CN101578092B - 用于皮肤增白的含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物作为活性成分的化妆品组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物作为活性成分的皮肤增白化妆品组合物。所公开的组合物可以通过作用于因紫外线而分泌的α-MSH的黑色素合成路线来控制或抑制黑色素的合成,并且与常规的皮肤增白化妆品相比,表现出优异的增白效果。此外,所述组合物具有高的制剂稳定性和低的皮肤刺激。

Description

用于皮肤增白的含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物作为活性成分的化妆品组合物
技术领域
本发明涉及一种含有牛蒡子甙(arctiin)、牛蒡子甙元(arctigenin)或其混合物作为活性成分的皮肤增白化妆品组合物。
背景技术
每个人都始终希望具有白色和细腻皮肤。一般来说,人的皮肤、头发、眼睛等的颜色取决于黑色素、胡萝卜素、血红素等。特别是,黑色素也是人皮肤颜色的主要决定因素。换句话说,皮肤颜色取决于黑色素的量、性质和分布。人的皮肤或头发中的色素在保护皮肤或头发免受阳光(尤其是紫外线)的有害影响方面起作用。例如,缺乏这种色素的人对阳光非常敏感,会受到灼伤,因此,即使他/她很年轻,也有很大的可能性患皮肤癌。短波长(290-320nm)的紫外线和致癌物质在皮肤中形成有害自由基,例如氧自由基,并因而这种氧自由基通过攻击皮肤细胞而诱导皮肤老化。
紫外线引起的色素沉积可由DNA损伤直接造成。此外,当细胞因子(一种生长因子)和因紫外线作用在角化细胞和纤维原细胞上而分泌的激素刺激黑色素细胞时,可能造成这种色素沉积。角化细胞由于炎症和紫外线照射而分泌α-黑素细胞刺激激素(α-MSH)、刺鼠信号蛋白(ASP)、内皮素等,从而促进黑色素的合成。α-MSH主要从垂体前叶腺分泌,也由于炎症或紫外线照射而从角化细胞分泌。α-MSH由从紫外线刺激的角化细胞分泌的POMC(Proopiomelanocortin,阿黑皮素原)蛋白的蛋白水解产生,将α-MSH接种到培养的黑色素细胞中提高了黑色素细胞的增长和酪氨酸酶的活性。
黑色素的主要功能是消除这种有害的自由基,从而保护皮肤免受自由基所造成的损伤。因此,大量的黑色素表明存在保护皮肤免受物理/化学有毒物质损伤的有效体系。
此外,在黑色素的合成中,酪氨酸转化为多巴(DOPA),然后通过酪氨酸酶的酶活性转化为多巴醌,然后进行非酶氧化而合成黑色素。然后,通过循环过程,合成的黑色素转移到皮肤细胞,然后,通过表皮松解失去。
这种黑色素合成过程是一种自然现象,不会在正常状态的人皮肤中过度发生,但在受到诸如紫外线、环境污染、应激等外部刺激的皮肤中会过度发生。当这种过度合成的黑色素保留在皮肤中而没有被排放到皮肤外部时,发生色素沉积,从而产生黄褐斑、雀斑等。
因此,皮肤增白可以通过抑制黑色素的合成来实现,抑制黑色素合成的代表性方法包括阻断外部刺激如紫外线、抑制有关黑色素合成的酪氨酸酶的激活、抑制有关黑色素细胞合成的黑色素细胞的分裂、使用维生素C衍生物等。
在用于皮肤增白或改善黄褐斑和雀斑的传统增白化妆品中,对于酪氨酸酶具有抑制活性的物质,如氢醌、抗坏血酸、曲酸、谷胱甘肽等,与油膏或化妆品混合。然而,氢醌具有皮肤增白效果,但是由于高皮肤刺激的原因其使用量受到限制,而且因为抗坏血酸容易被氧化,所以含有抗坏血酸的化妆品会发生颜色变化或恶化。此外,巯基化合物如谷胱甘肽,半胱氨酸等不适宜作为化妆品的混合组分,因为这类化合物具有特殊的不愉快气味,不良的透皮吸收性,并且其糖苷和衍生物具有高极性。
近来,为了解决上述问题,许多化妆品公司进行了很多研究和开发,结果发现各种自然物质,如桑白皮的树皮、甘草、树参、天冬草、铁冬青、连翘(Forsythia suspensa)、牛蒡果实等对于皮肤增白有效。然而,大多数物质是混合了各种成分的提取物,因此,使用高浓度的这类物质可能会降低化妆品的稳定性、刺激皮肤并且会根据浓度相对降低增白效果。
发明内容
因此,本发明的发明人试图研发通过作用于α-MSH的黑色素合成路线来控制和抑制黑色素合成的物质,并解决常规皮肤增白化妆品组合物的问题,如化妆品的稳定性、敏感性、相对较弱的增白效果。结果发现,含有牛蒡子甙和牛蒡子甙元的组合物表现出高度的增白效果和皮肤稳定性。
因此,本发明的一个目的是提供一种含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物作为活性成分的皮肤增白化妆品组合物。
此外,本发明的另一个目的是提供一种化妆方法,包括向人皮肤施用含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物作为活性成分的皮肤增白化妆品组合物。
下面,详细说明本发明的目的和优点。
具体实施方式
根据本发明的一方面,提供一种含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物作为活性成分的皮肤增白化妆品组合物。
在根据本发明的化妆品组合物中作为活性成分的牛蒡子甙元是化学式1代表的分子量为372的配体化合物,4-[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]二氢-3-[(4-羟基-3-甲氧基苯基)甲基]-2(3H)-呋喃酮。牛蒡子甙是牛蒡子甙元的糖苷,包括在其上连接的葡萄糖(式1),其是分子量为535的配体化合物,4-[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]二氢-3-[(4-葡萄糖-3-甲氧基苯基)甲基]-2(3H)-呋喃酮。牛蒡子甙和牛蒡子甙元均是配体化合物,与连翘中包含的各种成分相比,如马台树脂醇、胡黄连、连翘酯苷、齐墩果酸、白桦脂酸、芸香苷和熊果酸(参照实施例1和3),它们具有非常高的增白活性。本发明的牛蒡子甙和牛蒡子甙元可以从连翘(朝鲜连翘)提取,并且市场上有销售。此外,本发明的牛蒡子甙和牛蒡子甙元可以从牛蒡(arctiumlappa)、牛蒡的干果、红花(carthamus tinctorius)等提取。
化学式1
Figure G2008800021710D00031
R=H  牛蒡子甙元  R=Glc  牛蒡子甙
本发明的术语“配体化合物”指二元酚化合物,由于其与类固醇雌激素具有类似的结构和分子量,而被称为植物雌激素。另外,这种配体化合物由于与类固醇雌激素具有类似的作用而对于激素依赖性疾病是有效的。已知的是,这种配体化合物会减少疾病,如乳腺癌、大肠癌和前列腺癌,抑制绝经后妇女的心脏病和骨质疏松症,并且具有抗氧化/抗炎/抗病毒作用(The Royal Soc.of Chemistry,UK,1996;Anderson JJB,GarnerSC,Nutr.Res.,17:1617-1632,1997)。
本发明中使用的牛蒡子甙和牛蒡子甙元可以通过作用于因紫外线而分泌的α-MSH的黑色素合成路线来控制或抑制黑色素的合成,从而增白皮肤颜色。
本发明的牛蒡子甙和牛蒡子甙元可以从天然来源提取,如牛蒡、牛蒡的干果、红花、连翘等,也可以经化学合成。
在本发明的牛蒡子甙和牛蒡子甙元的混合物中,牛蒡子甙和牛蒡子甙元的混合重量比为100∶1~1∶100,优选7∶1~1∶7,最优选3∶1~1∶3。
在本发明中按化妆品组合物的总重计,牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物的含量为0.00001~40.0wt%,优选0.005~20wt%,更优选0.001~15.0wt%,最优选0.1~8.0wt%。
如果在本发明中牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物的含量小于0.00001wt%,那么不能实现显著的增白效果。另一方面,如果牛蒡子甙和牛蒡子甙元的含量大于40.0wt%,也不会获得相应于增加含量的显著增白效果,并可能会发生与皮肤刺激和制剂稳定性有关的问题。
本发明的化妆品组合物含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物作为活性成分,还含有化妆品组合物常规使用的组分(例如,常规的添加剂,如抗氧化剂、稳定剂、增溶剂、维生素、色素和香料)和载体组分。
根据本发明的化妆品组合物可以制备成本领域中已知的任何常规制剂形式,所述制剂可以包括但不限于溶液、悬浮液、乳液、糊剂、凝胶、霜剂、洗剂、粉剂、皂剂、含有表面活性剂的清洁剂、油、粉底霜、乳液底霜、蜡剂底霜和喷雾剂等。更具体地说,化妆品组合物可以配制成诸如皮肤软化剂(皮肤洗剂)、营养洗剂、营养霜、按摩霜、香精、眼霜、清洁霜、清洁泡沫、清洁水、面膜、喷雾剂或粉剂等形式的制剂。
当根据本发明的化妆品组合物的制剂是糊剂、霜剂或凝胶时,其可以使用以下物质作为载体组分:动物油、植物油、蜡、石蜡、淀粉、黄芪胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、二氧化硅、滑石粉、氧化锌等。
当根据本发明的化妆品组合物的制剂是粉末或喷雾剂时,其可以使用以下物质作为载体组分:乳糖、滑石粉、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉末,特别是,喷雾剂制剂还可以含有推进剂,如氯氟烃、丙烷/丁烷或二甲醚。
当根据本发明的化妆品组合物的制剂是溶液或乳液时,其可以使用以下物质作为载体组分:溶剂、增溶剂或乳化剂(例如,水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油类、甘油脂肪酸酯、聚乙二醇或失水山梨糖醇脂肪酸酯)。
当根据本发明的化妆品组合物的制剂是悬浮液时,其可以使用以下物质作为载体组分:液体稀释剂(如水、乙醇或丙二醇)、悬浮剂(如乙氧基化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇酯、聚氧乙烯失水山梨糖醇酯)、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂或黄芪胶等。
当根据本发明的化妆品组合物的制剂是含有表面活性剂的清洁剂时,其可以使用以下物质作为载体组分:脂肪醇硫酸盐、脂肪醇醚硫酸盐、磺化琥珀酸单酯、羟乙磺酸盐、咪唑鎓衍生物、甲基牛磺酸盐、肌氨酸盐、脂肪酸酰胺醚硫酸盐、烷基酰胺基甜菜碱、脂肪醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸二乙醇酰胺、植物油、羊毛脂衍生物、乙氧基化的甘油脂肪酸酯等。
根据本发明的另一方面,提供一种化妆方法,通过向人皮肤施用含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物作为活性成分的皮肤增白化妆品组合物可以实现皮肤增白效果。
在根据本发明的方法中,根据本发明的化妆品组合物可以独立地或反复地使用,或者其他化妆品组合物与根据本发明的化妆品组合物可以一起施用。此外,可以根据常规方法施用根据本发明的具有优异增白效果的化妆品组合物,并且施用次数可以随使用者的皮肤状况或使用者的嗜好变化。
当具有诸如皂剂、含有表面活性剂的清洁剂、不含有表面活性剂的清洁剂等制剂形式的根据本发明的化妆品组合物施用于皮肤时,施用的化妆品组合物可以洗去、除去或抹去。具体而言,所述皂剂可以包括液体皂剂、粉末皂剂、固体皂剂、油状皂剂等;所述含有表面活性剂的清洁剂可以包括清洁泡沫、清洁水、清洁巾、清洁面膜等;所述不含有表面活性剂的清洁剂可以包括清洁霜、清洁洗剂、清洁水、清洁凝胶等。
下面,结合优选实施例详细说明本发明。然而,以下实施例仅是说明性的,本发明的范围不限于此。
制备例1:从连翘制备活性物质
向1kg经纯净水洗涤、干燥和成粉的连翘(朝鲜连翘的果实)粉末中加入5L 95%乙醇,并进行回流搅拌。然后,通过过滤和浓缩,获得33.2g浓缩物。接下来,加入正己烷,进行脱脂过程(分馏和分离),获得19.3g浓缩物。通过加入水和甲醇,使用阳离子交换树脂Diaion HP-20(柱25×100cm)分离浓缩物,连续升高甲醇浓度(10%甲醇、20%甲醇等)。在各馏分中,浓缩到60-80%的甲醇馏分,获得3.5g浓缩物,将浓缩物溶解于甲醇中。通过LH-20和MPLC分离,获得0.63g牛蒡子甙,用NMR、质谱等观察。连翘的其他活性物质,如牛蒡子甙元、马台树脂醇、胡黄连、连翘酯苷、齐墩果酸、白桦脂酸、芸香苷和熊果酸,均购自Sigma或Fluka。每种活性物质,如牛蒡子甙和牛蒡子甙元,独立地以高浓度(1,000ppm)溶解于1,3-丁二醇,并可以稀释或不稀释。
制备例2:制备牛蒡子甙和牛蒡子甙元的混合物
按与制备例1所述相同的方式从连翘提取并制备牛蒡子甙,与购自Sigma的牛蒡子甙元以1∶3~3∶1的重量比混合,并以高浓度(4,000ppm)溶解于1,3-丁二醇。
实验例1:连翘活性物质的黑色素合成抑制
将用于黑色素合成抑制实验的α-MSH溶解于10%DMSO(二甲亚砜)中,并用作1mM溶液。将B-16黑素瘤(ATCC CRL 6323)细胞系(来自小鼠)接种到含有4.5g/L葡萄糖、10%血清和1%抗生素的DMEM培养基中,并在75cm2细胞培养瓶中于37℃、5%CO2下次培养。次培养的黑素瘤细胞系在75cm2细胞培养瓶中培养24小时,用含有0.02%EDTA的0.05%胰蛋白酶处理。然后,分离细胞,接种于75cm2细胞培养瓶中,进一步培养6小时。这里,细胞的数量为1×107细胞/瓶。然后,黑素细胞刺激激素在DMEM培养基中稀释到终浓度为100μg/ml。接下来,将牛蒡子甙、牛蒡子甙元、马台树脂醇、齐墩果酸、白桦脂酸、芸香苷和熊果酸中的每一种在DMEM培养基中稀释到终浓度为10-1000μg/ml,以进行黑素瘤细胞的处理,然后细胞在37℃下进一步培养5天。接下来,获得培养基,在475nm下测量吸光度,并通过比较黑色素合成,计算IC50(μg/ml),即抑制黑色素合成50%的密度。表1显示了结果。
表1黑色素合成抑制(IC50(μg/ml))
  测试物质   IC50(μg/ml)   公司
  牛蒡子甙   <40   制备
  牛蒡子甙元   <40   Sigma
  马台树脂醇   <200   Fluka
  齐墩果酸   <1000   Sigma
  白桦脂酸   <500   Sigma
  芸香苷   <500   Sigma
  熊果酸   <500   Sigma
如表1所示,与连翘的其他物质相比,牛蒡子甙和牛蒡子甙元对于黑色素合成抑制最有效。
实验例2:牛蒡子甙、牛蒡子甙元和其混合物的黑色素合成抑制
按与实验例1所述相同的方式进行黑色素合成抑制实验,除了以下步骤。将通过制备例1和2制备的牛蒡子甙、牛蒡子甙元、牛蒡子甙和牛蒡子甙元的1∶3混合物以及牛蒡子甙和牛蒡子甙元的3∶1混合物在DMEM培养基中稀释到终浓度为60、100、140、180μg/ml,以处理黑素瘤细胞,然后,这些细胞在37℃下进一步培养5天。接下来,获得培养基,在475nm下测量吸光度,比较黑色素合成。根据数学式1计算黑色素合成抑制(%),细胞培养物的对照值仅含有黑素细胞刺激激素。表2显示了结果。
数学式1
Figure G2008800021710D00081
表2黑色素合成抑制(%)(n=3)
Figure G2008800021710D00082
如表2所示,牛蒡子甙、牛蒡子甙元、牛蒡子甙和牛蒡子甙元的1∶3混合物以及牛蒡子甙和牛蒡子甙元的3∶1混合物的黑色素合成抑制(%)随浓度增加而增大。特别是,已经确定,与其他物质相比,牛蒡子甙和牛蒡子甙元的1∶3混合物非常有效。
实验例3:黑素细胞中的黑色素合成酶的表达抑制I
按与实验例1所述相同的方式进行实验,除了加入牛蒡子甙、牛蒡子甙元、马台树脂醇、齐墩果酸、白桦脂酸、芸香苷和熊果酸中的每一种,并且进一步培养3天以获得细胞。此外,为了比较黑色素合成酶的表达抑制,进行对照例1不含有连翘活性物质和对照例2含有黑素细胞刺激激素的实验。用磷酸钠缓冲液洗涤获得的细胞2次,用0.1%TritonX-100处理,并用超声破碎仪反应30秒。通过在4℃下使用12,000rpm的高速离心机30分钟,从反应溶液中分离出细胞沉淀和上清液。利用电泳从分离的上清液中分离出蛋白,在含有0.2%DOPA溶液的反应溶液中反应约8小时。然后,测量凝胶中酪氨酸酶的产生。表3显示了结果。
表3对酪氨酸酶的生物合成的抑制作用(100μg/ml)
  测试物质   酪氨酸酶带的强度
  对照例1   123
  对照例2   211
  牛蒡子甙   155
  牛蒡子甙元   135
  马台树脂醇   180
  齐墩果酸   200
  白桦脂酸   170
  芸香苷   150
  熊果酸   180
在表3中,随着酪氨酸酶带的强度降低,对酪氨酸酶的生物合成的抑制作用增大。因此,已经确定,牛蒡子甙和牛蒡子甙元表现出低的带强度,这与不含有连翘活性物质的对照例1类似,并且与仅含有黑素细胞刺激激素的对照例2相比,表现出显著的高抑制作用。此外,与连翘的其他物质相比,牛蒡子甙和牛蒡子甙元对酪氨酸酶表现出较高的抑制作用。
实验例4:源于黑素细胞的黑色素合成酶的表达抑制II
确定可以由牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物实现的源于黑素细胞的黑色素合成酶的表达抑制作用。按与实验例1所述相同的方式进行实验,除了加入制备例1和2中制备的牛蒡子甙、牛蒡子甙元、牛蒡子甙和牛蒡子甙元的1∶3混合物以及牛蒡子甙和牛蒡子甙元的3∶1混合物中的每一种,并且进一步培养3天以获得细胞。此外,为了比较黑色素合成酶的表达抑制,进行对照例1不含有黑素细胞刺激激素和测试物质以及对照例2含有黑素细胞刺激激素的实验。用磷酸钠缓冲液洗涤获得的细胞2次,用0.1%Triton X-100处理,并用超声破碎仪反应30秒。通过在4℃下使用12,000rpm的高速离心机30分钟,从反应溶液中分离出细胞沉淀和上清液。利用电泳从分离的上清液中分离出蛋白,在含有0.2%DOPA溶液的反应溶液中反应约8小时。然后,测量电泳凝胶中酪氨酸酶的产生。表4显示了结果。
表4黑素细胞刺激激素对酪氨酸酶的生物合成的抑制作用(μg/ml)
  牛蒡子甙   牛蒡子甙元   牛蒡子甙和牛蒡子甙元的3∶1混合物   牛蒡子甙和牛蒡子甙元的1∶3混合物   黑素细胞刺激激素   酪氨酸酶带的强度
 对照例1   -   -   -   -   0   123
 对照例2   -   -   -   -   100   211
 实施例1   100   -   -   -   100   155
 实施例2   -   100   -   -   100   135
 实施例3   -   -   100   -   100   145
 实施例4   -   -   -   100   100   129
如表4所示,与不含有连翘活性物质和不含有黑素细胞刺激激素的阴性对照例1相比,含有黑素细胞刺激激素的阳性对照例2表现出酪氨酸酶蛋白增加。另一方面,在阳性对照例的比较中,含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元、牛蒡子甙和牛蒡子甙元的1∶3混合物以及牛蒡子甙和牛蒡子甙元的3∶1混合物的实施例1-4表现出显著降低的酪氨酸酶蛋白。特别是,牛蒡子甙和牛蒡子甙元的1∶3混合物表现出最高效果。因此,已经确定,牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物抑制黑素细胞刺激激素引起的大量酪氨酸酶蛋白的表达。
实验例5:细胞毒性
在纤维原细胞上,分别测量通过制备例1和2制备的牛蒡子甙、牛蒡子甙元、牛蒡子甙和牛蒡子甙元的1∶3混合物以及牛蒡子甙和牛蒡子甙元的3∶1混合物的毒性。购买NIH/3T3(ATCC CRL 1658)细胞系(来自小鼠)作为纤维原细胞,接种到含有4.5g/L葡萄糖、10%血清和1%抗生素的DMEM培养基中,并在75cm2细胞培养瓶中于37℃下次培养。次培养的细胞系在5%CO2下培养24小时,然后用含有0.02%EDTA的0.05%胰蛋白酶处理。然后,分离细胞,接种于96孔细胞培养瓶中(1×104细胞/孔),通过培养稳定6小时。向细胞中加入表5所示的牛蒡子甙、牛蒡子甙元、牛蒡子甙和牛蒡子甙元的1∶3混合物以及牛蒡子甙和牛蒡子甙元的3∶1混合物中的每一种,进一步培养12小时。培养后,在每个孔中加入10μl MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)2,5-二苯基溴化四唑)溶液(5mg/ml),培养4小时。然后,加入100μl DMSO(二甲亚砜)溶液,在O.D.570nm下测量吸光度,计算细胞存活率。表5显示了基于表6所示标准的结果。这里,100%细胞存活率是基于没有额外物质情况下的吸光度。
表5纤维原细胞的存活率(%)
Figure G2008800021710D00111
表6对细胞的毒性测定标准
细胞存活率的范围   毒性测定
存活率≤70%   严重毒性
70%<存活率≤80%   略微毒性
80%<存活率≤90%   最低毒性
90%<存活率   无毒性
如表5所示,根据本发明的牛蒡子甙、牛蒡子甙元和其混合物中的每一种均表现出94~100%的高细胞存活率,因此,已经确定,这种存活率相应于基于表6所示毒性测定标准的无毒性。
制备例3:制备化妆品
基于表7(实施例5、6和7)制备含有通过制备例1制备的牛蒡子甙和购自Sigma的牛蒡子甙元作为活性成分的化妆品,此外,制备不含有额外活性物质的化妆品(对照例3)和含有常规增白物质(即,熊果苷)的化妆品(比较例1)。
表7
  含量(wt%)  对照例3  实施例5  实施例6  实施例7  比较例1
  牛蒡子甙  -  3.0  -  1.5  -
  牛蒡子甙元   -   -   3.0   1.5   -
  熊果苷   -   -   -   -   3.0
  甘油   5.1   5.1   5.1   5.1   5.1
  丙二醇   4.2   4.2   4.2   4.2   4.2
  生育酚乙酸酯   3.0   3.0   3.0   3.0   3.0
  液体石蜡   4.6   4.6   4.6   4.6   4.6
  三乙醇胺   1.0   1.0   1.0   1.0   1.0
  角鲨烯   3.1   3.1   3.1   3.1   3.1
  澳大利亚坚果油   2.5   2.5   2.5   2.5   2.5
  聚山梨醇酯60   1.6   1.6   1.6   1.6   1.6
  失水山梨糖醇倍半油酸酯   1.6   1.6   1.6   1.6   1.6
  对羟基苯甲酸丙酯   0.6   0.6   0.6   0.6   0.6
  羧基乙烯基聚合物   1.5   1.5   1.5   1.5   1.5
  香料   微量   微量   微量   微量   微量
  防腐剂   微量   微量   微量   微量   微量
  纯净水   余量   余量   余量   余量   余量
  总量   100   100   100   100   100
实验例6:化妆品组合物的增白效果
为了确定根据本发明的化妆品的增白效果,对通过制备例3的对照例3、实施例5、实施例6、实施例7和比较例1制备的化妆品进行5组的小组测试,这5组随机包括年龄为30~40岁的50名妇女。将通过对照例3、实施例5、实施例6、实施例7和比较例1制备的每种化妆品施用于每一组的受试者上。换句话说,每个受试者在清洗之后于她的上臂施用适量的相应化妆品,每天早上和晚上施用,持续2个月。在测试之前,在每个受试者的皮肤上通过紫外线辐射器引起色素沉积。通过对皮肤颜色进行眼睛检查来确定上臂上的增白效果。表8显示了结果。
表8化妆品的增白效果
  有效   略微有效   有效   效力(%)
  对照例3   3   7   10   15.0
  实施例5   15   3   2   90.0
  实施例6   16   2   2   90.0
  实施例7   18   1   1   95.0
  比较例1   12   3   5   75.0
如表8所示,与不含有连翘活性物质的对照例3相比,含有熊果苷的比较例1,含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或牛蒡子甙和牛蒡子甙元的1∶1混合物的每个实施例5~7,表现出高增白效果。
实验例7:皮肤刺激
测试根据本发明的含有牛蒡子甙元衍生物的化妆品的皮肤刺激。这里,使用通过制备例3的实施例5~7、比较例1和对照例3制备的含有牛蒡子甙元衍生物的霜剂。
为了测试化妆品的皮肤刺激,使用Haye试验室对50名健康男性和女性进行斑贴测试。用70%乙醇洗涤测试部分并干燥。然后,将15μg测试物质的斑贴或其上滴有15μl测试物质的斑试器(Finn chamber)(100×10,EPITEST,Finland)的斑贴紧密地贴到受试者前臂的内部上。24小时后,除去斑贴,用标记笔标记测试部分。除去斑贴的1小时后和24小时后(即,从贴上斑贴开始的24小时后和48小时后),通过用凸透镜(8MC-150,DAZOR,US)观察测试部分来确定红斑或水肿是否发生。基于如表9所示的ICDRG(国际接触性皮炎研究组)标准测定皮肤反应,并基于数学式2计算皮肤反应的平均分。表10显示了结果。
表9皮肤反应的测定标准和等级
  标记   等级   测定标准
  -   0   没有反应,正常皮肤
  ±   0.5   轻微或微弱红斑
  +   1.0   明显界线,但弱红斑、水肿和丘疹
  ++   2.0   明显红斑、丘疹和小水泡
  +++   3.0   强红斑和水泡
  ++++   6.0   大水泡
数学式2
Figure G2008800021710D00131
表10
  测试物质   24小时   48小时  平均皮肤反应(n=20)
  ±+++   ±+++
  对照例3   1--   1--  0.42
  实施例5   1--   1--  0.42
  实施例6   1--   1--  0.42
  实施例7   1--   1--  0.42
  比较例1   1--   1--  0.42
如表10所示,不含有根据本发明的牛蒡子甙元衍生物的比较例1的霜剂,表现出极低的皮肤反应,因此,已经确定,霜剂的其他成分不会引起皮肤刺激。此外,已经确定,加入牛蒡子甙元衍生物不会引起皮肤刺激。
实验例8:制剂稳定性
使用通过制备例3的实施例5~7、比较例1和对照例3制备的化妆品进行根据温度变化的制剂稳定性测试。将测试样品装到不透明的玻璃容器中并存储在45℃的恒温箱中1周,或者将测试样品装到不透明的玻璃容器中并存储在完全遮盖的恒温4℃的冰箱中1周。然后,通过眼睛检查测量颜色变化。这里,产品的颜色变化被分为如表11所示的6个等级。表12显示了结果。
表11产品的颜色变化的测定标准
  等级   测定标准
  0   没有变化
  1   极轻微变化
  2   略微变化
  3   略微显著变化
  4   显著变化
  5   极显著变化
表12制剂稳定性
  45℃   4℃
 对照例3   0   0
 实施例5   0   0
 实施例6   0   0
 实施例7   0   0
 比较例1   1   0
如表12所示,已经确定,根据本发明的含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物的化妆品组合物的温度稳定性非常优异。通过上述实验,间接证实,含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物的化妆品制剂可以通过作用于因紫外线而分泌的α-MSH的黑色素合成路线来有效地控制或抑制黑色素的合成,从而增白皮肤颜色。
下面,说明含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物的化妆品的制剂例。在这些制剂例中,每种化妆品含有但不限于通过制备例1制备的牛蒡子甙和购自Sigma的牛蒡子甙元。
制剂例1~3:皮肤软化剂(皮肤洗剂)
在含有牛蒡子甙或牛蒡子甙元作为活性成分的化妆品中,皮肤软化剂(皮肤洗剂)的制剂例如下。
表13
  含量(wt%)  制剂例1   制剂例2  制剂例3
  牛蒡子甙  1.0   -  2.0
  牛蒡子甙元  -   1.0  2.0
  1,3-丁二醇  5.2   5.2  5.2
  油醇  1.5   1.5  1.5
  乙醇  3.2   3.2  3.2
  聚山梨醇酯20  3.2   3.2  3.2
  二苯甲酮-9  2.0   2.0  2.0
  羧基乙烯基聚合物  1.0   1.0  1.0
  甘油  3.5   3.5  3.5
  香料  微量   微量  微量
  防腐剂  微量   微量  微量
  纯净水  余量   余量  余量
  总量  100   100  100
制剂例4~6:营养洗剂(润肤乳)
在含有牛蒡子甙或牛蒡子甙元的化妆品中,营养洗剂(润肤乳)的制剂例如下。
表14
  含量(wt%)  制剂例4  制剂例5  制剂例6
  牛蒡子甙  2.5  -  1
  牛蒡子甙元  -  1.5  7
  甘油  5.1  5.1  5.1
  丙二醇  4.2  4.2  4.2
  生育酚乙酸酯  3.0  3.0  3.0
  液体石蜡  4.6  4.6  4.6
  三乙醇胺  1.0  1.0  1.0
  角鲨烯  3.1  3.1  3.1
  澳大利亚坚果油  2.5  2.5  2.5
  聚山梨醇酯60  1.6  1.6  1.6
  失水山梨糖醇倍半油酸酯  1.6  1.6  1.6
  对羟基苯甲酸丙酯   0.6   0.6   0.6
  羧基乙烯基聚合物   1.5   1.5   1.5
  香料   微量   微量   微量
  防腐剂   微量   微量   微量
  纯净水   余量   余量   余量
  总量   100   100   100
制剂例7~9:营养霜
在含有牛蒡子甙或牛蒡子甙元的化妆品中,营养霜的制剂例如下。
表15
  含量(wt%)   制剂例7  制剂例8  制剂例9
  牛蒡子甙   1  -  3
  牛蒡子甙元   -  7  3
  甘油   4.0  4.0  4.0
  凡士林   3.5  3.5  3.5
  三乙醇胺   2.1  2.1  2.1
  液体石蜡   5.3  5.3  5.3
  角鲨烯   3.0  3.0  3.0
  蜂蜡   2.6  2.6  2.6
  生育酚乙酸酯   5.4  5.4  5.4
  聚山梨醇酯60   3.2  3.2  3.2
  羧基乙烯基聚合物   1.0  1.0  1.0
  失水山梨糖醇倍半油酸酯   3.1  3.1  3.1
  香料   微量  微量  微量
  防腐剂   微量  微量  微量
  纯净水   余量  余量  余量
  总量   100  100  100
制剂例10~12:按摩霜
在含有牛蒡子甙或牛蒡子甙元的化妆品中,按摩霜的制剂例如下。
表16
  含量(wt%)   制剂例10   制剂例11   制剂例12
  牛蒡子甙   3   -   3
  牛蒡子甙元   -   5   5
  甘油   4.0   4.0   4.0
  凡士林   3.5   3.5   3.5
  三乙醇胺   0.5   0.5   0.5
  液体石蜡   24.0   24.0   24.0
  角鲨烯   3.0   3.0   3.0
  蜂蜡   2.1   2.1   2.1
  生育酚乙酸酯   0.1   0.1   0.1
  聚山梨醇酯60   2.4   2.4   2.4
  羧基乙烯基聚合物   1.0   1.0   1.0
  失水山梨糖醇倍半油酸酯   2.3   2.3   2.3
  香料   微量   微量   微量
  防腐剂   微量   微量   微量
  纯净水   余量   余量   余量
  总量   100   100   100
制剂例13~15:面膜
在含有牛蒡子甙或牛蒡子甙元的化妆品中,面膜的制剂例如下。
表17
  含量(wt%)   制剂例13   制剂例14   制剂例15
  牛蒡子甙   2   -   3
  牛蒡子甙元   -   5   3
  乙醇   3.0   3.0   3.0
  EDTA-2Na   0.02   0.02   0.02
  丙二醇   5.1   5.1   5.1
  甘油   4.5   4.5   4.5
  Carbopol   1.0   1.0   1.0
  多氧化物   0.1   0.1   0.1
  防腐剂   微量   微量   微量
  香料   微量   微量   微量
  纯净水   余量   余量   余量
  总量   100   100   100
有益效果
本发明提供一种含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物作为活性成分的皮肤增白化妆品组合物。本发明的化妆品中使用的连翘成分,如牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物,可以通过作用于由α-MSH诱导的黑色素合成机理来控制和抑制黑色素的合成,并且与常规的皮肤增白化妆品相比,表现出优异的增白效果和较低的皮肤刺激。
虽然已经结合目前被认为是最实用和示例性的实施方案描述了本发明,但是可以理解,本发明并不限于所披露的实施方案和附图,相反,本发明意图涵盖所附权利要求精神和范围内的各种修改和变化。

Claims (3)

1.一种用于皮肤增白的化妆品组合物,其含有牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物作为活性成分,其中,按所述化妆品组合物总重计,牛蒡子甙、牛蒡子甙元或其混合物的含量为0.00001~40.0wt%。
2.如权利要求1所述的用于皮肤增白的化妆品组合物,其中,在所述混合物中,牛蒡子甙和牛蒡子甙元以100∶1~1∶100的重量比混合。
3.如权利要求1所述的用于皮肤增白的化妆品组合物,其中,所述化妆品组合物是选自溶液、悬浮液、乳液、糊剂、凝胶、霜剂、粉剂、油和喷雾剂的制剂形式。
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