CN101759735A

CN101759735A - 一种从牛蒡子中制备牛蒡子苷的方法

Info

Publication number: CN101759735A
Application number: CN201010017680A
Authority: CN
Inventors: 刘东锋; 张翼; 杨成东
Original assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2010-01-12
Filing date: 2010-01-12
Publication date: 2010-06-30

Abstract

本发明涉及一种从牛蒡子中制备牛蒡子苷的方法，工艺以牛蒡子药材为原料，粉碎，乙醇回流提取2-3次，活性炭脱色，微滤、超滤后浓缩至低浓度乙醇，调pH，大孔吸附树脂吸附，经水及乙醇洗脱，收集牛蒡子苷流分，回收试剂，放置结晶，石油醚洗涤，丙酮乙醚重结晶。该工艺易放大生产。

Description

一种从牛蒡子中制备牛蒡子苷的方法

技术领域：

本发明涉及一种从牛蒡子中制备牛蒡子苷的方法，尤其是一种微滤超滤分离纯化、大孔吸附树脂吸附制备牛蒡子苷的方法。

背景技术：

牛蒡子苷，是一种木脂内酯苷。

分子式：C₂₇H₃₄O₁₁。

分子量：534.55

分子结构是：

性质：

牛蒡子苷是一种无色结晶粉末，熔点110-112℃。

牛蒡子对多种致病性真菌有不同程度的抑制作用。牛蒡子苷具有抗胰腺癌活性，引起血管扩张、血压下降，使冷血及温血动物产生惊厥，同时具有抗肾病变作用，增强机体免疫功能，具有抗补体活性，钙拮抗及抗高血压等药理作用。

牛蒡子为菊科(Asteraceae)植物牛蒡的成熟果实，其瘦果长倒卵形，略扁，微弯曲，表面灰褐色，带紫黑色斑点，有数条棱，顶端钝圆，有圆环，中间具点状花柱残迹，基部略窄，着生面较浅。始载于《名医别录》，具有疏散风热，宣肺透疹，解毒利咽的功能。用于风热感冒，咳嗽痰多，麻疹，风疹，咽喉肿痛，痄腮丹毒，痈肿疮毒。主要化学成分为牛蒡子苷及苷元、脂肪酸、甾醇、维生素B₁等。牛蒡子苷含量为4％-5％。国内从植物提取牛蒡子苷，原料主要是牛蒡子。现有提取工艺主要是系统溶剂提取大孔树脂吸附、超临界流体萃取、硅胶柱层析分离纯化等制备方法。如卢来春发表的《牛蒡子中牛蒡苷的提取分离》，该文献公开了一种醇提，大孔吸附树脂和硅胶柱层析分离纯化方法，但硅胶柱层析不易放大生产；董文洪发表的《超临界流体萃取牛蒡子中的牛蒡子苷的实验研究》，该文献公开了超临界流体萃取法，提取率高，污染少，但设备一次性投入较大，也不适合产业化。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种从牛蒡子中制备牛蒡子苷的方法，该方法能降低生产成本，提高产品质量，便于工业化操作

本发明是采用以下技术方案实现的：

一种从牛蒡子中制备牛蒡子苷的方法，其特征在于包含以下步骤：

1)乙醇提取：将牛蒡子粉碎，加入原料6-10倍量乙醇溶液，加热回流提取2-3次，收集提取液，过滤，收集滤液；

2)活性炭脱色：上述滤液加入其体积的0.5-1％活性炭，回流脱色，得脱色液；

3)膜分离：上述下柱液经微滤膜滤过，再通过超滤膜超滤，收集透过液；

4)大孔吸附树脂吸附：上述超滤液浓缩至醇浓度为20％-30％，调pH至3-4，加入大孔吸附树脂柱吸附，依次用水、50％-70％乙醇洗脱，薄层检测，洗脱流分至无牛蒡子苷，收集牛蒡子苷流分；

7)结晶：上述牛蒡子苷流分浓缩至体积1/3-1/5，静置养晶，抽滤，得粗结晶物；

8)重结晶：上述粗结晶物加石油醚洗涤，丙酮溶解，滴加少量乙醚，静置养晶，结晶2-3次。

提取条件：乙醇为70％-90％乙醇溶液，回流时间1小时。

膜分离条件：压力0.4-0.8Mpa，超滤膜可选截留分子量3000-10000的中空复合膜。

大孔吸附树脂可选ADS-17或HZ806大孔吸附树脂。优选ADS-17大孔树脂。

调pH的酸可选硫酸、磷酸或盐酸的一种。优选盐酸。

洗脱条件：5-6倍柱体积水洗脱杂质，4-6倍柱体积50％-70％乙醇洗脱牛蒡子苷，薄层检测。

重结晶条件：乙醚加入量丙酮的1-2％，养晶时间10-18小时。

综上所述，本发明存在以下优点：膜分离去除多糖和油脂，树脂吸附量大，树脂寿命长；浓缩调节醇浓度和pH，有利于大孔吸附树脂吸附有效成分，提高吸附能力和效果，所得结晶纯度高。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

下述实施例中牛蒡子苷的检测采用薄层色谱法(参照邵晶等“七个不同产地牛蒡子中牛蒡苷的含量比较”文献)，具体方法如下：

薄层色谱条件：

薄层板：羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板。

展开剂：三氯甲烷-甲醇-水(40∶8∶1)

上行展开8cm取出，晾干，20％硫酸乙醇溶液显色，105℃加热至斑点显色清晰。结果与对照品色谱相应的位置上应显相同颜色的斑点。

实施例1：

取牛蒡子，粉碎，取10kg，投入提取罐，加入80L75％乙醇，回流提取1小时，提取2次，合并140L提取液，加入800g活性炭脱色2小时。将脱色液通过中空纤维微滤膜滤过，滤液以压力0.8Mpa再通过截留分子量为3000-6000的中空复合超滤膜，收集透过液，浓缩至醇浓度20％，加盐酸溶液调节pH至4。取10LADS-17大孔吸附树脂装柱，处理活化，以流速15L/h把脱色液加入树脂柱，依次用50L水、60L50％乙醇洗脱，同时用薄层色谱法检测，收集牛蒡子苷流分，回收乙醇，浓缩至15L，养晶8小时。滤出粗结晶物620g，用石油醚洗涤，丙酮热溶解，滴加1％乙醚，静置养晶12小时，结晶3次，滤出结晶物，低温干燥，得产品302g，含量98.2％。

实施例2：

取牛蒡子，粉碎，取10kg，投入提取罐，加入60L90％乙醇，回流提取1小时，提取3次，合并160L提取液，加入900g活性炭1小时，将脱色液通过中空纤维微滤膜微滤，滤液以压力0.6Mpa再通过截留分子量为6000-10000的中空复合超滤膜，收集透过液浓缩，至醇浓度25％，加硫酸溶液调节pH至3，以10L/h的流速加入10LADS-17大孔吸附树脂，依次用60L水、40L70％乙醇洗脱，，同时用薄层色谱法检测，收集牛蒡子苷流分，回收乙醇，浓缩至12L，养晶10小时。滤出粗结晶物610g，用石油醚洗涤，丙酮加热溶解，滴加2％乙醚，静置养晶10小时，结晶3次，滤出结晶物，低温干燥，得产品300g，含量98.6％。

实施例3：

取牛蒡子，粉碎，取10kg，投入提取罐，加入100L80％乙醇，回流提取1小时，提取2次，合并180L提取液，加入1000g活性炭2小时，将脱色液通过中空纤维微滤膜微滤，滤液以压力0.8Mpa再通过截留分子量为3000-6000的中空复合超滤膜，收集透过液，缩至醇浓度30％，加磷酸溶液调节pH至3，加入10L HZ806大孔吸附树脂，依次用60L水、50L 60％乙醇洗脱，同时用薄层色谱法检测，收集牛蒡子苷流分，回收乙醇，浓缩至10L，养晶15小时。滤出粗结晶物320g，用石油醚洗涤，丙酮热溶解，滴加1％乙醚，养晶16小时，结晶2次，滤出结晶物，低温干燥得产品302g，含量98％。

实施例4：

取牛蒡子，粉碎，取20kg，投入提取罐，加入200L80％乙醇，回流提取1小时，提取2次，合并360L提取液，加入180g活性炭1小时，将脱色液通过中空纤维微滤膜滤过，滤液以压力0.4Mpa再通过截留分子量为6000-10000的中空复合超滤膜，收集透过液，浓缩至醇浓度20％，加盐酸溶液调节pH至3，加入20LADS-17大孔吸附树脂，依次用120L水、120L60％乙醇洗脱，同时用薄层色谱法检测，收集牛蒡子苷流分，回收乙醇，浓缩至24L，养晶12小时。滤出粗结晶物650g；用石油醚洗涤，丙酮热溶解，滴加1％乙醚，养晶17小时，结晶2次，滤出结晶物，低温干燥得产品610g，含量98.2％。

Claims

1.一种从牛蒡子中制备牛蒡子苷的方法，其特征在于包含以下步骤：

3)膜分离：上述脱色液经微滤膜滤过，再通过超滤膜超滤，收集透过液；

4)大孔吸附树脂吸附：上述超滤液浓缩至醇浓度为20％-30％，调pH至3-4，加入大孔吸附树脂柱吸附，依次用水、50％-70％乙醇洗脱，薄层检测，洗脱流分无牛蒡子苷，收集牛蒡子苷流分；

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的提取条件：乙醇为70％-90％乙醇溶液，回流时间1小时。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的膜分离条件：压力0.4-0.8Mpa，超滤膜可选截留分子量3000-10000的中空复合膜。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的大孔吸附树脂可选ADS-17或HZ806大孔吸附树脂。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的调pH的酸可选硫酸、磷酸或盐酸的一种。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的洗脱条件：5-6倍柱体积水洗脱杂质，4-6倍柱体积50％-70％乙醇洗脱牛蒡子苷，薄层检测。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述重结晶条件：乙醚加入量丙酮的1-2％，养晶时间10-18小时。