CN105311668A - 一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料及其制备方法，细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料是在细菌纤维素水凝胶膜的三维多孔网络结构中附着氧化亚铜颗粒；氧化亚铜颗粒为八面体晶型，所述抗菌敷料是通过将含有葡萄糖溶液的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在NaOH水溶液和铜离子水溶液的混合溶液中，加热加压反应得到的。本发明的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料制备过程简单方便、成本低，不仅具备优异的抗菌性能，而且具有含水率高、透气性好、降解性好和无细胞毒性等优点，能够很好的满足湿法治疗各种创伤的要求。

Description

一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种细菌纤维素抗菌敷料及其制备方法，具体地说是一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料及其制备方法。

背景技术

皮肤是人体的重要组成部分，起保护机体内环境并维护其稳定的作用，皮肤受到损失时，肢体功能形态会受到严重影响。然而，皮肤创伤却是现代社会的常见病，并且呈现逐渐增加的趋势。为了有效治疗皮肤创伤，人们不断寻求有效的治疗方法，医学界也一直在研究这个问题。应用敷料治疗皮肤创伤是最基本也是最重要的方法之一。创伤敷料不仅能覆盖与包扎创面起到暂时保护伤口的作用，还具有防止水分与体液从创面蒸发和流失、防止污染、促进伤口愈合的作用与功能。理想的创伤敷料通常必须具备以下几个条件：(l)能与创面紧贴；(2)防止水分和体液从创面逸出并吸收创面流出的渗出液；(3)无毒无菌；(4)体感好，具有一定的柔韧性和强度；(5)促进新皮肤的生长；(6)易操作维护等。

细菌纤维素(bacterialcellulose，BC)是一种新型生物材料，具有良好的生物亲和性、生物相容性、生物可降解性、生物适应性和无过敏反应，以及高的持水性和结晶度、良好的纳米纤维网络、高的张力和强度，尤其是良好的湿态机械韧性等优良性能，细菌纤维素是一种理想的医用敷料基体材料。目前，细菌纤维素在医学材料上的应用日益受到人们的关注，而对其应用主要集中在高附加值的生物医用材料上，如组织工程支架、人造血管及人造皮肤等，并且都取得了阶段性成果，BC在敷料研究领域也有着广泛的应用。

临床上，为了控制伤口上的细菌并且防止其扩散，许多医用敷料中加入了各种各样的抗菌物质，利于皮肤表面给药，促使创面的愈合和康复。专利CN101708341A介绍了载银细菌纤维素水凝胶抗菌敷料制备方法及其制品，这种方法是以银离子溶液为原料制备得到的，价格比较高昂，纳米银颗粒虽起到抗菌作用但也具有细胞毒性，所以需要开发完全无毒害作用抗菌敷料。专利CN102121038A介绍了一种氧化亚铜/细菌纤维素复合材料的制备方法，改方法在制备过程中采用对苯二酚，对苯二酚具有较大的毒性，所以该种制备方法不能用在抗菌敷料的制备中。专利CN103642062A介绍了一种高催化活性氧化亚铜/再生纤维素复合薄膜的制备方法，该方法是先浸泡铜离子溶液，然后在浸泡NaOH溶液，最后在葡萄糖的水溶液中反应，采用该种方法得到的氧化亚铜的含量比较低，在多次浸泡过程中铜离子溶液会向其他浸泡液中扩散，最后在葡萄糖溶液中反应时，葡萄糖溶液也具有还原性，大大减少了纤维素膜上生成的氧化亚铜的含量；同时由于反应是在碱性环境下反应的，当浸泡在葡萄糖水溶液中时，碱性环境大大减弱，反应效率大大降低；再生纤维素与细菌纤维素的结构和性能是不同的，细菌纤维素的持水量、样式模量、强度和形状维持能力、超细(纳米级)纤维网状结构、生物适应性和生物可降解性都比再生纤维度要好。因此限制了该专利方法在抗菌敷料方面的应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料及其制备方法，本发明的制备方法简单方便、绿色无污染、成本低廉，所制备得到的氧化亚铜纳米颗粒的纯度高、分散良好、粒径大小可控。得到的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料不仅具有优异的抗菌性能，而且有着高的含水率，良好的透气性，降解性良好，无细胞毒性等优点，能够很好的满足湿法治疗各种创伤的要求。

为了实现上述目的，本发明可通过以下技术方案予以解决：

本发明的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，其具体制备步骤如下：

步骤一、将纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在葡萄糖水溶液中，取出，得到细菌纤维素水凝

胶膜A；

步骤二、将NaOH水溶液加入铜离子水溶液中共混，得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热加压反应，静置，再将反应后的细菌纤维素水凝胶膜取出洗涤、部分脱水、包装，灭菌，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到5％-20％，氧化亚铜的质量百分含量0.1-5％，即得到所述细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。

将细菌纤维素水凝胶膜先浸泡在葡萄糖水溶液中，这样可以保证葡萄糖充分并均匀的渗透到细菌纤维素水凝胶膜的内部，由于葡萄糖会和细菌纤维素形成氢键作用，由于这种分子间作用力，葡萄糖向外扩散的速度较慢，有利于后续反应中葡萄糖在细菌纤维素水凝胶膜内部均匀的反应，使更多的氧化亚铜在细菌纤维素水凝胶膜的内部生成，有利于大大提高抗菌敷料的持续抗菌效果。而如果后与葡萄糖水溶液浸泡或反应的话，会使最终产物的氧化亚铜主要集中在表面，抗菌效果的持续性大大降低。将NaOH水溶液加入铜离子水溶液中共混，使OH^-和Cu²⁺始终处于稳定的平衡状态，这是为了提供一个稳定的碱性环境，有利于反应时的稳定性，防止碱性环境不稳定引起的实验结果的不稳定以及实验结果的重复性。现有技术中将再生纤维素依次浸泡铜离子溶液，NaOH溶液和葡萄糖水溶液，再生纤维素上的OH^-浓度无法精确控制，且当铜离子和NaOH反应时，会造成OH^-反应完全甚至Cu²⁺过剩，碱性环境大大减弱，反应效率大大降低。

如上所述的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，步骤一中所述的葡萄糖水溶液的浓度为0.25～4mol/L，所述的浸泡的时间为1～24h。葡萄糖是一种温和的还原剂，能够促进氧化亚铜的生成，其具有良好的生物相容性。

如上所述的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，步骤二中所述的NaOH水溶液的浓度为1.25～10mol/L，所述的铜离子水溶液为硫酸铜水溶液或氯化铜水溶液，浓度为0.25～2mol/L，OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：2～1：5。反应所需环境为碱性条件，更有利于氧化亚铜的生成。

如上所述的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，步骤三中所述的加热的温度为110℃～130℃，所述的加压的压力为0.195～0.203Mpa，所述的反应时间为20～40min，所述的静置的时间为5-10min。加热加压有利于反应的生成，同时确保得到的氧化亚铜而非氧化铜，得到的氧化亚铜粒径分布更均匀，形貌结构为八面体晶型。

本发明还提出通过以上的制备方法制备的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料，是在细菌纤维素水凝胶膜的三维多孔网络结构中附着氧化亚铜颗粒；所述的氧化亚铜颗粒为八面体晶型。选用细菌纤维素是因为这是一种理想的医用抗菌敷料基体材料，具备良好的生物亲和性、生物相容性、生物可降解性、生物适应性和无过敏反应，以及高的持水性和结晶度、良好的纳米纤维网络、高的张力和强度，尤其是湿态机械韧性等优良性能。氧化亚铜成本低廉，制备工艺简单，具有良好的抗菌性能。

如上所述的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料，所述的细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得。所述纯细菌纤维素水凝胶膜是由木醋杆菌、产醋杆菌、醋化杆菌、巴氏醋杆菌、葡萄糖杆菌、农杆菌、根瘤菌、八叠球菌、洋葱假单胞菌、椰毒假单胞菌或空肠弯曲菌中的一种分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，质量百分含量为1％-5％。所述细菌纤维水凝胶膜中水的质量百分含量高，有利于制备过程中反应原料与细菌纤维素之间的接触更充分，制备所得到的产品与伤口接触面积更大，舒适性更好，更有利于伤口愈合。

如上所述的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料，所述分离提纯是指将分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，80-100℃的温度下加热3-4h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性。

如上所述的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料，所述药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数≤100cfu/g。

有益效果：

1、本发明的制备方法简单可控、绿色无污染，相对于其他抗菌敷料产品来说，成本低廉。

2、本发明所使用的葡萄糖作为一种温和的还原剂，对环境不会产生污染且没有毒性，因此有一定的工业应用前景。

3、本发明制备得到的氧化亚铜纳米颗粒的纯度高、分散性好、粒径大小可控。

4、本发明制备得到的抗菌敷料不仅有着优异的抗菌性能，而且具有高的含水率，良好的透气性，降解性更优异等特点，能够很好地满足湿法治疗各种创伤的要求。

5、本发明的氧化亚铜纳米颗粒起抗菌作用，相对其余其他纳米银颗粒来说，没有细胞毒性，能够更好的应用于抗菌敷料领域。

附图说明

图1-1、1-2为本发明的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料进行场发射扫描电镜分析图；

图2为细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料XRD图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

本发明的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料是在细菌纤维素水凝胶膜的三维多孔网络结构中附着氧化亚铜颗粒；所述的氧化亚铜颗粒为八面体晶型。

其中，所述的细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；所述纯细菌纤维素水凝胶膜由木醋杆菌、产醋杆菌、醋化杆菌、巴氏醋杆菌、葡萄糖杆菌、农杆菌、根瘤菌、八叠球菌、洋葱假单胞菌、椰毒假单胞菌或空肠弯曲菌中的一种分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占所述纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为1％-5％。

其中，所述分离提纯是指将分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，80-100℃的温度下加热3-4h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性。

其中，所述药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数≤100cfu/g。

实施例1

一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，首先制得细菌纤维素水凝胶膜，细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；纯细菌纤维素水凝胶膜由木醋杆菌分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为1％，分离提纯是指分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，80℃的温度下加热3h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性，药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数＝100cfu/g，然后进行以下制备步骤：

步骤一、将纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在4mol/L的葡萄糖水溶液中1h，浸泡的时间为1h，取出，得到细菌纤维素水凝胶膜A；

步骤二、将1.25mol/L的NaOH水溶液加入0.25mol/L的铜离子水溶液中共混，OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：5，得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热到130℃，加压到0.203MPa，反应20min，静置10min，再将反应后的细菌纤维素水凝胶膜取出洗涤、通过自然干燥部分脱水、包装，γ辐射灭菌，洗涤为二次蒸馏水洗至水洗后的溶液中不再有Cu²⁺、OH^-、葡萄糖水溶液，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到5％，氧化亚铜的质量百分含量0.1％，即得到细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。对得到的产物进行场发射扫描电镜分析如图1-1、1-2所示，从图1-1、1-2中可以看出，所述的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料是以细菌纤维素水凝胶膜为模板，氧化亚铜纳米颗粒均匀分散其中；所述的氧化亚铜纳米颗粒为八面体晶型。

对产品进行XRD分析，如图2所示，从图2中可以看出，最终得到的细菌纤维素水凝胶膜中含有氧化亚铜的成分。

以纯细菌纤维素水凝胶膜为对照组，采用抑菌圈法对细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料进行抗菌性能测试。对照组无抑菌圈，试样下细菌大量繁殖，纯细菌纤维素膜没有抗菌性；实验组对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具备抗菌性，对金黄色葡萄球菌的抑菌圈宽度达3.9-7.6mm，对大肠杆菌的抑菌圈宽度达1.2-1.7mm。按照国标(GB/T20944.1-2007)的评定标准，所制细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料对这两种细菌均可称为抗菌效果好。

实施例2

一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，首先制得细菌纤维素水凝胶膜，细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；纯细菌纤维素水凝胶膜由产醋杆菌分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为5％，分离提纯是指分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，100℃的温度下加热4h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性，药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数＝90cfu/g，然后进行以下制备步骤：

步骤一、将纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在0.1mol/L的葡萄糖水溶液中24h，浸泡的时间为24h，取出，得到细菌纤维素水凝胶膜A；

步骤二、将10mol/L的NaOH水溶液加入2mol/L的铜离子水溶液中共混，OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：5，得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热到110℃，加压到0.195MPa，反应40min，静置5min，再将反应后的细菌纤维素水凝胶膜取出洗涤、离心沥干部分脱水、包装，压力蒸气灭菌灭菌，洗涤为生理盐水中性缓冲液水洗至水洗后的溶液中不再有Cu²⁺、OH^-、葡萄糖水溶液，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到20％，氧化亚铜的质量百分含量5％，即得到所述细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。

实施例3

一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，首先制得细菌纤维素水凝胶膜，细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；纯细菌纤维素水凝胶膜由醋化杆菌分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为3％，分离提纯是指分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，90℃的温度下加热3h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性，药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数＝80cfu/g，然后进行以下制备步骤：

步骤一、将纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在0.1mol/L的葡萄糖水溶液中24h，得到细菌纤维素水凝胶膜A；

步骤二、将2mol/L的NaOH水溶液加入1mol/L的铜离子水溶液中共混，OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：2得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热到110℃，加压到0.195MPa，反应40min，静置5min，再将反应后的细菌纤维素水凝胶膜取出洗涤、真空干燥部分脱水、包装，电子束灭菌，洗涤为磷酸盐中性缓冲液水洗至水洗后的溶液中不再有Cu²⁺、OH^-、葡萄糖水溶液，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到10％，氧化亚铜的质量百分含量3％，即得到所述细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。

实施例4

一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，首先制得细菌纤维素水凝胶膜，细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；纯细菌纤维素水凝胶膜由巴氏醋杆菌分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为2％，分离提纯是指分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，100℃的温度下加热4h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性，药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数＝70cfu/g，然后进行以下制备步骤：

步骤一、将纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在浓度为0.2mol/L的葡萄糖水溶液中，浸泡的时间为10h，取出，得到细菌纤维素水凝胶膜A；

步骤二、将浓度为1.50mol/L的NaOH水溶液加入浓度为1.25mol/L铜离子水溶液中共混，OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：2，得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热110℃加压0.198MPa反应25min，静置6min，再将静置后的细菌纤维素水凝胶膜C取出洗涤、自然干燥部分脱水、包装和压力蒸气灭菌灭菌，洗涤为二次蒸馏水中性缓冲液水洗至水洗后的溶液中不再有Cu²⁺、OH^-、葡萄糖水溶液，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到5％-20％，氧化亚铜的质量百分含量0.1-5％，即得到所述细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。

实施例5

一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，首先制得细菌纤维素水凝胶膜，细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；纯细菌纤维素水凝胶膜由葡萄糖杆菌分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为4％，分离提纯是指分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，90℃的温度下加热3.5h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性，药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数＝60cfu/g，然后进行以下制备步骤：

步骤一、将质量百分含量为1％的纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在4mol/L的葡萄糖水溶液中1h，浸泡的时间为22h，取出，得到细菌纤维素水凝胶膜A；

步骤二、将1.25mol/L的NaOH水溶液加入0.25mol/L的铜离子水溶液中共混，OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：5，得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热到130℃，加压到0.203MPa，反应20min，静置10min，再将反应后的细菌纤维素水凝胶膜取出洗涤、自然干燥部分脱水、包装和压力蒸气灭菌灭菌，洗涤为二次蒸馏水中性缓冲液水洗至水洗后的溶液中不再有Cu²⁺、OH^-、葡萄糖水溶液，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到10％，氧化亚铜的质量百分含量0.5％，即得到所述细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料，即得到所述细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。

实施例6

一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，首先制得细菌纤维素水凝胶膜，细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；所述纯细菌纤维素水凝胶膜由葡萄糖杆菌分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为2％，分离提纯是指分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，80-100℃的温度下加热3-4h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性，药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数＝50cfu/g，然后进行以下制备步骤：

步骤一、将质量百分含量为5％的纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在0.1mol/L的葡萄糖水溶液中24h，浸泡的时间为1～24h，取出，得到细菌纤维素水凝胶膜A；

步骤二、将10mol/L的NaOH水溶液加入2mol/L的铜离子水溶液中共混，OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：5得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热到110℃，加压到0.195MPa，反应40min，静置5min，再将反应后的细菌纤维素水凝胶膜取出洗涤、自然干燥部分脱水、包装和压力蒸气灭菌灭菌，洗涤为二次蒸馏水中性缓冲液水洗至水洗后的溶液中不再有Cu²⁺、OH^-、葡萄糖水溶液，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到15％，氧化亚铜的质量百分含量0.6％，即得到所述细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料，即得到所述细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。

实施例7

一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，首先制得细菌纤维素水凝胶膜，细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；纯细菌纤维素水凝胶膜由农杆菌分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为2％，分离提纯是指分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，85℃的温度下加热3h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性，药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数＝40cfu/g，然后进行以下制备步骤：

步骤一、将质量百分含量为5％的纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在0.1mol/L的葡萄糖水溶液中24h，得到细菌纤维素水凝胶膜A；

步骤二、将2mol/L的NaOH水溶液加入1mol/L的铜离子水溶液中共混，OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：2得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热到110℃，加压到0.195MPa，反应40min，静置5min，再将反应后的细菌纤维素水凝胶膜取出洗涤、自然干燥部分脱水、包装和压力蒸气灭菌灭菌，洗涤为二次蒸馏水中性缓冲液水洗至水洗后的溶液中不再有Cu²⁺、OH^-、葡萄糖水溶液，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到6％，氧化亚铜的质量百分含量1.5％，即得到细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。

实施例8

一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，首先制得细菌纤维素水凝胶膜，细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；纯细菌纤维素水凝胶膜由根瘤菌分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为3％，分离提纯是指分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，85℃的温度下加热3h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性，药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数＝30cfu/g，然后进行以下制备步骤：

步骤一、将纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在浓度为2mol/L的葡萄糖水溶液中，浸泡的时间为10h，取出，得到细菌纤维素水凝胶膜A；

步骤二、将浓度为5mol/L的NaOH水溶液加入浓度为0.25mol/L铜离子水溶液中共混，OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：3，得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热到115℃，加压到0.198MPa反应20min，静置6min，再将静置后的细菌纤维素水凝胶膜C取出洗涤、自然干燥部分脱水、包装和压力蒸气灭菌灭菌，洗涤为二次蒸馏水中性缓冲液水洗至水洗后的溶液中不再有Cu²⁺、OH^-、葡萄糖水溶液，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到8％，氧化亚铜的质量百分含量3.5％，即得到所述细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。

实施例9

一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，首先制得细菌纤维素水凝胶膜，细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；纯细菌纤维素水凝胶膜由八叠球菌分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为4％，分离提纯是指分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，88℃的温度下加热3h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性，药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数＝20cfu/g，然后进行以下制备步骤：

步骤一、将纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在浓度为3mol/L的葡萄糖水溶液中，浸泡的时间为18h，取出，得到细菌纤维素水凝胶膜A；

步骤二、将浓度为6mol/L的NaOH水溶液加入浓度为1.5mol/L铜离子水溶液中共混，OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：4，得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热到118℃，加压到0.200MPa，反应28min，静置5min，再将静置后的细菌纤维素水凝胶膜C取出洗涤、自然干燥部分脱水、包装和压力蒸气灭菌灭菌，洗涤为二次蒸馏水中性缓冲液水洗至水洗后的溶液中不再有Cu²⁺、OH^-、葡萄糖水溶液，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到18％，氧化亚铜的质量百分含量2.5％，即得到细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。

实施例10

一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，首先制得细菌纤维素水凝胶膜，细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；纯细菌纤维素水凝胶膜由洋葱假单胞菌分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为5％，分离提纯是指分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，100℃的温度下加热4h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性，药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数＝10cfu/g，然后进行以下制备步骤：

步骤一、将纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在浓度为3.5mol/L的葡萄糖水溶液中，浸泡的时间为5h，取出，得到细菌纤维素水凝胶膜A；

步骤二、将浓度为6.5mol/L的NaOH水溶液加入浓度为1.25mol/L铜离子水溶液中共混，OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：2，得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热到120℃，加压到0.197MPa，反应25min，静置10min，再将静置后的细菌纤维素水凝胶膜C取出洗涤、自然干燥部分脱水、包装和压力蒸气灭菌灭菌，洗涤为二次蒸馏水中性缓冲液水洗至水洗后的溶液中不再有Cu²⁺、OH^-、葡萄糖水溶液，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到12％，氧化亚铜的质量百分含量0.9％，即得到细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。

实施例11

一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，首先制得细菌纤维素水凝胶膜，细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；纯细菌纤维素水凝胶膜由椰毒假单胞菌分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为2％，分离提纯是指分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，88℃的温度下加热3h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性，药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数＝5cfu/g，然后进行以下制备步骤：

步骤一、将纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在浓度为2.5mol/L的葡萄糖水溶液中，浸泡的时间为8h，取出，得到细菌纤维素水凝胶膜A；

步骤二、将浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液加入浓度为2mol/L铜离子水溶液中共混，OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：5，得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热到130℃，加压到0.200MPa，反应25min，静置8min，再将静置后的细菌纤维素水凝胶膜C取出洗涤、自然干燥部分脱水、包装和压力蒸气灭菌灭菌，洗涤为二次蒸馏水中性缓冲液水洗至水洗后的溶液中不再有Cu²⁺、OH^-、葡萄糖水溶液，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到12％，氧化亚铜的质量百分含量2.5％，即得到所述细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。

实施例12

一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，首先制得细菌纤维素水凝胶膜，细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；纯细菌纤维素水凝胶膜由空肠弯曲菌分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为5％，分离提纯是指分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，80℃的温度下加热3h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性，药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数＝1cfu/g，然后进行以下制备步骤：

步骤一、将纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在浓度为0.8mol/L的葡萄糖水溶液中，浸泡的时间为12h，取出，得到细菌纤维素水凝胶膜A；

步骤二、将浓度为6.5mol/L的NaOH水溶液加入浓度为0.50mol/L铜离子水溶液中共混，OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：3，得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热到120℃，加压到0.201MPa反应20min，静置5min，再将静置后的细菌纤维素水凝胶膜C取出洗涤、自然干燥部分脱水、包装和压力蒸气灭菌灭菌，洗涤为二次蒸馏水中性缓冲液水洗至水洗后的溶液中不再有Cu²⁺、OH^-、葡萄糖水溶液，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到8％，氧化亚铜的质量百分含量3.2％，即得到所述细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。

Claims (9)

1.一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，其特征是：其具体制备步骤如下：

步骤一、将纯细菌纤维素水凝胶膜浸泡在葡萄糖水溶液中，取出，得到细菌纤维素水凝胶膜A；

步骤二、将NaOH水溶液加入铜离子水溶液中共混，得到溶液B；

步骤三、将步骤一得到的细菌纤维素水凝胶膜A浸泡在步骤二得到的溶液B中，加热加压反应，静置，再将细菌纤维素水凝胶膜取出洗涤、部分脱水、包装和灭菌，得到所述细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料。

2.根据权利要求1所述的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，其特征在于，步骤一中所述的葡萄糖水溶液的浓度为0.1～4mol/L，所述的浸泡的时间为1～24h。

3.根据权利要求1所述的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，其特征在于，步骤二中所述的NaOH水溶液的浓度为1.25～10mol/L，所述的铜离子水溶液为硫酸铜水溶液或氯化铜水溶液，浓度为0.25～2mol/L；OH^-和Cu²⁺的浓度比为1：2～1：5。

4.根据权利要求1所述的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，其特征在于，步骤三中所述的加热的温度为110℃～130℃，所述的加压的压力为0.195～0.203MPa，所述的反应时间为20～40min，所述的静置的时间为5-10min。

5.根据权利要求1所述的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料的制备方法，其特征在于，步骤三中所述洗涤为二次蒸馏水、生理盐水或磷酸盐中性缓冲液水洗至水洗后的溶液中不再有Cu²⁺、OH^-、葡萄糖水溶液；所述部分脱水为通过自然干燥、离心沥干、真空干燥或是机械压除达到部分脱水，脱水后的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料中细菌纤维素的质量百分含量达到5％-20％，氧化亚铜的质量百分含量0.1-5％；所述灭菌为γ辐射、压力蒸气灭菌或电子束灭菌方法。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的制备方法制备的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料，其特征是，所述的细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料是在细菌纤维素水凝胶膜的三维多孔网络结构中附着氧化亚铜颗粒；所述的氧化亚铜颗粒为八面体晶型。

7.根据权利要求6所述的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料，其特征在于，所述的细菌纤维素水凝胶膜为基体材料，是纯细菌纤维素水凝胶膜经处理后所得；所述纯细菌纤维素水凝胶膜由木醋杆菌、产醋杆菌、醋化杆菌、巴氏醋杆菌、葡萄糖杆菌、农杆菌、根瘤菌、八叠球菌、洋葱假单胞菌、椰毒假单胞菌或空肠弯曲菌中的一种分泌产出的、经过分离提纯除去菌体蛋白和黏附在纤维素膜上的残余培养基达到药用敷料等级的细菌纤维素，细菌纤维素占所述纯细菌纤维素水凝胶膜的质量百分含量为1％-5％。

8.根据权利要求7所述的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料，其特征在于，所述分离提纯是指将分泌产出的细菌纤维素水凝胶膜浸泡在质量百分含量为5％的NaOH水溶液中，80-100℃的温度下加热3-4h，再用二次蒸馏水反复冲洗至中性。

9.根据权利要求7所述的一种细菌纤维素复合氧化亚铜抗菌敷料，其特征在于，所述药用敷料等级是指符合一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995，抗菌敷料的微生物指标满足产品初始污染菌数≤100cfu/g。