CN101780242A - 一种保健或药品组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种保健或药品组合物，它是由下述重量配比的原料药制备而成制剂：海马0.5-2份、灵芝1-2份、益智仁2-4份、枸杞3-6份、桂圆肉3-6份。本发明还提供了该组合物的制备方法。本发明药酒属于浸出制剂，为中药材的酒提取液，在防病治病上疗效独特，在我国医疗保健上发挥着重要作用。根据组方的不同，药酒可以起到活血通络、滋补、延年益寿等多种作用，以海马、灵芝、益智仁、枸杞子、桂圆肉等组方，用酒浸取有效成分，具有温补肾阳，养心安神的作用，根据剂量及药效、口感、色泽等配置药酒，所得药酒呈棕红色，味香醇，适口，为品质上乘的保健酒(餐饮酒)。

Description

一种保健或药品组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种保健药物组合物，属医药领域或保健品领域。

背景技术

海马是我国传统名贵海洋中药材，具有温肾壮阳，散结消肿的作用。现代研究海马具有较高的营养和药用价值以及多种化学活性成分，蛋白质含量高达70％以上，还有脂肪酸及酯类成分，甾体类化合物，磷脂类成分及多种无机元素等，认为海马具有抗衰老药理作用。目前，将海马作为药酒的原料的较多，如：黄软，许桢灿，复方海马保健酒的研制，海峡药学，1995，7(2)：15-16，复方海马保健酒具有滋补肝肾作用，能明显增强性功能，强壮筋骨，延缓衰老。处方：海马100g，韭菜子、淫羊藿、桂枝、菟丝子各1000g，巴戟天、仙茅、麦冬各500g，枸杞子4000g，三七100g，蔗糖粉适量，白酒适量，共制157000ml。申请号：200610034290.7，发明名称：海马酒及其制备方法。公开一种海马酒及其制备方法。它由规定份数的小曲米酒、黄酒、海马药液、中药汤、白糖、蜂蜜制成。所述的海马药液由规定份数的活海马、鹿鞭、鹿筋、花旗参、小曲米酒制成。所述的中药汤由规定份数的枸杞子、肉苁蓉、黄芪、杜仲、川牛膝、元桂肉、玉竹、淫羊藿、甘草、小曲米酒制成。它突破了现有技术采用药用海马干制作海马酒技术，具有药效高、口感好、配制时间短、配方简单优点，是一种补肾壮阳、明目益智、安神镇静、舒筋活络保健食品。申请号：97100659.8，发明名称：“海马酒”配方和生产工艺。属于配制酒技术、保健食品技术和医药学技术的一种应用技术。技术关键包括本发明的配方和配方中主要原料药的组合、溶媒和载体的选用、调味剂、调香剂、调色剂的选用和组成。技术关键还包括将上述原料在生产过程中实现终端产品的一些普通和特殊的工艺，如浸渍、沉降和再沉降、多级过滤，静置熟化等。申请号：97105044.9，发明名称：滋补壮阳酒，由酒浸泡滋补壮阳剂的滤液制成。其特点是滋补壮阳剂由淫阳藿2g、牛膝2g、杜仲2g、桂圆肉2g、何首乌2g、枸杞子6g、白伏苓4g、仙茅3g、灵芝2g、大茴香2g、海马4g、海龙6g、柴胡2g、人参4g、蚂蚁4g、山药6g、当归2g、甘草2g、山楂6g、大枣4g、龙眼肉2g、阳起石6g、鹿角2g、地龙4g、竹叶2g等组成，经常饮用滋补壮阳酒，不仅能补肾壮阳，提高性功能，而且能全面提高人体素质，延缓衰老。

发明内容

本发明的技术方案是提供了一种保健或药品组合物，本发明的另一技术方案是提供了该药物组合物的制备方法。

本发明提供了一种保健或药品组合物，它是由下述重量配比的原料药制备而成制剂：

海马0.5-2份、灵芝1-2份、益智仁2-4份、枸杞3-6份、桂圆肉3-6份。

进一步优选地，它是由下述重量配比的原料药制备而成：

药海马0.5份，灵芝1份、益智仁2份、枸杞3份、桂圆肉3份。

其中，所述的制剂是片剂、丸剂、散剂、口服液、胶囊剂或酒剂。

所述的酒剂是由下述重量配比的原料药及辅料制备而成：

海马0.5-2份、灵芝1-2份、益智仁2-4份、枸杞3-6份、桂圆肉3-6份、白糖2-5份、枸橼酸0.04-0.05份。

进一步优选地，所述的酒剂是由下述重量配比的原料药及辅料制备而成：

海马0.5份，灵芝1份、益智仁2份、枸杞3份、桂圆肉3份、白糖2份、枸橼酸0.04份。

其中，所述的制剂是酒剂，具体制备方法如下：

a、将海马药材粗粉碎，加5-20倍量基酒浸泡，以100-500目滤布滤过；

b、将灵芝粉碎，益智仁去壳取仁，与枸杞、桂圆肉配合，加5-20倍量基酒浸泡，350目滤布滤过，与海马浸出液按比例合并，调节酒精含量，依次加入白糖、枸橼酸按重量配比为：2-5∶0.04-0.05，溶解，陈化2～3天，加入0.5％-2％活性炭搅拌5min后，冷藏静置24h，低温过滤，灌装。

其中，所述的基酒是将60°白酒与16°黄酒按1-5∶1-10的比例调配。

进一步地，本发明的制备方法为：

a、将海马药材粗粉碎，加10倍量基酒浸泡1周，其中基酒为60°白酒与16°黄酒按3.5∶6.5的比例调配，以350目滤布滤过；

b、将灵芝粉碎，益智仁去壳取仁，与枸杞、桂圆肉按处方比例配合，加10倍量基酒浸泡1周，350目滤布滤过，与海马浸出液按比例合并，调节酒精含量，依次加入白糖、枸橼酸按重量配比为：2∶0.04，溶解，陈化2～3天；加入1.5％的活性炭搅拌5min后，冷藏静置24h，低温过滤，灌装。

所述的白酒为：小曲酒。

海马是我国传统名贵海洋中药材，具有温肾壮阳，散结消肿的作用。用于阳痿，遗尿，肾虚作喘，癥瘕积聚，跌扑损伤；外治痈肿疔疮。化学成分研究表明，海马具有较高的营养和药用价值以及多种化学活性成分。蛋白质含量高达70％以上，还有脂肪酸及酯类成分，甾体类化合物，磷脂类成分及多种无机元素等。灵芝，性平味甘，归心、肺、肝、肾经。具有补气安神，止咳平喘的功效。用于眩晕不眠，心悸气短，虚劳咳喘。灵芝中主要含氨基酸、多糖类成分，又含有机酸、生物碱、内酯等。药理与临床研究均证明，确有防病治病、延年益寿之功效。益智仁性温、味辛，入脾、肾经，具有温脾开胃摄唾、暖肾固精缩尿的功效，主治冷气腹痛、中寒吐泻、多唾、遗精、小便余沥、夜多小便等。益智仁含有挥发油，尚含有多种微量元素、丰富的B族维生素以及17种氨基酸。枸杞性平味甘，归肝、肾经。具有滋补肝肾，益精明目的作用，用于虚劳精亏，腰膝酸痛，眩晕耳鸣，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明。桂圆肉性温味甘，入心、脾经。具有补心安神，养血益脾的功效，益心脾，补气血；具有良好的滋养补益作用。以上除海马外的四味均为药食同源的原料，与海马配合应用，具有温补肾阳，养心安神的作用。

本发明的特点在于组方药味同时都属于卫生部公布的既是食品又是药品的物品名单范围内。本发明药酒属于浸出制剂，为中药的酒提取液，在防病治病上疗效独特，在我国医疗保健上发挥着重要作用。根据组方的不同，药酒可以起到活血通络、滋补、延年益寿等多种作用。以海马、灵芝、益智仁、枸杞子、桂圆肉等组方，用酒浸取有效成分，具有温补肾阳，养心安神的作用。根据剂量及药效、口感、色泽等配置药酒，所得药酒呈棕红色，味香醇，适口，为品质上乘的保健酒(餐饮酒)。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

实施例1本发明酒剂的制备

处方：

海马5g   灵芝10g       益智仁20g    枸杞30g    桂圆肉30g

白糖20g  枸橼酸0.4g    制成1000ml

制备方法：将海马药材粗粉碎，加约10倍量基酒(60°白酒与16°黄酒按3.5∶6.5的比例调配)浸泡1周，以350目滤布滤过。将灵芝粉碎，益智仁去壳取仁，与枸杞、桂圆肉按处方比例配合，加约10倍量基酒浸泡1周，350目滤布滤过，与海马浸出液按比例合并，调节酒精含量，依次加入白糖、枸橼酸溶解，陈化2～3天。加入1.5％的活性炭搅拌5min后，冷藏静置24h，低温过滤，灌装。

实施例2本发明酒剂基酒及原料配方的筛选

一、基酒的筛选

将海马、灵芝、桂圆肉、益智仁、枸杞分别用以下溶剂密闭浸泡一周，各药酒浓度约10％。

①60°白酒。

②60°白酒与16°黄酒按3.5∶6.5的比例调配(酒度约30°)。

结果：加入黄酒的基酒在口感、色泽上均优于白酒基酒。确定基酒为白酒加黄酒进行调配。最初白酒选用红星二锅头，后改用小曲酒，口味醇和，较优。

二、药味及配方比例的选择

最初选择的药材为海马、灵芝、益智仁、高良姜、枸杞、桂圆肉，但是在配制时，发现高良姜加入后，酒立刻浑浊，故取消高良姜。按照海马1份(质量比)，灵芝、益智仁、枸杞、桂圆肉按照L₉(3⁴)配比进行组合，各配制250ml药酒，评价9份药酒的口感、嗅味、澄清度、色泽等。

因素水平表

正交实验表

结果，以2号组合的嗅味、口感、色泽均较佳，在放置一段时间后澄明度依然较好。故选择配方为海马1份，灵芝1份、益智仁2份、枸杞3份、桂圆肉3份进行组合。后降低海马用量，改为0.5份，其余比例不变。

三、矫味剂的选择

在按比例调配的海马酒中加入不同的矫味剂调节口感。

海马酒矫味剂筛选及试验结果

矫味剂选择蜂蜜，对澄清度影响较大，而且口感不及加入白糖的药酒。通常药酒中加入0.04～0.05％的枸橼酸(柠檬酸)可以起到调节口感的作用，在本药酒中，加入0.04％的枸橼酸，口味更加醇和，掩盖了酒的涩味。故在药酒中加入2％的白糖，0.04％的枸橼酸可以得到甜度适宜，口感醇和的药酒。

四.精制工艺的研究

为了提高药酒澄明度，需采用适宜的除杂方法，以尽可能除去提取液中的杂质。实验采用物理分离方法除杂。比较了离心除杂，以及活性炭吸附的效果，基本一致。由于活性炭吸附杂质无需特殊设备，又能改善溶液的澄明度，还有助滤作用，故采用活性炭作为吸附剂。在除杂工艺中，主要考察活性炭的用量。采用不同量的活性炭，分别加入调配好的100ml海马药酒中，搅拌5min后，静置24h，滤过。收集滤液，比较色泽、澄明度。

活性炭不同用量除杂效果比较表

结果，药酒经不同用量活性炭吸附除杂后，药酒的色泽、澄明度都有所变化。以加入活性炭的量为1.5％时，澄明度有较大的改善，而药酒色泽较适宜。故选取1.5％的活性炭用量对药液进行吸附处理。

实施例3本发明海马酒的制备

处方：海马20g  灵芝20g  益智仁40g  枸杞60g  桂圆肉60g

将上述处方量海马、灵芝、益智仁、枸杞、桂圆肉粗粉碎，加白酒浸取一周，滤过，调节酒精含量，依次加入白糖、枸橼酸溶解，陈化2～3天。加入1.5％的活性炭搅拌5min后，冷藏静置24h，低温过滤，灌装，得海马酒。

实施例4本发明海马酒的制备

处方：海马0.5g    灵芝10g    益智仁20g    枸杞30g  桂圆肉30g

将上述处方量海马、灵芝、益智仁、枸杞、桂圆肉粗粉碎，加10倍量70％乙醇浸渍提取，滤过，调节酒精含量，依次加入白糖、枸橼酸溶解，陈化2～3天。加入1.5％的活性炭搅拌5min后，冷藏静置24h，低温过滤，灌装，得海马酒。

实施例5本发明片剂的制备

将实施例1的处方量海马、灵芝、益智仁、枸杞、桂圆肉粗粉碎，加12倍量70％乙醇回流提取3次，每次1小时，滤过，滤液合并，减压浓缩至无醇味后，加入淀粉15g，制软材，制粒，干燥，整粒，装胶囊。或加入润滑剂硬酯酸镁0.3g，混匀后压片。

实施例6本发明丸剂的制备

将实施例2的处方量海马、灵芝、益智仁、枸杞、桂圆肉粗粉碎，加12倍量70％乙醇回流提取3次，每次1小时，滤过，滤液合并，减压浓缩至无醇味后，加入微粉硅胶10g，混合均匀，采用塑制法搓条、轧丸、整粒、干燥，制备成丸剂。

实施例7本发明片剂的制备

将实施例2处方量海马、灵芝、益智仁粗粉碎，用12倍量70％乙醇回流提取3次，每次1小时，滤过，滤液合并后减压浓缩至无醇味；药渣与桂圆肉、枸杞子合并煎煮3次，每次1小时，滤过，水煎液浓缩后与醇提液合并浓缩至稠，加入淀粉15g，制软材，制粒，干燥，整粒，装胶囊。或加入润滑剂硬酯酸镁0.3g，混匀后压片。

实施例8本发明丸剂的制备

将实施例1处方量海马、灵芝、益智仁粗粉碎，用12倍量70％乙醇回流提取3次，每次1小时，滤过，滤液合并，减压浓缩至无醇味；药渣与桂圆肉、枸杞子合并煎煮3次，每次1小时，滤过，水煎液浓缩后与醇提液合并浓缩至稠，加入微粉硅胶10g，混合均匀，采用塑制法搓条、轧丸、整粒、干燥，制备成丸剂。

实施例9本发明口服液的制备

将实施例2处方量海马、灵芝、益智仁粗粉碎，用12倍量70％乙醇回流提取3次，每次1小时，滤过，滤液合并，减压浓缩至无醇味；药渣与桂圆肉、枸杞子合并煎煮3次，每次1小时，滤过，水煎液浓缩后与醇提液合并，离心除杂后加水至近1000ml，加入蔗糖20g溶解，精滤，用蒸馏水补充至1000ml，灌装，灭菌，即制成口服液剂。

实施例10本发明片剂的制备

将实施例1上述处方量海马与灵芝超微粉碎，过100目筛；桂圆肉、益智仁、枸杞用水煎煮提取3次，每次1小时，滤过，滤液合并浓缩后得到稠浸膏(相对密度约1.10，60℃测)。将海马微粉、灵芝微粉与水提稠浸膏混合均匀，制软材，制粒，干燥，整粒，装胶囊。或加入润滑剂硬酯酸镁0.3g，混匀后压片。

实施例11本发明丸剂的制备

取实施例3的处方量，将海马与灵芝超微粉碎，过100目筛；桂圆肉、益智仁、枸杞用水煎煮提取3次，每次1小时，滤过，滤液合并浓缩后得到稠浸膏(相对密度约1.10，60℃测)。将海马微粉、灵芝微粉与水提稠浸膏混合均匀，采用塑制法搓条、轧丸、整粒、干燥，制备成丸剂。

实施例12本发明丸剂的制备

将实施例1处方量海马与灵芝超微粉碎，过100目筛；桂圆肉、益智仁、枸杞用水煎煮提取3次，每次1小时，滤过，滤液合并浓缩后得到稠浸膏(相对密度约1.10，60℃测)。海马微粉与灵芝微粉混合，在包衣锅内，以水提浸膏作为粘合剂，泛制成丸。

以下通过具体药效学试验证明本发明的有益效果。

试验例1本发明药物酒剂功效试验

本发明药物酒剂(由实施例1制备)回收乙醇经冷冻干燥，干燥粉供实验用。

1、性激素样作用

1.1、雌激素作用

取对数生长期MCF-7细胞(人乳腺癌细胞，对雌激素敏感)，用DMEM培养基(含10％小牛血清，青莲酶素)培养，细胞用0.25％的胰酶消化，调整细胞浓度至1×10⁴个/ml，接种于96孔板，培养24小时让其贴壁。然后将培养基换成无酚红的培养基，然后加入样品溶液，本发明药物酒剂设3个浓度(50，20，10μg/m1)，每个浓度设六个复孔。阳性对照：E2(17β-雌二醇)设2个浓度(10^-9，10^-10M)，在培养箱中37℃、5％CO₂培养4天。用MTT法测定细胞增殖，吸出培养基，加入MTT培养4h，吸出MTT加入DMSO在4920nm测定OD值。

表1.本发明药物酒剂对MCF-7细胞增殖作用的影响

与空白对照组相比*P＜0.05，**P＜0.01。

结果显示，本发明药物酒剂具有雌激素样作用，与空白对照组相比差异有显著性。

1.2、抗雌激素作用

方法与雌激素作用相同，在加入药物的同时加入雌二醇共培养，用MTT法测定细胞增殖。

表2.本发明药物酒剂在17β-雌二醇条件下对MCF-7细胞增殖作用的影响

与模型组相比^**P＜0.01

结果显示，本发明药物酒剂高剂量时对雌激素有一定拮抗作用，低剂量时与雌激素有协同作用，能增强雌激素对乳腺细胞的增殖作用。

1.3、酵母双杂交

转基因酵母接种在培养皿上，放入培养箱30℃培养，无菌取10ml SD培养基加入L形试管，接种培养皿中生长良好的酵母进行前培养，放入摇床30℃过夜，转化生长。然后加药培养：于1.5mlEP管中加入200μl新SD培养基，再加入50μl前培养液，加入药物2.5μl(3个浓度)继续在培养在摇床上30℃培养4h。取150μl放入96孔板，于595nm(或600nm)测OD值作为细胞密度。EP管放入离心机，12000rpm，离心5min。小心吸去上清液，加入200μl Z缓冲液中，振匀，37℃温育15min使酵母破壁。取出，吸干外表水，然后加入40μl 4mg/ml浓度的2-硝基苯β-D-半乳糖苷开始酶促反应。30min后取出，吸干外表水，加入100μl1MNa₂CO₃停止反应。取150μl加入96孔板中测定酶活性。以酶活表示药物与雌激素受体d、β的结合能力。

表3.酵母双杂交系统中本发明药物酒剂对β-半乳糖苷酶的诱导作用的影响(d-受体)

与空白对照组相比*P＜0.05，**P＜0.01。

结果显示，本发明药物酒剂内在成分具有与雌激素α-受体结合的能力。

表4.酵母双杂交系统中本发明药物酒剂对β-半乳糖苷酶的诱导作用的影响(β-受体)

与空白对照组相比*P＜0.05，**P＜0.01。

结果显示，本发明药物酒剂内在成分具有与雌激素β-受体结合的能力。

1.4、对小鼠子宫系数及血清雌激素含量的影响

取昆明雌性幼鼠50只，分为五组，模型组给予己烯雌酚，空白对照给予生理盐水，适应性饲养两天后开始给药六天后处理，眼球取血，分离血清，测雌激素含量，剥离子宫并称重，计算子宫系数。

表5.本发明药物酒剂对小鼠子宫重量及血清中雌激素含量的影响

与空白对照组相比**P＜0.01。

结果显示，本发明药物酒剂能增加小鼠子宫重量，减少血清中雌激素含量，具有雌激素作用。

1.5、对肾上腺皮质激素型阳虚模型的影响

取昆明种雄性小鼠，体质量25-35g，随机分为6组，每组20只，其中，正常组不作任何处理；其他4组，以醋酸氢化可得松25mg/kg，连续注射8天，造成阳虚模型，注射后0.5h，对照组灌胃给予饮用水0.4mL/只，小、中、大剂量组分别灌胃给予本发明药物酒剂、以人参北芪片为阳性对照，连续8d，每天测定小鼠体重；第9天，取一半小鼠取血，测血常规(WBC、RBC)，断头处死小鼠，取胸腺、脾脏、肾上腺称重，计算脏器指数(脏器重量/体重*100)。取一半小鼠测游泳存活时间

表6.本发明药物酒剂对阳虚小鼠白细胞、红细胞和游泳存活时间的影响

与模型组相比**P＜0.01。

表7.本发明药物酒剂对阳虚小鼠胸腺、脾脏、肾上腺重量的影响

结果显示，本发明药物酒剂能增加阳虚小鼠白细胞、红细胞数量，延长游泳存活时间，增加胸腺、脾脏及肾上腺指数，具有治疗阳虚作用。

试验例2本发明药物抗氧化活性试验

1体外抗氧化活性

1.1DPPH法检测样品对DPPH自由基的清除的能力

取DPPH母液稀释成1.0×10^-5mol/L、5.0×10^-5mol/L、1.0×10^-4mol/L、1.5×10^-4mol/L、2.0×10^-4mol/L不同浓度做标准曲线。用软件OriginPro 7.5分析作线性回归方程式：Y＝0.44727X-0.40211，R＝0.9992。

吸取2mLDPPH储备液，用无水乙醇定容于100mL容量瓶中摇匀待测。利用DPPH溶液的特征紫红色团的吸收，用紫外-可见分光光度法测定加抗氧剂提取液后在波长517nm处吸光值下降程度表示其对有机自由基消除能力，按表8加反应液。

表8实验操作加样表

用力摇匀，将A_i所表示的样品在室温下静置30min后，加入比色皿中进行吸光度的测定，测出A₀、A_i、A_j所表示样品的吸光度值，清除率按公式(1)计算。S_A(％)＝1-(A_i-A_j)/A₀×100(1)

DPPH是一种稳定的自由基，其结构中含有3个苯环，1个N原子上有1个孤对电子，其乙醇溶液呈紫色，在517nm附近有强吸收，当DPPH溶液中加入自由基清除剂时，孤对电子被配对，颜色由紫色向黄色变化，在517nm处的吸光度变小，而吸光度变小的程度与自由基被清除的程度呈定量关系，因而可用分光光度法进行定量分析。

表9本发明药物酒剂对DPPH自由基的清除作用(X±S，n＝5)

本发明药物酒剂对DPPH自由基的清除作用见表9，本发明药物酒剂对DPPH自由基具有很强的清除作用，且呈浓度依赖性。相对于维生素C(EC₅₀为277.85μg/ml)本发明药物酒剂EC₅₀为473.55μg/ml，约是维生素的1.7倍。

1.2二氧化钛光催化反应体系检测样品清除羟基自由基的能力

利用二氧化钛光催化反应体系检测样品抑制羟基自由基产生的能力。在70mL圆柱形硬质玻璃瓶中依次加入一定体积5.0×10^-4mol/L SRB溶液，5mg TiO₂，用HClO₄调节pH为2.5，定容至50mL，置于暗室搅拌30min达到吸附平衡。在紫外光照射下计时并开始反应，于不同时间间隔取样，离心分离，紫外可见分光光度计扫描上清液吸收曲线，在λ565nm波长处测定吸光度值A_i。在相同条件下，测定空白试样A₀(无TiO₂)，计算ΔA＝A₀-A_i。

在该体系中加入适量的1.0×10^-3mol/L样品，其它条件相同，测定在12min的A_S值，测定不加清除剂提取物时的A_0S计算。ΔA_S＝A_0S-A_S，清除率D(％)＝ΔA_S/ΔA×100＝(A_0S-A_S)/(A₀-A_i)×100。

表10本发明药物酒剂对羟基自由基的清除作用(X±S，n＝5)

本发明药物酒剂对羟基自由基的清除作用见表10，本发明药物酒剂对DPPH自由基具有一定的清除作用，且呈浓度依赖性。相对于维生素C(EC₅₀为226.25μg/ml)本发明药物酒剂EC₅₀为281.16μg/ml，约是维生素的1.2倍。

2体内抗氧化实验

采用CCl₄急性肝损伤模型测定样品的护肝抗氧化作用。选择雄性昆明种小鼠，体重为20±2，随机分组，每组10只。小鼠适应性喂养3d，采用灌胃给药，正常对照组和模型组灌胃等体积的生理盐水。灌胃按0.2ml/(20g/d)剂量进行，连续灌胃给药4d。于末次给药后1h，除正常对照组腹腔注射(ip)等量生理盐水外，其余各组均ip 0.1％CCl₄花生油溶液0.1ml/10g。禁食不禁水，16h后取样。摘眼球取血，血清置4℃保存备用；同时立即剖腹取肝脏，用4℃预冷的生理盐水冲尽表面浮血，滤纸拭干、称重，计算肝脏指数(肝重/体重×100％)。测血清ALT、AST活力。肝组织匀浆，测肝组织中丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。

表11本发明药物酒剂对CCL4致急性肝损伤小鼠血清中ALT、AST、TBILI活力的影响

注：与正常组相比⁺⁺P＜0.001；与模型组相比^**P＜0.001。

表12本发明药物酒剂对CCL₄致急性肝损伤小鼠肝脏内MDA含量、T-AOC和GSH-PX活性的影响

注：与正常组相比⁺⁺P＜0.001；与模型组相比^**P＜0.001。

本实验结果证明，本发明药物酒剂能显著降低CCl₄引起的急性肝损伤后血清中ALT、AST和TBILI的水平，同时还明显降低肝组织MDA的含量，并且有效提高了T-AOC和GSH-PX的活力。这些结果提示，本发明药物酒剂对CCl₄所致小鼠急性肝损伤的保护作用，可能与其提高肝细胞抗氧化能力，对抗CCl₄引起的膜脂质过氧化，促进肝细胞的再生和修复有关。

试验例3本发明药物或保健品的调节免疫作用

1对小鼠淋巴细胞转化的影响

取小鼠脾脏，制备2×10⁶脾细胞悬液，将100μl细胞悬液接种于96孔板，对照组每孔加入100μl 5μg·ml^-1的ConA，药物组每孔加入100μl药物，置37℃，5％CO2孵箱混合培养48h，于第44h加入10μl MTT试剂，4h后在570nm处测定吸光值。以吸光值表示淋巴细胞转化增值。

表13本发明药物酒剂对小鼠淋巴细胞转化的影响

与模型组相比^**P＜0.01

结果显示，本发明药物酒剂能增加小鼠淋巴细胞转化。

2对小鼠抗体生成细胞的影响

取昆明小鼠称重后随机分组，按体重灌胃给药，正常对照组灌服生理盐水。连续15天。于给药第11天每鼠腹腔注射20％SRBC 0.2ml进行免疫，于第15天给药后1小时，取小鼠脾脏制成5×10⁶/ml的脾细胞悬液。取脾细胞悬液0.5ml，加入0.2％SRBC 0.5ml和补体0.5ml，混匀，37℃孵育1小时，离心取上清于415nm测定吸光值。以吸光值表示抗体生成细胞。

表14本发明药物酒剂对小鼠抗体生成细胞的影响

与模型组相比^**P＜0.01

结果显示，本发明药物酒剂能增加小鼠抗体生成细胞数。。

3对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

取昆明小鼠称重后随机分组，按体重灌胃给药，正常对照组灌服生理盐水。连续给药15天。自第八天起，隔天腹腔注射环磷酰胺0.6mg/g造模，共注射4次。于末次给药半小时后，摘眼球取血，分离血清，检测血清免疫球蛋白。无菌取胸腺、脾脏，用电子天平称重。计算胸腺、脾脏指数。

表15本发明药物酒剂对小鼠血清免疫球蛋白的影响

与模型组相比^*P＜0.05，^**P＜0.01

表16本发明药物酒剂对小鼠血清免疫球蛋白的影响

与模型组相比^*P＜0.05，^**P＜0.01

结果显示，本发明药物酒剂能增加免疫抑制小鼠脾脏指数和血清免疫球蛋白含量，提高免疫功能。

试验例4本发明药物或保健品镇静作用

取昆明小鼠，雌雄各半，体重18～22g，随机分为空白对照组、本发明药物酒剂高、中、低剂量组，每组10只，灌胃给药，给药前先将小鼠放入光电计数仪的记录盒内，让其适应2min，随后记录5min正常小鼠活动的次数，然后分别于药后1、2、4h记录各组小鼠的活动情况。表17本发明药物酒剂对小鼠自发活动的影响

与空白组比较：^*P＜0.05。

结果表明，本发明药物酒剂高、中剂量组对小鼠自主活动有明显的抑制作用，药后2h、4h高剂量组作用明显，药后2h中剂量组作用明显，提示本发明药物酒剂具有镇静作用。

试验例5本发明药物或保健品降糖作用

取昆明小鼠，雌雄各半，体重18-22g，随机将小鼠分成6组，分别为空白组，模型组，本发明药物酒剂高、中、低剂量组。灌胃给药给药3d，第三天给药后禁食24h，皮下注射肾上腺素0.2ml(0.02mg/ml)。90min后取血，3000转速离心10min，取上清。采用葡萄糖测定试剂盒的测定方法进行测定。于505nm下测定吸光度值。结果如下：

表18本发明药物酒剂对小鼠血糖的影响

与模型组比较：^*P＜0.05。

结果显示本发明药物酒剂对注射肾上腺素所引起的血糖升高有抑制作用，高剂量组作用明显，与模型组比较差异有显著性。

结论：1、本发明药物酒剂具有激素样作用，对雌激素、雄激素缺乏症具有治疗作用。

2、本发明药物酒剂具有抗氧化、保肝作用。能显著降低CCl4引起的急性肝损伤后血清中ALT、AST和TBILI的水平，同时还明显降低肝组织MDA的含量，有效提高T-AOC和GSH-PX的活力。

3、本发明药物酒剂能调节免疫功能。对免疫功能低下机体的细胞免疫和体液免疫均具有增强作用。

4、本发明药物酒剂能明显减少小鼠自主活动计数，具有镇静作用。

5、本发明药物酒剂能降低注射肾上腺素所引起的高血糖，具有降血糖作用。

所述的药理作用体现了本发明药物酒剂温补肾阳，养心安神等功效。

Claims (10)

1.一种保健品或药品组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制备而成制剂：

海马0.5-2份、灵芝1-2份、益智仁2-4份、枸杞3-6份、桂圆肉3-6份。

2.根据权利要求1所述的保健品或药品组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制备而成：

海马0.5份，灵芝1份、益智仁2份、枸杞3份、桂圆肉3份。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于：所述的制剂是片剂、丸剂、散剂、口服液、胶囊剂或酒剂。

4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于：所述的酒剂是由下述重量配比的原料药及辅料制备而成：

海马0.5-2份、灵芝1-2份、益智仁2-4份、枸杞3-6份、桂圆肉3-6份、白糖2-5份、枸橼酸0.04-0.05份。

5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于：所述的酒剂是由下述重量配比的原料药及辅料制备而成：

海马0.5份，灵芝1份、益智仁2份、枸杞3份、桂圆肉3份、白糖2份、枸橼酸0.04份。

6.一种制备权利要求4或5所述的组合物的方法，其特征在于：所述的酒剂是由以下方法制备而成：

a、将海马药材粗粉碎，加5-20倍量基酒浸泡，以100-500目滤布滤过；

b、将灵芝粉碎，益智仁去壳取仁，与枸杞、桂圆肉配合，加5-20倍量基酒浸泡，350目滤布滤过，与海马浸出液按比例合并，调节酒精含量，依次加入白糖、枸橼酸按重量配比为：2-5∶0.04-0.05，溶解，陈化2～3天，加入0.5％-2％活性炭搅拌5min后，冷藏静置24h，低温过滤，灌装。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述的基酒是将60°白酒与16°黄酒按1-5∶1-10的比例调配。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：

a、将海马药材粗粉碎，加10倍量基酒浸泡1周，其中基酒为60°白酒与16°黄酒按3.5∶6.5的比例调配，以350目滤布滤过；

b、将灵芝粉碎，益智仁去壳取仁，与枸杞、桂圆肉按处方比例配合，加10倍量基酒浸泡1周，350目滤布滤过，与海马浸出液按比例合并，调节酒精含量，依次加入白糖、枸橼酸按重量配比为：2∶0.04，溶解，陈化2～3天；加入1.5％的活性炭搅拌5min后，冷藏静置24h，低温过滤，灌装。

9.根据权利要求4-5任一项所述的制备方法，其特征在于：所述的白酒为：小曲酒。

10.权利要求1-5任一项所述的组合物在制备具有激素样作用，对雌激素、雄激素缺乏症具有治疗作用；具有抗氧化、保肝作用；具有调节免疫功能；具有镇静作用；具有降血糖作用的温补肾阳，养心安神的作用的药物或/和保健品中的用途。