CN101708341A - 载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法及其制品 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法及其制品，将细菌纤维素水凝胶膜在银金属前躯体溶液中浸泡，然后在高压灭菌锅中加热至121～135℃并加压0.205～0.313MPa，静置处理5～30min，再将处理后的细菌纤维素取出洗涤、部分脱水、包装、灭菌，即得到由银金属纳米颗粒与细菌纤维素复合而成的细菌纤维素三维多孔网络结构中附着0.01～10wt％的银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。本发明制备过程简单易行、操作方便、制备技术可控、无污染、成本低；所制备的纳米颗粒纯度高、纳米颗粒粒径小、尺寸均一、分散性好。得到的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料具有抗菌性能好、含水率高、保水性好、韧性强、透气性好等特点，能满足湿法治疗各种创伤的要求。

Description

载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法及其制品

技术领域

本发明涉及一种载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法及其制品。属于金属纳米材料与生物高分子材料复合领域，具体地说是一种以细菌纤维素作为载体制备银金属纳米颗粒复合细菌纤维素的方法及其制品。

背景技术

人类对于敷料的使用由来已久，但在20世纪60年代前沿用的伤口敷料均是以吸收、排除伤口渗出液和隔离伤口为目的的。随着“湿法疗法”的普及，高科技的医用敷料自20世纪70年代后在医疗卫生领域得到日益重视。传统的棉纱布越来越多的被新型医用敷料取代。2000年8月美国食品与药品管理局(FDA)在新颁布的创面医疗用品指南中特别强调，保持创面的湿润环境是标准的处理方法。因此新型敷料应具有保持创面的湿润，促进伤口愈合的功能。目前在发达国家，此类敷料已经成为医用敷料的主流，使用较为普及，国内也开始将其应用于各种急、慢性创面的治疗中。

由于伤口表面有温暖且潮湿的环境，细菌在伤口上的繁殖速度很快，使伤口成为病区内交叉感染一个重要来源。近年来，随着全球气候变暖、以及全球化、城市化带来的人口流动的增加，使各种形式的细菌感染变的越来越严重，抑制细菌增长和繁殖也变得越来越重要。近期研究发现，单一或多种细菌在伤口处所形成的细菌生物膜(bacterial biofilm)是阻碍伤口愈合的主要原因，它可以阻止抗生素药物进入病灶，降低宿主防御，影响伤口愈合时角化细胞正常的迁移和增殖。临床上，为了控制伤口上的细菌并且防止他们的扩散，许多种类的医用敷料中加入了各种各样的抗菌物质。抗生素对于细菌感染的控制和治疗起到了一定的作用，然而随着抗菌药物的不断发现和大量使用，越来越严重的细菌耐药性随之而来。因此对细菌不产生抗药性的新型生物抗菌敷料的研究成为近年来的热点。

细菌纤维素水凝胶敷料作为一种新型的“湿性”敷料具有其独特的物理、化学和机械性质：超细网状结构；高抗张强度和弹性模量；高亲水性，有良好的透气、吸水、透水性能，并有非凡的持水性和高湿强度。大量研究表明细菌纤维素具有良好的体内、体外生物相容性和良好的生物可降解性。极好的形状维持性能和形状可调控性。采用细菌纤维素制成的敷料可以为伤口提供促进愈合的，良好的潮湿的环境；并且敷料可以任意裁剪，与皮肤有极好的伏贴性，具有一定的镇痛效果；其超细网状结构、优异的机械性能和抗张强度使得辅料有一定的可缝性，便于固定。因此采用细菌纤维素作为抗菌材料的基材具有以往其它生物材料、织物等无可比拟的优点，有望成为一种较理想的医用敷料。

国外采用单纯的细菌纤维素作为敷料已有报道，并且已经产业化用于临床。自1987年以来关于用BC膜治疗烧伤、烫伤、褥疮、皮肤移植、创伤和慢性皮肤溃疡等成功病例已屡见不鲜，并且已经有用于人工皮肤、纱布、绷带等的敷料产品。如由Fontana和Mayall等人研发的BC产品，已经被证明在诸如二级、三级烧伤，烫伤，皮肤移植，慢性皮肤溃疡等皮肤伤病方面有非常显著的疗效。另外，Xylos公司推出的由Alvarez等人研制的

纤维素创伤敷料和

抗菌创伤敷料也已在临床上得到了广泛的应用。而国内关于细菌纤维素的研究仍处于起步阶段，有关细菌纤维素敷料的研究鲜有报道。

细菌纤维素是一种天然水凝胶薄膜，用于人造皮肤或其他医用材料有很好的发展前景，它为伤口提供了湿润的环境以促进伤口更好地愈合。但是细菌纤维素本身没有抗菌，消炎等功能，本发明选用银金属纳米颗粒作为抗菌物质，能够使细菌纤维素水凝胶敷料具有高效的抗菌性能，使该水凝胶敷料具有良好的抗菌，消炎和促进伤口愈合等功能。银是已知的一种对人体毒性很小的金属离子，是一种具有广谱抗菌性的无机抗菌材料，几乎对所有的细菌都有抑制作用，并且不会产生细菌抵抗性。银作为最有效的抗菌物质之一，早在很久以前就被人类所认识。古罗马人用银质的容器来储藏食物；蒙古牧民常放一块银币在牛奶容器中，以达到保鲜的目的。1893年，Negeli报道了当银离子浓度在10^-7时即能杀死清水中的藻类生物，而当银离子的浓度在6×10^-5时能阻止黑曲霉菌的发芽。目前新型敷料的研究热点之一就是引入银以达到有效的抗菌效果，避免细菌的抵抗作用。通常认为，Ag的杀菌作用是通过接触反应，即抗菌制品中的Ag与细菌接触反应后，使微生物固有成分破坏或产生功能障碍，且由于金属银的活性很低，在使用金属银时必须保证它的颗粒很细，并且添加在材料的表面。国外在载银敷料研究方面起步较早，且得到了政府的大力支持，目前已经有较多成熟的载银敷料产品。

目前国际市场上的含银医用敷料在加入银的方法上也有很大的区别，总结起来有四种，即混合法、化学处理法、物理处理法和共混法。混合法及将含银的颗粒与载体材料在熔融或溶液状态下混合，使含银化合物均匀地分布在载体材料中，这种方法难以保持生物材料的天然三维网络结构，多用于合成高分子材料与含银化合物的混合。物理处理法则是通过气相沉积的方法将银涂在合成高分子材料上，共混法则是把含银纤维或其它形式的材料与不含银的材料混合后用作敷料，但这难以保证银离子的均匀分散，进而影响银的抗菌性能。采用化学处理方法，用含银的溶液处理载体材料，通过离子交换、还原反应在载体上加入银离子。这种方法制的敷料能够保证银离子活性，而且银颗粒分布均匀，制备方法相对简单，能大大降低成本。但传统的制备方法一般采用还原性较强的还原剂，如硼氢化物，柠檬酸盐，抗坏血酸盐等，且颗粒粒径较大，不易控制。

目前细菌纤维素创伤敷料已经实现了商业化，如：Xylos公司推出的

纤维素创伤敷料和抗菌创伤敷料(加抗生素药物)已在临床上得到了广泛的应用。但是以细菌纤维素为基体的载银材料仍然在实验室阶段，而相关的文献报道主要集中在近两年。

如：Maneerung等将细菌纤维素浸泡在硝酸银溶液中，加入硼氢化钠作为还原剂，制备纳米银复合材料。当硼氢化钠与硝酸银的比例减小时，紫外-可见光光谱有红移现象，表明纳米银颗粒的粒径和粒径分部随还原剂用量的减小而增大。透射电镜结果同样证实这一现象。载银细菌纤维素的抗菌实验表明材料对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有极强的抗菌性能。Pinto等分别采用硼氢化钠和紫外辐照还原硝酸银溶液，制备细菌纤维素复合纳米银材料，紫外-可见光光谱显示在433nm附近有较强的吸收峰，且材料呈黄褐色，说明已经有纳米银颗粒复合在细菌纤维素表面。采用振荡法，分别对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷白式菌进行了抗菌性能的评价，结果表明即使在含银量极低时(10^-4％wt)，仍然具有良好的抗菌效果。Maria等研究了在细菌纤维素中不同还原剂对纳米银制备的影响。在研究中，分别以肼、羟基肼、维生素C作为还原剂，明胶和基乙烯吡咯烷酮作为胶体保护剂在细菌纤维素上合成纳米银。结果表明通过调节还原剂及胶体保护剂可以得到粒径、分部较均匀的纳米银颗粒。Shinsuke Ifuku等采用TEMPO(2，2，6，6-tetramethylpiperidine-1-oxyradical)将细菌纤维素氧化改性，在表面引入羧酸盐基团，浸入硝酸银溶液中，通过离子交换、热还原反应制备纳米银，得到稳定的纳米银颗粒。

综上所述，目前细菌纤维素复合纳米银的制备主要以化学处理法为主，采用硼酸钠、肼、羟基肼等强还原剂还原银化合物。得到的复合材料均具有较好的抗菌性能。但对于医用敷料制备而言，应避免强还原剂的使用。为此我们需要寻找更适合的合成方法及工艺路线。近十年来随着绿色化学(Green Chemistry)的产生和发展，为我们提供了一种新型制备纳米颗粒的合成方法和思路。

中国专利CN101586309A通过银氨溶液与含醛基的化学试剂反应，在细菌纤维素膜上原位生成银纳米颗粒，得到细菌纤维素与纳米银的复合膜。在此方法中需要首先用氢氧化钠对细菌纤维素膜进行处理，然后制备银氨溶液，再以醛基试剂作为还原剂原位生成银纳米颗粒。制备工艺路线较复杂，不易规模化生产。、

因此采用一种简易可行、完全绿色的制备方法制备贵金属纳米颗粒复合材料，得到结晶完好、纯度高、粒径分布窄、粒径大小可控、分散良好的纳米贵金属颗粒具有极大的现实意义。

发明内容

本发明的目的是提供本发明的目的是提供及其制备方法，该方法采用完全绿色的合成路线，利用细菌纤维素纳米网络结构控制了颗粒的生长，避免了颗粒的团聚；具有设备简单、原料容易获得，制备过程灵活简便，无污染，成本低等优点；所制备的银金属纳米颗粒纯度高、粒径小、粒径分布窄、粒径大小可控、分散良好；通过简单改变制备条件可以实现纳米颗粒尺寸和分布的可控制备。得到的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料具有抗菌性能好、含水率高、保水性好、韧性强、透气性好等特点，能满足湿法治疗各种创伤的要求，可用于治疗烧烫伤，褥疮，外科手术感染等皮肤损伤。

本发明的一种载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，将细菌纤维素水凝胶膜在银金属前躯体溶液中浸泡，然后在高压灭菌锅中加热至121℃并加压0.205MPa，静置处理5～30min，再将处理后的细菌纤维素取出洗涤、部分脱水、包装、灭菌。即得到由银金属纳米颗粒与细菌纤维素复合而成的细菌纤维素三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。

作为优选的技术方案：

其中，如上所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，所述的银金属前驱体溶液溶剂为二次蒸馏水。银离子摩尔百分比浓度为0.001～1mol/L。银离子摩尔百分比与最后得到的水凝胶抗菌敷料中银金属纳米颗粒的含量，粒径大小有关。可以通过控制银金属前躯体溶液的摩尔百分比制备所需银金属纳米颗粒含量的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。

如上所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，所述的银金属前驱体为硝酸银、硫酸银、磷酸银或过氯酸银，或者是由氧化银、氯化银、碳酸银等含银化合物与氨水形成的银氨溶液。

如上所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，所述的浸泡的时间为2～720min。银金属前躯体溶液中的银离子通过纤维素表面的含氧基团(羟基、醚基)的离子偶极静电相互作用吸附于细菌纤维素的三维网络中，细菌纤维素特有的化学组分和物理结构(毛细孔道，纳米级纤维、空穴)使其能够在银金属前躯体溶液中均匀吸附银离子。

如上所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，所述的洗涤方法为二次蒸馏水、生理盐水或磷酸盐中性缓冲液水洗，水洗时间为10～20分钟，直至水洗后的溶液中不再出现银离子，可利用银离子与某些离子反应生成沉淀的特性检测有银离子，如：利用银离子与氯离子反应生成氯化银沉淀来判定。所述的部分脱水的方法为自然干燥、离心沥干、真空干燥或机械压除方法。

如上所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，所述的消毒采用γ辐射、压力蒸气灭菌或电子束灭菌方法。

如上所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，所述的细菌纤维素是由木醋杆菌、产醋杆菌、醋化杆菌、巴氏醋杆菌、葡萄糖杆菌、农杆菌、根瘤菌、八叠球菌、洋葱假单胞菌、椰毒假单胞菌或空肠弯曲菌中的一种产出的纤维素膜经过分离提纯除去菌体蛋白和粘附在纤维素膜上的残余培养基使细菌纤维素水凝胶达到药用敷料等级(热源质含量＜0.05EU/ml)。如：可将细菌纤维素水凝胶浸泡在质量百分含量为2～6％的NaOH水溶液中，在60～100℃的温度下加入1～4h。再用二次蒸馏水反复冲洗至中性。按照使用要求，制成2～7mm(±0.1mm)厚，特定长度、宽度的水凝胶膜片。

本发明还提供了一种依据上述方法制得的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料，细菌纤维素水凝胶敷料的三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒，其中水凝胶敷料是由质量百分含量1％-5％细菌纤维素与质量百分含量为0.01％-2％的纳米银颗粒构成。

其中，所述的金属纳米颗粒为银纳米颗粒，颗粒形貌为球形或多面体，颗粒粒径为5～60nm；所述的细菌纤维素水凝胶膜是由木醋杆菌、产醋杆菌、醋化杆菌、巴氏醋杆菌、葡萄糖杆菌、农杆菌、根瘤菌、八叠球菌、洋葱假单胞菌、椰毒假单胞菌或空肠弯曲菌中的一种产出的纤维素。

本发明的一种载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，将细菌纤维素水凝胶膜在银离子摩尔百分比浓度为0.001～1mol/L的银金属前躯体溶液中浸泡2～720min使浸泡充分，金属离子充分吸附到细菌纤维素的纳米级孔径中及微纤表面上，然后在高压灭菌锅中加热至121℃并加压0.205MPa，静置处理5～30min，再将处理后的细菌纤维素取出洗涤、部分脱水、包装、灭菌。即得到由银金属纳米颗粒与细菌纤维素复合而成的细菌纤维素三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

(1)所用的原料为细菌纤维素水凝胶，这种多羟基的生物高分子材料能很好的吸附银离子。羟基和醚键基团通过离子偶极相互作用紧密固定微纤中的银离子，从根本上控制了银金属纳米颗粒的生长，限制了颗粒的团聚。

(2)细菌纤维素的制备过程不使用任何有毒溶剂，不会带来环境污染以及生态危机等问题，符合生物医学领域的使用要求。

(3)利用细菌纤维素自身的还原作用，避免了还原剂的使用，最后所得的产物纯度高，粒径小，属于完全绿色的生产过程。

(4)银金属纳米颗粒直接在细菌纤维素膜的纳米级孔径和微纤表面形成，细菌纤维素膜可以阻碍粒子的成核增长从而控制纳米粒径的大小，可通过改变细菌纤维素的纳米级孔径的结构或银金属前驱体溶液的浓度及高压高压条件，处理时间来控制银金属纳米颗粒的大小。

(5)本发明制备过程简单易行、操作方便、制备技术可控、无污染、成本低；所制备的纳米颗粒纯度高、纳米颗粒粒径小、尺寸均一、分散性好；通过简单改变条件可以实现纳米颗粒尺寸和分布的可控制备。得到的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料具有抗菌性能好、含水率高、保水性好、韧性强、透气性好等特点，能满足湿法治疗各种创伤的要求，可用于治疗烧烫伤，褥疮，外科手术感染等皮肤损伤。

具体实施方式

下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

实施例1：

(1)细菌纤维素水凝胶膜由木醋杆菌制备，将分离提纯后的细菌纤维素水凝胶膜片浸入0.01mol/L硝酸银溶液中浸泡5min。

(2)将细菌纤维素水凝胶膜片与硝酸银溶液一同移入高压锅中，在温度121℃、压力0.205MPa的高温高压下处理10min。

(3)将处理后的复合膜用二次蒸馏水水洗，水洗时间为10分钟，直至水洗后的蒸馏水中不再出现银金属离子；洗净后的复合膜经自然干燥部分脱水、γ辐射灭菌，即得到细菌纤维素三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。其中，水凝胶敷料是由质量百分含量3％细菌纤维素、质量百分含量为0.05％的纳米银颗粒和余量的水构成。所制备的银金属纳米颗粒为立方晶型，颗粒形貌多为球形和/或多面形，平均粒径大小为10nm。

实施例2：

(1)细菌纤维素水凝胶膜由产醋杆菌制备，将分离提纯后的细菌纤维素水凝胶膜片浸入0.001mol/L硝酸银溶液中浸泡2min。

(2)将细菌纤维素水凝胶膜片与硝酸银溶液一同移入高压锅中，在温度121℃、压力0.25MPa的高温高压下处理30min。

(3)将处理后的复合膜用二次蒸馏水水洗，水洗时间为20分钟，直至水洗后的蒸馏水中不再出现银金属离子；洗净后的复合膜经离心沥干部分脱水、压力蒸气灭菌，即得到细菌纤维素三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。其中，水凝胶敷料是由质量百分含量1％细菌纤维素、质量百分含量为0.01％的纳米银颗粒和余量的水构成。所制备的银金属纳米颗粒为立方晶型，颗粒形貌多为球形和/或多面形，平均粒径大小为5nm。

实施例3：

(1)细菌纤维素水凝胶膜由醋化杆菌制备，将分离提纯后的细菌纤维素水凝胶膜片浸入0.1mol/L硫酸银溶液中浸泡10min。

(2)将细菌纤维素水凝胶膜片与硝酸银溶液一同移入高压锅中，在温度125℃、压力0.232MPa的高温高压下处理5min。

(3)将处理后的复合膜用生理盐水水洗，水洗时间为15分钟，直至水洗后的蒸馏水中不再出现银金属离子；洗净后的复合膜经真空干燥部分脱水、电子束灭菌方法灭菌，即得到细菌纤维素三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。其中，水凝胶敷料是由质量百分含量2％细菌纤维素、质量百分含量为1％的纳米银颗粒和余量的水构成。所制备的银金属纳米颗粒为立方晶型，颗粒形貌多为球形和/或多面形，平均粒径大小为15nm。

实施例4：

(1)细菌纤维素水凝胶膜由巴氏醋杆菌制备，将分离提纯后的细菌纤维素水凝胶膜片浸入1mol/L磷酸银溶液中浸泡60min。

(2)将细菌纤维素水凝胶膜片与硝酸银溶液一同移入高压锅中，在温度125℃、压力0.232MPa的高温高压下处理10min。

(3)将处理后的复合膜用磷酸盐中性缓冲液水洗，水洗时间为20分钟，直至水洗后的蒸馏水中不再出现银金属离子；洗净后的复合膜经机械压除方法部分脱水、γ辐射灭菌，即得到细菌纤维素三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。其中，水凝胶敷料是由质量百分含量5％细菌纤维素、质量百分含量为2％的纳米银颗粒和余量的水构成。所制备的银金属纳米颗粒为立方晶型，颗粒形貌多为球形和/或多面形，平均粒径大小为60nm。

实施例5：

(1)细菌纤维素水凝胶膜由葡萄糖杆菌制备，将分离提纯后的细菌纤维素水凝胶膜片浸入0.1mol/L过氯酸银溶液中浸泡120min。

(2)将细菌纤维素水凝胶膜片与硝酸银溶液一同移入高压锅中，在温度130℃、压力0.270MPa的高温高压下处理20min。

(3)将处理后的复合膜用磷酸盐中性缓冲液水洗，水洗时间为20分钟，直至水洗后的蒸馏水中不再出现银金属离子；洗净后的复合膜经机械压除方法部分脱水、γ辐射灭菌，即得到细菌纤维素三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。其中，水凝胶敷料是由质量百分含量3％细菌纤维素、质量百分含量为0.5％的纳米银颗粒和余量的水构成。所制备的银金属纳米颗粒为立方晶型，颗粒形貌多为球形和/或多面形，平均粒径大小为40nm。

实施例6：

(1)细菌纤维素水凝胶膜由农杆菌制备，将分离提纯后的细菌纤维素水凝胶膜片浸入0.1mol/L氧化银与氨水形成的银氨溶液中浸泡720min。

(2)将细菌纤维素水凝胶膜片与硝酸银溶液一同移入高压锅中，在温度130℃、压力0.270MPa的高温高压下处理20min。

(3)将处理后的复合膜用磷酸盐中性缓冲液水洗，水洗时间为20分钟，直至水洗后的蒸馏水中不再出现银金属离子；洗净后的复合膜经机械压除方法部分脱水、γ辐射灭菌，即得到细菌纤维素三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。其中，水凝胶敷料是由质量百分含量4％细菌纤维素、质量百分含量为0.7％的纳米银颗粒和余量的水构成。所制备的银金属纳米颗粒为立方晶型，颗粒形貌多为球形和/或多面形，平均粒径大小为50nm。

实施例7：

(1)细菌纤维素水凝胶膜由根瘤菌制备，将分离提纯后的细菌纤维素水凝胶膜片浸入0.5mol/L氯化银与氨水形成的银氨溶液中浸泡240min。

(2)将细菌纤维素水凝胶膜片与硝酸银溶液一同移入高压锅中，在温度135℃、压力0.313MPa的高温高压下处理10min。

(3)将处理后的复合膜用二次蒸馏水水洗，水洗时间为20分钟，直至水洗后的蒸馏水中不再出现银金属离子；洗净后的复合膜经机械压除方法部分脱水、γ辐射灭菌，即得到细菌纤维素三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。其中，水凝胶敷料是由质量百分含量2％细菌纤维素、质量百分含量为0.3％的纳米银颗粒和余量的水构成。所制备的银金属纳米颗粒为立方晶型，颗粒形貌多为球形和/或多面形，平均粒径大小为30nm。

实施例8：

(1)细菌纤维素水凝胶膜由八叠球菌制备，将分离提纯后的细菌纤维素水凝胶膜片浸入0.05mol/L碳酸银与氨水形成的银氨溶液中浸泡360min。

(2)将细菌纤维素水凝胶膜片与硝酸银溶液一同移入高压锅中，在温度135℃、压力0.313MPa的高温高压下处理10min。

(3)将处理后的复合膜用二次蒸馏水水洗，水洗时间为20分钟，直至水洗后的蒸馏水中不再出现银金属离子；洗净后的复合膜经机械压除方法部分脱水、γ辐射灭菌，即得到细菌纤维素三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。其中，水凝胶敷料是由质量百分含量4％细菌纤维素、质量百分含量为0.1％的纳米银颗粒和余量的水构成。所制备的银金属纳米颗粒为立方晶型，颗粒形貌多为球形和/或多面形，平均粒径大小为30nm。

实施例9：

(1)细菌纤维素水凝胶膜由洋葱假单胞菌制备，将分离提纯后的细菌纤维素水凝胶膜片浸入0.15mol/L硝酸银溶液中浸泡20min。

(2)将细菌纤维素水凝胶膜片与硝酸银溶液一同移入高压锅中，在温度135℃、压力0.313MPa的高温高压下处理10min。

(3)将处理后的复合膜用二次蒸馏水水洗，水洗时间为20分钟，直至水洗后的蒸馏水中不再出现银金属离子；洗净后的复合膜经机械压除方法部分脱水、γ辐射灭菌，即得到细菌纤维素三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。其中，水凝胶敷料是由质量百分含量3％细菌纤维素、质量百分含量为0.03％的纳米银颗粒和余量的水构成。所制备的银金属纳米颗粒为立方晶型，颗粒形貌多为球形和/或多面形，平均粒径大小为20nm。

实施例10：

(1)细菌纤维素水凝胶膜由椰毒假单胞菌制备，将分离提纯后的细菌纤维素水凝胶膜片浸入0.01mol/L硝酸银溶液中浸泡10min。

(2)将细菌纤维素水凝胶膜片与硝酸银溶液一同移入高压锅中，在温度121℃、压力0.205MPa的高温高压下处理10min。

(3)将处理后的复合膜用二次蒸馏水水洗，水洗时间为20分钟，直至水洗后的蒸馏水中不再出现银金属离子；洗净后的复合膜经机械压除方法部分脱水、γ辐射灭菌，即得到细菌纤维素三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。其中，水凝胶敷料是由质量百分含量3％细菌纤维素、质量百分含量为1.5％的纳米银颗粒和余量的水构成。所制备的银金属纳米颗粒为立方晶型，颗粒形貌多为球形和/或多面形，平均粒径大小为10nm。

实施例11：

(1)细菌纤维素水凝胶膜由空肠弯曲菌制备，将分离提纯后的细菌纤维素水凝胶膜片浸入0.01mol/L硝酸银溶液中浸泡10min。

(2)将细菌纤维素水凝胶膜片与硝酸银溶液一同移入高压锅中，在温度121℃、压力0.205MPa的高温高压下处理30min。

(3)将处理后的复合膜用二次蒸馏水水洗，水洗时间为20分钟，直至水洗后的蒸馏水中不再出现银金属离子；洗净后的复合膜经机械压除方法部分脱水、γ辐射灭菌，即得到细菌纤维素三维多孔网络结构中附着银金属纳米颗粒的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。其中，水凝胶敷料是由质量百分含量3％细菌纤维素、质量百分含量为1％的纳米银颗粒和余量的水构成。所制备的银金属纳米颗粒为立方晶型，颗粒形貌多为球形和/或多面形，平均粒径大小为13nm。

Claims (10)

1.载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，其特征是：将细菌纤维素水凝胶膜在银金属前躯体溶液中浸泡，然后在高压灭菌锅中加热至121～135℃并加压0.205～0.313MPa，静置处理5～30min，再将处理后的细菌纤维素取出洗涤、部分脱水、包装、灭菌，即得到由金属银纳米颗粒与细菌纤维素水凝胶复合而成的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料。

2.如权利要求1所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，其特征在于，所述的银金属前驱体溶液的溶剂为二次蒸馏水，其中银离子摩尔百分比浓度为0.001～1mol/L。

3.如权利要求1或2所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，其特征在于，所述的银金属前驱体为硝酸银、硫酸银、磷酸银或过氯酸银，或者是由氧化银、氯化银或碳酸银与氨水形成的银氨溶液。

4.如权利要求1所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，其特征在于，所述的浸泡的时间为2～720min。

5.如权利要求1所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，其特征在于，所述的洗涤方法为二次蒸馏水、生理盐水或磷酸盐中性缓冲液水洗，水洗时间为10～20分钟，直至水洗后的溶液中不再出现银离子；所述的部分脱水的方法为自然干燥、离心沥干、真空干燥或机械压除方法。

6.如权利要求1所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，其特征在于，所述的消毒采用γ辐射、压力蒸气灭菌或电子束灭菌方法。

7.如权利要求1所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法，其特征在于，所述的细菌纤维素是由木醋杆菌、产醋杆菌、醋化杆菌、巴氏醋杆菌、葡萄糖杆菌、农杆菌、根瘤菌、八叠球菌、洋葱假单胞菌、椰毒假单胞菌或空肠弯曲菌中的一种产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和粘附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素。

8.根据权利要求1所述的方法制得的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料，其特征是：所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料是由细菌纤维素水凝胶与质量百分含量为0.01％-2％的纳米银颗粒构成，其中细菌纤维素水凝胶由质量百分含量1％-5％的细菌纤维素和余量的水构成；细菌纤维素水凝胶敷料的三维多孔网络结构中附着金属纳米颗粒。

9.如权利要求8所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料，其特征在于，所述的金属纳米颗粒为银纳米颗粒，颗粒形貌为球形或多面体，颗粒粒径为5～60nm。

10.如权利要求8所述的载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料，其特征在于，所述的细菌纤维素是由木醋杆菌、产醋杆菌、醋化杆菌、巴氏醋杆菌、葡萄糖杆菌、农杆菌、根瘤菌、八叠球菌、洋葱假单胞菌、椰毒假单胞菌或空肠弯曲菌中的一种产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和粘附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素。