
原子    4291 CA  SER A 569     24.137   28.623  -52.827  1.00  37.72
原子    4292 CB  SER A 569     25.365   27.746  -52.600  1.00  38.07
原子    4293 OG  SER A 569     25.454   27.359  -51.238  1.00  39.18
原子    4294 C   SER A 569     22.868   27.819  -52.540  1.00  36.72
原子    4295 O   SER A 569     22.474   27.672  -51.382  1.00  36.47
原子    4296 N   VAL A 570     22.222   27.313  -53.583  1.00  35.25
原子    4297 CA  VAL A 570     20.988   26.558  -53.365  1.00  34.26
原子    4298 CB  VAL A 570     19.709   27.243  -53.987  1.00  34.42
原子    4299 CG1 VAL A 570     18.992   26.358  -55.020  1.00  35.11
原子    4300 CG2 VAL A 570     20.010   28.651  -54.506  1.00  35.12
原子    4301 C   VAL A 570     21.113   25.080  -53.718  1.00  33.29
原子    4302 O   VAL A 570     21.735   24.694  -54.714  1.00  32.88
原子    4303 N   THR A 571     20.515   24.261  -52.864  1.00  31.66
原子    4304 CA  THR A 571     20.480   22.825  -53.021  1.00  30.87
原子    4305 CB  THR A 571     21.016   22.146  -51.752  1.00  30.96
原子    4306 OG1 THR A 571     22.311   22.686  -51.442  1.00  33.18
原子    4307 CG2 THR A 571     21.117   20.637  -51.935  1.00  30.95
原子    4308 C   THR A 571     19.018   22.473  -53.210  1.00  29.72
原子    4309 O   THR A 571     18.186   22.832  -52.373  1.00  28.84
原子    4310 N   TRP A 572     18.697   21.846  -54.337  1.00  29.01
原子    4311 CA  TRP A 572     17.331   21.388  -54.589  1.00  28.49
原子    4312 CB  TRP A 572     17.004   21.367  -56.086  1.00  28.99
原子    4313 CG  TRP A 572     16.950   22.690  -56.739  1.00  29.65
原子    4314 CD1 TRP A 572     18.014   23.419  -57.217  1.00  30.67
原子    4315 NE1 TRP A 572     17.564   24.603  -57.769  1.00  31.84
原子    4316 CE2 TRP A 572     16.196   24.655  -57.668  1.00  30.45
原子    4317 CD2 TRP A 572     15.770   23.464  -57.028  1.00  30.30
原子    4318 CE3 TRP A 572     14.398   23.274  -56.791  1.00  29.43
原子    4319 CZ3 TRP A 572     13.502   24.266  -57.205  1.00  30.24
原子    4320 CH2 TRP A 572     13.959   25.437  -57.846  1.00  30.31
原子    4321 CZ2 TRP A 572     15.298   25.649  -58.083  1.00  29.71
原子    4322 C   TRP A 572     17.205   19.991  -54.031  1.00  28.21
原子    4323 O   TRP A 572     18.168   19.212  -54.060  1.00  27.50
原子    4324 N   GLU A 573     16.033   19.647  -53.499  1.00  27.69
原子    4325 CA  GLU A 573     15.819   18.251  -53.123  1.00  27.17
原子    4326 CB  GLU A 573     14.586   18.074  -52.222  1.00  27.18
原子    4327 CG  GLU A 573     13.287   18.406  -52.901  1.00  26.04
原子    4328 CD  GLU A 573     12.059   18.111  -52.028  1.00  26.20
原子    4329 OE1 GLU A 573     12.112   17.224  -51.141  1.00  25.84
原子    4330 OE2 GLU A 573     11.032   18.764  -52.264  1.00  22.24
原子    4331 C   GLU A 573     15.725   17.419  -54.405  1.00  27.91
原子    4332 O   GLU A 573     15.498   17.957  -55.497  1.00  26.94
原子    4333 N   SER A 574     15.907   16.108  -54.267  1.00  28.48
原子    4334 CA  SER A 574     15.880   15.201  -55.410  1.00  29.59
原子    4335 CB  SER A 574     16.296   13.805  -54.975  1.00  29.73
原子    4336 OG  SER A 574     17.609   13.875  -54.449  1.00  32.74
原子    4337 C   SER A 574     14.526   15.134  -56.095  1.00  29.70
原子    4338 O   SER A 574     13.500   15.482  -55.513  1.00  29.12
原子    4339 N   ASP A 575     14.544   14.669  -57.339  1.00  29.54
原子    4340 CA  ASP A 575     13.337   14.435  -58.109  1.00  29.98
原子    4341 CB  ASP A 575     13.705   14.000  -59.534  1.00  30.69
原子    4342 CG  ASP A 575     14.324   15.125  -60.331  1.00  33.96
原子    4343 OD1 ASP A 575     14.056   16.299  -59.997  1.00  36.25
原子    4344 OD2 ASP A 575     15.083   14.846  -61.290  1.00  37.94
原子    4345 C   ASP A 575     12.519   13.358  -57.428  1.00  28.93
原子    4346 O   ASP A 575     13.050   12.633  -56.600  1.00  28.34
原子    4347 N   PRO A 576     11.217   13.267  -57.760  1.00  28.58
原子    4348 CA  PRO A 576     10.469   14.173  -58.650  1.00  27.92
原子    4349 CB  PRO A 576     9.319    13.294  -59.131  1.00  28.52
原子    4350 CG  PRO A 576     9.053    12.378  -57.954  1.00  28.29
原子    4351 CD  PRO A 576     10.377   12.159  -57.267  1.00  28.76
原子    4352 C   PRO A 576     9.894    15.397  -57.938  1.00  27.25
原子    4353 O   PRO A 576     9.887    15.452  -56.703  1.00  28.13
原子    4354 N   ASN A 577     9.394    16.360  -58.707  1.00  25.62
原子    4355 CA  ASN A 577     8.612    17.449  -58.129  1.00  24.83
原子    4356 CB  ASN A 577     8.013    18.336  -59.224  1.00  24.90
原子    4357 CG  ASN A 577     9.055    19.184  -59.913  1.00  25.61
原子    4358 OD1 ASN A 577     10.176   19.321  -59.423  1.00  25.83
原子    4359 ND2 ASN A 577     8.693    19.756  -61.060  1.00  25.07
原子    4360 C   ASN A 577     7.466    16.868  -57.322  1.00  24.22
原子    4361 O   ASN A 577     6.949    15.798  -57.672  1.00  23.69
原子    4362 N   HIS A 578     7.057    17.562  -56.259  1.00  23.20
原子    4363 CA  HIS A 578     5.830    17.179  -55.570  1.00  22.96
原子    4364 CB  HIS A 578     5.734    17.844  -54.200  1.00  22.09
原子    4365 CG  HIS A 578     6.874    17.538  -53.285  1.00  21.80
原子    4366 ND1 HIS A 578     6.809    16.558  -52.318  1.00  21.62
原子    4367 CE1 HIS A 578     7.948    16.530  -51.645  1.00  21.36
原子    4368 NE2 HIS A 578     8.743    17.465  -52.133  1.00  20.16
原子    4369 CD2 HIS A 578     8.096    18.109  -53.160  1.00  19.78
原子    4370 C   HIS A 578     4.697    17.707  -56.429  1.00  23.58
原子    4371 O   HIS A 578     4.814    18.794  -56.976  1.00  23.64
原子    4372 N   THR A 579     3.603    16.955  -56.534  1.00  23.98
原子    4373 CA  THR A 579     2.426    17.448  -57.254  1.00  25.34
原子    4374 CB  THR A 579     2.092    16.568  -58.477  1.00  26.08
原子    4375 OG1 THR A 579     3.162    16.672  -59.429  1.00  29.14
原子    4376 CG2 THR A 579     0.749    16.979  -59.126  1.00  26.14
原子    4377 C   THR A 579     1.259    17.480  -56.291  1.00  25.05
原子    4378 O   THR A 579     0.977    16.487  -55.629  1.00  25.73
原子    4379 N   TYR A 580     0.591    18.619  -56.213  1.00  25.23
原子    4380 CA  TYR A 580    -0.450    18.802  -55.211  1.00  25.68
原子    4381 CB  TYR A 580     0.098    19.556  -53.976  1.00  25.88
原子    4382 CG  TYR A 580    -0.931    19.763  -52.866  1.00  26.21
原子    4383 CD1 TYR A 580    -1.284    21.048  -52.429  1.00  26.22
原子    4384 CE1 TYR A 580    -2.256    21.233  -51.399  1.00  27.53
原子    4385 CZ  TYR A 580    -2.860    20.111  -50.841  1.00  27.08
原子    4386 OH  TYR A 580    -3.806    20.207  -49.844  1.00  27.88
原子    4387 CE2 TYR A 580    -2.510    18.841  -51.264  1.00  26.97
原子    4388 CD2 TYR A 580    -1.562    18.671  -52.276  1.00  26.29
原子    4389 C   TYR A 580    -1.634    19.523  -55.828  1.00  25.65
原子    4390 O   TYR A 580    -1.490    20.596  -56.403  1.00  25.29
原子    4391 N   THR A 581    -2.813    18.915  -55.732  1.00  25.95
原子    4392 CA  THR A 581    -4.015    19.629  -56.117  1.00  25.78
原子    4393 CB  THR A 581    -5.016    18.700  -56.806  1.00  26.75
原子    4394 OG1 THR A 581    -4.332    18.000  -57.855  1.00  26.57
原子    4395 CG2 THR A 581    -6.189    19.498  -57.397  1.00  27.62
原子    4396 C   THR A 581    -4.627    20.285  -54.874  1.00  25.36
原子    4397 O   THR A 581    -5.024    19.595  -53.935  1.00  25.22
原子    4398 N   VAL A 582    -4.685    21.615  -54.880  1.00  24.54
原子    4399 CA  VAL A 582    -5.255    22.382  -53.777  1.00  24.15
原子    4400 CB  VAL A 582    -5.006    23.915  -53.953  1.00  24.21
原子    4401 CG1 VAL A 582    -5.472    24.700  -52.744  1.00  23.87
原子    4402 CG2 VAL A 582    -3.514    24.218  -54.219  1.00  25.33
原子    4403 C   VAL A 582    -6.759    22.063  -53.706  1.00  24.32
原子    4404 O   VAL A 582    -7.478    22.204  -54.700  1.00  23.26
原子    4405 N   PRO A 583    -7.236    21.587  -52.546  1.00  24.10
原子    4406 CA  PRO A 583    -8.665    21.230  -52.476  1.00  24.34
原子    4407 CB  PRO A 583    -8.865    20.763  -51.022  1.00  24.33
原子    4408 CG  PRO A 583    -7.516    20.538  -50.468  1.00  25.16
原子    4409 CD  PRO A 583    -6.508    21.310  -51.294  1.00  24.72
原子    4410 C   PRO A 583    -9.597    22.404  -52.768  1.00  24.50
原子    4411 O   PRO A 583    -9.262    23.558  -52.487  1.00  23.93
原子    4412 N   ALA A 584    -10.756   22.104  -53.350  1.00  24.61
原子    4413 CA  ALA A 584    -11.817   23.084  -53.477  1.00  24.77
原子    4414 CB  ALA A 584    -12.065   23.439  -54.943  1.00  25.29
原子    4415 C   ALA A 584    -13.036   22.434  -52.847  1.00  24.94
原子    4416 O   ALA A 584    -13.922   21.932  -53.537  1.00  25.03
原子    4417 N   VAL A 585    -13.052   22.406  -51.517  1.00  24.24
原子    4418 CA  VAL A 585    -14.075   21.673  -50.776  1.00  23.75
原子    4419 CB  VAL A 585    -13.465   20.452  -50.029  1.00  24.50
原子    4420 CG1 VAL A 585    -14.515   19.770  -49.151  1.00  24.48
原子    4421 CG2 VAL A 585    -12.863   19.447  -51.026  1.00  25.32
原子    4422 C   VAL A 585    -14.707   22.639  -49.781  1.00  23.20
原子    4423 O   VAL A 585    -13.999   23.347  -49.065  1.00  22.13
原子    4424 N   ALA A 586    -16.044   22.679  -49.739  1.00  22.43
原子    4425 CA  ALA A 586    -16.749   23.546  -48.804  1.00  21.79
原子    4426 CB  ALA A 586    -18.240   23.212  -48.820  1.00  22.19
原子    4427 C   ALA A 586    -16.160   23.324  -47.389  1.00  21.57
原子    4428 O   ALA A 586    -15.954   22.180  -46.990  1.00  20.89
原子    4429 N   CYS A 587    -15.872   24.414  -46.679  1.00  21.59
原子    4430 CA  CYS A 587    -15.388   24.379  -45.268  1.00  21.68
原子    4431 CB  CYS A 587    -16.131   23.323  -44.441  1.00  22.08
原子    4432 SG  CYS A 587    -17.952   23.374  -44.507  1.00  23.60
原子    4433 C   CYS A 587    -13.886   24.129  -45.094  1.00  21.27
原子    4434 O   CYS A 587    -13.386   24.225  -43.980  1.00  21.08
原子    4435 N   VAL A 588    -13.178   23.780  -46.170  1.00  20.53
原子    4436 CA  VAL A 588    -11.742   23.499  -46.085  1.00  20.52
原子    4437 CB  VAL A 588    -11.351   22.268  -46.958  1.00  20.47
原子    4438 CG1 VAL A 588    -9.8462   1.959   -46.844  1.00  20.87
原子    4439 CG2 VAL A 588    -12.163   21.042  -46.549  1.00  20.51
原子    4440 C   VAL A 588    -10.949   24.731  -46.504  1.00  20.59
原子    4441 O   VAL A 588    -10.699   24.950  -47.705  1.00  21.88
原子    4442 N   THR A 589    -10.533   25.522  -45.528  1.00  19.56
原子    4443 CA  THR A 589    -9.9032   6.807   -45.795  1.00  19.48
原子    4444 CB  THR A 589    -10.595   27.914  -44.988  1.00  20.13
原子    4445 OG1 THR A 589    -10.527   27.565  -43.592  1.00  21.49
原子    4446 CG2 THR A 589    -12.085   28.018  -45.410  1.00  20.03
原子    4447 C   THR A 589    -8.424    26.819  -45.427  1.00  19.42
原子    4448 O   THR A 589    -7.694    27.767  -45.743  1.00  18.66
原子    4449 N   GLN A 590    -7.995    25.772  -44.734  1.00  19.62
原子    4450 CA  GLN A 590    -6.606    25.629  -44.317  1.00  20.20
原子    4451 CB  GLN A 590    -6.359    26.261  -42.939  1.00  21.06
原子    4452 CG  GLN A 590    -4.950    25.956  -42.410  1.00  27.00
原子    4453 CD  GLN A 590    -4.184    27.189  -41.989  1.00  33.74
原子    4454 OE1 GLN A 590    -4.771    28.196  -41.611  1.00  37.22
原子    4455 NE2 GLN A 590    -2.855    27.118  -42.066  1.00  36.77
原子    4456 C   GLN A 590    -6.247    24.159  -44.295  1.00  19.00
原子    4457 O   GLN A 590    -7.004    23.335  -43.771  1.00  18.70
原子    4458 N   VAL A 591    -5.113    23.811  -44.904  1.00  17.70
原子    4459 CA  VAL A 591    -4.682    22.404  -44.940  1.00  17.15
原子    4460 CB  VAL A 591    -4.843    21.750  -46.330  1.00  17.82
原子    4461 CG1 VAL A 591    -6.316    21.701  -46.744  1.00  18.11
原子    4462 CG2 VAL A 591    -3.970    22.470  -47.390  1.00  17.60
原子    4463 C   VAL A 591    -3.213    22.360  -44.551  1.00  17.42
原子    4464 O   VAL A 591    -2.531    23.377  -44.638  1.00  17.32
原子    4465 N   VAL A 592    -2.731    21.206  -44.090  1.00  17.26
原子    4466 CA  VAL A 592    -1.291    21.092  -43.887  1.00  17.03
原子    4467 CB  VAL A 592    -0.762    21.198  -42.365  1.00  18.70
原子    4468 CG1 VAL A 592     0.335    20.217  -41.930  1.00  18.75
原子    4469 CG2 VAL A 592    -1.810    21.731  -41.315  1.00  15.36
原子    4470 C   VAL A 592    -0.736    19.951  -44.730  1.00  16.99
原子    4471 O   VAL A 592    -1.318    18.862  -44.828  1.00  16.23
原子    4472 N   LYS A 593     0.357    20.253  -45.403  1.00  15.38
原子    4473 CA  LYS A 593     0.953    19.302  -46.293  1.00  16.27
原子    4474 CB  LYS A 593     1.301    20.010  -47.616  1.00  16.69
原子    4475 CG  LYS A 593     1.835    19.096  -48.694  1.00  20.55
原子    4476 CD  LYS A 593     0.791    18.101  -49.203  1.00  24.73
原子    4477 CE  LYS A 593     1.330    17.311  -50.409  1.00  27.26
原子    4478 NZ  LYS A 593     2.395    16.299  -50.074  1.00  28.37
原子    4479 C   LYS A 593     2.209    18.783  -45.588  1.00  16.01
原子    4480 O   LYS A 593     3.175    19.525  -45.427  1.00  15.12
原子    4481 N   GLU A 594     2.195    17.519  -45.175  1.00  15.82
原子    4482 CA  GLU A 594     3.308    16.969  -44.407  1.00  16.23
原子    4483 CB  GLU A 594     2.798    16.017  -43.317  1.00  16.26
原子    4484 CG  GLU A 594     1.866    16.732  -42.299  1.00  16.62
原子    4485 CD  GLU A 594     1.727    15.949  -40.991  1.00  18.94
原子    4486 OE1 GLU A 594     1.267    14.778  -41.024  1.00  21.31
原子    4487 OE2 GLU A 594     2.107    16.507  -39.940  1.00  16.43
原子    4488 C   GLU A 594     4.286    16.245  -45.323  1.00  17.34
原子    4489 O   GLU A 594     3.973    15.177  -45.852  1.00  17.78
原子    4490 N   ASP A 595     5.463    16.833  -45.487  1.00  17.05
原子    4491 CA  ASP A 595     6.481    16.326  -46.405  1.00  17.21
原子    4492 CB  ASP A 595     6.823    17.379  -47.475  1.00  16.63
原子    4493 CG  ASP A 595     5.678    17.619  -48.455  1.00  17.91
原子    4494 OD1 ASP A 595     5.023    16.631  -48.857  1.00  20.73
原子    4495 OD2 ASP A 595     5.434    18.795  -48.844  1.00  18.08
原子    4496 C   ASP A 595     7.734    15.955  -45.631  1.00  17.47
原子    4497 O   ASP A 595     7.915    16.375  -44.492  1.00  16.44
原子    4498 N   THR A 596     8.598    15.162  -46.277  1.00  18.11
原子    4499 CA  THR A 596     9.917    14.835  -45.747  1.00  18.85
原子    4500 CB  THR A 596     9.991    13.390  -45.188  1.00  19.58
原子    4501 OG1 THR A 596     9.057    13.248  -44.116  1.00  20.97
原子    4502 CG2 THR A 596     11.385   13.124  -44.598  1.00  20.94
原子    4503 C   THR A 596     10.895   14.978  -46.914  1.00  19.34
原子    4504 O   THR A 596     10.588   14.531  -48.024  1.00  19.05
原子    4505 N   TRP A 597     12.050   15.581  -46.631  1.00  20.24
原子    4506 CA  TRP A 597     13.074   15.921  -47.633  1.00  21.94
原子    4507 CB  TRP A 597     14.325   16.453  -46.940  1.00  22.34
原子    4508 CG  TRP A 597     15.445   16.854  -47.882  1.00  23.75
原子    4509 CD1 TRP A 597     16.509   16.079  -48.275  1.00  25.08
原子    4510 NE1 TRP A 597     17.327   16.801  -49.138  1.00  24.85
原子    4511 CE2 TRP A 597     16.802   18.059  -49.300  1.00  25.25
原子    4512 CD2 TRP A 597     15.611   18.128  -48.527  1.00  24.09
原子    4513 CE3 TRP A 597     14.875   19.325  -48.519  1.00  24.91
原子    4514 CZ3 TRP A 597     15.334   20.401  -49.262  1.00  23.38
原子    4515 CH2 TRP A 597     16.520   20.299  -50.028  1.00  25.14
原子    4516 CZ2 TRP A 597     17.265   19.137  -50.053  1.00  22.49
原子    4517 C   TRP A 597     13.424   14.708  -48.473  1.00  23.42
原子    4518 O   TRP A 597     13.675   13.635  -47.939  1.00  22.37
原子    4519 N   GLN A 598     13.409   14.904  -49.788  1.00  25.26
原子    4520 CA  GLN A 598     13.698   13.850  -50.755  1.00  27.05
原子    4521 CB  GLN A 598     12.936   14.124  -52.052  1.00  26.51
原子    4522 CG  GLN A 598     11.418   13.948  -51.895  1.00  26.10
原子    4523 CD  GLN A 598     10.642   14.209  -53.156  1.00  26.76
原子    4524 OE1 GLN A 598     11.194   14.620  -54.175  1.00  27.68
原子    4525 NE2 GLN A 598     9.340    13.990  -53.095  1.00  25.96
原子    4526 C   GLN A 598     15.204   13.787  -50.977  1.00  29.21
原子    4527 O   GLN A 598     15.794   14.694  -51.574  1.00  28.61
原子    4528 N   SER A 599     15.818   12.722  -50.453  1.00  32.41
原子    4529 CA  SER A 599     17.273   12.530  -50.498  1.00  35.70
原子    4530 CB  SER A 599     17.747   11.698  -49.302  1.00  35.61
原子    4531 OG  SER A 599     17.374   12.296  -48.072  1.00  39.62
原子    4532 C   SER A 599     17.703   11.831  -51.785  1.00  36.66
原子    4533 O   SER A 599     16.916   11.145  -52.433  1.00  37.44
原子    4534 OXT SER A 599     18.863   11.922  -52.194  1.00  38.18
原子    4535 C1  MAN A 601    -3.602   -3.018   -46.412  1.00  102.64
原子    4536 C2  MAN A 601    -4.584   -2.109   -47.156  1.00  102.73
原子    4537 O2  MAN A 601    -3.951   -1.548   -48.288  1.00  102.91
原子    4538 C3  MAN A 601    -5.867   -2.845   -47.570  1.00  102.38
原子    4539 O3  MAN A 601    -6.544   -2.112   -48.566  1.00  102.32
原子    4540 C4  MAN A 601    -5.640   -4.269   -48.082  1.00  102.18
原子    4541 O4  MAN A 601    -6.860   -4.967   -47.984  1.00  101.76
原子    4542 C5  MAN A 601    -4.561   -5.018   -47.298  1.00  102.40
原子    4543 C6  MAN A 601    -4.172   -6.307   -48.010  1.00  102.48
原子    4544 O6  MAN A 601    -3.156   -6.957   -47.280  1.00  102.80
原子    4545 O5  MAN A 601    -3.400   -4.222   -47.131  1.00  102.71
原子    4546 C1  MAN A 602    -29.428  -4.974   -42.477  1.00  77.32
原子    4547 C2  MAN A 602    -28.973  -6.434   -42.405  1.00  77.44
原子    4548 O2  MAN A 602    -30.120  -7.253   -42.347  1.00  77.72
原子    4549 C3  MAN A 602    -28.044  -6.835   -43.565  1.00  77.20
原子    4550 O3  MAN A 602    -27.940  -8.239   -43.664  1.00  76.96
原子    4551 C4  MAN A 602    -28.487  -6.260   -44.909  1.00  77.22
原子    4552 O4  MAN A 602    -27.471  -6.474   -45.862  1.00  76.90
原子    4553 C5  MAN A 602    -28.766  -4.766   -44.768  1.00  77.47
原子    4554 C6  MAN A 602    -29.185  -4.115   -46.081  1.00  77.84
原子    4555 O6  MAN A 602    -28.163  -3.228   -46.483  1.00  78.24
原子    4556 O5  MAN A 602    -29.768  -4.562   -43.790  1.00  77.46
原子    4557 C1  MAN A 603    -18.689   25.235  -53.677  1.00  47.04
原子    4558 C2  MAN A 603    -20.074   24.872  -53.114  1.00  51.09
原子    4559 O2  MAN A 603    -21.044   25.065  -54.120  1.00  52.42
原子    4560 C3  MAN A 603    -20.141   23.420  -52.620  1.00  51.78
原子    4561 O3  MAN A 603    -21.465   23.079  -52.262  1.00  53.36
原子    4562 C4  MAN A 603    -19.602   22.466  -53.686  1.00  51.72
原子    4563 O4  MAN A 603    -19.615   21.142  -53.209  1.00  51.94
原子    4564 C5  MAN A 603    -18.179   22.911  -54.021  1.00  51.66
原子    4565 C6  MAN A 603    -17.421   21.906  -54.892  1.00  53.80
原子    4566 O6  MAN A 603    -17.915   21.885  -56.214  1.00  55.49
原子    4567 O5  MAN A 603    -18.217   24.223  -54.581  1.00  49.62
原子    4568 C1  MAN A 605    -4.678    15.117  -57.896  1.00  58.79
原子    4569 C2  MAN A 605    -3.360    15.555  -58.538  1.00  58.65
原子    4570 O2  MAN A 605    -2.564    14.412  -58.722  1.00  59.38
原子    4571 C3  MAN A 605    -3.570    16.269  -59.878  1.00  58.70
原子    4572 O3  MAN A 605    -2.523    15.985  -60.778  1.00  59.27
原子    4573 C4  MAN A 605    -4.915    15.892  -60.491  1.00  58.73
原子    4574 O4  MAN A 605    -5.084    16.538  -61.730  1.00  59.62
原子    4575 C5  MAN A 605    -6.054    16.284  -59.547  1.00  58.90
原子    4576 C6  MAN A 605    -7.370    15.612  -59.932  1.00  58.75
原子    4577 O6  MAN A 605    -7.255    14.219  -59.738  1.00  59.42
原子    4578 O5  MAN A 605    -5.730    16.034  -58.173  1.00  58.30
原子    4579 C1  MAN A 606    -10.273   28.688  -42.727  1.00  25.90
原子    4580 C2  MAN A 606    -9.839    27.944  -41.452  1.00  28.64
原子    4581 O2  MAN A 606    -9.245    28.909  -40.620  1.00  28.84
原子    4582 C3  MAN A 606    -10.999   27.249  -40.710  1.00  29.65
原子    4583 O3  MAN A 606    -10.568   26.763  -39.441  1.00  28.85
原子    4584 C4  MAN A 606    -12.203   28.177  -40.551  1.00  30.36
原子    4585 O4  MAN A 606    -13.330   27.463  -40.084  1.00  30.29
原子    4586 C5  MAN A 606    -12.553   28.769  -41.914  1.00  30.72
原子    4587 C6  MAN A 606    -13.730   29.731  -41.778  1.00  33.97
原子    4588 O6  MAN A 606    -13.624   30.732  -42.762  1.00  36.82
原子    4589 O5  MAN A 606    -11.434   29.464  -42.435  1.00  28.12
原子    4590 C1  MAN A 607    -31.396   1.963   -40.521  1.00  50.29
原子    4591 C2  MAN A 607    -30.220   1.790   -41.485  1.00  52.65
原子    4592 O2  MAN A 607    -30.541   0.785   -42.419  1.00  54.93
原子    4593 C3  MAN A 607    -29.845   3.092   -42.208  1.00  52.48
原子    4594 O3  MAN A 607    -28.932   2.836   -43.251  1.00  53.01
原子    4595 C4  MAN A 607    -31.068   3.818   -42.766  1.00  52.78
原子    4596 O4  MAN A 607    -30.672   5.070   -43.297  1.00  52.92
原子    4597 C5  MAN A 607    -32.103   3.985   -41.652  1.00  52.23
原子    4598 C6  MAN A 607    -33.331   4.749   -42.153  1.00  52.96
原子    4599 O6  MAN A 607    -34.520   4.076   -41.791  1.00  52.95
原子    4600 O5  MAN A 607    -32.451   2.702   -41.127  1.00  51.79
原子    4601 C1  MAN A 608     3.870    15.416  -59.489  1.00  37.21
原子    4602 C2  MAN A 608     5.134    15.938  -60.168  1.00  40.45
原子    4603 O2  MAN A 608     6.091    14.903  -60.120  1.00  38.47
原子    4604 C3  MAN A 608     4.872    16.381  -61.608  1.00  42.66
原子    4605 O3  MAN A 608     6.071    16.726  -62.263  1.00  44.20
原子    4606 C4  MAN A 608     4.122    15.321  -62.401  1.00  44.80
原子    4607 O4  MAN A 608     3.708    15.907  -63.612  1.00  47.73
原子    4608 C5  MAN A 608     2.893    14.887  -61.597  1.00  44.80
原子    4609 C6  MAN A 608     2.042    13.861  -62.342  1.00  47.55
原子    4610 O6  MAN A 608     1.085    14.582  -63.104  1.00  49.87
原子    4611 O5  MAN A 608     3.262    14.423  -60.302  1.00  42.18
原子    4612 C1  NAG A 611     3.450   -2.354   -8.282   1.00  23.44
原子    4613 C2  NAG A 611     3.474   -0.875   -7.878   1.00  24.51
原子    4614 N2  NAG A 611     4.425   -0.077   -8.630   1.00  21.95
原子    4615 C7  NAG A 611     4.123    0.454   -9.818   1.00  22.94
原子    4616 O7  NAG A 611     3.030    0.322   -10.367  1.00  20.93
原子    4617 C8  NAG A 611     5.216    1.232   -10.481  1.00  21.54
原子    4618 C3  NAG A 611     3.741   -0.713   -6.380   1.00  25.60
原子    4619 O3  NAG A 611     3.676    0.655   -6.047   1.00  24.91
原子    4620 C4  NAG A 611     2.741   -1.528   -5.554   1.00  25.70
原子    4621 O4  NAG A 611     3.196   -1.598   -4.227   1.00  28.27
原子    4622 C5  NAG A 611     2.648   -2.952   -6.086   1.00  26.18
原子    4623 C6  NAG A 611     1.524   -3.738   -5.397   1.00  26.64
原子    4624 O6  NAG A 611     0.278   -3.081   -5.497   1.00  25.38
原子    4625 O5  NAG A 611     2.437   -2.975   -7.488   1.00  24.34
原子    4626 C1  NAG A 612     2.499   -0.713   -3.326   1.00  32.04
原子    4627 C2  NAG A 612     2.710   -1.192   -1.879   1.00  35.81
原子    4628 N2  NAG A 612     2.254   -2.556   -1.666   1.00  37.89
原子    4629 C7  NAG A 612     3.072   -3.605   -1.753   1.00  39.19
原子    4630 O7  NAG A 612     4.277   -3.517   -2.031   1.00  40.58
原子    4631 C8  NAG A 612     2.439   -4.947   -1.507   1.00  38.98
原子    4632 C3  NAG A 612     2.012   -0.256   -0.899   1.00  37.96
原子    4633 O3  NAG A 612     2.352   -0.666    0.403   1.00  41.23
原子    4634 C4  NAG A 612     2.491    1.176   -1.129   1.00  37.63
原子    4635 O4  NAG A 612     1.789    2.053   -0.278   1.00  40.85
原子    4636 C5  NAG A 612     2.294    1.565   -2.604   1.00  35.10
原子    4637 C6  NAG A 612     2.785    2.982   -2.903   1.00  31.93
原子    4638 O6  NAG A 612     4.188    2.994   -3.008   0.58  32.70
原子    4639 O5  NAG A 612     2.974    0.625   -3.425   1.00  31.95
原子    4640 O8  BTB A 620    -1.213    18.638  -21.639  1.00  23.78
原子    4641 C8  BTB A 620    -1.255    19.440  -22.838  1.00  17.50
原子    4642 C7  BTB A 620    -2.257    18.851  -23.831  1.00  15.39
原子    4643 N   BTB A 620    -1.808    17.505  -24.294  1.00  13.88
原子    4644 C5  BTB A 620    -1.274    17.600  -25.684  1.00  12.99
原子    4645 C6  BTB A 620     0.017    18.399  -25.786  1.00  14.67
原子    4646 O6  BTB A 620     0.949    18.004  -24.768  1.00  16.93
原子    4647 C2  BTB A 620    -2.926    16.495  -24.191  1.00  13.33
原子    4648 C4  BTB A 620    -4.238    16.972  -24.835  1.00  13.45
原子    4649 O4  BTB A 620    -4.167    17.018  -26.265  1.00  14.77
原子    4650 C3  BTB A 620    -3.213    16.295  -22.703  1.00  13.18
原子    4651 O3  BTB A 620    -1.984    15.920  -22.059  1.00  12.74
原子    4652 C1  BTB A 620    -2.501    15.161  -24.845  1.00  13.57
原子    4653 O1  BTB A 620    -3.463    14.138  -24.525  1.00  13.07
原子    4654 O   WAT W   1    -7.741    16.530  -28.587  1.00  12.90
原子    4655 O   WAT W   2    -1.955    18.721  -7.814   1.00  11.77
原子    4656 O   WAT W   3    -17.101   16.033  -19.836  1.00  15.26
原子    4657 O   WAT W   4    -1.389    7.464   -24.070  1.00  15.86
原子    4658 O   WAT W   5    -8.070    20.758  -43.462  1.00  19.56
原子    4659 O   WAT W   6    -12.959   28.534  -26.860  1.00  16.12
原子    4660 O   WAT W   7    -0.502    31.488  -57.004  1.00  33.06
原子    4661 O   WAT W   8     2.095    5.710   -17.808  1.00  18.68
原子    4662 O   WAT W   9    -7.601    14.567  -6.827   1.00  14.97
原子    4663 O   WAT W  10     24.863   23.325  -37.431  1.00  32.31
原子    4664 O   WAT W  11    -22.569   7.289   -10.357  1.00  17.52
原子    4665 O   WAT W  12    -18.987   1.758   -22.078  1.00  23.03
原子    4666 O   WAT W  13    -3.226    16.264  -54.338  1.00  32.98
原子    4667 O   WAT W  14     6.141    16.546  -42.196  1.00  16.00
原子    4668 O   WAT W  15    -10.356   21.827  -22.675  1.00  13.52
原子    4669 O   WAT W  16    -3.130    25.355  -17.925  1.00  14.01
原子    4670 O   WAT W  17    -11.823   29.479  -29.411  1.00  17.50
原子    4671 O   WAT W  18    -14.383   15.964  -19.553  1.00  13.02
原子    4672 O   WAT W  19    -1.180    16.935  -10.101  1.00  18.86
原子    4673 O   WAT W  20    -31.133   23.501   4.462   1.00  16.66
原子    4674 O   WAT W  21    -4.819    24.193  -15.023  1.00  14.31
原子    4675 O   WAT W  22     1.709    22.276  -4.126   1.00  21.96
原子    4676 O   WAT W  23    -5.339    21.386  -7.463   1.00  15.78
原子    4677 O   WAT W  24    -17.232   15.476   1.374   1.00  17.64
原子    4678 O   WAT W  25    -11.449   4.860   -24.929  1.00  17.45
原子    4679 O   WAT W  26    -17.555   17.679  -39.815  1.00  23.23
原子    4680 O   WAT W  27     10.075   17.015  -49.295  1.00  24.05
原子    4681 O   WAT W  28    -16.018  -0.740   -24.205  1.00  18.07
原子    4682 O   WAT W  29     9.446    24.991  -37.612  1.00  19.20
原子    4683 O   WAT W  30    -4.165    26.137  -12.642  1.00  18.33
原子    4684 O   WAT W  31     2.771    22.947  -14.916  1.00  25.80
原子    4685 O   WAT W  32    -12.297   21.394  -35.680  1.00  14.89
原子    4686 O   WAT W  33    -24.061   13.570   10.081  1.00  24.96
原子    4687 O   WAT W  34     10.032   29.725  -56.684  1.00  26.97
原子    4688 O   WAT W  35     0.231    4.133   -28.595  1.00  17.67
原子    4689 O   WAT W  36     0.335    2.173   -30.650  1.00  18.32
原子    4690 O   WAT W  37    -10.199   24.315  -42.717  1.00  22.38
原子    4691 O   WAT W  38    -14.151   12.872  -8.204   1.00  16.16
原子    4692 O   WAT W  39    -2.710    9.564   -16.092  1.00  14.10
原子    4693 O   WAT W  40     5.954    7.990   -32.401  1.00  16.59
原子    4694 O   WAT W  41     0.294    5.561   -25.249  1.00  17.87
原子    4695 O   WAT W  42     2.102    15.148  -37.718  1.00  14.64
原子    4696 O   WAT W  43    -19.351   1.384   -26.295  1.00  20.27
原子    4697 O   WAT W  44    -19.623   9.533   -17.751  1.00  14.67
原子    4698 O   WAT W  45     3.117    18.767  -36.336  1.00  12.66
原子    4699 O   WAT W  46    -15.016   16.950   0.662   1.00  20.14
原子    4700 O   WAT W  47    -22.261   4.600   -10.993  1.00  16.38
原子    4701 O   WAT W  48    -12.926   5.474   -22.680  1.00  19.85
原子    4702 O   WAT W  49     5.564    17.071  -37.018  1.00  16.82
原子    4703 O   WAT W  50    -19.848   20.552  -2.718   1.00  19.38
原子    4704 O   WAT W  51    -15.859   17.744  -41.901  1.00  19.69
原子    4705 O   WAT W  52    -16.430   25.522  -1.123   1.00  19.97
原子    4706 O   WAT W  53    -15.978   5.366   -12.193  1.00  26.02
原子    4707 O   WAT W  54    -1.637    9.365   -26.035  1.00  14.42
原子    4708 O   WAT W  55    -10.759   27.212  -30.898  1.00  17.28
原子    4709 O   WAT W  56    -11.509   0.756   -13.101  1.00  20.70
原子    4710 O   WAT W  57    -16.950   15.108   4.727   1.00  23.86
原子    4711 O   WAT W  58    -25.368   26.009  -7.106   1.00  25.08
原子    4712 O   WAT W  59    -16.870   22.937  -3.651   1.00  17.56
原子    4713 O   WAT W  60    -14.388   13.258  -40.897  1.00  27.90
原子    4714 O   WAT W  61    -1.509   -4.779   -6.723   1.00  31.01
原子    4715 O   WAT W  62    -1.973    27.723  -11.521  1.00  21.99
原子    4716 O   WAT W  63    -1.159   -10.623  -29.592  1.00  36.68
原子    4717 O   WAT W  64    -1.943    16.930  -42.957  1.00  21.57
原子    4718 O   WAT W  65    -1.507    25.238  -40.032  1.00  31.36
原子    4719 O   WAT W  66    -4.023    5.499   -31.787  1.00  20.03
原子    4720 O   WAT W  67    -13.383   13.873  -21.065  1.00  12.01
原子    4721 O   WAT W  68    -15.098   10.726  -24.467  1.00  24.34
原子    4722 O   WAT W  69    -2.122    13.975  -13.435  1.00  12.51
原子    4723 O   WAT W  70    -4.807    19.360  -43.270  1.00  20.93
原子    4724 O   WAT W  71    -26.028   26.143  -33.768  1.00  28.78
原子    4725 O   WAT W  72    -19.347   21.638   3.482   1.00  19.92
原子    4726 O   WAT W  73    -27.299   24.219  -6.045   1.00  20.97
原子    4727 O   WAT W  74    -21.114  -0.343   -28.050  1.00  22.38
原子    4728 O   WAT W  75    -5.818    34.483  -11.645  1.00  20.61
原子    4729 O   WAT W  76     6.048    1.098   -23.393  1.00  16.77
原子    4730 O   WAT W  77    -3.946    23.711  -39.552  1.00  25.07
原子    4731 O   WAT W  78    -18.572   21.631  -41.884  1.00  25.98
原子    4732 O   WAT W  79     5.239    26.273  -31.646  1.00  27.95
原子    4733 O   WAT W  80     0.054    15.597  -45.905  1.00  28.45
原子    4734 O   WAT W  81    -3.130    21.534  -5.652   1.00  20.95
原子    4735 O   WAT W  82    -12.534   4.331   -20.095  1.00  17.49
原子    4736 O   WAT W  83     0.785    16.541  -14.558  1.00  14.65
原子    4737 O   WAT W  84    -5.197    12.827  -31.553  1.00  14.10
原子    4738 O   WAT W  85    -16.738   26.994  -34.463  1.00  23.74
原子    4739 O   WAT W  86     3.596    22.076  -36.828  1.00  22.68
原子    4740 O   WAT W  87     5.170    14.460  -40.572  1.00  26.56
原子    4741 O   WAT W  88    -12.322   21.050   0.328   1.00  30.36
原子    4742 O   WAT W  89     7.426    14.327  -48.857  1.00  26.44
原子    4743 O   WAT W  90    -13.702   19.025   1.863   1.00  28.28
原子    4744 O   WAT W  91     8.794    2.010   -23.444  1.00  34.69
原子    4745 O   WAT W  92    -6.185    5.529   -30.210  1.00  17.03
原子    4746 O   WAT W  93    -18.081   20.709  -4.839   1.00  17.61
原子    4747 O   WAT W  94    -15.469   13.082  -22.717  1.00  15.55
原子    4748 O   WAT W  95     13.101   16.811  -29.771  1.00  29.16
原子    4749 O   WAT W  96    -25.944   7.031   -2.628   1.00  27.42
原子    4750 O   WAT W  97    -4.552    34.207  -7.388   1.00  22.19
原子    4751 O   WAT W  98    -2.231   -9.858   -32.291  1.00  26.28
原子    4752 O   WAT W  99     5.314    10.271  -28.762  1.00  29.39
原子    4753 O   WAT W 100    -15.379   27.478  -46.620  1.00  37.77
原子    4754 O   WAT W 101     26.815   24.874  -36.295  1.00  31.11
原子    4755 O   WAT W 102    -18.489  -0.112   -24.256  1.00  23.63
原子    4756 O   WAT W 103    -23.763   26.890  -9.454   1.00  20.50
原子    4757 O   WAT W 104    -10.933   23.904  -50.315  1.00  25.63
原子    4758 O   WAT W 105     5.864    12.071  -41.668  1.00  29.27
原子    4759 O   WAT W 106     2.526    9.409   -13.116  1.00  20.75
原子    4760 O   WAT W 107    -11.557  -6.653   -10.981  1.00  30.68
原子    4761 O   WAT W 108    -14.882   7.238   -22.254  1.00  24.81
原子    4762 O   WAT W 109    -5.331   -13.390  -25.293  1.00  35.63
原子    4763 O   WAT W 110    -8.068    24.248  -40.534  1.00  39.14
原子    4764 O   WAT W 111    -0.779    14.419  -43.060  1.00  24.01
原子    4765 O   WAT W 112    -22.279   12.054  -26.750  1.00  32.13
原子    4766 O   WAT W 113    -26.829   1.352   -33.787  1.00  26.97
原子    4767 O   WAT W 114    -14.120   14.116   3.214   1.00  36.89
原子    4768 O   WAT W 115     0.582   -9.914   -21.103  1.00  23.30
原子    4769 O   WAT W 116    -24.305   22.723   6.995   1.00  21.67
原子    4770 O   WAT W 117    -28.275   12.468  -15.419  1.00  21.87
原子    4771 O   WAT W 118     3.699    27.669  -20.781  1.00  34.08
原子    4772 O   WAT W 119    -30.428   26.452   3.757   1.00  24.51
原子    4773 O   WAT W 120     19.168   26.858  -59.022  1.00  33.45
原子    4774 O   WAT W 121    -8.803    21.729  -1.693   1.00  18.30
原子    4775 O   WAT W 122     2.863    1.621   -31.755  1.00  19.96
原子    4776 O   WAT W 123    -2.357    28.930  -56.725  1.00  35.51
原子    4777 O   WAT W 124    -16.780   5.504   -21.523  1.00  31.34
原子    4778 O   WAT W 125     6.216    18.141  -30.592  1.00  20.87
原子    4779 O   WAT W 126     11.789   32.722  -38.773  1.00  40.41
原子    4780 O   WAT W 127    -5.001    7.195   -45.656  1.00  35.03
原子    4781 O   WAT W 128    -18.743   1.608   -1.861   1.00  32.49
原子    4782 O   WAT W 129    -25.089  -1.945   -20.935  1.00  35.17
原子    4783 O   WAT W 130    -7.097   -2.177   -28.928  1.00  30.93
原子    4784 O   WAT W 131    -12.591   2.907   -11.929  1.00  18.60
原子    4785 O   WAT W 132    -17.913  -2.374   -39.429  1.00  29.36
原子    4786 O   WAT W 133    -6.507   -7.038   -37.710  1.00  37.27
原子    4787 O   WAT W 134    -0.628    7.596   -18.660  1.00  20.01
原子    4788 O   WAT W 135    -11.683   28.527  -37.016  1.00  36.45
原子    4789 O   WAT W 136    -3.169    33.267  -18.049  1.00  24.89
原子    4790 O   WAT W 137    -16.742   8.938   -23.161  1.00  26.79
原子    4791 O   WAT W 138    -28.456   17.726  -22.449  1.00  32.61
原子    4792 O   WAT W 139     25.559   27.237  -45.392  1.00  43.21
原子    4793 O   WAT W 140    -26.925   5.789   -41.722  1.00  26.97
原子    4794 O   WAT W 141    -16.907   20.013  -43.283  1.00  29.68
原子    4795 O   WAT W 142    -20.029   5.119   -1.799   1.00  24.76
原子    4796 O   WAT W 143     8.706    1.050   -13.115  1.00  32.81
原子    4797 O   WAT W 144    -4.353    22.506  -1.252   1.00  24.86
原子    4798 O   WAT W 145    -29.660   14.750  -15.295  1.00  32.62
原子    4799 O   WAT W 146     2.173    2.240   -12.124  1.00  26.38
原子    4800 O   WAT W 147     4.174   -4.659   -14.794  1.00  25.20
原子    4801 O   WAT W 148    -10.913   29.083  -33.130  1.00  27.78
原子    4802 O   WAT W 149    -21.448   30.157  -10.670  1.00  25.07
原子    4803 O   WAT W 150    -23.296   18.641  -36.646  1.00  27.11
原子    4804 O   WAT W 151    -19.426   8.262   -24.240  1.00  25.11
原子    4805 O   WAT W 152     4.729   -0.512   -31.679  1.00  23.50
原子    4806 O   WAT W 153     9.247    19.703  -33.306  1.00  23.44
原子    4807 O   WAT W 154     6.024    15.401  -22.768  1.00  27.11
原子    4808 O   WAT W 155    -16.077   30.180  -4.530   1.00  23.52
原子    4809 O   WAT W 156    -0.038    14.751  -8.812   1.00  25.64
原子    4810 O   WAT W 157     2.962    18.631  -29.190  1.00  18.13
原子    4811 O   WAT W 158     8.793    12.371  -36.745  1.00  23.77
原子    4812 O   WAT W 159    -22.406   9.468   -0.415   1.00  21.66
原子    4813 O   WAT W 160    -10.961   33.685  -7.076   1.00  25.30
原子    4814 O   WAT W 161    -8.504    27.891  -3.964   1.00  33.88
原子    4815 O   WAT W 162     6.836    20.663  -32.439  1.00  24.97
原子    4816 O   WAT W 163     4.292    23.232  -29.206  1.00  32.74
原子    4817 O   WAT W 164     2.350    3.656   -15.645  1.00  23.29
原子    4818 O   WAT W 165    -17.377   10.190  -20.605  1.00  25.21
原子    4819 O   WAT W 166    -23.426   24.714   4.551   1.00  26.12
原子    4820 O   WAT W 167     0.338    1.730   -14.995  1.00  31.29
原子    4821 O   WAT W 168    -3.303    17.836  -46.350  1.00  28.34
原子    4822 O   WAT W 169     1.465    6.514   -14.840  1.00  22.81
原子    4823 O   WAT W 170     2.409    11.466  -4.481   1.00  29.82
原子    4824 O   WAT W 171     0.998    19.313  -20.348  1.00  31.57
原子    4825 O   WAT W 172     7.556   -3.076   -34.213  1.00  31.62
原子    4826 O   WAT W 173    -25.163   1.132   -18.852  1.00  33.45
原子    4827 O   WAT W 174    -25.606   17.471  -26.509  1.00  27.89
原子    4828 O   WAT W 175     5.952    32.621  -65.955  1.00  42.20
原子    4829 O   WAT W 176    -27.397   26.421  -12.489  1.00  29.06
原子    4830 O   WAT W 177    -17.506   35.918  -29.284  1.00  36.40
原子    4831 O   WAT W 178    -18.298   7.055   -19.628  1.00  30.04
原子    4832 O   WAT W 179    -24.383   14.811  -26.605  1.00  29.51
原子    4833 O   WAT W 180    -1.204    27.462  -35.328  1.00  29.93
原子    4834 O   WAT W 181    -14.112   33.822  -23.916  1.00  34.66
原子    4835 O   WAT W 182     2.887    26.714  -9.619   1.00  34.18
原子    4836 O   WAT W 183    -16.062   4.698    1.046   1.00  32.44
原子    4837 O   WAT W 184    -13.340   36.111  -4.359   1.00  39.14
原子    4838 O   WAT W 185     9.661    34.457  -47.977  1.00  37.66
原子    4839 O   WAT W 186    -8.465    24.284  -1.237   1.00  33.71
原子    4840 O   WAT W 187     16.971   15.520  -43.951  1.00  42.49
原子    4841 O   WAT W 188    -12.038  -14.614  -20.299  1.00  34.37
原子    4842 O   WAT W 189    -5.887    22.387  -40.784  1.00  33.70
原子    4843 O   WAT W 190    -3.962   -18.100  -17.720  1.00  31.33
原子    4844 O   WAT W 191    -30.888   11.643  -15.288  1.00  36.84
原子    4845 O   WAT W 192     11.576   13.142  -37.752  1.00  32.89
原子    4846 O   WAT W 193    -7.856    3.348   -41.927  1.00  34.02
原子    4847 O   WAT W 194    -20.849   7.518    7.652   1.00  32.37
原子    4848 O   WAT W 195     16.954   13.938  -58.514  1.00  42.65
原子    4849 O   WAT W 196    -31.884   7.593   -13.893  1.00  37.54
原子    4850 O   WAT W 197     4.560   -14.190  -17.137  1.00  36.09
原子    4851 O   WAT W 198     1.116    27.617  -39.051  1.00  37.08
原子    4852 O   WAT W 199    -1.019   -12.134  -21.800  1.00  36.12
原子    4853 O   WAT W 200     8.350    0.111   -21.198  1.00  36.56
原子    4854 O   WAT W 201    -2.691    31.235  -26.910  1.00  32.08
原子    4855 O   WAT W 202     13.222   30.530  -38.626  1.00  36.46
原子    4856 O   WAT W 203    -11.218   19.535  -54.549  1.00  35.12
原子    4857 O   WAT W 204    -5.623    10.865  -46.910  1.00  35.48
原子    4858 O   WAT W 205    -18.073   1.743   -43.946  1.00  40.62
原子    4859 O   WAT W 206    -32.195   23.231   2.102   1.00  34.73
原子    4860 O   WAT W 207    -24.204   8.994   -2.941   1.00  30.29
原子    4861 O   WAT W 208    -4.771    18.292  -48.610  1.00  31.87
原子    4862 O   WAT W 209    -17.156   23.843  -40.674  1.00  35.73
原子    4863 O   WAT W 210     8.319    13.422  -13.297  1.00  37.43
原子    4864 O   WAT W 211    -25.962   8.559   -33.791  1.00  33.46
原子    4865 O   WAT W 212    -36.129   8.276    3.147   1.00  40.24
原子    4866 O   WAT W 213     20.833   21.074  -56.185  1.00  39.11
原子    4867 O   WAT W 214    -17.726   14.087   8.330   1.00  39.10
原子    4868 O   WAT W 215     8.944    8.011   -10.493  1.00  41.24
原子    4869 O   WAT W 216    -16.566   35.858  -11.282  1.00  38.90
原子    4870 O   WAT W 217    -20.560   11.198  -43.128  1.00  34.83
原子    4871 O   WAT W 218     3.261   -0.833   -39.177  1.00  32.67
原子    4872 O   WAT W 219    -22.370  -13.152  -34.412  1.00  59.42
原子    4873 O   WAT W 220    -24.775   6.925    5.968   1.00  34.28
原子    4874 O   WAT W 221    -20.357   21.098  -45.702  1.00  36.83
原子    4875 O   WAT W 222     2.502    28.932  -40.686  1.00  36.85
原子    4876 O   WAT W 223    -17.630  -5.533   -21.334  1.00  35.08
原子    4877 O   WAT W 224    -19.358  -1.912   -43.190  1.00  35.83
原子    4878 O   WAT W 225    -14.632   25.995  -42.094  1.00  41.12
原子    4879 O   WAT W 226    -28.967   5.606   -22.103  1.00  45.63
原子    4880 O   WAT W 227    -4.326    9.934    5.097   1.00  44.46
原子    4881 O   WAT W 228     3.983    22.711  -17.336  1.00  46.21
原子    4882 O   WAT W 229    -17.238   16.931   6.949   1.00  42.44
原子    4883 O   WAT W 230    -25.871   18.809   10.364  1.00  36.15
原子    4884 O   WAT W 231    -23.524   31.294  -19.082  1.00  35.99
原子    4885 O   WAT W 232    -5.261   -9.321   -38.277  1.00  43.42
原子    4886 O   WAT W 233    -22.757   28.188  -29.173  1.00  39.56
原子    4887 O   WAT W 234    -25.699   26.238  -0.299   1.00  40.26
原子    4888 O   WAT W 235    -21.884  -4.007   -22.294  1.00  38.01
原子    4889 O   WAT W 236    -6.696   -17.346  -27.753  1.00  39.83
原子    4890 O   WAT W 237    -18.052   5.515    3.888   1.00  37.82
原子    4891 O   WAT W 238    -6.073    35.708  -9.057   1.00  36.25
原子    4892 O   WAT W 239    -8.876    2.984   -44.368  1.00  45.85
原子    4893 O   WAT W 240     9.232    31.613  -65.496  1.00  45.82
原子    4894 O   WAT W 241    -28.246   26.806  -0.118   1.00  36.45
原子    4895 O   WAT W 242    -27.793   14.675  -45.312  1.00  52.10
原子    4896 O   WAT W 243     7.463    14.079  -55.045  1.00  36.97
原子    4897 O   WAT W 244    -28.572   4.769   -1.130   1.00  36.20
原子    4898 O   WAT W 245     8.221    12.936  -50.870  1.00  38.81
原子    4899 O   WAT W 246    -23.302  -2.082   -27.191  1.00  32.98
原子    4900 O   WAT W 247    -13.035   8.248   -46.620  1.00  51.73
原子    4901 O   WAT W 248    -11.869   31.852  -50.157  1.00  56.13
原子    4902 O   WAT W 249     0.898    13.920  -6.521   1.00  27.38
原子    4903 O   WAT W 250     20.427   30.852  -45.446  1.00  35.54
原子    4904 O   WAT W 251    -1.397    12.400  -44.617  1.00  39.33
原子    4905 O   WAT W 252    -27.354   24.696  -3.162   1.00  35.38
原子    4906 O   WAT W 253     17.587   20.557  -31.069  1.00  41.51
原子    4907 O   WAT W 254    -7.936    35.055  -7.354   1.00  39.02
原子    4908 O   WAT W 255    -22.469   7.215   -2.044   1.00  38.25
原子    4909 O   WAT W 256     2.038    15.474  -52.963  1.00  50.04
原子    4910 O   WAT W 257     10.889   10.184  -21.700  1.00  44.84
原子    4911 O   WAT W 258    -11.714   10.583   4.136   1.00  42.70
原子    4912 O   WAT W 259    -14.719   6.574    2.959   1.00  43.18
原子    4913 O   WAT W 260    -16.694   25.390  -37.688  1.00  36.77
原子    4914 O   WAT W 261    -9.212    13.388  -48.363  1.00  38.05
原子    4915 O   WAT W 264    -0.611   -1.965   -3.253   1.00  37.95
原子    4916 O   WAT W 265    -16.380   30.998  -14.262  1.00  32.44
原子    4917 O   WAT W 266     9.420    16.012  -61.368  1.00  35.22
原子    4918 O   WAT W 267    -4.976   -15.180  -21.223  1.00  45.50
原子    4919 O   WAT W 268    -16.631   33.287  -14.201  1.00  34.50
原子    4920 O   WAT W 269    -16.883   34.052  -32.249  1.00  36.88
原子    4921 O   WAT W 270    -8.293   -16.006  -14.535  1.00  34.80
原子    4922 O   WAT W 273     0.240    4.589   -13.868  1.00  32.34
原子    4923 O   WAT W 275     3.657    14.447  -55.516  1.00  43.54
原子    4924 O   WAT W 276    -17.602   20.784  -51.471  1.00  38.88
原子    4925 O   WAT W 277    -10.479   31.683  -30.513  1.00  40.35
原子    4926 O   WAT W 278    -10.974   4.308   -5.745   1.00  40.30
原子    4927 O   WAT W 280    -4.336    36.908  -17.666  1.00  34.01
原子    4928 O   WAT W 281     6.720    33.970  -53.572  1.00  38.81
原子    4929 O   WAT W 282    -30.457   23.527  -0.621   1.00  34.61
原子    4930 O   WAT W 283     16.969   17.394  -30.816  1.00  55.74
原子    4931 O   WAT W 284    -24.391   5.834   -24.909  1.00  37.92
原子    4932 O   WAT W 285     4.567    9.814   -4.438   1.00  44.83
原子    4933 O   WAT W 286    -24.370  -7.328   -27.875  1.00  56.18
原子    4934 O   WAT W 287    -21.605   11.887   9.715   1.00  43.15
原子    4935 O   WAT W 288     8.603    0.412   -37.887  1.00  40.47
原子    4936 O   WAT W 290    -20.056   21.495   6.073   1.00  41.68
原子    4937 O   WAT W 291    -3.221    28.158  -33.448  1.00  44.24
原子    4938 O   WAT W 292     9.171    9.103   -38.735  1.00  34.30
原子    4939 O   WAT W 293     2.894    22.763  -25.829  1.00  38.57
原子    4940 O   WAT W 294    -29.901   19.604  -14.929  1.00  37.66
原子    4941 O   WAT W 296    -4.579    30.229  -29.110  1.00  40.57
原子    4942 O   WAT W 297    -23.821   11.441  -33.187  1.00  42.81
原子    4943 O   WAT W 298    -26.753  -3.087   -31.243  1.00  39.08
原子    4944 O   WAT W 300    -10.820   35.024  -53.050  1.00  55.39
原子    4945 O   WAT W 302    -1.992    7.169   -31.692  1.00  39.12
原子    4946 O   WAT W 303    -15.282  -19.000  -23.770  1.00  34.62
原子    4947 O   WAT W 304     12.106   10.568  -25.112  1.00  39.04
原子    4948 O   WAT W 305     2.585    2.766    1.880   1.00  53.88
原子    4949 O   WAT W 306     3.680    21.122  -19.818  1.00  46.35
原子    4950 O   WAT W 307     22.759   24.721  -48.099  1.00  40.35
原子    4951 O   WAT W 309    -17.062  -6.726   -19.202  1.00  41.54
原子    4952 O   WAT W 311     12.594   1.109   -31.461  1.00  47.85
原子    4953 O   WAT W 312     23.347   25.060  -50.638  1.00  49.64
原子    4954 O   WAT W 314    -18.291   4.422   -19.151  1.00  39.17
原子    4955 O   WAT W 315    -11.815  -7.807   -8.676   1.00  37.74
原子    4956 O   WAT W 316    -25.147   1.885   -4.649   1.00  44.72
原子    4957 O   WAT W 317    -36.473   13.592   5.315   1.00  44.38
原子    4958 O   WAT W 318    -17.587   20.023  -46.231  1.00  48.30
原子    4959 O   WAT W 319    -16.081   29.024  -54.668  1.00  39.40
原子    4960 O   WAT W 320    -14.210   32.143  -5.494   1.00  42.73
原子    4961 O   WAT W 321    -15.274   28.830  -38.916  1.00  46.47
原子    4962 O   WAT W 322    -32.792   22.221  -3.433   1.00  41.52
原子    4963 O   WAT W 323    -32.475   16.905  -12.401  1.00  46.29
原子    4964 O   WAT W 325     15.341   22.212  -60.490  1.00  34.67
原子    4965 O   WAT W 326    -12.668   8.518   -41.723  1.00  36.26
原子    4966 O   WAT W 327     4.709    20.490  -10.568  1.00  38.04
原子    4967 O   WAT W 328     13.937   10.625  -29.312  1.00  38.32
原子    4968 O   WAT W 329    -21.964   9.615   -24.896  1.00  40.43
原子    4969 O   WAT W 330     19.325   25.925  -40.199  1.00  51.36
原子    4970 O   WAT W 331    -19.010   8.073   -45.255  1.00  46.06
原子    4971 O   WAT W 332    -25.024  -2.892   -29.306  1.00  41.74
原子    4972 O   WAT W 333    -16.593  -7.067   -23.297  1.00  38.54
原子    4973 O   WAT W 334    -17.517   24.078   2.157   1.00  45.82
原子    4974 O   WAT W 335    -19.123   31.941   0.010   1.00  38.91
原子    4975 O   WAT W 337     10.677   21.901  -62.740  1.00  44.31
原子    4976 O   WAT W 338     4.510    15.230  -51.810  1.00  42.12
原子    4977 O   WAT W 339     13.979   14.161  -43.380  1.00  46.42
原子    4978 O   WAT W 341     5.979   -11.625  -28.739  1.00  43.09
原子    4979 O   WAT W 342    -19.453   13.347   10.394  1.00  42.44
原子    4980 O   WAT W 343     7.085    23.050  -30.796  1.00  34.94
原子    4981 O   WAT W 345     6.471    24.087  -63.943  1.00  45.16
原子    4982 O   WAT W 347     3.734    22.842  -12.031  1.00  43.85
原子    4983 O   WAT W 348    -17.739   7.564    5.723   1.00  43.77
原子    4984 O   WAT W 351    -22.014   31.372  -24.708  1.00  42.69
原子    4985 O   WAT W 352     25.016   25.103  -46.967  1.00  40.51
原子    4986 O   WAT W 353     7.969    32.464  -67.637  1.00  57.78
原子    4987 O   WAT W 354    -27.444   5.101    5.861   1.00  48.31
原子    4988 O   WAT W 356     8.012    11.087  -40.867  1.00  47.51
原子    4989 O   WAT W 357     4.974    29.116  -17.433  1.00  43.72
原子    4990 O   WAT W 358    -0.457    9.488   -45.288  1.00  45.63
原子    4991 O   WAT W 360    -3.090    36.536  -12.138  1.00  46.29
原子    4992 O   WAT W 361     20.072   19.772  -36.896  1.00  38.73
原子    4993 O   WAT W 363    -26.217   15.345  -28.735  1.00  49.07
原子    4994 O   WAT W 365    -25.308   0.100   -48.602  1.00  60.01
原子    4995 O   WAT W 367     19.369   29.586  -58.438  1.00  48.19
原子    4996 O   WAT W 369     12.808   11.144  -54.427  1.00  48.48
原子    4997 O   WAT W 370     9.410    2.674   -16.115  1.00  44.59
原子    4998 O   WAT W 372    -10.249   38.564  -13.215  1.00  48.60
原子    4999 O   WAT W 373    -24.151   16.211   10.617  1.00  42.16
原子    5000 O   WAT W 375    -6.459    31.697  -48.106  1.00  46.03
原子    5001 O   WAT W 376    -11.605   27.116  -1.562   1.00  44.58
原子    5002 O   WAT W 377    -4.703    24.150  -62.673  1.00  48.70
原子    5003 O   WAT W 379     6.889    0.036   -7.530   1.00  45.35
原子    5004 O   WAT W 381    -13.601   32.742  -32.002  1.00  51.37
原子    5005 O   WAT W 383    -28.077   5.243   -4.688   1.00  37.46
序列表
<110>丹尼斯科美国公司
 
<120>具有改变性质的葡糖淀粉酶变体
 
<130>48452-0032-WO(430971)
 
<140>
<141>
 
<150>60/989,426
<151>2007-11-20
 
<160>168
 
<170>PatentIn version 3.5
 
<210>1
<211>632
<212>PRT
<213>里氏木霉
 
<400>1
Met His Val Leu Ser Thr Ala Val Leu Leu Gly Ser Val Ala Val Gln
1               5                   10                  15
Lys Val Leu Gly Arg Pro Gly Ser Ser Gly Leu Ser Asp Val Thr Lys
            20                  25                  30
Arg Ser Val Asp Asp Phe Ile Ser Thr Glu Thr Pro Ile Ala Leu Asn
        35                  40                  45
Asn Leu Leu Cys Asn Val Gly Pro Asp Gly Cyg Arg Ala Phe Gly Thr
    50                  55                  60
Ser Ala Gly Ala Val Ile Ala Ser Pro Ser Thr Ile Asp Pro Asp Tyr
65                  70                  75                  80
Tyr Tyr Met Trp Thr Arg Asp Ser Ala Leu Val Phe Lys Asn Leu Ile
                85                  90                  95
Asp Arg Phe Thr Glu Thr Tyr Asp Ala Gly Leu Gln Arg Arg Ile Glu
            100                 105                 110
Gln Tyr Ile Thr Ala Gln Val Thr Leu Gln Gly Leu Ser Asn Pro Ser
        115                 120                 125
Gly Ser Leu Ala Asp Gly Ser Gly Leu Gly Glu Pro Lys Phe Glu Leu
    130                 135                 140
Thr Leu Lys Pro Phe Thr Gly Asn Trp Gly Arg Pro Gln Arg Asp Gly
145                 150                 155                 160
Pro Ala Leu Arg Ala Ile Ala Leu Ile Gly Tyr Ser Lys Trp Leu Ile
                165                 170                 175
Asn Asn Asn Tyr Gln Ser Thr Val Ser Asn Val Ile Trp Pro Ile Val
            180                 185                 190
Arg Asn Asp Leu Asn Tyr Val Ala Gln Tyr Trp Asn Gln Thr Gly Phe
        195                 200                 205
Asp Leu Trp Glu Glu Val Asn Gly Ser Ser Phe Phe Thr Val Ala Asn
    210                 215                 220
Gln His Arg Ala Leu Val Glu Gly Ala Thr Leu Ala Ala Thr Leu Gly
225                 230                 235                 240
Gln Ser Gly Ser Ala Tyr Ser Ser Val Ala Pro Gln Val Leu Cys Phe
                245                 250                 255
Leu Gln Arg Phe Trp Val Ser Ser Gly Gly Tyr Val Asp Ser Asn Ile
            260                 265                 270
Asn Thr Asn Glu Gly Arg Thr Gly Lys Asp Val Asn Ser Val Leu Thr
        275                 280                 285
Ser Ile His Thr Phe Asp Pro Asn Leu Gly Cys Asp Ala Gly Thr Phe
    290                 295                 300
Gln Pro Cys Ser Asp Lys Ala Leu Ser Asn Leu Lys Val Val Val Asp
305                 310                 315                 320
Ser Phe Arg Ser Ile Tyr Gly Val Asn Lys Gly Ile Pro Ala Gly Ala
                325                 330                 335
Ala Val Ala Ile Gly Arg Tyr Ala Glu Asp Val Tyr Tyr Asn Gly Asn
            340                 345                 350
Pro Trp Tyr Leu Ala Thr Phe Ala Ala Ala Glu Gln Leu Tyr Asp Ala
        355                 360                 365
Ile Tyr Val Trp Lys Lys Thr Gly Ser Ile Thr Val Thr Ala Thr Ser
    370                 375                 380
Leu Ala Phe Phe Gln Glu Leu Val Pro Gly Val Thr Ala Gly Thr Tyr
385                 390                 395                 400
Ser Ser Ser Ser Ser Thr Phe Thr Asn Ile Ile Asn Ala Val Ser Thr
                405                 410                 415
Tyr Ala Agp Gly Phe Leu Ser Glu Ala Ala Lys Tyr Val Pro Ala Asp
            420                 425                 430
Gly Ser Leu Ala Glu Gln Phe Asp Arg Asn Ser Gly Thr Pro Leu Ser
        435                 440                 445
Ala Leu His Leu Thr Trp Ser Tyr Ala Ser Phe Leu Thr Ala Thr Ala
    450                 455                 460
Arg Arg Ala Gly Ile Val Pro Pro Ser Trp Ala Asn Ser Ser Ala Ser
465                 470                 475                 480
Thr Ile Pro Ser Thr Cys Ser Gly Ala Ser Val Val Gly Ser Tyr Ser
                485                 490                 495
Arg Pro Thr Ala Thr Ser Phe Pro Pro Ser Gln Thr Pro Lys Pro Gly
            500                 505                 510
Val Pro Ser Gly Thr Pro Tyr Thr Pro Leu Pro Cys Ala Thr Pro Thr
        515                 520                 525
Ser Val Ala Val Thr Phe His Glu Leu Val Ser Thr Gln Phe Gly Gln
    530                 535                 540
Thr Val Lys Val Ala Gly Asn Ala Ala Ala Leu Gly Asn Trp Ser Thr
545                 550                 555                 560
Ser Ala Ala Val Ala Leu Asp Ala Val Asn Tyr Ala Asp Asn His Pro
                565                 570                 575
Leu Trp Ile Gly Thr Val Asn Leu Glu Ala Gly Asp Val Val Glu Tyr
            580                 585                 590
Lys Tyr Ile Asn Val Gly Gln Asp Gly Ser Val Thr Trp Glu Ser Asp
        595                 600                 605
Pro Asn His Thr Tyr Thr Val Pro Ala Val Ala Cys Val Thr Gln Val
    610                 615                 620
Val Lys Glu Asp Thr Trp Gln Ser
625                 630
 
<210>2
<211>.599
<212>PRT
<213>里氏木霉
 
<400>2
Ser Val Asp Asp Phe Ile Ser Thr Glu Thr Pro Ile Ala Leu Asn Asn
1               5                   10                  15
Leu Leu Cys Asn Val Gly Pro Asp Gly Cys Arg Ala Phe Gly Thr Ser
            20                  25                  30
Ala Gly Ala Val Ile Ala Ser Pro Ser Thr Ile Asp Pro Asp Tyr Tyr
        35                  40                  45
Tyr Met Trp Thr Arg Asp Ser Ala Leu Val Phe Lys Asn Leu Ile Asp
    50                  55                  60
Arg Phe Thr Glu Thr Tyr Asp Ala Gly Leu Gln Arg Arg Ile Glu Gln
65                  70                  75                  80
Tyr Ile Thr Ala Gln Val Thr Leu Gln Gly Leu Ser Asn Pro Ser Gly
                85                  90                  95
Ser Leu Ala Asp Gly Ser Gly Leu Gly Glu Pro Lys Phe Glu Leu Thr
            100                 105                 110
Leu Lys Pro Phe Thr Gly Asn Trp Gly Arg Pro Gln Arg Asp Gly Pro
        115                 120                 125
Ala Leu Arg Ala Ile Ala Leu Ile Gly Tyr Ser Lys Trp Leu Ile Asn
    130                 135                 140
Asn Asu Tyr Gln Ser Thr Val Ser Asn Val Ile Trp Pro Ile Val Arg
145                 150                 155                 160
Asn Asp Leu Asn Tyr Val Ala Gln Tyr Trp Asn Gln Thr Gly Phe Asp
                165                 170                 175
Leu Trp Glu Glu Val Asn Gly Ser Ser Phe Phe Thr Val Ala Asn Gln
            180                 185                 190
His Arg Ala Leu Val Glu Gly Ala Thr Leu Ala Ala Thr Leu Gly Gln
        195                 200                 205
Ser Gly Ser Ala Tyr Ser Ser Val Ala Pro Gln Val Leu Cys Phe Leu
    210                 215                 220
Gln Arg Phe Trp Val Ser Ser Gly Gly Tyr Val Asp Ser Asn Ile Asn
225                 230                 235                 240
Thr Asn Glu Gly Arg Thr Gly Lys Asp Val Asn Ser Val Leu Thr Ser
                245                 250                 255
Ile His Thr Phe Asp Pro Agn Leu Gly Cys Asp Ala Gly Thr Phe Gln
            260                 265                 270
Pro Cys Ser Asp Lys Ala Leu Ser Asn Leu Lys Val Val Val Asp Ser
        275                 280                 285
Phe Arg Ser Ile Tyr Gly Val Asn Lys Gly Ile Pro Ala Gly Ala Ala
    290                 295                 300
Val Ala Ile Gly Arg Tyr Ala Glu Asp Val Tyr Tyr Asn Gly Asn Pro
305                 310                 315                 320
Trp Tyr Leu Ala Thr Phe Ala Ala Ala Glu Gln Leu Tyr Asp Ala Ile
                325                 330                 335
Tyr Val Trp Lys Lys Thr Gly Ser Ile Thr Val Thr Ala Thr Ser Leu
            340                 345                 350
Ala Phe Phe Gln Glu Leu Val Pro Gly Val Thr Ala Gly Thr Tyr Ser
        355                 360                 365
Ser Ser Ser Ser Thr Phe Thr Asn Ile Ile Asn Ala Val Ser Thr Tyr
    370                 375                 380
Ala Asp Gly Phe Leu Ser Glu Ala Ala Lys Tyr Val Pro Ala Asp Gly
385                 390                 395                 400
Ser Leu Ala Glu Gln Phe Asp Arg Asn Ser Gly Thr Pro Leu Ser Ala
                405                 410                 415
Leu His Leu Thr Trp Ser Tyr Ala Ser Phe Leu Thr Ala Thr Ala Arg
            420                 425                 430
Arg Ala Gly Ile Val Pro Pro Ser Trp Ala Asn Ser Ser Ala Ser Thr
        435                 440                 445
Ile Pro Ser Thr Cys Ser Gly Ala Ser Val Val Gly Ser Tyr Ser Arg
    450                 455                 460
Pro Thr Ala Thr Ser Phe Pro Pro Ser Gln Thr Pro Lys Pro Gly Val
465                 470                 475                 480
Pro Ser Gly Thr Pro Tyr Thr Pro Leu Pro Cys Ala Thr Pro Thr Ser
                485                 490                 495
Val Ala Val Thr Phe His Glu Leu Val Ser Thr Gln Phe Gly Gln Thr
            500                 505                 510
Val Lys Val Ala Gly Asn Ala Ala Ala Leu Gly Asn Trp Ser Thr Ser
        515                 520                 525
Ala Ala Val Ala Leu Asp Ala Val Asn Tyr Ala Asp Asn His Pro Leu
    530                 535                 540
Trp Ile Gly Thr Val Asn Leu Glu Ala Gly Asp Val Val Glu Tyr Lys
545                 550                 555                 560
Tyr Ile Asn Val Gly Gln Asp Gly Ser Val Thr Trp Glu Ser Asp Pro
                565                 570                 575
Asn His Thr Tyr Thr Val Pro Ala Val Ala Cys Val Thr Gln Val Val
            580                 585                 590
Lys Glu Asp Thr Trp Gln Ser
        595
<210>3
<211>453
<212>PRT
<213>里氏木霉
 
<400>3
Ser Val Asp Asp Phe Ile Ser Thr Glu Thr Pro Ile Ala Leu Asn Asn
1               5                   10                  15
Leu Leu Cys Asn Val Gly Pro Asp Gly Cys Arg Ala Phe Gly Thr Ser
            20                  25                  30
Ala Gly Ala Val Ile Ala Ser Pro Ser Thr Ile Asp Pro Asp Tyr Tyr
        35                  40                  45
Tyr Met Trp Thr Arg Asp Ser Ala Leu Val Phe Lys Asn Leu Ile Asp
    50                  55                  60
Arg Phe Thr Glu Thr Tyr Asp Ala Gly Leu Gln Arg Arg Ile Glu Gln
65                  70                  75                  80
Tyr Ile Thr Ala Gln Val Thr Leu Gln Gly Leu Ser Asn Pro Ser Gly
                85                  90                  95
Ser Leu Ala Asp Gly Ser Gly Leu Gly Glu Pro Lys Phe Glu Leu Thr
            100                 105                 110
Leu Lys Pro Phe Thr Gly Asn Trp Gly Arg Pro Gln Arg Asp Gly Pro
        115                 120                 125
Ala Leu Arg Ala Ile Ala Leu Ile Gly Tyr Ser Lys Trp Leu Ile Asn
    130                 135                 140
Asn Agn Tyr Gln Ser Thr Val Ser Asn Val Ile Trp Pro Ile Val Arg
145                 150                 155                 160
Asn Asp Leu Asn Tyr Val Ala Gln Tyr Trp Asn Gln Thr Gly Phe Asp
                165                 170                 175
Leu Trp Glu Glu Val Asn Gly Ser Ser Phe Phe Thr Val Ala Asn Gln
            180                 185                 190
His Arg Ala Leu Val Glu Gly Ala Thr Leu Ala Ala Thr Leu Gly Gln
        195                 200                 205
Ser Gly Ser Ala Tyr Ser Ser Val Ala Pro Gln Val Leu Cys Phe Leu
    210                 215                 220
Gln Arg Phe Trp Val Ser Ser Gly Gly Tyr Val Asp Ser Asn Ile Asn
225                 230                 235                 240
Thr Asn Glu Gly Arg Thr Gly Lys Asp Val Asn Ser Val Leu Thr Ser
                245                 250                 255
Ile His Thr Phe Asp Pro Asn Leu Gly Cys Asp Ala Gly Thr Phe Gln
            260                 265                 270
Pro Cys Ser Asp Lys Ala Leu Ser Asn Leu Lys Val Val Val Asp Ser
        275                 280                 285
Phe Arg Ser Ile Tyr Gly Val Asn Lys Gly Ile Pro Ala Gly Ala Ala
    290                 295                 300
Val Ala Ile Gly Arg Tyr Ala Glu Asp Val Tyr Tyr Asn Gly Asn Pro
305                 310                 315                 320
Trp Tyr Leu Ala Thr Phe Ala Ala Ala Glu Gln Leu Tyr Asp Ala Ile
                325                 330                 335
Tyr Val Trp Lys Lys Thr Gly Ser Ile Thr Val Thr Ala Thr Ser Leu
            340                 345                 350
Ala Phe Phe Gln Glu Leu Val Pro Gly Val Thr Ala Gly Thr Tyr Ser
        355                 360                 365
Ser Ser Ser Ser Thr Phe Thr Asn Ile Ile Asn Ala Val Ser Thr Tyr
    370                 375                 380
Ala Asp Gly Phe Leu Ser Glu Ala Ala Lys Tyr Val Pro Ala Asp Gly
385                 390                 395                 400
Ser Leu Ala Glu Gln Phe Asp Arg Asn Ser Gly Thr Pro Leu Ser Ala
                405                 410                 415
Leu His Leu Thr Trp Ser Tyr Ala Ser Phe Leu Thr Ala Thr Ala Arg
            420                 425                 430
Arg Ala Gly Ile Val Pro Pro Ser Trp Ala Asn Ser Ser Ala Ser Thr
        435                 440                 445
Ile Pro Ser Thr Cys
    450
 
<210>4
<211>1899
<212>DNA
<213>里氏木霉
 
<400>4
atgcacgtcc tgtcgactgc ggtgctgctc ggctccgttg ccgttcaaaa ggtcctggga    60
agaccaggat caagcggtct gtccgacgtc accaagaggt ctgttgacga cttcatcagc    120
accgagacgc ctattgcact gaacaatctt ctttgcaatg ttggtcctga tggatgccgt    180
gcattcggca catcagctgg tgcggtgatt gcatctccca gcacaattga cccggactac    240
tattacatgt ggacgcgaga tagcgctctt gtcttcaaga acctcatcga ccgcttcacc    300
gaaacgtacg atgcgggcct gcagcgccgc atcgagcagt acattactgc ccaggtcact    360
ctccagggcc tctctaaccc ctcgggctcc ctcgcggacg gctctggtct cggcgagccc    420
aagtttgagt tgaccctgaa gcctttcacc ggcaactggg gtcgaccgca gcgggatggc    480
ccagctctgc gagccattgc cttgattgga tactcaaagt ggctcatcaa caacaactat    540
cagtcgactg tgtccaacgt catctggcct attgtgcgca acgacctcaa ctatgttgcc    600
cagtactgga accaaaccgg ctttgacctc tgggaagaag tcaatgggag ctcattcttt    660
actgttgcca accagcaccg agcacttgtc gagggcgcca ctcttgctgc cactcttggc    720
cagtcgggaa gcgcttattc atctgttgct ccccaggttt tgtgctttct ccaacgattc    780
tgggtgtcgt ctggtggata cgtcgactcc aacatcaaca ccaacgaggg caggactggc    840
aaggatgtca actccgtcct gacttccatc cacaccttcg atcccaacct tggctgtgac    900
gcaggcacct tccagccatg cagtgacaaa gcgctctcca acctcaaggt tgttgtcgac    960
tccttccgct ccatctacgg cgtgaacaag ggcattcctg ccggtgctgc cgtcgccatt    1020
ggccggtatg cagaggatgt gtactacaac ggcaaccctt ggtatcttgc tacatttgct    1080
gctgccgagc agctgtacga tgccatctac gtctggaaga agacgggctc catcacggtg    1140
accgccacct ccctggcctt cttccaggag cttgttcctg gcgtgacggc cgggacctac    1200
tccagcagct cttcgacctt taccaacatc atcaacgccg tctcgacata cgccgatggc    1260
ttcctcagcg aggctgccaa gtacgtcccc gccgacggtt cgctggccga gcagtttgac    1320
cgcaacagcg gcactccgct gtctgcgctt cacctgacgt ggtcgtacgc ctcgttcttg    1380
acagccacgg cccgtcgggc tggcatcgtg cccccctcgt gggccaacag cagcgctagc    1440
acgatcccct cgacgtgctc cggcgcgtcc gtggtcggat cctactcgcg tcccaccgcc    1500
acgtcattcc ctccgtcgca gacgcccaag cctggcgtgc cttccggtac tccctacacg    1560
cccctgccct gcgcgacccc aacctccgtg gccgtcacct tccacgagct cgtgtcgaca    1620
cagtttggcc agacggtcaa ggtggcgggc aacgccgcgg ccctgggcaa ctggagcacg    1680
agcgccgccg tggctctgga cgccgtcaac tatgccgata accaccccct gtggattggg    1740
acggtcaacc tcgaggctgg agacgtcgtg gagtacaagt acatcaatgt gggccaagat    1800
ggctccgtga cctgggagag tgatcccaac cacacttaca cggttcctgc ggtggcttgt    1860
gtgacgcagg ttgtcaagga ggacacctgg cagtcgtaa                           1899
 
<210>5
<211>448
<212>PRT
<213>泡盛曲霉
 
<400>5
Ala Thr Leu Asp Ser Trp Leu Ser Asn Glu Ala Thr Val Ala Arg Thr
1               5                   10                  15
Ala Ile Leu Asn Asn Ile Gly Ala Asp Gly Ala Trp Val Ser Gly Ala
            20                  25                  30
Asp Ser Gly Ile Val Val Ala Ser Pro Ser Thr Asp Asn Pro Asp Tyr
        35                  40                  45
Phe Tyr Thr Trp Thr Arg Asp Ser Gly Leu Val Ile Lys Thr Leu Val
    50                  55                  60
Asp Leu Phe Arg Asn Gly Asp Thr Asp Leu Leu Ser Thr Ile Glu Asn
65                  70                  75                  80
Tyr Ile Ser Ser Gln Ala Ile Val Gln Gly Ile Ser Asn Pro Ser Gly
                85                  90                  95
Asp Leu Ser Ser Gly Gly Leu Gly Glu Pro Lys Phe Asn Val Asp Glu
            100                 105                 110
Thr Ala Tyr Thr Gly Ser Trp Gly Arg Pro Gln Arg Asp Gly Pro Ala
        115                 120                 125
Leu Arg Ala Thr Ala Met Ile Gly Phe Arg Gln Trp Leu Leu Asp Asn
    130                 135                 140
Gly Tyr Thr Ser Ala Ala Thr Glu Ile Val Trp Pro Leu Val Arg Asn
145                 150                 155                 160
Asp Leu Ser Tyr Val Ala Gln Tyr Trp Asn Gln Thr Gly Tyr Asp Leu
                165                 170                 175
Trp Glu Glu Val Asn Gly Ser Ser Phe Phe Thr Ile Ala Val Gln His
            180                 185                 190
Arg Ala Leu Val Glu Gly Ser Ala Phe Ala Thr Ala Val Gly Ser Ser
        195                 200                 205
Cys Ser Trp Cys Asp Ser Gln Ala Pro Gln Ile Leu Cys Tyr Leu Gln
    210                 215                 220
Ser Phe Trp Thr Gly Glu Tyr Ile Leu Ala Asn Phe Asp Ser Ser Arg
225                 230                 235                 240
Ser Gly Lys Asp Thr Asn Thr Leu Leu Gly Ser Ile His Thr Phe Asp
                245                 250                 255
Pro Glu Ala Gly Cys Asp Asp Ser Thr Phe Gln Pro Cys Ser Pro Arg
            260                 265                 270
Ala Leu Ala Asn His Lys Glu Val Val Asp Ser Phe Arg Ser Ile Tyr
        275                 280                 285
Thr Leu Asn Asp Gly Leu Ser Asp Ser Glu Ala Val Ala Val Gly Arg
    290                 295                 300
Tyr Pro Lys Agp Ser Tyr Tyr Asn Gly Asn Pro Trp Phe Leu Cys Thr
305                 310                 315                 320
Leu Ala Ala Ala Glu Gln Leu Tyr Asp Ala Leu Tyr Gln Trp Asp Lys
                325                 330                 335
Gln Gly Ser Leu Glu Ile Thr Asp Val Ser Leu Asp Phe Phe Gln Ala
            340                 345                 350
Leu Tyr Ser Asp Ala Ala Thr Gly Thr Tyr Ser Ser Ser Ser Ser Thr
        355                 360                 365
Tyr Ser Ser Ile Val Asp Ala Val Lys Thr Phe Ala Asp Gly Phe Val
    370                 375                 380
Ser Ile Val Glu Thr His Ala Ala Ser Asn Gly Ser Leu Ser Glu Gln
385                 390                 395                 400
Tyr Agp Lys Ser Asp Gly Asp Glu Leu Ser Ala Arg Asp Leu Thr Trp
                405                 410                 415
Ser Tyr Ala Ala Leu Leu Thr Ala Asn Asn Arg Arg Asn Ser Val Met
            420                 425                 430
Pro Pro Ser Trp Gly Glu Thr Ser Ala Ser Ser Val Pro Gly Thr Cys
        435                 440                 445
 
<210>6
<211>449
<212>PRT
<213>黑曲霉
 
<400>6
Ala Thr Leu Asp Ser Trp Leu Ser Asn Glu Ala Thr Val Ala Arg Thr
1               5                   10                  15
Ala Ile Leu Asn Asn Ile Gly Ala Asp Gly Ala Trp Val Ser Gly Ala
            20                  25                  30
Agp Ser Gly Ile Val Val Ala Ser Pro Ser Thr Asp Asn Pro Asp Tyr
        35                  40                  45
Phe Tyr Thr Trp Thr Arg Asp Ser Gly Leu Val Leu Lys Thr Leu Val
    50                  55                  60
Asp Leu Phe Arg Asn Gly Asp Thr Ser Leu Leu Ser Thr Ile Glu Asn
65                  70                  75                  80
Tyr Ile Ser Ala Gln Ala Ile Val Gln Gly Ile Ser Asn Pro Ser Gly
                85                  90                  95
Asp Leu Ser Ser Gly Ala Gly Leu Gly Glu Pro Lys Phe Asn Val Asp
            100                 105                 110
Glu Thr Ala Tyr Thr Gly Ser Trp Gly Arg Pro Gln Arg Asp Gly Pro
        115                 120                 125
Ala Leu Arg Ala Thr Ala Met Ile Gly Phe Gly Gln Trp Leu Leu Asp
    130                 135                 140
Asn Gly Tyr Thr Ser Thr Ala Thr Asp Ile Val Trp Pro Leu Val Arg
145                 150                 155                 160
Asn Asp Leu Ser Tyr Val Ala Gln Tyr Trp Asn Gln Thr Gly Tyr Asp
                165                 170                 175
Leu Trp Glu Glu Val Asn Gly Ser Ser Phe Phe Thr Ile Ala Val Gln
            180                 185                 190
His Arg Ala Leu Val Glu Gly Ser Ala Phe Ala Thr Ala Val Gly Ser
        195                 200                 205
Ser Cys Ser Trp Cys Asp Ser Gln Ala Pro Glu Ile Leu Cys Tyr Leu
    210                 215                 220
Gln Ser Phe Trp Thr Gly Ser Phe Ile Leu Ala Asn Phe Asp Ser Ser
225                 230                 235                 240
Arg Ser Gly Lys Asp Ala Asn Thr Leu Leu Gly Ser Ile His Thr Phe
                245                 250                 255
Asp Pro Glu Ala Ala Cys Asp Asp Ser Thr Phe Gln Pro Cys Ser Pro
            260                 265                 270
Arg Ala Leu Ala Asn His Lys Glu Val Val Asp Ser Phe Arg Ser Ile
        275                 280                 285
Tyr Thr Leu Asn Asp Gly Leu Ser Asp Ser Glu Ala Val Ala Val Gly
    290                 295                 300
Arg Tyr Pro Glu Asp Thr Tyr Tyr Asn Gly Asn Pro Trp Phe Leu Cys
305                 310                 315                 320
Thr Leu Ala Ala Ala Glu Gln Leu Tyr Asp Ala Leu Tyr Gln Trp Asp
                325                 330                 335
Lys Gln Gly Ser Leu Glu Val Thr Asp Val Ser Leu Asp Phe Phe Lys
            340                 345                 350
Ala Leu Tyr Ser Asp Ala Ala Thr Gly Thr Tyr Ser Ser Ser Ser Ser
        355                 360                 365
Thr Tyr Ser Ser Ile Val Asp Ala Val Lys Thr Phe Ala Asp Gly Phe
    370                 375                 380
Val Ser Ile Val Glu Thr His Ala Ala Ser Asn Gly Ser Met Ser Glu
385                 390                 395                 400
Gln Tyr Asp Lys Ser Asp Gly Glu Gln Leu Ser Ala Arg Asp Leu Thr
                405                 410                 415
Trp Ser Tyr Ala Ala Leu Leu Thr Ala Asn Asn Arg Arg Asn Ser Val
            420                 425                 430
Val Pro Ala Ser Trp Gly Glu Thr Ser Ala Ser Ser Val Pro Gly Thr
        435                 440                 445
Cys
 
<210>7
<211>450
<212>PRT
<213>米曲霉
 
<400>7
Gln Ser Asp Leu Asn Ala Phe Ile Glu Ala Gln Thr Pro Ile Ala Lys
1               5                   10                  15
Gln Gly Tyr Leu Asn Asn Ile Gly Ala Asp Gly Lys Lsu Val Glu Gly
            20                  25                  30
Ala Ala Ala Gly Ile Val Tyr Ala Ser Pro Ser Lys Ser Asn Pro Asp
        35                  40                  45
Tyr Phe Tyr Thr Trp Thr Arg Asp Ala Gly Leu Thr Met Glu Glu Tyr
    50                  55                  60
Ile Glu Gln Phe Ile Gly Gly Asp Ala Thr Leu Glu Ser Thr Ile Gln
65                  70                  75                  80
Asn Tyr Val Asp Ser Gln Ala Asn Glu Gln Ala Val Ser Asn Pro Ser
                85                  90                  95
Gly Gly Leu Ser Asp Gly Ser Gly Leu Ala Glu Pro Lys Phe Tyr Tyr
            100                 105                 110
Asn Ile Ser Gln Phe Thr Asp Ser Trp Gly Arg Pro Gln Arg Asp Gly
        115                 120                 125
Pro Ala Leu Arg Ala Ser Ala Leu Ile Ala Tyr Gly Asn Ser Leu Ile
    130                 135                 140
Ser Ser Asp Lys Gln Ser Val Val Lys Ala Asn Ile Trp Pro Ile Tyr
145                 150                 155                 160
Gln Asn Asp Leu Ser Tyr Val Gly Gln Tyr Trp Asn Gln Thr Gly Phe
                165                 170                 175
Asp Leu Trp Glu Glu Val Gln Gly Ser Ser Phe Phe Thr Val Ala Val
            180                 185                 190
Gln His Lys Ala Leu Val Glu Gly Asp Ala Phe Ala Lys Ala Leu Gly
        195                 200                 205
Glu Glu Cys Gln Ala Cys Ser Val Ala Pro Gln Ile Leu Cys His Leu
    210                 215                 220
Gln Asp Phe Trp Asn Gly Ser Ala Val Leu Ser Asn Leu Pro Thr Asn
225                 230                 235                 240
Gly Arg Ser Gly Leu Asp Thr Asn Ser Leu Leu Gly Ser Ile His Thr
                245                 250                 255
Phe Asp Pro Ala Ala Ala Cys Asp Asp Thr Thr Phe Gln Pro Cys Ser
            260                 265                 270
Ser Arg Ala Leu Ser Asn His Lys Leu Val Val Asp Ser Phe Arg Ser
        275                 280                 285
Val Tyr Gly Ile Asn Asn Gly Arg Gly Ala Gly Lys Ala Ala Ala Val
    290                 295                 300
Gly Pro Tyr Ala Glu Asp Thr Tyr Gln Gly Gly Asn Pro Trp Tyr Leu
305                 310                 315                 320
Thr Thr Leu Val Ala Ala Glu Leu Leu Tyr Asp Ala Leu Tyr Gln Trp
                325                 330                 335
Asp Lys Gln Gly Gln Val Asn Val Thr Glu Thr Ser Leu Pro Phe Phe
            340                 345                 350
Lys Asp Leu Ser Ser Asn Val Thr Thr Gly Ser Tyr Ala Lys Ser Ser
        355                 360                 365
Ser Ala Tyr Glu Ser Leu Thr Ser Ala Val Lys Thr Tyr Ala Asp Gly
    370                 375                 380
Phe Ile Ser Val Val Gln Glu Tyr Thr Pro Asp Gly Gly Ala Leu Ala
385                 390                 395                 400
Glu Gln Tyr Ser Arg Asp Gln Gly Thr Pro Val Ser Ala Ser Asp Leu
                405                 410                 415
Thr Trp Ser Tyr Ala Ala Phe Leu Ser Ala Val Gly Arg Arg Asn Gly
            420                 425                 430
Thr Val Pro Ala Ser Trp Gly Ser Ser Thr Ala Asn Ala Val Pro Ser
        435                 440                 445
Gln Cys
    450
 
<210>8
<211>441
<212>PRT
<213>灰腐质霉
 
<400>8
Ala Ala Val Asp Thr Phe Ile Asn Thr Glu Lys Pro Ile Ala Trp Asn
1               5                   10                  15
Lys Leu Leu Ala Asn Ile Gly Pro Asn Gly Lys Ala Ala Pro Gly Ala
            20                  25                  30
Ala Ala Gly Val Val Ile Ala Ser Pro Ser Arg Thr Asp Pro Pro Tyr
        35                  40                  45
Phe Phe Thr Trp Thr Pro Asp Ala Ala Leu Val Leu Thr Gly Ile Ile
    50                  55                  60
Glu Ser Leu Gly His Asn Tyr Asn Thr Thr Leu Gln Gln Val Ser Asn
65                  70                  75                  80
Pro Ser Gly Thr Phe Ala Asp Gly Ser Gly Leu Gly Glu Ala Lys Phe
                85                  90                  95
Asn Val Asp Leu Thr Ala Phe Thr Gly Glu Trp Gly Arg Pro Gln Arg
            100                 105                 110
Asp Gly Pro Pro Leu Arg Ala Ile Ala Leu Ile Gln Tyr Ala Lys Trp
        115                 120                 125
Leu Ile Ala Asn Gly Tyr Lys Ser Thr Ala Lys Ser Val Val Trp Pro
    130                 135                 140
Val Val Lys Asn Asp Leu Ala Tyr Thr Ala Gln Tyr Trp Asn Glu Thr
145                 150                 155                 160
Gly Phe Asp Leu Trp Glu Glu Val Pro Gly Ser Ser Phe Phe Thr Ile
                165                 170                 175
Ala Ser Ser His Arg Ala Leu Thr Glu Gly Ala Tyr Leu Ala Ala Gln
            180                 185                 190
Leu Asp Thr Glu Cys Pro Pro Cys Thr Thr Val Ala Pro Gln Val Leu
        195                 200                 205
Cys Phe Gln Gln Ala Phe Trp Asn Ser Lys Gly Asn Tyr Val Val Ser
    210                 215                 220
Thr Ser Thr Ala Gly Glu Tyr Arg Ser Gly Lys Asp Ala Asn Ser Ile
225                 230                 235                 240
Leu Ala Ser Ile His Asn Phe Asp Pro Glu Ala Gly Cys Asp Asn Leu
                245                 250                 255
Thr Phe Gln Pro Cys Ser Glu Arg Ala Leu Ala Asn His Lys Ala Tyr
            260                 265                 270
Val Asp Ser Phe Arg Asn Leu Tyr Ala Ile Asn Lys Gly Ile Ala Gln
        275                 280                 285
Gly Lys Ala Val Ala Val Gly Arg Tyr Ser Glu Asp Val Tyr Tyr Asn
    290                 295                 300
Gly Asn Pro Trp Tyr Leu Ala Asn Phe Ala Ala Ala Glu Gln Leu Tyr
305                 310                 315                 320
Asp Ala Ile Tyr Val Trp Asn Lys Gln Gly Ser Ile Thr Val Thr Ser
                325                 330                 335
Val Ser Leu Pro Phe Phe Arg Asp Leu Val Ser Ser Val Ser Thr Gly
            340                 345                 350
Thr Tyr Ser Lys Ser Ser Ser Thr Phe Thr Asn Ile Val Asn Ala Val
        355                 360                 365
Lys Ala Tyr Ala Asp Gly Phe Ile Glu Val Ala Ala Lys Tyr Thr Pro
    370                 375                 380
Ser Asn Gly Ala Leu Ala Glu Gln Tyr Asp Arg Asn Thr Gly Lys Pro
385                 390                 395                 400
Asp Ser Ala Ala Asp Leu Thr Trp Ser Tyr Ser Ala Phe Leu Ser Ala
                405                 410                 415
Ile Asp Arg Arg Ala Gly Leu Val Pro Pro Ser Trp Arg Ala Ser Val
            420                 425                 430
Ala Lys Ser Gln Leu Pro Ser Thr Cys
        435                 440
 
<210>9
<211>452
<212>PRT
<213>Hypocrea vinosa
 
<400>9
Ser Val Asp Asp Phe Ile Asn Thr Gln Thr Pro Ile Ala Lsu Asn Asn
1               5                   10                  15
Leu Leu Cys Asn Val Gly Pro Asp Gly Cys Arg Ala Phe Gly Thr Ser
            20                  25                  30
Ala Gly Ala Val Ile Ala Ser Pro Ser Thr Thr Asp Pro Asp Tyr Tyr
        35                  40                  45
Tyr Met Trp Thr Arg Asp Ser Ala Leu Val Phe Lys Asn Ile Val Asp
     50                  55                  60
Arg Phe Thr Gln Gln Tyr Asp Ala Gly Leu Gln Arg Arg Ile Glu Gln
65                  70                  75                  80
Tyr Ile Ser Ala Gln Val Thr Leu Gln Gly Ile Ser Asn Pro Ser Gly
                85                  90                  95
Ser Leu Ser Asp Gly Ser Gly Leu Gly Glu Pro Lys Phe Glu Leu Thr
            100                 105                 110
Leu Ser Gln Phe Thr Gly Asn Trp Gly Arg Pro Gln Arg Asp Gly Pro
        115                 120                 125
Ala Leu Arg Ala Ile Ala Leu Ile Gly Tyr Ser Lys Trp Leu Ile Asn
    130                 135                 140
Asn Asn Tyr Gln Ser Thr Val Ser Asn Ile Ile Trp Pro Ile Val Arg
145                 150                 155                 160
Asn Asp Leu Asn Tyr Val Ala Gln Tyr Trp Asn Gln Thr Gly Phe Asp
                165                 170                 175
Leu Trp Glu Glu Val Asn Gly Ser Ser Phe Phe Thr Val Ala Agn Gln
            180                 185                 190
His Arg Ala Leu Val Glu Gly Ala Thr Leu Ala Ala Thr Leu Gly Gln
        195                 200                 205
Ser Gly Ser Thr Tyr Ser Ser Val Ala Pro Gln Ile Leu Cys Phe Leu
    210                 215                 220
Gln Arg Phe Trp Val Ser Gly Gly Tyr Ile Asp Ser Asn Ile Asn Thr
225                 230                 235                 240
Asn Glu Gly Arg Thr Gly Lys Asp Ala Asn Ser Leu Leu Ala Ser Ile
                245                 250                 255
His Thr Phe Asp Pro Ser Leu Gly Cys Asp Ala Ser Thr Phe Gln Pro
            260                 265                 270
Cys Ser Asp Lys Ala Leu Ser Asn Leu Lys Val Val Val Asp Ser Phe
        275                 280                 285
Arg Ser Ile Tyr Gly Val Asn Lys Gly Ile Pro Ala Gly Ser Ala Val
    290                 295                 300
Ala Ile Gly Arg Tyr Pro Glu Asp Val Tyr Phe Asn Gly.Asn Pro Trp
305                 310                 315                 320
Tyr Leu Ala Thr Phe Ala Ala Ala Glu Gln Leu Tyr Asp Ser Val Tyr
                325                 330                 335
Val Trp Lys Lys Thr Gly Ser Ile Thr Val Thr Ser Thr Ser Ser Ala
            340                 345                 350
Phe Phe Gln Glu Leu Val Pro Gly Val Ala Ala Gly Thr Tyr Ser Ser
        355                 360                 365
Ser Gln Ser Thr Phe Thr Ser Ile Ile Asn Ala Ile Ser Thr Tyr Ala
    370                 375                 380
Asp Gly Phe Leu Ser Glu Ala Ala Lys Tyr Val Pro Ala Asp Gly Ser
385                 390                 395                 400
Leu Ala Glu Gln Phe Asp Arg Asn Thr Gly Thr Pro Leu Ser Ala Val
                405                 410                 415
His Leu Thr Trp Ser Tyr Ala Ser Phe Leu Thr Ala Ala Ala Arg Arg
            420                 425                 430
Ala Gly Val Val Pro Pro Ser Trp Ala Ser Ser Gly Ala Asn Thr Val
        435                 440                 445
Pro Ser Ser Cys
    450
 
<210>10
<211>25
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>10
tcgcgttaac gctagcatgg atctc                                    25
 
<210>11
<211>31
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(10)..(11)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>11
tctgttgacn nsttcatcag caccgagacg c                             31
 
<210>12
<211>34
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(13)..(14)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>12
tctgttgacg acnnsatcag caccgagacg ccta                          34
 
<210>13
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>13
atcagcaccg agacgcctnn sgcactgaac aatcttcttt                    40
 
<210>14
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>14
ctttgcaatg ttggtcctnn sggatgccgt gcattcggca                    40
 
<210>15
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>15
cctgatggat gccgtgcann sggcacatca gctggtgcgg                    40
 
<210>16
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>16
attgcatctc ccagcacann sgacccggac tactattaca                    40
 
<210>17
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>17
gcatctccca gcacaattnn sccggactac tattacatgt                    40
 
<210>18
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>18
tctcccagca caattgacnn sgactactat tacatgtgga                    40
 
<210>19
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>19
cccagcacaa ttgacccgnn stactattac atgtggacgc                    40
 
<210>20
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>20
agcacaattg acccggacnn stattacatg tggacgcgag                    40
 
<210>21
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>21
attgacccgg actactatnn satgtggacg cgagatagcg                    40
 
<210>22
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>22
ccggactact attacatgnn sacgcgagat agcgctcttg                    40
 
<210>23
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>23
9accgcttca ccgaaacgnn sgatgcgggc ctgcagcgcc                    40
 
<210>24
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>24
acgtacgatg cgggcctgnn scgccgcatc gagcagtaca                    40
 
<210>25
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>25
tacgatgcgg gcctgcagnn scgcatcgag cagtacatta                    40
 
<210>26
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
<400>26
ctccagggcc tctctaacnn stcgggctcc ctcgcggacg                    40
 
<210>27
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>27
ccctcgggct ccctcgcgnn sggctctggt ctcggcgagc                    40
 
<210>28
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>28
aagtttgagt tgaccctgnn scctttcacc ggcaactggg                    40
 
<210>29
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>29
gagttgaccc tgaagcctnn saccggcaac tggggtcgac                    40
 
<210>30
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>30
ctgaagcctt tcaccggcnn stggggtcga ccgcagcggg                    40
 
<210>31
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>31
ttcaccggca actggggtnn sccgcagcgg gatggcccag                     40
 
<210>32
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>32
aactggggtc gaccgcagnn sgatggccca gctctgcgag                    40
 
<210>33
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>33
aagtggctca tcaacaacnn statcagtcg actgtgtcca                    40
 
<210>34
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>34
ctcatcaaca acaactatnn stcgactgtg tccaacgtca                    40
 
<210>35
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>35
ctcaactatg ttgcccagnn stggaaccaa accggctttg                    40
 
<210>36
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>36
gttgcccagt actggaacnn saccggcttt gacctctggg                    40
 
<210>37
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
<400>37
tactggaacc aaaccggcnn sgacctctgg gaagaagtca                    40
 
<210>38
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>38
caaaccggct ttgacctcnn sgaagaagtc aatgggagct                    40
 
<210>39
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>39
ggctttgacc tctgggaann sgtcaatggg agctcattct                    40
 
<210>40
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>40
tttgacctct gggaagaann saatgggagc tcattcttta                    40
 
<210>41
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>41
cttgctgcca ctcttggcnn stcgggaagc gcttattcat                    40
 
<210>42
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>42
actcttggcc agtcgggann sgcttattca tctgttgctc                    40
 
<210>43
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>43
tgctttctcc aacgattcnn sgtgtcgtct ggtggatacg                    40
 
<210>44
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>44
gactccaaca tcaacaccnn sgagggcagg actggcaagg                    40
 
<210>45
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>45
tccaacatca acaccaacnn sggcaggact ggcaaggatg                    40
<210>46
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>46
atcaacacca acgagggcnn sactggcaag gatgtcaact                    40
 
<210>47
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>47
gtcgactcct tccgctccnn stacggcgtg aacaagggca                    40
 
<210>48
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>48
tccttccgct ccatctacnn sgtgaacaag ggcattcctg                    40
 
<210>49
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>49
tccatctacg gcgtgaacnn sggcattcct gccggtgctg                    40
 
<210>50
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>50
gctgccgtcg ccattggcnn statgcagag gatgtgtact                    40
 
<210>51
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>51
gccgtcgcca ttggccggnn sgcagaggat gtgtactaca                    40
 
<210>52
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>52
attggccggt atgcagagnn sgtgtactac aacggcaacc                    40
 
<210>53
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>53
ggccggtatg cagaggatnn stactacaac ggcaaccctt                    40
 
<210>54
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>54
cggtatgcag aggatgtgnn stacaacggc aacccttggt                    40
 
<210>55
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>55
tatgcagagg atgtgtacnn saacggcaac ccttggtatc                    40
 
<210>56
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>56
gcagaggatg tgtactacnn sggcaaccct tggtatcttg                    40
<210>57
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>57
tactacaacg gcaaccctnn statcttgct acatttgctg                    40
 
<210>58
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>58
gatgccatct acgtctggnn saagacgggc tccatcacgg                    40
 
<210>59
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>59
gccatctacg tctggaagnn sacgggctcc atcacggtga                    40
 
<210>60
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>60
tccatcacgg tgaccgccnn stccctggcc ttcttccagg                    40
 
<210>61
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>61
acctccctgg ccttcttcnn sgagcttgtt cctggcgtga                    40
 
<210>62
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>62
gagcttgttc ctggcgtgnn sgccgggacc tactccagca                    40
 
<210>63
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>63
gtgacggccg ggacctacnn sagcagctct tcgaccttta                    40
 
<210>64
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>64
acggccggga cctactccnn sagctcttcg acctttacca                    40
 
<210>65
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>65
agctcttcga cctttaccnn satcatcaac gccgtctcga                    40
 
<210>66
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>66
ctcagcgagg ctgccaagnn sgtccccgcc gacggttcgc                    40
 
<210>67
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>67
gctgccaagt acgtccccnn sgacggttcg ctggccgagc                    40
<210>68
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>68
tacgtccccg ccgacggtnn sctggccgag cagtttgacc                    40
 
<210>69
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>69
ctggccgagc agtttgacnn saacagcggc actccgctgt                    40
 
<210>70
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>70
gccgagcagt ttgaccgcnn sagcggcact ccgctgtctg                    40
 
<210>71
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>71
tttgaccgca acagcggcnn sccgctgtct gcgcttcacc                    40
 
<210>72
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>72
actccgctgt ctgcgcttnn sctgacgtgg tcgtacgcct                    40
 
<210>73
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>73
tctgcgcttc acctgacgnn stcgtacgcc tcgttcttga                    40
 
<210>74
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>74
ttgacagcca cggcccgtnn sgctggcatc gtgcccccct                    40
 
<210>75
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>75
acggcccgtc gggctggcnn sgtgcccccc tcgtgggcca                    40
 
<210>76
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(19)..(20)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>76
agcgctagca cgatccccnn sacgtgctcc ggcgcgtccg                    40
 
<210>77
<211>24
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>77
gtaacatcag agattttgag acac                                     24
 
<210>78
<211>31
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>78
gcgtctcggt gctgatgaas nngtcaacag a                             31
 
<210>79
<211>34
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>79
taggcgtctc ggtgctgats nngtcgtcaa caga                          34
 
<210>80
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>80
aaagaagatt gttcagtgcs nnaggcgtct cggtgctgat                    40
 
<210>81
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>81
tgccgaatgc acggcatccs nnaggaccaa cattgcaaag                    40
 
<210>82
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>82
ccgcaccagc tgatgtgccs nntgcacggc atccatcagg                    40
 
<210>83
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>83
tgtaatagta gtccgggtcs nntgtgctgg gagatgcaat                    40
 
<210>84
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>84
acatgtaata gtagtccggs nnaattgtgc tgggagatgc                    40
<210>85
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>85
tccacatgta atagtagtcs nngtcaattg tgctgggaga                    40
 
<210>86
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>86
gcgtccacat gtaatagtas nncgggtcaa ttgtgctggg                    40
 
<210>87
<211>40
<212>DNA    
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>87
ctcgcgtcca catgtaatas nngtccgggt caattgtgct                    40
 
<210>88
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>88
cgctatctcg cgtccacats nnatagtagt ccgggtcaat                    40
 
<210>89
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>89
caagagcgct atctcgcgts nncatgtaat agtagtccgg                    40
 
<210>90
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>90
ggcgctgcag gcccgcatcs nncgtttcgg tgaagcggtc                    40
 
<210>91
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>91
tgtactgctc gatgcggcgs nncaggcccg catcgtacgt                    40
 
<210>92
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>92
taatgtactg ctcgatgcgs nnctgcaggc ccgcatcgta                    40
 
<210>93
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>93
cgtccgcgag ggagcccgas nngttagaga ggccctggag                    40
 
<210>94
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>94
gctcgccgag accagagccs nncgcgaggg agcccgaggg                    40
 
<210>95
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>95
cccagttgcc ggtgaaaggs nncagggtca actcaaactt                    40
<210>96
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22).
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>96
gtcgacccca gttgccggts nnaggcttca gggtcaactc                    40
 
<210>97
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>97
cccgctgcgg tcgaccccas nngccggtga aaggcttcag                    40
 
<210>98
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>98
ctgggccatc ccgctgcggs nnaccccagt tgccggtgaa                    40
 
<210>99
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>99
ctcgcagagc tgggccatcs nnctgcggtc gaccccagtt                    40
 
<210>100
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>100
tggacacagt cgactgatas nngttgttga tgagccactt                    40
 
<210>101
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>101
tgacgttgga cacagtcgas nnatagttgt tgttgatgag                    40
 
<210>102
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>102
caaagccggt ttggttccas nnctgggcaa catagttgag                    40
 
<210>103
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>103
cccagaggtc aaagccggts nngttccagt actgggcaac                    40
 
<210>104
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>104
tgacttcttc ccagaggtcs nngccggttt ggttccagta                    40
 
<210>105
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>105
agctcccatt gacttcttcs nngaggtcaa agccggtttg                    40
 
<210>106
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>106
agaatgagct cccattgacs nnttcccaga ggtcaaagcc                    40
<210>107
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>107
taaagaatga gctcccatts nnttcttccc agaggtcaaa                    40
 
<210>108
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>108
atgaataagc gcttcccgas nngccaagag tggcagcaag                    40
 
<210>109
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>109
gagcaacaga tgaataagcs nntcccgact ggccaagagt                    40
 
<210>110
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>110
cgtatccacc agacgacacs nngaatcgtt ggagaaagca                    40
 
<210>111
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>111
ccttgccagt cctgccctcs nnggtgttga tgttggagtc                    40
 
<210>112
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>112
catccttgcc agtcctgccs nngttggtgt tgatgttgga                    40
 
<210>113
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>113
agttgacatc cttgccagts nngccctcgt tggtgttgat                    40
 
<210>114
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>114
tgcccttgtt cacgccgtas nnggagcgga aggagtcgac                    40
 
<210>115
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>115
caggaatgcc cttgttcacs nngtagatgg agcggaagga                    40
 
<210>116
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>116
cagcaccggc aggaatgccs nngttcacgc cgtagatgga                    40
 
<210>117
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>117
agtacacatc ctctgcatas nngccaatgg cgacggcagc                    40
<210>118
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>118
tgtagtacac atcctctgcs nnccggccaa tggcgacggc                    40
 
<210>119
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>119
ggttgccgtt gtagtacacs nnctctgcat accggccaat                    40
 
<210>120
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>120
aagggttgcc gttgtagtas nnatcctctg cataccggcc                    40
 
<210>121
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>121
accaagggtt gccgttgtas nncacatcct ctgcataccg                    40
 
<210>122
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>122
gataccaagg gttgccgtts nngtacacat cctctgcata                    40
 
<210>123
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>123
caagatacca agggttgccs nngtagtaca catcctctgc                    40
 
<210>124
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>124
cagcaaatgt agcaagatas nnagggttgc cgttgtagta                    40
 
<210>125
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>125
ccgtgatgga gcccgtctts nnccagacgt agatggcatc                    40
 
<210>126
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>126
tcaccgtgat ggagcccgts nncttccaga cgtagatggc                    40
 
<210>127
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>127
cctggaagaa ggccagggas nnggcggtca ccgtgatgga                    40
 
<210>128
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>128
tcacgccagg aacaagctcs nngaagaagg ccagggaggt                    40
<210>129
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>129
tgctggagta ggtcccggcs nncacgccag gaacaagctc                    40
 
<210>130
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>130
taaaggtcga agagctgcts nngtaggtcc cggccgtcac                    40
 
<210>131
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>131
tggtaaaggt cgaagagcts nnggagtagg tcccggccgt                    40
 
<210>132
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>132
tcgagacggc gttgatgats nnggtaaagg tcgaagagct                    40
 
<210>133
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>133
gcgaaccgtc ggcggggacs nncttggcag cctcgctgag                    40
 
<210>134
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>134
gctcggccag cgaaccgtcs nnggggacgt acttggcagc                    40
 
<210>135
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>135
ggtcaaactg ctcggccags nnaccgtcgg cggggacgta                    40
 
<210>136
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>136
acagcggagt gccgctgtts nngtcaaact gctcggccag                    40
 
<210>137
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>137
cagacagcgg agtgccgcts nngcggtcaa actgctcggc                    40
 
<210>138
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>138
ggtgaagcgc agacagcggs nngccgctgt tgcggtcaaa                    40
 
<210>139
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>139
aggcgtacga ccacgtcags nnaagcgcag acagcggagt                    40
<210>140
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>140
tcaagaacga ggcgtacgas nncgtcaggt gaagcgcaga                    40
 
<210>141
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>141
aggggggcac gatgccagcs nnacgggccg tggctgtcaa                    40
 
<210>142
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>142
tggcccacga ggggggcacs nngccagccc gacgggccgt                    40
 
<210>143
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<220>
<221>经修饰的碱基
<222>(21)..(22)
<223>a,c,g,t,未知或者其它
 
<400>143
cggacgcgcc ggagcacgts nnggggatcg tgctagcgct                    40
 
<210>144
<211>33
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>144
gcatctccca gcacacgaga cccggactac tat                           33
 
<210>145
<211>33
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>145
gcatctccca gcacatacga cccggactac tat                           33
 
<210>146
<211>33
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>146
gatgcgggcc tgcagctgcg catcgagcag tac                           33
 
<210>147
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>147
ctgaagcctt tcaccggcac ctggggtcga ccgcagcggg                    40
 
<210>148
<211>39
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>148
tgaagccttt caccggctac tggggtcgac cgcagcggg                     39
 
<210>149
<211>40
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>149
ctgaagcctt tcaccggcga ctggggtcga ccgcagcggg                    40
<210>150
<211>36
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>150
agtggctcat caacaacgas tatcagtcga ctgtgt                        36
 
<210>151
<211>36
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>151
agtggctcat caacaacacc tatcagtcga ctgtgt                        36
 
<210>152
<211>34
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>152
gtggctcatc aacaatggta tcagtcgact gtgt                          34
 
<210>153
<211>36
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>153
agtggctcat caacaacctg tatcagtcga ctgtgt                        36
<210>154
<211>36
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>154
agtggctcat caacaactcc tatcagtcga ctgtgt                        36
 
<210>155
<211>38
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>155
ttgcccagta ctggaacgas accggctttg acctctgg                      38
 
<210>156
<211>38
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>156
ttgcccagta ctggaacstg accggctttg acctctgg                      38
 
<210>157
<211>38
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>157
ttgcccagta ctggaacacc accggctttg acctctgg                      38
<210>158
<211>38
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>158
ttgcccagta ctggaaccga accggctttg acctctgg                      38
 
<210>159
<211>38
<212>DNA
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的引物
 
<400>159
ttgcccagta ctggaactgc accggctttg acctctgg                      38
 
<210>160
<211>6
<212>PRT
<213>里氏木霉
 
<400>160
Ser Val Asp Asp Phe Ile
1               5
 
<210>161
<211>599
<212>PRT
<213>人工序列
 
<220>
<221>来源
<223>/注释=人工序列的描述:合成的多肽
 
<400>161
Ser Val Asp Asp Phe Ile Ser Thr Glu Thr Pro Ile Ala Leu Asn Asn
1               5                   10                  15
Leu Leu Cys Asn Val Gly Pro Asp Gly Cys Arg Ala Phe Gly Thr Ser
            20                  25                  30
Ala Gly Ala Val Ile Ala Ser Pro Ser Thr Ile Asp Pro Asp Tyr Tyr
        35                  40                  45
Tyr Met Trp Thr Arg Asp Ser Ala Leu Val Phe Lys Asn Leu Ile Asp
    50                  55                  60
Arg Phe Thr Glu Thr Tyr Asp Ala Gly Leu Gln Arg Arg Ile Glu Gln
65                  70                  75                  80
Tyr Ile Thr Ala.Gln Val Thr Leu Gln Gly Asn Ser Asn Pro Ser Gly
                85                  90                  95
Ser Leu Ala Asp Gly Ser Gly Leu Gly Glu Pro Lys Phe Glu Leu Thr
            100                 105                 110
Leu Lys Pro Phe Thr Gly Asn Trp Gly Arg Pro Gln Arg Asp Gly Pro
        115                 120                 125
Ala Leu Arg Ala Ile Ala Leu Ile Gly Tyr Ser Lys Trp Leu Ile Asn
    130                 135                 140
Asn Asn Tyr Gln Phe Thr Val Ser Asn Val Ile Trp Pro Ile Val Arg
145                 150                 155                 160
Asn Asp Leu Asn Tyr Val Ala Gln Tyr Trp Asn Gln Thr Gly Phe Asp
                165                 170                 175
Leu Trp Glu Glu Val Asn Gly Ser Ser Phe Phe Thr Val Ala Asn Gln
            180                 185                 190
His Arg Ala Leu Val Glu Gly Ala Thr Leu Ala Ala Thr Leu Gly Gln
        195                 200                 205
Ser Gly Ser Ala Tyr Ser Ser Val Ala Pro Gln Val Leu Cys Phe Leu
    210                 215                 220
Gln Arg Phe Trp Val Ser Ser Gly Gly Tyr Val Asp Ser Asn Ile Asn
225                 230                 235                 240
Thr Asn Glu Gly Arg Thr Gly Lys Asp Val Asn Ser Val Leu Thr Ser
                245                 250                 255
Ile His Thr Phe Asp Pro Asn Leu Gly Cys Asp Ala Gly Thr Phe Gln
            260                 265                 270
Pro Cys Ser Asp Lys Ala Leu Ser Asn Leu Lys Val Val Val Asp Ser
        275                 280                 285
Phe Arg Ser Ile Tyr Gly Val Asn Lys Gly Ile Pro Ala Gly Ala Ala
    290                 295                 300
Val Ala Ile Gly Arg Tyr Ala Glu Asp Val Tyr Tyr Asn Gly Asn Pro
305                 310                 315                 320
Trp Tyr Leu Ala Thr Phe Ala Ala Ala Glu Gln Leu Tyr Asp Ala Ile
                325                 330                 335
Tyr Val Trp Lys Lys Thr Gly Ser Ile Thr Val Thr Ala Thr Ser Leu
            340                 345                 350
Ala Phe Phe Gln Glu Leu Val Pro Gly Val Thr Ala Gly Thr Tyr Ser
        355                 360                 365
Ser Ser Ser Ser Thr Phe Thr Asn Ile Ile Asn Ala Val Ser Thr Tyr
    370                 375                 380
Ala Asp Gly Phe Leu Ser Glu Ala Ala Lys Tyr Val Pro Ala Asp Gly
385                 390                 395                 400
Ser Leu Ala Glu Gln Phe Asp Arg Asn Ser Gly Thr Pro Leu Ser Ala
                405                 410                 415
Leu His Leu Thr Trp Ser Tyr Ala Ser Phe Leu Thr Ala Thr Ala Arg
            420                 425                 430
Arg Ala Gly Ile Val Pro Pro Ser Trp Ala Asn Ser Ser Ala Ser Thr
        435                 440                 445
Ile Pro Ser Thr Cys Ser Gly Ala Ser Val Val Gly Ser Tyr Ser Arg
    450                 455                 460
Pro Thr Ala Thr Ser Phe Pro Pro Ser Gln Thr Pro Lys Pro Gly Val
465                 470                 475                 480
Pro Ser Gly Thr Pro Tyr Thr Pro Leu Pro Cys Ala Thr Pro Thr Ser
                485                 490                 495
Val Ala Val Thr Phe His Glu Leu Val Ser Thr Gln Phe Gly Gln Thr
            500                 505                 510
Val Lys Val Ala Gly Asn Ala Ala Ala Leu Gly Asn Trp Ser Thr Ser
        515                 520                 525
Ala Ala Val Ala Leu Asp Ala Val Asn Tyr Ala Asp Asn His Pro Leu
    530                 535                 540
Trp Ile Ala Thr Val Asn Leu Glu Ala Gly Asp Val Val Glu Tyr Lys
545                 550                 555                 560
Tyr Ile Asn Val Gly Gln Asp Gly Ser Val Thr Trp Glu Ser Asp Pro
                565                 570                 575
Asn Hig Thr Tyr Thr Val Pro Ala Val Ala Cys Val Thr Gln Val Val
             580                 585                 590
Lys Glu Asp Thr Trp Gln Ser
        595
 
<210>162
<211>109
<212>PRT
<213>里氏木霉
 
<400>162
Cys Ala Thr Pro Thr Ser Val Ala Val Thr Phe His Glu Leu Val Ser
1               5                   10                  15
Thr Gln Phe Gly Gln Thr Val Lys Val Ala Gly Asn Ala Ala Ala Leu
            20                  25                  30
Gly Asn Trp Ser Thr Ser Ala Ala Val Ala Leu Asp Ala Val Asn Tyr
        35                  40                  45
Ala Asp Asn His Pro Leu Trp Ile Gly Thr Val Asn Leu Glu Ala Gly
    50                  55                  60
Asp Val Val Glu Tyr Lys Tyr Ile Asn Val Gly Gln Asp Gly Ser Val
65                  70                  75                  80
Thr Trp Glu Ser Asp Pro Asn His Thr Tyr Thr Val Pro Ala Val Ala
                85                  90                  95
Cys Val Thr Gln Val Val Lys Glu Asp Thr Trp Gln Ser
            100                 105
 
<210>163
<211>112
<212>PRT
<213>灰腐质霉
 
<400>163
Cys Ala Asp Ala Ser Glu Val Tyr Val Thr Phe Asn Glu Arg Val Ser
1               5                   10                  15
Thr Ala Trp Gly Glu Thr Ile Lys Val Val Gly Asn Val Pro Ala Leu
            20                  25                  30
Gly Asn Trp Asp Thr Ser Lys Ala Val Thr Leu Ser Ala Ser Gly Tyr
        35                  40                  45
Lys Ser Asn Asp Pro Leu Trp Ser Ile Thr Val Pro Ile Lys Ala Thr
    50                  55                  60
Gly Ser Ala Val Gln Tyr Lys Tyr Ile Lys Val Gly Thr Asn Gly Lys
65                  70                  75                  80
Ile Thr Trp Glu Ser Asp Pro Asn Arg Ser Ile Thr Leu Gln Thr Ala
                85                  90                  95
Ser Ser Ala Gly Lys Cys Ala Ala Gln Thr Val Asn Asp Ser Trp Arg
            100                 105                 110
 
<210>164
<211>108
<212>PRT
<213>太瑞斯梭孢壳霉
 
<400>164
Cys Ser Thr Pro Thr Ala Val Ala Val Thr Phe Asn Glu Arg Val Thr
1               5                   10                  15
Thr Gln Trp Gly Gln Thr Ile Lys Val Val Gly Asp Ala Ala Ala Leu
            20                  25                  30
Gly Gly Trp Asp Thr Ser Lys Ala Val Pro Leu Ser Ala Ala Gly Tyr
        35                  40                  45
Thr Ala Ser Asp Pro Leu Trp Ser Gly Thr Val Asp Leu Pro Ala Gly
    50                  55                  60
Leu Ala Val Gln Tyr Lys Tyr Ile Asn Val Ala Ala Asp Gly Gly Val
65                  70                  75                  80
Thr Trp Glu Ala Asp Pro Asn His Ser Phe Thr Val Pro Ala Ala Cys
                85                  90                  95
Gly Thr Thr Ala Val Thr Arg Asp Asp Thr Trp Gln
            100                 105
 
<210>165
<211>109
<212>PRT
<213>疏棉状嗜热丝孢菌
 
<400>165
Cys Thr Pro Pro Ser Glu Val Thr Leu Thr Phe Asn Ala Leu Val Asp
1               5                   10                  15
Thr Ala Phe Gly Gln Asn Ile Tyr Leu Val Gly Ser Ile Pro Glu Leu
            20                  25                  30
Gly Ser Trp Asp Pro Ala Asn Ala Leu Leu Met Ser Ala Lys Ser Trp
        35                  40                  45
Thr Ser Gly Asn Pro Val Trp Thr Leu Ser Ile Ser Leu Pro Ala Gly
    50                  55                  60
Thr Ser Phe Glu Tyr Lys Phe Ile Arg Lys Asp Asp Gly Ser Ser Asp
65                  70                  75                  80
Val Val Trp Glu Ser Asp Pro Asn Arg Ser Tyr Asn Val Pro Lys Asp
                85                  90                  95
Cys Gly Ala Asn Thr Ala Thr Val Asn Ser Trp Trp Arg
            100                 105
 
<210>166
<211>108
<212>PRT
<213>埃默森踝节菌
 
<400>166
Cys Thr Thr Pro Thr Ser Val Ala Val Thr Phe Asp Glu Ile Val Ser
1               5                   10                  15
Thr Ser Tyr Gly Glu Thr Ile Tyr Leu Ala Gly Ser Ile Pro Glu Leu
            20                  25                  30
Gly Asn Trp Ser Thr Ala Ser Ala Ile Pro Leu Arg Ala Asp Ala Tyr
        35                  40                  45
Thr Asn Ser Asn Pro Leu Trp Tyr Val Thr Val Asn Leu Pro Pro Gly
    50                  55                  60
Thr Ser Phe Glu Tyr Lys Phe Phe Lys Asn Gln Thr Asp Gly Thr Ile
65                  70                  75                  80
Val Trp Glu Asp Asp Pro Asn Arg Ser Tyr Thr Val Pro Ala Tyr Cys
                85                  90                  95
Gly Gln Thr Thr Ala Ile Leu Asp Asp Ser Trp Gln
            100                 105
 
<210>167
<211>108
<212>PRT
<213>黑曲霉
 
<400>167
Cys Thr Thr Pro Thr Ala Val Ala Val Thr Phe Asp Leu Thr Ala Thr
1               5                   10                  15
Thr Thr Tyr Gly Glu Asn Ile Tyr Leu Val Gly Ser Ile Ser Gln Leu
            20                  25                  30
Gly Asp Trp Glu Thr Ser Asp Gly Ile Ala Leu Ser Ala Asp Lys Tyr
        35                  40                  45
Thr Ser Ser Asp Pro Leu Trp Tyr Val Thr Val Thr Leu Pro Ala Gly
    50                  55                  60
Glu Ser Phe Glu Tyr Lys Phe Ile Arg Ile Glu Ser Asp Asp Ser Val
65                  70                  75                  80
Glu Trp Glu Ser Asp Pro Asn Arg Glu Tyr Thr Val Pro Gln Ala Cys
                85                  90                  95
Gly Thr Ser Thr Ala Thr Val Thr Asp Thr Trp Arg
            100                 105
 
<210>168
<211>108
<212>PRT
<213>泡盛曲霉
 
<400>168
Cys Thr Thr Pro Thr Ala Val Ala Val Thr Phe Asp Leu Thr Ala Thr
1               5                   10                  15
Thr Thr Tyr Gly Glu Asn Ile Tyr Leu Val Gly Ser Ile Ser Gln Leu
            20                  25                  30
Gly Asp Trp Asp Thr Ser Asp Gly Ile Ala Leu Ser Ala Asp Lys Tyr
        35                  40                  45
Thr Ser Ser Asn Pro Leu Trp Tyr Val Thr Val Thr Leu Pro Ala Gly
    50                  55                  60
Glu Ser Phe Glu Tyr Lys Phe Ile Arg Ile Glu Ser Asp Asp Ser Val
65                  70                  75                  80
Glu Trp Glu Ser Asp Pro Asn Arg Glu Tyr Thr Val Pro Gln Ala Cys
                85                  90                  95
Gly Glu Ser Thr Ala Thr Val Thr Asp Thr Trp Arg
            100                 105

Claims (30)

1.在下述残基位置处包含两个或多于两个的氨基酸取代的葡糖淀粉酶变体,所述残基位置对应于SEQ ID NO:2的第61、73、417、430、431、503、511、535、539或563位,或亲本葡糖淀粉酶的等价位置,其中葡糖淀粉酶变体与SEQ ID NO:1、2、3、5、6、7、8或9具有至少80%序列同一性。
2.在下述残基位置处包含氨基酸取代的葡糖淀粉酶变体,所述残基位置对应于SEQ ID NO:2的I43Q/D44C、D44C/G294C、I43Q/G294C或I43Q/D44C/G294C,或亲本葡糖淀粉酶的等价位置,其中葡糖淀粉酶变体与SEQ ID NO:1、2、3、5、6、7、8或9具有至少80%序列同一性。
3.权利要求1或2的葡糖淀粉酶变体,其中亲本葡糖淀粉酶具有与SEQID NO:1、2、3、5、6、7、8或9有至少80%序列同一性的催化结构域,或者具有与SEQ ID NO:1或2有至少80%序列同一性的淀粉结合结构域。
4.权利要求1或2的葡糖淀粉酶变体,其中葡糖淀粉酶变体具有与SEQID NO:1、2、3、5、6、7、8或9至少85%序列同一性。
5.权利要求1或2的葡糖淀粉酶变体,其中葡糖淀粉酶变体具有与SEQID NO:1、2、3、5、6、7、8或9至少90%序列同一性。
6.权利要求1或2的葡糖淀粉酶变体,其中葡糖淀粉酶变体具有与SEQID NO:1、2、3、5、6、7、8或9至少95%序列同一性。
7.权利要求1或2的葡糖淀粉酶变体,其中葡糖淀粉酶变体具有与SEQID NO:1、2、3、5、6、7、8或9至少99.5%序列同一性。
8.权利要求1或2的葡糖淀粉酶变体,其中亲本葡糖淀粉酶是SEQ IDNO:1或2。
9.权利要求1的葡糖淀粉酶变体,其中葡糖淀粉酶变体还在下述残基位置处包含一个或多个氨基酸取代,所述残基位置对应于SEQ ID NO:2的第4、5、12、24、43、44、45、46、47、49、51、70、75、6、94、100、108、114、116、119、122、124、125、137、141、143、146、148、169、171、172、175、178、180、181、208、211、228、242、243、245、292、294、197、309、310、313、314、315、316、317、321、340、341、350、353、356、363、368、369、375、376、395、398、401、408、409、412、415、418、421、433、436或451位,或亲本葡糖淀粉酶的等价位置。
10.权利要求1的葡糖淀粉酶变体,其中变体还在下述残基位置处包含一个或多个氨基酸取代,所述残基位置对应于SEQ ID NO:2的第4、5、24、29、43、44、49、70、75、76、100、108、119、124、137、146、148、169、171、172、175、178、181、208、211、243、292、294、297、314、316、317、340、341、350、356、363、368、369、376、395、401、412、433、436或451位,或亲本葡糖淀粉酶的等价位置。
11.权利要求1的葡糖淀粉酶变体,其中葡糖淀粉酶变体还在下述残基位置处包含一个或多个氨基酸取代,所述残基位置对应于SEQ ID NO:2的第5、24、43、44、49、70、75、76、94、119、141、146、148、172、175、178、180、181、208、211、243、294、309、314、353、369、375或409位,或亲本葡糖淀粉酶的等价位置。
12.权利要求1的葡糖淀粉酶变体,其中葡糖淀粉酶变体还在下述残基位置处包含一个或多个氨基酸取代,所述残基位置对应于SEQ ID NO:2的第43、44或294位,或亲本葡糖淀粉酶的等价位置。
13.权利要求1的葡糖淀粉酶变体,其中变体还在下述残基位置处包含两个或多于两个的氨基酸取代,所述残基位置对应于SEQ ID NO:2的N61I、G73F、L417R/V、T430A/M、A431L/Q、E503A/V、Q511H、A535R、A539R或N563I/K,或亲本葡糖淀粉酶的等价位置。
14.权利要求15的葡糖淀粉酶变体,其中变体还包括一个或多个下列取代:SEQ ID NO:2的D4L/E/R/S/C/A/Q/W、F5C/M/N/R/S/T/V/W、I12L/R、D24E/L/Y/T、F29L/I/D/C/S/V/W、I43F/R/D/Y/S/Q、D44E/H/K/S/N/Y/F/R/C、Y47W、Y49N、Q70R/K/M/P/G/L/F、Q75R/K/A、R76L/M/K/T/P、P94L、D100W/I/Q/M/P/A/N、N119P/T/Y/D/E、N146S/G/C/H/E/D/T/W/L/F/M、Q148V/Y/H/A/C/D/G/M/R/S/T、Y169D/F、Q172C/A/D/R/E/F/H/V/L/M/N/S/T/V、F175H/A/G/R/S/T/C/W/Y、W178A/C/D/E/F/G/H/K/N/R/S/T/V/Y、E180A/C/G/H/I/L/N/P/Q/R/S/T/V/Y/、V181E/C/D/G/H/I/P/T/Y/S/L/K/F/A、Q208L/A/C/E/N/F/H/T、S211C/R/E/A/Y/W/M/H/L/I/R/Q/T、E243S/R/N/M/Y/A/L、R245A/E/M/I/P/V、I292D/H/P/R/T/N/V/F/L、G294C/D/E/T/Q/I/A、K297F/L/P/T/M/D/N/Q/A/Y/H/S/R/W、R309A/C/G/H/I/N/P/Q/S/T/W/Y/L、Y310E/G/L/P/S/W/R/Q、D313Q、V314A/R/N/D/C/E/Q/G/H/I/L/K/M/F/P/S/T/W/Y、Y315F、Y316Q/R、N317T/H、K340D/T、K341F/D/P/V/G/S、T350S/E/A/N、Q356H/D/E、T363L/R/C/H/W、S368W/D/F/L、S369F、N376Q/T/H/S/V、Y395Q/R/S、A398S/I/T、S401C/V、R408S、N409W/T/K、T412A/H/K/G、R433H/Q、I436A/T或S451M/T/H,或亲本葡糖淀粉酶中的等价位置。
15.权利要求15的葡糖淀粉酶变体,其中变体还包括一个或多个下列取代:SEQ ID NO:2的I43F/R/D/Y/S/Q、D44E/H/K/S/N/Y/F/R/C或G294C/D/E/T/Q/I/A,或亲本葡糖淀粉酶中的等价位置。
16.权利要求1-15任一项的葡糖淀粉酶变体,其中亲本葡糖淀粉酶选自从木霉属物种、曲霉属物种、腐质霉属物种、青霉属物种、踝节菌属物种或裂殖酵母属物种获得的葡糖淀粉酶。
17.权利要求16的葡糖淀粉酶变体,其中亲本葡糖淀粉酶获得自木霉属物种或曲霉属物种。
18.权利要求1-17任一项的葡糖淀粉酶变体,其中葡糖淀粉酶变体与亲本葡糖淀粉酶相比,表现出改变的热稳定性。
19.权利要求18的葡糖淀粉酶变体,其中葡糖淀粉酶变体与亲本葡糖淀粉酶相比,表现出增加的热稳定性。
20.权利要求1-17任一项的葡糖淀粉酶变体,其中葡糖淀粉酶变体与亲本葡糖淀粉酶相比,表现出改变的比活性。
21.权利要求20的葡糖淀粉酶变体,其中葡糖淀粉酶变体与亲本葡糖淀粉酶相比,表现出增加的比活性。
22.权利要求1-17任一项的葡糖淀粉酶变体,其中葡糖淀粉酶变体与亲本葡糖淀粉酶相比,表现出增加的热稳定性和增加的比活性。
23.编码权利要求1-22任一项的变体的多核苷酸。
24.包括权利要求23的多核苷酸的载体。
25.包括权利要求24的载体的宿主细胞。
26.包括权利要求1-22任一项的葡糖淀粉酶变体的酶组合物。
27.权利要求26的酶组合物,其中酶组合物用于淀粉转化过程中。
28.权利要求26的酶组合物,其中酶组合物用于醇发酵过程中。
29.在宿主细胞内生产葡糖淀粉酶变体的方法,包括在适合表达和生产葡糖淀粉酶变体的条件下培养权利要求25的宿主细胞,和生产葡糖淀粉酶变体。
30.根据权利要求29的方法,还包括从培养物中回收葡糖淀粉酶变体。
CN2008801166952A 2007-11-20 2008-11-20 具有改变性质的葡糖淀粉酶变体 Active CN101868537B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US98942607P 2007-11-20 2007-11-20
US60/989,426 2007-11-20
PCT/US2008/012934 WO2009067218A2 (en) 2007-11-20 2008-11-20 Glucoamylase variants with altered properties

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101868537A true CN101868537A (zh) 2010-10-20
CN101868537B CN101868537B (zh) 2013-11-06

Family

ID=40352212

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2008801166952A Active CN101868537B (zh) 2007-11-20 2008-11-20 具有改变性质的葡糖淀粉酶变体

Country Status (12)

Country Link
US (3) US8058033B2 (zh)
EP (3) EP2816109B1 (zh)
JP (1) JP5594899B2 (zh)
CN (1) CN101868537B (zh)
BR (1) BRPI0820483B1 (zh)
CA (1) CA2705941C (zh)
DK (3) DK3323889T3 (zh)
ES (2) ES2795989T3 (zh)
HU (1) HUE050328T2 (zh)
MX (1) MX2010005461A (zh)
PL (1) PL2222842T3 (zh)
WO (1) WO2009067218A2 (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103695386A (zh) * 2013-12-25 2014-04-02 南宁邦尔克生物技术有限责任公司 一种耐酸性高温β-淀粉酶突变体及其应用
CN104619836A (zh) * 2012-08-22 2015-05-13 杜邦营养生物科学有限公司 具有葡糖淀粉酶活性的变体
CN109312320A (zh) * 2016-08-05 2019-02-05 福尼亚生物处理股份有限公司 2g16葡糖淀粉酶组合物和方法

Families Citing this family (58)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX2009003472A (es) 2006-10-10 2009-06-02 Danisco Us Inc Genencor Div Variantes de glucoamilasa con propiedades alteradas.
US8592194B2 (en) 2007-10-09 2013-11-26 Danisco Us Inc. Glucoamylase variants with altered properties
EP2430169A2 (en) * 2009-05-12 2012-03-21 Danisco US Inc. Ethanol yields in fermentation from an improved liquefaction process
CN102647918B (zh) 2009-08-07 2015-05-27 丹尼斯科美国公司 用于淀粉加工的α-淀粉酶混合物及其使用方法
US20120164695A1 (en) * 2009-08-19 2012-06-28 Danisco Us Inc. Combinatorial variants of glucoamylase with improved specific activity and/or thermostability
MX2012002032A (es) * 2009-08-19 2012-03-26 Danisco Variantes de glucoamilasa.
DK2558484T3 (en) * 2010-04-14 2016-03-29 Novozymes As Polypeptides having glucoamylase activity and polynucleotides encoding them
US9617527B2 (en) 2010-04-14 2017-04-11 Novozymes A/S Polypeptides having glucoamylase activity and polynucleotides encoding same
WO2012019169A1 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Danisco Us Inc. Production of isoprene under neutral ph conditions
US20120034659A1 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Danisco Us Inc. NEUTRAL pH SACCHARIFICATION AND FERMENTATION
MX335994B (es) 2011-04-29 2016-01-07 Danisco Us Inc Proceso de ph unico para licuacion y sacarificacion de almidon para jarabes de glucosa de alta densidad.
EP2702161A1 (en) 2011-04-29 2014-03-05 Danisco US Inc. Use of cellulase and glucoamylase to improve ethanol yields from fermentation
US8951764B2 (en) 2011-08-05 2015-02-10 Danisco Us Inc. Production of isoprenoids under neutral pH conditions
EP3246404B1 (en) 2011-10-28 2019-02-27 Danisco US Inc. Variant maltohexaose-forming alpha-amylase variants
EP2788491B1 (en) 2011-12-09 2019-01-23 Danisco US Inc. Ribosomal promotors from b. subtilis for protein production in microorganisms
EP2831256A1 (en) 2012-03-28 2015-02-04 Danisco US Inc. Low temperature method for making high glucose syrup
WO2013169645A1 (en) 2012-05-11 2013-11-14 Danisco Us Inc. Use of alpha-amylase from aspergillus clavatus for saccharification
WO2013181647A2 (en) 2012-06-01 2013-12-05 Danisco Us Inc. Compositions and methods of producing isoprene and/or industrrial bio-products using anaerobic microorganisms
CA2874061A1 (en) 2012-06-08 2014-01-09 Danisco Us Inc. Variant alpha amylases with enhanced activity on starch polymers
US20140024064A1 (en) 2012-07-23 2014-01-23 Butamax(Tm) Advanced Biofuels Llc Processes and systems for the production of fermentative alcohols
CN104602540B (zh) * 2012-08-14 2019-08-16 丹尼斯科美国公司 能抵抗与氧化相关的活性损失的里氏木霉葡糖淀粉酶变体及其用途
JP2015534456A (ja) * 2012-08-16 2015-12-03 ダニスコ・ユーエス・インク アスペルギルス・クラバタス(Aspergillusclavatus)由来のαアミラーゼ及びイソアミラーゼを糖化に使用する方法
MX2015001818A (es) 2012-08-16 2015-05-07 Danisco Inc Proceso para producir glucosa a partir de almidon con el uso de la alfa-amilasa de aspergillus clavatus y una pululanasa.
WO2014039773A1 (en) * 2012-09-07 2014-03-13 Novozymes A/S Glucoamylase variants and polynucleotides encoding same and uses thereof
JP6653576B2 (ja) 2012-09-12 2020-02-26 ビュータマックス・アドバンスド・バイオフューエルズ・エルエルシー 発酵産物の生成のための方法およびシステム
CA2887574A1 (en) 2012-10-11 2014-04-17 Butamax Advanced Biofuels Llc Processes and systems for the production of fermentation products
EP2922951B1 (en) 2012-11-20 2017-08-23 Danisco US Inc. Amylase with maltogenic properties
EP2931911A1 (en) 2012-12-14 2015-10-21 Danisco US Inc. Method of using alpha-amylase from aspergillus fumigatus and isoamylase for saccharification
CN104903461A (zh) 2012-12-20 2015-09-09 丹尼斯科美国公司 将支链淀粉酶和来自土曲霉的α-淀粉酶用于糖化的方法
WO2014099525A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Danisco Us Inc. Paenibacillus curdlanolyticus amylase, and methods of use, thereof
DK3354728T3 (da) 2012-12-21 2020-07-27 Danisco Us Inc Alpha-amylase-varianter
WO2014135647A1 (en) * 2013-03-07 2014-09-12 Novozymes A/S Glucoamylase variants and polynucleotides encoding same
CN110777132B (zh) 2013-03-11 2024-03-22 丹尼斯科美国公司 α-淀粉酶组合变体
US9523104B2 (en) 2013-03-12 2016-12-20 Butamax Advanced Biofuels Llc Processes and systems for the production of alcohols
WO2014200657A1 (en) 2013-06-13 2014-12-18 Danisco Us Inc. Alpha-amylase from streptomyces xiamenensis
WO2014200658A1 (en) 2013-06-13 2014-12-18 Danisco Us Inc. Alpha-amylase from promicromonospora vindobonensis
WO2014200656A1 (en) 2013-06-13 2014-12-18 Danisco Us Inc. Alpha-amylase from streptomyces umbrinus
WO2014204596A1 (en) 2013-06-17 2014-12-24 Danisco Us Inc. Alpha-amylase from bacillaceae family member
CA2915980A1 (en) 2013-06-21 2014-12-24 Danisco Us Inc. Compositions and methods for clostridial transformation
EP3052622B1 (en) 2013-10-03 2018-09-19 Danisco US Inc. Alpha-amylases from a subset of exiguobacterium, and methods of use, thereof
WO2015050723A1 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Danisco Us Inc. Alpha-amylases from exiguobacterium, and methods of use, thereof
WO2015057517A1 (en) 2013-10-17 2015-04-23 Danisco Us Inc. Use of hemicellulases to improve ethanol production
WO2015065978A1 (en) 2013-10-28 2015-05-07 Danisco Us Inc. Trehalase in fermentations
WO2015066669A1 (en) 2013-11-04 2015-05-07 Danisco Us Inc. Proteases in corn processing
WO2015066667A1 (en) 2013-11-04 2015-05-07 Danisco Us Inc. Proteases in wheat processing
CN105960456A (zh) 2013-11-20 2016-09-21 丹尼斯科美国公司 对蛋白酶裂解敏感性降低的变体α-淀粉酶及其使用方法
US10584323B2 (en) 2013-12-04 2020-03-10 Danisco Us Inc Glucoamylase variants
WO2015094809A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Danisco Us Inc. Chimeric fungal alpha-amylases comprising carbohydrate binding module and the use thereof
WO2015094714A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Danisco Us Inc. Proteases in grain processing
WO2016100871A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Danisco Us Inc Glucoamylase blends
CN107250365A (zh) 2015-02-19 2017-10-13 丹尼斯科美国公司 增强的蛋白质表达
BR112018012020A2 (pt) 2015-12-18 2018-12-04 Danisco Us Inc polipeptídeos com atividade de endoglucanase e usos dos mesmos
US11447782B2 (en) 2016-03-04 2022-09-20 Danisco Us Inc. Engineered ribosomal promoters for protein production in microorganisms
WO2019089898A1 (en) 2017-11-02 2019-05-09 Danisco Us Inc Freezing point depressed solid matrix compositions for melt granulation of enzymes
MX2022000355A (es) 2019-07-09 2022-03-17 Dupont Nutrition Biosci Aps Composiciones de enzimas particuladas recubiertas de grasa.
WO2021046073A1 (en) 2019-09-05 2021-03-11 Dupont Nutrition Biosciences Aps Feed composition
AU2022349014A1 (en) 2021-09-27 2024-04-04 International N&H Denmark Aps Feed additive compositions and methods for using the same
WO2023122676A1 (en) 2021-12-24 2023-06-29 Danisco Us Inc. Hybrid glucoamylases and methods of use thereof

Family Cites Families (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5534046A (en) 1978-09-01 1980-03-10 Cpc International Inc Novel glucoamyrase having excellent heat resistance and production
GB2089836B (en) 1980-12-16 1984-06-20 Suntory Ltd Process for producing alcohol by fermentation without cooking
US4794175A (en) 1983-12-20 1988-12-27 Cetus Corporation Glucoamylase CDNA
US4618579A (en) 1984-09-28 1986-10-21 Genencor, Inc. Raw starch saccharification
JPH0630586B2 (ja) 1984-12-15 1994-04-27 サントリー株式会社 グルコアミラ−ゼ遺伝子
AU607398B2 (en) 1985-08-29 1991-03-07 Genencor Inc. Heterologous polypeptides expressed in filamentous fungi, processes for making same, and vectors for making same
US5024941A (en) 1985-12-18 1991-06-18 Biotechnica International, Inc. Expression and secretion vector for yeast containing a glucoamylase signal sequence
DK122686D0 (da) 1986-03-17 1986-03-17 Novo Industri As Fremstilling af proteiner
GB8610600D0 (en) 1986-04-30 1986-06-04 Novo Industri As Transformation of trichoderma
WO1988009795A1 (en) 1987-06-06 1988-12-15 Biotechnica International, Inc. Yeast expression vector
US6803499B1 (en) 1989-08-09 2004-10-12 Dekalb Genetics Corporation Methods and compositions for the production of stably transformed, fertile monocot plants and cells thereof
US6777589B1 (en) 1990-01-22 2004-08-17 Dekalb Genetics Corporation Methods and compositions for the production of stably transformed, fertile monocot plants and cells thereof
US5290474A (en) 1990-10-05 1994-03-01 Genencor International, Inc. Detergent composition for treating cotton-containing fabrics containing a surfactant and a cellulase composition containing endolucanase III from trichoderma ssp
US5475101A (en) 1990-10-05 1995-12-12 Genencor International, Inc. DNA sequence encoding endoglucanase III cellulase
US5246853A (en) 1990-10-05 1993-09-21 Genencor International, Inc. Method for treating cotton-containing fabric with a cellulase composition containing endoglucanase components and which composition is free of exo-cellobiohydrolase I
DK0551386T3 (da) 1990-10-05 2004-05-10 Genencor Int Fremgangsmåde til behandling af bomuldsholdige stoffer med cellulase
DE69133100T3 (de) 1990-12-10 2015-09-03 Danisco Us Inc. Verbesserte saccharifizierung von zellulose durch klonierung und vervielfältigung des beta-glukosidase genes aus trichoderma reesei
US5861271A (en) 1993-12-17 1999-01-19 Fowler; Timothy Cellulase enzymes and systems for their expressions
ATE294871T1 (de) 1994-06-30 2005-05-15 Novozymes Biotech Inc Nicht-toxisches, nicht-toxigenes, nicht- pathogenes fusarium expressionssystem und darin zu verwendende promotoren und terminatoren
US5744716A (en) 1995-06-08 1998-04-28 Scp Global Technologies, A Division Of Preco, Inc. Fluid displacement level, density and concentration measurement system
US6537792B1 (en) 1996-07-24 2003-03-25 Iowa State University Protein engineering of glucoamylase to increase pH optimum, substrate specificity and thermostability
US6255084B1 (en) 1997-11-26 2001-07-03 Novozymes A/S Thermostable glucoamylase
US6352851B1 (en) * 1998-07-15 2002-03-05 Novozymes A/S Glucoamylase variants
CN100402645C (zh) * 1998-07-15 2008-07-16 诺维信公司 葡糖淀粉酶变体
US6268328B1 (en) 1998-12-18 2001-07-31 Genencor International, Inc. Variant EGIII-like cellulase compositions
US6254914B1 (en) 1999-07-02 2001-07-03 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Process for recovery of corn coarse fiber (pericarp)
CN100510067C (zh) * 1999-07-09 2009-07-08 诺维信公司 葡糖淀粉酶变体
US20020182734A1 (en) 2000-08-11 2002-12-05 Diaz-Torres Maria R. Bacillus transformation, transformants and mutant libraries
US6582914B1 (en) 2000-10-26 2003-06-24 Genencor International, Inc. Method for generating a library of oligonucleotides comprising a controlled distribution of mutations
WO2003029449A2 (en) * 2001-10-01 2003-04-10 Novozymes A/S Glucoamylase variants
GB0129864D0 (en) 2001-12-13 2002-02-06 Danisco Animal feed
EP2534961A1 (en) 2003-03-10 2012-12-19 POET Research, Inc. Method for producing ethanol using raw starch
DE602004024964D1 (de) 2003-03-10 2010-02-25 Novozymes As Verfahren zur herstellung von alkohol
WO2005001036A2 (en) 2003-05-29 2005-01-06 Genencor International, Inc. Novel trichoderma genes
US6899910B2 (en) 2003-06-12 2005-05-31 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Processes for recovery of corn germ and optionally corn coarse fiber (pericarp)
JP5091484B2 (ja) 2003-11-21 2012-12-05 ジェネンコー・インターナショナル・インク トリコデルマにおける顆粒デンプン加水分解酵素の発現及び顆粒デンプン基質からグルコースシロップを製造する方法
US7413887B2 (en) 2004-05-27 2008-08-19 Genecor International, Inc. Trichoderma reesei glucoamylase and homologs thereof
AU2004320371B2 (en) 2004-05-27 2011-09-22 Genencor International, Inc. Heterologous expression of an aspergillus kawachi acid-stable alpha amylase and applications in granular starch hydrolysis
GB0423139D0 (en) 2004-10-18 2004-11-17 Danisco Enzymes
RU2394101C2 (ru) * 2004-11-30 2010-07-10 Джененкор Интернэшнл, Инк. Глюкоамилаза trichoderma reesei и ее гомологи
ATE530643T1 (de) 2004-12-30 2011-11-15 Genencor Int Säureaktive fungale protease
MX2009003472A (es) * 2006-10-10 2009-06-02 Danisco Us Inc Genencor Div Variantes de glucoamilasa con propiedades alteradas.

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104619836A (zh) * 2012-08-22 2015-05-13 杜邦营养生物科学有限公司 具有葡糖淀粉酶活性的变体
CN103695386A (zh) * 2013-12-25 2014-04-02 南宁邦尔克生物技术有限责任公司 一种耐酸性高温β-淀粉酶突变体及其应用
CN103695386B (zh) * 2013-12-25 2015-09-16 南宁邦尔克生物技术有限责任公司 一种耐酸性高温β-淀粉酶突变体及其应用
CN109312320A (zh) * 2016-08-05 2019-02-05 福尼亚生物处理股份有限公司 2g16葡糖淀粉酶组合物和方法
CN109312320B (zh) * 2016-08-05 2020-11-03 福尼亚生物处理股份有限公司 2g16葡糖淀粉酶组合物和方法

Also Published As

Publication number Publication date
US9290753B2 (en) 2016-03-22
BRPI0820483B1 (pt) 2022-04-12
DK3323889T3 (da) 2020-06-29
DK2816109T3 (en) 2018-04-16
JP2011502543A (ja) 2011-01-27
BRPI0820483A2 (pt) 2014-10-14
US20120149087A1 (en) 2012-06-14
CN101868537B (zh) 2013-11-06
MX2010005461A (es) 2010-06-02
CA2705941A1 (en) 2009-05-28
EP2816109A1 (en) 2014-12-24
ES2527586T3 (es) 2015-01-27
US8679792B2 (en) 2014-03-25
US8058033B2 (en) 2011-11-15
US20090275080A1 (en) 2009-11-05
WO2009067218A2 (en) 2009-05-28
EP3323889A1 (en) 2018-05-23
JP5594899B2 (ja) 2014-09-24
CA2705941C (en) 2018-05-22
EP2222842A2 (en) 2010-09-01
EP3323889B1 (en) 2020-03-25
PL2222842T3 (pl) 2015-03-31
HUE050328T2 (hu) 2020-11-30
EP2816109B1 (en) 2018-01-10
US20140227754A1 (en) 2014-08-14
WO2009067218A3 (en) 2009-08-06
EP2222842B1 (en) 2014-10-15
DK2222842T3 (en) 2015-01-19
ES2795989T3 (es) 2020-11-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101522893B (zh) 具有改变性质的葡糖淀粉酶变体
CA2948231C (en) Glucoamylase variants
CA2705941C (en) Glucoamylase variants with altered properties
EP2467475A1 (en) Combinatorial variants of glucoamylase with improved specific activity and/or thermostability

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant