KR101631924B1

KR101631924B1 - 리포좀에 포접하여 안정화시킨 악틴 또는 악티게닌을 함유하는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR101631924B1
Application number: KR1020140092419A
Authority: KR
Inventors: 김운하; 이정표; 이강태; 이광식; 이건국
Original assignee: 주식회사 코리아나화장품
Priority date: 2014-07-22
Filing date: 2014-07-22
Publication date: 2016-06-20
Also published as: KR20160011398A

Abstract

본 발명은 리포좀에 포접하여 안정도를 향상시킨 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 화장료 조성물은 악틴, 악티게닌 또는 그의 혼합물을 장시간 안정하게 효능을 유지하고, 높은 농도로 안정하게 침투시켜 효능을 극대화시킬 수 있다. 따라서 적은 양의 유효성분으로 우수한 피부 미백 및 주름개선 효과를 달성할 수 있다.

Description

리포좀에 포접하여 안정화시킨 악틴 또는 악티게닌을 함유하는 화장료 조성물{Cosmetic Composition Comprising Actine or Actigenin Stabilized Liposome}

본 발명은 리포좀에 포접하여 안정화시킨 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 상세하게는 악틴과 악티게닌의 효능을 장기간 유지시킬 수 있으며, 유효 성분의 피부 침투를 향상시켜 피부 미백 또는 피부 주름 개선 효과가 우수한 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 신체의 가장 외부에 존재하는 기관으로 여러 가지 기능을 가짐과 동시에 외모 및 이미지 등에 큰 영향을 미치는 중요한 기관으로서, 다양한 세포들과 독특한 구조로 이루어져 신체의 외각 표면을 덮고 있어서 수분의 증발 방지, 체온조절, 자외선 등 외부 자극으로부터의 인체보호, 유해 미생물의 침입 방지 등 외부 환경에 대한 인체의 1차 방어막 역할을 수행하는 기관이다.

피부는 표피, 진피, 피하지방의 3층으로 구성되어 있는데, 이중 가장 외부에 존재 하는 표피는 피부 노화의 측면에서 가장 중요한 역할을 한다. 표피의 최외각층인 각질층을 구성하는 성분은 각질세포와 피부 지질로서 피부 지질은 피부의 장벽 기능을 담당하는데 이와 같은 피부의 장벽 기능은 세포의 분열과 분화를 조절하여 외부 유해 물질로부터 피부를 보호하고, 체내 물질의 유출을 방지하며 피부 수분 증발을 방지하는 중요한 기능이라고 할 수 있다.

피부 지질 중에서도 피부의 장벽 기능을 담당하는 지질은 주로 세라마이드, 콜레스테롤 및 유리 지방산 등으로 구성되어있고 이들은 각질층 지질 전체에 대해 각각 40-65%, 10% 및 25%를 차지한다. 이처럼 피부 장벽을 구성하는 성분들이 지질로 구성되어 있고, 피부 표면은 피지막으로 덮여 있어서 친유성의 성질을 가지고 있으며 견고한 피부 지질 장벽을 구성하고 있기 때문에 수용성 유효성분들의 피부 침투는 매우 어려운 것으로 알려져 있다.

당업계에서는 수용성 유효 성분들의 피부 침투를 높이기 위해 리포좀, 니오좀, 캡슐, 나노 베지클 등으로 유효 성분을 포접하여 화장료 조성물을 제조하는 방법이 많이 사용되고 있다. 그러나 이러한 기술들은 단순히 입자를 미세하게 만들어 피부 침투를 용이하게 하고자 할 뿐 수용성 성질을 그대로 가지고 있어, 여전히 친유성의 피부 장벽을 완벽하게 침투하는 문제점이 해소되지 않고 있다.
<선행문헌 정보>
1. 한국등록특허공보 제10-0855457호
2. 한국공개특허공보 제10-2010-0044578호
3. 한국공개특허공보 제10-2010-0029114호
4. 한국등록특허공보 제10-1026873호

본 발명자들은 상기와 같은 종래 기술의 문제점을 극복하고자 예의 노력한 결과, 리포좀에 포접하여 안정화시킨 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 함유하는 화장료 조성물이 유효 성분의 안정도를 유지시켜 주고, 피부 침투를 도와주는 것을 발견함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 리포좀에 포접하여 안정화시킨 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 함유하는 화장료 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 다른 기술적 과제 및 이점은 하기의 실시예 및 청구범위에 의해 보다 명확하게 된다.

상기 기술적 과제를 달성하기 위해, 본 발명은 리포좀에 포접하여 안정화시킨 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 포함하는 피부 미백용 또는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

바람직하게는, 상기 리포좀은 시토스테롤, 레시틴, 하이드로제네이티드포스파티딜콜린 및 비이온성계면활성제를 포함하는 제1상 및 글리세린, 잔탄검 및 정제수를 포함하는 제2상을 혼합한 후, 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 첨가하여 제조할 수 있다.

또한, 상기 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 포접하기 있는 리포좀은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 20.0 중량%일 수 있고, 상기 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물은 리포좀 총 중량에 대해 0.0003 내지 0.06 중량%일 수 있다.

본 발명은 리포좀에 포접하여 안정화시킨 악틴, 악티게닌 또는 그의 혼합물을 주성분으로 하여 제조한 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 화장료 조성물은 악틴, 악티게닌 또는 그의 혼합물을 장시간 효능을 안정하게 유지할 수 있으며, 피부 침투를 극대화 시킬 수 있는 이점이 있다.

본 발명은 리포좀에 포접하여 안정화시킨 악틴, 악티게닌 또는 그의 혼합물을 주성분으로 하여 제조한 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 화장료 조성물은 악틴과 악티게닌의 효능을 오랫동안 안정하게 유지시켜 주며, 피부 침투가 용이하여 효과를 극대화 할 수 있다.

본 발명은 악틴(Arctiin), 악티게닌(Arctigenin) 또는 그의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 화장료 조성물에 유효성분으로 사용되는 "악티게닌"은 4-[(3,4-디메톡시페닐)메틸]디하이드로-3-[(4-하이드록시-3-메톡시페닐)메틸]-2(3H)-퓨라논(4-[(3,4-Dimethoxyphenyl)methyl]dihydro-3-[(4-hydroxy-3-metoxyphenyl)methyl]-2(3H)-furanone)으로 표기되고, 하기 화학식 1의 구조를 가지는 분자량이 372인 리간드 화합물이다.

"악틴"은 하기 악티게닌의 배당체로 글루코스가 붙어있는 화합물이며(화학식 1), 4-[(3,4-디메톡시페닐)메틸]디하이드로-3-[(4-글루코스-3-메톡시페닐)메틸]-2(3H)-퓨라논(4-[(3,4-Dimethoxyphenyl)methyl]dihydro-3-[(4-Glucose-3-metoxyphenyl)methyl]-2(3H)-furanone)으로 표기되고 분자량이 535인 리간드 화합물이다. 상기 악틴과 악티게닌은 모두 리간드 화합물로서, 우엉, 우방자(Arctiumlappa), 홍화 (Carthamus tinctorius), 연교(Forsythia suspensa) 등에서 추출할 수 있으며, 상업적으로 판매하기도 한다.

본 발명에서 "리간드 화합물"은 디페놀화합물로서 그 구조와 분자량이 스테로이드 여성호르몬 에스토로겐과 유사하여 식물성 여성호로몬 즉 피토에스트로겐(phytoestrogen)이라 불리며, 그 작용도 스테로이드 여성호르몬 에스토로겐과 유사하여 호르몬 의존성 질병에 효과적이다. 상기 리간드 화합물은 유방암, 대장암, 전립선암의 발병을 감소시켜주고 폐경기의 여성에게 발생하는 심장병, 골다공증을 억제하며 항산화, 항염 및 항바이러스 등의 효과가 있는 것으로 잘 알려져 있다(The Royal Soc. of Chemistry, UK, 1996; Anderson JJB, Garner SC, Nutr. Res., 17:1617-1632, 1997).

본 발명에서 용어 "리포좀"은 수용성 머리와 불용성의 꼬리를 가진 양친매성 분자로 구성된 입자의 상호 자발적인 결합 및 정렬된 콜로이드 입자로, 세포막과 유사한 이중막 구조를 가지며, 이를 함유한 조성물은 손상된 피부장벽의 회복, 피부장벽의 강화, 피부자극의 완화의 효과를 기대할 수 있다. 또한 상기 리포좀을 통해서 악틴, 악티게닌 또는 그의 혼합물의 효능을 장시간 안정하게 유지할 수 있는 효과가 있다.

상기 리포좀은 유성성분, 인지질, 계면활성제, 폴리올 및 물을 포함하는 혼합물에 의해 제조될 수 있다.

상기에서 유성(oil)성분은 당업계에 공지된 다양한 오일이 이용될 수 있다. 바람직하게는 헥사데칸 및 파라핀 오일과 같은 하이드로카본계오일; 에스테르계의 합성오일; 디메치콘 및 사이클로메치콘계과 같은 실리콘 오일; 해바라기유, 옥수수유, 대두유, 아보카도유, 참깨유 및 어유와 같은 동식물성 오일; 에톡시레이티드 알킬에테르계오일; 프로폭시레이티드 알킬에테르계오일; 피토스핑고신, 스핑고신 및 스핑가닌과 같은 스핑고노이드 지질; 세레브로사이드; 콜레스테롤; 시토스테롤; 콜레스테릴설페이트; 시토스테릴설페이트; C10-40 지방알콜 및 이의 혼합물이다. 보다 바람직하게는 시토스테롤을 사용할 수 있다. 유성성분의 사용량은 리포좀 총 중량에 대하여 0.1-10.0 중량%이고, 바람직하게는 1.0-5.0 중량%이다.

상기에서 인지질은 양쪽친화성 지질로 이용된 것으로서, 난황 레시틴, 대두 레시틴 또는 스핑고마이엘린과 같은 천연 인지질 및/또는, 하이드로제네이티드포스파티딜콜린, 디팔미토일포스파티틸콜린 또는 수첨레시틴과 같은 합성 인지질을 포함할 수 있다. 보다 바람직하게는 쳔연 인지질인 레시틴과 합성 인지질인 하이드로제네이티드포스파티딜콜린을 함께 사용할 수 있다. 천연 인지질과 합성 인지질의 사용량은 리포좀 총 중량에 대하여 각각 0.1-10.0 중량%이고, 바람직하게는 1.0-5.0 중량%이다.

상기에서 계면활성제는 당업계에서 공지된 것을 사용할 수 있으며, 예를 들어, 음이온성 계면활성제, 양이온성 계면활성제, 양성 계면활성제 및 비이온성 계면활성제가 사용될 수 있고, 바람직하게는 비이온성 계면활제가 사용된다. 비이온성 계면활성의 구체적인 예는 알콕시레이티드 알킬에테르, 알콕시레이티드 알킬에스테르, 알킬폴리글리코사이드, 폴리글리세릴에스테르, 폴리소르베이트 및 슈가에스테르를 포함한다. 가장 바람직하게는, 비이온성 계면활성제에 속하는 폴리소르베이트가 이용된다. 계면활성제의 사용량은, 일반적으로 리포좀 총 중량에 대하여 0.1-10 중량%이고, 바람직하게는 1-5.0 중량%이다.

상기에서 폴리올은 특별히 제한되지 않지만, 바림직하게는 글리세린, 프로필렌글라이콜, 디프로필렌글라이콜, 1,3-부틸렌글라이콜, 글리세린, 메틸프로판디올, 이소프로필렌글라이콜, 판틸렌글라이콜, 에리스리톨, 자일리톨, 솔비톨 및 이의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된다. 폴리올의 사용량은 리포좀 총 중량에 대하여 0.1-10 중량%이고, 바람직하게는 1-5.0 중량%이다.

본 발명의 화장료 조성물에 함유되는 악틴, 악티게닌 또는 그의 혼합물을 포접하고 있는 리포좀은 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.01 - 20.00 중량 %, 바람직하게는 0.1-10.0 중량 % 이다.

악틴, 악티게닌 또는 그의 혼합물은 리포좀 총 중량을 기준으로 0.0003 내지 0.06중량%인 것이 바람직하다. 악틴, 악티게닌 또는 그의 혼합물은 화장료 총 중량을 기준으로 0.000003 내지 0.0006 중량%로 포함되며, 바람직하게는 0.000003 내지 0.0003 중량%로 포함된다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 유효성분 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수(스킨), 영양 화장수(밀크로션), 영양 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.

제조예 1 내지 6 : 리포좀의 제조

하기 표 1의 조성에 따라, 본 발명의 유효성분인 악틴(제조예 1), 악티게닌(제조예 2) 또는 그의 혼합물을 첨가한 리포좀을 제조하였다. 리포좀 제조에 사용한 악틴과 악티게닌의 혼합물은 1:1로 혼합(제조예 3)하여 사용하였다. 또한 본 출원인의 리포좀 방식(등록특허 제10-1117562호 참조)에 따라서 유효성분인 악틴(제조예 4), 악티게닌(제조예 5) 또는 이들의 혼합물(제조예 6)을 첨가한 리포좀을 제조하였다.

(단위:중량%)

상	성분	제조예1	제조예2	제조예3	제조예4	제조예5	제조예6
A	시토스테롤	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
	레시틴	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
	하이드로제네이티드포스파티딜콜린	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
	폴리소르베이트 80	2.0	2.0	2.0	-	-	-
	글리코리피드	-	-	-	1.00	1.00	1.00
B	글리세린	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
	잔탄검	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
	향, 방부제	적량	적량	적량	적량	적량	적량
	정제수	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량
C	악틴	0.003	-	-	0.003	-	-
	악티게닌	-	0.003	-	-	0.003	-
	악틴 + 악티게닌 (1:1)	-	-	0.003	-	-	0.003
총 합		100	100	100	100	100	100

A상과 B상을 80℃까지 가온하여 단일 용액으로 만든 후, 50℃에서 C상을 첨가하여 혼합한다. 이후 1000바(bar)로 2회 고압유화기기를 통과시킨 후 냉각하여 본 발명의 리포좀을 제조하였다.

비교 제조예 1 내지 3 : 카페인을 함유하는 리포좀 및 조성물 제조

본 발명의 리포좀의 피부 침투력을 측정하기 위하여 상기 표 1의 조성에서 C상의 악틴, 악티게닌 또는 그의 혼합물 대신 카페인을 함유하는 리포좀(비교 제조예 1), 표 1의 조성에서 본 발명의 리포좀의 조성을 종래의 리포좀 조성으로 변경하고 악틴, 악티게닌 또는 그의 혼합물 대신 카페인을 함유하는 리포좀(비교 제조예 2) 및 카페인만을 함유하는 조성물(비교 제조예 3)을 제조하였다.

(단위:중량%)

상	성분	비교 제조예 1	비교 제조예 2	비교 제조예 3
A	글리세릴스테아레이트	-	2.0	-
	세테아릴알콜	-	2.0	-
	폴리소르베이트 60	-	1.2	-
	소르비탄세스퀴올레이트	-	0.8	-
	피이지-100 스테아레이트	-	1.0	-
	스쿠알란	-	10.0	-
	카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	-	10.0	-
	시토스테롤	2.0	-	-
	레시틴	3.0	-	-
	폴리소르베이트 80	2.0	-	-
	하이드로제네이티드포스파티딜콜린	2.0	2.0	-
B	글리세린	5.0	5.0	-
	잔탄검	0.1	0.1	-
	향, 방부제	적량	적량	적량
	정제수	잔량	잔량	잔량
C	카페인	1.0	1.0	1.0
총 합		100	100	100

A상과 B상을 80℃까지 가온하여 단일 용액으로 만든 후 50℃에서 C상을 첨가하여 혼합한 후 1000바(bar)로 2회 고압유화기기를 통과시킨 후 냉각하여 리포좀을 제조하였다. 비교 제조예 3은 실온에서 C상만을 녹여 최종 제품을 제조하였다.

실험예 1: 유효성분의 침투 효과 측정 (카페인 투과량)

본 발명의 리포좀을 함유하는 화장료의 유효성분의 침투 효과를 실험하기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다. 실험에 사용한 리포좀이 함유된 화장료는 하기 표 3의 조성에 따라 A상에 B상을 서서히 첨가하여 균일하게 혼합하여 제조된 비교 실시예 1, 2 및 3의 화장료를 사용하였다.

(단위 :중량 %)

상	성분	비교 실시예 1	비교 실시예 2	비교 실시예 3
A	향, 방부제	적량	적량	적량
A	정제수	잔량	잔량	잔량
B	비교 제조예 1	10	-	-
	비교 제조예 2	-	10	-
	비교 제조예 3	-	-	10
총 합		100	100	100

피부 침투 효과 실험은, 동물 또는 사람의 피부를 홀더(holder)에 고정시킨 후 표피 쪽에서 액체 미디움 쪽으로 물질이 투과되는 양을 측정하는 장치인 수직형 확산 셀(Cell: Frenz Diffusion cell, Labfine, Korea)을 이용하여 비교 실시예 1, 2 및 3에 함유된 카페인의 피부 침투량을 측정하였다. 실험에는 인공 피부를 이용하였으며, 피부 면적은 0.64cm², 사용한 미디움은 PBS(pH 7.4)이며, 비교 실시예 1, 2 및 3을 각각 0.50g을 적용하여 37℃에서 2시간 동안 반응시킨 후 피부를 투과한 미디움 150 μg을 취해 HPLC를 이용하여 투과한 카페인의 함량을 측정하였다. 이때 비교 실시예 1, 2 및 3의 유효성분 침투효과를 극명하게 비교하기 위하여 비교 제조예 1, 2 및 3도 함께 실험하여 카페인 함량을 측정하였다. 이 평가를 토대로 피부를 침투한 카페인의 함량(투과된 카페인 함량(%))은 하기의 수학식 1에 따라 계산하였으며, 그 결과를 하기의 표 4에 나타내었다.

제품	투과된 카페인 함량(%)
본 발명의 리포좀을 함유하는 비교 실시예 1	71%
종래의 리포좀을 함유하는 비교 실시예 2	52%
리포좀을 함유하지 않은 비교 실시예 3	22%

상기 표 4의 결과에서도 알 수 있듯이, 본 발명의 리포좀을 함유하는 화장료인 비교 실시예 1은 종래의 리포좀만으로 이루어진 비교 실시예 2 또는 리포좀을 함유하지 않은 비교 실시예 3에 비해 우수한 '카페인 투과율'을 보였다.

실시예 1 내지 3 : 악틴 , 악티게닌 또는 이들이 혼합물이 함유된 리포좀 포함 화장료 조성물

본 발명의 악틴, 악티게닌, 또는 이들의 혼합물을 함유하는 제조예 1 내지 3의 리포좀을 포함하는 화장료를 표 5의 조성에 따라 다음과 같이 제조하였다. 실온에서 A상에 B, C상을 서서히 첨가하여 균일하게 혼합하여 최종 화장료를 완성하였다. 본 발명의 리포좀의 안정도를 확인하기 위해 리포좀을 포함하지 않고 악틴(비교예 1), 악티게닌(비교예 2) 또는 이들의 혼합물(비교예 3)을 함유하는 화장료를 제조하였다. 또한 기존리포좀 기술인 제조예 4 내지 6에 따른 리포좀을 함유하는 화장료 (비교예 4 내지 6)를 제조하였다. 비교예의 화장료 조성물은 A상과 B 상을 각각 75℃ 가온 혼합 시킨 후 유화시켜 온도를 40℃까지 냉각하여 C상을 첨가 혼합해서 최종 제품으로 하였다. A상의 유화 베이스는 아래의 표 6의 조성으로 제조하였다. 이때 화장료 100 중량%에 포함되는 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물의 최종 함량은 0.0003 중량%(3ppm)으로 고정하였다.

(단위:중량%)

상	성분	실시예1	실시예2	실시예3	비교예1	비교예2	비교예3	비교예4	비교예5	비교예6
A	유화 베이스	80	80	80	80	80	80	80	80	80
B	향, 방부제	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량
B	정제수	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량
C	제조예 1	10	-	-	-	-	-	-	-	-
	제조예 2	-	10	-	-	-	-	-	-	-
	제조예 3	-	-	10	-	-	-	-	-	-
	제조예 4	-	-	-	-	-	-	10	-	-
	제조예 5	-	-	-	-	-	-	-	10	-
	제조예 6	-	-	-	-	-	-	-	-	10
	악틴	-	-	-	0.0003	-	-	-	-	-
	악티게닌	-	-	-	-	0.0003	-	-	-	-
	악틴 + 악티게닌 (1:1)	-	-	-	-	-	0.0003	-	-	-
총 합		100	100	100	100	100	100	100	100	100

(단위: 중량%)

상	성분	함량
A	정제수	잔량
A	글리세린	2.8
B	폴리글리세릴-3메칠글루코오스디스테아레이트	1.6
	피이지-4올리베이트	0.4
	카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	0.2
	스쿠알란	4.5
	디메치콘	4.2
C	아크릴레이트/C10-30알킬아크릴레이트크로스폴리머	0.06
D	포타슘하이드록사이드	0.0082
총 합		100

실험예 2 : 악틴 , 악티게닌 또는 이들의 혼합물의 유효 성분 안정성 평가

실시예 1 내지 3과 비교예 1 내지 6의 샘플을 이용하여 시간 및 온도의 변화 조건을 달리 하여 악틴, 악티게닌 및 그의 혼합물의 함량을 HPLC를 이용하여 분석한 결과를 표 7에 정리하였다. HPLC는 WATERS 2695/2487 SYSTEM을 사용하였으며, 분석 방법은 아래와 같다.

(1) 표준액 만드는 법

1. 100mL 용량 플라스크에 악틴 또는 악티게닌 표준품 약 0.020g을 정밀하게 채취한 후 표선까지 에탄올을 가하여 초음파 분산 장치로 완전히 용해한다.

2. 200mL 용량 플라스크에 위의 액 1mL을 정밀하게 채취한 다음, 에탄올을 첨가하여 표선까지 채운다.

3. 0.45㎛ 실린지 필터를 이용하여 여과한 액을 표준액으로 한다.

(2) 검액 만드는 법

1. 본 품을 가지고 악틴 또는 악티게닌 약 25㎍에 해당하는 양을 25mL 용량 플라스크에 정밀하게 채취한다.

2. 표선까지 에탄올을 가하여 초음파 분산장치로 완전히 용해한다.

3. 0.45㎛ 실린지 필터를 이용하여 여과한 액을 검액으로 한다.

4. 검액, 표준액을 각각 15 l 주입하여 다음 조건에 따라 분석을 실시한다.

(3) HPLC 분석 조건

1. 악틴 또는 악티게닌을 표준품으로 사용한다.

2. 컬럼(Column) : Kromasil 100-5C18, 2504.6mm I.D.(5㎛, AKZO NOBEL Co.)

3. 이동상(Mobile Phase) : 아세토니트릴/물 혼합액 = (26:74)

4. 검출기(Detector) : UV/Vis Spectrometer (278nm)

5. 오븐 온도 : 35℃

6. 유속(Flow Rate) : 1.0 mL/min

7. 주입량(Inject Volume) : 15μl

(4) 분석결과

1. 표준품 채취량과 주입된 악틴 또는 악티게닌 표준품의 농도

표준품	채취량(g)	희석(ml)	주입된 표준품 농도(ppm)
악틴 또는 악티게닌	0.0198	20000	0.990

2. 검체 채취량 및 검액의 HPLC 측정 결과

AT : 검체의 악틴 또는 악티게닌 피크 면적

AS : 주입된 악틴 또는 악티게닌 표준품의 피크면적(3회 평균)

25 : 검체의 희석 부피

(악틴 및 악티게닌의 함량:ppm)

	1일		14일		1개월		2개월		3개월
	4℃	45℃	4℃	45℃	4℃	45℃	4℃	45℃	4℃	45℃
실시예1(악틴)	3.025	3.035	3.027	3.024	3.042	3.053	3.010	2.998	3.029	2.984
실시예2 (악티게닌)	3.042	3.050	3.038	3.055	3.030	3.031	3.022	2.984	3.017	2.991
실시예3 (혼합물 1:1)	3.009	3.012	2.999	3.028	3.000	3.010	2.998	2.970	2.992	2.962
비교예1(악틴)	3.040	3.031	3.040	3.012	3.028	3.012	2.987	2.648	2.938	2.301
비교예2 (악티게닌)	2.998	3.007	3.002	3.018	2.998	2.994	2.990	2.466	2.970	2.388
비교예3 (혼합물 1:1)	3.015	3.028	3.011	2.991	3.015	2.925	3.005	2.488	2.988	2.282
비교예4(악틴)	3.002	3.018	3.008	3.011	3.015	3.009	2.997	2.842	3.005	2.728
비교예5 (악티게닌)	3.014	3.008	3.021	3.020	3.001	2.997	3.018	2.877	3.024	2.729
비교예6 (혼합물 1:1)	3.022	3.020	3.013	3.032	3.028	3.019	3.007	2.796	3.012	2.653

악틴 및 악티게닌 또는 그의 혼합물을 함유하는 화장료 조성물 실시예 1 내지 3과 비교예 1 내지 6의 유효 성분을 분석한 결과 약 1개월까지는 큰 차이가 없었지만 2개월이 지난 시점에서부터 본 발명의 리포좀으로 안정하게 유효성분을 포접한 실시예 1 내지 3이 그렇지 않은 비교예 1 내지 6에 비해서 유효성분의 안정도가 매우 우수함을 알 수 있었다. 실시예 1 내지 3의 악틴, 악티게닌 또는 그의 혼합물은 2개월차에 4℃ 대비 45℃의 유효성분의 역가가 -0.4%(실시예 1), -1.26%(실시예 2), -0.94%(실시예 3)로 하락폭이 매우 작고, 효능 성분이 안정하게 유지되는 것을 알수 있었다. 하지만 2개월차에서 비교예 1 내지 3은 -11.35%(비교예 1),-17.53%(비교예 2), -17.21%(비교예 3)으로 하락폭이 매우 큰 것을 확인하였고, 기존의 리포좀 기술로 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 포함시켜 제조한 화장료인 비교예 4 내지 6은 -5.18%(비교예 4), -4.68%(비교예 5), -7.02%(비교예 6)으로 역가가 소폭 하락함을 확인하였다. 또한 3개월 차에서도 실시예 1 내지 3은 하락폭이 매우 작았지만, 비교예 1 내지 6은 -21.69%, -19.6%, -23.63%, -9.22%. -9.76%, -11.92%로 유효 성분의 안정도가 매우 감소함을 확인하였다.

본 발명의 리포좀으로 포접한 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물은 종래의 리포좀 기술 및 리포좀을 포함하지 않는 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물에 비하여 유효성분의 장기 안정도가 매우 우수함을 확인하였다.

실험예 3 : 악티게닌의 멜라닌 생합성 억제 실험

B-16 세포 (쥐 멜라노마 세포, 한국세포주은행)를 6-웰 플레이트 (well plate)에 1×10⁵ cell/well이 되도록 접종한 후에 24시간 배양하였다. 각 웰에 실시예 1, 실시예 3 및 비교예 2, 비교예 5의 시료를 각각 1%(v/v)를 처리하고 3-4일 동안 배양한 후 각 웰의 배양액을 원심 분리하였다. 분리된 세포는 디메틸설폭사이드 (DMSO)에 용해한 1N NaOH 용액 500 ㎕로 용해하여 10분간 90℃ 수욕 (water bath)에서 가열하였다. 이 상등액을 490 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 미백 효과가 널리 알려진 알부틴을 사용하였다. 멜라닌 생성 저해도는 하기 수학식 4에 따라 계산하였으며, 그 결과는 표 9에 나타나 있다.

악티게닌의 멜라닌 생합성 억제 효과

시험 물질농도(%)	멜라닌 생성 억제율(%)
실시예 2(리포좀으로 포접한 악티게닌)	76.8
실시예 3(리포좀으로 포접한 악틴+악티게닌)	77.1
비교예 2(리포좀으로 포접하지 않은 악티게닌)	70.4
비교예 5(기존 리포좀 기술로 포접한 악티게닌)	73.2
양성대조군 - 알부틴	62.4

실험예 4: 피부탄력 개선 효과의 평가

본 발명의 기술로 악틴을 리포좀으로 안정하게 포접한 실시예 1, 악틴과 악티게닌을 리포좀으로 안정하게 포접한 실시예 3, 리포좀으로 포접하지 않은 비교예 1 및 기존의 리포좀 기술로 악틴을 포접한 비교예 4의 피부탄력 개선 효과를 다음과 같이 평가하였다.

실험자(20세-35세의 여성) 15명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 1과 실시예 3의 크림을 얼굴 왼쪽 부위에는 비교예 1과 비교예 4의 크림을 각각 1일 2회씩 연속 1개월간 도포하였다.

실험완료 후 피부 탄력 개선 효과는 제품 사용 전과 1개월간 사용 후에 피부탄력측정기(cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 측정하였다. 결과는 하기 표 3에 피부탄력측정기(Cutometer SEM 575)의 ΔR8값으로 기재하였는데 R8값은 피부의 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 나타낸다.

하기 표 10에 나타난 바와 같이 본 발명의 기술로 악틴을 리포좀으로 안정하게 포접한 실시예 1을 도포한 실험자의 피부 탄력개선 효과가 가장 우수함을 알 수 있다.

실험제품	피부탄력효과(ΔR8)
실험제품	사용전	사용후
실시예 1(리포좀으로 포접한 악틴)	0.12	0.34
실시예 3(리포좀으로 포접한 악틴+악티게닌)	0.12	0.35
비교예 4(기존의 리포좀으로 포접한 악틴)	0.12	0.28
비교예 1(리포좀을 포접하지 않은 악틴)	0.11	0.20

(n=15, p＜0.05)

이상 실험예의 결과를 종합하자면, 유효 성분의 피부 침투는 일반 유화 베이스보다 리포좀에 함유된 것이 우수하며, 리포좀을 이용하여 제품을 만드는 경우에 유효성분(악티게닌)을 피부에 잘 적용시킬 수 있어 피부 미백 효과 및 피부 탄력 개선 효과를 보다 잘 나타나게 할 수 있음을 보여준다. 또한 본 발명의 리포좀 기술로 유효성분(악티게닌)을 안정화시킴으로써 종래의 기술보다 피부 미백 효과 및 피부 탄력 개선 효과가 더 뛰어나다는 것을 확인하였다. 결과적으로, 리포좀에 악틴, 악티게닌 또는 그의 혼합물을 안정하게 포접시킴으로써 유효 성분의 효능을 장시간 지속시킬 수 있는 장점이 있으므로 제품의 품질력 향상에 큰 기여를 할 것으로 기대된다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

리포좀에 포접하여 안정화시킨 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물로서,
상기 리포좀은 시토스테롤, 레시틴, 하이드로제네이티드포스파티딜콜린 및 비이온성계면활성제를 포함하는 제1상 및 글리세린, 잔탄검 및 정제수를 포함하는 제2상을 혼합한 후, 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 첨가하여 제조한 것인, 화장료 조성물.
리포좀에 포접하여 안정화시킨 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 포함하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물로서,
상기 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 포접하는 리포좀은 시토스테롤, 레시틴, 하이드로제네이티드포스파티딜콜린 및 비이온성계면활성제를 포함하는 제1상 및 글리세린, 잔탄검 및 정제수를 포함하는 제2상을 혼합한 후, 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 첨가하여 제조한 것인, 화장료 조성물.
삭제
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물을 포접하는 리포좀은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 20.0 중량%인 것인, 화장료 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 악틴, 악티게닌 또는 이들의 혼합물은 리포좀 총 중량에 대해 0.0003 내지 0.06 중량%인 것인, 화장료 조성물.